Экологические аспекты существования популяций пробиотических штаммов бактерий: электронная и модуляционная интерференционная микроскопия тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.02.05, кандидат наук Арсенюк, Анна Юрьевна

• Арсенюк, Анна Юрьевна
• кандидат наук
• 2017

Оглавление диссертации кандидат наук Арсенюк, Анна Юрьевна

СОДЕРЖАНИЕ

стр.

ВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Экологические аспекты существования бактериальных популяций

1.2 Пробиотики - препараты на основе микроорганизмов

1.3 Спорообразующие сапрофитные бактерии рода Bacillus

ГЛАВА 2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Материалы и методы

2.2 Результаты собственных исследований

2.2.1 Исследование морфологии популяций Bacillus subtilis

2.2.2 Исследование морфологии популяций Lactobacillus acidophilus NK-1, Lactobacillus plantarum 8P-A3

2.2.3 Исследование морфологии популяций Bifidobacterium longum 379-ИН, Bifidobacterium bifidum 791-ИН

2.2.4 Экспериментальное электронно-микроскопическое исследование взаимодействия Bacillus subtilis с популяциями пробиотических штаммов

Lactobacillus и Bifidobacterium

2.2.5. Электронно-микроскопическое исследование влияния биологически активных веществ Bacillus subtilis на морфологию популяций Salmonella

typhimurium

2.2.6 Исследование морфологии стабильных и нестабильных L-форм Salmonella typhimurium методом модуляционной интерференционной

микроскопии

ГЛАВА 3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЯ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Экологические аспекты существования популяций пробиотических штаммов бактерий: электронная и модуляционная интерференционная микроскопия»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. В настоящее время постоянное ухудшение экологической обстановки вследствие загрязнения окружающей среды негативно влияет на микроэкологический баланс внутренней среды организма, что приводит к дисбиозам и способствует накоплению патогенных и условно-патогенных микроорганизмов. Одной из важнейших проблем современной медицины и ветеринарии является широкое распространение множественной лекарственной резистентности возбудителей инфекционных заболеваний и увеличение темпов ее роста. Учитывая социальную значимость проблем, очевидна необходимость разработки и внедрения альтернативных способов лечения и профилактики бактериальных инфекций. Все большее внимание специалистов уделяется пробиотикам - препаратам на основе микроорганизмов и их метаболитов, что подтверждено распоряжением Правительства Российской Федерации «О концепции долгосрочного социально-экономического развития Российской Федерации на период до 2020 года» № 1662-р от 17.11. 2008, в котором одной из актуальных задач поставлено создание высокотехнологичных производств по выпуску конкурентоспособных пробиотических препаратов.

Эффективность пробиотиков определяется совокупностью биологических свойств штаммов, что обусловливает широкий спектр применения. Традиционно их используют для восстановления нормальной микрофлоры при дисбиотических состояниях различной этиологии, лечения и профилактики желудочно-кишечных заболеваний инфекционной природы в острой и хронической форме, а также с целью иммунностимуляции и регуляции обменных процессов в организме. Многолетний опыт применения в мировой практике доказал эффективность и экологическую безопасность пробиотиков. Вырабатываемые бактериями биологически активные вещества включаются в общую систему биохимических процессов в организме и обеспечивают их коррекцию (Пирузян Л.А., Михайловский Е.М., 1992;

Феклисова Л.В., Полевой С.В., Ушакова А.Ю., 2002; Бондаренко В.М., Грачева Н.М., 2005; Калмыкова А.И., 2007; Мазанкова Л.Н., Рыбальченко О.В., Корниенко Е.А., 2016; Воронин Е.С., Шахов А.Г., 1999; Бакулина Л.Ф., Тимофеев И.В., Перминова Н.Г., 2001; Данилевская Н.В., 2005; Панин А.Н., Малик Н.И., 2006; Неустроев М.П., Тарабукина Н.П., Федорова М.П., 2010).

Возрастающий интерес к использованию биопрепаратов на основе микроорганизмов и продуцируемых ими биологически активных веществ требует углубленного изучения экологических аспектов существования пробиотических штаммов. Наибольшую значимость представляют структуры и функции, отсутствующие у отдельной клетки и реализуемые исключительно на уровне всей популяции. В этой связи очевидна необходимость расширения знаний о морфологических особенностях популяций, в том числе при взаимодействии в многовидовых ассоциациях с сохранением естественной архитектоники колоний исследуемых штаммов.

Степень разработанности темы. В последнее годы специалисты разного научно-практического профиля активно занимаются разработкой и внедрением в практику пробиотических препаратов. Усилия учёных направлены на выделение и изучение биологических свойств микроорганизмов, повышение их активности за счет рациональной комбинации входящих в состав препарата про- и пребиотических компонентов, создание рекомбинантных (генно-инженерных) штаммов с заданными свойствами, а также на совершенствование технологии получения готовых препаратов (Лянная А.М., Гончарова Г.И., Высоцкий В.В., 1979; Сорокулова И.Б., 1999; Осипова И.Г., 2006; Амерханова А.М., 2009; Алешкин В.А, 2011; Субботин В.В., 1999; Малик Н.И., 2002).

Большинство публикаций, посвященных пробиотикам, касается опыта их применения в практике лечения и профилактики, и лишь в некоторых случаях приводятся данные об экологических аспектах существования входящих в состав пробиотических штаммов микроорганизмов

(Рыбальченко О.В., 2003, 2006, 2014; Глушанова Н.А., Шендеров Б.А., 2005; Петров Л.Н., Бондаренко В.М., Вахитов Т.Я. и др., 2006; Павлова И.Б., Банникова Д.А., Кононенко А.Б., Комбарова С.Ю., 2013; Бухарин О.В., 2015; Лахтин М.В., Лахтин В.М., Афанасьев С.С. и др., 2016).

Актуальным направлением является дальнейшее исследование на популяционном уровне морфологических особенностей строения, закономерностей развития и взаимодействия бактерий с применением микроскопов высокой разрешающей способности.

Цель и задачи исследований. Целью данной работы явилось изучение экологических аспектов существования популяций пробиотических штаммов бактерий.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

• Изучить закономерности развития и морфологические особенности популяций пробиотических штаммов бактерий Bacillus subtilis ТНП-3, ТНП-5, Lactobacillus acidophilus NK-1, Lactobacillus plantarum 8P-A3, Bifidobacterium bifidum 791-ИН, Bifidobacterium longum 379-ИН методами световой и сканирующей электронной микроскопии.

• Исследовать активность биологически активных веществ Bacillus subtilis в отношении представителей индигенной микрофлоры кишечника (Lactobacillus acidophilus NK-1, Lactobacillus plantarum 8P-A3, Bifidobacterium bifidum 791-ИН, Bifidobacterium longum 379-ИН).

• Изучить выживаемость и провести электронно-микроскопическое исследование морфологии популяций Salmonella typhimurium под действием биологически активных веществ Bacillus subtilis.

• Разработать методику исследования морфологических особенностей внутренних структур патогенных бактерий.

• Изучить морфологию стабильных и нестабильных L-форм Salmonella typhimurium с использованием модуляционной интерференционной микроскопии.

Научная новизна. На основании экспериментальных исследований с сохранением естественной архитектоники колоний и применением сканирующей электронной микроскопии установлены особенности развития и морфология популяций пробиотических штаммов бактерий: Bacillus subtilis, Lactobacillus acidophilus NK-1, Lactobacillus plantarum 8P-A3, Bifidobacterium bifidum 791-ИН, Bifidobacterium longum 379-ИН.

С применением разработанной методики для модуляционной интерференционной микроскопии выявлены различия в морфологии L-форм S. typhimurium размером 0,2-0,5 мкм, обусловливающие их жизнеспособность. В работе изложены и подкреплены фактическим материалом сведения, что нестабильные L-формы имеют вид шара, в котором находится скрученная структура ДНК, занимающая весь объем клетки, в то время как у уплощенных стабильных L-форм нарушение структуры ДНК свидетельствовало о невозможности их реверсии в исходное состояние. В результате статистической обработки количество нестабильных L-форм не превышало 25% исследуемых клеток.

Практическая значимость работы. Экспериментальные исследования экологических аспектов существования и взаимодействия популяций микроорганизмов способствуют научному обоснованию для применения пробиотических препаратов.

На основании проведенных исследований разработаны и утверждены председателем методической комиссии «Ветеринарная санитария, гигиена и экология» секции зоотехнии и ветеринарии отделения сельскохозяйственных наук РАН Смирновым А.М. 03.10.2016 г. «Методические рекомендации по изучению морфологии стабильных и нестабильных L-форм патогенных бактерий методом модуляционной интерференционной микроскопии».

Методология и методы исследований. Применение оригинальных микробиологических методик и щадящих способов пробоподготовки препаратов позволяют выявлять структуру колоний без нарушения естественной архитектоники исследуемых штаммов.

Для реализации поставленных задач применяли разработанные в лаборатории санитарной микробиологии ФГБНУ «ВНИИВСГЭ» методы исследования бактериальных популяций. В частности, для изучения морфологических особенностей популяций в процессе естественного роста использован метод выращивания бактериальных культур на поверхности мембранных фильтров, помещенных на плотные питательные среды.

