ДНК-абзимы при ревматоидном артрите тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.05, кандидат медицинских наук Наумова, Татьяна Евгеньевна

• Наумова, Татьяна Евгеньевна
• кандидат медицинских наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Наумова, Татьяна Евгеньевна

Список сокращений Введение

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Актуальность проблемы.

1.2. Гуморальное звено иммунитета и его место в патогенезе РА.

1.2.1. Иммуногенетические основы предрасположенности

РА: состояние проблемы.

1.2.2. В-клетки и аутоАТ.

1.2.3. Феномен молекулярной мимикрии и его место в патогенезе и развитии РА.

1.2.4. Каталитические аутоантитела или природные абзимы: их роль в реализации гуморальных механизмов иммунитета при РА.

1.2.5. Особенности апоптоза и их связь с гуморальным звеном иммунитета при РА.

1.2.6. Водорастворимые факторы, медиаторы иммунитета и новые мишени для терапии РА.

Глава 2. Материалы и методы исследования.

2.1. Материалы, характеристика больных и биологических образцов.

2.2. Иммунологические методы исследования.

2.2.1. Определение содержания в периферической крови ЦИК и криоглобулинов.

2.2.2. Определение содержания в периферической крови иммуноглобулинов.

2.3. Методы экспериментальной и молекулярной иммунологии.

2.3.1. Метод аффинной сорбции для экспресс-скрининга образцов крови на наличие ДНК-абзимов.

2.3.2. Фракционирование, выделение и очистка ДНК-абзимов из сыворотки крови.

2.3.3. Определение ДНК-гидролизующей активности в препаратах антител.

2.3.4. Электрофорез в агарозном геле.

2.4. Методы статистической обработки результатов

Глава 3. Результаты исследований и их обсуждение.

3.1. ДНК-абзимы у больных с различными клиническими вариантами течения РА.

3.1.1. Частота встречаемости ДНК-абзимов у больных с различными клиническими формами и вариантами течения РА.

3.1.2. Каталитическая (ДНК-гидролизующая) активность ДНК-связывающих аутоантител у больных с различными клиническими формами и вариантами течения РА.

3.2. ДНК-абзимы у больных РА с различными клинико-серологическими вариантами.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «ДНК-абзимы при ревматоидном артрите»

Ревматоидный артрит (РА) относится к аутоиммунным заболеваниям, для которых общим признаком гиперактивации гуморального звена иммунитета является появление в крови полиспецифических аутоантител (аутоАТ), принадлежащих, преимущественно, к экстрацеллюлярным компонентам и входящих в категорию серологических маркеров РА [9,38,40].

Важнейшими в этом списке серологическими маркерами являются ревматоидный фактор (РФ), а также ряд высокоинформативных в диагностическом и прогностическом плане аутоАТ. Особое место занимают ДНК-связывающие аутоАТ, обладающие способностью к перекрестной реактивности с целым рядом вне- и внутриклеточных мишеней и составляющие сегодня важнейший в патогенетическом и критериальном отношении инструмент, позволяющий диагностировать формирование у больных РА внесуставных (в том числе, системных) поражений [38,40,81].

АутоАТ при системных аутоиммунных заболеваниях и РА, в частности, могут подвергаться процессу созревания с изменением порогов авидности, приобретением патогенных идиотипов и рождением принципиально новых свойств. К одной из такой уникальных категорий природных аутоАТ принадлежат ДНК-абзимы или аутоАТ с каталитической (ДНК-гидролизующей активностью), которые, будучи маркерами аутоиммунных и ревматических заболеваний, обнаруживаются на ранних (доклинических) стадиях и активно участвуют в патогенезе [5,6,12,13,46,69, 92,123].

На модели системной красной волчанки (СКВ) было показано присутствие в крови больных ДНК-абзимов, непосредственно реализующих свои каталитические и цитотоксические свойства в процессе развития патологического процесса, причем количественные параметры, иллюстрирующие эти свойства, проявляют выраженную зависимость от степени активности СКВ и полноты картины клинической симптоматики [12-14,49].

