Диагностика и профилактика нозокомиальных инфекций у новорожденных детей тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.08, кандидат медицинских наук Шуникова, Марина Леонтьевна

• Шуникова, Марина Леонтьевна
• кандидат медицинских наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Шуникова, Марина Леонтьевна

Список используемых сокращений.

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1 Актуальность проблемы нозокомиальных инфекций у новорожденных детей.

1.2 Изучение процесса колонизации новорожденных детей.

1.3 Основные очаги гнойно-септических заболеваний у новорожденных детей.

1.4 Применение метода полимеразной цепной реакции в неонатальной практике.

1.5 Применение препаратов - пробиотиков для профилактики НЭК у недоношенных детей

Глава 2. Материалы и методы исследования.

2.1 Краткая характеристика обследованных детей.

2.2. Клинико-инструментальные методы исследования.

2.3 Микробиологические методы выделения бактерий из клинического материала.

2.4 Оценка разработанной мультипраймерной тест системы ПЦР-РВ.

2.5 Общий объем выполненных исследований.

2.6 Статистическая обработка матеирала.

Глава 3. Результаты собственных исследований.

3.1 Разделение обследованных детей на группы, характеристики групп.

3.2 Динамика колонизации слизистой дыхательных и мочевыводящих путей.

3.3 Оценка диагностической чувствительности и специфичности разработанной тест — 60 системы ПЦР - РВ в сравнении с бактериологическим методом.

3.4 Особенности течения неонатального периода у детей, колонизированных 64 нозокомиальными микроорганизмами.

3.5 Наблюдение за микрофлорой фекалий, изучение частоты встречаемости НЭК и 54 антибактериальной терапии в исследуемых подгруппах детей.

Глава 4. Обсуждение собственных результатов.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Диагностика и профилактика нозокомиальных инфекций у новорожденных детей»

В настоящее время инфекционная патология плода и новорожденного, занимает одно из ведущих мест в структуре заболеваемости и смертности в неонатальный период. Недоношенные дети относятся к группе особого риска по развитию заболеваний в ранний и поздний неонатальный периоды [9, 107].

Особую опасность и значимость в неонатальном периоде представляют бактериальные инфекции, вызываемые госпитальными микроорганизмами, устойчивыми к лекарственным препаратам и дезинфектантам.

Присоединение госпитальных или внутриболышчных инфекций (ВБИ) к основному заболеванию увеличивает летальность, длительность пребывания пациента в стационаре и стоимость лечения [15, 37, 117, 120].

Концентрация в ОРИТ пациентов с тяжелой сопутствующей патологией и сниженной антимикробной защитой, создает условия для селекции субпопуляций микроорганизмов с новым набором факторов устойчивости к воздействиям антибактериальных и антисептических препаратов, повышению их вирулентности. Чем дольше ребенок находится в стационаре, тем выше вероятность развития внутри больничной инфекции. [20].

Тяжесть состояния пациентов обусловливает почти 10-кратное увеличение потребления антимикробных препаратов (АМП) в ОРИТ по сравнению с обычными отделениями стационара. Интенсивное использование препаратов широкого спектра действия способствует появлению и распространению резистентности к АМП среди нозокомиальных возбудителей [121]. Кроме того, резистентность возбудителя инфекции приводит к удлинению сроков госпитализации, потребности в дополнительных курсах АМП и, следовательно, к увеличению стоимости лечения [108].

Несмотря на интенсивное развитие методов реанимационной помощи новорожденным и особенно недоношенным детям, остаются нерешенным вопросы быстрой этиологической диагностики бактериальных осложнений, снижения их распространенности и сокращение сроков проведения антибактериальной терапии и уменьшения ее «агрессивности». Учитывая быстроту прогрессирования инфекционных процессов у новорожденных детей, а также отсутствие специфической картины, когда различные патологические состояния проявляются одним и тем же симптомокомплексом, актуальными являются вопросы разработки и совершенствования методов экспресс - диагностики нозокомиальных инфекций, а также их профилактики на основании физиологических подходов.

Изучению закономерностей колонизацрш микроорганизмами родившегося ребенка посвящено немало исследований, однако, до настоящего времени тонкие механизмы экзогенного и эндогенного инфицирования новорожденных остаются не изученными. Анализ ситуации, при которой имеет место колонизация или инфицирование организма больного, выбор диагностической и терапевтической стратегии - одна из сложнейших задач, которые должны быть решены клиницистом [16, 82, 120].

В неонатальной клинике особенно большое значение имеют методы микробиологической экспресс - диагностики. Быстро развивающимся направлением в области клинической лабораторной диагностики стало создание и совершенствование методов молекулярной диагностики инфекционных болезней. Методы, основанные на технологии полимеразной цепной реакции (ПЦР), отличаются высокой чувствительностью и специфичностью и позволяют обнаруживать присутствие очень малого количества копий генетических последовательностей микроорганизмов в микроколичествах исследуемого материала и за короткое время. Важнейшей модификацией ПЦР является мультипраймерная ПЦР в реальном времени (ПЦР - РВ), которая позволяет проводить экспресс-диагностику сразу нескольких возбудителей различной природы. Внедрение молекулярных методов быстрой диагностики будет способствовать уменьшению риска возникновения и распространения бактериальных штаммов с лекарственной резистентностью [99].

