Диагностические и прогностические клинико-иммунологические параметры у больных с супратенториальными глиомами тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.18, кандидат медицинских наук Мишинов, Сергей Валерьевич

• Мишинов, Сергей Валерьевич
• кандидат медицинских наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Мишинов, Сергей Валерьевич

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. СОВРЕМЕННЫЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ ОБ ОСОБЕННОСТЯХ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ БОЛЬНЫХ ГЛИАЛЬНЫМИ ОПУХОЛЯМИ ГОЛОВНОГО МОЗГА (ОБЗОР

ЛИТЕРАТУРЫ)

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Общая характеристика больных

2.1.1. Характеристика больных в группе проспективного исследования

2.1.2. Характеристика больных в группе исторического

контроля

2.2. Методика иммунологических исследований

2.2.1. Культивирование лимфоцитов

2.2.2. Смешанная культура лимфоцитов

2.2.3. Генерация ИФН-ДК

2.2.4. Определение субпопуляций клеток методом проточной цитофлуориметрии

2.2.5. Оценка клеточного цикла

2.2.6. Оценка способности ДК к эндоцитозу

2.2.7. Определение цитостатической/цитотоксической активности ДК

2.3. Используемая аппаратура

2.4. Техника оперативных вмешательств при

супратенториальных глиомах головного мозга

2.5. Методы исследования в клинике

2.5.1. Современные методы нейровизуализации в диагностике супратенториальных глиом головного мозга

2.5.2. Морфологические методы верификации глиом и их гистологическая характеристика

2.5.3. Методы статистического анализа

ГЛАВА 3. АНАЛИЗ КЛИНИКО-ЛАБОРАТОРНЫХ КРИТЕРИЕВ, ОПРЕДЕЛЯЮЩИХ ПРОГНОЗ ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТИ ЖИЗНИ БОЛЬНЫХ СУПРАТЕНТОРИАЛЬНЫМИ ГЛИОМАМИ

3.1. Анализ показателей продолжительности жизни больных

супратенториальными глиомами в группе проспективного

исследования

3.2. Анализ показателей продолжительности жизни больных

злокачественными супратенториальными глиомами в группе

проспективного исследования

3.3. Анализ показателей продолжительности жизни в группе

больных с оценкой отдельных параметров

противоопухолевого клеточного иммунитета

(рекрутированная группа)

3.4. Анализ показателей продолжительности жизни больных

супратенториальными глиомами в группе исторического

контроля

3.5. Анализ показателей выживаемости в группах исследования

на основе степени злокачественности опухоли по Grade

ГЛАВА 4. ХАРАКТЕРИСТИКА ОТДЕЛЬНЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО КЛЕТОЧНОГО ИММУНИТЕТА БОЛЬНЫХ С СУПРАТЕНТОРИАЛЬНЫМИ ГЛИАЛЬНЫМИ ОПУХОЛЯМИ

4.1. Сравнительный анализ субпопуляционного состава

лимфоцитов в периферической крови у больных

супратеториальными глиомами и здоровых доноров

4.1.1. Сравнительный анализ содержания CD8+Per+ Т— лимфоцитов в периферической крови больных и здоровых

доноров

4.1.2. Сравнительный анализ содержания CD56+CD16+ Т-лимфоцитов в периферической крови больных и здоровых

доноров

4.1.3. Сравнительный анализ содержания субпопуляций регуляторных CD4+CD25+ Т-лимфоцитов в периферической крови больных и здоровых доноров

4.2. Сравнительный анализ цитостатической и цитотоксической активности интерферон альфа - индуцированных

дендритных клеток больных супратенториальными глиомами

и здоровых доноров

ГЛАВА 5. КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ПОЛУЧЕННЫХ ДАННЫХ И ОЦЕНКА ВОЗМОЖНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ИССЛЕДУЕМЫХ ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ ПАРАМЕТРОВ В КАЧЕСТВЕ ПОТЕНЦИАЛЬНЫХ МАРКЁРОВ ВЫЖИВАНИЯ ПРИ ГЛИОМАХ ГОЛОВНОГО МОЗГА

5.1. Оценка корреляционных связей

5.2. Оценка кривых выживаемости больных

5.2.1. Оценка кривых выживаемости в зависимости от содержания CD8+Per+ Т-лимфоцитов в периферической крови больных

5.2.2. Оценка кривых выживаемости в зависимости от содержания CD56+CD16+ Т—лимфоцитов в периферической

крови больных

5.2.3. Оценка кривых выживаемости в зависимости от содержания CD4+CD25+ Т-лимфоцитов в периферической

крови больных

5.3. Выявление предикторов выживания больных глиобластомой

5.4. Оценка кривых выживаемости в зависимости от

цитотоксической активности дендритных клеток in vitro

5.5. Выявление предиктора глиобластомы на основании оценки цитотоксической активности интерферон альфа индуцированных дендритных клеток больных

супратенториальными глиальными опухолями in vitro

ГЛАВА 6. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Диагностические и прогностические клинико-иммунологические параметры у больных с супратенториальными глиомами»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы

В настоящее время в России, как и в других странах мира чётко прослеживается тенденция к увеличению заболеваемости опухолями центральной нервной системы [1,2,3,6,14,17,24,44,45,48,55,58,98].

Частота первичных опухолей головного мозга у взрослого населения составляет от 7,42 до 13,9 на 100 ООО населения в год [3,39,44,48,128], при этом наибольший удельный вес составляют глиомы 50-55%, причем от 50 до 60% из них являются злокачественными [1,2,3,39,55,58].

В последние десятилетия, благодаря научно-техническому прогрессу, в рутинной нейрохирургической практике стало возможным применение микрохирургической техники с высокой увеличительной способностью. Использование интраоперационных нейронавигационных и флюорисцентных технологий, а также интраоперационного МРТ позволяет максимально радикально резецировать опухолевые образования [19,20,21,57,58,59,61,62,63,64]. Использование на диагностическом этапе современных томографов даёт возможность идентифицировать заболевание на ранних (иногда доклинических) стадиях, результатом чего является успешное, радикальное хирургическое лечение внемозговых опухолей (менингиом, неврином и др.) [53,54,56,112]. В то же время с учётом всех новейших высокотехнологических разработок тотального удаления внутримозговых опухолей удаётся добиться далеко не всегда. Это обусловлено рядом факторов: опухоль может поражать функционально-значимые зоны головного мозга, манипуляции на которых могут приводить к грубой инвалидизации больных. Глиальные опухоли обладают высокой способностью к инфильтративному росту и не имеют капсулы, что делает определение визуальных границ со здоровой мозговой тканью затруднительным. Даже при условии удаления всего опухолевого узла в перитуморозной зоне встречаются опухолевые клетки, что наиболее выражено при злокачественных новообразованиях, последующий рост и размножение которых приводит к

рецидивам заболевания [1,2,5,57,61,63,64,65,68,70,71,75,77,78,79,80,84,85,92]. Учитывая, что результаты хирургического лечения больных с глиальными опухолями мозга, даже в условиях использования современных технологий, не позволяют добиться иррадикации опухоли, выработан единый комплексный подход к лечению низкодифференцированных внутримозговых опухолей. Он включает в себя оперативное вмешательство, направленное на максимальную опухолевую циторедукцию, лучевую и химиотерапию, а также опционально применяется иммунокоррекция [9,10,12,13,36,39,46,72,76,93,97,100,101,109,144, 146,152,153, 158].