Так же было продемонстрировано наличие ДНК-абзимов в сыворотках больных РА [11]. Данный факт вызвал особый интерес в связи с тем, что в отличие от СКВ, где анти-ДНК аутоАТ принадлежит ключевая роль в развитии заболевания [10], патогенетическая значимость семейства ДНК-связывающих аутоАТ при РА ограничена участием этих AT в формировании внесуставных (в том числе, системных) форм синдромальной патологии. При этом не секрет, что перекрестно-реагирующие с целым рядом органных и тканевых мишеней ДНК-абзимы [12,13,56,68] могут вызывать деградацию этих мишеней и, как итог, провоцировать развитие ряда синдромов — в случае кросс-реактивности с эндотелием клубочков почек и сосудистого русла дермы - формирование нефрита и кожного синдрома, а в случае кросс-реактивности с антигенами синовиальной оболочки суставов - возникновение суставного синдрома [19,21,42,49,60,68,69,82,109]. Накопленный нами и другими исследователями клинический опыт и экспериментальный материал показывают, в частности, что серонегативные в отношении ДНК-абзимов случаи СКВ имеют менее благоприятный прогноз, чем в присутствии таких аутоАТ [49,79,118,119,131].

Исследования последних десятилетий значительно расширили представления специалистов в области клинической иммунологии и практической медицины о свойствах аутбантител. Значительное внимание уделяется изучению природных аутоантител, появление которых в организме, как правило, является ранним предвестником аутоиммунного заболевания [30,32,35,47,83,103,104].

Возникновение и формирование пула таких аутоантител, обладающих способностью обратимо связывать антигены собственных органов и тканей, а часто и мимикрирующие эпитопы перекрестно-реагирующих антигенов микробного происхождения, как правило, сопряжено с развитием целого ряда тяжелейших заболеваний, получивших название аутоиммунных. Большое количество проведенных исследований позволило точно установить связь появления аутоантител с развитием аутоиммунных заболеваний, а в ряде случаев установить и механизмы их участия в патологическом процессе.

Заслуживает внимания факт обнаружения аутоантител не только при заболеваниях аутоиммунной природы. Повышенный уровень аутоантител наблюдается при ряде лимфопролиферативных процессов, а также при хронических формах инфекционной патологии (синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД), гепатиты), и в этом случае они, безусловно, также вносят свой вклад в развитие патологического процесса, провоцируя развитие аутоиммунных нарушений в ходе развития и прогрессирования основного заболевания [3,7,70].

Поскольку особенностями большинства заболеваний, при которых обнаруживаются аутоантитела различных уровней специфичности, аффинности и авидности, в той или иной мере являются нарушения нормальной работы иммунной системы, появление повышенного уровня аутоантител при этих заболеваниях не является неожиданным, однако конкретные причины, вызывающие сопряженный с лимфоидной пролиферацией или рецидивирующей инфекцией аутоиммунный процесс, еще не выяснены и требуют дальнейших исследований,

С другой стороны, данные о развитии аутоиммунных процессов, причинах образования и свойствах аутоантител помогают понять базовые механизмы функционирования здоровой иммунной системы и ее влияние на работу других систем организма.

В последние годы было выяснено, что некоторые природные аутоантитела способны проявлять каталитические функции по отношению к различным субстратам и могут быть задействованы как в деградации продуктов распада клеток при патологическом процессе, так и вызывать серьезные разрушения структур живых клеток и тканей, провоцируя в них патологические изменения [4,5].

Другой ряд работ, посвященных цитотоксическим свойствам аутоантител, позволяет также высказать предположение об их гораздо большем, чем предполагалось ранее, значении в развитии аутоиммунного патологического процесса [98,117]. Таким образом, особую актуальность приобретает выявление роли каталитических аутоантител в аутоиммунных процессах и обнаружение механизмов, вызывающих продукцию этих антител.

Накопленные к сегодняшнему дню факты дают возможность строить гипотезы о потенциальной роли аутоантител, в том числе аутоантител с каталитическими и цитотоксическими свойствами, в регуляции жизнедеятельности живых клеток. Все эти ранее не отмеченные свойства аутоантител требуют тщательного дальнейшего изучения, поскольку они могут иметь значение не только в плане фундаментальных научных исследований, но и найти широкое применение в клинической диагностике аутоиммунных заболеваний и заболеваний, сопряженных с аутоиммунными нарушениями, в частности, целого ряда опухолевых и инфекционных процессов.

Исследование каталитических и цитотоксических свойств антител, помимо клинических сфер их применения, интересно и с точки зрения фундаментальных проблем биокатализа, например, при расшифровке механизмов катализа физиологически важных реакций, так и для целей прикладных разработок, направленных на создание новых устойчивых биокатализаторов, способных включать и выключать важнейшие процессы метаболизма. Среди новых типов неферментативных биокатализаторов абзимы, несомненно, представляют особый интерес не только с фундаментальной точки зрения, но и как кандидаты на роль диагностических инструментов и сайт-направленных фармакоконструк-ций будущего.