Для исследования активности биологически активных веществ (БАВ), продуцируемых в вегетативной фазе роста B.subtilis, использован метод, основанный на способности БАВ диффундировать через поры мембранных фильтров в слой питательной среды, на поверхность которой в дальнейшем накладывали новый стерильный фильтр и высевали исследуемые культуры. Методика позволяет непосредственно изучать действие биологически активных веществ пробиотических штаммов на популяции микроорганизмов в сканирующем электронном микроскопе.

Разработана методика пробоподготовки препаратов для исследования в модуляционном интерференционном микроскопе, позволившая зафиксировать подвижные бактерии за счет вязкости используемых веществ и проводить прижизненные исследования морфологии с детализацией их внутренней структуры.

Положения, выносимые на защиту:

• Морфологические особенности популяций пробиотических штаммов бактерий: Bacillus subtilis ТНП-3, ТНП-5, Lactobacillus acidophilus NK-1, Lactobacillus plantarum 8P-A3, Bifidobacterium bifidum 791-ИН, Bifidobacterium longum 379-ИН на основе результатов сканирующей электронной микроскопии.

• Раскрытие механизма действия биологически активных веществ, продуцируемых Bacillus subtilis, на популяцию Salmonella typhimurium на основе данных, полученных с использованием сканирующей электронной микроскопии.

• Особенности морфологии стабильных и нестабильных L-форм S.typhimurium, выявленные с применением модуляционной интерференционной микроскопии.

Степень достоверности и апробация работы. Результаты исследований получены на сертифицированном оборудовании с использованием современных методик обработки информации.

Основные положения научных исследований доложены:

• на ежегодных заседаниях ученого совета ВНИИВСГЭ;

• XVIII Международной Пущинской школе-конференции молодых ученых «Биология - наука XXI века» (Пущино, 2014);

• IX Международной научно-практической конференции «Научные проблемы обеспечения ветеринарно-санитарного благополучия животноводства и пути их решения» (Москва, 2014);

• IX Международной научно-практической конференции «Обеспечение качества и безопасности продуктов животного происхождения» (Москва, 2014);

• VIII Российской научной конференции с международным участием «Персистенция и симбиоз микроорганизмов» (Оренбург, 2015);

• ежегодном Конгрессе с международным участием «Контроль и профилактика инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи (ИСМП-2016)» (Москва, 2016).

Личный вклад соискателя состоит в непосредственном выполнении всех этапов экспериментов и обобщении результатов исследований, в апробации на конференциях разного уровня, а также в подготовке публикаций по выполненной работе.

Публикации. Основное содержание диссертации и результаты исследований изложены в 6 научных работах, в том числе в 3 статьях, опубликованных в журналах, входящих в перечень рецензируемых научных изданий, рекомендованных Высшей аттестационной комиссией при Министерстве образования и науки Российской Федерации.

Объём и структура диссертации. Работа изложена на 116 листах машинописного текста, содержит 3 таблицы, 39 рисунков и 8 приложений. Диссертация состоит из: введения; обзора литературы; собственных исследований; обсуждения полученных результатов; заключения; списка литературы, включающего 179 источников (отечественных авторов - 149; зарубежных авторов - 30). Диссертация представляет собой самостоятельно выполненную законченную работу.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1.1. Экологические аспекты существования бактериальных популяций

Экология бактерий является одним из фундаментальных разделов биологии, которая изучает взаимодействие микроорганизмов с окружающей средой, что обусловливает особенности их существования. Как известно, основоположником экологической бактериологии был С.Н. Виноградский, который создал учение о роли отдельных групп микроорганизмов в природных экосистемах и участии бактериальных сообществ в циклах биологической трансформации веществ. В современных условиях очевидна необходимость изучения бактерий с широких биологических позиций в условиях их естественного существования.

Как самостоятельная дисциплина электронная микроскопия зародилась в 50-х годах прошлого столетия и к концу 60-х годов прочно заняла свое место в ряду других направлений микробиологии. Первым важным этапом было исследование ультраструктурной организации бактерий, что позволило дифференцировать структуры, выполняющие жизненно важные функции, а также изучить механизм действия антибактериальных веществ (Авакян А.А, Кац Л.Н., Павлова И.Б., 1972; Куликовский А.В, 1979). Однако просвечивающая электронная микроскопия в результате жесткой обработки при подготовке препаратов не давала возможности изучить естественную архитектонику бактерий в популяциях. Разработка и внедрение методических подходов к изучению морфологии популяций патогенных и условно -патогенных микроорганизмов позволили в ходе многочисленных исследований установить закономерности их развития в окружающей среде (Павлова И.Б., Ленченко Е.М., Банникова Д.А., 2007; Павлова И.Б., Банникова Д.А., Кононенко А.Б., 2013).

Полноценная реализация потенциальных возможностей микроорганизмов осуществляется формированием многоклеточных сообществ - биопленок, состоящих из морфологически и функционально дифференцируемых бактерий. Для каждого вида характерны свои

особенности роста и развития, однако процесс формирования бактериальных биопленок имеет общие закономерности (Павлова И.Б., Ленченко Е.М., Банникова Д.А., 2007; Ильина Т.С., Романова Ю.М., Гинцбург А.Л., 2004; Николаев Ю.А., Плакунов В.К., 2007; Смирнова Т.А., 2010; Гостев С.В., 2010)

Адгезия — первичный контакт бактерии с объектом окружающей среды, без которого не может осуществляться дальнейшее развитие бактериальной популяции. Прикрепление бактерий к поверхности субстрата происходит посредством неспецифических физико-химических взаимодействий (электростатические, гидрофобные, силы Ван-дер-Ваальса) между молекулами и структурами на поверхности бактериальной клетки и объектом окружающей среды. Однако первичный контакт с твердой поверхностью не предполагает закрепления на ней бактерий и представляет собой обратимый процесс, так как установившаяся связь недостаточно прочна. Специфическая адгезия к биологическим поверхностям происходит посредством молекулярных взаимодействий бактериальных адгезинов с клеточными рецепторами. Основу таких взаимодействий составляет пространственная совместимость взаимодействующих структур (Езепчук Ю.В., 1977; Зуев В.С., 2004; Коротяев А.И., 2002; Лахтин В.М., Алешкин В.А., Лахтин М.В., 2006; Klemm.P., 2010; Гостев В.В., Сидоренко С.В, 2010).

Переход к фиксированному состоянию зависит от секреции экзополисахаридов, с которым связано образование межклеточного матрикса. Благодаря адгезии бактерии могут прикрепляться к любой поверхности, однако колонизация будет происходить лишь при наличии необходимых для развития условий и питательных веществ.

После адгезии микроколония активно растет за счет деления клеток, что сопровождается продукцией межклеточного матрикса - синтезируемого клеточной стенкой бактерий внеклеточного полимерного вещества (extracellular polymeric substance) (Маянский А.Н., Чеботарь И.В, 2012).

Матрикс у различных видов бактерий различается по физическим свойствам и химическому составу в зависимости от строения клеточной стенки, но, как правило, его основными компонентами являются кислые полисахариды, гликозилфосфатсодержащие полимеры типа тейховых кислот, реже -гликопротеины. (Ботвинко И.В., 1985, Hall-Stoodley L., Costerton J.W. Stoodley P., 2004). Степень развития межклеточного матрикса обусловливает формирование на поверхности колоний покровов - биопленок (Павлова И.Б., 1999).

Установлено, что межклеточный матрикс формируется, и по нему распространяются сигнальные вещества как химической, так и волновой природы. Благодаря этому популяция может функционировать как единая многоклеточная система, в которой осуществляется взаимодействие составляющих ее элементов. В научной литературе много данных о так называемой кворум-зависимой системе («чувство кворума», «Quorum-sensing», «QS») - процесса коллективной координации экспрессии генов, регулирующей поведение всего микробного сообщества (ГинцбургА.Л., Ильина Т.С., Романова Ю.М., 2003). В основе лежит возрастание концентрации секретируемых веществ в зависимости от плотности клеточной культуры. Бактерии образуют специализированные химические сигнальные молекулы (аутоиндукторы), и когда эти вещества достигают высокой концентрации при определенной плотности популяции, бактерии предпринимают те или иные коллективные действия. Например, морские бактерии Vibrio fisheri и Vibrio harveyi, у которых это явление впервые описано, начинают светиться (Олескин А.В., Ботвинко Е.А., Цавкелова Е.А., 2000). Эту систему можно сравнить с гормональной регуляцией функционирования органов и тканей в многоклеточном микроорганизме (Гостев В.В, Сидоренко С.В., 2010; Fuqua W.C., Winans S.C., Greenberg E.P., 1998; Miller M.B., Bassler B.L., 2001; Rasmussen T.B., Givskov M., 2006).

QS-системы включают в себя два обязательных компонента -низкомолекулярный регулятор, способный проникать через клеточную мембрану, и взаимодействующий с ним рецепторный белок. Полученный комплекс связывается с промоторными областями генов/оперонов, что приводит к активации экспрессии определенных генов. (Завильгельский Г.Б, Манухов И.В., 2001; Хмель И.А, 2006; Петров Л.Н., Бондаренко В.М., Вахитов Т.Я. и др., 2006). QS-системы играют ключевую роль в регуляции самых разных процессов, протекающих в бактериальной популяции: синтезе определенных компонентов межклеточного матрикса и этапах формирования биопленки, а также во взаимодействии с высшими организмами. (Гостев В.В., Сидоренко С.В., 2010). Кроме того, рядом работ, в том числе Люка Монтанье (Montagnier L., Ai'ssa, J., Ferris, S. 2009), показана возможность передачи информации между бактериями посредством электромагнитных или ультразвуковых волн, а также взаимооусиливающее действие разных каналов межклеточной коммуникации (Олескин А.В., 2009; Николаев Ю.А., 1992).

