Диагностика и прогноз рака предстательной железы с использованием факторов роста и молекулярно-генетических маркеров тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.14, кандидат медицинских наук Шегай, Петр Викторович

• Шегай, Петр Викторович
• кандидат медицинских наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Шегай, Петр Викторович

Принятые сокращения.

ВВЕДЕНИЕ.

Актуальность темы.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Механизмы пролиферации клеток предстательной железы.

1.1.1. Пролиферация с вовлечением сигнального пути андрогенового рецептора.

1.1.2. Механизмы пролиферации клеток ПЖ, не затрагивающие сигнальный путь АР.

1.2. Механизмы поддержания опухолевого гомеостаза.

1.2.1. Роль факторов роста и их рецепторов в формировании инвазивного фенотипа клеток ПЖ.

1.2.2. Опухолевый ангиогенез.

1.3 Клинико-морфологические критерии диагностики и прогноза, используемые в повседневной практике.

1.4. Оптимизация диагностики и прогноза РПЖ.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Принципы формирования и общая характеристика групп.

2.1.1. Характеристика больных, подвергшихся РПЭ и ЦПВЭ.

2.1.1.1. Характеристика больных РПЖ.

2.1.1.2. Характеристика больных контрольной подгруппы.

2.1.1.3. Сравнение подгрупп больных РПЖ и больных ДГПЖ.

2.1.2. Характеристика больных, подвергшихся мультифокальной биопсии ПЖ.

2.1.2.1. Характеристика больных с выявленным РПЖ или ПИН.

2.1.2.2. Характеристика больных контрольной подгруппы.

2.1.2.3. Сравнение подгрупп больных РПЖ, ПИН, ДГПЖ.

2.2. Общая характеристика применявшихся методов обследования

2.3. Первичная культура аденокарциномы предстательной железы

2.4. Анализ метилирования ДНК.

2.5. Методы статистической обработки данных.

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Анализ и оценка количественного содержания растворимых факторов EGF, HGF и VEGF в супернатантах первичных культур ткани.

3.1.1. Анализ и оценка достоверности различий количественного содержания растворимых факторов EGF, HGF и VEGF у больных раком предстательной железы и в группе контроля.

3.1.2. Анализ и оценка достоверности различий количественного содержания растворимых факторов EGF, HGF и VEGF у больных раком предстательной железы в зависимости от объема ПЖ.

4 3.1.3. Анализ и оценка достоверности различий количественного содержания растворимых факторов EGF, HGF и VEGF у больных РПЖ в зависимости от уровня и плотности ПСА.

3.1.4. Анализ и оценка достоверности различий количественного i содержания растворимых факторов EGF, HGF и VEGF у больных РПЖ в зависимости от процента «позитивных» биоптатов. 3.1.5. Анализ и оценка достоверности различий количественного ] содержания растворимых факторов EGF, HGF и VEGF у больных РПЖ » в зависимости от патоморфологической стадии.

3.1.6. Анализ и оценка достоверности различий количественного содержания растворимых факторов EGF, HGF и VEGF у больных РПЖ в зависимости от степени дифференцировки опухоли по шкале Глисона

3.1.7. Анализ и оценка достоверности различий количественного содержания растворимых факторов EGF, HGF и VEGF у больных РПЖ в зависимости от применения неоадъювантной гормональной терапии и степени гормонального патоморфоза.

3.1.8. Многофакторный анализ клинико-морфологических факторов прогноза и растворимых факторов роста.

3.2. Анализ профиля метилирования генов HIC1, р16, N33 и GSTP1 в группе биопсированных больных.

3.2.1. Анализ и оценка достоверности различий профиля метилирования генов HIC1, pió, N33 и GSTP1 у больных с выявленным РПЖ, ПИН и в группе контроля.

3.2.2. Анализ и оценка достоверности различий профиля метилирования генов HIC1, pió, N33 и GSTP1 у больных РПЖ в зависимости от уровня ПСА.

3.2.3. Анализ и оценка достоверности различий профиля метилирования генов HIC1, р1б, N33 и GSTP1 у больных РПЖ в зависимости от стадии заболевания.

3.2.4. Анализ и оценка достоверности различий профиля метилирования генов HIC1, р1б, N33 и GSTP1 у больных РПЖ в зависимости от степени дифференцировки по шкале Глисона.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Диагностика и прогноз рака предстательной железы с использованием факторов роста и молекулярно-генетических маркеров»

Актуальность темы

Проблема диагностики и лечения рака предстательной железы (РПЖ) является наиболее актуальной в современной онкоурологической практике. Это связано прежде всего с продолжающимся увеличением заболеваемости данной патологией.

В США РПЖ стоит на первом месте в структуре онкологической заболеваемости и второе место по частоте летальных исходов, занимая четвертое место среди всех причин смертности [1, 10]. В странах Европы опухоли предстательной железы также являются наиболее распространенными новообразованиями наравне с раком легкого; ежегодно выявляют более 85000 новых случаев заболевания, что служит причиной 9% смертей мужского населения вызванных онкологическими заболеваниями [2, 3]. Ежегодно число больных РПЖ возрастает во всем мире, а по темпам прироста РПЖ занимает ведущее место в большинстве стран.

В России в 2006 г. зарегистрировано 18092 новых случая РПЖ, причем заболеваемость составила 21,4 на 100 тыс. мужского населения. На долю опухолей предстательной железы приходиться 8,2% от всех злокачественных новообразований у мужчин, занимая 4-е место по заболеваемости после опухолей легких, желудка и кожи. По величине прироста показателя заболеваемости в России РПЖ занимает 1-е место за период 1996-2006 г. (128,26%). Смертность от РПЖ составила 10,08 на 100 тыс. мужского населения. Столь широкое распространение РПЖ ставит это заболевание в ряд наиболее важных социальных проблем современности [17].

Золотым» стандартом диагностики РПЖ являются пальцевое ректальное исследование (ПРИ), трансректальное ультразвуковое исследование предстательной железы (ТРУЗИ) и определение уровня простатспецифического антигена (ПСА). Определение ПСА имеет наибольшую чувствительность и специфичность из трех основных исследований. ПСА является одним из самых исследованных и широко применяемых биомаркеров ранней диагностики РПЖ.