Патогенетическая роль каталитических аутоантител и, в частности, аутоантител с ДНК-гидролизующей активностью (ДНК-абзимов) и функциональный смысл их каталитической активности остаются до сих пор невыясненными. Вместе с тем, приобретенная в эволюции способность к катализу как дополнительная функция антител в условиях in vivo может оказаться ключевой и весьма перспективной при разработке современной системы серодиашостических и серопрогностических критериев заболеваний аутоиммунной природы, а также при создании новых поколений лекарственных средств (prodrug-терапия) и технологий мониторинга на фоне лечения такими средствами [110,129].

Функциональные свойства и физиологическая роль ДНК-абзимов требуют тщательных исследований, которые могут внести вклад в понимание механизмов развития аутоиммунных нарушений и найти применение, как в клинической диагностике аутоиммунных заболеваний, так и заболеваний, сопряженных с аутоиммунными нарушениями, в частности, многих опухолевых заболеваний крови, сопровождающихся формированием аутоиммунного синдрома.

Необходимость понимания возможной патогенетической роли и клинической значимости ДНК-абзимов у больных с различными вариантами течения РА определили актуальность настоящих исследований.

Цель настоящей работы: Изучение роли ДНК-абзимов в патогенезе ревматоидного артрита и их диагностического значения.

Задачи

1. Изучить частоту обнаружения ДНК-абзимов у больных ревматоидным артритом.

2. Исследовать частоту встречаемости и уровень каталитической (ДНК-гидролизующей) активности ДНК-абзимов у больных с различными клиническими формами и вариантами течения РА.

3. Определить значение ДНК-абзимов и их каталитической активности для оценки тяжести течения и прогрессирования РА.

Научная новизна Впервые установлен факт широкой распространнености ДНК-абзимов у больных с различными вариантами течения РА. Доказана патогенетическая взаимосвязь ДНК - абзимов с клинико-лабораторными данными аутоиммунного синдрома, развитием и прогрессированием болезни.

Выявлена прямая коррелятивная связь между уровнем каталитической активности ДНК-абзимов при РА и клиническими проявлениями заболевания.

Практическая значимость работы.

Определение ДНК-абзимов и их активности является дополнительным диагностическим критерием, позволяющим оценить тяжесть и прогнозировать течение заболевания.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ.

1. Характерной особенностью ДНК-абзимов является их широкое распространение при РА, что свидетельствует в пользу особой роли ДНК-связывающих аутоантител (ДНК-абзимов) в патогенезе РА и формировании полисимптомной картины заболевания.

2. Определение параметров каталитической активности ДНК-абзимов может использоваться как дополнительный метод уточнения степени активности заболевания, оценки тяжести и прогнозирования течения заболевания.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ.

Основные положения и материалы диссертации доложены на совместной научной конференции: кардиопульмонологического отделения, лаборатории клинической возрастной иммунологии МОНИКИ, кафедры терапии ФУВ МОНИКИ, кафедры пульмонологии ФУВ ММА им. И.М. Сеченова, ГНЦ «Институт иммунологии» 27 сентября 2004 года.

ПУБЛИКАЦИИ.

По материалам диссертации опубликовано 18 печатных работ, в том числе статьи в центральных отечественных научных журналах, тезисов докладов на отечественных научных конференциях.

ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ.

Материалы диссертации изложены на 109 страницах машинописного текста, иллюстрированы 10 рисунками и 3 таблицами, 32 диаграммами, состоят из введения, обзора литературы, главы материалы и методы, глав собственных результатов с обсуждением, выводов, перечня практических рекомендаций и указателя литературы, включающего источников (135 источников: 18- отечественных и 117- иностранных авторов). и

Заключение диссертации по теме «Внутренние болезни», Наумова, Татьяна Евгеньевна

Выводы:

1. У больных ревматоидным артритом каталитическая (ДНК-гидролизующая) активность, ассоциированная с ДНК-связывающими аутоанти-телами, выявляется в 41,5% случаев.

2. Наибольшая частота встречаемости и максимальный уровень каталитической активности ДНК - абзимов выявлены у больных с медленнопрогресси-рующим течением заболевания, с длительным течением PA, II-III степенью активности заболевания, у больных с наличием внесуставных (системных) проявлений болезни.

3. Определение ДНК-абзимов и их активности является дополнительным диагностическим критерием, позволяющим уточнить степень активности, оценить тяжесть и прогнозировать течение заболевания.

Практические рекомендации. Определение ДНК - абзимов и их активности у больных РА может быть дополнительным диагностическим критерием, позволяющим уточнить степень активности, оценить тяжесть и прогнозировать течение заболевания.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Наумова, Татьяна Евгеньевна, 2004 год

1. Дубровская В.В. с соавт.//Биохимия- Т. 68- 10- С. 1081-1088.-2003.