Успешное разрешение проблемы нозокомиальных инфекций, как в их предупреждении, так и в своевременном лечении зависит от использования целого комплекса эффективных диагностических и лечебных технологий, проведения микробиологического мониторинга циркулирующих штаммов в каждом лечебном учреждении.

Цель исследования: Оптимизация способов диагностики и профилактики инфекционных осложнений у недоношенных детей.

Задачи исследования:

1. Установить особенности колонизации слизистой дыхательных и мочевыводящих путей, толстого кишечника у детей, рожденных раньше срока и находящихся на лечении в отделении реанимации и интенсивной терапии.

2. Провести сравнительную оценку количественного содержания энтеробактерий и стрептококков группы В в различных клинических образцах с помощью бактериологического метода и новой мультипраймерной диагностической тест системы метода ПЦР-РВ.

3. Оценить наличие этиопатогенетической связи между степенью бактериальной колонизации эндотрахеального аспирата, мочи, фекалий и клиническим течением неонатального периода.

4. Оценить риски возникновения и тяжести течения некротизирующего энтероколита (НЭК) у недоношенных новорожденных на фоне использования комбинированной терапии с применением пробиотических препаратов.

Материалы и методы исследования

Работа выполнена на кафедре неонатологии ФУВ (заведующий кафедрой - доктор медицинских наук, профессор Дегтярева Марина Васильевна.) ГОУ ВПО РГМУ Росздрава (ректор - академик РАМН, профессор Володин H.H.) и на кафедре микробиологии и вирусологии ГОУ ВПО РГМУ Росздрава (заведующий кафедрой - доктор медицинских наук, профессор - Кафарская Людмила Ивановна) за период с сентября 2007 года по декабрь 2009 года.

Комплексное обследование новорожденных проводилось на базе ОРИТ №1 и ОРИТ№2, также педиатрических отделений №1 и №2 ГБ №8 Департамента здравоохранения г. Москвы (главный врач — Дуленков А.Б., заведующая отделением реанимации и интенсивной терапии №1 - к.м.н Воронцова Ю.Н., заведующая отделением реанимации и интенсивной терапии №2 - к.м.н. Бабак O.A., заведующая педиатричесаким отделением №1 - к.м.н. Потапова О.В., заведующая педиатрическим отделением №2 -Миронюк О.В.)

В основу данной работы были положены результаты комплексного клинико-лабораторного обследования 195 новорожденных детей гестационного возраста 24 - 36 недель, получавших лечение в условиях отделения реанимации и интенсивной терапии с 1 суток жизни.

Научная новизна

Изучены особенности процессов колонизации слизистых организма недоношенных детей в условиях ОРИТ в динамике. Установлены основные закономерности смены доминирующих госпитальных штаммов преобладание коагулазонегативных стафилококков в первые дни жизни и грамотрицательных бактерий в конце первого месяца жизни.

Установлена прямая корреляционная связь между длительностью персистирования грамотрицательных бактерий в эндотрахеальном аспирате и частой развития вентилятор-ассоциированных пневмоний у недоношенных новорожденных, длительностью проводимой искусственной вентиляции легких, продолжительностью курса антибактериальной терапии и сроками пребывания ребёнка в стационаре.

Показана идентичность смены доминирующих госпитальных штаммов в различных исследуемых локусах (аспират, моча, фекалии) у недоношенных детей в ОРИТ. Выявлено, что грамотрицательная бактериурия в 66% случаев сочетается с генерализованным течением инфекционного процесса.

Проведена сравнительная оценка результатов бактериологического исследования различных локусов организма недоношенного новорожденного с данными, полученными при использовании новой диагностической мультипраймерной тест- системы, работающей в режиме ПЦР-РВ, позволяющей выявлять в клиническом материале наличие ДНК Klebsiella spp, Escherichia coli, Streptococcus agalactiae. Выявлена сильная корреляция количественного содержания S.agalactiae, Klebsiella sp. и E.coli в клиническом материале при сопоставлении бактериологического исследования и метода ПЦР-РВ с использованием новой диагностической тест- системы.

Показано, что назначение препаратов - пробиотиков снижает риск развития тяжелых форм некротического энтероколита.

Практическая значимость

Выявлены закономерности колонизации дыхательных путей, толстой кишки и слизистой мочевыделительного тракта недоношенных детей, заключающиеся в прогрессивном увеличении частоты колонизации слизистой дыхательных путей и толстой кишки, при стабильно низком уровне колонизации слизистой МВП, а также в смене видового состава обнаруживаемых микроорганизмов во всех исследуемых локусах с грамположительной в на грамотрицательную в течение первого месяца жизни.

Разработаны алгоритмы назначения антибактериальной и противогрибковой терапии недоношенным детям с 1 суток жизни и на весь период пребывания в стационаре, с учетом особенностей колонизации недоношенных госпитальными штаммами в различные сроки пребывания в ОРИТ.