Биомаркерная диагностика РПЖ не является инновационной методикой. Еще в 1938 г. A.B. Gutman и соавт. [2] отметили значительное повышение уровня кислой фосфатазы сыворотки крови у мужчин с метастазами РПЖ. В дальнейшем был разработан более точный метод определения простатспецифической субфракции кислой фосфатазы (ПКФ). Несмотря на невысокую чувствительность и специфичность (повышение ПКФ в 70—80% случаев сопутствовало метастатическому РПЖ и лишь в 10—30% -локализованному), этот биомаркер на протяжении почти 50 лет являлся основным в диагностике РПЖ.

Простатспецифический антиген впервые был выделен M.C.Wang из ткани предстательной железы в 1979 г. В 1980 г. Papsidero создал серологический тест для определения сывороточного ПСА. Концентрация ПСА в эякуляте составляет примерно 1 млн мкг/мл, тогда как в сыворотке крови при отсутствии заболеваний предстательной железы - не более 4 нг/мл. Начиная с 1987 г., ПСА широко используется в диагностике РПЖ, при установлении стадии процесса, оценке эффективности лечения [2, 11].

С конца 80-х годов частота выявления РПЖ почти удвоилась, свидетельствуя об улучшении диагностики РПЖ, что, безусловно, связано с широким внедрением ПСА-диагностики в клиническую практику [11].

Однако ПСА имеет ряд серьезных недостатков. В частности, причиной повышения уровня ПСА являются не только РПЖ, но и ДГПЖ, хронический и острый простатит, массаж железы, эякуляция, биопсия, что говорит о невысокой специфичности метода. Кроме того, в 20—40% случаев РПЖ уровень ПСА не превышает принятую в настоящее время норму 4 нг/мл [2, 11, 15]. Для решения данной проблемы многими специалистами было предложено снизить пороговое значение ПСА с 4 до 2,5 нг/мл [2, 15], что, в свою очередь, привело к выявлению относительно благоприятных опухолей - небольших и высокодифференцированных, представляющих невысокий риск для жизни и здоровья пациента. Клинически эти опухоли трудно дифференцировать имеющимися в арсенале уролога средствами, поэтому в большинстве случаев применяют агрессивное лечение даже относительно благоприятного РПЖ.

Применение ПСА в сочетании с трансректальной мультифокальной биопсией предстательной железы под ультразвуковым контролем позволяет выявлять больший процент заболеваний на ранних стадиях, а также дает возможность на дооперационном этапе определить агрессивность и распространенность РПЖ. Нельзя забывать, однако, что при биопсии часто недооцениваются злокачественность и степень распространенности опухолевого процесса в предстательной железе [8, 9, 15].

К сожалению, на сегодняшний день еще не найден «идеальный онкомаркер» для РПЖ, способный различать агрессивные опухоли от медленнорастущих или латентных заболеваний с относительно хорошим прогнозом и, таким образом, дающий возможность тонкой индивидуализации терапевтической тактики для каждого больного.

Для определения тактики ведения больного с локализованным РПЖ важное значение имеет не только своевременная постановка диагноза, но и возможность прогнозировать дальнейшее течение и выявление потенциально агрессивных форм РПЖ. Очевидна необходимость поиска и внедрения в клиническую практику новых, более чувствительных, специфичных и прогностически эффективных маркеров РПЖ.

Современный подход к диагностике, выбору тактики лечения« и прогнозирования его результатов должен базироваться на глубоких знаниях молекулярных и генетических основ этиологии и патогенеза злокачественного процесса. Сегодня одним из исследовательских направлений является изучение клеточно-клеточного и клеточно-матриксного взаимодействия. В последнее время, достигнуты также большие успехи в изучении генетических факторов, влияющих на различные этапы канцерогенеза РПЖ [2, 9, 10].

С учетом вышесказанного, становится очевидной актуальность проблемы выявления и оценки новых молекулярно-генетических факторов, которые могли бы стать, с одной стороны, маркерами дифференциальной диагностики и прогноза РПЖ, а с другой - явиться мишенью для таргетной терапии, что и побудило нас провести собственное исследование по данной проблеме.

Цель исследования

Оптимизация ранней диагностики РПЖ и определения прогноза течения заболевания на основании изучения клинического значения ростовых факторов и метилирования генов опухолевой супрессии.

Задачи:

1. Изучить количественное содержание растворимых факторов HGF, EGF и VEGF в супернатантах первичных культур аденокарциномы предстательной железы и доброкачественной гиперплазии предстательной железы, провести сравнительный анализ их концентраций.

2. Провести корреляционный анализ концентраций HGF, EGF и VEGF и основных клинико-морфологических характеристик опухолевого процесса и определить прогностическую значимость данных факторов роста.

3. Изучить профиль метилирования генов PI б, HIC1, N33 и GSTP1 в биопсийном материале от больных раком предстательной железы, простатической интраэпителиальной неоплазией и доброкачественной гиперплазией предстательной железы, провести их сравнительный анализ.

4. Оценить прогностическую значимость метилирования генов PI 6, HIC1, N33 и GSTP1 для ранней диагностики рака предстательной железы и разработать показания к проведению повторных биопсии.

Научная новизна

В исследовании впервые проведено изучение содержания ростовых факторов ЬЮБ, ЕОБ и УЕОБ в супернатантах первичных культур, полученных от больных РПЖ и ДГПЖ, что позволило наиболее точно проанализировать роль данных факторов в развитии опухолевого процесса.

На большом клиническом материале впервые проведен дифференцированный анализ прогностической роли различных факторов роста и продемонстрировано их значение для прогноза распространенности опухолевого процесса.

В работе исследована роль гормональной регуляции в продукции факторов роста НОБ, ЕОБ и УЕОБ и впервые показана стимуляция синтеза ЬЮР на фоне проведения НеоГТ, что, возможно, является одним из механизмов гормональной резистентности опухоли.

Выявлена достоверная корреляция продукции НвБ с метастатическим потенциалом опухоли.

Впервые проведен анализ частоты метилирования генов Р16, Н1С1, N33 и С8ТР1 в биопсийном материале при РПЖ, ПИН и ДГПЖ, при этом показаны чувствительность и специфичность метилирования данных генов для каждого патологического процесса.

Проведенное исследование показало возможность использования анализа метилирования генов Р16, Н1С1, N33 и С8ТР1 для ранней диагностики РПЖ и определения показаний к повторной биопсии ПЖ.

