Экспресс-метод диагностики метапневмовирусной инфекции птиц на основе иммуноферментного анализа тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.02.02, кандидат наук Лисенкова, Анастасия Сергеевна

• Лисенкова, Анастасия Сергеевна
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Лисенкова, Анастасия Сергеевна

Оглавление стр.

1. Введение

2. Основная часть

2.1. Иммуноферментный анализ и его применение в ветеринарии

2.2. Метапневмовирусная инфекция птиц

2.2.1. Распространение и ущерб, причиняемый этой болезнью

2.2.2. Характеристика рода Ме1арпеитоуип8 семейства Рагатухоушёае

2.2.3.Эпизоотологические данные метапневмовирусной инфекции птиц

2.2.4. Клинические признаки и патологоанатомические изменения

2.2.5. Диагностика метапневмовирусной инфекции птиц

2.2.6. Профилактика метапневмовирусной инфекции птиц

2.3. Собственные исследования

2.3.1. Получение специфических компонентов для иммуноферментного анализа

2.3.1.1. Получение контрольного антигена метапневмовируса птиц

2.3.1.2. Получение специфической сыворотки к метапневмовирусу птиц

2.3.1.3.Выделение специфических иммуноглобулинов О^т)

2.3.1.4. Получение иммунопероксидазного конъюгата кур

2.3.2. Разработка иммуноферментной тест-системы для выявления антигена метапневмовируса птиц

2.3.2.1. Определение оптимальных концентраций и условий взаимодействия компонентов

2.3.2.1.1. Определение сенсибилизирующих доз метапневмовирусных антител

2.3.2.1.2. Определение рН сорбирующего буфера

2.3.2.1.3. Определение времени и температуры сорбции антиметапневмовирусных антител

2.3.2.1.4. Определение времени и температуры инкубации антигенсодержащего материала с адсорбированными антиметапневмовирусными антителами

2.3.2.1.5. Определение специфичности иммуноферментного анализа

2.3.2.2. Оценка чувствительности иммуноферментной тест-системы

2.3.3. Практическое использование разработанного «сэндвич» варианта ИФА

2.3.3.1. Сравнительные исследования выявления антигена метапневмовируса птиц в клетках Vero «сэндвич» вариантом ИФА и методом титрации

2.3.3.2. Обнаружение антигена в клетках Vero и в органах цыплят, зараженных мтапневмовирусом птиц

2.3.3.3. Обнаружение антигена метапневмовируса птиц в патологическом

материале

3. Заключение

3.1. Выводы

3.2. Обсуждение результатов исследований

3.3. Практические предложения

Список сокращений

Список литературы

Приложения

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Экспресс-метод диагностики метапневмовирусной инфекции птиц на основе иммуноферментного анализа»

1. Введение

Актуальность темы исследования. Болезнь, вызываемая метапневмовирусом птиц, зарегистрирована во многих регионах мира, как у индеек, так и у кур всех возрастов [6,21,148]. Первичная вирусная инфекция часто осложняется вторичной, бактериальной инфекцией, и заболевание протекает со сложной симптоматикой. Метапневмовирусная инфекция (МПВИ) птиц причиняет серьезный экономический ущерб из-за общего ослабления организма, спровоцированного поражением верхнего отдела респираторного тракта, и приводит к гибели, снижению мясной и яичной продуктивности взрослой птицы [91, 92]. Впрочем, этот вирус может быть вовлечен в мультифакторную болезнь, как, например, синдром большой головы, что крайне осложняет диагностику заболевания.

Многообразие подтипов А, В, С, Б возбудителя и вирулентных свойств метапневмовируса, также затрудняет правильную своевременную постановку диагноза и не позволяет дать оценку этиологической роли вируса в патогенезе и течении болезни [91].

Основными трудностями при выделении возбудителя является достаточно короткий период персистенции и ограниченный тропизм вируса в организме птицы [61, 145].

Поскольку клинические признаки болезни и патологоанатомические изменения при МПВИ птиц непатогномоничны, основная роль в постановке диагноза принадлежит лабораторным методам.

Степень разработанности темы исследования. Большинство методов, позволяющих выявить вирус в организме птицы, основано на иммуноферментном анализе [33,154].

Среди большого числа модификаций ИФА наибольшее распространение получил «сэндвич» вариант ИФА и ОТ-ПЦР для экспресс диагностики МПВИ [33]. Учитывая широкое распространение в Российской Федерации метапневмовируса птиц подтипов А и В и масштабное производство

биологических препаратов из данных подтипов, необходимо разработать чувствительный и специфический метод индикации антигена метапневмовируса в патологическом материале и исходном сырье при изготовлении и контроле вакцин и диагностикума.

Цель и задачи. Целью настоящей работы явилась разработка тест-системы для выявления антигена метапневмовируса птиц в биологических материалах на основе «сэндвич» варианта ИФА.

В соответствии с поставленной целью необходимо было решить следующие задачи:

- получить иммуноспецифические компоненты тест-системы для выявления антигена метапневмовируса птиц в биологических материалах;

- определить оптимальные концентрации и условия взаимодействия компонентов реакции;

- дать оценку чувствительности и специфичности разработанной тест-системы;

- с помощью разработанного «сэндвич» варианта ИФА провести исследования содержания антигена метапневмовируса птиц в патологическом материале и в вируссодержащем сырье для изготовления вакцины;

- разработать методические положения по определению содержания антигена МПВ птиц в биологических материалах с помощью тест-системы на основе «сэндвич» варианта ИФА.

Научная новизна. Впервые в качестве экспресс диагностики МПВИ птиц разработан «сэндвич» вариант ИФА с использованием отечественных препаратов и реактивов. Выделены антиметапневмовирусные IgG (H+L) из гипериммунной сыворотки крови цыплят, получен конъюгат [анти-МПВ IgG(H+L), меченые пероксидазой хрена]. Определены оптимальные концентрации и условия взаимодействия компонентов реакции. Дана сравнительная оценка «сэндвич» варианта ИФА с методом титрации в клетках Vero. Изучены сроки выявления антигена метапневмовируса в клетках Vero, а также в органах и тканях у

экспериментально зараженных цыплят. Показано, что данные ИФА имели высокий коэффициент корреляции (г= 1,0) с результатами титрации вируса в клетках Vero.

С помощью тест-системы проведено исследование патологического материала из 2 птицеводческих хозяйств и выявлен антиген метапневмовируса птиц. Установлена высокая чувствительность и специфичность разработанного «сэндвич» варианта ИФА при выявлении антигена метапневмовируса в биологическом сырье, предназначенном для изготовления вакцины. Теоретическая и практическая значимость работы.

На основании проведенных исследований разработан высокоэффективный экспресс-метод выявления и количественного определения антигена МПВ птиц в патологическом материале и сырье, предназначенном для производства вакцины на основе «сэндвич» варианта ИФА.

Разработаны ГНУ ВНИВИП Россельхозакадемии и утверждены академиком-секретарем А.М.Смирновым Отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии «Методические положения по выявлению антигена метапневмовируса птиц в биологических материалах «сэндвич» вариантом иммуноферментного анализа» от 10. 06. 2013 г.

Методология и методы исследования.

Вирус. В работе использовали вакцинный штамм VC-03 подтипа В метапневмовируса птиц [198], Nemovak Rhone Merilux (Франция). Вирус поддерживали в клетках Vero и хранили при температуре минус 20°С.

Инкубационные яйца и цыплята:

- яйца СПФ кур, фирмы «Lohmann Tierzucht» (Германия) , 200 штук;

- цыплята, инкубированные из СПФ яиц фирмы «Lohmann Tierzucht» в ГНУ ВНИВИП, 50 голов.

Культура клеток:

- перевиваемая культура клеток почки африканской зеленой мартышки, клетки Vero ( институт гриппа АМН, Санкт-Петербург).

Материалы, используемые в иммунологических тестах:

- механические дозаторы с объемом от 0,5 до 1000 мкл и 1-8- канальные;

- полистироловые планшеты производства Nunc, США;

- пероксидаза хрена производства "Serva", ФРГ, RZ = 3,0;

- иммуноферментный анализатор производства «Униплан». Питательные среды, сыворотки, растворы и реактивы:

- питательная среда Игла MEM или ДМЕМ, жидкая, с L-глутамином;

- питательная среда № 199, жидкая, с L-глутамином;

- сыворотка крови плодов коровы;

- трипсина раствор, 0,25% фирмы «US BIO»;

- версена раствор, 0,02%;

- Хенкса раствор;

Питательные среды и растворы из полнокомпонентной смеси фирмы «Hyclone», производства ООО «Биолот»;

- альбумин бычий сывороточный, чистота > 95%, производства ООО «Биолот»;

- калий фосфорнокислый однозамещенный, ч., ГОСТ 4198, ОАО «Реактив»;

- калий фосфорнокислый двузамещенный 3-водный, ч.д.а., ГОСТ 2493,ОАО «Реактив»;

- карбонат-бикарбонатный буфер производства ООО «Биолот»;

- фосфатно-солевой буфер производства ООО «Биолот»;

- фосфатно-цитратный буфер производства ООО «Биолот»;

- натрия хлорид (NaCI), х.ч., ГОСТ 4233, ОАО «Реактив»;

- перекись водорода производства ОАО «Татхимфармпрепараты»;

- ортофенилендиамин (ОФД) производства фирмы Sigma;

- твин 20 (Р7949) производства фирмы Sigma;

Клетки Vero пересевали с интервалом 5-6 сут. бесцентрифужным методом. Для снятия монослоя клеток со стекла использовали растворы трипсина 0,25% и версена 0,02% в соотношении 1:9. Монослой клеток дважды отмывали раствором Хенкса, затем в матрас добавляли смесь растворов трипсина и версена,

о

подогретую до 37 С и инкубировали в термостате в течение 5-10 мин до начала отделения клеток от стекла.

Раствор версена с трипсином сливали, а клетки ресуспензировали в определенном объеме питательной среды. Клетки подсчитывали в камере Горяева, затем разводили питательной ростовой средой Игла, содержащей до 10% фетальной сыворотки и антибиотиков, до концентрации 150-250 тыс. кл./см3. Клеточную суспензию разливали в пробирки по 1,0 см3 и во флаконы PS "Orange Scientibic", культивировали в стационарных условиях при температуре (37,0±0,5)° С.

