ДНК-диагностика вариантов генов каппа-казеина и бета-лактоглобулина у крупного рогатого скота тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Гладырь, Елена Александровна

• Гладырь, Елена Александровна
• кандидат биологических наук
• 2001

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Гладырь, Елена Александровна

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Маркер-зависимая селекция

1.2. Молоко коров и его свойства

1.3. Полиморфизм генов белков молока крупного рогатого 13 скота,

1.3.1. Полимеразная цепная реакция (ПНР)

1.3.2. Молекулярно-биохимический полиморфизм казеина молока

1.3.3. Молекулярно-биохимический полиморфизм сывороточных 22 белков молока

1.3.4. Полиморфизм генов каппа-казеина и бета-лактоглобулина и 29 связь с хозяйственно-ценными признаками у крупного рогатого скота

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Материалы исследований

2.1.1. Животные

2.1.2. Оборудование

2.1.3. Реактивы

2.2. Методика исследований

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Оптимизация метода выделения ДНК из крови, ткани, 42 молока, спермы с использованием перхлората натрия

3.2. Оптимизация метода ПЦР-ПДРФ для анализа гена каппа- 43 казеина крупного рогатого скота

3.3. Разработка метода ПЦР-ПДРФ для идентификации 50 вариантов гена бета-лактоглобулина крупного рогатого скота

3.4. Популяционно-генетический анализ гена каппа-казеина у 57 различных пород крупного рогатого скота Российской Федерации

3.5. Связь генотипов каппа-казеина с молочной 65 продуктивностью у исследованных пород крупного рогатого скота

3.6. Популяционно-генетический анализ гена бета- 71 лактоглобулина у различных пород крупного рогатого скота Российской Федерации

3.7. Связь генотипов и аллелей гена бета-лактоглобулина с 74 молочной продуктивностью

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «ДНК-диагностика вариантов генов каппа-казеина и бета-лактоглобулина у крупного рогатого скота»

Актуальность темы.

Одним из приоритетных направлений развития науки и техники до 2005 г. является мобилизация, сохранение и использование генофонда животных с хозяйственно ценными признаками (приказ Министерства науки и технологии Российской Федерации, Минсельхоза Российской Федерации и Президиума РАСХН от 30 декабря 1999 г. № 295/892/111). В этой связи актуальной становится задача выявления маркерных генов, ответственных за проявление хозяйственно-полезных признаков, и их анализ с целью последующего установления закономерных связей между локусами количественных признаков (QTL) и маркерными генами.

Наряду с биохимическими и физиологическими маркерами (оценка по группам крови, полиморфным системам белков) [Марзанов Н.С., 1994] широкое распространение получают молекулярно-генетические маркеры. Выявление маркерных аллелей, связанных с желательными хозяйственно-полезными признаками (ДНК-диагностика), позволит проводить селекцию животных на уровне ДНК (генотипа), а широкое их использование в качестве маркеров признаков продуктивности в конечном итоге повысит эффективность ведения селекционной работы. Преимущество ДНК-диагностики перед оценкой признаков по их фенотипическому проявлению объясняется тем, что она базируется непосредственно на анализе наследственной информации, лежащей в основе того или иного признака [Зиновьева Н.А. и др., 1998].

Среди большого разнообразия имеющихся молекулярно-генетических методов анализа наследственного материала, и в частности ДНК, при оценке животных по генотипу предпочтение отдается методу ПЦР-ПДРФ анализа, вследствие его высокой чувствительности, точности, быстроты и известной простоты исполнения.

Аллельные варианты генов белков молока являются важнейшими маркерами молочной продуктивности крупного рогатого скота [Geldermann Н., 1989]. В связи с возросшими требованиями рынка к качеству молочной продукции, в частности к количеству и составу молочного белка, а так же к сыродельным характеристикам молока, возникает насущная необходимость в выявлении и использовании в селекции генетических маркеров, напрямую или косвенно связанных с качественными и количественными признаками молочной продуктивности.

Цель и задачи исследования.

Целью диссертационной работы являлось проведение ДНК-диагностики вариантов генов каппа-казеина и бета-лактоглобулина у различных пород крупного рогатого скота Российской Федерации.

Для достижения цели диссертационной работы были поставлены и решены следующие задачи:

1. Создать банк ДНК различных пород крупного рогатого скота.

2. Оптимизировать методику определения полиморфизма генов каппа-казеина и бета-лактоглобулина крупного рогатого скота на основе анализа ПЦР-ПДРФ.

3. Выявить полиморфизм генов каппа-казеина и бета-лактоглобулина у различных пород крупного рогатого скота.

4. Изучить генетическую структуру популяций по исследуемым генам.

5. Установить взаимосвязи между аллелями генов каппа-казеина и бета-лактоглобулина и показателями молочной продуктивности крупного рогатого скота.

Научная новизна.

Впервые разработаны методики определения шести аллельных вариантов гена каппа-казеина и четырех аллельных вариантов гена бета-лактоглобулина крупного рогатого скота. Изучено генетическое разнообразие четырех пород крупного рогатого скота Российской Федерации по исследуемым генам. Изучено влияние аллельных вариантов генов каппа-казеина и бета-лактоглобулина на признаки молочной продуктивности крупного рогатого скота.

Практическая ценность работы.

Создан банк ДНК крупного рогатого скота четырех различных пород, который может быть использован для выявления полиморфизма других генов-кандидатов локусов количественных признаков.

Разработаны оптимальные методики выявления аллельных вариантов генов каппа-казеина и бета-лактоглобулина, пригодные для проведения широкомасштабных популяционно-генетических исследований.

Исследовано влияние аллельных вариантов генов каппа-казеина и бета-лактоглобулина на признаки молочной продуктивности крупного рогатого скота и даны рекомендации по возможному использованию данных маркеров в селекции.

Основные положения, выносимые на защиту.