Практическая значимость

На основании изучения содержания HGF, EGF и VEGF в первичных культурах аденокарциномы и доброкачественной гиперплазии ПЖ показана возможность использования данных факторов роста для диагностики РПЖ и оценки распространенности опухолевого процесса.

Установлено, что экспрессия HGF связана с высоким метастатическим потенциалом РПЖ, а концентрация VEGF достоверно коррелирует с распространенностью первичной опухоли ПЖ. В то же время продемонстрирована низкая специфичность EGF для оценки распространенности опухолевого процесса.

Проведенный в исследовании анализ профиля метилирования генов опухолевой супрессии в биопсийном материале показал значение определения метилирования для дифференциальной диагностики РПЖ, ПИН, ДГПЖ.

Выявлено, что частота метилирования гена GSTP1 при РПЖ достоверно выше, чем при ПИН и ДГПЖ, а метилирование гена N33 определяется в биопсийном материале только из участков аденокарциномы. В исследовании показано, что изучение профиля метилирования GSTP1 и N33 может быть использовано для определения показаний к повторной биопсии предстательной железы у больных с ДГПЖ и ПИН с целью ранней диагностики РПЖ.

Заключение диссертации по теме «Онкология», Шегай, Петр Викторович

Выводы

1. В культурах ткани полученных от больных РПЖ и ДГПЖ концентрация факторов роста достоверно различалась. Медиана концентрации EGF в подгруппе РПЖ составила 298,1 pg/ml, в подгруппе ДГПЖ - 233,15 pg/ml (р=0,031); у больных РПЖ медиана уровня HGF - 1162,6 pg/ml, ДГПЖ - 104,85 pg/ml (р<0,001); медиана уровня VEGF в подгруппе РПЖ составила 606,5 pg/ml, в подгруппе ДГПЖ - 148,6 pg/ml (р<0,001).

2. Уровень экспрессии факторов роста достоверно коррелировал с такими характеристиками опухолевого процесса, как ЭИ, наличие метастазов в регионарных лимфатических узлах, уровень сывороточного ПСА, % «позитивных» биоптатов, степень дифференцировки по шкале Глисона. Концентрация VEGF является наиболее прогностически значимым фактором в прогнозе ЭИ опухоли ПЖ (коэф. корреляции = 0,54; р<0,001), а уровень HGF для метастатического поражения лимфатических узлов (коэф. корреляции = 0,51; р<0,001).

3. Концентрация EGF статистически достоверно обратно пропорционально коррелировала с проведением неоадъювантной гормональной терапии (коэф. корреляции = -0,43; р<0,001), что косвенно свидетельствует о гормональной зависимости выработки этого фактора роста при РПЖ. Уровень экспрессии HGF сильно коррелировал с применением медикаментозной кастрации (коэф. корреляции = 0,57; р<0,001), что говорит об андроген-независимой регуляции этого фактора роста в развитии РПЖ.

4. Частота метилирования генов GSTP1 и N33 при РПЖ достоверно выше, чем при ДГПЖ и ПИН (р=0,005 и р=0,013 соответственно). Профиль метилирования генов pió, HIC1 при РПЖ, ПИН и ДГПЖ достоверно не различается.

5. Чувствительность метода определения метилирования составила для GSTP1 41%, для N33 19%, а специфичность для GSTP1 87%, для N33 составила 100%.

Практические рекомендации

1. Определение факторов роста НОР и УЕОР в биопсийном материале позволяет более точно прогнозировать патоморфологическую стадию опухолевого процесса.

2. Уровни УЕОБ в биопсийном материале превышающие пороговое значение (190 р£/ш1), свидетельствуют о более высоком риске развития ЭИ. В связи, с чем при высоких значениях УЕОБ выполнение нервосберегающей РПЭ не целесообразно.

3. Уровни НвБ в биопсийном материале превышающие пороговое значение (170 р§/ш1), свидетельствуют о более высоком риске лимфогенного метастазировании, что позволяет рекомендовать выполнение расширенной лимфаденэктомии при РПЭ или перед проведением ДЛТ.

4. Гиперметилирование генов N33 и ОБТР1 в биопсийном материале от больных с неопухолевыми изменениями ПЖ (ПИН, ДГПЖ) является дополнительным показанием для проведения повторной биопсии ПЖ вне зависимости от динамики ПСА.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Шегай, Петр Викторович, 2008 год

1. Алексеев Б.Я., Нюшко K.M. Рекомендации европейской ассоциации урологов по диагностике и лечению рака предстательной железы.// Онкоурология Москва, 2007, №4, с. 41-44.

2. Аляев Ю.Г., Безруков Е.А., Шестиперов П.А. Молекулярная патология рака предстательной железы: диагностическая и прогностическая значимость основных маркеров.// Онкоурология Москва, 2006, №2, с. 45-54.

3. Велиев Е.И., Рыбальченко A.B., Широков Д.А., Тупицын H.H. Экспрессия интерлейкина-6 человека и его вирусного гомолога в ткани рака предстательной железы.// Онкоурология Москва, 2007, №1, с. 6569.

4. Гладских О.П., Федоров Д.Н., Иванов A.A. Роль стромально-эпителиальных взаимодействий в регуляции процессов репарации и клеточного роста.// Вестник НИИ молекулярной медицины Москва, 2002, №2, с. 5-28.

5. Гладских О.П., Иванов A.A., Алексеев Б.Я. и др. Роль трансформирующего фактора роста ß\ в регуляции инвазивного роста аденокарциномы предстательной железы.// Архив патологии Москва, 2004, №3, с. 27-30

6. Гладских О.П., Андреева Ю.Ю., Винаров А.З. и др. Первичная культура аденокарциномы простаты. Модель для изучения стромально-эпителиальных взаимодействий.// Архив патологии 2002, №6, с. 35-38.

7. Гундорова JI.B., Автандилов Г.Г., Захматов Ю.М., и др. Сравнительная оценка гистологических классификаций злокачественных опухолей предстательной железы ВОЗ и Глисона.// Урология Москва, 2003, №5, с. 9-13

8. Коган М.И., Якимчук Т.П., Шишков A.B., Волдохин A.B. Сравнительный анализ диагностических методов при первичномобследовании больных раком предстательной железы.// Урология -Москва, 1999, с. 38-41

9. Кулыпинский Н.Е., Соловьев Ю.Н., Трапезникова М.Ф. Рак предстательной железы. Москва, 2002.