Титрование вируса по цитопатогенному действию (ЦПД) проводили в клетках Vero методом десятикратных разведений и с соответствующими

контролями. Из культуральной вируссодержащей жидкости готовили 10-кратные

1 8

разведения 10-10° на поддерживающей среде без добавления сыворотки. Предварительно монослой клеток дважды отмывали раствором Хенкса. Каждым разведением в объеме 1,0 см3 вируса заражали 4 пробирки с культурой клеток. Зараженные и контрольные культуры инкубировали при температуре Ежедневно в течение 5-7 суток проводили учет ЦПД, выражая его по 4-крестовой системе. Специфичность ЦПД подтверждали в реакции нейтрализации со специфической сывороткой.

Величину титра вычисляли по методу Reed L.J. & Muench Н. и выражали в lg ТЦД5о в 1,0 см3 (тканевая цитопатогенная доза)[10].

Реакция нейтрализации (РН). В основу РН брали стандартный, классический метод, описанный в руководстве по вирусологии [54].

РН ставили в культуре клеток со специфической сывороткой, полученной от иммунизированной птицы а-варианте (с постоянной дозой гомологичной сыворотки и десятикратным разведением вируса).

Сыворотку перед началом исследований освобождали от термолабильных неспецифических ингибиторов подогреванием в водяной бане при температуре 56°С в течение 30 минут. Смеси равных объемов вируса и сыворотки в соответствующих разведениях выдерживали при комнатной температуре в течение 60 минут, а затем в объеме 1,0 см3 вносили в 4 пробирочные культуры.

Титр вируса и конечную точку нейтрализации вычисляли по Reed L.J. & Muench Н. на основании ЦПД в культуре клеток через 5-6 суток инкубации после инокуляции клеток.

Вируснейтрализующую активность сыворотки выражали в индексе нейтрализации, который представляет собой разность показателей логарифмов титра вируса в присутствии специфической и нормальной сывороток.

Очистку вируссодержащего материала проводили методом гельхроматографии на макропористом стекле (МПС), обработанном поливинилпирролидоном (ПВП) [42]. Макропористое стекло размером пор 1000А активировали концентрированной соляной кислотой в соотношении 1:2 и выдерживали при температуре 20-22°С 1-2 суток, периодически встряхивая. После этого кислоту сливали и МПС однократно промывали дистиллированной водой, затем его заливали равным объемом смеси Комаровского (6% раствор Н2О2 в 6 М растворе НС1 в соотношении 1:1). Смесь Комаровского с МПС нагревали на водяной бане при 56°С в течение 2 ч в вытяжном шкафу. Обработанное МПС промывали дистиллированной водой до нейтральной реакции и под вакуумом удаляли воздух из пор. Затем заливали двумя объемами 4% раствора ПВП в дистиллированной воде и перемешивали на качалке в течение 4-5 ч. Раствор сливали, а МПС отмывали от несвязанного ПВП дистиллированной водой до исчезновения желтой окраски. Колонку размером 80><2см заполняли модифицированным МПС и уравновешивали 0,01М фосфатно-солевым буферным раствором (ФБР), рН 7,3-7,5. После стабилизации колонки над поверхностью МПС оставляли слой буфера в 1 мм. После этого на МПС наслаивали вируссодержащую материал. Элюцию вируса осуществляли ФБР, рН 7,3-7,5 с использованием перистальтического насоса, прибора РЭППС-1М (регистратор

измерений электропроводимости и процента поглощения света элюатом при жидкостной хроматографии при длине волны 280 нм) со скоростью 0,7-1,0 см3/мин и собирали его отдельной фракцией. Выход очищенного вируса регистрировался на ленте самописца в своеобразном пике, затем вторым пиком выделялись примесные белки.

Выделение иммуноглобулинов G (IgG). Исходным сырьем для получения специфических IgG служила иммунная сыворотка крови клинически здоровых цыплят. Осаждение сывороточных иммуноглобулинов проводили 30% раствором сернокислого аммония, который добавляли по каплям при постоянном перемешивании на магнитной мешалке. Затем выдерживали 2 часа и центрифугировали при 2000 об/мин в течение 15 мин. Осадок иммуноглобулинов разводили 0,01М фосфатным буферным раствором рН 7,2-7,4 , в объеме в 5 раз меньше исходного объема сыворотки, и диализировали раствор иммуноглобулинов против трех смен 0,01М фосфатного буфера, рН 7,2-7,4. Для выделения IgG применяли метод гельфильтрации на колонке с сефадексом G-200. В качестве элюата использовали 0,01М фосфатный буфер рН 7,2-7,4, скорость элюции была 28-30 см3/ч на 1см2 сечения колонки. Фракции собирали по 5см3, используя для этой цели автоматический коллектор фракций. Оптическую плотность элюата измеряли на спектрофотометре при длине волны 280 нм.

Концентрацию иммуноглобулинов G определяли по формуле:

ОД 280 X р

1.3

где (1)

ОД280 - показатель оптической плотности раствора при длине волны 280 нм;

Р - показатель разведения раствора;

1.3 - коэффициент для пересчета белка.

Фракции, содержащие белок, объединяли, концентрировали путем диализа

против 0,01М фосфатного буфера рН 7,2±0,2 в течение 24 часов при температуре

4-6°С.

Получение иммунопероксидазного конъюгата проводили методом, основанным на образовании ковалентной аминосвязи между аминогруппами иммуноглобулина О и альдегидными группами пероксидазы, и ее последующем восстановлением до С-1М-связи с помощью боргидрида натрия.

Пероксидазу хрена использовали без дополнительной очистки. Для

л

приготовления конъюгата 4 мг пероксидазы растворяли в 1,0 см дистиллированной воды, к раствору фермента добавляли 0,2 см3 свежеприготовленного ОДМ периодата натрия (ТЧаЮ^ и выдерживали в темной стеклянной посуде 20 минут при комнатной температуре, осторожно помешивая (следили, чтобы не образовалась пена, что ведет к денатурации фермента). Затем раствор диализовали против 0,001М ацетатного буфера рН 4,4 при 4°С в течение 16-18 часов.

После диализа раствор защелачивали до рН 9,6 добавлением 0,02 см3 0,2 М карбонат-бикарбонатного буфера рН 9,6. К этому раствору немедленно добавляли 8 мг специфических антител по белку, предварительно отдиализованных против этого же буфера. Смесь выдерживали в течение 2 часов в темном месте при комнатной температуре. Затем добавляли ОД см3 0,4%-ного раствора боргидрида натрия (ЫаВНд) и инкубировали в течение 2 часов при температуре 4°С. Раствор диализовали против 0,01М фосфатного буфера рН 7,2±0,2 в течение 24 часов при 4°С.

Очистку конъюгата от несвязавшихся белков и пероксидазы проводили методами гельфильтрации на колонках с сефадексом 0-200, уравновешенных 0,01М фосфатным буфером рН 7,2-7,4, скорость пропускания 0,2-0,3 см3/мин. Собранные фракции (по 3,0 см3) измеряли на спектрофотометре при двух длинах волн 280 и 403нм. Объединенные фракции пика, имеющие значение коэффициента связывания от 0,4 до 0,6, разливали небольшими порциями и хранили при 4°С.

КО Д 403

= - (2)

О Д 280

Активность конъюгата проверяли в прямом простом сэндвич-методе со специфическим иммуноглобулином. 5 мг специфического иммуноглобулина растворяли в 5,0 см3 0,01М фосфатно-буферного раствора с 0Д5М хлорида натрия рН 7,2-7,4. Концентрацию белка определяли спектрофотометрически при длине волны 280 нм по формуле: ОД28о/1-ЗхР, где 1,3-эмпирический коэффициент; Раствор специфического иммуноглобулина разбавляли до концентрации 1 мкг/см3 ФБР рН 7,2-7,4 и сорбировали его в лунках полистиролового планшета в течение 2,5 часа при 37°С или 18-20 часов при 4-8°С. Трижды отмывали ФБР с твином-20 (ФБРТ), добавляя в каждую лунку не менее 0,2см3. Затем вносили по 0,1см3 конъюгата и термостатировали при 37°С в течение 30 минут, содержимое лунок удаляли и планшет трехкратно отмывали по 0,2см3 ФБРТ. Добавляли по ОД см3 субстратной смеси и через 15-20 мин после внесения субстрата реакцию останавливали 0,05 см3 10% H2SO4, а оптическую плотность измеряли на иммуноферментном анализаторе «Униплан» при длине волны 492 нм. Если оптическая плотность была (0,9±0,2) со специфическим иммуноглобулином и не более (0,2±0,05) с IgG других видов животных и с бычьим сывороточным альбумином, то препарат был пригоден к использованию в прямом методе иммуноферментного анализа для обнаружения антигена метапневмовируса птиц.

В очищенном препарате вируса, конъюгате и промежуточных продуктах его получения и очистки, концентрацию белка определяли по методу Лоури [165], используя в качестве стандартного раствора бычий сывороточный альбумин (БСА), производства ООО «Биолот», Санкт-Петербург.

«Сэндвич» вариант иммуноферментного анализа. Для сенсибилизации поверхности лунок полистироловых планшет для ИФА фирмы «Nunc» (США) использовали очищенные антиметапневмовирусные иммуноглобулины G (анти-МПВ IgG) в оптимальной концентрации, разведенные в 0,05М карбонат-бикарбонатном буфере, рН 9,5-9,7. Иммобилизацию специфических IgG на поверхности лунок полистироловых планшет осуществляли в течение 16-18 часов при температуре 4-8°С. Несвязавшиеся с поверхностью полистирола

специфические отмывали трехкратно в объеме 0,2 см3 0,01М калий-

фосфатным буфером, содержащим 0,5М раствор хлорида натрия с 0,1% конечной концентрацией твина-20 (ФБРТ), рН 7,0-7,4. Все реакции на планшетах проводили в объеме 0,1 см3 . Антигенсодержащий материал и конъюгат инкубировали в ФСБ рН 7,2+ 0,15 М ЫаС1 + 0,1% твин-20 + 0,2% бычий сывороточный альбумин в течение 2 часов при 37°С. Для отмывки планшет применяли буфер ФБРТ в объеме 0,2 см3. В качестве субстрата использовали ортофенилендиамин (ОФД) + 0,01% Н2О2 в 0,05 М фосфатно-цитратном буфере рН 4,9-5,0. Реакцию останавливали 0,05 см3 10% раствора Н^С^ через 15-20 мин после внесения субстрата и оптическую плотность измеряли на иммуноферментном анализаторе «Униплан» при длине волны 492 нм.