Обволакивающий бактерии матрикс выступает как буферная среда колонии и покров на ее поверхности, предохраняя отдельные клетки и популяцию в целом от действия неблагоприятных факторов внешней среды: физической, химической и биологической природы. Матрикс прикрывает антигенные участки поверхности бактериальных клеток, делая их неуязвимыми для распознавания антителами и Т-лимфоцитами (Чеботарь И.В., Маянский А.Н., Кончакова Е.Д. и др., 2012). В дальнейшем, в зависимости от степени развития межклеточного матрикса, формируются зрелые биопленки, и бактерии приобретают устойчивость не только к иммунной системе хозяина, но и к действию антимикробных препаратов, что создает трудности лечения инфекционных заболеваний и является одной из основных проблем современной медицины.

Установлено, что концентрации антибиотиков, необходимые для бактерицидного эффекта в отношении патогенных микроорганизмов, структурированных в биопленки, может быть в 10-100 раз больше, чем для единичных (планктонных) форм, что не может быть достигнуто в организме при введении препаратов в стандартных терапевтических дозировках (Чеботарь И.В., Маянский А.Н., Кончалова Е.Д., 2012). Это обусловлено совокупностью механизмов, в первую очередь, ограниченным проникновением антимикробных веществ в глубокие слои биопленки за счет препятствия процессу их диффузии. Это объясняет, почему некоторые антибиотики не проникают в биопленки, а только препятствуют их распространению в организме (Бехало В.А., Бондаренко В.М., Сысолятина Е.В. и др., 2010; Costerton J. W., Stewart P.S., Greenberg E.P., 1999).

Кроме того, бактерии подвергаются естественным стрессорным воздействиям - главным образом из-за дефицита питательных веществ и кислорода. В результате, в составе зрелой биопленки, помимо активно функционирующих бактерий, возникают измененные формы со сниженным уровнем метаболизма - так называемые персистеры (Льюис К., 2005), вследствие чего остается меньше мишеней для действия антибактериальных веществ, влияющих на отдельные звенья биосинтеза клеточной стенки, что необходимо учитывать (Хмель И.А, 2005; Смирнова Т.А., Диденко Л.В., Азизбекян Р.Р. и др., 2010; Павлова И.Б., Толмачева Г.С., Ленченко Е.М., 2016).

Важным аспектом лекарственной устойчивости бактерий в составе биопленок является экспрессия генов антибиотикорезистентности. Горизонтальной передаче подвержены гены резистентности к токсичным веществам, гены патогенности, гены, определяющие продукцию тех или иных компонентов межклеточного матрикса. Обмен плазмидами возможен не только в составе монокультуры, но и между различными видами и даже родами микроорганизмов, т.е. у бактерий передача генетического материала

возможна не только вертикально, как у эукариот, но и горизонтально, когда некоторые гены могут быть перенесены представителям других видов и даже родов. Близость бактерий в многовидовых биопленках существенно упрощает этот процесс.

Таким образом, повышенная устойчивость бактерий в составе биопленок обусловлена тремя факторами: способностью межклеточного матрикса препятствовать диффузии и инактивировать антибактериальные вещества; генетическими механизмами, основанными на плазмидном переносе генов антибиотикорезистентности и появлением измененных форм.

Понимание механизма устойчивости патогенных бактерий тесно связано со знаниями природы их адаптации. При всем многообразии терминов, неизменным остается появление у бактерий новых биологических характеристик (свойств), способствующих их выживанию в среде обитания.

Установлено, что в ответ на воздействие неблагоприятных факторов внешней среды закономерным процессом является переход бактериальной популяции в состояние гетероморфизма с различными проявлениями L-трансформации, включая образование клеток сферопластного и протопластного типов разного размера и конфигурации, а также мелких L-форм, полностью лишенных клеточных стенок (Гамалея Н.О, 1894; Пешков М.А, 1955; Тимаков В.Д, Каган Г.Я., 1973; Прозоровский С.В, Кац Л.Н, Каган Г.Я, 1981; Литвин В.Ю., Гинцбург А.Л., Пушкарева В.И. и др. 1998). Явление L-трансформации представляет собой естественный цикл развития бактериальной популяции, поскольку обнаруживается при ее развитии (Павлова И.Б., Ленченко Е.М., Банникова Д.А., 2007; Павлова И.Б., Банникова Д.А., Кононенко А.Б., 2013; Блинкова Л.П., Пахомов Ю.Д., Стоянова Л.Г., 2010).

Термин «гетероморфизм» впервые предложен Н.Ф. Гамалея для описания разнообразных форм холерного вибриона, образующихся под действием солей лития. Первые сообщения о L-формах были опубликованы E.Klieneberger (1935). Работая в Листеровском институте в Англии, она обнаружила морфологически необычные клетки в культуре стрептококка, выделенного из суставной жидкости.

Обнаруженное R. Colwell 1984 году у грамотрицательных бактерий состояние покоя было предложено называть «некультивируемым состоянием» (НС), а сами бактерии в этом состоянии получили название «некультивируемые формы» (НФ). В научной литературе также используется термин «жизнеспособные, но некультивируемые» («viable but non-culturable», «VBNC»), объединяющий такое свойство бактерий, как неспособность расти в данное время и при данных условиях на свойственных им питательных средах, но не утративших своей жизнеспособности (Kell B.D., Young M., 2010; Пахомов Ю.Д., Блинкова Л.П., Стоянова Л.Г., 2010). Однако морфологическую картину этого явления наиболее точно отображает термин «гетероморфизм».

Процессы адаптации сопровождаются изменением морфологии и физиологии бактерий. Начальным этапом гетероморфизма является образование удлиненных нитевидных форм, что является следствием нарушения процесса нормального бинарного деления при сохранении роста. (Пешков М.А., 1955). В последующем, популяция характеризуется появлением атипичных форм с различной степенью дефектности клеточной стенки, описанной на ультраструктурном уровне для многих бактерий (Прозоровский С.В., Кац Л.Н., Каган Г.Я., 1981).

Сферопласты характеризуются частичным разрушением клеточной стенки. Механизм образования сферопластов у грамположительных и грамотрицательных бактерий различен, что объясняется различиями в структуре клеточных стенок этих бактерий. Так, у грамотрицательных бактерий при образовании сферопластов сохраняется пластичный слой

клеточной стенки, но отсутствует ригидный слой - пептидогликан, в результате чего наружняя мембрана клеточной стенки отходит от цитоплазматической мембраны. Периплазматическое пространство неравномерно расширяется и возникает вздутие, куда переходит все содержимое клетки, что приводит к образованию овальных или шаровидных клеток, объем которых превышает исходные в 3-5 раз. Для грамположительных бактерий вследствие их строения более характерно образование протопластов - бактериальных форм различного размера, полностью лишенных клеточных стенок. Следующим этапом Ь-трансформации является образование мелких округлых Ь-форм размером 0,2-0,5 мкм, также лишенных клеточных стенок.

Существенно важной биологической особенностью гетероморфных форм является их способность длительно сохранять свою жизнеспособность и реверсировать при устранении факторов, вызвавших их образование. Нестабильные Ь-формы представляют собой клетки, утратившие свойства типичных бактерий и изменившие свои морфологические и физиологические характеристики, но сохранившие геном и, при благоприятных условиях, способные к реверсии в исходную бактериальную форму за счет саморегулирующейся системы, необходимой для построения новой клеточной стенки. Стабильные Ь-формы — это клетки, потерявшие способность к реверсии в исходное состояние.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Арсенюк, Анна Юрьевна, 2017 год

Список литературы

1. Авакян А.А. Атлас анатомии бактерий, патогенных для человека и животных / А.А.Авакян, Л.Н.Кац, И.Б.Павлова // М.:Медицина, 1972. -182с.

2. Алешкин В.А. Становление пробиотикотерапии в России / В.А. Алешкин, С.С. Афанасьев, В.В. Поспелова, А.А. Воробьев, Л.В. Феклисова, Ю.В. Несвижский, А.М. Амерханова, Л.В. Пожалостина, Е.А. Воропаева, М.С. Афанасьев, В.Ю. Давыдкин, В.М. Лахтин, И.Ю. Давыдкин // Вестник Российской АМН. - 2005. - №12. - С.3-12.

3. Алешкин В.А. Поликомпонентные пробиотические препараты -конструирование, производство и стратегия их продвижения на российском фармацевтическом рынке: дис. доктора биол. наук. -Москва, 2011. - 297с.

4. Амерханова А.М. Научно-производственная разработка новых препаратов-синбиотиков и клинико-лабораторная оценка их эффективности: дис. доктора биол. наук. - Москва, 2009. - 280с.

5. Арсенюк А.Ю., Павлова И.Б., Игнатьев П.С. Исследование процесса L-трансформации в популяции сальмонелл методами электронной и лазерной интерференционной микроскопии // Сельскохозяйственная биология. - 2013. - № 6.