10. Ю.Матвеев Б. П. Клиническая онкоурология. Москва, 2003.

11. П.Матвеев Б.П., Комарова Л.Е., Бухаркин Б.В. и др. Итоги 5-летнего скрининга рака предстательной железы.// Урология Москва, 2003, №1, с. 6-10

12. Медведев В. Л. Гормонорезистентный эпителиальный рак предстательной железы.// Урология Москва, 2001, №4, с. 29-33

13. Медведев В.Л., Мационис А.Э., Медведева Л.А. Клиническое значение гистологических типов рака предстательной железы.// Урология -Москва, 2003, №6, с. 10-14

14. Петров С.Б., Ракул С.А., Новиков Р.В., Елоев Р.А. Прогноз статуса хирургического края после радикальной позадилонной простатэктомии на основании данных биопсии простаты.// Онкоурология 2007, №2, с. 51-56.

15. Пушкарь Д.Ю. Простат-специфический антиген и биопсия предстательной железы Москва, 2003.

16. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Москва, 2003.

17. П.Чиссов В.И., Дарьялова С.Л. и др. Избранные лекции по клинической онкологии. -Москва, 2000.

18. Чиссов В.И., Старинский В.В., Петрова Г.В. Онкологическая заболеваемость в России в 2006 году. Москва, 2008.

19. Algaba F., Epstein J.I., Fabus G. et al. Working standards in prostatic intraepithelial neoplasia and atypical adenomatous hyperplasia.// Pathol Res Pract. 1995;191:836-837.

20. Amin M., Grignon D., Humphrey P.A. et al. Gleason Grading of Prostate Cancer: A Contemporary Approach. Philadelphia, PA: Lippincott Williams & Wilkins, 2004.

21. Armstrong A.J. Carducci M.A. Novel therapeutic approaches to advanced prostate cancer// Clin Adv Hematol Oncol 2005;3:271-282.

22. Armstrong AJ. Carducci M.A. Advanced prostate cancer: the future.//Can J Urol 2005;12:42-47.

23. Attisano L., Wrana J.L., Lopez-Casillas F., Massague J. TGF-beta receptors and actions.// Biochim. Biophys. Acta, 1994, v. 1222(1), p.71-80.

24. Babaian R.J., Troncoso P., Bhadkamkar V.A. et al. Analysis of dinicopathologic factors predicting outcome after radical prostatectomy.// Cancer 2001;91:1414-1422.

25. Bastacky S.I., Walsh P.C., Epstein J.I. Relationship between perineural tumor invasion on needle biopsy and radical prostatectomy capsular penetration in clinical stage B carcinoma of the prostate.// Am J Surg Pathol 1993;17:336-341.

26. Bentel J.M., Tilley W.D.// J. Endocrinol., 1996, v. 151, p. 1 -11.

27. Bishara T., Ramnani D.M., Epstein J.I. High-grade prostatic intraepithelial neoplasia on needle biopsy: risk of cancer on repeat biopsy related to number of involved cores and morphologic pattern.// Am J Surg Pathol -2004;28:629-633.

28. Bono A.V., Celato N., Cova V. et al. Microvessel density in prostate carcinoma.// Prostate Cancer Prostatic Dis 2002;5;7.

29. Borre M., Offersen B.V., Nerstrom B. et al. Microvessel density predicts survival in prostate cancer patients subjected to watchful waiting.// Br J Cancer 1998; 78; 940-944.

30. Bostwick D.G., Brawer M.K. Prostatic intra-epithelial neoplasia and early invasion in prostate cancer.// Cancer 1987;59:788-794.

31. Bussolino F., Di Renzo M.F., Ziehe M. et al. Hepatocyte growth factor is a potent angiogenic factor which stimulates endothelial cell motility and growth.// J Cell Biol 1992, 119:629-641.

32. Chan T.Y., Partin A.W., Walsh P.C. et al. The prognostic significance of Gleason score 3+4 versus Gleason score 4+3 tumor at radical prostatectomy.// Urology 2000;56:823-827.

33. Chen C.D., Welsbie D.S., Tran C. et al. Molecular determinants of resistance to antiandrogen therapy.// Nat Med 2004;10:33-39.

34. Clark J.H., Schräder W.T., O'Malley B. et al. Williams Textbook of Endocrinology.// Saunders, Philadelphia 2000, p. 35-90.

35. Coffey D.S. The biology of the prostate. In: Lepor H., Lawson R.K.,eds Prostate diseases.// Philadelphia: Saunders 1993, p.28-56.

36. Cohen D.W., Simak R., Fair W.R., Melamed J., Scher H.I., Cordon-Cardo C. Expression of transforming growth factor-alpha and the epidermal growth factor receptor in human prostate tissues. // Urol., 1994, v. 152 (6 Pt. I), p.2120-2124.

37. Cohen P., Peehl D.M., Rosenfeld R.G. Insulin-like growth factor 1 in relation to prostate cancer and benign prostatic hyperplasia.// Br J Cancer -1998, v.78(4), p.554-6.

38. Cross M.J., Dixelius J., Matsumoto T. et al. VEGF-receptor signal transduction.// Trends Biochem Sci 2003;28:488-494.

39. D'Amico A.V., Whittington R., Malkowicz S.B. et al. Biochemical outcome after radical prostatectomy, external beam radiation therapy, or interstitial radiation therapy for clinically localized prostate cancer// JAMA — 1998;280:969-974.

40. Darne C., Veyssiere G., Jean C. Phorbol ester causes ligand-independent activation of the androgen receptor.// Eur. J. Biochem. 1998, v.256, p.541-552.

41. Di Lorenzo G., De Placido S., Autorino R. et al. Expression of biomarkers modulating prostate cancer progression: implications in the treatment of the disease.//Prostate Cancer Prostatic Dis 2005;8:54- 59.

42. Dvorak H.F. Vascular permeability factor/vascular endothelial growth factor: a critical cytokine in tumor angiogenesis and a potential target for diagnosis and therapy.// J Clin Oncol 2002;20:4368-4380.