Несмотря на комплексный подход в лечении, очень редко удается стабилизировать рост злокачественной глиальной опухоли и значительно продлить жизнь пациентам. Медиана выживаемости у больных с глиомами низкой степени злокачественности составляет в среднем 80 месяцев. У больных с анапластической астроцитомой составляет порядка 30 месяцев, а в случае глиобластомы от 10 до 14 месяцев с момента установления диагноза [3,39,44,48,59,82,128,130,148,149,163,164].

В условиях современного общества актуальной проблемой является не только совершенствование лечения больных со злокачественными заболеваниями головного мозга, но и возможность прогноза течения заболевания. Выявление дополнительных прогностических факторов, помимо гистологического диагноза, объёма резекции опухоли и возраста [38,66,69,81,124,127,149,151,154], указывающих на неблагоприятный прогноз.

Низкая эффективность современных методов лечения опухоли обусловлена недостаточным пониманием всех механизмов нарушения противоопухолевого ответа и причин формирования иммунологической толерантности к опухолевым антигенам. Известно, что опухолевые клетки могут распознаваться и уничтожаться иммунной системой. Однако, в условиях клинической манифестации и прогрессии опухоли, иммунный ответ оказывается несостоятельным [163,170,171]. Глиальные опухоли в отличие от других новообразований имеют ряд особенностей: они расположены в мозге,

являющегося забарьерным органом, где иммунные реакции протекают менее интенсивно [18,22,23,26,27,96,110,113,114,115]. Глиальные опухоли также продуцируют ряд медиаторов (IL-10; TGF-(3; VEGF; PGE2), влияющих как на локальное ослабление иммунного ответа в перитуморозной зоне, так и вызывающих иммуносупрессию на организменном уровне

[28,29,52,91,95,106,107,118,119,147,172]. Особенности глиальных опухолей обуславливают необходимость дальнейшего исследования характера их взаимоотношений с иммунной системой организма, совершенствование знаний о механизмах иммуносупресси и опухолевой резистентности. А также изучения особенностей иммунных нарушений при этих опухолях и разработку методов их коррекции.

Противоопухолевый иммунный ответ сложный многоступенчатый процесс, главным эффекторным звеном которого являются цитотоксические лимфоциты (ЦТЛ) и натуральные киллерные лимфоциты (НК), вызывающие гибель опухолевых клеток. У больных глиомами наблюдается дефицит Т - клеточной иммунологической реактивности in vitro и in vivo, супернатанты культуры человеческой глиобластомы угнетают in vitro ответ Т - лимфоцитов. Установлено снижение субпопуляций CD3+, CD4+, CD16+ лимфоцитов у больных опухолями головного мозга [22,24,25,26,27,28,29,30,31,32,34].

В качестве одной из причин угнетения иммунного ответа может быть вовлечение регуляторных Т - лимфоцитов (Трег) с супрессорной активностью. В экспериментальных моделях у мышей показано, что опухолевый рост сопровождается увеличением численности регуляторных Т - клеток (CD4 CD25 ). Причем их истощение приводит к отторжению или уменьшению опухоли, что свидетельствует об их ингибирующем эффекте на противоопухолевый иммунный ответ. Известно, что иммуносупрессия при ряде злокачественных онкологических заболеваний (например при раке яичников, поджелудочной железы, молочной железы, толстого кишечника, лёгких, раке пищевода) опосредована именно данным типом клеток [174,175,176,177,178]. Увеличение регуляторных Т - лимфоцитов при большинстве форм рака

выявляется как в локальном опухолевом микроокружении, так и периферической крови, что свидетельствует о генерализованном характере опухоль индуцированной супрессии. Так у больных раком желудка и колоректальным раком отмечено увеличение содержания данной популяции клеток в периферической крови, а при утяжелении заболевания отмечалось увеличение процентного содержания Трег в периферической крови [179,180]. Глиомы, в особенности высокой степени злокачественности, выделяют большое количество хемоаттрактантов (в их числе ИЛ-2, ИЛ-10) и вызывают миграцию регуляторных клеток в перифокальную зону. При этом установлена взаимосвязь между степенью злокачественности глиом (Grade по ВОЗ) и степенью инфильтрации опухолевого микроокружения регуляторными Т-лимфоцитами: с увеличением злокачественности отмечается более интенсивная инфильтрация данными типами клеток [145].

Дендритные клетки (ДК) играют ведущую роль в запуске специфического противоопухолевого иммунного ответа, поскольку наделены уникальной способностью захватывать, процессировать и презентировать опухолевые антигены наивным CD4+ Т-лимфоцитам, а также эффекторным CD8+ Т-клеткам [15,16,24,28,34,40,50,91,145,165,166]. Исследования последних лет показали, что помимо важной роли в запуске противоопухолевого иммунного ответа, ДК могут непосредственно подавлять рост опухолевых клеток за счет цитотоксического (способность к прямому лизису опухолевых клеток) и цитостатического (ингибирование опухолевого роста) эффектов [166,167]. Двойственная функция ДК как непосредственных эффекторов (клеток - киллеров) врожденного иммунитета и индукторов/регуляторов адоптивного иммунного ответа придает особую значимость ДК в противоопухолевой защите. При этом множество механизмов, задействованных в реализации цитотоксической активности ДК, по-видимому, позволяет преодолеть «резистентность» опухолевых клеток к лизису. Разрушение опухолевых клеток дендритными клетками сопровождается высвобождением опухолевых антигенов, которые могут сразу же презентироваться дендритными клетками Т-лимфоцитам. Кроме того, важно

отметить, что благодаря специфическому распознаванию через рецепторы №С020 цитотоксическая активность ДК направлена именно против опухолевых, но не нормальных клеток [51,108,169].

Прежде исследования показателей выживаемости больных супратенториальными глиальными опухолями и сопоставление полученных данных с отдельными показателями противоопухолевого клеточного иммунитета не проводились. В доступной литературе отсутствуют данные о наличии взаимосвязи содержания в периферической крови цитотоксичесих лимфоцитов (С08+Рег+), активированных натуральных киллерных клеток (С056+С016+), естественных регуляторных клеток (С04+СБ25+) со степенью злокачественности внутримозговых опухолей и продолжительностью жизни больных. Исследование цитостатической и цитотоксической функций дендритных клеток у больных супратенториальными глиомами прежде не проводилось. Исходя из изложенного выше, была сформулирована цель работы.