Интерпретация результатов ИФА. Зависимость величины

ферментативной активности специфического комплекса с ферментной меткой от количества любого компонента комплекса изображается в виде доза-ответной кривой, где по оси ординат отложена интенсивность сигнала субстрата после его ферментативного превращения, измеренная в момент времени а по оси абсцисс концентрация определяемого реагента в пробе.

Под чувствительностью анализа понимается та минимальная концентрация определяемого реагента, при которой заметно различие в величине сигнала для этой концентрации и нулевого стандарта, то есть образца заведомо не содержащего определяемого реагента. Эта разница в величинах сигналов должна составлять 2-3 величины стандартного отклонения для нулевого стандарта, рассчитываемого по формуле:

(3)

8 - стандартное отклонение, п - число измерений, X! - величина сигнала для

данного измерения, ш - среднее арифметическое от х,

1-

Методы выражения концентрации антигена. В тех случаях, когда антиген можно получить в очищенном виде, готовят стандартные растворы с известной концентрацией антигена и строят калибровочную кривую. По ней, зная величину сигнала для неизвестной пробы, можно рассчитать концентрацию определяемого

максимальна в линейной области доза-ответной кривой, так как чем больше наклон кривой, тем выше точность анализа.

Для неочищенного антигена его концентрация выражается в относительной величине - титре, который представляет собой степень разведения раствора антигена. Разновидностью этого метода является полуколичественный учет результатов ИФА, когда интенсивность сигнала оценивается в «крестах»

Для качественной диагностики, когда важно наличие или отсутствие антигена в исследуемой пробе используют положительно-отрицательный метод. Положительным значением (+) считают величину сигнала, которая в 2-3 раза превышает сигнал от контрольного образца, не содержащего определенный антиген или содержащий гетерологичный антиген (-). Процент положительных проб представляет собой выявляемость метода.

Статистическая обработка данных. Все полученные результаты обработаны статистически. При обработке результатов мы пользовались методами вариационной статистики, изложенные в соответствующих руководствах [2,47].

Среднее арифметическое значение вычисляли по формуле:

антигена, которая выражается обычно в нг/см3 или М. Точность результатов

(#, Ф, + и -).

(4)

, где

п

- значение суммы вариант, п - общее число вариант.

Ошибку средней арифметической величины определяли по формуле:

Ш = -J. ,где (5)

6 — средняя квадратичная ошибка (отклонение)

Величину квадратичного отклонения определяли по формуле:

S= ± (6)

Средняя величина считалась достоверной, если уровень значимости Р<0,05 и недостоверной, если Р>0,05. Положения, выносимые на защиту:

- тест-система, разработанная на основе «сэндвич» варианта ИФА для выявления и количественного определения антигена метапневмовируса птиц в биологических материалах, включающая обоснования оптимальных концентраций и условий взаимодействия компонентов и способ выражения концентрации антигена;

- результаты сравнительной оценки выявления антигена метапневмовируса птиц в клетках Vero в «сэндвич» варианте ИФА и методом титрации;

- результаты выявления антигена метапневмовируса в клетках Vero и в органах и тканях у экспериментально зараженных цыплят;

- данные эпизоотологического обследования птицехозяйств РФ. Степень достоверности и апробация результатов.

Научные положения, выводы и практические рекомендации, сформулированные в диссертационной работе научно-обоснованы, достоверны и вытекают из результатов собственных исследований. Исследования проведены на большом фактическом материале с использованием современных вирусологических, биохимических и серологических методов исследований.

По результатам научных исследований опубликовано 2 статьи в журналах, рекомендованных ВАК Минобразования и науки РФ, и 5 статей опубликованы в сборниках материалов конференций и конгрессов. Материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на заседаниях Методического совета отдела вирусологии и ОБП и Ученого совета ГНУ ВНИВИП Россельхозакадемии (20112013гг.), на международных агропромышленных конгрессах (Санкт-Петербург, 2011,2013г.); XVII международной конференции ВНАП (Сергиев Посад, 2012 г.); XVIII Congress World Veterinary Poultry Associatio French branch (GF-AMVA) 1923 august 2013, Nantes France.

Диссертация изложена на 115 страницах компьютерного текста и состоит из следующих разделов: введение, основная часть, заключение, список сокращений, список литературы и приложения.

Диссертация иллюстрирована 5 таблицами, 11 рисунками и 6 формулами. Список литературы включает 238 источников, из которых 181 зарубежных.

2. Основная часть 2.1. Иммуноферментный анализ и его применение в ветеринарии

В течение последних десятилетий в диагностике инфекционных болезней широкое применение получил твердофазный иммуноферментный анализ. В отличие от классических иммунологических методов лабораторной диагностики, основанных на феноменах преципитации или агглютинации, инфекционный агент выявляется на первой фазе взаимодействия антиген-антитело и при последующей фермент-субстратной реакции, что определяет высокую чувствительность метода.

В патентной и научной литературе появляется все больше сведений о рекордных пределах обнаружения веществ данным методом, вплоть до 10-21 молей в образце [37]. Высокие результаты достигаются благодаря использованию неограниченных возможностей ферментов - биокатализаторов, которые позволяют создать каскадные системы усиления различных химических сигналов. Ферменты, используемые в иммуноанализе, должны удовлетворять следующим требованиям:

- доступность в чистом виде;

- простота и чувствительность методов определения продуктов ферментативной реакции;

- высокая стабильность и активность конъюгатов при хранении

в условиях выполнения анализа.

Наибольшее применение в иммуноферментном анализе среди ферментов, удовлетворяющих перечисленным выше требованиям, получили пероксидазы из корней хрена, щелочная фосфатаза из слизистой кишечника теленка и ß-галактозидазы Е. coli. Все три фермента определяются на уровне пикомолярных концентраций.

Пероксидаза остается самым доступным ферментом. Она содержит легко окисляемые периодатом углеводные остатки, через которые может осуществляться связывание фермента с антителами или антигенами. В состав субстратной системы для измерения активности пероксидазы фотометрическим

способом входят хромогены, дающие при окислении перекисью окрашенные соединения. Каталитическая активность получаемых конъюгатов остается достаточно высокой, так как при соблюдении мягких условий окисления активный центр фермента не затрагивается и остается слабо экранированным [113].

Пероксидаза является гемсодержащей оксидоредуктазой, катализирующей окисление перекисью водорода различных органических соединений. Типичными, быстро окисляющими субстратами пероксидазы являются фенолы, ароматические амины и диалкиламины. Такие часто применяемые субстраты, как о-фенилендиамин, 5-аминосалициловая кислота, бензидин и его гомологи в результате окислительной конденсации образуют интенсивно окрашенные продукты. Растворы субстратов готовят непосредственно перед употреблением; спонтанное окисление субстрата в растворе, в том числе и в присутствии перекиси водорода, может быть замедлено добавлением полиэтиленгликоля или другого водорастворимого полимера [114]. Стабилизация водных растворов 3,3', 5,5'-тетраметилбензидина достигается добавлением N-метилпирролидона [189]. Удобны в работе водорастворимые алкилсульфонаты тетраметилбензидина [230].

Фенолы и К,М-диалкиламины применяются обычно в составе двухкомпонентных субстратных смесей: вторым компонентом являются соединения с первичными ароматическими аминогруппами. В результате такого окисления образуются красители хинониминового ряда. Типичными аминами являются 4-аминоантипирин, м- или п- замещенные анилины [116, 155, 227], 3-амино-9-этилкарбозол [114]. Отличается особенно быстрое развитие окраски при применении 4-йодфенола [217]. Преимущества одних комбинаций реагентов перед другими могут состоять в стабильности при хранении растворов или сухих составов, в скорости развития окраски, ее интенсивности и стабильности во времени после остановки реакции. 1Ч,М-диалкиланилины, содержащие в алкильной цепи карбоксильную [227] или фосфатную группу [111], стабильны при хранении, дают интенсивную и стабильную окраску [227] и низкую неспецифическую реакцию в присутствии белков нормальной сыворотки [111].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Лисенкова, Анастасия Сергеевна, 2013 год

Список литературы

1. Андреева, 3. М.,. Никонова В.А, Шобухова Т.С., Ванеева Л.И., Янкина Н.Ф.

Ускоренный иммуноферментный анализ // Жур. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 1985, - №4, - С.60-63.

2. Ашмарин, И.П., Васильев H.H., Амбросов В.А. Быстрые методы статистической обработки и планирование экспериментов // Л.: Изд-во ЛГУ, 1975,- 78 с.

3. Болезни птиц // СПб: издатель В.А. Бакулин, издательский код по ОКВЭД

22.11.1,2006.-С.164-166.

4. Борисова, H.A. Антигенная активность экспериментальной инактивированной

эмульсионной вакцины против ньюкаслской болезни и пневмовирусной инфекции птиц // Вет. патология. - 2006. - №4 (19). - С. 144-146

5. Борисова, И. А. Разработка технологии изготовления и контроля инактивированной вакцины против Ньюкаслской болезни и метапневмовирусной инфекции птиц: дисс... канд. биол. наук: 03.02.02 / Борисова Ирина Александровна. - Владимир, 2008. -167с.

6. Борисова, И.А., Борисов A.B. Метапневмовирусная инфекция птиц //РацВетИнформ. - 2009. - №12. - С. 9 - 11.

7. Борисова, И.А., Старов С.К. Пневмовирусная инфекция птиц // Тр. Федерального центра охраны здоровья животных. - Владимир, 2006. - Т.4. -С.281-296.

8. Вербов, В.Н. Принципы твердофазного иммуноферментного анализа //

Твердофазный иммуноферментный анализ : сб. науч. тр. / Ленингр. НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Пастера.-Л., 1988,- Т.64,- С.3-27.

9. Виноходов, В.О. Синдром «опухшая голова» или введение в отоларингологию

птиц // Ветеринария в птицеводстве.- 2003. - №1 (7) С.14-27.