43. Elo J.P., Kvist L., Leinomen K. et 2X.II J. Clin. Endocrinol Metab. 1995, v.80, p.3494-3500.

44. Epstein J.I., Bizo V.G., Walsh P.C. Correlation of pathologic findings with progression after radical retropubic prostatectomy.// Cancer 1993;71:3582-3593.

45. Epstein J.I., Partin A.W., Potter S.R. et al. Adenocarcinoma of the prostate invading the seminal vesicle: Prognostic stratification based on pathologic parameters.// Urology 2000,56:283-288.

46. Epstein J.I., Partin A.W., Sauvageot J. et al. Prediction of progression following radical prostatectomy: A multivariate analysis of 721 men with long-term follow-up.// Am J Surg Pathol 1996;20:286-292.

47. Ferrara N., Gerber H.P., Le Couter J. The biology of VEGF and its receptors.// Nat Med 2003;9:669-676.

48. Ferrara N. Molecular and biological properties of vascular endothelial growth factor.// J Mol Med 1999; 77:527-543.

49. Ferrara N. Vascular endothelial growth factor and the regulation of angiogenesis.// Rec Prog Horm Res 2000;55:15-35; discussion 35-36.

50. Ferrara N., Henzel W.J. Pituitary follicular cells secrete a novel heparin-binding growth factor specific for vascular endothelial cells.// Biochem Biophys Res Commun 1989;161:851-858.

51. Fidler I.J. Angiogenic heterogeneity: regulation of neoplastic angiogenesis by the organ microenvironment.// J Natl Cancer Inst 2001;93:1040-1041.

52. Fidler I.J. Critical determinants of metastasis.// Semin Cancer Biol -2002;12:89-96.

53. Folkman J. Angiogenesis in cancer, vascular, rheumatoid and other disease.//Nat Med 1995;1:27-31.

54. Folkman J. Tumor angiogenesis: therapeutic implications.// N Engl J Med -1971;285:1182-1186.

55. Fowler J. Jr, Whitmore W.F. The incidence and extent of pelvic lymph node metastasis in apparently localized prostatic cancer.// Cancer 1981;47:294-1-2949.

56. Freedland S.J., Aronson W.J., Moul J.W., Baiiez L.L. Rising PSA in nonmetastatic prostate cancer.// Oncology (Williston Park). 2007 Nov;21(12):1436-45; discussion 1449, 1452, 1454.

57. Fujiuchi Y., Nagakawa 0., Murakami K., Fuse H., Saiki I. Effect of hepatocyte growth factor on invasion of prostate cancer cell lines.// Oncology reports 2003,10: 1001-1006.

58. Gaddipati J.P., McLeod D.G., Heidelberg H.B., Sesterhenn I.A., Finger M.J., Moul J.W., Srivastava S. Frequent detection of codon 877 mutation in the androgen receptor gene in advanced prostate cancers.// Cancer Res. 1994, 54(11):2861-4.

59. Gelmann E.P. Molecular biology of the androgen receptor.// J Clin Oncol -2002:20:3001-15.

60. George D.J., Halabi S., Shepard T.F. et al. Prognostic significance of plasma vascular endothelial growth factor levels in patients with hormone-refractory prostate cancer treated on Cancer and Leukemia Group B 9480.// Clin Cancer Res 2001;7:1932-1936.

61. Gimbrone M.A. Jr., Leapman S.B., Cotran R.S. et al. Tumor dormancy in vivo by prevention of neovascularization.// J Exp Med 1972;136:261-276.

62. Gu Z., Thomas G., Yamashiro J. et al. Prostate stem cell antigen (PSCA) expression increases with high Gleason score, advanced stage and bone metastasis in prostate cancer.// Oncogene 2000;19:1288-1296.

63. Guo Y., Jacobs S.C., Kyprianou N. Down-regulation of protein and mRNA expression for transforming growth factor-beta (TGF-betal) type I and type II receptors in human prostate cancer.// Int J Cancer 1997;71:573-579.

64. Gustavsson H., Welen K., Damber J.E. Transition of an androgen-dependent human prostate cancer cell line into an androgen-independent subline is associated with increased angiogenesis.// Prostate 2005;62:364- 373.

65. Haggman M.J., Macoska J.A., WojnoK.J. et al. The relationship between prostatic intraepithelial neoplasia and prostate cancer: critical issues.// J Urol 1997; 158:12-22.

66. Han M., Partin A.W., Pound C.R. et al. Long term biochemical diseasefree and cancer-specific survival following anatomic radical retropubicprostatectomy: The 15-year Johns Hopkins Experience.// Urol Clin N Am -2001;28:555-565.

67. Han M., Partin A.W., Zahurak M. et al. Biochemical (prostate specific antigen) recurrence probability following radical prostatectomy for clinically localized prostate cancer.// J Urol 2003;169:517-523.

68. Hanahan D., Folkman J. Patterns and emerging mechanisms of the angiogenic switch during tumorigenesis.// Cell 1996;86:353-364.

69. Hanahan D., Wagner E.F., Palmiter R.D. The origins of oncomice: a history of the first transgenic mice genetically engineered to develop cancer.// Genes Dev. 2007 Sep 15;21(18):2258-70.

70. Hashem M., Essam T. Hepatocyte groeth factor as a tumor marker in the serum of patients with prostate cancer. // J. Egypt. Natl. Cane. Inst. 2005. -Vol. 17(2).-P.l 14-120.

71. Hobisch A., Culig Z., Radmayar C. et al. Cancer Res. 1995, v.55, p.3068-3072.

72. Hobisch A., Eder I.E., Putz T., Horninger W., Bartsch G., Klocker H., Culig Z. Interleukin-6 regulates prostate-specific protein expression in prostate carcinoma cells by activation of the androgen receptor.// Cancer Res. 1998, v.58, p.4640-4651.

73. Hofer M.D., Fecko A., Shen R. et al. Expression of the platelet-derived growth factor receptor in prostate cancer and treatment implications with tyrosine kinase inhibitors.// Neoplasia 2004;6:503-512.

74. Holmgren* L., O'Reilly M.S., Folkman J. Dormancy of micrometastases: balanced proliferation and apoptosis in the presence of angiogenesissuppression.//Nat Med 1995;1:149-153.