Исходя из выявленного преимущества (улучшение количественного и качественного состава микрофлоры толстой кишки, снижение частоты встречаемости тяжелых форм некротизирующего энтероколита), был разработан и внедрен алгоритм по применению препаратов - пробиотиков, с учетом возраста, состояния ребенка и разового объема энтерального питания.

Разработанная мультипраймерная тест-система, работающая в режиме ПЦР РВ, при диагностике инфекций, обусловленных Klebsiella spp, Escherichia coli, Streptococcus agalactiae, позволяет обеспечить раннее, в том числе доклиническое выявление наиболее значимых перинатальных инфекций, провести количественную оценку бактериальной обсемененности исследуемого материала, расширяет спектр дифференциально-диагностических возможностей при сходстве клинической картины заболеваний у новорожденных.

Внедрение в практику

Практические рекомендации внедрены в отделениях реанимации и интенсивной терапии новорожденных №1 и №2 и педиатрические отделения №1 и №2 Городской больницы №8 Департамента здравоохранения г. Москвы.

Публикация результатов исследования

По теме диссертации опубликовано 6 научных работ:

1. Володин Н.Н., Кафарская Л.И., Ефимов Б.А., Шкопоров А.Н., Хохолова Е.В., Шуникова M.JI., Дегтярева JI.A., Чаплин А.Н. Использование молекулярно-генетических технологий, основанных на ПЦР в диагностике инфекционных заболеваний у новорожденных. // Вопросы практической педиатрии 2010; 5 (4): 39-46.

2. Кафарская Л.И., Шуникова M.JL, Бабак О.А., Воронцова Ю.Н. К вопросу об этиологии пневмоний у недоношенных новорожденных в

ОРИТ. // Вопросы практической педиатрии, 2009г, том 4, с. 24-25.

3. Кафарская Л.И., Шуникова M.JL, Бабак O.A., Воронцова Ю.Н. Особенности становления микрофлоры недоношенных новорожденных в условиях отделения реанимации и интенсивной терапии. // Вопросы практической педиатрии, 2008г, том 3, №5, с. 26-27

4. Кафарская Л.И., Шуникова M.JT. Мониторинг колонизации организма недоношенных детей нозокомиальными микроорганизмами в течение первого месяца жизни на фоне лечения в ОРИТ. // Вопросы практической педиатрии, 20Юг, том №5, с 29.

5. Володин H.H., Кафарская Л.И., Ефимов Б.А., Шкопоров А.Н., Хохолова Е.В., Шуникова М.Л. Разработка метода экспресс - диагностики перинатальных инфекций на основе количественной оценки содержания ДНК цитомегаловируса и бактерий, колонизирующих организм плода и новорожденного. // Вопросы практической педиатрии, 2010г, том №5, с 12.

6. Кафарская Л.И., Шуникова М.Л. Ефимов Б.А., Шкопоров А.Н., Хохолова Е.В., Особенности микрофлоры у детей раннего возраста и пути коррекции с помощью пробиотиков. //Педиатрическая фармакология, 2011, №2, с.

Публичные выступления

1. Особенности становления микрофлоры недоношенных новорожденных в условиях ОРИТ. Шуникова М.Л. Стендовый доклад на III Ежегодном конгрессе и IV Съезде Российской ассоциации специалистов перинатальной медицины: «Современная перинатология: организация, технологии и качество», Москва, 29-30 сентября 2008 года.

2. Комплексное влияние пробиотиков и антибиотиков на показатели микробиоценоза кишечника недоношенных детей. Кафарская Л.И., Шуникова М.Л. Устный доклад на IV Ежегодном конгрессе Российской ассоциации специалистов перинатальной медицины: «Современная перинатология: организация, технологии и качество», Москва, 28-29 сентября 2009 года.

3. Surfactant replacement therapy may decrease the rate of ventilator-associated pneumonia in premature infants. Kafarskaya L.I., Shunikova M.L., Babak O.A., Levadnaya A.V. 25th International Workshop on Surfactant Replacement, Moscow - стендовый доклад.

4. Probiotics contribute to gut colonization with normal microflora even under prolonged antibacterial therapy in infected premature neonates. Kafarskaya L.I., Shunikova M.L., Golubtsova Y.M., Volodin N.N., XXII European Congress "PERINATAL MEDICINE", GRANADA, SPAIN,.May 26th - 29th, 2010 -стендовый доклад.

5. Ethiology of Neonatal Pneumonia in Neonatal Intensive Care Unit (NICU) in Russia. Kafarskaya L.I., Shunikova M.L., Golubtsova Y.M., Volodin N.N. XXII European Congress "PERINATAL MEDICINE", GRANADA, SPAIN, May 26th - 29th, 2010 - стендовый доклад.