Цель исследования: На основании комплекса клинических, гистологических и иммунологических показателей у больных супратенториальными глиомами оценить их диагностическую и прогностическую значимость как биомаркеров степени злокачественности опухоли и предикторов выживания.

Задачи исследования

1. Оценить показатели выживаемости у больных с глиальными опухолями различной степени злокачественности и изучить роль гистологических и клинических факторов в качестве предикторов выживания пациентов.

2. Исследовать содержание цитотоксических лимфоцитов (С08+Рег+), натуральных киллерных клеток (С056+С016 ) и естественных регуляторных клеток (С04+С025+) в периферической крови у больных супратенториальными глиомами и здоровых доноров.

3. Изучить цитостатическую и цитотоксическую активность дендритных клеток у больных с супратенториальными глиомами головного мозга и здоровых доноров.

4. Охарактеризовать прогностическую значимость клинических, гистологических и иммунологических параметров как потенциальных предикторов выживания пациентов с глиомами головного мозга и выявить среди них тесты с наибольшей прогностической значимостью.

Основные положения, выносимые на защиту

1. В клинической картине заболевания степень злокачественности по шкале Grade (ВОЗ) является информативным, независимым от прочих предиктором выживаемости больных злокачественными супратенториальными глиомами, тогда как ранжирование по классификации ICD-O (МКБ) не коррелирует с показателями выживаемости.

2. Степень злокачественности супратенториальных глиом по шкале Grade (ВОЗ) обратно коррелирует с количественным содержанием Трег, которое в свою очередь является предиктором выживаемости больных глиобластомой независимо от возраста и индекса качества жизни.

3. Дендритные клетки больных обладают сниженной цитотоксической активностью, и значение данного параметра ниже 9% является дополнительным диагностическим маркером глиобластомы на этапе клинико-лабораторной дифференциальной диагностики объёмного инракраниального образования.

Научная новизна заключается в том, что впервые:

- проведен анализ показателей выживаемости больных глиальными опухолями различной степени злокачественности и оценена роль клинических, гистологических и иммунологических факторов в качестве предикторов выживания пациентов;

- произведена сравнительная оценка прогностических факторов выживания больных глиальными опухолями. Установлено, что из набора показателей лишь степень злокачественности по шкале Grade (ВОЗ) является информативным независимым предиктором выживания данной категории больных;

- установлено, что количество естественных Трег (CD4+CD25+) в периферической крови больных выше, чем в крови здоровых доноров. Получены данные о наличии обратной зависимости между количеством данной

субпопуляции лимфоцитов и степенью злокачественности глиальной опухоли. Впервые количественное содержание Трег сопоставлено с показателями выживаемости больных злокачественными супратенториальными глиомами. Выявлено более низкое содержание натуральных киллерных лимфоцитов (ХЛ)56+СВ16+) в периферической крови у больных глиобластомами как по сравнению с показателями здоровых доноров, так и по сравнению с показателями больных прочими глиальными опухолями. В ходе анализа установлено, что низкое содержание данной субпопуляции лимфоцитов в периферической крови больных злокачественными супратенториальными глиомами указывает на худший прогноз, поскольку ассоциировано с наличием глиобластомы;

- изучена и оценена цитостатическая и цитотоксическая функции дендритных клеток больных супратенториальными глиомами. Установлено, что, в отличие от клеток здоровых доноров, дендритные клетки больных характеризуются отсутствием цитостатической активности и снижением цитотоксической активности против клеток линии НЕр-2. При этом наибольший дефект цитотоксичности дендритных клеток выявлен у больных глиобластомой.

На основе полученных данных разработан оригинальный способ диагностики глиобластомы головного мозга, на который получен патент № 2444732 от 10.03.2012 г. (Ступак В. В., Мишинов С. В., Леплина О. Ю., Тыринова Т. В., Останин А. А., Черных Е. Р.).

Практическая значимость

Наряду с клиническими предикторами выживаемости больных с глиомами различной степени злокачественности, выявленная сопряженность между сроками выживания пациентов и содержанием Трег в периферической крови обосновывает возможность использования данного маркера в качестве независимого предиктора выживаемости как в общей группе больных злокачественными супратенториальными глиомами, так и в группе глиобластом в отдельности.

В случаях неясной гистологической картины опухоли наличие выраженного угнетения цитотоксической активности ДК свидетельствует о глиобластоме.

Внедрение в практику

Результаты проведённых исследований внедрены в клиническую практику отделения нейрохирургии №1 ФГБУ «Новосибирский НИИТО» Минздрава России, в качестве диагностического теста для выявления глиобластом у больных с внутримозговыми объёмными образованиями супратенториальной локализации. Также полученные данные включены и используются в педагогическом процессе на кафедре клинической иммунологии ГБОУ ВПО «Новосибирский Государственный Медицинский Университет» Минздрава России, на кафедре нейрохирургии и неврологии ФПК и ППС ГБОУ ВПО «Красноярский Государственный Медицинский Университет им. проф. В.Ф.Войно-Ясенецкого» Минздрава России и при обучении ординаторов в центре нейрохирургии ФГБЛПУ «Научно-клинический центр охраны здоровья шахтёров».

Публикации

По теме диссертации опубликовано 20 научных работ, 7 - в рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК и 12 в материалах научно-практических конференций.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, шести глав, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы. Работа изложена на 155 страницах машинописного текста, иллюстрирована 33 рисунками, содержит 55 таблиц. В указателе литературы приводится 52 отечественных и 128 зарубежных источников.

Исследования выполнены в клинике нейрохирургии Новосибирского НИИТО, лаборатории клеточных технологий НИИКИ СО РАМН, патоморфологической лаборатории Регионального Центра Высоких Медицинских Технологий.

Тема кандидатской диссертации является составной частью плановой темы № 034 «Комплексное лечение опухолей головного мозга с использованием высокоинтенсивного лазерного излучения инфракрасного диапазона спектра,

методов адоптивной иммунотерапии и фотодинамической терапии» с № гос. регистрации 01.20.0004114, научного руководителя кандидатской диссертации д-ра мед. наук, профессора Ступака В.В. по специальности 14.01.18 -«нейрохирургия».

Глава 1. СОВРЕМЕННЫЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ ОБ ОСОБЕННОСТЯХ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ БОЛЬНЫХ ГЛИАЛЬНЫМИ ОПУХОЛЯМИ ГОЛОВНОГО МОЗГА (обзор литературы)

Эпидемиология глиом

Термин «глиома» был предложен Р. Вирховым более полутора века назад. Глиомы - это первичные опухоли головного мозга, происходящие из клеток глии. Начиная с 50-х годов прошлого столетия был опубликован ряд работ и монографий, посвященных классификации глиальный опухолей (Б.М. Никифоров, Д.Е. Мацко 2003; Б.С. Хоминский 1969; Л.И. Смирнов 1962; F.C. Stam 1991, Zulch 1956). В настоящее время под эти термином в научной литературе подразумевают часть нейроэпителиальных опухолей, исходящих из астроцитарного или олигодендрогиального ростка. Морфологический диагноз глиом формулируется согласно классификации ВОЗ (Лион 2007).