75. Huggins C., Hodges C.V. Studies on prostatic cancer: I. The effect of castration, of estrogen and of androgen injection on serum phosphatases in metastatic carcinoma of the prostate.// Arch Surg 1941;43:209.

76. Huggins C., Stevens A.R. The effect of castration on benign hypertrophy of the prostate in man. // J. Urol. 1940. - Vol. 43. - P.705.

77. Humphrey A.P., Zhu X., Zarnegar R., Swanson. PE. et al. Hepatocyte growth factor and its receptor (c-MET) in prostatic carcinoma.// Am J Pathol 1995, 147:386-396.

78. Hunter J. Lectures on the principles of surgery. In: Palmer JF, ed.// The Works of John Hunter, F.R.S. Vol. 1. London: Longman, Rees, Orne, Brown, Green, and Longman, 1835.

79. Ikonen T., Palvimo J.J., Kallio P.J. et al. Stimulation of androgenrregulated transactivation by modulators of protein phosphorylation.// Endocrinology -1994, v.l35,p.l359-1366.

80. Isaacs J.T. New strategies for the medical treatment of prostate cancer. //BJU Int. 2005, v.96 Suppl. 2:35-40.

81. Isaacs J.T., Isaacs W.B. Androgen receptor outwits prostate cancer drugs.// Nat Med-2004; 10:26-27.

82. Jackson M.W., Bentel J.M., Tillet W.D. Vascular endothelial growth factor (VEGF) expression in prostate cancer and benign prostatic hyperplasia.// J.Urol. 1997, v.157(6), p.2323-2328.

83. Jain R.K., Carmeliet P.F. Vessels of death or life.// Sci Am 2001;285:38-45.

84. Jiang Z., Wu C.L., Woda B.A. et al. P504S/alpha-methylacyl- CoA racemase: a useful marker for diagnosis of small foci of prostatic carcinoma on needle biopsy.// Am J Surg Pathol 2002;26:1169-1174.

85. Kakehi Y., Oka H., Mitsumori K. et al.// Urol. Oncol 1996, v.2, p.131-135.

86. Kattan M.W., Eastham J.A., Wheeler T.M. et al. Counseling men withprostate cancer: a- nomogram* for predicting the presence of small,moderately differentiated, confined tumors.// J Urol 2003;170:1792-1797.

87. Kattan M.W., Eastham J. Algorithms for prostatespecific antigen recurrence after treatment of localized prostate cancer.// Clin Prostate Cancer- 2003;1: 221-226.

88. Kattan M.W., Eastham J.A., Wheeler T.M. et al. Counseling men with prostate cancer: a nomogram for predicting the presence of small, moderately differentiated, confined tumors.// J Urol 2003;170:1792-1797.

89. Kestin L.L., Goldstein N.S., Vicini F.A. et al. Percentage of positive biopsy cores as predictor of clinical outcome in prostate cancer treated with radiotherapy.// J Urol 2002;168:1994-1999.

90. Kim I.Y., Ann H.J., Zelner D.J. et al. Genetic change in transforming growth factor beta (TGF-beta) receptor type I gene correlates with insensitivity to TGF-beta 1 in human prostate cancer cells.// Cancer Res -1996,56:44-48.

91. Ko Y.J., Small E.J., Kabbinavar F. et al. A multi-institutional phase II study of SU101, a platelet-derived growth factor receptor inhibitor, for patients with hormone-refractory prostate cancer.// Clin Cancer Res -2001;7:800-805.

92. Koh H., Kattan M.W., Scardino P.T. et al. A nomogram to predict seminal vesicle invasion by the extent and location of cancer in systematic biopsy results.// J Urol 2003;170:1203-1208.

93. Kohli M., Kaushal V., Spencer H.J. et al. Prospective study of circulating angiogenic markers in prostatespecific antigen (PSA)-stable and PSA-progressive hormone-sensitive advanced prostate cancer.// Urology -2003;61:9.

94. Kostenuik P.J., Singh G., Orr F.W. Transforming growth factor beta upregulates the integrin-mediated adhesion of human prostatic carcinoma cells to type I collagen.// Clin Exp. Metastasis 1997, v. 15(1), p.41-52.

95. Kronz J.D., Allan C.H., Shaikh A.A. et al. Predicting cancer following a diagnosis of high-grade prostatic intraepithelial neoplasia on needle biopsy: data on men with more than one follow-up biopsy.// Am J Surg Pathol -2001;25:1079-1085.

96. Kurimoto S., Moriyama N., Horie S. et al. Co-expression of hepatocyte growth factor and its receptor in human prostate cancer.// Histochem J 1998, 30: 27-32.

97. Kyprianou N., English H.F., Isaacs J.T. Programmed cell death during regression of PC-82 human prostate cancer following androgen ablation. // Cancer Res. 1990, v.50(12), p.3748-53.

98. LandstromM., Eklov S., Colosetti P. et al. Estrogen induces apoptosis in a rat prostatic adenocarcinoma: association with an increased expression of TGF-beta 1 and its type-I and type-II receptors.// Int. J. Cancer 1996, v.67, p.573-579.

99. Levine A.C., Liu X.-H., Greenberg P.D. et al. Androgens induce the expression of vascular endothelial growth factor in human fetal prostatic fibroblasts.// Endocrinology 1998, v. 139(11), p.46-72-4678.

100. Li R., Younes M., Wheeler T.M. et al. Expression of vascular endothelial growth factor receptor-3 (VEGFR- 3) in human prostate.// Prostate 2004;58:193-199.

101. Li S.L., Goko H., Xu Z.D. et al. Expression of insulin-like growth factor (IGF)-II in human prostate, breast, bladder, and paraganglioma tumors. // Cell Tissue Res. 1998, v.291, p.469-479.

102. Lind M., Deleuran B., Thestrup-Pedersen K. et al. Chemotaxis of human osteoblasts. Effects of osteotropic growth factors.// Acta Pathol. Microbiol. Immunol. Scand. 1995, v.103, p.140-146.

103. Liotta LA, Kleinerman J, Saidel GM. Quantitative relationships of intravascular tumor cells, tumor vessels, and pulmonary metastases following tumor implantation.// Cancer Res 1974;34:997-1004.

104. MacDougall C.A., Vargas M., Soares C.R. et al. Involvement of HGF/SF-Met signaling in prostate adenocarcinoma cells: evidence for alternative leading to a metastatic phenotype in Pr-14c. 2005. - Vol. 64(2). - P.139-148.