2. Насонов В.А., Остапенко М.Г.//Клиническая ревматология. — М., Медицина. 2000.

3. Козырь А.В., Колесников А.В., Яхнина Е.И., Асцатуров И.А., Варламова Е.Ю., Кириллов Е.В. ДНК-гидролизующие антитела при лимфопролифератив-ных заболеваниях // БЭБМ. 1996. -N 2. - С. 204-209.

4. Невинский Г.А., Канышкова Т.Г., Семенов Д.В., Бунева B.II. Каталитически активные антитела и их возможная биологическая функция // Вестник РАМН. -2001.-N 2.-С. 38-45.

5. Невинский Г.А., Канышкова Т.Г., Бунева В.Н. Природные каталитически активные антитела (абзимы) в норме и при патологии .// Биохимия. 2000. — Т. 65, вып. 11.-С. 1473-1487.

6. Пономаренко Н.А., Александрова Е.С., Воробьев И.И., Дурова О.М., Козырь А.В., Колесников А.В. и др. Каталитическая активность нативных антител у мышей с аутоиммунными нарушениями // ДАН. 2000. — Т. 375(2). — С. 256259.

7. Ройт А., Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология. — М., Мир. 2000.

8. Рытикова Н.С. Современные аспекты лабораторной диагностики аутоиммунных заболеваний // Новости прикладной иммунологии и аллергологии. 2000. - N 4. - С. 7-47.

9. Сперанский А.И., Иванова С.М. Аутоиммунные болезни (клинические и теоретические аспекты).// Аллергология и иммунология.- 2002.- 3 (1).- С.- 6283.

10. Сучков С.В., Наумова Т.Е., Третьяк Е.Б., Грачева Т.В., Алекберова З.С., Хитров А.Н., Габибов А.Г. Молекулярные основы патогенности ДНК-связывающих аутоантител.// Иммунология №2.- 2004.- С. 115-119.

11. Сучков С.В. Каталитические антитела и их значение для практической медицины.// Альманах клинической медицины (Сборник трудов МОНИКИ, Юбилейный выпуск)-2003- Т.6 С.З 87-391.

12. Сучков С.В., Наумова Т.Е., Дурова О.М., Габибов А.Г., Алекберова З.С. ДНК-абзимы при аутоиммунной патологии в клинике и эксперименте.// Научно-практическая ревматология №1- 2003.- С. 11-14.

13. Сучков С.В., Габибов А.Г., Алекберова З.С., Хитров А.Н. Каталитические аутоАТ и их будущее в практической медицине.// Тер. Архив -2002 №10- С. 40-45.

14. Сучков С.В. Сравнительное исследование каталитических (ДНК-гидролизующих) и цитотоксических свойств анти-ДНК аутоантител . //БЭБМ. -2001.-Т. 131, N4.-С. 420-423.

15. Сучков С.В. Клинические аспекты использования ДНК-абзимов в практике системных аутоиммунных заболеваний // Научно-практическая ревматология. 2001.-N 3. - С. 111.

16. Сучков С.В. Механизмы цитотоксичности анти-ДНК аутоантител // БЭБМ.-2001.-Т. 131, N5.-С. 560-563.

17. Сучков С.В., Габибов А.Г. Аутоантитела различных уровней специфичности и их клиническое значение при системных и локализованных формах аутоиммунной патологии // Аллергология и иммунология. 2001. - Т. 2(1). - С. 137147.

18. Сучков С.В., Габибов А.Г., Алекберова З.С., Гнучев Н.В. ДНК- абзимы и их клиническое значение при СКВ// Тер. архив.-2001.- №10.- С.-58-65.

19. Alarcon-Segovia D., Ruiz-Arguelles A., Llorente L. Broken dogma: penetration of autoantibodies into living cells // Immunol. Today. 1996.1. Vol. 17(4). P. 163-164.

20. Alberdi F., Dadone J., Ryazanov A., Isenberg D.A., Reichlin M. Cross-reaction of lupus anti-dsDNA antibodies with protein translation factor EF-2 // Clin. Immunol. -2001.- Vol. 98(2). P. 293-300.

21. Aune T.M., Maas K., Moore J.H.,01sen N.J. Gene Expression Profiles in Human Autoimmune Disease.// Current Pharmaceutical Design.- 2003.- 9(19).- P.- 1-13.

22. Baier A., Meineckel I., Gay S., Pap T. Apoptosis in rheumatoid arthritis.// Curr. Opin Rheumatol.- 2003- 15(3)-P.- 274-279.

23. Benoist C., Mathis D. Autoimmunity provoked by infection: how good is the case for T cell epitope mimicry? //Nature Immunology- 2001-2 (9)-P. 797-801.