• Создан банк ДНК четырех пород крупного рогатого скота Российской Федерации;

• Предложен новый метод выявления 6-и полиморфных аллелей гена каппа-казеина (А, В, С, Е, F, G);

• Предложен новый метод выявления 4-х полиморфных аллелей гена бета-лактоглобулина (А, В, С, D);

• Показано, что частоты встречаемости аллелей и генотипов исследуемых генов различаются в зависимости от породы крупного рогатого скота;

• Установлены тенденции влияния аллелей генов каппа-казеина и бета-лактоглобулина на отдельные признаки молочной продуктивности коров.

Апробация работы.

Материалы диссертационной работы были доложены и обсуждены на:

• конференции аспирантов и молодых ученых, ВИЖ, п. Дубровицы, 2000;

• научно-практической конференции «Повышение конкурентноспособности животноводства и задачи кадрового обеспечения», Быково, 2000;

• II Международной научной конференции «Биотехнология в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии», Москва, ВНИИСХБ, 2000;

• научных отчетах ВИЖа 1999-2000;

• научной конференции отдела биотехнологии, ВИЖ, п. Дубровицы, 2001.

Публикации.

В ходе выполнения диссертационной работы автором было опубликовано 3 научные работы, в том числе 1 методические рекомендации.

Структура и объем работы.

Диссертация изложена на 103 страницах, содержит 18 таблиц, 14 рисунков, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, результатов исследований, выводов, практических предложений, списка литературы, который включает 190 источников, в том числе 133 на иностранных языках.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Гладырь, Елена Александровна

ВЫВОДЫ

1. Создан банк ДНК крупного рогатого скота красной горбатовской породы (0=187), молочного типа швицкого породы (п=72), якутской породы (п=33), черно-пестрой породы (п=27), который может быть использован для проведения различных молекулярно-генетических исследований.

2. Оптимизирована методика выделения ДНК из крови (п=60), ткани (п=56), спермы (п=20), молока (n=30) КРС. Эффективность выделения высоко молекулярной ДНК, пригодной для ПЦР-ПДРФ анализа фрагментов, длиной более 1 т.п.о., составила 92,6-100% по сравнению с 10,6% при использовании стандартного солевого метода экстракции.

3. Модифицирована и усовершенствована методика ПЦР-ПДРФ анализа, позволяющая выявлять 6 полиморфных аллелей гена каппа-казеина крупного рогатого скота - А, В, С, Е, F, G. Установлено, что при стандартной двуаллельной диагностике процент ошибок в зависимости от породы составляет: 6,94 % (швицкая, молочный тип), 7,41% (черно-пестрая), 18,34% (красная горбатовская).

4. Разработан новый метод выявления 4-х полиморфных аллелей гена бета-лактоглобулина крупного рогатого скота на основе ПЦР-ПДРФ анализа. Установлено, что процент ошибочно интерпретируемых генотипов при двуаллельной диагностике в зависимости от исследуемой породы составляет 0,76%) (красная горбатовская), 4% (черно-пестрая), 12,5% (швицкая, молочный тип).

5. Показано, что частоты встречаемости аллелей каппа-казеина различались в зависимости от породы. Частота предпочтительного для сыроделия аллеля В была минимальной (12,96%) у черно-пестрой породы, и максимальной у швицкой породы (65,28%о). Наряду с основными аллелями каппа-казеина А и В в трех из четырех исследованных породах выявлены редкие аллели С, Е, F, G. Относительно высокая частота встречаемости аллеля Е (7,21%) была установлена у животных красной горбатовской породы. Наибольшее число различных генотипов было диагностировано у животных красной горбатовской - 8 (АА, АВ, ВВ, АЕ, BE, ЕЕ, BF, ВС) и швицкой пород - 7 (АА, АВ, ВВ, BF, ВС, AC, AG). Наименьшим генетическим разнообразием (по три генотипа) характеризовались коровы черно-пестрой (АА, АВ, АЕ) и якутской пород (АА, АВ, ВВ).

У коров швицкой породы, молочного типа выявлена тенденция, указывающая на связь генотипа ВВ с исследованными параметрами молочной продуктивности: удоем (ВВ>АА, +1065кг, Р>0,95), молочным жиром (ВВ>АА, +42,1кг, Р>0,95), процентным содержанием жира (ВВ>АВ, +0,07%, Р>0,95) и белка (ВВ>АВ, +0,04%, Р>0,99 и ВВ>АА, +0,07%, Р>0,99). Наблюдается тенденция положительного влияния аллеля Е и отрицательного влияния аллелей G и F гена каппа-казеина на удой.

6. Установлено, что частоты встречаемости аллелей и генотипов гена бета-лактоглобулина являются породоспецифичными. В трех исследованных породах (красная горбатовская, швицкая, черно-пестрая) было выявлено три аллеля - А, В, С, с частотой встречаемости редкого аллеля С от 0,4 (красная горбатовская порода) до 6,25% (молочный тип швицкой породы). Редкий аллель D у исследованных животных отсутствовал.

Выявлены достоверные различия в проявлении генетических вариантов гена бета-лактоглобулина у коров красной горбатовской породы. Установлено превосходство животных с генотипом АА над животными с генотипами АВ и ВВ по содержанию жира в молоке (соответственно, +0,13%, Р>0,999 и + 0,09%, Р>0,95).

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Лабораториям, занимающимся ДНК-диагностикой, для повышения достоверности анализа генов каппа-казеина и бета-лактоглобулина крупного рогатого скота, рекомендуем использовать предложенные в данной диссертационной работе методики.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Гладырь, Елена Александровна, 2001 год

1. Алиев А.А. Обмен веществ у жвачных животных. М.: НИЦ «Инженер». -1997.-420 с.

2. Бадагуева Ю.Н., Сулимова Т.Е., Удина И.Г. Исследование полиморфизма гена каппа-казеина у крупного рогатого скота и родственных видов // Молекулярно-генетические маркеры животных: Тез. докл. II Международной конф. Киев. - 1996. - С.5.