105. Martikainen P., Kyprianou N., Isaacs I.T. Effect of transforming growth factor-beta 1 on proliferation and death of rat prostatic cells.// Endocrinology 1990;127:2963-2968.

106. Massague J. Gomis R.R. The logic of TGFbeta signaling. // FEBS Lett. -2006, v.580(12), p.2811-20.

107. Mathew P., Thall P.F., Joned D. et al. Platelet-derived growth factor receptor inhibitor imatinib mesylate and docetaxel: a modular phase I trial in androgenindependent prostate cancer.// J Clin Oncol 2004;22: 3323-3329.

108. McColl B.K., Baldwin M.E., Roufail F. et al. Plasmin activates the lymphangiogenic growth factors VEGF-C and VEGF-D.// J Exp Med -2003;198:863-868.

109. McDonnell T.J., Troncoso P., Brisbay S.M. et al. Expression of the protooncogene bcl-2 in the prostate and its association with emergence of androgen-independent prostate cancer.// Cancer Res 1992;52:6940-6944.

110. Mian B.M., Troncoso P., Okihara K. et al. Outcome of patients with Gleason score 8 or higher prostate cancer following radical prostatectomy alone.// J Urol 2002;167:1675-1680.

111. Millauer B., Wizigmann-Voos S., Schnurch H. et al. High affinity VEGF binding and developmental expression suggest Flk-1 as a major regulator ofvasculogenesis and angiogenesis.// Cell 1993;72:835-846.

112. Mosse C.A., Magi-Galuzi C., Tsuzuki T. et al. The prognostic significance of tertiary Gleason pattern 5 in radical prostatectomy specimens.// Am J Surg Pathol 2004;28:394-398.

113. Naish S.J. Immunochemical staining methods.// DAKO Corp. -California. -1989.

114. Naumov G.N., Akslen L.A., Folkman J. Role of angiogenesis in human tumor dormancy: animal models of the angiogenic switch.// Cell Cycle. 2006, v.5(16), p.1779-87.

115. Naya Y., Ayala A.G., Tamboli P. et al. Can the number of cores with high-grade prostate intraepithelial neoplasia predict cancer in men who undergo repeat biopsy?// Urology 2004;63:503-508.

116. Nicholson B., Schaefer G., Theodorescu D. Angiogenesis in prostate cancer: biology and therapeutic opportunities.// Cancer Metastasis Rev -2001;20:297-319.

117. Nishimura K., Kitamura M., Miura H. et al. Prostate stromal cell-derived hepatocyte growth factor induces invasion of prostate cancer cell line DU145 through tumor-stromal interaction.// Prostate. 1999. - Vol. (41(3). — P.145-153.

118. Nishimura K., Kitamura M., Takada S. et al. Regulation of invasive potential of human prostate cancer* cell lines by hepatocyte growth factor.// Int. J. Urol. 1998. - Vol. 5(3). P.276-281.

119. Ohori M, Scardino PT, Lapin SL, et al. The mechanisms and prognostic significance of seminal vesicle involvement by prostate cancer.// Am J Surg Pathol 1993;17:1252-1261.

120. Olofsson B., Korpelainen E., Pepper M.S. et al. Vascular endothelial growth factor B (VEGF-B) binds to VEGF receptor-1 and regulatesplasminogen activator activity in endothelial cells.// Proc Natl Acad Sci USA 1998;95:11709-11714.

121. Ostman A. PDGF receptors-mediators of autocrine tumor growth and regulators of tumor vasculature and stroma.// Cytokine Growth Factor Rev -2004;15:275-286.

122. Pan C.C., Potter S.R., Partin A.W. et al. The prognostic significance of tertiary Gleason patterns of higher grade in radical prostatectomy specimens: a proposal to modify the Gleason grading system// Am J Surg Pathol 2000;24:563-569.

123. Park J.E., Chen H.H., Winer J. et al. Placenta growth factor. Potentiation of vascular endothelial growth factor bioactivity, in vitro and in vivo, and high affinity binding to Flt-1 but not to Flk-l/KDR.// J Biol Chem 1994;269:25646-25654.

124. Park J.E., Keller G.A., Ferrara N. The vascular endothelial growth factor (VEGF) isoforms: differential deposition into the subepithelial extracellular matrix and bioactivity of extracellular matrix-bound VEGF.// Mol Biol Cell 1993;4:1317-1326.

125. Partin A.W., Mangold L.A., Lamm DM. et al. Contemporary update of prostate cancer staging nomograms (Partin Tables) for the new millennium.// Urology 2001;58:843-848.

126. Perrotti M., Rabbani F., Russo P. et al. Early prostate cancer detection and potential for surgical cure in men with poorly differentiated tumors.// Urology 1998;52:106-110.

127. Poukka H., Karvonen U., lanne O.A. et al. Covalent modification of the androgen receptor by small ubiquitin-like modifier 1 (SUMO-1).// Proc Natl Acad Sci USA 2000;97:14145-14150.

128. Quarmby V.E., Beckman W.C.J., Cooke D.B. Expression and localization of androgen receptor in the R-3327 Dunning rat prostatic adenocarcinoma. // Cancer Res. 1990, v.50(3), p.735-742.

129. Rennie P.S., Nelson C.C. Epigenetic mechanisms for progression of prostate cancer. //Cancer Metastasis Rev. 1998-1999, v. 17(4), p.401-409.

130. Rioux-Leclercq N., Chan D.Y., Epstein J.I. Prediction of outcome after radical prostatectomy in men with organ-confined Gleason score 8 to 10 adenocarcinoma.// Urology 2002;60:666-669.

131. Rubin M.A., Mucci N.R., Manley S. et al. Predictors of Gleason pattern 4/5 prostate cancer on prostatectomy specimens: can high grade tumor be predicted preoperatively?// J Urol 2001; 165:114-118.

132. Rubin M.A., Bassily N., Sanda M. et al. Relationship and significance of greatest percentage of tumor and perineural invasion on needle biopsy in prostatic adenocarcinoma.// Am J Surg Pathol 2000;24:183-189.