10. Вирусные болезни животных: учеб. пособие / Сюрин В.Н. М. : ВНИТИБП, 1998. -С.17-20.

11. Волкова, М.А., Батченко Г.В., Мудрак Н.С. Непрямой вариант иммуноферментного метода для определения антител к пневмовирусу птиц // Актуальн. пробл. инфекц. патологии жив-х: матер. Междунар. науч. конф., посвящен. 45-летию ФГУ «ВНИИЗЖ». - Владимир, 2003. - С.358-361.

12. Георгиу, X. Оценка серологических реакций при анаплазмозе крупного рогатого скота и овец // Вестник ветеринарии.-1998.-№8(2). С.82-85.

13. Горбачев, E.H., Вербов В.Н., Артюхов А.И. Влияние физико-химических факторов на чувствительность и специфичность иммуноферментного анализа // Твердофазный иммуноферментный анализ: сб. науч. тр., Ленингр. НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Пастера. - Л., 1988,-Т.64,- С.76-80.

14. Данко, Л.Ю. Культуральные и антигенные свойства метапневмовируса птиц: автореф. дис. ... канд. вет. наук: 06.02.02 / Данко Леонид Юрьевич. - СПб., 2011.-21 с.

15. Джавадов Э.Д. Иммуноферментный метод диагностики болезни Гамборо:

дис. ... канд. вет. наук / Джавадов Эдуард Джавадович - Л., 1988.-126 с.

16. Джавадов, Э.Д., Никитина Н.В., Трефилов Б.Б., Явдошак Л.И. Способ определения специфических антител к вирусу энтерита гусей // RU 2323743 С2 22.05.2006.

17. Дмитриев, Д.В. Ассоциированное течение пневмовирусной инфекции птиц// Вет. мед.- теория, практика и обучение: матер, второй всерос. научно-практ. конф. 1-2 ноября 2007г. - СПб, 2007. - С. 23-25.

18. Дмитриев, Д.В. Серологический мониторинг на метапневмовирусную инфекцию птиц с применением ИФА // Ветеринарная практика.- СПб, 2010.-№2(49). - С. 20-22.

19. Дмитриев, Д.В. Непрямой метод иммуноферментного анализа в диагностике метапневмовирусной инфекции птиц: автореф. дис. ... канд. вет. наук: 06.02.02 / Дмитриев Денис Валерьевич. - СПб., 2010. - 21 с.

20. Дубовой, A.C., Никитина Н.В., Сергеев В.Д. Разработка тест-системы для иммуноферментного метода диагностики аденовирусной инфекции птиц // Современные средства и методы борьбы с заразными болезнями

сельскохозяйственных птиц: сб. науч.тр., ВНИВИП,- Л., 1988., С. 12-14.

21. Ирза, В.Н., Борисов A.B., Дрыгин В.В., Старов С.К. Проблемы респираторных заболеваний в современном птицеводстве // 1-й Междунар. ветер, конгресс по птицеводству. - М., 2005. - С.14-22.

22. Ирза, В.Н., Оковытая Т.В., Борисов В.В., Колотилов А.Н Серологический мониторинг по птичьему пневмовирусу (Avian Pneumovirus - APV) в России // Конференция по птицеводству,- Зеленоград, 2003. - С.222-223.

23. Капустин, В.Н., Лысый В.Г. Диагностика и профилактика пневмовируса у кур-несушек // Ветеринария и кормление - 2005. - №5. - С.З.

24. Каспарьянц, С., Столляр А. Пневмовирусы птицы // РацВетИнформ. -

2009.-№11.-С.8-10.

25. Котляр, П.Ю. Иммуноферментный метод диагностики инфекционного ларинготрахеита птиц : автореф. дис. ...канд. вет. наук: 16.00.03 / Котляр Павел Юрьевич. - СПб., 1995. - 18 с.

26. Лисенкова, A.C. Метапневмовирусная инфекция птиц. Диагностика и профилактика // Материалы Международного агропромышленного конгресса. -СПб, 2011.-С. 21-22.

27. Маслов, Д.В. Серологическая диагностика вирусного энтерита гусей методом иммуноферментного анализа: автореф. дис. ... канд. вет. наук: 16.00.03 / Маслов Дмитрий Владимирович. - СПб., 2006. - 17 с.

28. Никитина, Н.В., Дубовой A.C. Набор компонентов для выявления антител к вирусу синдрома снижения яйценосткости-76 (ССЯ-76) иммуноферментным методом // ТУ 9388 016 00495674-2003.-С.18.

29. Никитина, Н.В., Трефилов Б.Б., Дмитриев Д.В., Романов А.Е. Получение антигена пневмовируса птиц для иммуноферментного анализа // Материалы науч.- пракг. конф. ВНИВИП (3-4 июня 2008 г.). - СПб., 2008. - С. 94-97.

30. Никитина, Н.В., Трефилов Б.Б. Набор компонентов для диагностики реовирусного теносиновита кур иммуноферментным методом // ТУ 9388-00900495674-2001. Регистр.: 23.04.01,- С. 18.

31. Никитина Н.В., Трефилов Б.Б., Лисенкова A.C. Влияние физико-химических факторов на чувствительность и специфичность иммуноферментного анализа // Ветеринарная практика. - СПб, 2012. - № 2 (57). - С. 36 - 39.

32. Никитина Н.В., Трефилов Б.Б., Лисенкова A.C. Применение «сэндвич» варианта ИФА при метапневмовирусной инфекции птиц // Перспективы развития агропромышленного комплекса России в условиях членства в ВТО: матер, междунар. конгр. - СПб, 2013. - С.226 .

33. Никонова, З.Б. Разработка и применение методов диагностики метапневмовирусной инфекции птиц: автореф. дис. ... канд. биол. наук: 03.02.02 / Никонова Зоя Борисовна. - Владимир, 2012. - 25 с.

34. Новые методы иммуноанализа // под редакцией A.M. Егорова. М.: Мир., 1991. - 289 с.

35. Пронин, A.C., Герасимова H.H., Волкова М.А., Хлебовец З.Б., Борисова H.A. Обоснование выбора подтипа пневмовируса птиц в качестве антигена инактивированной вакцины // Тр. Федер. Центра охраны здоровья ж-х. -Владимир, 2006. - Т. 4. - С .323-328.

36. Райхер, И.И. Очищенные антитоксины (выделение из противодиф. и противостолбн. сывороток с помощью иммуносорбции, изучение , перспективы практического применения). // автореф. дис. ... докт. биол. наук,-Пермь.-1973.

37. Ройт, А., Бростофф Д., Мейл Д. Иммунология // М. : Мир, 2000. -С.592.

38. Руководство по ветеринарной вирусологии // Сюрин В.Н. - М.: Колос, 1966.-С.141-185, 206, 207.

39. Самусева, Г.Н., Дмитриева М.Е., Лисенкова A.C., Занько М.А.. Диагностика ассоциированного течения метапневмовирусной инфекции и парамиксовирусной инфекции 2-го серотипа// Материалы XVII международной конференции ВНАП. - Сергиев Посад, 2012. - С. 604-606.

40. Сарбасов, А.Б., Старов С.К., Борисов A.B. Изучение антигенных свойств пневмовируса птиц на цыплятах // Актуальн. пробл. инфекц. патологии жив-х: матер. Междунар. науч. конф., посвящен. 45-летию ФГУ «ВНИИЗЖ». -

Владимир, 2003. - С.354-356.

41. Сергеев, В.Д., Никитина Н.В., Мухамедшина Л.Р. Иммуноферментный метод в диагностике болезней птиц // Тр. ВНИВИП. - Л., 1989.-С.75-82.

42. Сергеев, В.Д., Рождественский И.К. Методические рекомендации по очистке и концентрированию аденовирусов птиц // Л., 1988,- 30 с.

43. Сергеев, В.Д., Токарских В.В. Получение очищенного и специфического антигена вируса инфекционного бронхита кур для иммуноферментного анализа // Вирусные болезни с.-х. животных : тез. докл. Всерос. науч.-практ. конф. - Владимир, 1995.

44. Старкова, Т.В., Полетаева О.Г. Оценка различных методов инструментального учета результатов ИФА с антигеном трихинелл // Материалы докл. Седьмой науч. конф. по трихинеллезу человека и животных. - М., 1996.-С.93-95.

45. Тарун, Е.И. Влияние иммобилизации антител и пероксидазных конъюгатов на их реакции: автореф. дис. ... канд. хим. наук: 03.00.04 / Тарун Екатерина Ивановна. - Минск, 1993. - 19 с.

46. Теория и практика иммуноферментного анализа // под редакцией Егорова A.M. - М.: Высш. шк, 1991.-288с.

47. Терентьев, П.В., РостоваН.С. Практикум по биометрии// Л., 1977.-151 с.

48.Трефилов, Б.Б., Бочкарев B.C., Лисенкова A.C. Репродукция метапневмовируса птиц при различной температуре // Ветеринарная практика. - СПб, 2012. - № 1(56).-С. 15-17.

49. Трефилов, Б.Б., Данко Л.Ю., Бочкарев B.C., Никитина Н.В Антигенная специфичность и степень нейтрализации вакцинных штаммов метапневмовируса птиц // Ж.. Ветеринарная практика. - 2011. - № 1. - С.35-37.

50. Трефилов, Б.Б., Никитина Н.В., Данко Л.Ю., Пунтус Ф.М. Ассоциированное течение респираторных вирусных болезней птиц // Матер, междунар. конгр,-СПб. - 2009. - С.41-42.

51. Трефилов, Б.Б., Никитина Н.В., Денисов Н.В. Пневмовирусная инфекция птиц (эпизоотология, диагностика) // Актуал. пробл. вет. мед. ( научно-практ.

конгр. 24-25 августа 2007). - СПб. - 2007,- С.210-211.

52. Трефилов, Б.Б., Никитина Н.В., Дмитриев Д.В. Репродукция метапневмовируса в клеточных культурах // Актуал. пробл. ветеринарии и животноводства: матер, межрегион, научно-практ. конф.-Самара, 2010,-С.316-320

53. Трефилов, Б.Б., Никитина Н.В., Лисенкова А.С. Получение антиметапневмовирусных IgG из сыворотки крови кур для «сэндвич» метода ИФА. // Материалы XVII международной конференции ВНАП. - Сергиев Посад, 2012.-С. 618-619.