3. Барабанщиков Н.В. Молочное дело // М.: Колос. 1983.-413 с.

4. Баранова B.C., Валова JI.B., Курдуманов О.И. Электрофоретическое разделение белков молока // М. 1987. - 16 с.

5. Бисенов У.К. Выделение и клонирование кДНК гена бета-лактоглобулина овец // Бюл. науч. работ / ВИЖ. 1992. - № 106. - С. 78-80.

6. Брем Г., Кройслих X., Штранцингер Г. Экспериментальная генетика в животноводстве // М. РАСХН. - 1995. - 326 с.

7. Вартапетян А.Б. Полимеразная цепная реакция // Молекулярная биология. 1991. - Том 25. - № 4. - С. 926-936.

8. Георгиевский В.И. Физиология сельскохозяйственных животных // М.: Агропромиздат. 1990. - 510 с.

9. П.Глазко И.И. ДНК-технологии животных // под ред. А.А.Созинова. Киев. - 1997.- 173 с.

10. Н.Голиков А.Н., Баранова Н.У., Кожебеков З.К. Физиология сельскохозяйственных животных // М.: Агропромиздат. 1991. - 432 с.

11. Горбатова К.К. Биохимия молока и молочных продуктов // М.: "Легкая и пищевая промышленность" . 1988. - 344 с.

12. Гроклод Ф. Полиморфизм белков молока, некоторые биохимические и генетические аспекты // Материалы XXVI Международной конференции по группам крови и биохимическому полиморфизму животных. Л. -1979.-Т. 1.-С. 55-94.

13. Дерюшева С.Е. Определение генотипа каппа-казеина у коров бестужевской породы методом полимеразной цепной реакции // Бюллетень ВНИИРГЖ. С-Петербург. - 1993. - Вып. 137. - С. 36-39.

14. Ефремов И.А. Исследование аллельного полиморфизма микро- и минисателлитных локусов генома человека методом амплификации ДНК // Автореф. дис. канд. биол. наук.: Москва. 1996. - 20 с.

15. Жебровский JI.C., Митютько В.Е. Использование полиморфных белковых систем // М.: Колос. 1979. -182 с.

16. Журавель Е.В., Глазко В.И. Распределение аллельных и генотипических частот по локусу каппа-казеина у различных пород крупного рогатого скота // Генетика. 1997. - Т. 33. - № 12.

17. Зиновьева Н.А., Васичек Д., Айгнер Б., Попов А.Н., Брем Г. Диагностика различных аллельных вариантов ДНК "single tube" методом аллелеспецифической полимеразной цепной реакции // Биотехнология. -1996.-№6.-С. 45-49.

18. Зиновьева Н.А. Молекулярно-генетические аспекты в решении задач современного животноводства // Автореф. докт. дисс. Дубровицы. -1998а.-36 с.

19. Зиновьева Н.А., Попов А.Н., Эрнст Л.К., Марзанов Н.С., Бочкарев В.В., Стрекозов Н.И., Брем Г. Методические рекомендации по использованию метода полимеразной цепной реакции в животноводстве // Дубровицы. -1998b.-47 с.

20. Иолчиев Б.С. Эффективность использования быков производителей черно-пестрой породы разного племенного достоинства // Автореф. канд. с.-х. наук. Дубровицы. - 1994. - 24 с.

21. Калашникова JI.A., Дунин И.М., Глазко В.И., Рыжова Н.В., Голубина Е.П. ДНК-технологии оценки сельскохозяйственных животных // Лесные Поляны.-1999.- 148 с.

22. Калашникова Л.А., Дунин И.М., Глазко В.И. Селекция XXI века: использование ДНК-технологий // Лесные Поляны. 2000. - 31 с.

23. Карликов Д.В., Зыскунова Р.Н. Полиморфизм белков молока черно-пестрого скота при голштинизации // Труды научной конференции ТСХА, 1987.-С. 1064-1079.

24. Кленовицкий П.М., Моисейкина Л.Г., Марзанов Н.С. Цитогенетика сельскохозяйственных животных// Элиста. 1999. - 142 с.

25. Кривенцов Ю.М., Щербакова Г.В. Молочная продуктивность, физико-химический состав и технологическое свойство молока черно-пестрого скота различных генотипов // Вестник с. -х. науки. 1991. С. 100-104.

26. Кугенев П.В. Барабанщиков Н.В. Практикум по молочному делу. М.: Агропромиздат. - 1988. - 223 с.

27. Марзанов Н.С. Физиологические маркеры крови овец и коз: теоретические и прикладные аспекты их применения // Дисс. докт. биол. наук. Дубровицы. - 1994. - 348 с.

28. Маринчук Г.Е. Сопряженность молочной продуктивности крупного рогатого скота с комплексов локусов сцепленного блока казеинов и (3-лактоглобулина // Цитология и генетика. 1992. - Т. 26. - № 5. - С. 48-53.

29. Маркин Ю.В. Физиологическое обоснование методов повышения энергетической и протеиновой обеспеченности лактирующих коров имолодняка крупного рогатого скота // Автореф. дис. докт. биол. наук. -1997.-38 с.

30. Меркурьева Е.К., Шангин-Березовский Г.Н. Генетика с основами биометрии. М.: Колос. - 1983. - 400 с.

31. Меркурьевой Е.К., Абрамова З.В., Бакай А.В., Кочиш И.И. Генетика. -М.: Агропромиздат. 1991. - 444 с.

32. Овчинников А.И., Горбатова К.К. Биохимия молока и молочных продуктов. JI. -1974. - 259 с.

33. Плохинский Н.А. Биометрия. М.: Издательство Московского Университета. - 1970. - 366 с.

34. Погоняло Д.И. Наследственный полиморфизм белков молока сельскохозяйственных животных и его практическое значение в селекции: Автореф. дис. канд. с. -х. наук. -Минск. 1975. - 17 с.