6. Бакулина Л.Ф. Пробиотики на основе спорообразующих микроорганизмов рода Bacillus и их использование в ветеринарии / Л.Ф.Бакулина, И.В.Тимофеев, Н.Г.Перминова, А.Ф.Полушкина, Н.И.Печоркина // Биотехнология. - 2001. - №2. - С.48-56.

7. Бехало В.А. Иммуннобиологические особенности бактериальных клеток медицинских биопленок / В.А. Бехало, В.М. Бондаренко, Е.В. Сысолятина, Е.В. Нагурская // ЖМЭИ. - 2010. - №4. С. 97-105.

8. Блинкова Л.П. Свойства некультивируемых и покоящихся форм микроорганизмов / Л.П.Блинкова, Ю.Д.Пахомов, Л.Г.Стоянова // Иммунопатология, аллергология, инфектология. - 2010. - №3. - с.67-76.

9. Ботвинко И.В. Экзополисахариды бактерий // Успехи микробиологии. -1985. - Т.20. - С.79-122.

10. Бондаренко В.М. Дисбиотические состояния и лечебные мероприятия при них / В.М. Бондаренко, Н.М. Грачева // Вестник Российской АМН. -2005. - №12. - С.24-29.

11. Бондаренко В.М. Оценка микробиты и пробиотических штаммов с позиции новых научных технологий / В.М.Бондаренко, О.В.Рыбальченко // Фарматека. - 2016. - №11(324). - С.21-33.

12. Бухарин О.В. Инфекционная симбиология // Журн. микробиол. - 2015. -№4. - С.4-9.

13. Бухарин О.В. Механизмы персистенции бактериальных патогенов // Вестник Российской АН. -2000. -№2. -С.43-48.

14. Быков А.С. Атлас по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии / А.С.Быков, А.А.Воробьев, В.В.Зверев, Е.П.Пашков, А.В.Караулов, С.А.Быков, М.Я.Корн. - 2-е изд. -М.: ООО «Медицинское информационное агенство», 2008. - 272с.

15. Волков М.Ю. Метаболиты Bacillus как новые перспективные пробиотические препараты / М.Ю.Волков, Е.И.Ткаченко, Е.В.Воробейников, А.В.Синица // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. - 2007. - №2. - С.75-80.

16. Воробьев А.А. Исследование пристеночной микрофлоры желудочно-кишечного тракта у человека в норме и при патологии / А.А.Воробьев, Ю.В.Несвижский, Е.М.Липницкий, М.Н.Алленов, Е.А.Богданова, М.Л.Корнеев // Вестник РАМН. - 2004. - №2. - С. 43-47.

17. Воронин Е.С. Современная концепция этиологии, профилактики и лечения болезней молодняка сельскохозяйственных животных / Е.С.Воронин, А.Г.Шахов // Мат. науч. Сессии Россельхозакадемии. Т. №1. - М.: Россельхозакадемия, 1999. - С. 209-214.

18. Высоцкий В.В. Полиморфизма как закономерность развития популяций прокариотных организмов / В.В.Высоцкий, П.Л.Заславская, А.В.Машкова, О.И.Баулина // Биологические науки. - 1991. -№12. - С.5-17.

19. Высоцкий В.В. Поли(гетеро)морфные формы патогенных бактерий в инфекционной патологии / В.В.Высоцкий, Г.А.Котлярова // Журн. микробиол. - 1999. - №2. - С.100-104

20. Гамалеи Н.О. Гетероморфизм бактерий под влиянием солей лития / Н.О.Гамалеи // Врачъ. - 1894. - №20. - С.541-579

21. Глушанова Н.А. Взаимоотношения пробиотических и индигенных лактобацилл хозяина в условиях совместного культивирования in vitro / Н.А. Глушанова, Б.А.Шендеров // Журн. микробиол. 2005. - №2. - С.75-79.

22. Гинцбург А.Л. «Quorum sensing» или социальное поведение бактерий /

A.Л. Гинцбург, Т.С. Ильина, Ю.М. Романова // ЖМЭИ. - 2003. - №5. -С.86-93.

23. Гоголев Ю.В. Выявление и характеристика некультивируемых форм Erwinia carotovora в длительно инкубируемых культурах / Ю.В.Гоголев,

B.Ю.Горшков, О.Е.Петрова // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. - 2009. - №4. - С.77-80

24. Гончарова Г.И., Дорофейчук В.Г., Смолянская А.З., Соколова К.Я. Микробная экология кишечника в норме и при патологии // Антибиотики и химиотерапия. - 1989. - 34, № 6. - С. 462-466.

25. Гостев В.В. Бактериальные биопленки и инфекции / В.В. Гостев, С.В. Сидоренко // Журн. инфектологии. - 2010. - том 2. - №3. - С.4-15.

26. Гостева В.В. Взаимодействие бактерий, вирусов и эукариотических клеток в условиях смешанной инфекции (электронно-микроскопическое исследование) // Дис.. ..канд. биол. наук. М., 1984.

27. Громов Б.В. Экология бактерий: Учеб. Пособие / Б.В.Громов, Г.П.Павленко. - Л.: Издательство Ленинградского университета, 1989. -248.

28. Данилевская Н. В. Фармакологические аспекты применения пробиотиков / Н.В. Данилевская // Ветеринария. - 2005. - № 11. - С. 6-9.

29. Давыдов Д.С. Экспериметальное обоснование клинического применения споробактерина в кардиохирургии: дис....канд. биол. наук: 03.00.03 / Давыдов Дмитрий Сергеевич. - М., 2010

30. Диденко Л.В. Ультраструктурная организация клеток Salmonella typhimurium при длительном голодании и переходе в некультивируемое состояние / Л.В. Диденко, Н.Д. Константинова, Ю.М. Романова, Н.В. Алексеева, С.Г. Андреевская, А.Л. Гинцбург // Молекулярная генетика, микробиология, вирусология. - 2000. - №3. - С.21-25.

31. Дуктов А.П. Биополимеры, иммуностимуляторы и пробиотики в бройлерном птицеводстве: монография / А.П. Дуктов, П.А. Красочко, И.С. Серяков, В.И. Еремец, Л. А. Неминущая, А. В.Проворотова // Министерство сельского хозяйства и продовольствия Республики Беларусь, Главное управление образования, науки и кадров, Учреждение образования «Белорусская государственная сельскохозяйственная академия». - Горки: БГСХА, 2016. - 289 с.

32. Езепчук Ю.В. Биомолекулярные основы патогенности бактерий / Ю.В.Езепчук. - М.:Наука, 1977. - 215 с.

33. Елинов Н.П. Общие закономерности строения и развития микробов-продуцентов биологически активных веществ / Н.П.Елинов . -Л.:Медицина, 1977. - 288 с.

34. Емельяненко П.А. Наставление по применению комплексных препаратов-пробиотиков для повышения качества пушнины. / Емельяненко П.А., Козловский Ю.Е., Плугина И.В. и др. // МО. - 2005.

35. Жиленкова О.Г. Селекция производственно-перспективных штаммов бифидобактерий, выделенных от детей: дис....канд. биол. наук: 03.02.03, 03.01.06 / Жиленкова Ольга Генадиевна. - М., 2011.

36. Жирков А.Д. Фунгицидная активность штаммов бактерий Bacillus subtilis по отношению к токсигенным и плесневым грибам / А.Д. Жирков, С.С. Татаринова, Н.П. Тарабукина, М.П. Неустроев // Аграрный вестник Урала. - 2013. - №7 (113). - С.20-21.

37. Завильгельский Г.Б. «Quorum sensing» или как бактерии «разговаривают» друг с другом / Г.Б. Завильгельский, И.В. Манухов // Молекулярная биология. - 2001. - том 35. - №2. - с. 268-275.

38. Запруднов А.М. Микробная флора кишечника и пробиотики (Б-ка практ. Врача / Актуальные проблемы современной медицины) / А.М. Запруднов, Л.Н. Мазанкова. - М., 2001.

39. Зуев В.С. Факторы выживания популяций сальмонелл в водной среде и их взаимоотношения с некоторыми микробионтами: электронно-микроскопическое исследование: дис....канд. биол. наук: 16.00.06 / Зуев Вячеслав Сергеевич. - М., 2004.

40. Иерусалимский П.Д. Физиология развития чистых бактериальных культур: дис.д-ра .биол. наук., М.: Институт микробиологии АН СССР, 1952.

41. Иванова А.Б. Перспективы применения бактериальных препаратов и пробиотиков в рыбоводстве / А.Б.Иванова, Б.Г.Сариев, Г.А.Ноздрин, И.В.Морузи, Ю.С.Аликин // Вестник новосибирского государственного аграрного университета. - 2012. - Т.2. - №23-2. - С.58-61.

42. Игнатьев П.С. Лазерная интерференционная микроскопия морфологии и динамики биологических объектов в реальном времени: дис....канд. физ.-мат. наук: 01.04.21 / Игнатьев Павел Сергеевич. - М., 2011.

43. Игнатьев П.С., Арсенюк А.Ю., Индукаев К.В., Павлова И.Б, Воронин Д.А., Осипов П.А. Микроскопия как новый инструмент исследования процессов l-трансформации патогенных бактерий // Инфекция и иммунитет. Материалы международной конференции «Молекулярная эпидемиология актуальных инфекций». -2013. -Том 3. -№2.