Впервые классификация опухолей нервной системы с указанием степени злокачественности Grade была опубликована ВОЗ в 1979 году, которая используется в настоящее время и является основной для построения морфологического диагноза. Ранжирование опухолей осуществляется согласно наличию следующих признаков:

Grade I - опухоли с низким пролиферативным потенциалом, часто дискретной природы, которые могут быть излечены исключительно хирургическим методом.

Grade II - опухоли, характеризующиеся инфильтративным ростом, и несмотря на низкую митотическую активность, склонны к рецидивированию. Некоторые типы этих опухолей склонны к прогрессирующему снижению степени дифференцировки и трансформации в злокачественные формы.

Grade III - опухоли с отчетливыми проявлениями инфильтративного роста и признаками анаплазии, такими как ядерная атипия и высокая митотическая активность.

Grade IV - опухоли с высоким уровнем митотической активности, склонные к образованию очаговых некрозов, характеризующиеся быстрым прогрессированием заболевания.

Глиальные опухоли по классификации ВОЗ в зависимости от агрессивности их роста подразделяются на: медленнорастущие (Low-grade I-II) или глиомы низкой степени злокачественности и быстрорастущие (High-grade III-IV), глиомы высокой степени злокачественности (WHO Classifications of Tumors of the Central Nervous System, 2007). Различают следующие варианты роста внутримозговых опухолей головного мозга [1,2,4]:

- узловой, при котором преобладает экспансивный рост опухоли; опухоль довольно четко отграничена от мозговой ткани; опухолевых клеток в перифокальной зоне нет или же они обнаруживаются в незначительном количестве в непосредственной близости от опухоли;

- диффузный, при котором преобладает инфильтративный рост опухоли, нет четкого разграничения между опухолью и нормальной мозговой паренхимой, последняя на значительном протяжении инфильтрирована опухолью.

Диффузный или инфильтративный рост опухоли характерен для злокачественных, быстрорастущих глиом (анапластических астроцитомах и особенно глиобластомах). При продолженном росте опухоли тенденция к инфильтративному росту проявляется более ярко. Чем лучше контроль над локальным продолженным ростом опухоли, тем чаще возникают очаги отдаленного продолженного роста опухоли и её мультифокальные очаги [1,2,4,15,16,39].

В международной классификации болезней (МКБ 10) представлена другая классификация опухолей центральной нервной системы, которая является одной из частей общей онкологической классификации - ICD-O (International Classification of Diseases for Oncology). Все опухоли делятся на 5 групп, глиальным определены три: 0 - доброкачественные; 1 - пограничные, неопределенные как доброкачественные или злокачественные; 3 -злокачественные опухоли. К доброкачественным относятся три типа смешанных

нейронально-глиальных опухолей, которые в настоящем исследовании не представлены.

В структуре общей онкологической заболеваемости опухоли головного мозга занимают от 0,7 до 1,5%. Частота первичных опухолей головного мозга у взрослого населения по разным данным составляет от 7,42 до 13,9 на 100 ООО населения в год. Соотношение заболеваемости первичными опухолями головного мозга у лиц мужского и женского пола составляет 1,1 : 1,0. Лидирующую позицию занимают глиальные опухоли, составляя от 50 до 55 % среди всех опухолей головного мозга, что составляет около 1,4 % от всех выявляемых злокачественных опухолей различных органов и систем человека. При этом у взрослых пациентов 90% глиом локализуется в больших полушариях головного мозга. От 50 до 60% глиальных опухолей являются злокачественными. Частота возникновения глиальных опухолей в различных возрастных группах увеличивается примерно на 1,2 % для каждого прожитого года и достигает плато после 70 лет [1,2,3,6,14,17,24,39,44,45,48,55,58,98, 128,130,148,149,158].

По данным статистки США заболеваемость опухолями головного мозга имеет ежегодную тенденцию к увеличению, так по данным F.G. Davis в 2000 году этот показатель составил 13,8 на 100 000 населения в год. Спустя 8 лет по данным Американского Онкологического Общества зарегистрировано 16,5 случаев заболеваемости на 100 000. При этом частота злокачественных глиом составляет порядка 6,4 на 100 000 населения в год [128].

По данным исследователей Северной Америки и Европы при условии проведения комбинированного лечения медиана выживаемости у больных с глиомами низкой степени злокачественности (Low Grade) составляет в среднем 80 месяцев, 5-ти и 10-ти летняя выживаемость регистрируется у 54% и 31% больных соответственно. Медиана безрецидивного периода составляет 56 месяцев, при этом 5-ти и 10-ти летняя выживаемость без признаков рецидива составляет 45% и 24%. Что же касается дедифференцированных глиом (High Grade) показатели разняться в зависимости от типа опухоли. Так медиана выживаемости больных с анапластической астроцитомой (Grade III) колеблется от 24 до 36 месяцев в

зависимости от объёма получаемого комбинированного лечения, наличия повторных операций. Отсутствие признаков рецидива в течение года после операции отмечается у 46% больных. Выживаемость больных в течение 1 года составляет 85,5% больных, 2-х лет - 70,9%, 3-х лет - 27,3%. Медиана продолжительности жизни больных глиобластомой (Grade IV) составляет от 10 до 14 месяцев с момента установления диагноза, а 5-ти летняя выживаемость не превышает 4% [1,2,6,39,128,158].

Ранее тенденция к ежегодному увеличению заболеваемости опухолями ЦНС объяснялась высокой частотой выявляемое™ заболеваний в результате возрастающего числа скрининговых исследований. Однако, в настоящее время, когда в развитых странах население равномерно охвачено диагностической медицинской базой, тенденция всё равно сохраняется, что свидетельствует о возрастающем числе онкологических заболеваний центральной нервной системы [1,2,3,6,19,20,21,39,44,48,53,54,56,112].

Иммунная система при опухолях головного мозга.

Иммунология новообразований изучается уже более века, однако единого устоявшегося мнения о роли иммунных реакций к настоящему времени нет. Подробно изучены нарушения в различных звеньях клеточного и гуморального иммунитета, установлены изменения в отдельных субпопуляциях клеток врождённого и приобретённого иммунитета, цитокинового статуса организма, экспрессии антигенов иммунного ответа и системы антигенов HLA и т.д. В то же время многие представления о взаимодействии опухоли и иммунной системы остаются нерешёнными и требуют дальнейшего исследования, исходя из новых методических и теоретических построений [8,18,22,23,25,31,33,35,41,118].

Глиальные опухоли в отличие от других опухолевых образований имеют ряд особенностей. Они расположены в мозге, являющегося забарьерным органом, где иммунные реакции протекают менее интенсивно. Иммунная привилегия считается эволюционной адаптацией для защиты жизненно важных структур от потенциально разрушительных эффектов воспалительного иммунного ответа.