Объем и структура работы

Заключение диссертации по теме «Педиатрия», Шуникова, Марина Леонтьевна

Выводы

1. Уровень колонизации слизистой дыхательных путей недоношенных новорожденных, находящихся в ОРИТ, госпитальными микроорганизмами прогрессивно увеличивается в течение первого месяца после рождения, при этом до 14 суток жизни преобладают коагулазонегативные стафилококки. К 30 суткам происходит смена доминирующей микрофлоры на грамотрицательные микроорганизмы семейства Enterobacteriacea и неферментирующие бактерии. Спектр чувствительности этой группы микроорганизмов лимитируется антибактериальными препаратами из группы резерва: цефепиму, цефоперазону, карбапенемам, ципрофлоксацину. Эта группа препаратов назначалась недоношенным детям после 3 суток жизни.

2. Частота встречаемости бактериурии у недоношенных детей остается низкой (10,9%) на протяжении всего неонатального периода. Динамика смены микрофлоры, колонизирующей мочевыводящие пути, соответствует таковой в дыхательных путях. Грамотрицательные микроорганизмы в 66,7% случаев выявляются у детей в моче на фоне генерализации инфекции.

3. Колонизация эндотрахеального аспирата Klebsiella spp., Ps.aeruginosae и Stenotrophomonas maltophilia является фактором очень высокого риска развития ВАП у недоношенных новорожденных, приводит к увеличению длительности курса стационарного лечения, продолжительности антибактериальной терапии и искусственной вентиляции легких.

4. Проведенная сравнительная оценка бактериологического метода и мультипраймерной ПЦР-РВ системы подтвердила высокую диагностическую значимость последней. Сокращение времени проводимого исследования при ПЦР-РВ - до 3 часов, высокая диагностическая чувствительность и специфичность помогает оптимизировать диагностику перинатальных инфекций, вызываемых представителями Klebsiella spp, E. coli, Str.agalactiae.

5. Процесс колонизации кишечника недоношенного новорожденного в ОРИТ значительно нарушен, характеризуется резким замедлением колонизации бифидо- и лактофлорой. Назначение препаратов пробиотиков увеличивает качественное и количественное содержание представителей нормальной микрофлоры, но достоверные различия отмечаются к 30 суткам.

6. Назначение препаратов - пробиотиков снижает частоту тяжелых форм некротического энтероколита (в 3,5 раза по данным нашего исследования).

Практические рекомендации

1. С целью профилактики инфекционных осложнений в отделениях реанимации и интенсивной терапии новорожденных необходимо осуществлять микробиологический мониторинг циркулирующих госпитальных штаммов и контроль степени колонизации, различных биотопов организма. Факт контаминация эндотрахеального аспирата микроорганизмами представителями рода Klebsiella spp., Ps.aeruginosae и Stenotr.maltophilia. указывает на высокий риск развития ВАП у недоношенных новорожденных.

2. Стратегия антибактериальной терапии в отделениях реанимации и интенсивной терапии новорожденных определяется особенностями процесса контаминации госпитальными штаммами различных биотопов ребенка. В первые 14 дней преобладающими микроорганизмами являются грамположительные микроорганизмы, после 14 суток жизни грамотрицательные.

3. Использование мультипраймерных диагностических тест систем ПЦР-РВ в клинической практике, сокращает сроки проводимого диагностической процедуры до 3 часов и повышает эффективность выявления возбудителей инфекционных процессов.

4. При достижении разового объема 4 мл после начала энтерального питания (адаптированная смесь или сцеженное грудное молоко) к базовой терапии целесообразно добавить препарат - пробиотик до окончания системной антибактериальной терапии. Назначение препарата - пробиотика способствует повышению уровня колонизации кишечника бифидобактериями и лактобациллами, снижает риск развития тяжелых форм НЭК у недоношенных детей, находящихся в ОРИТ.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Шуникова, Марина Леонтьевна, 2011 год

1. Адарченко A.A., Гудкова Е.И., Скороход Г.А., Слабко И.Н., Абаев Ю.К., Волков В.И. Микробная колонизация новорожденных в хирургическом стационаре. Н.И. Телятицкий Белорусский государственный медицинский университет, 13.09.2009 доступно на МедОценка.ги

2. Антонов А.Г., Байбарина E.H., Соколовская Ю.В. и др. Объективные диагностический критерии сепсиса у новорожденных. //Вопр. гинекологии, акушерства и перинатологии. 2005; 4 (4-5): 113-115.

3. Ашуха А.Я., Смагин А.Ю., Стасенко B.JL, Николаев C.B. Опыт работы по снижению вентилятор-ассоциированных пневмоний на уровне отделения реанимации новорожденных перинатального центра, Городской клинический перинатальный центр, г. Омск, Россия

4. Всемирная гастроэнтерологическая ассоциация. Практические рекомендации. Пробиотики и пребиотики. 2008., Опубликовано в журнале «Здоровье ребенка», 3 (24) 2010

5. Иванов Д.О. Клинико-лабораторные варианты течения сепсиса новорожденных: Автореф.дис. докт. мед. наук. СПб, 2002.

6. Иммунокорригирующая терапия инфекционно-воспалительных заболеваний женской половой сферы Санкт-Петербург, 2007, доступно на http://medi.ru/doc/a21021002.htm

7. Коршунова Г.С. Эпидемиологическая ситуация по внутрибольничным инфекциям в РФ в 1997-2001 гг. // Эпидемиология и инфекционные болезни,— 2002.— № 6.— С. 22-24.