54. Троценко, Н.И., Белоусова Р.В., Преображенская Э.А. Практикум по ветеринарной вирусологии // М.: «Колос»,2000. - С.272.

55. Фадель, М., Надточей Г.А., Контримавичус Л.М., Суворов А.В. Метод ИФА для диагностики вирусного энтерита гусей // Ветеринария.-1989.-№7.-С.36-39.

56. Хлебовец, З.Б., Щербакова Л.О., Манин Т.Б., Батченко Т.Д., Дрыгин В.В., Старов С.К. Изучение особенностей персистенции и тропизма пневмовируса птиц подтипа А с помощью полимеразной цепной реакции// Материалы 1-го междунар. вет. конгресса по птицеводству (18-22 апреля 2005). - М., 2005. -С.93-97.

57. Чард, Т. Радиоиммунологические методы // М. : Мир, 1981. - С.246.

58. Ahmadian, G., Chambers P., Easton A.J. Detection and characterization of Processing encoded by the second ORF of the M2 gene of pneumoviruses // J. Gen. Virol. - 1999. - V .80. -P.2011-2016.

59. Alberty R. A. A study of the variation of the average isoelectric points of several plasma proteins with ionic strength // J. Phys. And colloid Chem. — 1949, —V. 53, —P. 114-126.

60. Alexander, D.J. Newcastle disease and other avian paramyxoviridae infections// Diseases of Poultry.-10th ed. Ames, Iowa, 1997. - P.541-569.

61. Alkhalaf, A.N., Ward L.A., Dearth R.N. and Y.M. Saif. Pathogenicity, transmissibility, and tissue distribution of avian pneumovirus in turkey poults // Avian Dis. - 2002. - V.46. - P.650-659.

62. Anawis, M.A., Lindberg R.E. Stabilized enzyme conjugate composition // Patent №EP0152847.-1985-08-28.

63. Anon. Turkey rhinotracheitis of unknown aetiology in England and Wales: a preliminary report from the British Veterinary Poultry Association // Vet. Rec. -1985. -V.117.-P.653-654.

64. Arns, C.W., Hafez H.M. Swollen head syndrome in poultry flocks in Brazil // Proc. 41st Western Poultry Dis. Conf. - Sacramento, California, 1992. - P.81-83.

65. Ashihara, Y., Kasahara Y. Method of measuring biological ligand by utilising amylase // Patent №EP0152305.-1985-08-21.

66. Banet-Noach, C., Simanov L., Malkinson M. Direct (non-vector) transmission of West Nile virus in geese // Avian Pathol. - 2003. - V.32. - P.489-494.

67. Banet-Noach, C., Simanov L., Perk S. Characterization of Israeli avian metapneumovirus strains in turkeys and chickens // Avian Pathol. - 2005. - V.34. -P.220-226.

68. Baxter-Jones, C., Cook J.K.A., Frazier J.A. Grant M., Jones R.C., Mockett A.P.A. and Wilding G.P. Close relationship between TRT virus isolates // Vet. Rec. - 1987. -V.120.-P.562.

69. Baxter-Jones, C. Grant M., Jones R.C. and Wilding G.P. A comparison of three methods for detecting antibodies to turkey rhinotracheitis virus.// Avian Pathol. -1989. - V.18. -P.91-98.

70. Baxter-Jones, C., Wilding G.P., Grant M. Immunofluorescence as a potential diagnostic method for turkey rhinotracheitis. // Vet. Rec. - 1986. - V.119. - P.600-601.

71. Bayon-Auboyer M. H., Jestin V., D. Toquin D., Cherbonnel M., and Eterradossi N. Comparison of F-, G- and N-based RT-PCR protocols with conventional virological procedures for the detection and typing of turkey rhinotracheitis virus//Arch. Virol.-1999. - V.144. - P.1091-1109.

72. Bell, I.G. Alexander D.J. Failure to detect antibody to turkey rhinotracheitis virus in Australia poultry Hocks // Austral. Vet. J. - 1990. - V.67. - P.232-233.

73. Bennett, R.S., La Rue R., Shaw D., Yu Q., Nagaraja K.V., Halvorson D.A., and

Njenga M.K. A wild goose metapneumovirus containing a large attachment of glycoprotein is avirulent but immunoprotective in domestic turkeys // J. Virol. -2005. -V.79. - P. 14834-14842.

74. Bennett, R.S., Nezworski J., Velayudhan B.T., Nagaraja K.V., Zeman D. H., Dyer N., Graham T., Lauer D.C., Njenga M.K., and Halvorson D.A., Evidence of avian pneumovirus spread among wild birds and domestic turkeys in central North America // Avian Dis - 2004 - V 48 - P.902-908.

75. Bennett, R.S., McComb B., Shin H.J., Njenga M.K., Nagaraja K.V., and Halvorson D.A., Detection of avian pneumovirus in wild Canada geese (Branta canadensis) and blue-winged teal (Anas discors) // Avian Dis. - 2002. -V.46.-P. 1025-1029.

76. Blake, D.A., Boguslaski R.C. Specific biding assay based on enzyme cascade amplification // Patent №EP0144744.-1985-06-19.

77. Brodbeck, H., Gallati H. Stabilized peroxidase compositions // Patent №US4448882.-1984-05-15.

78. Brot,N., WeissbachH. Novel reductase//Patent№US4374928,- 1983-02-22.

79. Buys, S.B., Du Preez J.H., A preliminary report on the isolations of a virus causing sinusitis in turkeys in Souch Africa and attemps to attenuate the virus // Turkeys. - 1980. - V.28. - P.36.

80. Buys, S.B., Du Preez J.H. and Els H.J., The isolation and attenuation of a virus causing rhinotracheitis in turkeys in South Africa, Onderstepoort // J. Vet. Res. -1989a. -V.56. -P.87-98.

81. Buys, S.B., Du Preez J.H. and Els H.J. Swollen head syndrome in chickens: a preliminary report on the isolation of a possible aetiological agent. J.S. Afr. Vet. Assoc., 1989b. -V.60. -P.221-222.

82. Cadman, H.F., Kelly P.J., Zhou R., Davelaar F., and Mason P.R., A serosurvey using enzyme-linked immunosorbent assay for antibodies against poultry pathogens in Ostriches (Struthio camelus) from Zimbabwe//Avian Dis.-1994. - V.38. - P.621-625.

83. Cantarero L., Butler J., Osborne J., The adsorptive characteristics of proteins for polystyrene and their significance in solid-phase immunoassays // Anal. Biochem.

— 1980. — V. 105, —P. 375—378.

84. Carlies, G. Bont D., Capron A. Enzymo-immunoassaiss// Bulletin d e'Institute Pasteur.-1981.-T.79.-P.317-333, 343-346.

85. Catelli, E., Cook J.K.A., Chesher J., Orbell S.J., Woods M.A., Baxendale W., and Huggins M.B., The use of virus isolation, histopathology and immunoperoxidase techniques to study the dissemination of a chicken isolate of avian pneumovirus in chickens// Avian Pathol. - 1998. - V.27. - P.632-640.

86. Cavanagh, D., Barrett T., Pneumovirus-like characteristics of the mRNA and proteins of turkey rhinotracheitis virus // Virus Res.-1988 - V.ll. - P.241-256.

87. Chettle, N.J., Wyeth P.J. The use of an ELISA test to detect antibodies to turkey rhinotracheitis // Brit. Vet. J. - 1988. - V.144. - P.282-287.

88. Collins, M.S., Gough R.E., Characterisation of a virus associated with turkey rhinotracheitis // J. Gen. Virol. - 1988. - V.69. - P.909-916.

89. Collins, M.S., Cox W.J., Gettle N.J., Antigenic differentiation of avian pneumovirus isolates using polyclonal antisera and mouse monoclonal antibodies // Avian Pathol. - 1993. - V.22. - P.469-479.

90. Collins, M.S., Mcintosh K., Chanock R.M., Respiratory syncytial virus// Fields Virology. 3rd ed. Philadelphia; - 1996. - P.1313-1351.

91. Cook, J.K.A. Avian rhinotracheitis// Revue Scientifique et Technique, Office International des Epizooties. - 2000. - L.19. - P.602-613.

92. Cook, J.K.A., Cavanagh D., Detection and differentiation of avian pneumoviruses (metapneumoviruses)// Avian Pathol. - 2002 - V.31 - P. 117-119.

93. Cook, J.K.A., Chesher J., Orthel F., Woods M.A., Orbell S.J., Baxendale W., Huggins M.B., Avian pneumovirus infection of laying hens: experimental studies // Avian Pathol. - 2000. - V.29. - P.545-556.

94. Cook, J.K.A., Ellis M.M. Attenuation of turkey rhinotracheitis virus by alternative

passage in embryonated chicken eggs and tracheal organ cultures // Avian Pathol. -1990. - V.19. -P.181-185.

95. Cook, J.K.A., Ellis M.M., Dolby C.A., Holmes H.C., Finney P.M., and Huggins M.B.,

A live attenuated turkey rhinotracheitis vaccine. 1. Stability of the attenuated strain //

Avian Pathol. - 1989a. - V.18. - P.511-522.

96. Cook, J.K.A., Ellis M.M., Huggins M.B., The pathogenesis of turkey rhinotracheitis in

turkey poults inoculatet with the virus alone or together with two strains of bacteria //Avian Pathol. -1991. - V.119. - P.181-185.

97. Cook, J.K.A., Holmes H.C., Finney P.M., Dolby C.A., Ellis M.M., and Huggins M.B., A live attenuated turkey rhinotracheitis virus vaccine. 2. The use of the attenuated strain as an experimental vaccine// Avian Pathol. - 1989b. - V.18. -P.523-534.

98. Cook, J. K. A., Huggins M.B., Orbell S.J., Mawditt K., Cavanagh D., Infectious

bronchitis virus vaccine interferes with the replication of avian pneumovirus vaccine in domestic fowl// Avian Pathol. - 2001. - V.30. - P. 233-242.

99. Cook, J.K.A., Huggins M.B., Orbell S.J., and Senne D.A., Preliminary antigenic c haracterisation of an avian pneumovirus isolated from commercial turkeys in Colorado. USA // Avian Pathol. - 1999. - V.28. - P.607-617.