Ранее считалось, что гематоэнцефалическим барьером мозг полностью изолирован от иммунной системы. На смену этому постулату пришло признание того, что микроглия помимо выполнения поддерживающей и трофической функции для нейронов, обладает иммунокомпетентными свойствами, формируя иммунную систему головного мозга [24,26,28,33]. Иммунный статус микроглии отличается от такового в периферической крови, а иммунные функции находятся под контролем внутренних ингибирующих факторов ЦНС (TGF-ß2, ИЛ-10), вырабатываемыми нейронами. В клетках микроглии обнаруживаются антигены главного комплекса гистосовместимости, маркёров Т- и В- лимфоцитов, также клетки микроглии обладают слабыми по сравнению с клетками периферических органов антигенпрезентирующими свойствами [92,93,94,95,96,]. Также рядом исследователей было продемонстрировано, что активированные цитотоксические лимфоциты (CD 8+) способны проникать через гематоэнцефалический барьер [26,27,142].

Глиальные опухоли обладают высокой способностью к инфильтративному росту во внеклеточном пространстве мозга и слабой пенетрирующей способностью в сосудистое русло, в связи с чем их метастазирование относится к казуистики. Что делает невозможным контакт опухоли и иммунной системы в лимфоидных органах. Дифференцированные глиомы несут на своей поверхности большее количество антигенов здоровых клеток мозга, чем чужеродных, что в условиях забарьерной ткани не вызывает развития адекватного противоопухолевого иммунного ответа. Клетки злокачественных глиом быстро делятся, в ходе чего антигенный состав становится очень вариабельным. В таких условиях иммунная система не в состоянии наработать адекватного количества цитотоксических лимфоцитов и глиомы таким образом «ускользают» от иммунного ответа. Глиальные опухоли также продуцируют ряд медиаторов (ILIO; TGF-ß; VEGF; PGE2), влияющих как на локальное ослабление иммунного ответа в перитуморозной зоне, так и вызывающих иммуносупрессию на организменном уровне [114,115,116,117,118,171,173].

Представленные выше некоторые особенности глиальных опухолей обуславливают необходимость дальнейшего исследования характера их взаимоотношений с иммунной системой организма. А также изучения особенностей иммунных нарушений при этих опухолях и разработку методов их коррекции.

Изучение иммунного ответа при глиомах имеют две составляющие части: первая - исследование особенностей иммунной системы на организменном уровне, вторая - изучение иммунологических взаимодействий в опухолевом микроокружении.

У больных глиомами наблюдается дефицит Т-клеточной иммунологической реактивности in vitro и in vivo, супернатанты культуры человеческой глиобластомы угнетают in vitro ответ Т-лимфоцитов [110,113,116,118]. Установлено снижение субпопуляций CD3+, CD4+, CD 16+ лимфоцитов у больных опухолями головного мозга [23,26], также не было выявлено какой-либо корреляции между степенью атипии опухоли мозга и параметрами иммунного статуса [24,31]. В то же время В-субпопуляция лимфоцитов практически не меняет своего количественного состава. Установлено, что клетки глиом продуцируют ряд иммуносупрессивных факторов, к которым относят простогландин Е2 (PGE2), бетатрансформирующий фактор роста (TGF-(3). Эти факторы тормозят активацию лимфоцитов и их пролиферацию. Было показано, что глиальные клетки вырабатывают ИЛ-6 и ИЛ-10, которые блокируют специфический ответ лимфоцитов на Th-1 пути и стимулируют Th-2 клеточный ответ лимфоцитов, а этот путь, как известно, является менее эффективным в борьбе с глиомами, чем клеточно-опосредованный иммунный ответ [113,114,117,118,120].

Ещё одним из механизмов, оказывающих влияние опухоли на иммунную систему является индукция ею апоптоза в лимфоцитах, особенно среди цитотоксических лимфоцитов, которые избирательно активируют опухоль-ассоциированные антигены и функция их заключается в оказании цитотоксического и цитолитического действия на опухолевые клетки.

Существуют данные об экспрессии на клетках глиом как Баз-рецептора, так и Баз-лиганда, способного индуцировать через Баз-рецептор (СБ95+ рецептор) апоптоз лимфоцитов. Тем более, что, как отмечают многие авторы, у больных со злокачественными глиомами в крови повышенный уровень лимфоцитов (в 3-4 раза), экспрессирующих СБ95 рецептор, отвечающий за восприятие и передачу в клетку апоптического сигнала [25,103,118].

В прямых экспериментальных опытах было показано, что если происходит контакт Т-лимфоцита, у которого имеется Баз-рецептор (СЮ95+) с опухолевой клеткой, несущей Баз-лиганд, то происходит ап оптическая гибель этого лейкоцита. Более того, иммуногистохимическими методами подтверждено, что вокруг глиомных клеток, имеющих Баз-лиганд, расположены Т-лимфоциты, находящиеся в состоянии апоптоза [99,113]. В то же время отмечено, что сами опухолевые клетки, имея рецептор апоптоза, не подвергаются апоптозу, что связано, как предполагается, с изменением внутриклеточной регуляции в части передачи сигнала от Баз-рецептора в опухоли, что есть одним из объяснений «ухода» опухолевых клеток от воздействия иммунных факторов, повреждение которых реализуют цитотоксические лимфоциты, включая и системы Баз-рецептор - Баз-лиганд [118]. Помимо этой рецепторной системы индукции апоптоза, существуют и другие системы рецепторов, способные вызывать апоптоз, например через ФНО-альфа и его рецептор СБ70+ / СТ)21+. В частности, показано, что глиомы защищаются от действия лимфоцитов тем, что экспрессируют СЭ70 (эта молекула относится к семейству факторов некроза опухоли) и при взаимодействии с лимфоцитами, имеющими на своей поверхности СТ>21 рецептор, необходимый в физиологических условиях для так называемой костимуляции Т-лимфоцитов и последующей их пролиферации, происходит вместо активации пролиферация этих Т-лимфоцитов и развитие апоптоза [120,121]. Таким образом, существует, по-видимому, несколько молекулярных механизмов, посредством которых глиальная опухоль способна индуцировать апоптоз лимфоцитов и тем самым вызывать специфическую селективную иммуносупрессию, защищающую от воздействия иммунных реакций.

Накопленные знания об изменениях в иммунной системе у больных с различными гистотипами глиобластом систематизированы в виде формирования двух групп пациентов. Первая категория - больные с синдромом опухоль-ассоциированного иммунодефицита (СОАВИД), вторая - с синдромом опухолевоассоциированного иммунодефицита в сочетании с вторичным иммунодефицитом (ВИДОАС). В структуре первой группы выделено два субфенотипа: 1-е выраженным иммунодефицитом и II - со слабовыраженным иммунодефицитом или его отсутствием [31]. Особенностью группы с СОАВИД I является наличие ярко выраженных диспропорций в составе субпопуляций, затрагивающих эффекторные и регуляторные звенья сразу двух ветвей иммунитета: адаптивного и врождённого. В группе СОАВИД II картина субпопуляционного спектра клеток крови имеет минимальные отличия от значений нормы, а в ряде случаев патологические сдвиги касаются только отдельных параметров субпопуляционного спектра клеток периферической крови. ВИДОАС является той иммунологической формой глиобластом, в составе которой преобладают варианты течения опухоли с более агрессивными и инвазивными свойствами [31,32].