35. Сайки Р. Анализ генома // Методы. М. - Мир. - 1990. - 400 с.

36. Сапунов А.Г., Подшибякин А.Е., Чеботарев И.И., Головской И.П. Биологическая полноценность молозива и молока овцематок и жизнеспособность новорожденных ягнят // Ветеринария. 1986. - № 9. -С. 65-66.

37. Сингер М., Берг П. Гены и геномы / В 2-х томах // М.: Мир. 1998.

38. Сипко Т.П., Удина И.Г., Бодагуева Ю.Н., Сулимова Г.Е. Сравнительная характеристика полиморфизма ДНК гена каппа-казеина у крупного рогатого скота с помощью полимеразной цепной реакции // Генетика. -1991.-27.-№ 12.-С. 2053-2062.

39. Сулимова Г.Е., Чайхаев Г.О., Берберов Э.М. Генотипирование локуса каппа-казеина у крупного рогатого скота с помощью ПЦР // Генетика. -1991. Т.27. - № 12. - С. 2053-2062.

40. Сулимова Г.Е., Соколова С.С., Семикозова О.П. и др. Агализ полиморфизма ДНК кластерных генов у крупного рогатого скота: гены казеинов и главного комплекса гистосовместимости (BOLA) // Цитология и генетика. 1992. - Т. 26. - № 5. - С. 18-26.

41. Тепел А. Химия и физика молока. -М.: "Пищевая промышленность". -1979.-624 с.

42. Томме А.А. Генетический полиморфизм |3-Lg и казеинов и возможности его использования в селекции пород крупного рогатого скота в Эстонской ССР// Автореф. дис. канд. с. -х. наук. Тарту. - 1972. - 27 с.

43. Хаертдинов Р.А. Влияние генотипа коров по казеину на количественное содержание молочных белков // Генетика. 1989. - Т. 25. - № 8. - С. 1462-1472.

44. Шибата Д.К. Полимеразная цепная реакция и молекулярно-генетический анализ биоптатов. // Методы. Молекулярная клиническая диагностика. -М.: Мир. -1999. С.395-428.

45. Ясуи В., Ито X., Тахара Е. Анализ ДНК в архивных образцах и его применение для изучение патогенеза опухолей. // Методы. Молекулярная клиническая диагностика. М.: Мир. -1999. - С.395-428.

46. Alanpri С., Buttazoni S.G., Scaneiden the effectes of milk componentes and chees-producins abulity // J. Dairy Sc. 1990. - P. 241.

47. Aleksander L.J., Stewart A.F., Mackinlay A.G., Kapelinskaya T.V., Tkach T.M., Gorodetsky S.I. Isolation and characterisation of the bovine kappa-casein gene // Eur. J. Biochem. 1988. - V. 178. - № 2. - P. -.395-401.

48. Aleksander L.J., Hayes G., Bawden W., Stewart A.F., Mackinlay A.G. Complete nucleotide sequence of bovine fMactoglobulin gene // Animal Biotechnology. 1993. -V. 4. - P. 1-10.

49. AH S., Clark A.J. Characterisation of the gene encoding ovine beta-lactoglobulin. Similarity to the genes for retinol binding protein and other secretory proteins // J. Mol. Biol. 1988. - V. 199. - P. 415-426.

50. Archibald A.L., McClenaghan M., Hornsey V., Simons J.P., Clark A.J. High-level expression of biologically active human alpha 1 -antitrypsin in the milk of transgenic mice // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1990. - V. 87. - P. 5178-5182.

51. Axelsson I., Jacobsson I., Lindberg Т., Benidiktsson B. Bovine B-lactoglobulin in the human milk. A longitudinal study during the whole lactation period // Asts Peadiatr. Scand. 1986. - V. 75. - P. 702-707.

52. Banaszak L., Winter N., Xu Z., Bernlohr D.A., Cowan S., Jones T.A. Lipid-binding proteins: A family of fatty acid and retinoid transport proteins // Adv. Protein Chem. 1994. - V. 45. - P. 89-151.

53. Banyko J., Borze Z. Detection of kappa-casein genotypes in bulls of cattle breeds by restrction fragment length polymorphism (RFLP) // Vet. Med. -1995. V. 40. -No 6.- P. 165-169.

54. Barroso A., Dunner S., Canon J. Technical note: Detection of bovine kappa-kasein variants А, В, C, and E by means of polymerase chain reaction- single strand conformation polymorphism ( PCR-SSCP) // J. Anim, Sci. 1998. - V. 76.-№6. P. 1535-1538.

55. Barroso A., Dunner S., Canon J. A multiplex PCR-SSCP test to genotype bovine beta-casein alleles Al, A2, A3, В and C// Anim. Genet.- 1999. V. 30. - № 4. - P. 322-323.

56. Beckmann J.S., Soller M. Restriction fragment length polymorphisms in genetic improvement: Methodologies mapping and costs // Theor. and Appl. Genet. 1983. - V. 67. - P. 35-43.

57. Bell K., McKenzie H.A., Shaw D.C. Amino acid composition and peptide maps of (3-lactoglobulin variants // Biochim. Biophis. Acta. 1968. - V. 154. - P. 284-294.

58. Bernback S., Hernell O., Blackberg L. Bovine pregastric lipase: a model for the human enzyme with respekt to properties relevant to its site of action // Biohim. Biophys. Acta. 1987. - V. 3. - P. 2303-2308.

59. Blumberg B.S., Tombs M.P. Possible polymorphism of bovine p-lactalbumin // Nature. 1958.-V. 181.-P. 683.

60. Borze Z., Dohy J. Improvement of the quality of milk protein by new biotechnological methods // Hungarian Agricultural Research. 1993. - V. 2. -№ l.-P. 26-29.