24. Blackburn G.M., Deng S.X. Catalytic antibodies for the hydrolysis of un-activated peptides // Biochem. Soc. Trans. 1993. - Vol. 21(4). - P. 11021107.

25. Blackburn G.M., Kingsbury G., Jayaweera S., Burton D.R. Expanded transition state analogues // Ciba Found. Symp. 1991. - Vol. 159. - P. 211-222.

26. Cabral A.R., Alarcon-Segovia D. Autoantibodies in systemic lupus erythematosus // Curr. Opin. Rheumatol. 1998. - Vol. 10(5). - P. 409-416.

27. Casiano C.A., Martin S.J., Green D.R., Tan E.M. Selective cleavage of nuclear autoantigens during CD95 (Fas/APO-1)- mediated T cell apoptosis // J. Exp. Med. 1996. - Vol! 184. - P. 765-770.

28. Casiano C.A., Tan E.M. Antinuclear autoantibodies: probes for defining proteolytic events associated with apoptosis // Mol. Biol. Rep. 1996. - Vol. 23(3-4). - P. 211-216.

29. Caspi R.R. Immune mechanisms in uveitis // 1999. Springer Semin. Immunopathol. - Vol. 21(2). - P. 113-124.

30. Chan T.M., Cheng I.K. Identification of endothelial cell membrane proteins that bind anti-DNA antibodies from patients with systemic lupus erythematosus by direct and indirect mechanisms // J. Autoimmun. 1997. - Vol. 10(5). -P. 433-439.

31. Conrad K., Tan E.M., Humbel R.L., Shoenfeld Y. Autoantibodies diagnostic, pathogenic and pathognostic relevance // Clin. Exp. Rheum. - 1997. - Vol. 15. - P. 457-465.

32. Cope A.P. Exploring the reciprocal relationship between immunity and inflammation in chronic inflammatory arthritis.// Rheumatology (Oxford).- 2003.- 42(6).- P.- 716-731.

33. Cunnane G., Doran M. Bresnihan B. Infections and biological therapy in rheumatoid arthritis.// Best Pract. Res. Clin.Rheumatol.- 2003- 17(2)-P.- 345-363.

34. Davidson A., Diamond. B.// Autoimmune Diseases. New England J. Med.- 2001-345(5)- P.-340-350.

35. Dighiero G. Natural autoantibodies, tolerance and autoimmunity // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1997. - Vol. 85. - P. 182-192.

36. Eilat D. Cross-reactions of anti-DNA antibodies and the central dogma of lupus nephritis // Immunol. Today. 1985. - Vol. 6. - P. 123-127.

37. Fairweather D., Kaya Z., Shellam G., Lawson C., Rose N. From infection to autoimmunity. //J. of Autoimmunity- 2001- 16- P.-175-186.

38. Firestein G.S. Evolving concepts of rheumatoid arthritis.//Nature.- 2003.-423(6937).- P.-356-361.

39. Firestein G. S. Somatic mutations in the p53 tumor suppressor gene in rheumatoid arthritis synovium.// Proc. Natl Acad. Sci. USA- 1997- 94-P.- 10895-10900.

40. Friboulet A., Avalle В., Debat H., Thomas D. A possible role of catalytic antibodies in metabolism // Immunol. Today 1999. - Vol. 20(10). - P. 474-475.

41. Fritzler M.J. Autoantibodies: diagnostic fingerprints and etiologic perplexities // Clin. Invest. Med. 1997. - Vol. 20. - P. 50-66.

42. Fukuyama H., Adachi M., Suematsu S., Miwa K., Suda Т., YoshidaN. et al. Transgenic expression of Fas in T cells blocks lymphoproliferation but not autoimmune disease in MRL-lpr/lpr mice // J. Immunol. 1998. - Vol. 160(8). - P. 3805381.

43. Gabibov A.G., Kozyr A.V., Kolesnikov A.V. Disease association and cytotoxic effects of DNA-hydrolyzing autoantibodies // In: Ed. S. Paul. Catalytic Antibodies: Chemical Immunology, KargerN.Y.-2000.-Vol. 77. -P. 130-156.

44. Gabibov A.G, Makarevich O.I. DNA hydrolysis by antibodies: Antibody engineering protocols // Methods in Molecular Biology. Ed. S. Paul. Humana Press Inc., Totowa, NJ. 1995. - Vol. 51. - P. 223-235.

45. Gabibov A.G., Gololobov G.V., Makarevich O.I., Schourov D.V., Cher-nova E.A., Yadav R.P. DNA-hydrolyzing autoantibodies // Appl. Biochem. Biotechnol. 1994. - Vol. 47. - P. 293-302.