8. Кривопустов С.П. Пневмония новорожденных: особенности диагностики и лечения.// Здоровье Украины, июнь 2008г.18/1, стр. 32-33

9. Макаров О.В., Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В., Бахарева И.В., Ганковская O.A. Нвынашивание беременности, инфекция, врожденный иммунитет, М,: ГЭОТАР-Медиа, 2007г

10. Монисов A.A., Лазикова Г.Ф., Фролочкина Т.Н. и др. Состояние заболеваемости внутрибольничными инфекциями в Российской Федерации // Эпидемиология и инфекционные болезни. 2000. № 5. С. 9— 12.

11. Нетребенко О. К. Пробиотики и пребиотики в питании детей грудного возраста // Педиатрия. — 2007. — Т. 86, № 1. — С. 80—87

12. Под. ред. Венцела Р.П. Внутрибольничные инфекции. Пер. с англ. . М.: Медицина; 1990, с656.18. под. ред. Володина H.H. Неонатология: Национальное руководство. М.: ГЭОТАР-Медиа. 2007 848 с.

13. Решедько Г.К., Рябкова Е.Л., Кречикова О.И., с соавт. Антибиотикорезистентность грамотрицательных возбудителей нозокомиальных в отделениях реанимации и интенсивной терапии России. Клин Микробиол Антимикроб Химиотер 2008; 10 №2 с. 96-112

14. Розанова С.М. и соавт. Антибиотикорезистентность в ОРИТ Екатеринбурга. Клин микробиол, антимикробная химиотерапия, 2005, Том 7, №4, с 410-418

15. Руководство по инфекционному контролю в стационаре. Глава 1. Shaheen Mehtar. Значение инфекционного контроля. // Доступно на www. antibiotic.ru

16. Самсыгина Г.А. Сепсис и септический шок. //Педиатрия 2009, Т. 87, №1:121-127.

17. Сидоренко С.В., Эйделыптейн М.В. Механизмы резистентности микроорганизмов. Практическое руководство по антиинфекционой химиотерапии. Под ред. Страчунского Л.С., Белоусова Ю.Б., Козлова С.Н. М.: РЦ "Фармединфо", 2007: 19-31.

18. Суханова Л.П. Скляр М.С. Детская и перинатальная смертность в России: тенденции, структура, факторы риска. №4. 27.01.2008 г. доступно на vestnik.mednet.ru

19. Хавкин А. И. Микрофлора пищеварительного тракта. — М.: Фонд социальной педиатрии, 2006. — 415 с

20. Шабалов Н.П. Неонатология: учебное пособие. М.: МЕДпресс-информ, 2006,- 656 с.

21. Шилова, В. П., Розанова С. М., Кырф, М. В. и др. Формирование микрофлоры новорожденных в условиях родильных домов и отделений патологии новорожденных // Клинич. лаборат. диагностика. 2007. № 10. С. 37-40

22. Этиология нозокомиальных пневмоний у новорожденных результаты российского исследования. Антибиотики и химиотерапия, 2001; 46: 1723, http://www.antibiotic.ru/

23. Яковенко, В. А., Чукичев, А. В., Котляров, А. Н. Прогнозирование развития послеоперационных гнойных осложнений в детской хирургической клинике // Внутрибольничные инфекции: Тез. докл. II Рос. науч.-практ. конф. М., 1999. С. 283-284.

24. Яцык Г.В., Бомбардирова Е.П. Сепсис новорожденных. Современные проблемы диагностики и лечения. //Практика педиатра, февраль 2009, С. 6-9.

25. Butel М. J. et al. Conditions of hifidobacterial colonization in preterm infants: a prospective analysis // J. Ped. Gastroenterol. Nutr. — 2007. — V. 44. — № 5. —P. 577 — 582.

26. M. Juntunen et al. Adherence ofprobiotic bacteria to human intestinal mucus in healthy infants and during rotavirus infection // Clin. Diagn. Lab. Immunol. — 2001. — V. 8, S. 2. — P. 293—296.

27. Aly H., Badawy M., El-Kholy A., Nabil R., Mohamed A. Randomized, Controlled Trial on Tracheal Colonization of Ventilated Infants: Can Gravity Prevent Ventilator-Associated Pneumonia? // Pediatrics 2008; 122;770-774

28. Angus D.C., Linde-Zwirble W.T., Lidicker J. et al. Epidemiology of severe sepsis in the United States: analyses of incidence, outcome, and associated cost of care. //Crit. Care Med. 2001; 29 (7): 1303-1310

29. Apisarnthanarak A, Holzmann-Pazgal G, Hamvas A, Olsen MA, Fraser VJ.

30. Bin-Nun A. et al. Oral Probiotics Prevent Necrotizing Enterocolitis In Very Low Birth Weight Neonates. // The Journal of Pediatrics. August 2005; 147: 192-196

31. Bizzarro MJ, Gallagher PG Antibiotic-resistant organisms in the neonatal intensive care unit. // Semin Perinatol. 2007 Feb;31(l):26-32