61. Bovenhuis H., Van Arendock J.A.M., Korver S. Associations between milk protein polymorphisms and milk productions traits // J. Dairy Sci. 1992. - V. 75.-P. 2549.

62. Braunitzer G., Chen R., Schrank В., Stangl A. Automatische Sequenzanalyse eines Proteins ((3-Lactoglobulin AB) // Hoppe-Seyler's Z. Physiol. Chem. -1972.-V. 353.-P. 832-834.

63. Braunitzer G., Chen R., Schrank В., Stangl A. Die Sequenzanalyse des p-Lactoglobulins // Hoppe-Seyler s Z. Physiol. Chem. 1973. -V. 354. - P. 876878.

64. Braunschweig M., Stranzinger G., Puhan Z. A PvuII PCR-RFLP test for the bovine J3-lactoglobulin D allele // Animal Genetics. 1999. - V. 30. - P. 76.

65. Cauvin E., Conti A., Liberatori J. Comparative structursl studies on (3-lactoglobulins. The N-terminal seqense of sheep, goat and buffalo (3-lactoglobulins // Milchwiss. 1977. - V. 32. - P. 459-460.

66. Chikuni K., Kageyama S., Koshkawa Т., Kato S. Identification of bovine ae-casein genotypes using polymerase chain reaction metod // J. Zootechn. Sci. -1991.-V. 62.-№7.-654-659.

67. Cowan C.M., Dentine M.R., Colye T. Chromosome substitution effects associated with kappa-casein and beta-lactoglobulin in Holstein cattle // J. Dairy Sci. 1992. - V. 75. - P. 1097.

68. Jeffreys A. et al. // Nature 316. 1985. - P. 76.

69. De Frutos M., Cifuentes A., Amigo L., Ramos M., Diez-Masa J.C.Rapid analysis of whey proteins from different animal species by reversed-phase high-performance liquid chromatography // Lebensmittelunters. und Forsch. -1992.-№ 195.-S. 326-331.

70. De Jong N., Visser S., Oliemann C. Determinatin of milk proteins by capillary electrophoresis // Chromotogr. 1993. -652. - P. 207-213.

71. Denicourt D., Sabour M.P., Mc Alister A.J. Detection of bovine к-casein genomic variants by the polymerase chain reaction method // Anim. Genet. -1990.-V 21.-P. 215-216.

72. Diaz de Villegas M.C., Oria R., Sala F.J., Calvo M. Lipid binding by 6-lactoglobulin of cow milk // Milchwiss. 1987. - V. 42. - P. 357-358.

73. Di Stasio L., Merlin P. Polimorphysmo biochimici del latte nella razza bovina Grigio Alpina // Rivista Zootechia e Veterinaria. 1979. - V. 2. - P. 64-67.

74. Ebner K., Schambacher F.// Lactation (Eds.: LarsonB., Smith V.). -1974. № 2.-P. 77-113.

75. Ehrmann S. Milchproteine: Mit dem Muster auch die Leistung verbessern? // Der Tierzuchter. 1993. - № 3. - S. 44-47.

76. Eigel W.N., Butler J.E, Ernstrom C.A, Farrell Jr. H.M., Harwalkal V.R., Jenness R., Whitney R. Mc.L. Nomenclature of proteins of cow's milk: fifth revision.// J. Dairy Sci., Champaign, III.- 1984. V. 67. - P. 1599-1631.

77. Erhardt G. Kappa-casein in bovine milk. Evidence of a futher allele (kappa-casein E) in different breeds // J. Animal Breeding and Genetics. 1989. - V. 106.-P. 225-231.

78. Erhardt G., Broad Т.Е., Hill D., Pearce P. Present status of the ovine gene map (Ovies aries); comparison with the bovine map (Bos taurus) // Mamm. Genome. 1996. - № 5. -P. 324 -332.

79. Erlich H.A., Gelfand D., Sninsky J.J. Recent advances in the polymerase chain reaction // Sc. 1989. - P. 1643-1650.

80. Flekna G., Zinovieva N., Mtiller M., Brem G. A teim and cost effective method for kappa-casein genotyping of breeding bulls // Reprod. Dom. Anim. 1997 . -V. 32.-P. 171-173.

81. Flower D.R. The lipocalin protein famely: a role in cell regulation // FEBS Lett. 1994.-V. 354.-P. 7-11.

82. Frank G., Braunitzer G. Milchwissenschaft. -1967. V. 20. - P. 361-365.

83. Fraser D.L., Orskov E.R., Whitelaw E.G., MacLeod N.A. The effeciency of casein n utilization in dairy cows // Livestock Prod. Sci. 1990. - V. 25. - P. 67-78.

84. Freier R., Kletter В., Gery I., Lebenthal E., Geifman M. Intolerance to milk protein // J. Pediatr. 1969. - V. 75. - P. 623-631.

85. Fries R., Ruddle F.H. Gene mapping in domestic animals // Proc. 10th Beltsville Symposium in Agricultural Reserarch. 1986. - V. 10. - P. 19-37.

86. Fugate R.D., Song P.S. Spectroscopic characterization of B-lactoglobulin-retnol complex // Biochim. Biophys. Acta. 1980. - V. 625. - P. 28-42.

87. Gallangher D., Schelling C., Groenen M. et al. Confirmation that the casein gene cluster resides on cattle chromosome 6 // Mamm.Genome. 1994. - V. 5. -P. 524.

88. Geldermann H. Gentechnologie in der Tierzucht, neue Forschungsansatze am Beispiel der Milchprotein-Gene beim Rind // Dt. Tieraryl. W. 1989. - V.96. -S. 52-55.

89. Godovac-Zimmermann J. The structural motif of (3-lactoglobulin and retinol-binding protein: a basis franework for binding and trancport f small hydrophobic molecules? // TIBS. 1988. - V. 13. - P. 64-66.

90. Godovac-Zimmermann J., Krause I., Buchberger J. A novel wild-type (3-lactoglobulin W and its primary sequence // Biol. Chem. Hoppe-Seyler. 1990. V. 371. P. 255-260.