44. Ильина Т.С. Биопленки как способ существований бактерий в окружающей среде и организме хозяина: феномен, генетический контроль и системы регуляции их развития / Т.С. Ильина, Ю.М. Романова, А.Л. Гинцбург // Генетика. - 2004. - том 40. - №11. - С.1445-1456.

45. Калмыклова А.И. Клеточные и системные механизмы действия пробиотиков. Эффективность применения жидких пробиотиков в комплексной терапии дисбиотических нарушений / А.И. Калмыкова [и д.р.] - Новосибирск, 2007. - 280с.

46. Кононенко А.Б. Мониторинг устойчивости условно-патогенных и патогенных энтеробактерий к дезинфецирующим средствам / А.Б.Кононенко, Д.А.Банникова, С.В.Бритова, Е.П.Савинова, Д.Н.Набиуллина // Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии. - 2016. - №4(20). -С.22-29.

47. Куликовский А.В. Эмерджентные пищевые зоонозы / А.В. Куликовский. - М.: Крафт+, 2004. - 176с.

48. Козырева В.К. Клональное распросранение СТХ-М-5-продуцирующих нозокомиальных штаммов Salmonella Typhimurium в России, Белоруси и Казахстане / В.К.Козырева, М.В.Эйдельштейн, Д.В. Тапальский, И.С.Азизов, А.В.Романов, Р.С.Козлов // Клин. Микробиол. Химиотерапия. - 2012. - том 14. - №1. - с.38 - 49.

49. Колотилова Н.Н. Экологическая микробиология - рождение науки // Бюлл. МОИП. Отдел биологический. 2009. - Т.114. - Вып.2. - С.225-227.

50. Коптелова Е.И. Выделение L-форм из спинномозговой жидкости больных эпидемическим цереброспинальным менингитом / Е.И.Коптелова, Т.К.Миронова, В.И.Покровский // Журн. микробиол. -1973. - №1. - с.107-109.

51. Копылов В.А. Значение феномена транслокации бактерий из желудочно-кишечного тракта в патогенезе хирургической инфекции при повреждениях: автореф. дис. ... канд. мед. наук: 14.00.27 / Копылов Вадим Анатольевич. - Оренбург, 2005. - 25 с.

52. Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология.-СПб.:СпецЛит, 2002. - 591с.

53. Лазовская А.Л. Споровые пробиотики в сельском хозяйстве / А.Л.Лазовская, З.Г.Воробьева, К.Н.Слинина, М.А.Кульчицкая // Успехи современной биологии. - 2013. Т.133. - №2. - С.133-140.

54. Лахтин В.М. Лектины, адгезины и лектиноподобные вещества лактобацилл и бифидобактерий / В.М. Лахтин, В.А. Алешкин, М.В. Лахтин, С.С. Афанасьев, В.В. Поспелова, Б.А. Шендеров // Вестник Российской АМН. - 2006. - №1. - С.28-34.

55. Лахтин М.В. Фундаментальные и прикладные перспективы лектиновых систем симбиотических микроорганизмов / Лахтин М.В., Лахтин В.М., Афанасьев С.С., Алешкин В.А // Уральский научный вестник. - 2016. -Т.10. - №2. - С.230-237.

56. Ленченко Е.М. Микроскопические и гематологические исследования при дисбактериозах животных / Е.М.Ленченко, Г.С.Толмачева, В.И.Боев // Аграрная наука. - 2015. - №10. - С.25-28

57. Литвин В.Ю. Эколого-генетические механизмы перехода Salmonella typhimurium в покоящееся состояние в окружающей среде / В.Ю. Литвин, В.И. Пушкарева, Л.В. Солохина, Ю.М. Романова, Н.В. Алексеева, А.Л. Гинцбург // Журн. микробиол. - 2001. - №6. - С.32-36.

58. Литвин В.Ю. Эпидемиологические аспекты экологии бактерий /

B.Ю.Литвин, А.Л.Гинцбург, В.И.Пушкарева, Ю.М.Романова, Б.В.Боев; под ред. С.В.Прозоровского. - М.: Фармарус-принт,1997. - 255.

59. Льюис К. Персистирующие клетки и загадка выживания биопленок / К.Льюис // Биохимия. - 2005. - том 70. - вып.2. - С.327-336.

60. Лянная А.М. Морфология бифидобактерий на светооптическом и электронно-микроскопическом уровне и их биологические свойства / А.М. Лянная, Г.И. Гончарова, В.В. Высоцкий // ЖМЭИ. - 1979. - №6. -

C.54-58.

61. Лямин А.В. Методы выявления биопленок в медицине: возможности и перспективы / А.В.Лямин, Е.А.Боткин, А.В.Жестков // Клин. Микробиол. Антимикроб. Химиотер. - 2012. - Т.14. - №1. - С.17-22

62. Мазанкова Л.Н. Пробиотики: характеристика препаратов и выбор в педиатрической практике / Л.Н. Мазанкова, Е.А. Лыкова // Детские инфекции. - 2004. - №1. - С.18-23.

63. Мазанкова Л.Н. Пробиотики в педиатрии: за и против с позиции доказательной медицины / Л.Н.Мазанкова, О.В.Рыбальченко, Е.А.Корниенко, С.Г.Перловская // Российский вестник перинатологии и педиатрии. - 2016. - т.61. - №1. - С.16-26.

64. Макарова М.Н. Характеристика микрофлоры кишечника у человека и лабораторных животных / М.Н. Макарова, К.Л. Крышень, А.А.Алякринская, А.В.Рыбакова, В.Г.Макаров // Международный вестник ветеринарии. - 2016. - №4. - С. 86-94.

65. Малик Н.И. Новые пробиотические препараты ветеринарного назначения: автореф.дис. ... д-ра вет. наук: 16.00.03/ Н.И.Малик. - М., 2002. - 53 с.

66. Маянский А.Н. Патогенетическая микробиология: рук-во.-Н.Новгород: Изд.НГМА. - 2006. - 520с.

67. Маянский А.Н. Стратегия управления бактериальным биопленочным процессом / А.Н. Маянский, И.В. Чеботарь // Журн. инфектологии. -2012. - том 4. - №3. С. 5-15.

68. Мешкова Н.В. Почвенные бактерии, сохранившие жизнеспособность в течение тысячалетий в условиях вечной мерзлоты /Н.В.Мешкова,

A.А.Симонова // Тр. 8-й науч. Конф. Молодых ученых факультета почвоведения МГУ (Москва, 86). - М. - 1989, С.92-95.

69. Михайлова Е.С. Способность к формированию биопленок у микроорганизмов, выделенных их верхних отделов ЖКТ больных хроническим холициститом и ЖКБ / Е.С. Михайлова, Ю.В. Червинец,

B.М. Червинец // Успехи современного естествознания. - 2009. - №7. -

C.76, 77.

70. Неминущая, Л.А. Перспективные биотехнологии получения новых синбиотиков для сельскохозяйственных животных / Л.А. Неминущая, Т.А. Скотникова, Е.И. Титова, О.В. Провоторова, Н.К. Еремец, И.В. Бобровская, З.А. Канарская // Вестник Казанского технологического университета. - 2012. - №4. - С.82-87.

71. Неминущая, Л.А. Новые синбиотики для птицеводства и их использование в целях повышения эффективности вакцинопрофилактики. / Л.А.Неминущая, Г.И. Воробьева, Т.А. Скотникова, Э.Ф.Токарик, И.П. Салеева, В.Г. Шоль // Птица и птицепродукты. - 2012. - №5. - С. 36-41.

72. Нетрусов А.И. Экология микроорганизмов / А.И.Нетрусов, Е.А.Бонч-Осмоловская, В.М.Горленко, М.В.Иванов, Г.И.Каравайко, П.А.Кожевин, Н.Н.Колотилова, И.Б.Котова, В.Н.Максимов, А.Н.Ножевникова, А.М.Семенов, Т.П.Турова, Т.Г.Юдина. - М.: Издательский центр «Академия», 2004. - 272 с.

73. Неустроев М.П. Пробиотики из штаммов Bacillus subtilis в сельском хозяйстве Якутии / М.П.Неустроев, Н.П.Тарабукина, М.П.Федорова // Рос. акад.с.-х.наук, Якут.науч.-исслед.ин-т сел.хоз-ва. - Якутск, 2010. -10 с.

74. Никитенко В.И. новые данные о механизме действия пробиотиков / В.И. Никитенко // Медицинская кафедра. - 2005. - №6. - С.33-34

75. Николаев Ю.А. Дистантные взаимодействия между клетками бактерий // Микробиология. - 1992. -Т.61. - №6. - С. 1066-1071.

76. Николаев Ю.А. Дистантные информационные взаимодействия у бактерий / Ю.А. Николаев // Микробиология. - 2000. - Т.69. - №5. -С.597-605.

77. Николаев Ю.А. Биопленка - «город микробов» или аналог многоклеточного организма? / Ю.А. Николаев, В.К. Плакунов // Микробиология. - 2007. - Т.76. - №2. - С.149-163.

78. Новик Г.Н. Изменение морфологии клеток в цикле развития популяций Bifidobacterium adolescentis и Bifidobacterium bifidum / Г.И. Новик, В.В. Высоцкий // Микробиология. - 1996. - том 65. - №3. С. 357-364.