32. Boland, T., R. A. Latour, and F. J. Sutzenberger. Molecular basis of bacterial adhesion, 2000. p. 29-41

33. Brandy L., Frost MD, Tamas Jilling MD, Michael, S. Caplan MD. The importance of pro-inflammatory signaling in neonatal NEC. // Semin Perinatol. 2008 April; 32(2): 100-106

34. Canadian Critical Care Trials Group. A Randomized Trial of Diagnostic Techniques for Ventilator-Associated Pneumonia. // N Engl J Med 2006, 355:2619-2630

35. Caplan M S. Probiotic and prebiotic supplementation for the prevention of neonatal necrotizing enterocolitis. // Journal of Perinatology May 2009, 29, S2-S6

36. Cimiotti JP, Haas JP, Della-Latta P, Wu F, Saiman L, Larson ELPrevalence and clinical relevance of Staphylococcus warneri in the neonatal intensive care unit. // 2007 Mar; 28(3):326-30. Epub 2007 Feb

37. Cornaglia G. Garau J., Livermore D.M. Living with ESBLs. // Clin Microbiol Infect 2008; 14(Suppl. 1): 1-2

38. Deshpande G, Rao S, Patole S. Probiotics for prevention of necrotizing enterocolitis in preterm neonates with very low birthweight: a systematic review of randomized controlled trials. // Lancet 2007; 369:1614-20.

39. Donlan Rodney M., J. William Costerton Biofilms: Survival Mechanisms of Clinically Relevant Microorganisms // Clinical Microbiology Reviews, Apr. 2002, p. 167-193 Vol. 15, No. 2

40. Enweronu-Laryea CC, Newman MJ. Changing pattern of bacterial isolates and antimicrobial susceptibility in neonatal infections in Korle Bu Teaching Hospital, Ghana East Afr // Med J. 2007 Mar;84(3): 136-40.

41. Fitzpatrick et al. L. R. Effects of the probiotic formulation VSL3 on colitis in weanling rats. // J. Ped. Gastroenterol. Nutr. — 2007. — V. 44. — № 5. — P. 561—570

42. Fujimura S, Kato S, Hashimoto M, Takeda H, Maki F, Watanabe A. Survey of methicillin-resistant Staphylococcus aureus from neonates and the environment in the NICU. // Acta Paediatr. 2004 Jun; 93(6):786-90 J Infect Chemother. 2004 Apr; 10(2): 131 -2

43. Gewolb IH, Schwalbe RS, Taciak VL, Harrison TS, Panigrahi P.A. Stool microflora in extremely low birthweight infants. // Dis Child Fetal Neonatal Ed. 1999 May; 80(3):F167-73

44. Goldenberg R.L., Hauth J.C., Andrews W.W. Intrauterine infection and preterm delivery. //N.Engl.J.Med. 2000. 342 (20): 1500 1507.

45. In A. L. Bisno, F. A. Waldovogel ed., Infections associated with indwelling medical devices. // 2nd ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C

46. In Y. H. An, R. J. Friedman ed., Handbook of bacterial adhesion: principles, methods, and applications, 1st ed. Humana Press, Totowa, N.J

47. Janjindamai W, Phetpisal S Time to positivity of blood culture in newborn infants. // Southeast Asian J Trop Med Public Health. 2006 Jan;37(l):171-6.

48. Kailasapathy K. Survival and therapeutic potential ofprobiotic organisms with reference to Lactobacillus acidophilus and Bifidobacterium spp. // J. Chin Immunol. Cell Biol. — 2000. — V. 78, —S. 1, —P. 80—88.

49. Kalliomaki MA, Walker WA. Physiologic and pathologic interactions of bacteria with gastrointestinal epithelium. // Gastroenterol Clin North Am 2005; 34:383-99.

50. Kaufman D., Fairchild K.D. Clinical Microbiology of Bacterial and Fungal Sepsis in Very-Low-Birth-Weight Infants. // Clinical Microbiology Reviews 2004. 17(3): 638-80.

51. Kaufman David A. Fungal Infections in Preterm Infants Updated: Jan 15, 2010, availble at emedicine.medscape.com

52. Klingenberg C, Ronnestad A, Anderson AS et al. Persistent strains of coagulase-negative staphylococci in a neonatal intensive care unit: virulence factors and invasiveness. // Clin Microbiol Infect 2007;13:1100 —11

53. Koksal N, Hacimustafaoglul M, Celebi S, Ozakin C. Nonbronchoscopic bronchoalveolar lavage for diagnosing ventilator-associated pneumonia in newborns. // Turk J Pediatr. 2006 Jul-Sep;48(3):213-20

54. Lammers K.M., Brigidi P., Vitali B. et.al. Immunomodulatory effects of probiotic bacteria DNA: IL-1 and IL-10 response in human peripheral blood mononuclear cells. FEMS immunol. // Med. Microbiol. 2003; 38(2), p. 165172

55. Lee MK, Chiu CS, Chow VC, Lam RK, Lai RW. Prevalence of hospital infection and antibiotic use at a university medical center in Hong Kong. // J Hosp Infect. 2007; 65(4):341-7. 21

56. Lee NC, Chen SJ, Tang RB, Hwang BT. Neonatal bacteremia in a neonatal intensive care unit: analysis of causative organisms and antimicrobialsusceptibility. // J Chin Med Assoc. 2004 Jan; 67(1): 15-20, J Commun Dis. 2005 Sep;37(3):227-32.