100. Cook, J.K.A., Huggins M.B., Woods M.A., Orbell S.J., and Mockett A.P.A., Protection provided by a commercially avialable vaccine against different strains of turkey rhinotracheitis virus // Vet. Rec. - 1995. - V.136. - P.392-395.

101. Cook, J.K.A., Jones B.V., Ellis M.M., Jing Li and Cavanagh D. Antigenic differentiation of strains of turkey rhinotracheitis virus using monoclonal antibodies // Avian Pathol.- 1993b. - V.22. - P. 257 -273.

102. Cook, J.K.A., Kinloch S., Ellis M.M., In vitro and in vivo studies in chickens and

turkeys on strains of turkey rhinotracheitis virus isolated from the two species // Avian Pathol. - 1993a. - V.22. - P.157-170.

103. Cook, J.K.A., Orthel S.J., Orbell S., Woods M.A., and Huggins M.B., An experimental turkey rhinotracheitis (TRT) infection in breeding turkeys and the prevention of its clinical effects using live attenuated and inactivated TRT vaccines //Avian Pathol. -1996. - V.25. - P.231-243.

104. D'Arce, R.C.F., Cswing L.T., Almeida R.S., Trevisol I.M., Monteiro M.C., Rossini

L.I., Di Fabio J., Hafez H.M., Arns C.W., Subtyping of new Brazilian avian metapneumovirus isolates form chickens and turkeys by reverse transcriptase -

nested - polymerase chain reaction. //Avian Pathol. - 2005. - V.34. - P. 133-136.

105. Dar, A.M., Munir S., Goyal S.M., Abrahamsen M.S., Kapur V., Sequence analysis of the nucleocapsid and phosphoprotein genes of avian pneumovirus circulating in the US// Virus Res. - 2001. - V.79. - P. 15-25.

106. Dawson, E., Homan J. Stabilization of peroxidase // Patent №US4331761.-1982-05-25.

107. Droual, R., and Woolcock P.R., Swollen head syndrome associated with E. coli and infectious bronchitis virus in the Central Valley of California. // Avian Pathol. -1994. - V.23 -P.733-742.

108. Engvall, E., Perlmann P., Enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) Qanlitative assay of immunoglobulin G // Immunochemistry.-1971.-V.89.-P.871-879.

109. Eterradossi, N., Toquin D., Guittet M., Bennejean G., Discrepanciens in turkey rhinotracheitis ELISA results using different antigens. // Vet. Rec. - 1992. - V.131. -P.563-564.

110. Eterradossi, N., Toquin D., Guittet M., and Bennejean G., Evaluation of different turkey rhinotracheitis viruses used as antigens for serological testing following live vaccination and challenge // Vet. Med. - 1995. - V.42. - P.175-186.

111. Frey, G., Zimmermann G. Agent and process for detection of redox system // Patent №DE3433946.-1986-03-27.

112. Freytag, J.W., Ishikawa E. Immunoassay utilizing covalent conjugates of polymerized and antibody // Patent №EP0175560.-1986-03-26.

113. Gallacher, J. Partially oxidized enzyme conjugates // Patent № GB2067572.-1981-07-30.

114. Gallacher, J. Stabilization of indicators for detecting enzyme activity // Patent №US4615972.-1986-10-07.

115. Ganapathy, K., Jones R.C., Vaccination of chicks with live attenuated subtype B avian metapneumovirus vaccines: protection against challenge and immune responses can be unrelated to vaccine dose.// Avian Dis.- 2007,- V.51. - P.733-737.

116. Gantzer, M.L. Stabilized test composition, devise and method for the determination

of peroxidatively active substances // Patent №EP0130520.-1985-01-09.

117. Gerrard, C., Whitworth A., Chettle N., Wyeth P., Avian rhinotracheitis diagnostic kit. // Vet. Rec. - 1990. - V.126. - P.342.

118. Giraud, P., Bennejean G., Guittet M., & Touquin D., Turkey rhinotracheitis in France: preliminary investigations on a ciliostatic virus //Vet. Rec. - 1986. - V.119. -P.607-608.

119. Giraud, P., Guittet M., Toquin D., Le Gros F.X., Bouquet J.F. & Bennejean G., La rhinotracheite infectieuse de la dinde. Description et role d'un nouvel agent viral. // Receuil de Medecine Veterinaire. - 1988. - L.164. - P.39-44.

120. Gough, R.E. Isolation of an avian pneumovirus from broiler chickens. // Vet. Rec. -1994. - V.134. - P.353-354.

121. Gough, R.E., Collins M.S., Cox W.J., Chette N.J., Experimental infection of turkeys, chickens, ducks, geese, guinea fowl, pheasants, and pigeons with turkey rhinotracheitis virus // Vet. Rec. - 1988. - V. 123 - P.58-59.

122. Goyal, S.M., Chiang S.J., Dar A.M., Nagaraja K.V., Shaw D.P., Halvorson D.A. and Kapur V. Isolation of avian pneumovirus in from an outbreak of respiratory illness in Minnesota turkeys.// J. Vet. Diagn. Invest. - 2000. - V.12. - P. 166-168.

123. Goyal, S.M., Lauer D., Friendshuh K., Halvorson D.A., Seroprevalence of avian pneumovirus in Minnesota turkeys. // Avian Dis. - 2003. - V.47. - P.700-706.

124. Graham, D.A., German A., Abernethy D., McCullough S.J., Manvell R.J., and Alexander D.J., Isolation of ortho- and paramyxovirus from wild birds in Northern Ireland during the 1997 Newcastle epizootic // Vet. Rec. - 1999. - V.145. - P.20-21.

125. Grant, M., Baxter-Jones C., Wilding G.P., An enzyme-linked immunosorbent assay

for the serodiagnosis of turkey rhinotracheitis infection. // Vet. Rec. - 1987. - V.120 - P.279-280.

126. Grassi, J., Pradelles P. Compound labeled with acetylcholine sterase from Electrophorus electricus, method for its preparation and its use a marker in enzyme immunoassays // Patent №EP0139552.-1985-05-02.

127. Gulati, B.R., Munir S., Patnayak D.P., Goyal S.M., Kapur V., Detection of antibodies to US isolates of avian pneumovirus by a recombinant nucleocapsid

protein-based sandwich enzyme-linked immunosorbent assay. I I Journal of Clinical Microbiology. - 2001a. - V.39. - P.2967-2970.

128. Gulati, B.R., Patnayak D.P., Sheikh A.M., Poss P.E., Goyal S.M., Protective efficacy of high-passaged avian pneumovirus (APV/MN/turkey/l-a/97) in in.keys. // Avian Dis. - 2001b. - V.45. - P.593-597.

129. Hall, J.E., Hargreaves W.R. Zymogene activation, cascade amplification immunoassay // Patent №EP0123265.-1984-10-31.

130. Hafez, H.M. Comparative investigation of turkey rhinotracheitis (TRT) virus isolates from different countries // Dtsch. Tierarztl Wochenschr.-1992.-Bd.99.-S.489-488.

131. Hafez, H.M. The role of pneumovirus in swollen head syndrome of chickens. Review. //Arch. Geflugelkunde. - 1993. - Bd.57. - S.181-185.

132. Hafez, H.M., Emele J., Woemle H., Rhinotracheitis der Puten (TRT): serologische

verfolgunter suchung wirtschaftliche parameter sowie Erfarung mit dem Einsatz von Enrofloxazin zur Bekämpfung der secundarinfectionen. // Tierartztl. Umschau. -1990. - Bd.45. - S.111-114.

133. Hafez, H.M., Hess M., Prusas C., Naylor C.J., Cavanagh D. Presence of avian

pneumovirus type A in continental Europe during the 1980s // J. Vet. Med. B. -2000. - V.47 -P.29-33.

134. Hafez, H.M., Lohren U., Swollen head syndrome: clinical observations and serological examinations in West Germany. // Dtsch. Tierarztl. Wochenschr. - 1990. - Bd.97. - S.322-324.

135. Hafez, H.M., Weiland F., Isolierung des Virus der Rhinotracheitis der Puten (TRT). //

Zeitschr.Gebiete Veterinarmed. - 1990. - Bd.45. - S.103-111.

136. Harris, C. Cascade amplification enzyme immunoassay // Patent №US4463090.-

1984-07-31.

137. Have, P., Hansen H.C. Detection of goose Parvovirus antibodies by microneutralisation and enzyme-linked immunosorbent assay // Proc. 7th World. Vet. Poult. Assoc.- 1981,- P.60.

138. Heck, F.C., Deyoe B.L., Williams J.D. Antibodies to Brucella abortus in sera from

Strain 19 vaccinated and non-vaccinated cows as determined by enzyme linked

immunosorbent assay and conventional serologic method // Vet. Immunol. Immunopathol.- 1982.-6(3).-P.629-634.

139. Houadfi, E., Hamam M., Vanmarche J., Cook J.K.A. Swollen head syndrome in broiler chicken in Morocco // Proc. 40th Western Poultry Dis. Conf. Acapulco, Mexico-1991.-P.126-127.

140. Ishiguro, N., Ebihara T., Endo R., Ma X., Kikuta H., Ishiko H., Kobayashi K. High genetic diversity of the attachment (G) protein of human metapneumovirus // J. Clin. Microbiol. - 2004. - V.42. - P.3406-3414.

141. Jeggo, M.H., Wardley R.C., Brownlie J., and Corteyn A.H., Serial inoculation of sheep with two bluetongue virus types. //Res. Vet. Sci. - 1986. -V.40. -P. 386-392.

142. Jing, L., Cook J.K.A., David T., Brown K., Shaw K., Cavanagh D., Detection of turkey rhinotracheitis virus in turkeys using the polymerase chain reaction. // Avian Pathol. - 1993. - V.22. - P.771-783.

143. Jirjis, F.E., Noll S.L., Halvorson D.A., Nagaraja K.V., Townsend E.L., Sheikh A.M.,

Shaw D.P., Avian pneumovirus infection in Minnesota turkeys: experimental reproduction of the disease. // Avian Dis. - 2000. - V.44. - P.222-226.

144. Jirjis, F.E., Noll S.L., Halvorson D.A., Nagaraja K.V., Shaw D.P., Immunohistochemical detection of avian pneumovirus in formalin-fixed tissues. //J Vet. Diagn. Invest. - 2001. -V.13. - P. 13-16.