Помимо изучения иммунного ответа при глиальных опухолях на организменном уровне не менее важным является изучение особенностей иммунологических взаимодействий в опухолевом микроокружении. Известно, что глиомы высокой степени злокачественности вызывают не только генерализованную, но и выраженную локальную иммуносупрессию.

Установлено, что активированные цитотоксические лимфоциты (СВ8+), являющиеся эффекторами клеточного иммунитета способны проникать через гематоэнцефалический барьер, при этом они обнаруживаются в перифокальной опухолевой зоне. Но превалирующая их часть при этом находится в состоянии анергии или апоптоза. Одной из причин этому являются межклеточные взаимодействия, происходящие в опухолевом микроокружении. Клетки глиом помимо множества медиаторов продуцируют ССЬ-2 (СЬетокте ^апс! 2), являющийся аттрактантом регуляторных Т- клеток [171]. Трег являются

субпопуляцией CD4+ Т лимфоцитов, которые экспрессируют на свой поверхности транскрипционный фактор Foxp3, CD25 рецептор (CD25+) высокоаффинный к ИЛ-2 и В7 лиганд (CTLA4). Они ответственны за поддержание иммунологической толерантности в течение жизни [162,174,175]. Известно, что мутации Foxp3 взывают острые аутоиммунные расстройства у человека. Трег накапливаются в глиомах и перифокальной зоне в течение всей опухолевой прогрессии, при этом интенсивность инфильтрации прямо коррелирует со степенью злокачественности опухолей по Grade [161]. Также установлено, что Трег экспрессируют на своей поверхности В7-Н1 - гомолог В7 лиганда, синоним - лиганд программируемой клеточной гибели (PD-L1). Этот трансмембранный белок играет иммуносупрессорную роль, за счёт того, что передаёт тормозные сигналы на CD8+ Т-лимфоциты. Факт, того, что Трег ответственны за подавление противоопухолевого иммунного ответа подтверждён рядом исследований, в которых при ингибировании данной субпопуляции отмечено повышение эффективности специфической иммунотерапии и увеличение продолжительности жизни больных [99,144,145,160,168,170].

Таким образом, развивающаяся иммуносупрессия при глиомах головного мозга носит как генерализованный, так и локальный характер. При этом в случае последнего это реализуется за счет и системных ингибирующих факторов (IL-10; IL-2; TGF-[3; VEGF; PGE2), а также путём непосредственных межклеточных взаимодействий.

Совершенствование знаний о взаимоотношениях глиальных опухолей и иммунной системы, а также об особенностях микроокружения опухоли может привести к возникновению новых стратегий адъювантной терапии этих новообразований.

Прогностические факторы при глиомах головного мозга

Несмотря на комплексный подход в лечении злокачественных опухолей головного мозга, очень редко удается стабилизировать рост опухоли и значительно продлить жизнь больным. В условиях современного общества

актуальной проблемой является не только совершенствование лечения больных, но и возможность прогноза течения заболевания, поскольку вопрос излечения таких пациентов в настоящее время остаётся открытым.

Всё многообразие прогностических критериев можно разделить на две группы: первая, объединяющая в себе клинические критерии, такие как размер опухоли и её локализация, радикальность удаления, возраст, индекс качества жизни по Карновскому. Вторая, заключающая в себе лабораторные критерии: гистологическое, иммуногистохимическое, молекулярно-генетическое, а также иммунологическое исследования [7,11,14,16,38,39,43,48,66,69,81,83,124,127,131, 132,149,151]. Первые три характеризуют саму опухоль, в то время как последний даёт представление о состоянии иммунологического ответа со стороны организма - носителя опухоли. Гистологический диагноз по-прежнему является главным предикторным фактором выживания больных. Иммуногистохимическое исследование позволяет нивелировать спорные моменты при постановке патоморфологического диагноза. Всё множество гистотипов опухолей ЦНС систематизировано ВОЗ в 4 классах (Grade). Каждый из которого, имеет своё прогностическое значение. Тем не менее, методики исследования морфологического строения опухоли не дают всего понимания биологии этих образований. В связи с этим бурное развитие получили молекулярно-генетические исследования. На этапе их развития были предприняты попытки идентификации прогностической значимости различных особенностей патоморфологии и молекулярной генетики опухолей, однако результаты были крайне противоречивы. С течением времени было однозначно установлено, что на продолжительность жизни больных с глиобластомами существенное влияние оказывают следующие молекулярно-биологические критерии: пролиферативный потенциал, экспрессия внутриклеточного домена рецептора эпидермального фактора роста и интенсивность процесса апоптоза [37,38]. Также продемонстрирована связь между высокой метилирующей активностью метилгуанинметилтрансферазы (MGMT) и увеличениями сроков выживаемости больных с глиомами высокой степени злокачественности [38,100].

В настоящее время с появлением генетических чипов стало возможным одновременное исследования нескольких десятков генов на одном биологическом материале. Как известно глиомы вариабельны по своему антигенному составу, в особенности опухоли высокой степени злокачественности. Соответственно возникают вопросы: какие именно гены, которые соответственно станут биомаркёрами выживаемости, следует ассоциировать со степенью злокачественности, устойчивости к радио- и химиотерапии, иммунологической толерантности. Ряд исследователей предлагает использовать генетические карты, которые будут более точными предикторами выживания по сравнению с гистологическим диагнозом и возрастом больных [124,125,126,127,130,131, 132,133]. Однако дороговизна и ресурсоёмкость этих диагностических методик не позволяет широкому их внедрению в практику, в связи с чем, данное направление продолжает бурно развиваться, чтобы с течением времени прийти на смену рутинному гистологическому исследованию.