91. Gonyon D.S., Mather R.E., Hines H.C., Haenlein G.F.W., Arave C.W., Gaunt S.N. Associations of bovine blood and milk polymorphisms with lactation traits Holsteins // J. Dairy Sci. 1987. -V. 70. - P. 2585-2598.

92. Graml R.J., Buchberger H., Kirchmeier O., Kirchmeier F., Pirchner F. Genfrequenzschatzung bei Milchproteinen des bauyerischen Fleckviehs // Ziichtungskunde. 1984. - V. 56. - S. 73-87.

93. Graml R.J., Buchberger H., Klostermeyer H., Pirchner F. Pleiotrope Wirkungen von (3-Lactoglobulin- und Caseingenotypen auf Milchinhaltsstoffe des bayerischen Fleckviehs und Braunviehs // Z. Tierzuchtg. Ziichtungsbiol. -1985.-V. 102.-S. 355-370.

94. Graml R.J., Buchberger H., Klostermeyer H., Pirchner F. Markerassoziierte und polygene Korrelation zwischen Casein-, Molkeneiweiss- und Fettgehaltund -mengen bei Fleckvieh und Braunvieh // J. Anim. Breed. Genet. 1989. -V. 106.-P. 96-109.

95. Han S.K., Shin Y.C., Byun H.D. Biochemical, molecular and physiological characterisation of a new beta-casein variant detected in Korean cattle // Animal Genetic. 2000. - V. 31. - № 1. - P. 49-51.

96. Hansen H. The advantages of using Brown Swiss bloodlines // The Cow International. 1990. - № 9. - P. 31.

97. Ikonen Т., Ruottinen O., Erhardt G., Ojala M. Allele frequencies of the major milk proteins in the Finnish Ayrshire and detection of a new kappa-casein variant // Anim. Genet. 1996. - № 27. - P. 179-181.

98. Jeness R. Inter-species comparison of milk proteins // Applied Science Publishers. 1982. - London. - P. 87-114.

99. Jersay Journal //Another Jersay breed advantage revealed. 1990. - V. 63. -Desember.

100. Johns W.K., Yu-Lee L.-Y., Clift S.M., Brown T.L., Rosen J.M. The rat casein multigene family. Fine structure and the evolution of the fi-casein gene // Biol. Chem. -1989.

101. Kaminski S. Zastosowanie wynikow badan polimorfismu odcinkow restrycyjnych DNA do okreslenia genotypu kappa-kazeiny u duhajow // Pr. I mater. Zootechn. 1994. - zesz. Spec. 3. - P. 99-101.

102. Kawamoto Y., Naticava Т., Adachi A., et al. A population genetic study on yaks cattle and their hybrids in Nepal using milk protein variants // Animal. Sci. Technol. Japan. - 1992. - V. 63. - № 6. - P. -563-575.

103. Kolde H.J., Braunitzer G. The prymety structure of ovine (3-lactoglobulin. Isolation of the peptides and sequences // Milchwiss. 1983a. - V. 38. - P. 1820.

104. Li H., Chui X., Arnheim N. Direct electrophoretic detection of the allalic state of single DNA molecules in human sperm by using the polymerase chain reaction // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1990. - V.87. - P. 4580-4584.

105. Liberatoti J. (3-lactoglobulins. Chemical and structural studies // Folia Vet. Lat. 1977. - V. 7. - P. 205-222.

106. Litwenzuk A. Polymorphism of milk proteins in blak and whit cowes Crosses whit different share of Holstein-Friesian cattle blood // Anim. Sci. Rep. and Repst. -1991. -№ 7. P.37-41.

107. Macha J. Genetika analza kappa-kazeinu v mlece skotu // Zivoc vyroba. -1992. -V. 37. № 8. - C. 645-651.

108. Makinen-Kiljunen S. Detection and characterisation of atopic allergens // Ann.Med. 1994. - V. 26. - P. 283-288.

109. Marziali A.S., Ng-Kwai Hang K.F. Effects of milk composition and genetic polymorphism on coagulation properties of milk // J. Dairy Sci. 1986a. -V.69. -P.l 193-1201.

110. Marziali A.S., Ng-Kwai Hang K.F. Relationship between milk protein polymorphisms and cheese yielding capacity // J. Dairy Sci. 1986b. -V.69. -P. 1793-1798.

111. Mayer H., Foissy H. Phanotypisierung genetischer Milchproteinvarianten bei osterreichischem Braun- und Fleckvieh./ Forschungsprojekt Endbericht.- 1992.

112. Mazhar K., Savva D., Skidmor C.J. Analysis of polymorphisms of the bovine .3-lactoglobulingene by PCR//Anim. Genet. 1992. - V.23. Suppl. 1. - P. 65.

113. Mckenzie H.A., Sawyer W.H. Effect of pH on a-lactoglobulins // Na. 1967. -V.214.-P. 1101-1104.

114. Mclean D.M., Graham E.R.B., Ponzoni R.W., Mckenzie H.A. Effect of milk protein genetic variants and composition on heat stability of milk // J. Dairy Res.-1984a. -V. 51.-P. 219-235.

115. Mclean D.M., Graham E.R.B., Ponzoni R.W., Mckenzie H.A Effect of milk protein genetic variants of milk yield and composition // J. Dairy Res. -1984b. -V. 54.-P. 534-546.

116. Mclean D.M. Influence of milk protein genetic on composition, yield and cheesemaking propepties // Animal Genet. -1987. Suppl. 1. - P. 100-102.

117. Medrano J.F., Aguilar-Gordova E. Genotyping of bovine kappa-casein ioci following DNA sequence amplification // Biotechnology. 1990. - № 8. - P. 144-146.

118. Mehrens H.A., Reimerdes E.H. Definition der milchproteine. In: Lebensmittelchemische Gesellschaft (Hrsg.): Milchproteine. Berg's Verlag. -1991.-Hamburg.-S. 17-27.