46. Gabriel S.E. The epidemiologi of rheumatoid arthritis.// Rheum. Dis. Clin. North. Am. 2001-27- P.-269-281.

47. Gewurz В., Gaudet R., Tortorella D., Wang E., Ploehg H. Virus subversion of immunity: a structural perspective.// Curr. Opin. Immunol.- 2001- 13-P.- 442-450.

48. Goldbach-Mansky R. et. al. Rheumatoid arthritis associated antibodies in patients with sinovitis of recent onset.// Arthritis Res. 2000(2).- P.-23 6-243.

49. Gololobov G.V., Mikhalap S.V., Starov A.V., Kolesnikov A.V., Gabibov A.G. DNA-protein complexes. Natural targets for DNA-hydrolyzing antibodies // Appl. Bioch. Biotechnol. 1994. - Vol. 47(2-3). - P. 305-314.

50. Goronzy J.J., Weyand C.M.// Ageing, autoimmunity and arthritis T-cell senescence and contraction of T-cell repertoire diversity catalysts of autoimmunity and chronic inflammation. Arthritis Res. Ther.- 2003.- 5.- P.-225-234.

51. Han Z. c-Jun N-terminal kinase is required for metalloproteinase expression and joint destruction in inflammatory arthritis. // J. Clin. Invest.- 2001- 108- P.-73-81.

52. Herrmann M., Voll R.E., Kalden J.R. Etiopathogenesis of systemic lupus erythematosus // Immunol. Today 2000. - Vol. 21(9). - P. 424-426.

53. Huck S., Jamin C., Youinou P., Zouali M. High-density expression of CD95 on В cells and underrepresentation of the B-l cell subset in human lupus // J. Autoimmun. 1998. - Vol. 11(5). - P. 449-455.

54. Imamura F. Monoclonal expansion of synoviocytes in rheumatoid arthritis.// Arthritis Rheum.- 1998-41-P.- 1979-1986.

55. Inazuka M. Analysis of p53 tumour suppressor gene somatic mutations in rheumatoid arthritis synovium.// Rheumatology- 2000- 39-P.- 262-266.

56. Inoue K., Kumagai C., Nishioka Т., Taniguchi Y., Osaki F., Kumon Y., Suehiro Т., Hashimoto K., Arisawa T. Malignant rheumatoid arthritis in the young with polyneuritis as an initial symptom.// Nippon Naika Gakkai Zasshi- 2004- 93(1)-P.- 134136.

57. Kinne R. W. Synovial fibroblast-like cells strongly express jun-B and C-fos proto-oncogenes in rheumatoid-and osteoarthritis. //Scand. J. Rheumatol. Suppl.-1995-101-P.- 121-125.

58. Koch J.S., Levine J.S'. Apoptosis and autoimmunity // Curr. Opin. Nephrol. Hypertens. 1997. - Vol. 6(3). - P. 259-266.

59. Kozyr A.V. et. al Antibodies to nuclear antigens.// Appl. Biochem.-2000.-83.-P.-255-270.

60. Kozyr A.V., Kolesnikov A.V., Aleksandrova E.S., Sashchenko L.P., Gnuchev N.V. Novel functional activities of anti-DNA autoantibodies from sera of patients with lymphoproliferative and autoimmune diseases.// Appl. Biochem. Biotechnol. 1998- 75-P.-45-61.

61. Kozyr A.V. A novel method for purification of catalytic antibodies toward DNA from sera of patients with lymphoproliferative diseases // Biochem. Mol. Biol. Int. 1996. - Vol. 39(2). - P. 403-413.

62. Kubota T. // Immunol. Lett 2001. - Vol. 75 (2). - P. 111-115.

63. Li L., Kalaga R., Paul S. Proteolytic components of serum IgG preparations // Clin. Exp. Immunol. 2000. - Vol. 120(2). - P. 261-266.

64. Liu H., Pope R. The role of apoptosis in rheumatoid arthritis.// Curr. Opin Pharmacol.- 2003-3(3)-P.- 317-322.

65. Liu II., Perlman H., Pagliari L. & Pope R. Constitutively activated Akt-1 is vital for the survival of human monocyte-differentiated macrophages: role of Mcl-1, independent of NF-кВ, Bad or caspase activation. //J. Exp. Med.- 2001- 194-P.- 113-125

66. Liu H. TNF-a gene expression in macrophages: regulation by NF-кВ is independent of c-Jun or C/EBPp.// J. Immunol.- 2000- 164-P.- 4277-4285.