145. Jirjis, F.E., Noll S.L., Halvorson D.A., Nagaraja K.V., Shaw D.P., Pathogenesis of avian pneumovirus infection in turkeys // Vet. Pathol. - 2002. - V.39. - P.300-310.

146. Johannsson, A. Biochemical detection method and kit for use therein // Patent №EP0132948.-1985-02-13.

147. Jones, R.C. Avian pneumovirus infections: questions still unanswered. // Avian Pathol. - 1996. - V.25. - P.639-648.

148. Jones, R.C. Respiratory viral diseases - lessons to be learned? / R.C. Jones // Int. Poultry Prod. -2004. -V.12. -P.ll-15.

149. Jones, R.C., Baxter - Jones C., Savage C.E., Kelly D.F., and Wilding G.P., Experimental infection of chickens with a ciliostatic agent isolated from turkeys with rhinotracheitis. // Vet. Rec. - 1987. - V.120. - P.301-302.

150. Jones, R.C., Baxter - Jones C., Wilding G.P., and Kelly D.F., Demonstration of a candidate virus for turkey rhinotracheitis in experimentally inoculated turkeys. // VetRec. - 1986. - V. 119. - P.599-600.

151. Jones, R.C., Williams R.A., Baxter-Jones C., Savage C.E. and Wilding G.P., Experimental infection of laying of turkeys with rhinotracheitis virus: distribution of virus in the tissues and serological respons. // Avian Pathol. - 1988 - V.17. - P.841-850.

152. Juhasz, K., Easton A.J., Extensive sequence variation in the attachment (G) protein gene of avian pneumovirus: evidence for two distinct subgroups. // J. Gen. Virol. -1994. - V.75. - P.2873-2880.

153. Kapczynski, D.R., Sellers H.S. Immunization of turkeys with a DNA vaccine expressing either the F or N gene of avian metapneumovirus // Avian Dis. - 2003. -V.47. - P.1376-1383.

154. Kardi, V., Szegletes E. Use of ELISA procedures for the detection of Derzsy's disease virus of geese and of antibodies produced against it // Avian Pathologie.-1996.-№25.-P.25-34.

155. Katsuyama, H., Shishido T. Color indicator composition and film for detecting hydrogen peroxide // Patent №DE3213786.-1983-01-05.

156. Klenner, D., Kleinhamer G. Stabilization of peroxidase activity in solution // Patent № EP0197447.-1986-10-15.

157. Lamb, R.A., Collins P.L., Kolacofsky D. Paramyxoviridae // Acad. Pres., N.Y. -2000. - P.835-849.

158. Lenz, H., Kleinhammer G Process for the determination of an immunologically-bindable substance involving a Fab fragment //Patent № DE3430905.-1986-02-27.

159. Liao, Y.K., Lu Y.S. Detection of Derzsy's disease viral antigen by ELISA and latex agglutination // Proceedings of the 5th Asian-Australasian Association of Animal Production Societies Congress, Taipei, ROC on Taiwan. - 1990.-Vol.3.-P.208.

160. Ling, R., Pringle C.R. Turkey rhinotracheitis virus: in vivo and in vitro polypeptide synthesis // J. Gen. Virol. - 1988 - V.69. - P.917-923.

161. Ling, R., Easton A.J., Pringle C.R. Sequence analysis of the 22K, SH and G genes

of turkey rhinotracheitis virus and their intergenic regions reveals a gene order different from that of other pneumoviruses // J. Gen. Virol. - 1992. - V.73. - P. 17091715.

162. Lisenkova, A., Samuseva G., Dmitrieva M. The associated course of metapneumovirus and type 2 paramyxovirus infections in laying hens/ XVIII Congress World Veterinary Poultry Associatio French branch (GF-AMVA) 19-23 august 2013, Nantes France, 2013. - C. 417 .

163. Lister, S.A., Alexander D.J. Turkey rhinotracheitis: a review// Vet. Bull. - 1986. -V.56. - P.637-663.

164. Litman, D., Ullman E. Simultaneous calibration heterogeneous immunoassay //

Patent №US4533629.-1985-08-06.

165. Lowry, O.M., Rosenbrough W., Farr A., Randall R.V. Protein measurment with the folin-phenol reagent // J. Biol. Chem.-1951,- P. 193, 235.

166. Lu, Y.S., Skien Y.S., Tsai H.J. Swollen head syndrome in Taiwan-isolation of an avian pneumovirus and serological survey. // Avian Pathol. - 1994b. - V.23. -P.169-174.

167. Lu, Y.S., Skien Y.S., Tsai H.J. Swollen head syndrome in Taiwan-isolation of an avian pneumovirus and serological survey. // Exp. Rep. Tprian. - 1994a. - No 30,-P.103-108.

168. Lwamba, H.C., Alvarez R., Wise M.G., Yu Q., Halvorson D., Njenga M.K., Seal B.C. Comparison of the full-length genome sequence of avian metapneumovirus subtype C with other paramyxoviruses // Virus Res. - 2005.-V.107.-P.83-92.

169. Maharaj, S.B. Isolation of an avian pneumovirus-like agent from broiler breeder chikens in South Africa // Vet. Rec. - 1994. - V.134. - P.525-526.

170. Majo, N, Allan G.M., O'Loan C.J., Pages A., Ramis A.J. A sequential histopathologic and immunocytochemical study of chickens, turkey poults and broiler breeders experimentally infected with turkey rhinotracheitis virus //Avian Dis. -1995.-V.39.-P.887-896.

171. McDougall, J.S., Cook J.K.A. Turkey rhinotracheitis: preliminary investigations //

Vet. Rec. - 1986. - V.118. - P.206-207.

172. McFarlane-Toms, I.P. & R.J.H. Jackson A comparison of three commercially available ELISA tests for detecting antibodies to turkey rhinotracheitis (TRTV) // In E. Kaleta & U. Heffels-Redmann (Eds.). Proceedings of the International Symposium on Infectious Bronchitis and Pneumovirus Infections in Poultry Rauischholzhausen, Germany. - 1998. - P.26-37.

173. Morley, A.J., Thompson D.K. Swollen head syndrome in broiler chikens // Avian Dis.- 1984.-V.28.-P.238-243.

174. Nakamura, K., Mase M., Tanimura N., Yamaguchi S., Yuasa N. Attempts to reproduce swollen head syndrome in specific pathogen free chickens by inoculating with Escherichia coli and/or turkey rhinotracheitis virus // Avian Pathol. - 1998 -V.27. - P.21-27.

175. Nakane, P.K., Farr A.G. Immunohistochemistry with enzyme labeled antibodies: a brief review // J. of Immunological Methods.-1981,- № 47,- P.129-144.

176. Naylor, C.J., Al-Ankari A.R., Al-Afaleq A.L., Bradbury J.M., Jones R.C. Exacerbation of Mycoplasma gallisepticum infection in turkeys by rhinotracheitis virus // Avian Pathol. - 1992. - V.21. - P.295-305.

177. Naylor, C.J., Britton P., Cavanagh D. The ectodomains but not the transmembrane domains of the fusion proteins of subtypes A and B avian pneumovirus are conserved to a similar extent as those of human respiratory syncytial virus // J. Gen. Virol-1998. - V.79. - P. 1393-1398.

178. Naylor, C.J., Jones R.C. Turkey rhinotracheitis: a review //Vet.Bull. - 1993. - V.63.-P.339-349.

179. Naylor, CJ. & Jones R.C. Demonstration of a virulent subpopulation in a prototype live attenuated turkey rhinotracheitis vaccine // Vaccine. - 1994. - V.12. - P. 12251230.

180. Naylor, C.J., Worthington K.J., Jones R.C. Failure of maternal antibodies to protect young turkey poults against challenge with turkey rhinotracheitis virus //Avian Dis.-1997.-V.41- P.968-971.

181. Noguchi H., Nakanishi T. The quantitative analysis of antigen by the enzyme-antibody bridge method // Patent № EP0125893.- 1984-11-21.

182. O' Brien, J.D.P. Swollen head syndrome in broiler breeders // Vet. Rec.-1985. -V.117. - P.619-620.

183. Oliver, D.G., Sanders A.H. Thermal gradients in microtitration plates, effects on enzyme-linked immunoassay// J. Immun. Method.-1981.V.42.-№1.-P. 195-201.

184. O'Loan, C.J. & Allan G.M. The detection of turkey rhinotracheitis virus antigen in formalin fixed, paraffin embedded tissue using a streptavidin-biotin-immunoperoxidase method // Avian Pathol. - 1990. - V.19. - P.401-407.

185. O'Loan, C.J., Curran W.L. & McNulty M.S. Immunogold labelling of turkey rhinotracheitis virus // J. of Vet. Med., series B. - 1992. - V.39. - P.459-466.

186. Oreskes, I., Singer J.M. The mechanism of particulate carrier reactions. I. Adsorption of human-globulin to polystyrene latex particles // J. Immunol. — 1961.

— V. 86,—P. 338—343.

187. Oreskes, I. , Singer J.M. Influence of pH, ionic strength and human gamma globulin concentration on stability of polystyrene latex particle

suspensions // Proc. Soc. Exp. Biol. Med — 1964. — V. 115. —P. 763.

188. Pages-Mante, A. Studies on swollen head syndrome in Spain /A. Pages - Mante // New and Evolving Virus Diseases of Poultry: Proc. Seminar Europ. Comm. -Brussels. - 1994. - P. 109.

189. Parham, M., Warren W. Assay of peroxidase enzyme activity // Patent №US4596770.-1986-06-24.

190. Panigrahy, B., Senne D.A., Pedersen J.C., Gidlewski T., Edson R.K. Experimental and serologic observations on avian pneumovirus (APV /turkey /Colorado/97) infection in turkeys // Avian Dis -2000. - V.44. - P. 17-22.

191. Patnayak, D.P., Gulati B.R., Sheikh A.M., Goyal S.M. Cold - adapted avian pneumovirus for use as live, attenuated vaccine in turkeys // Vaccine. - 2003. - V.21.

- P.1371-1374.

192. Patnayak, D.P., Sheikh A.M., Gulati B.R., Goyal S.M. Experimental and field evaluation of a live vaccine against avian pneumovirus // Avian Pathol. - 2002. -V.31. -P.377-382.