119. Miller S.A., Dykes D.D., Polesky H.F. A simple salting out procedure for extracting DNA from human nucleated cells // Nucleic Acids Res. 1988. - V. 16. -№3. P. 1215.

120. Miranda G., Anglade P., Mahe M., Erhardt G. Biochemical characterization of the bovine genetic kappa-casein С and E variants // Anim. Genet. 1993. - № 24. -P27-31.

121. Monaco H.L., Zanotti G., Spadon P., Bolgnesi P., Sawyer L., Eliopoulos E.E. Crystal structure of the trigonal form of bovine betta-lactoglobulin and its complex with retinol at 2,5 A resolution // J. Mol. Biol. 1987. - V. 197. - P. 695-706.

122. Nakamura Y., Leppert M., O'Connell P., Wolff R., Culver M., et al. Sciens.-1987.-V. 235.-P. 1616.

123. Nebola M., Dvorak J., Hradil R., Havillek Z. The distribution of kappa-Cn alleles А, В and E in cattle // Anim/ Genet. 1994. - V. 25. - Suppl. 2. - P. 15.

124. Newstead D.F., Sanderson W.B., Conaghan E.F. Influence of whey proteins, preheat treatment and concentration on the heat stability of milk // Proc. 20th Int. Dairy Congr. 1978. - Vol. E. - P. 252-253.

125. Newton C.R., Graham A., Heptinstall L.E., Powell S.J., Summers C., Kalsheker N., Smith J.C., Markharm A.F. Analysis of any point mutation in DNA. The amplification refractory mutation system (ARMS) // Nucl. Acids Res. 1989. - V. 17. - P. 2503 - 2516.

126. Ng-Kwai Hang K.F., Hayes J.F., Moxley J.E., Monardes H.G. Association of genetic variantsof casein and milk, fet and protein production bei dairy cattle // J. Dairy Sci. Champaign. - 1984. -V. 67. - № 3. - P. 835-840.

127. Ng-Kwai Hang K.F., Hayes J.F., Moxley J.E., Monardes H.G. Relatioship between milk protein polymorphism and major milk constituents in Holsttein-Friesian cow // J. Dairy Sci. 1986. - V. 69. - P. 22.

128. Ng-Kwai Hang K.F., Hayes J.F., Moxley J.E., Monardes H.G. Variation in milk protein concentrations associated with genetic polymorphism and environmental factors // J. Dairy Sci. Champaign. - 1987. - V. 70. - № 3. - P. 563-570.

129. Ng-Kwai Hang K.F. Genetic variants of milk proteins and cheese yield // IDF Seminar Cheese yekd and factors affecting its cjntrol. Cork. - 1993.- P. 160166.

130. Palmer A.H. The preparation of a cystalline globulin from the albumin fraction of cow^s milk // J. Biol. Chem. -1934. V. 104. - P. 359-373.

131. Papiz M.Z., Sawyer L., Eliopoulos E.E., North A.C.T., Findlay J.B.C., Sivaprasadarao R., Jones T.A., Newcomer M.E., Kraulis P.J. The structure of 13-Iactoglobulin and its similarity to plasma retinol-binding protein // Na. -1986.-V. 324. -P. 383-385.

132. Pearce R.J. Heat stability in concentrated and non-concentrated milk the effect of urea and J3-lactoglobulin levels and the influence of preheating // J. Dairy Res. - 1979. - V. 46. - P. 385-386.

133. Perez M.D., Sanchez L., Aranda P., Ena J.M., Oria R., Calvo M. Effect of 13-lactoglobulin on the activity of pregastric lipase. A possible role for this protein in ruminant milk//Biochim. Blophys. Acta. 1992.-V. 1123. - P. 151-155.

134. Perez M.D., Diaz de Villegas C., Sanchez L., Aranda P., Ena J.M., Oria R., Calvo M. Interaction of fatty acids with B-lactoglobulin and albumin from ruminant milk // J. Biochem. 1989. - V. 106. - P. 1094-1097.

135. Perez M.D., Puyol P., Ena J.M., Calvo M. Comparison of the ability to bind lipids of 13-lactoglobulin and serum albumin of milk from ruminant and non-ruminant species // J. Dairy Res. 1993. - V. 60. - P. 55-63.

136. Pervaiz S., Brew K. Homology of a-lactoglobulin, serum retinol-binding protein and protein HC // Science. 1985. - V. 228. - P. 335-337.

137. Pierce A.E. B-lactoglobulins in the urine of the newborn suckled calf // Na. -1960.-V. 188.-P. 940-941.

138. Pinder S.J., Perry B.N., Skidmore C.J., Savva D. Analysis of polymorphism in the bovine casein genes by use of the polymerase chain reaction // Anim. Genet.-1991.-V. 22. № l.-P. 11-20.

139. Poli M.A, Antonini A.G. Genetic structure of milk proteins in Argentinian Holstein and Argentinian crolecattle // Hereditas. -1991. № 2. - P. 177-182.

140. Puyol P., Perez M.D., Ena J.M., Calvo M. Interaction of bovine 13-lactoglobulin and other bovine and human whey proteins with retinol and fatty acids // Agric. Biol. Chem. 1991. -V. 55. - P. 2515-2520.

141. Reddy I.M., Kella N.K.D., Kinsella J.E. Structural and conformational basis of the resistance of B-lactoglobulin to peptic and chymotryptic digestion // J. Agric. Food Chem. 1988. - V. 36. - P. 737-741.

142. Robitaille G. Influence of ae-casein and (3-lactoglobulin genetic variants on the heat stability of milk // J. Dairy Res. 1995. - V. 62. - № 4. - P. 593-600.

143. Ron M., Yoffe O., Ezra E., Medrano., Weller J. Determination of effects of milk protein genotype on production traits of Izraeli Holsteins // J. Dairy Sci. -1994.-V. 77.-P. 1106-1113.