133. Rubin M.A., De Marzo A.M. Molecular genetics of human prostate cancer// Mod Pathol 2004;17:380-388.

134. Ruijter E., van de Kaa C., Miller G. et al. Endocrinol. Rev. 1999, v.20, p.22-45.

135. Sadi M.V., Walsh P.C., Barrack E.R. Immunohistochemical study of androgen receptors in metastatic prostate cancer. Comparison of receptor content and response to hormonal therapy.// Cancer 1991, v.67(-12), p:3057-3064.

136. Sakata H., Takayama H., Sharp R. et al. Hepatocyte growth factor/scatter factor overexpression induces growth, abnormal development, and tumor formation in transgenic mouse livers.// Cell Growth Differ 1996, 7: 1513-1523.

137. Sakr W.A., Billis A., Ekman P. et al. Epidemiology of high-grade prostatic intraepithelial neoplasia.// Scand J Urol Nephrol Suppl 2000:1118.

138. Sakr W.A., Grignon D.J. Prostatic intraepithelial neoplasia and atypical adenomatous hyperplasia. Relationship to pathologic parameters, volume and spatial distribution of carcinoma of the prostate.// Anal Quant Cytol Histol- 1998;20:417Ai23.

139. Salomon L., Anastasiadis A.G., Johnson C.W. et al. Seminal vesicle involvement after radical prostatectomy: Predicting risk factors for progression.// Urology 2003:62:304-309.

140. Sehgai I., Baley P.A., Thompson T.C. Transforming growth factor betal stimulates contrasting responses in metastatic versus primary mouse prostate cancer-derived cell lines in vitro. //Cancer Res. 1996, v.56(14), p.3359-3365.

141. Silberman M.A., Partin A.W., Veltri R.W., Epstein J.I. Tumor angiogenesis correlates with progression after radical prostatectomy but not with pathologic stage in Gleason sum 5 to 7 adenocarcinoma of the prostate.// Cancer 1997, v.79(4), p.772-779.

142. Sofer M., Savoi M., Kim S.S. et al. Biochemical and pathological predictors of the recurrence of prostatic adenocarcinoma with seminal vesicle invasion.// J Urol 2003; 169:154-156.

143. Sokoloff M.H., Chung L.W.K. Targeting angiogenic pathways involving tumor-stromal interaction to treat advanced human prostate cancer.// Cancer Metastasis Rev. 1999, v. 17(4), p.307-315.

144. Steiner H., Bartsch G., Culig Z., Hobisch A. Mechanisms of endocrine therapy-responsive and -unresponsive prostate tumours.// Endocr Relat Cancer. 2005,12(2):229-44.

145. Steiner M.S., Barrack E.R. Transforming growth factor-beta 1 overproduction in prostate cancer: effects on growth in vivo and in vitro. // Mol. Endocrinol. 1992, v.6(l), p.15-25.

146. Story M.T., Hopp K.A., Meier D.A. et al. Influence of transforming growth factor beta 1 and other growth factors on basic fibroblast growth factor level and proliferation of cultured human prostatederived fibroblasts.// Prostate 1993,22:183-197.

147. Tajima H., Matsumoto K. and Nakamura T. Regulation of cell growth and motility by hepatocyte growth factor and receptor expression in various cell species.// Exp Cell Res 1992, 202: 423-431.

148. Tefilli M.V., Gheiler E.L., Tiguert R. et al. Prognostic indications in patients with seminal vesicle involvement following radical prostatectomy for clinically localized prostate cancer.// J Urol 1998;160:802-806.

149. Thomas K.A. Vascular endothelial growth factor, a potent and selective angiogenic agent.// J Biol Chem 1996;271:603-606.

150. Tille J.S., Pepper M.S. Hereditary vascular anomalies: new insights into their pathogenesis.// Arterioscler Thromb Vase Biol. 2004, 24(9), p.1578-90.

151. Tilley W.D., Wilson C.M., Marcelli M., McPhaul M.J. Androgen receptor gene expression in human prostate carcinoma cell lines.// Cancer Res. 1990, v. 50(17), p. 5382-5392.

152. Tilley W.D., Buchanan G., Hickey T.E., Bentel J.M. Mutations in the androgen receptor gene are associated with progression of human prostatecancer to androgen independence.// Clin. Cancer Res. 1996, v.2(2), p.277-285.

153. Tischer E., Mitchell R., Hartman T. et al. The human gene for vascular endothelial growth factor. Multiple protein forms are encoded through alternative exon splicing.// J Biol Chem 1991;266:11947-11954.

154. Tuxhom J.A., Ayala G.E., Rowley D.R. Reactive stroma in prostate cancer progression. // J Urol. 2001, v. 166(6), p.2472-83.

155. Veikkola T., Alitalo K. VEGFs, receptors and angiogenesis.// Semin Cancer Biol -1999;9:211-220.

156. Veikkola T., Karkkainen M., Claesson-Welsh L. et al. Regulation of angiogenesis via vascular endothelial growth factor receptors.// Cancer Res -2000;60:203-212.

157. Wang D., Huang HJ., Kazlauskas A. et al. Induction of vascular endothelial growth factor expression in endothelial cells by platelet-derived growth factor through the activation of phosphatidylinositol 3-kinase.// Cancer Res 1999;59:1464-1472.

158. Wang G., Jones S.J., Marra M.A., Sadar M.D. Identification of genes targeted by the androgen and PKA signaling pathways in prostate cancer cells.// Oncogene. 2006; v.25(55), p.7311-23.

159. Wang Y.C., Wong Y.Z. Growth factors and epithelial-stromal interactions in prostate cancer development.// Int Rev Cytol. 2000, v. 199, p.65-116.

160. West A.F., O'Donnell M., Charlton R.G. et al. Correlation of vascular endothelial growth factor expression with fibroblast growth factor-8expression and clinicopathologic parameters in human prostate cancer.// Br J Cancer-2001;85:576-583.

161. Woessner R.D., Wright P.S., Loudy D.E. et al. Microautoradiographic quantitation of vascular endothelial growth factor mRNA levels in human prostate specimens containing normal and neoplastic epithelium.// Exp. Mol. Pathol. 1998, v.65(l), p.37-52.

162. Zhang F., Lee J., Lu S. et al. Blockade of transforming growth factor-beta signaling suppresses progression of androgen-independent human prostate cancer in nude mice.// Clin Cancer Res 2005;11:4512-4520.