Одновременно с развитием молекулярно-генетических исследований совершенствуются протеомные методики, позволяющие, в том числе, идентифицировать концентрацию различных веществ в сыворотке крови. Так наличие индивидуальных биомаркёров как инсулиноподобный ростовой фактор (IGFBP2), трансформирующий фактор роста (31/ (32 (TGFJ31 / 2), фактор роста эндотелия (VEGF) и опухолево-специфических ДНК, а также эндотелиальных клеток-предшественников в плазме крови больных глиомами были сопоставлены с гистологическим диагнозом. При этом отмечена положительная корреляционная связь между концентрацией данных веществ и степенью злокачественности опухоли. Что может позволить использовать их в качестве потенциальных предикторов течения заболевания [155,158]. Также установлено, что идентификация в периферической крови больных с глиомами головного мозга циркулирующих эндотелиальных клеток предшественников, экспрессирующих на своей поверхности второй тип рецептора к фактору роста эндотелия (EGFR 2), может свидетельствовать об активном процессе ангиогенеза в опухоли. Таким образом отражая её способность к быстрому, инвазивному росту [154]. Однако,

исследование специфических маркёров ассоциированных с наличием внутримозговых опухолей головного мозга в сыворотке крови представляет ряд сложностей: во-первых, глиомы находятся за гематоэнцефалическим барьером и концентрация исследуемых веществ в периферической крови гораздо меньше, чем в зоне опухоли. Во-вторых, то небольшое количество попадающих в кровь соединений, которых можно использовать в виде потенциальных маркёров глиом, растворяется в большом объёме циркулирующей крови. В-третьих, эти вещества могут осаждаться на клетках крови и не выделяться в «чистом» виде в плазме крови. Для повышения специфичности методики предложено использовать спинномозговую жидкость, поскольку концентрация искомых маркёров, как ожидается, должна быть выше, чем в периферической крови [158].

При поиске прогностических факторов заболевания важной составляющей является исследование особенностей иммунологических реакций, поскольку опухоль и организм неразрывно связаны и являются постоянно противоборствующими сторонами. Было установлено, что у больных глиомами головного мозга по сравнению со здоровыми донорами достоверно ниже содержание ИЛ-2, ФНО-альфа, IgG, IgA, фракции С4 комплимента, также снижено содержание CD3+; CD4+; CD8+; CD19+ лимфоцитов, снижено соотношение CD4/CD8, при этом увеличение степени злокачественности опухоли по Grade было ассоциировано с прогрессивным снижением CD3+; CD4+; CD8+ лимфоцитов в периферической крови. С увеличением степени злокачественности опухоли, также отмечено снижение содержания IL-2, IgG, фракции С4 комплимента в периферической крови больных. Таким образом, более высокая степень злокачественности опухоли по Grade была связана с более грубыми нарушениями иммунитета [18,22,24,26,27,47,52]. Было установлено, что после применения иммунотерапии у пациентов с глиомами высокой степени злокачественности в периферической крови помимо увеличения содержания CD3 ; CD4 ; CD 16 ; CD56 повышается также и содержание CD8 Т -лимфоцитов [23,28], а также отмечено усиление их цитотоксических свойств, при этом количество CD8+ Т - лимфоцитов прямо коррелирует с продолжительностью

жизни больных после проведённой иммунотерапии [163]. Анализ содержания в периферической крови регуляторных Т-лимфоцитов (СВ4+СЭ25+ РохрЗ+), ответственных за торможение противоопухолевого иммунного ответа, продемонстрировал высокое их содержание у больных с глиомами по сравнению со здоровыми донорами [159,170].

Установлена взаимосвязь между гистологическим диагнозом и иммунологическим фенотипом: группе больных с синдромом выраженного опухоль-ассоциированного иммунодефицита (СОАВИД I) чаще соответствовала наиболее злокачественная изоморфоклеточная глиобластома, в то время как в группе пациентов с синдромом слабовыраженного опухоль-ассоциированного иммунодефицита (СОАВИД II) превалирующую долю занимала относительно благоприятная гемистоцитарная глиобластома. Выявленная корреляция между гистотипом глиобластом и характером иммунологических расстройств может также быть использована в качестве потенциального предиктора течения заболевания [49].

Становится очевидным, что для оценки иммунологических расстройств, как и в случае с молекулярно-генетическими исследованиями, необходим анализ сразу нескольких параметров. Всё многообразие исследований, посвящённых состоянию иммунной системы, отражает иммуносупрессорную функцию глиом головного мозга, которая возрастает по мере озлокачествления опухоли, что, безусловно, отражается на прогрессии опухолевого роста и может быть использовано в качестве предикторов течения заболевания. Однако, вся полученная информация не даёт возможности обозначить иммунологические параметры с чётким числовым выражением, которые бы стали достоверными предикторами выживаемости больных с гиальными опухолями.

Резюме

В свете вышеизложенного дальнейшие исследования иммунной системы при глиальных опухолях головного мозга видятся перспективными. Поскольку позволят получить новые сведения о нарушениях иммунологического надзора, дадут возможность оценить значимость отдельных показателей в качестве

потенциальных предикторов злокачественности новообразований и продолжительности жизни, а также в перспективе, возможно, приведут к появлению новых стратегий в комбинированном лечении данной патологии.

Заключение диссертации по теме «Нейрохирургия», Мишинов, Сергей Валерьевич

ВЫВОДЫ

1. Из использованных клинических и гистологические показателей, класс злокачественности опухолей по шкале Grade (ВОЗ) является информативным, независимым от прочих предиктором выживаемости больных супратенториальными глиомами. Степень злокачественности новообразований по классификации ICD-O (МКБ) использовать как прогностический фактор у больных с глиальными опухолями нецелесообразно.

2. Количество регуляторных Т-клеток (CD4+CD25+) в периферической крови у больных супратенториальными глиомами выше по сравнению со здоровыми донорами и обратно коррелирует со степенью злокачественности опухоли по шкале Grade (ВОЗ). Количество натуральных киллерных клеток (CD56+CD16+) в периферической крови больных глиобластомами ниже как по сравнению со здоровыми донорами, так и с больными прочими глиальными опухолями, при этом количество цитотоксических лимфоцитов (CD8+Per+) в периферической крови здоровых доноров и больных глиальными опухолями не отличаются.

3. Цитотоксическая активность дендритных клеток угнетена у больных глиобластомами (0%) как по сравнению с больными прочими глиальными опухолями (9%), так и по сравнению со здоровыми донорами (17%). Одновременно дендритные клетки больных супратенториальными глиомами не обладают цитостатической функцией.

4. В комплексе клинико-лабораторных исследований показатель цитотоксической функции дендритных клеток больных объёмными супратенториальными образованиями менее 9% на этапе дифференциальной диагностики указывает на наличие глиобластомы. Абсолютное число Трег в периферической крови больных глиобластомой является наиболее информативным предиктором выживания, по сравнению с показателями возраста и индексом качества жизни в послеоперационном периоде.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. В нейрохирургической практике с прогностических позиций для больных глиальными опухолями целесообразно использовать классификацию степеней злокачественности по шкале Grade (ВОЗ), в то время как классификация ICD-O (МКБ) в качестве предиктора выживания менее информативна, а в случаях злокачественных глиом вовсе не обладает прогностической значимостью.

2. В случаях неясной гистологической картины по результатам патоморфологических исследований новообразований тест цитотоксической активности дендритных клеток больных супратенториальными опухолями против клеток линии НЕр-2 in vitro менее 9% указывает на наличие глиобластомы.