79. Новик Г.И. Репродукция и дифференцировка клеток в цикле развития популяций Bifidobacterium adolescentis и Bifidobacterium bifidum / Г.И. Новик, В.В. Высоцкий // Микробиология. - 1996. - том 65. - №1. С. 6066.

80. Новик Г.И. Ультраструктура клеток некоторых видов рода Bifidobacterium / Г.И. Новик, В.В. Высоцкий, Ж.Н. Богдановская // Микробиология. - 1994. - том 63. - №3. С. 515-521.

81. Овод А.С. Профилактика диарей новорожденных телят пробиотиками / А.С.Овод, В.В.Мосейчук // Ветеринария. - 2007. - №2. - С.6-7.

82. Олескин А.В. Биосоциальность одноклеточных (на материале исследований прокариот) / А.В. Олескин // журн. общей биологии. -2009. - том 70. - №3. - С.225-238.

83. Олескин А.В. Микробная эндокринология и биополитика / А.В. Олескин, И.В. Ботвинко, Т.А. Кировская // Вестн. моск. ун-та. Сер.16. биология. - 1998. -№4. - С.3-8.

84. Олескин А.В. Колониальная организация и межклеточная коммуникация у микроорганизмов / А.В. Олескин, И.В. Ботвинко, Е.А. Цавкелова // Микробиология. - 2000. - том 69. - №3. - С.309-327.

85. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам: Методические указания. - М.:Федеральный центр госсанэпиднадзора Минздрава России, 2004. - 91с.

86. Осипова И.Г. Доклинические испытания новых споровых пробиотиков / И.Г. Осипова, И.Б. Сорокулова, Е.А. Васильева, Е.В. Буданова // Вестник Российской АМН. - 2005. - №12. - С.36-40

87. Осипова И.Г., Васильев А.С., Васильева Е.А., Евлашкина В.Ф. Гирич В.С. Общие принципы создания новых бактерийных препаратов на примере пробиотиков. М., 2016.

88. Отраслевой стандарт «Протокол ведения больных. Дисбактериоз кишечника» (ОСТ 91500.11.0004-2003), утв. Приказом министерства здравоохранения РФ (№231 от 09.06.2003)

89. Павлова И.Б. Закономерности развития популяций бактерий в окружающей среде: дис. ... доктора биол.наук: 16.00.06 / Павлова Инна Борисовна. - М., 1999.

90. Павлова И.Б. Атлас морфологии популяций патогенных бактерий / И.Б.Павлова, Е.М.Ленченко, Д.А.Банникова. - М.:Колос, 2007. - 180 с.

91. Павлова И.Б. Сапрофитизм популяций патогенных листерий / И.Б.Павлова, Д.А.Банникова, А.Б.Кононенко. - М.: Книжная типография БУКИ ВЕДИ, 2013. - 116 с.

92. Павлова И.Б., Применение компьютерной телевизионной морфоденситометрии в изучении микробного антагонизма / И.Б.Павлова, И.М.Манохина, Т.Г.Путина, А.В.Жукоцкий, Э.М.Коган // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 1994. - №7.

93. Павлова И.Б. Изменчивость популяции сальмонелл под влиянием температурного фактора / И.Б.Павлова, А.М.Смирнов, А.Б.Кононенко,

A.В.Барков, Т.Г.Путина, С.В.Бритова // Тезисы доклада на Международном симпозиуме. Москва. - 1995

94. Павлова И.Б. Электронно-микроскопическое исследование адгезивности бактерий / И.Б. Павлова, Е.М. Ленченко // ЖМЭИ. - 2002. - №1. - С.3-6.

95. Павлова И.Б. Электронномикроскопическое исследование взаимодействия молочнокислых бактерий с патогенными микроорганизмами // И.Б.Павлова, А.Б.Кононенко, Д.А.Банникова, С.Ю.Комбарова // Доклады академии с/х наук. - 2013. - №1. - С.55-58

96. Павлова И.Б. Экспериментальное исследование процессов формирования биопленок Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus / И.Б.Павлова, Г.С.Толмачева, Е.М.Ленченко // Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии. - 2016. - №4(20). - 65-73

97. Павлова И.Б., Арсенюк А.Ю., Жиленкова О.Г., Комбарова С.Ю. Экспериментальное электронно-микроскопическое исследование влияния биологически активных веществ Bacillus subtilis на популяции Lactobacillus и Bifidobacterium // Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии. 2016, №1(17).

98. Панин А.Н. Пробиотики - неотъемлемый компонент рационального кормления животных / А. Н. Панин, Н. И. Малик // Ветеринария. - 2006. - №7. - С. 3-7

99. Пат. 2105810 РФ Штамм бактерий Bacillus subtilis, используемый для обеззараживания птичьего помета и навоза от патогенных микроорганизмов - 27.06.1997

100. Пат. 2368382 РФ Способ лечения гнойно-некротических ран при нектобактериозе северных оленей / М.П.Неустроев, Н.П.Тарабукина,

B.Г.Шелепов, О.А.Карпов, В.Г.Луницин, С.И.Парникова - 09.03.2009

101. Пат. 237627 РФ Способ приготовления биологически активного органического удобрения (БАОУ) / А.И.Степанов, М.П.Неустроев, Е.И.Прибылых, Э.Г.Иванов, Н.П.Тарабукина, С.И.Парникова - Заявлено 10.12.2007; Опубл. 20.12.2009

102. Пат. 2385729 РФ Способ профилактики болезней органов дыхания и повышения продуктивности молодняка оленей / М.П.Неустроев, Н.П.Тарабукина, М.П.Федерова, С.А.Ягловский, С.И.Парникова -Заявлено 08.09. 2008; Опубл. 10.04.2010

103. Пат. 2428008 РФ Способ борьбы с черной ножкой, ризоктиниозом, морщинистой и обыкновенной мозаикой картофеля / П.П.Охлопкова, Р.Д.Васильева, М.П.Иванова, Т.В.Слепцова, М.П.Неустроев, Н.П.Тарабукина - Заявлено 27.01.2010; Опубл. 10.09.2011

104. Пат. 2428009 РФ Способ повышения урожайности огурцов в зимней теплице / М.П.Неустроев, М.П.Сидорова, И.П.Гурьева, Н.П.Тарабукина - Заявлено 27.01.2010; Опубл. 10.09.2011

105. Пат. 2446900 РФ Способ очистки мерзлотных почв от нефти спорообразующими бактериями Bacillus subtilis - М.П.Неустроев, Н.П.Тарабукина, М.М.Неустроев, Н.Н.Сазонов, С.И.Парникова, А.М.Степанова - Заявлено 13.07.2010; Опубл. 10.04.2012

106. Пат. 2460300 РФ Способ снижения поражаемости серой гнилью ягод земляники / Е.П.Васильева, В.Н.Сорокопудов, М.П.Неустроев, Н.П.Тарабукина, С.И.Парникова, У.К.Эверстова, А.В.Протопопова -Заявлено 08.04.2011; Опубл. 10.09.2012

107. Пат. 2538125 РФ Способ биоремедиации нефтезагрязненных мерзлотных почв / М.П.Неустроев, М.М.Неустроев, Н.И.Сазонов, А.М.Степанова, Н.П.Тарабукина, С.И.Парникова. - №2013130786/13; Заявлено 04.07.2013; Опубл. 10.01.2015, Бюл. №1.

108. Пахомов Ю.Д. Роль некультивируемых форм неспорообразующих бактерий в поддержании гомеостаза популяции / Ю.Д.Пахомов, Л.П.Блинкова, Л.Г.Стоянова // Иммунопатология, аллергология, инфектология. - 2010. - №4. - с.57-66.

109. Петров Л.Н. QS-системы у бактерий и перспективы создания новых метаболитных пробиотических препаратов / Л.Н. Петров, В.М. Бондаренко, Т.Я. Вахитов, А.А. Воробьев // Вестник Российской АМН. -2006. - №1. - С.38-44.

110. Петрухина М.И. Эпидемиологическое значение бактериальных биопленок / М.И.Петрухина, Г.В.Ющенко, Н.Г.Политова // Медиал. -2015. - №3(17). - С.9-17.

111. Пешков М.А. Цитология бактерий / М.А. Пешков. - Ленинград, 1955.

112. Пирузян Л.А. Сапротрофная микрофлора в качестве продуцента биологически активных веществ для целей микробной сапротрофной фармакотерапии / Л.А.Пирузян, Е.М.Михайловский // Доклады академии наук. Серия биологическая. - 1992. - №6. -С. 860-869.

113. Покровский В.И. Современные представления об инфекционной патологии и основные направления совершенствования стратегии ее профилактики / В.И. Покровский, Г.Г. Онищенко, Б.Л. Черкасский // Вестник Российской АМН. - 2000. - №1. - С.3-12.

114. Похиленко В.Д. Пробиотики на основе спорообразующих бактерий и их безопасность / В.Д. Похиленко, В.В. Перелыгин // Химическая и биологическая безопасность. - 2007. - №2-3. - С.20-40.

115. Прозоровский С.В. L-формы бактерий (механизм образования, структура, роль в патологии) / С.В.Прозоровский, Л.Н.Кац, Г.Я.Каган. -М., 1981. - 239с.