57. Lewis, K. Riddle of Biofilm Resistance. //Antimicrobial agents and Chemotherapy, 2001, Vol. 45, No. 4, p. 999-1007

58. Lodise T.P. Jr., Patel N., Kwa A., et al. Predictors of 30-day mortality among patients with Pseudomonas aeruginosa bloodstream infections: impact of delayed appropriate antibiotic selection. // Antimicrob Agents Chemother 2007; 51: 3510-5

59. Lyte M, Freestone PP, Neal CP, Olson BA, Haigh RD, Bayston R, Williams PH. Stimulation of Staphylococcus epidermidis growth and biofilm formation by catecholamine inotropes. // Lancet 2003; 361: 130-5

60. Macpherson AJ, Uhr T. Induction of protective IgA by intestinal dendritic cells carrying commensal bacteria. // Science 2004; 303:1662-5.

61. Maki, D. G. 1994. Infections caused by intravascular devices used for infusion therapy: pathogenesis, prevention, and management, p. 155-212.

62. Martin CR, Walker WA Probiotics: role in pathophysiology and prevention in necrotizing enterocolitis. // Semin Perinatol. 2008 Apr; 32(2): 127-37

63. Martone WJ, Jarvis WR, Culver DH, et al. Incidence and nature of endemic and epidemic nosocomial infections. In: Bennet JV, Brachman PS, eds. // Hospital Infections; 1992. p. 577-96

64. Mayer L. Oral tolerance: new approaches, new problems // Clin. Immunol. — 2000, —V. 94, —P. 1—8.

65. McGuire W., Clerihew L., Fowlie P.W. Infection in the preterm infant. // BMJ2004; 329 (7477): 1277-80.

66. Miles, F., Voss, L., Segedin, E., Anderson, B.J. Review of Staphylococcus aureus infections requiring admission to a paediatric intensive care unit // Arch. Dis. Child. 2005. Vol. 90, № 12. P. 1274 1278.

67. Molina-Cabrillana J, Santana-Reyes C, Hernández J, López I, Dorta E. Incidence of nosocomial infections at a neonatal intensive care unit: a six-year surveillance study. // Enferm Infecc Microbiol Clin. 2006 May;24(5):307-12

68. Nanthakumar N, Fusunyan RD, Sanderson IR, Walker WA. Inflammation in the developing human intestine: a possible pathophysiologic basis for necrotizing enterocolitis. // Proc Natl Acad Sci U S A 2000; 97: 6043-8.

69. Nanthakumar NN, Young C, Ko JS, et al. Glucocorticoid responsiveness in the developing human intestine: possible role in the prevention of necrotizing enterocolitis. // J Physiol Gastrointest Liver Physiol 005; 288:G85-92.

70. National Nosocomial Infections Surveillance (NNIS) System, Centers of Disease Control and Prevention. National Nosocomial Infections (NNIS) report, data summary from October 1986-April 1996. // J Infect Control 1996;24:380-6

71. Osrin D., Vergnano S., Costello A. Serious bacterial infections in newborn infants in developing countries. // Curr Opin Infect Dis. 2004; 17(3):217-24

72. Peralta G., Sanchez M.B., Garrido J.C.,et al. Impact of antibiotic resistance and of adequate empirical antibiotic treatment in the prognosis of patients with Escherichia coli bacteraemia. // J Antimicrob Chemother 2007; 60: 855-63

73. Petrof E. O. Probiotics inhibit nuclear factor-kB and induce heat shock proteins in colonic epithelial cells trough proteasome inhibition / E. O. Petrof, K. Kojima, M. Ropeleski // J. Gastroenterol. — 2004. — V. 127. — P. 1474— 1487

74. Pietz Jeff et al. Prevention of Necrotizing Enterocolitis in Preterm Infants: A 20-Year Experience, // Pediatrics. January 2007; 119: 164-170.

75. R. Walker, M. Buckley. Probiotic microbes: the scientific basis. A report from the American Academy of Microbiology, 2006. 05.07.2006

76. Raad I. Intravascular-catheter-related infections.// Lancet. 1998.351:893-898.

77. Rachmilewitz D, Katakara K, Karmeli F, et al. Toll-like receptor 9 signaling mediates the anti-inflammatory effects of probiotics in murine experimental colitis. // Gastroenterology 2004; 126:520-8.

78. Rachmilewitz D., Katakura K., Karmeli F. et al. Toll-like receptor 9 mediates the anti-inflammatory effects of probiotics in murine experimental colitis. Gastroenterology, 2004; 126: p.520-528.