67. Lorenz H.M., Herrmann M., Winkler Т., Gaipl U., Kalden J.R. Role of apoptosis in autoimmunity // Apoptosis 2000. - Vol. 5(5). - P. 443-449.

68. Maddison P.J.//Adv. Exp. Med. Biol.- 1999.-V.-455.-P.- 141-145.

69. Mason L.J., Isenberg D.A. Immunopathogenesis of SLE // Baillieres Clin. Rheum. 1998. - Vol. 12(3). - P. 385-403.

70. Masuko-Hongo K., Kato Т., Nishioka K. Virus-associated arthritis.// Best Pract Res Clin Rheumatol.- 2003- 17(2)-P.- 309-318.

71. Mierau R, Genth E. New aspects in autoantibody diagnosis in collagen diseases. // Z. Rheumatol., 2002, 61(4), 355-366.

72. Milgrom F., Swierczynski Z. Are cross-reacting natural antibodies multispecific? // Int. Arch. Allergy Appl. Immunol. 1986. - Vol. 80. - P. 200-210.

73. Monestier M. Autoantibodies to nucleosomes and histone-DNA complex // Methods. 1997. - Vol. 11(1). - P. 36-43.

74. Nepom, G. T. HLA genes associated with rheumatoid arthritis: identification of susceptibility alleles using specific oligonucleotide probes. //Arthritis Rheum.- 1989.-32-P.- 15-21.

75. Nevinsky G.A., Kanyshkova T.G., Semenov D.V., Vlassov A.V. Secretory immunoglobulin A from healthy human mothers' milk catalyzes nucleic acid hydrolysis // Appl. Biochcm. Biotechnol. 2000. - Vol. 83(1-3). - P. 115-129.

76. Oshmori H., Kanayama M.// Curr. Drug Targets Inflamm. Allergy- 2003 -2(3)-P. 232-241.

77. Pagliari L. J., Perlman H., Liu H., Pope R. M. Macrophages require constitutive NF-кВ activation to maintain Al expression and mitochondrial homeostasis. //Mol. Cell. Biol.- 2000- 20-P.- 8855-8865.

78. Pap T. et al. Invasiveness of synovial fibroblasts is regulated by p53 in the SCID mouse in vivo model of cartilage invasion. //Arthritis Rheum.- 2001- 44-P.-676-681.

79. Paul S. Mechanism and functional role of antibody catalysis // Appl. Biochem. Biotechnol. 1998. - Vol. 75(1). - P. 13-24.

80. Paul S. Natural catalytic antibodies // Mol. Biotechnol. 1996.- Vol. 5(3). P. 197-207.

81. Paul E., Manheimer-Lory A., Livneh A., Solomon A., Aranow C., Ghossein C. et al. Pathogenic anti-DNA antibodies in SLE: idiotypic families and genetic origins // Int. Rev. Immunol. -1990.- Vol. 5, N 3-4. P. 295-313.

82. Paul S., Said S.I., Thompson А.В., Voile D.J., Agrawal D.K., Foda H. et al. Characterization of autoantibodies to vasoactive intestinal peptide in asthma // J. Neuroimmunol. 1989. - Vol. 23. -P. 133-142.

83. Perlman H., Pagliari L., Volin M. Regulation of apoptosis and cell cycle activity in rheumatoid arthritis.// Сцгт. Mol. Med.- 2001- 1(5)-P.- 597-608.

84. Perlman H. et al. Rheumatoid arthritis synovial macrophages express the Fas-associated death domain-like interleukin-ip-converting enzyme-inhibitory protein and are refractory to Fas-mediated apoptosis. //Arthritis Rheum- 2001- 44-P.- 21-30.

85. Perniok A., Wedekind F., Herrmann M., Specker C., Schneider M. High levels of circulating early apoptic peripheral blood mononuclear cells in systemic lupus erythematosus//Lupus. 1998. - Vol. 7(2).-P. 113-118.

86. Phan T.G.// J. Exp. Med.-2003.- V.197(7)- P.-845-860.

87. Proussakova O.V., Rabaya N.A., Moshnikova А.В., Telegina E.S., Turanov A., Nanazashvili M.G., Beletsky LP. Oligomerization of soluble Fas-antigen induces its cytotoxicity. //J Biol Chem.- 2003-10-P.- 244-255.

88. Ray S.K., Putterman C,, Diamond B. Pathogenic autoantibodies are routinely generated during the response to foreign antigen: A paradigm for autoimmune disease // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996. - Vol. 93. - P. 2019-2024.

89. Reeves W.I L, Satoh M., Stojanov L., Wang J. Ku and Ki autoantibodies // In: Peter J.B., Shoenfeld Y. (eds) Autoantibodies, Elsevier Science B.V., Amsterdam. — 1996.-P. 449-455.