116. Прозоровский С.В. Некоторые механизмы персистенции in vivo микоплазм и L-форм бактерий / С.В.Прозоровский, Ю.В.Вульфович, И.В.Раковская, Л.Г.Горина, 1994

117. Пшеничнов В.А. Антивирусная активноть интерферонов в экспериментах на животных / В.А. Пшеничнов, Ю. Малинкин // Вопросы вирусологии. - 1988. - №3. - С.261-267

118. Резник С.Р. Серологический ответ макрооорганизма на патогенные бактерии под влиянием пробиотиков из бацилл / С.Р. Резник, В.А. Вьюницкая, С.В. Афонская, В.В. Смирнов // Микробиологический журнал. - 1993. - Т.55. - №5. - С. 81-82.

119. Романова Ю.М. Некультивируемое состояние у патогенных бактерий на модели Salmonella typhimurium: феномен и генетический контроль: автореф. дис. ... д-ра биол. наук: 03.00.07, 03.00.15 / Романова Юлия Михайловна. - М., 1997. - 45с.

120. Романова Ю.М. Бактериальные биопленки как естественная форма существования бактерий в окружающей среде и организме хозяина/ Ю.М. Романова, А.Л. Гинцбург // Журнал микробиология - 2011. - №3. -С.99-109.

121. Рыбальченко О.В. Морфо-физиологические аспекты взаимодействий микроорганизмов в микробных сообществах: дис....д-ра. биол. наук: 03.00.23 / Рыбальченко Оксана Владимировна. - Санкт-Петербург, 2003.

122. Рыбальченко О.В. Атлас ультраструктуры микробиоты кишечника человека / О.В.Рыбальченко, В.М.Бондаренко, В.П.Добрица. - М.; ИИЦ ВМА, 2008 - 112 с.

123. Рыбальченко О.В. Электронно-микроскопическое исследование межклеточных взаимодействий микроорганизмов при антагонистическом характере взаимоотношений / О.В. Рыбальченко // Микробиология. - 2006. - том 75. - №4. - С.550-555.

124. Рыбальченко О.В. Ультраструктурные изменения в клетках Shigella flexneri при взаимодействии с бактериоциногенными Lactobacillus acidophilus / О.В.Рыбальченко, В.М.Бондаренко, Н.Б.Вербицкая // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2006. -№4. - С.50-53.

125. Рыбальченко О.В. Проявление антагонистического действия бактериоциногенных Lactobacillus acidophilus на клетки Llebsiella pneumoniae, Citrobacter freundii и Proteus mirabilis / О.В. Рыбальченко,

B.М.Бондаренко, Н.Б.Вербицкая // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2006. - №7. - С.8-11.

126. Рыбальченко О.В. Ультраструктура микробных биопленок при межклеточных взаимоотношениях бактерий в сообществах / О.В.Рыбальченко, В.М.Бондаренко, О.Г.Орлова // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2014. - №4. -

C.87-92.

127. Самуйленко, А.Я. Ветеринарные аспекты обеспечения продовольственной безопасности России / А.Я. Самуйленко, Л.А. Неминущая, Е.О. Литвинова, М.А. Бондарева, С.А. Гринь, А.В. Гринь, И.Л. Беро, И.С. Рудакова // Ветеринария. - 2012. - №3. - С. 9-12.

128. Смирнов В.В. Современные представления о механизмах лечебно-профилактического действия пробиотиков из бактерий рода Bacillus / В.В. Смирнов, С.Р. Резник, В.А. Вьюницкая, И.Б. Сорокулова, Н.В. Самгородская, А.В. Тофан // Микробиологический журнал. - 1993. -Т.55. - №4. - С.92-111

129. Смирнов В.В. О некоторых механизмах возникновения бессимпномной бактериемии / В.В.Смирнов, С.Р.Резник, И.Б.Сорокулова, В.А.Вьюницкая // Микробиол. журн. - 1988. - том 50. - №5. - С.56-59

130. Смирнов В.В. Дискуссионные вопросы создания и применения бактериальных препаратов для коррекции микрофлоры теплокровных /

B.В.Смирнов, С.Р.Резник, И.Б.Сорокулова, В.А.Вьюницкая // Микробиол. журнал. - 1992. -54 - №6. - с. 82-94

131. Смирнова Т.А. Структурно-функциональная характеристика бактериальных биопленок / Т.А. Смирнова, Л.В. Диденко, Р.Р. Азизбекян, Ю.М. Романова // Микробиология. - 2010. - том 79. - №4. -

C.435-446.

132. Соколенко А.В. Морфология, ультраструктура, метаболизм некультивируемых форм холерных вибрионов: дисс. ... канд. биол. наук: 03.00.07 / Соколенко Анна Васильевна. - Ростов-на-Дону, 2000.

133. Соколов Н.И. Биологические свойства гетероморфных форм и L-подобных мутантов чумного микроба / Н.Н.Соколов, Г.С.Дунаев // Генетика и микробиология природноочаговых инфекций. - Саратов, 1984. - С. 36-38

134. Сорокулова И.Б. Перспективы применения бактерий рода Bacillus для конструирования новых биопрепаратов / И.Б. Сорокулова // Антибиотики и химиотерапия. - 1996. - том 41. - №10. - С.13-15.

135. Степанова А.М. Применение пробиотика из штаммов бактерий Bacillus subtilis ТПН-3 и Bacillus subtilis ТНП-5 в птицеводстве: автореф. дисс. ... канд. вет. наук:06.02.02 / Степанова Анна Михайловна. - Якутск, 2011.

136. Степанова А.М. Применение пробиотика «Норд-Бакт» для санации инкубационных яиц / А.М.Степанова // Материалы II международной конференции «Инновационные разработки молодых ученых». - 2013. -том 3. - вып.6. - С.266-268.

137. Субботин В.В. Биотехнология пробиотика лактобифадола (бифицидобактерина) и его лечебно-профилактическая эффективность: дис. д-ра вет. наук: 16.00.03/ В.В.Субботин. - М.:МГУПБ, 1999. - 315 с.

138. Тарабукина Н.П. Научное обоснование и разработка системы ветеринарно-санитарных мероприятий в животноводстве Крайнего Севера: дисс. ... док. вет. наук: 16.00.06 / Тарабукина Надежда Петровна. - Москва, 2000.

139. Тарабукина Н.П. Пробиотики из штаммов Bacillus subtilis в сельском хозяйстве Якутии / Н.П.Тарабукина, М.П.Неустроев, М.П.Федорова // Рос. акад. с-х наук, Якут. НИИ сель.хоз-ва. - Якутск, 2012. 16с.

140. Телишевская Л.Я. Питание и метаболизм патогенных микроорганизмов / Л.Я.Телишевская, Н.К.Букова, А.А.Комаров, В.Т.Ночевный. - М.: Издательский дом «Научная библиотека», 2016. - 156с.

141. Тимаков В.Д. L-формы бактерий и семейство Mycoplasmataceae в патологии / В.Д.Тимаков, Г.Я.Каган. - М.:Медицина, 1973. - 392 с.

142. Толмачева Т.А. Структура клетки и патогенность бруцелл на разных этапах L-трансформации / Т.А.Толмачева, Л.Н.Кац, Н.А.Грекова // ЖМЭИ. - 1979. - №8. - С. 63-67.

143. Узбеков Б.К. Биохимические особенности L-форм чумного микроба, находящихся на различных этапах L-трансформации // XXII Межреспубл.науч.-практ.конф.противочумных учреждений Средней Азии и Казахстана по профилактике чумы. - Алма-Ата, 1985. - С.45-47.

144. Феклисова Л.В. Пробиотики в лечении детей с хронической гастроэнтерологической патологией / Л.В.Феклисова, С.В.Полевой, А.Ю.Ушакова // Эпидемиология и инфекционные заболевания. - 2002. -№4. - С.42-45.

145. Хмель И.А. Quorum sensing регуляция экспрессии генов: фундаментальные и прикладные аспекты, роль в коммуникации бактерий / И.А. Хмель // Микробиология. - 2006. - том 75. - №4. - С.457-464

146. Чеботарь И.В. Антибиотикорезистентность биопленочных бактерий / И.В. Чеботарь, А.Н. Маянский, Е.Д. Кончакова, А.В. Лазарева, В.П. Чистякова // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. - 2012. - № 14 (1). - С. 51-58

147. Шапиро Дж. А. Бактерии как многоклеточные организмы / Дж.А.Шапиро // В мире науки. - 1988. - №8. - С.46-54.

148. Шендеров Б.А. Медицинская микробная экология и функциональное питание. Том I: Микрофлора человека и животных и ее функции. - М., 1998. - 287 с.

149. Шендеров Б.А. Медицинская микробная экология: некоторые итоги и перспективы исследований / Б.А. Шендеров // Вестник Российской АМН. - 2005. - №12. - С.13-17

150. Шендеров Б.А. Нормальная микрофлора и ее роль в поддержании здоровья человека / Б.А. Шендеров // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. - 1998. - №1. - С.61-65.