79. Raskind CH, Sabo BE, Callan DA, Farrel PA, Dembry LM, Gallagher PG Conjunctival colonization of infants hospitalized in a neonatal intensive care unit: a longitudinal analysis. // Infect Control Hosp Epidemiol. 2002 Nov; 23(ll):677-82

80. Reier-Nilsen T., Farstad T., Nakstad B., et al. Comparison of broad range 16S rDNA PCR and conventional blood culture for diagnosis of sepsis in the newborn: a case control study. // BMC Pediatrics 2009; 9(5): 1-8.

81. Sandiumenge A., Diaz E., Bodi M., et al. Therapy of ventilator-associated pneumonia. A patient-based approach based on the ten rules of "The Tarragona Strategy". // Intensive Care Med 2003; 29: 876-83

82. Schwaber M.J., Carmeli Y. Mortality and delay in effective therapy associated with extended-spectrum beta-lactamase production in Enterobacteriaceae bacteraemia: a systematic review and meta-analysis. // J Antimicrob Chemother 2007; 60: 913-20.

83. Shiau, A.-L., C.-L. Wu. The inhibitory effect of Staphylococcus epidermidis slime on the phagocytosis of murine peritoneal macrophages is interferon-independent. //Microbiol. Immunol. 1998. 42:33-40. 31

84. Singh N, LMger MM, Campbell J, Short B, Campos JM. Control of vancomycin-resistant enterococci in the neonatal intensive care unit. // Infect Control Hosp Epidemiol. 2005 Jul;26(7):646-9

85. Sison A.V., Campos J.M. Laboratory Methods for Early Detection of Human Immunodeficiency Virus Type 1 in Newborns and Infants. // Clinical Microbiology Reviews 1992; 5(3): 238-47.

86. Stoll BJ, Hansen N. Infections in VLBW infants: studies from the NICHD Neonatal Research Network. // Seminars in Perinatology 2003;27:293-301.

87. Stover B. H., S. T. Shulman, D. F. Bratcher, M. T. Brady, G. L. Levine, and W. R. Jarvis. Nosocomial infection rates in US children's hospitals' neonatal and pediatric intensive care units. // Am. J. Infect. Control 2001. 29: 152-157

88. Strabelli TM, Cais DP, Zeigler R, Siciliano R, Rodrigues C, Carrara D, Neres S, Lessa S, Uip DE Clustering of Enterococcus faecalis infections in a cardiology hospital neonatal intensive care unit. // Braz J Infect Dis. 2006 Apr;l 0(2): 113-6.

89. Stroll Barbara J. The Global Impact of Neonatal Infection // Clinics in Perinatology, Vol.24., No. 1, pp. 1 21

90. Strunk T, Richmond P, Simmer K, Currie A, Levy O, Burgner D. Neonatal immune responses to coagulase-negative staphylococci. // J Pediatr. 2007 Sep;151(3):260-5, 265.el. Epub 2007 Jul 24, Comment in: J Pediatr. 2007 Sep;151(3):232-4.

91. Vendettuoli V, De Cunto A, Tana M, Tirone C, Boccacci S, Vento G, Romagnoli C. Pulmonary infections in preterm newborns. // Minerva Pediatr.2007 Apr;59(2):97-105

92. Vincent JL, Bihari DJ, Sutter PM, et al. The prevalence of nosocomial infection in intensive care units in Europe. // JAMA 1995;274:639-45

93. W. Allan Walker. Mechanisms of Action of Probiotics CID 2008:46 (Suppl 2) 87-91

94. Weile J., Knabbe C. Current applications and future trends of molecular diagnostics in clinical bacteriology. // Anal Bioanal Chem 2009; 394:731^42.

95. Weinstein RA. Nosocomial Infection Update. // Emer Infect Dis 1998;4(3):416-20

96. WHO Global Strategy for Containment of Antimicrobial Resistance. World Health Organization 2001. Available from: http:// www.who.int/emc/amrpdfs/ WHOGlobalStrategyEnglish.pdf

97. Wolff M, Brun-Buisson C, Lode H, et al. The changing epidemiology of severe infections in the ICU. // Clin Microb Infect 1997;3(suppl. l):S36-47

98. Workshop on Enterobacter sakazakii and Other Microorganisms in Powdered Infant Formula Geneva, 2-5 February 2004

99. Yan F., Polk D.B. Probiotic bacterium prevents cytokine-induced apoptosis in intestinal epithelial cells. // J.Biol.Chem., 2002; 277:p.50959-65

100. Yassen, H., Darwich, M. Prevention of nosocomial neonatal sepsis: recent trends and latest recommendations // Neonat. Int. Care. 2002. Vol. 5, № 3. P. 18-20

101. Yhu-Chering Huang et al. Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus Colonization and Its Association With Infection Among Infants Hospitalized in Neonatal Intensive Care Units, // Pediatrics. August 2006;' 118: 469-474

102. Yuan TM, Chen LH, Yu HM. J. Risk factors and outcomes for ventilator-associated pneumonia in neonatal intensive care unit patients. // J Perinat Med. 2007; 35(4):334-8.

103. Zaidi A.K., Thaver D., Ali S.A., Khan T.A. Pathogens associated with sepsis in newborns and young infants in developing countries. //Pediatr. Infect. Dis. J. 2009. Jan. 28(1 suppl):S10-8.