144. Rottmann O., Schlee P. Analyse der Milchproteingene mit PCR/RFLP und PASA // Arch. Tierz., Dummerstorf. 1992. - V. 35. - № 14. S. 65-76.

145. Sabour M.P., Lin C.Y., Keongh A., Mechanda S.M., Lu A.J. Effects of selection practiced on the freuquencies of эг-casein and B-lactoglobulingenotipes in Canadian artificial insemination bulls // J. Dairy Sc. 1993. - V. 76.-№ l.-P. 274-280.

146. Saiki R.K, Scharf S.J, Faloona F, Mullis K.M, Horn G.T, Erlich H.A, Arnheim N. Enzymatic amplification of B-globulin genomic sequences and restriction site analysis for diagnosis of sickle cell anemia // Science. 1985. -V. 230.-P. 1350-1354.

147. Saiki R.K, Gelfand D, Staffel S, et al. Primer-directed enzymatic amplication of with a thermostable DNA polymerase // Science. 1988. - V. 239.-P. 487-491.

148. Sansom C.E, North A.C.T, Sawyer L. Structural analysis and classification of lipocalins and related proteins using a profile-search method // Biochim. Biophys. Acta. -1994. V. 1208. - P. 247-255.

149. Saperstein D.A, Nickerson J.M. Restriction fragment length polymorphism analysis using PCR coupled tomrestriction digest // Bio. Techniques. —1991. — V.10.-P. 488-489.

150. Sawyer L, Kontopidis G. The core lipocalin, bovine beta-lactoglobulin // Biochim. Biophys. Acta. 2000. - Oct. 18. - P. 136-148.

151. Schaar J. Effect of k-casein genetic variants and lactation number on the renneting properties of individual milks // J. Dairy Res. 1984. - V. 51. - P. 97-106.

152. Schaar J, Hansson B, Pettersson H. Effects of genetic variants of kappa-casein and beta-lactoglobulin on cheesmaking // J. Dajri Res.- 1985. V. 52. -P. 429-437.

153. Schlee P, Rottmann O, Buchberger J, Graml R, Aumann J, Binser R, Pirchner F. Die Milchproteingene des Fleckviehbullen "Haxl" und dessen Einfluss auf die Allelfrequenzen // Zuchtungskunde. 1992. - V. 64. - № 5. -S. 312-322.

154. Schlieben S., Erhardt G., Senft B. Genotyping of bovine kappa-casein (kappa CnA, -CnB, -Cnc, -CnE) folloving DNA sequence amplification and direct sequenting of kappa Cn-E PCR product // Anim. Genet. 1991. - V. 22. - P. 333-342.

155. Schmidt D.C., Boht P., Koning P.J. Fractiostion and some properies of ae-Cn variants // Dairy Sci. -1966. V. 49. - P. 776-779.

156. Skidmore C.J., Pinder S.J., Perry B.N., Savva O. Genotyping the эз-casein locus in cattlusing PCR // Proc. 4-the World cong. Genet. 1990;

157. Smith L.M., Fantozzi P., Creveling R.K. Study of tryglicerid-protein interaction using a microemulsion-filtration method // J. Am. Chem. Oil Soc. -1983.-V. 60.-P. 691-714.

158. Sorensen R.U., Moore C. Immunology in the pediatrician's office // Pediatr. Clin. North Am. 1994. - V. 41. - P. 691-714.

159. Spector A.A., Fletcher J.C. Binding of long chain fatty acids to 13-lactoglobulin // Lipids. 1970. - V. 41. - P. 403-411.

160. Tejedor Т./, Alfarriba J., Zarazaga J. Estimacion del efecto de arrastre en loci de proteinas lacteas estudio en genado Holstein-Friesian explotado en Espana // «Arch, zootecn». 1987. - № 135. - P. 121-136.

161. Thompson M.P., Kiddy C.A., Pepper L., Zittle C.A. Casein variants in the milk from individual sows // J. Dairy Sci. 1962. - V. 45. - P. 650.

162. Uhrin P., Chrenek P., Vasivek D., Bauerova M., Bulla J. Genotyping of B-lactoglobulin gene in different breeds of cattle in Slovakia // Zivoc. vyroba. -1995.-V. 40.-№2.-P. 49-52.

163. Vasicek D., Ukrin P., Chtnek P., et al. Genotyping of kappa-casein in different cattle breeds in Slovakia // Zivocisna Vyroba. 1995.- № 6. - V. 40. - P. 241244.

164. Velmala R., Mantysaari E.A., Maki-Tanila A. Molecular genetic polymorflsm at the kappa-casein and beta-lactoglobulin loci in Finnish dairy buls // Agr. Sci. Finl. 1993. - V. 2. - № 5. - P. 431-435.

165. Waugh D.F. Formation and structure of casein micelles // In: Milk proteins chemisrty and molecular biologe (ed.: McKenzie H.A.). Acad. Press. - NY. -1971.-P. 3-85.

166. Wilkins R.J., Kuys Y.M. Rapid fi-lactoglobulin genotyping of cattle using the polymerase chain reaction // Anim. Genet. 1992. - V. 23. - P. 175-178.

167. Wu D.Y., Uggozzoli L., Pal B.K., Wallace R.B. Allele-specific enzymatic amplification of beta-globin genomic DNA for diagnosis of sickle cell anemia // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1989. - V. 86. - P. 2757-2760.

168. Zadworny D., Kuhlein U. The identification of the kappa-casein genotype in the Holstein dairy cattle using the polymerase chain reaction // Theor. and Appl. Genet.- 1990.-V. 80. P. 631-634.

169. Zwierzchowski L. Zastosowanie Metody RFLPdo badan nad polimorfizmem genetycznym kazein u budla // Pr. I mater. Zootechn. 1994. - Zest. Spec. 3. -P. 95-97.