90. Rosen A., Casciola Rosen L. Macromolecular substrates for the ICE-like proteases during apoptosis // J. Cell. Biochem. 1997. - Vol. 64(1). - P. 5054.

91. Schultz D., Harrington W. Apoptosis: programmed cell death at a molecular level.// Semin Arthritis Rheum.- 2003 -Jun;32(6) -P.-345-369.

92. Sen M., Chamorro M., Reifert J., Corr M. & Carson D. A. Blockade of Wnt-5A/Frizzled 5 signaling inhibits rheumatoid synoviocyte activation.// Arthritis Rheum.- 2001- 44-P.- 772-781.

93. Shiozawa S., Shimizu К., Tanaka K. & Hino K. Studies on the contribution of c-fos/AP-1 to arthritic joint destruction. //J. Clin. Invest.- 1997- 99- P.-1210-1216.

94. Shoenfeld Y. Anti-DNA antibodies: Is DNA the self antigen or a shelf antigen, or are all autoimmune diseases immunogen driven? // Academic Press, San Diego, USA.-1997.-P. 139-148.

95. Shuster A.M.,Gololobov G.V., Kvashuk O.A., Bogomolova A.E., Smir-nov I.V., Gabibov A.G. DNA-hydrolyzing autoantibodies // Science. 1992. -Vol. 256.-P. 665-667.

96. Sibbitt W.L. Oncogenes, growth factors, and autoimmune diseases (review). Anticancer Res., 1991, 11(1), 97-113.

97. Siegel R, Muppidi J, Roberts M, Porter M, Wu Z. Death receptor signaling and autoimmunity.// Immunol Res.- 2003- 27(2-3)-P.- 499-512.

98. Smeets T. J. et al. Poor expression of T cell-derived cytokines and activation and proliferation markers in early rheumatoid synovial tissue.// Clin. Immunol. Im-munopathol.-l 998- 88-P.- 84-90.

99. Suchkov S.V., Gabibov A.G., Gnuchev N.V., Alekberova Z.S. The Distribution of DNA-Abzymes in Patients with Different Types of Systemic and Organ-Specific Autoimmune Disorders // Russian J. Immunol. 2001. — Vol.

100. Suzuki Y., Funato Т., Munakata Y., Sato K. Chemically modified ribozyme to V gene inhibits anti-DNA production and the formation of immune deposits caused by lupus lymphocytes // J. Immunol. 2000. - Vol. 165( 10). - P. 5900-5905.

101. Tan E.M. Autoantibodies and autoimmunity: A three-decade perspective A tribute to Henry G. Kunkel // Ann. N.Y. Acad. Sci. - 1997. - Vol. 815. - P. 1-14.

102. Tan E.M., Feltkamp T.E.W., Smolen J.S., Butcher В., Dawkins R., Fritzler M.J. et al. Range of antinuclear antibodies in «healthy» individuals // Arthritis Rheum. 1997. - Vol. 40. - P. 1601 -1611.

103. Taylor P. Anti-cytokines and cytokines in the treatment of rheumatoid arthritis.// Curr. Pharm. Des.- 2003- 9(14)-P.- 1095-1106.

104. Tellier C. Exploiting antibodies as catalysts: potential therapeutic applications.// Transfus. Clin. Biol.- 2002- 8- P.- 1-8.

105. Walsh D. A., Wade M., Mapp P. I. & Blake D. R. Focally regulated endothelial proliferation and cell death in human synovium.// Am. J. Pathol.- 1998- 152- P.- 691702.

106. Xavier R.M., Yamauchi Y., Nakamura M., Tanigawa Y., Ishikura H., Tsune-matsu T. Antinuclear antibodies in healthy aging people: A prospective study // Mech. Ageing Dev. 1995. - Vol. 78. - P. 145-154.

107. Yamanishi Y. et al. Regional analysis of p53 mutations in rheumatoid arthritis synovium.//Proc. Natl Acad. Sci. USA- 2002- 99-P.- 10025-10030.

108. Zamulaeva I.A., Lekakh I.V., Kiseleva V.I., Gabai V.L., Saenko A.S., Shevchenko A.S. Natural hidden antibodies reacting with DNA or cardiolipin bind to thymocytes and evoke their death // FEBS Lett. 1997. - Vol. 413(2). - P. 231-235.

109. Zhou Z, Menard HA. Autoantigenic posttranslational modifications of proteins: does it apply to rheumatoid arthritis? // Curr Opin Rheumatol. 2002- 14(3).- P.-250-253.