193. Patnayak, D.P., Tiwari A., Goyal S.M. Growth of vaccine strains of avian pneumovirus in different cell lines // Avian Pathol. - 2005. - V.34. - P.123-126.

194. Pattison, M., Chettle N., Randall C.J., Wyeth P.J. Observations on swollen head syndrome in broiler and broiler breeder chickens // Vet. Rec. - 1989. - V.125. -P.229-231.

195. Pedersen, J.C., Reynolds D.L., Ali A. The sensitivity and specificity of a reverse transcription - polymerase chain reaction assay for the avian pneumovirus (Colorado strain) // Avian Dis. - 2000. - V.44. - P.681-685.

196. Peret, T.C., Boivin G., Li Y., Couillard M., Humphrey C., Osterhaus A.D., Erdman D.D., Anderson L.J. Characterization of human metapneumoviruses isolated from patients in North America //J. Infect. Dis. - 2002. - V. 185. - P. 1660-1663.

197. Picault, J.P. Drouin P. Lamande J. Syndrome infectieux de gonflement de la tete (S.I.G.T.): bilan actuel des recherches etiologiques // LAviculteur. - 1986. - L.467 -P.43.

198. Picault, J.P., Giraud P., Drouin P., Guittet M., Bennejean G., Lamande J., Toquin D.,

Gueguen C. Isolation of a TRT-like virus from chickens with swollen-head syndrome // Vet. Rec. - 1987a. - V.121. - P.135.

199. Picault, J.P. Giraud P., Drouin P. Une etiologie commune avec la rhinotracheite infectieuse de la dinde // LAviculteur. - 1987b. - L.481. - P.74.

200. Pringle, C. R. Virus taxonomy // Arch. Virol. - 1999. - V.144. - P.2065-2069.

201. Pringle, C.R. Virus taxonomy // Arch. Virol. - 1998. - V.143. - P.1449 - 1459.

202. Pringle, C.R. Pneumoviruses // Virology - A Practical Approach, Oxford, United Kingdom- 1985. - P.95-117.

203. Quingzong, Y., Barrett T., Brown T.D., Cook J.K., Green P., Skinner M.A., Cavanagh D. Protection against turkey rhinotracheitis pneumovirus (TRTV) induced by a fowlpox virus recombinant expressing the TRTV fusion protein glycoprotein // Vaccine. - 1994 - V.12. - P.569-573.

204. Randhawa, J.S., Wilson S.D., Tolley K.P., Cavanagh D., Pringle C.R., Easton A.J., Nucleotide sequence of the gene encoding the viral polymerase of avian pneumovirus // J. Gen. Virol. -1996. - V.77. - P.3047-3051.

205. Redmann, T., Zeydanli M.M., Herbst W., Kaleta E.F. Isolation of a paramyxovirus-3 from turkeys with respiratory tract disease in Germany // Dtsch. Tierarztl. Wochenschr. - 1991. - V.98. - P. 138-141.

206. Rima, B. Comparison of amino acid sequences of the major structural proteins of the paramixo- and morbilliviruses // Genetics and Pathogenicity of Negative Strand Viruses. Elsevier, Amsterdam. - 1989. - P.254-263.

207. Seal, B.S. Avian pneumoviruses and emergence of a new type in the United State of Americ // Anim. Health. Res. Rev. - 2000. - V.l. - P.67-72.

208. Seal, B.S., Sellers H.S., Meinersmann R.J.Fasion protein predicted amino acid sequence of the first U.S. avian pneumo virus isolate and lack of heterogeneity among other U.S. isolates // Virus Res. - 2000. -V.66. - P. 139-147.

209. Seal, B.S. Matrix protein gene nucleotide and predicted amino acid sequence demonstrate that the first U.S. avian pneumo virus isolate is distinct from European strains // Virus.Res. - 1998. - V.58. - P. 45-52.

210. Senne, D.A., Edson R.K, Pederson J.C. Avian pneumovirus update // Proc. 134th Ann. Conf- Schaumburg, Illinois: Am. Vet. Med. Assoc, 1997. - P. 190.

211. Shaffar, M.R. Method of stabilizing peroxidase in a serum protein based medium // Patent №US4252896 - 1981-02-24.

212. Shin, H.J., Cameron K.T., Jacobs J.A., Turpin E.A., Halvorson D.A., Goyal S.M., Nagaraja K.V., Kumar M.C., Lauer D.C., Seal B.S., Njenga M.K. Molecular epidemiology of subgroup C avian pneumoviruses isolated in the United Slates and comparison with subgroup A and B viruses // J. Clin. Microbiol. - 2002b. - V.40 -P.1687-1693.

213. Shin, H.J., Jirjis F.F., Kumar M.C., Njenga M.K., Shaw D.P., Noll S.L., Nagaraja K.V., Halvorson D.A. Neonatal avian pneumovirus infection in commercial turkeys // Avian Dis. - 2002c. - V.46. - P.239-244.

214. Shin, H.J., Nagaraja K.V., McComb B., Halvorson D.A., Jirjis F.F., Shaw D.P., Seal B.S., Njenga M.K. Isolation of avian pneumoviruses from mallard ducks that is genetically similar to viruses uses isolated from neighboring commercial turkeys // Virus Res. - 2002a. - V.83. - P.207-212.

215. Shin, H.J., Rajashekara G., Jirjis F.F., Shaw D.P., Goyal S.M., Halvorson D.A., Nagaraja K.V. Specific detection of avian pneumovirus (APV) US isolates by RT-PCR // Arch. Virol. - 2000. - V.145. - P.1239-1246.

216. Steven, Clark Comparative Genomic Hybridization Onto Dense Arrays of DNA Clones: Development and Application to Breast Cancer Genomes // California univ san Francisco.-1998,- p.8.

217. Stout, R. Catalyzed colorimetric substrates for peroxidase enzyme determinations // Patent №EP0103784.-1984-03-28.

218. Stuart, J.C., Nixey C., Grey T. C. Turkey rhinotracheitis (TRT) in Great Britain. In: Recent advances in turkey science // Poultry Science Symposium Series No. 21. Butterworths, London: United Kingdom. - 1989. - P.217-224.

219. Sun Ming. Stabilized peroxidase compositions // Patent №US4504579.-1985-03-12.

220. Tanaka, M., Kokumai N., Obi T., Higashihara R., Takuma H., Hiramatsu K., Shimizu Y. A serological survey of turkey rhinotracheitis virus infection in chickens in Japan // J. Vet. Med. Sci.-1996. - V.58. - P.689 - 691.

221. Tanaka, M., Takuma H., Kokumai N., Oishi E., Obi T., Hiramatsu K., Shimizu Y. Turkey rhinotracheitis virus isolated from broiler chicken with swollen head syndrome in Japan // J. Vet. Med. Sci. - 1995. - V.57. - P.939-941.

222. Toquin, D., Bayon-Auboyer M.H., Eteradossi N. Isolation of a pneumovirus from a Muscovy duck // Vet. Rec. - 1999. - V.145. - P.680.

223. Toquin, D., Bayon-Auboyer M.H., Serine D. A. & Eterradossi N. Lack of antigenic relationship brtween French and recent North American non -A/non-B turkey rhinotracheitis viruses// Avian Disease.- 2000,- V.44.- P.977-982.

224. Toquin, D., Eterradossi N., Guittet M. Infectious rhinotracheitis in turkeys: antigenic differences revealed by ELISA // In: M.S. McNulty; J.B. McFerran (Eds). New and Evolving Virus Diseases of Poultry, Brussels, Belgium. - 1992. - P. 111121.

225. Toquin, D., Eterradossi N., Guittet M. Infectious rhinotracheitis in turkeys: antigenic differences revealed by ELISA // New and Evolving Virus Diseases of Poultry: Proc. seminar/ Europ. Comm. - Brussels. - 1994. - P.l 11-121.

226. Toquin, D., Eterradossi N., Guittet M. Use of a related ELISA antigen for efficient TRT serological testing following live vaccination // Vet. Rec. - 1996. - V.139. -P.71-72.

227. Trager, U., Sojka B. Reagent and method for detection hydrogen peroxidases // Patent №EP0068356.-1983-01-05.

228. Voller A., Bidwell D., Bartlett A. The enzyme linked immunosorbent assay //- In: A

quide with abstracts of microplate application, London, 1979, V.l, p. 128.

229. Voller, A., Bidwell D. The enzyme linked immunosorbent assay /ELISA/ // - In: A review of recent developments with abstracts of microplate applications, London, 1980, V.2, p. 126.

230. Wada H., Kosaka Y.Composition for assaying hydrogen peroxide // Patent №DE3443415.-1986-02-27.

231. Wagner D. Amplified assay a ligand // Patent №EP174753.- 1986-03-31.

232. Wehner R., Mattersberger J. Process for stabilizing the activity of peroxidase in solution // Patent № DE3509238.-1986-09-18.

233. Weisman, Y. Strengel C., Blumenkranz R., Segal Y. Turkey rhinotracheitis (TRT) in Turkey flocks in Israel-virus isolation and serological response // Proc. 37th Western Poultry Dis. Conf. Davis, California, 1988. - P.67-69.

234. Wilding, G.P., Baxter-Jones C., Grant M. Ciliostatic agent found in rhinotracheitis //

Vet. Rec. - 1986. - V.l 18. - P.735.

235. Williams, R.A., Savage C.E., Jones R.C. Development of a live attenuated vaccine against turkey rhinotracheitis // Avian Pathol. - 1991. - V.20. - P.45-55.

236. Wyeth, P.J., Gough R.E.,. Chettle N.J, Eddy R. Preliminary observation on a virus associated with turkey rhinotracheitis // Vet.Rec. - 1986. - V.l 19 - P. 139.

237. Wyeth P.J., Chettle N.J., Gough R.E., Collins M.S. Antibodies to TRT in chickens with swollen head syndrome //Vet.Rec. - 1987. - V.21. - P.286-287.

238. Yu, Q., Davis P.J., Brown T.D., Cavanagh D. Sequence and in vitro expression of the M2 gene of turkey rhinotracheitis pneumovirus // J.of Gen. Virol. -1992. - V.73. -P. 1355-1363.