151. Beveridge T.J. Structures of gram-nigative cell walls and their derived membrane vesicles // J. Bacteriol. 1999. V. 181. P. 4725-4733

152. Collins M.D., Gibson G.R. Probiotics, prebiotics and synbiotics. Approaches for modulating the microbial ecology of the gut. Am. J. Clin. Nutr. 1999. 69. 1052-1057

153. Colwell R.R., P.R.Brayton, D.J. Grines et all. // Bio Technology. - 1985. -Vol.3. - P.817-820

154. Costerton J. W. Bacterial biofilms in nature and disease / J.W.Costerton, G.G.Geesy // Annu. Rev. Microbiol. 1987. - V.41. - P.438-464.

155. Costerton J. W., Bacterial biofilms: a common cause of persistent infections / J.W.Costerton, P.S.Stewart, E.P.Greenberg // Science. 1999 - P.1318-1322/

156. Donlan R.M., Costerton J.W. Biofilms: survival mechanisms of clinically relevant microorganisms // Clin. Microbiol. Rev. 2002. V.15. P.167-193.

157. Eijsink V.G.H. Production of class II bacteriocins by lactic acid bacteria; an example of biological warfare and communication / V.G.H.Eijsink, L.Axelsson, D.B.Diep, L.S.Havarstein, H.Holo, I.F.Nes // Antonie van Leeuwenhoek. - 2002. - V.81. - P.639-654

158. Fuller R. History and development of probiotics // Probiotics. The scientific basis. - London: Chapman & Hall, 1992. - P.1-9.

159. Fuller R., Gibson G.R. Modification of the intestinal microflora using probiotics and prebiotics // Scand. J. Gastroenterol. - 1997. - 32, Suppl. n 222. - P. 28-31.

160. Fuqua W.C., Winans S.C., Greenberg E.P. Census and consensus in bacterial ecosystems: the LuxR-LuxI family of quorum-sensing transcriptional regulators // Annu. Rev. Microbiol. 1996. V. 50.P.727-751; Davies D.G. et

all. The involvement of cell-to-cell signals in the development of a bacterial biofilm // Science.-1998.-V.280 №5361.

161. Hall-Stoodley L, Costerton J.W.Stoodley P. Bacterial biofilms: from the natural environment to infectious diseases. Nat. Rev. Microbiol. 2004, 2:95108

162. Hong H.A., Duc Le Hong, Cutting Simon M. The use of bacterial spore formers as probiotics//FEMS Microbiology Reviews 29 (2005).- c.813-835

163. Indar I. et al. Salmonellosis Trinidad: Evidence of transovarian transmission of Salmonella in farm eggs. Proc.4th Congress Foodborne Infections and Intoxications, V. 1. P. 425-432, 1998.

164. Inna Pavlova. Atlas: Pathogenic Bacteria Population (in two parts) - Moscow: Pero Publishing House. 2014. - 352 p.

165. Kell D.B. Bacterial dormancy and culturability:the role of autocrine growth factors / Kell B.D., Young M. // Curr. Opin. Microbiol. - 2000. - № 3. - 238243

166. Kellerr L., Benson C.S. Enteritidis colonization of the reproductive tract fresh laid eggs of chickens., Infections and Immunity, 63, 7, 2243-2249, 1995.

167. Klemm P. Prevention of bacterial adhesion // Appl. Microbiol. Biotechnol.-2010. V.88, №2.-P.451-459.

168. Lee M.-L.T., Ross R.A., Onderdonk A.B. Application of in vitro and in vivo to the study of microflora//Microb. Ecol. Health and Bisease. -1995. -8 №1. -P.31.

169. Montagnier, L., Aissa, J., Ferris, S. Electromagnetic signals are produced by aqueous nanostructures derived from bacterial DNA sequences.// Interdisciplinary Sciences: Computational Life Sciences. - 2009. - Vol. 1. - p 81-90.

170. Maldonado A. Induction of plantaricin production in Lactobacillus plantarum NC8 after coculture with specific gram-positive bacteria in mediated by an autoinduction mechanism / A.Maldonado, R.Jimenes-Diaz, J.L.Ruiz-Barba // J. Bacteriol. - 2004. - V.186. - №5. - P.1556-1564

171. McBride S.M., Coburn P.S., Baghdayan A.S. et al. Genetic variation and evolution of the pathogenicity island of Enterococcus faecalis. J. Bacteriol. 2009. 191 (10). 3392-3402

172. Miller M.B., Bassler B.L. Quorum sensing in bacteria // Annu. Rev. Microbiol. 2001. V. 55. P. 165-199

173. Moons P. Bacterial interactions in biofilms/ P. Moons et. al. //Crit. Rev. Microbiol. — № 3- 2009 Vol. 35 P. 157-168

174. Pauchaud A., Guy L., Collyn F. et al. M-protein and other intristic virulence factors of Streptococcus pyogenes are encoded on an ancient pathogenicity island. BMC Genjmics. 2009. 10. 198-205

175. Rasmussen T.B., Givskov M. Quorum sensing inhibitors: a bargain of effects // Microbiology. -2006.-V.152. - №4

176. Shapiro J.A. Thinking about bacterial population as multicellular organisms.//Ann.Rev.Microbiol, 1998. 52:81 — 104

177. Tannock G.W. Molecular assessment of intestinal microflora. Am.J.Clin.Nutr. 2001,73 (suppl):410-414

178. Thach P.N., Vu T.C., Nguen T.H. Le Bacillus subtilis en therapeutique et dans la prophilaxie // Rev. Immunol. - 1968. - 72, N S. - P. 53-58

179. Vu B., Chen M., Crawford R.J., et al. Bacterial extracellular polysaccharides involved in biofilm formation. Molecules.-2009; 14:2535-54

РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И.Скрябина"

УДОСТОВЕРЕНИЕ

О ПОВЫШЕНИИ КВАЛИФИКАЦИИ

772400 1 (5891 6

Дркумснт о квалификации

Регистрационный номер 54

Город

Москва

Дата выдачи 14.02.2014

по дополнительной профессиональной программе

Бактериология(микробиология) по безопасности работы с микроорганизмами 3-4 групп патогенности.

Арсенюк Анна Юрьевна

прошел(а) повышение квалификации в (на)

Институте повышения квалификации и профессиональной переподготовки работников животноводства и ветеринарии

с 10 февраля по 14 февраля 2014г.

в объёме

Настоящее удостоверение свидетельствует о том, что

О оо

РНЕ1\ЮМ\Л/01*1_0 Сертификат

Арсенюк Анна Юрьевна

Посетила семинар компании ООО «Мелитэк»:

«Современные настольные сканирующие электронные микроскопы компании «РИепот-\Л/ог1с1 В\/» (Нидерланды) - системы получения изображений и анализа».

Подтверждает, что

г. Москва 20 ноября 2013г.

Training manager

Karl Kersten

Настоящим удостоверяем, что

Арсенюк Анна Юрьевна

принял (а) участие в Ежегодном Конгрессе с международным участием «КОНТРОЛЬ И ПРОФИЛАКТИКА ИНФЕКЦИЙ, СВЯЗАННЫХ С ОКАЗАНИЕМ МЕДИЦИНСКОЙ ПОМОЩИ (ИСМП-2016)»

Общее количество часов участия в научной программе составляет 16 академических часов.

Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека - Главный государственный санитарный врач Российской Федерации, д.м.н., профессор

А.Ю. Попова

Директор ФБУН «Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии» Роспотрвбнадзора, Председатель Правления НП .»Национальное научное общество инфекцирнистдай», академик РАН, д.м.н., профессор

В.И. Покровский

Директор ФБУН «Научно-исследовательский

институт дезинфе Президе! дезинфе!

<тологии» Роспотребнадзора, П «Не циональная организация онист: з», д.м.н., профессор

Н.В. Шестопалов

а

к й

о *

п>

и к

п>

Российская академия наук Отделение сельскохозяйственных наук Федеральное государственное бюджетное учреждение «ВСЕРОССИЙСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ВЕТЕРИНАРНОЙ САНИТАРИИ, ГИГИЕНЫ И ЭКОЛОГИИ»

(ФГБНУ «ВНИИВСГЭ»)

УТВЕРЖДАЮ Председатель методической комиссии «Ветеринарная санитария, гигиена и экология» секции зоотехнии и ветеринарии Отделения сельскохозяйственных наук РАН академик РАН М.Смирнов

« О 3 » _2016г.

г, наук '

МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ по изучению морфологии стабильных и нестабильных Ь -форм патогенных бактерий методом модуляционной интерференционной микроскопии

Москва 2016

Методические рекомендации по изучению стабильных и нестабильных Ь-форм патогенных бактерий методом модуляционной интерференционной микроскопии разработаны Всероссийским научно-исследовательским институтом ветеринарной санитарии, гигиены и экологии (м.н.с. Арсенюк А.Ю., д.б.н. профессор Павлова И.Б) совместно с ООО «Лаборатории Амфора» (к.ф-м.н. Игнатьев П.С.)

Методические рекомендации предназначены для научно-исследовательских учреждений, изучающих биологию и экологию патогенных бактерий и разрабатывающих антибактериальные препараты, испытательных лабораторий, а также для аспирантов и студентов ветеринарных и медицинских ВУЗов.

Рецензент: профессор, д.б.н. В.В.Светличкин

Материалы рассмотрены и одобрены на совместном заседании ученого совета ФГБНУ «ВНИИВСГЭ» и методической комиссии «Ветеринарная санитария, гигиена и экология» секции зоотехнии и ветеринарии Отделения сельскохозяйственных наук РАН (протокол №7/2 от 2.11.2016 г.)