3. Абсолютное количество регуляторных (CD4+CD25+) Т - лимфоцитов в периферической крови больных глиобластомами менее 0,077 х 109 кл/л указывает на неблагоприятный прогноз выживания - менее 9 месяцев, - что можно использовать в клинической практике в качестве самостоятельного, независимого и информативного предиктора выживания. воз дк зно ив игх икж

ИНФ-ДК мАТ

МКБ

МНК

МНК-ПК

МРТ мскт ж сод тмо

Трег

ХТ

ЦТ цтл

Р1ТС НЕр-2 нее

CD-0

Ьвв Ме

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Мишинов, Сергей Валерьевич, 2013 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Зозуля Ю.А., Глиомы головного мозга. - Киев, 2007. - 636 с.

2. Земская А.Г., Лещинский Б.И. Опухоли головного мозга астроцитарного ряда. -Л., Медицина, 1985. - 216 с.

3. Розуменко В. Д. Эпидемиология опухолей головного мозга: статистические факторы // Укр. Нейрохирургический журн. -2002. -№3. -С.47-48.

4. Розуменко В.Д., Усатов CA. Характеристика перифокальных реакций в патогенезе клинических проявлений опухолей головного мозга // Укр. Нейрохирургический журн. -№4.-С.92-98.

5. Рамазанов Р.Х. Ультразвуковая хирургия опухолей головного мозга: Автореф. дис. канд. мед. наук. - М., 1984. -16 с.

6. Зозуля Ю.А., Розуменко В.Д., Лисяный Н.И. Проблемы современной нейроонкологии //Журн. АМН Украины. -1999. -Т.5, № 3. -С.426-441.

7. Ионова Т.И., Новик A.A., Сухонос Ю.А. Качество жизни онкологических больных //Вопр. онкологии. -1998. -№6. -С.749-752.

8. Кондратьева Т.В., Имянитов E.H., Того A.B. и др. Полиморфизм генов L-MYC и GST Ml у больных глиомами головного мозга // Вопр. онкологии. -1999.-Т. 45, N5.-С. 523-527.

9. Чехун В.Ф., Шишова Ю.В. Современные взгляды на механизмы формирования лекарственной устойчивости опухолей // Онкология. -2000. - Т.2, №1. -С.11-15.

10. Горбунова В.А. Темодал - новые возможности и перспективы лечения опухолей головного мозга // Фарматека. -2004. -№18. -С. 15-20.

11. Ионова Т.К., Новик A.A., Сухонос Ю.А. Понятие качества онкологического профиля жизни больных // Онкология. -2000. - Т2, №1-2. -С.25 -28.

12. Кобяков Г. Л. Химиотерапия в лечении злокачественных внутримозговых опухолей // Новое в химиотерапии. -2002. -Т.4., №1. -С.29-35.

13. Константинова М.М. - Современное состояние и перспективы химиотерапии злокачественных опухолей головного мозга // Современная онкология. -2003. -Т.4, №3. -С. 1-13.

14. Никифоров Б.М., Мацко Д.Е. Опухоли головного мозга. -СПб: Питер, 2003. - 320 с.

15. Олюшин В.Е., Тиглиев Г.С, Острейко О.В., Филатов М.В. Комбинированная специфическая противоопухолевая иммунотерапия лечения больных с продолженным ростом глиобластом: результаты пилотного исследования // III съезд нейрохирургов России. -СПб.,2002.-С. 135- 136.

16. Олюшин В.Е., Тиглиев ЕС, Филатов М.В. и др. Итоги и перспективы комплексной терапии больных с глиомами больших полушарий мозга. // III съезд нейрохирургов России. - СПб. - 2002. - С. 136.

17. Острейко О.В. Продолженный рост злокачественных глиом супратенториальной локализации: повторные операции, катамнез и некоторые вопросы комбинированного лечения. Автореф. дис. канд. мед. наук. - СПб, 2001. -23 с.

18. Примушко Л.И. Состояние иммунной системы у больных со злокачественными глиомами головного мозга на этапах комбинированного лечения : Дис. канд. мед. наук -К., 1988.- 176 с.

19. Журавлев A.B., Шершевер A.C., Белодед В.М. и др. Магнитно-резонансная и компьютерная томография в оценке результатов комплексного лечения глиальных опухолей головного мозга // III съезд нейрохирургов России: Материалы съезда. - СПб., 2002.

20. Коновалов А.Н., Корниенко В.Н., Кронин К.Н. Магнитно-резонансная томография в нейрохирургии. - М.: Видар, 1997. -472 с.

21. Пронин И.К., Талонов A.B., Петряйкин A.B., Родионов К.В. Возможности компьютерной и магнитно-резонансной томографии в изучении перитуморального отека и внутримозговых опухолей супратенториального расположения // Журн. Вопр. Нейрохирургии им. H.H. Бурденко. -1996. - №1. -С.10-11.

22. Гнедкова И.А. Изменение в регуляторном звене иммуногенеза у нейроонкологических больных и их клиническое значение: Дис. канд. мед. наук. -К.: 1991. 186 с.

23. Гнедкова И.А., Лисяный Н.И., Маркова О.В. Иммуномониторинг комбинированного лечения нейроонкологических больных //Иммунология и аллергология. Респ.межвед.сб. - К.: Здоровья, 1990. -Вып.24. -С.82-86.

24. Качков И.А., Биктимиров Р.Г., Захаров A.B. и др. Глиальные опухоли головного мозга: классификация, иммунопатогенез и иммунодиагностика //Вестн. РАМН. -2005. - №6. С.36-41.

25. Лисяный Н.И., Любич Л.Д. Нарушение апоптических процессов при глиоме головного мозга //Укр. Нейрохирургический журн. -2004. -№4. С.3-8.

26. Лисяный Н.И., Маркова О.В., Жмарева E.H. Активность естественных киллерных клеток периферической крови больных с опухолями головного мозга //Эксперим. онкология. -1988.-№3. С.57-59.

27. Маркова О.В. Состояние естественной киллерной активности лимфоцитов периферической крови больных с опухолями головного мозга: Дис. канд. мед. наук. -К., 1990. -196 с.

28. Останин A.A., Леплина О.Ю., Шевела Е.Я. и др. Изменение иммунологических показателей у онкологических больных при проведении адаптивной иммунотерапии //Иммунология. -1996. -№5. С.29-32.

29. Абрамов Ю.А. Основы нейроиммунологии. - Москва., 2004. - 100 с.

30. Чумаков В.А., Биктимуров Р.Г., Кочков И.А. Клинико-иммунологическая оценка апоптоза периферических лимфоцитов у больных с глиобластомой в предоперационном периоде // Рос.кон. нейроиммунопатология. -М., 2002. -С.85.

31. Чумаков В.А., Михайлов Р.В., Качков И.А. и др. Иммунодефицит, ассоциированный с глиобластомой //Аллергология и иммунология. -2005. -Т.6, №2. -Материалы П-ой Рос. конф. по иммунотерапии и иммунореабилитологии. -С. 184.

32. Чумаков, В.А. Особенности субпопуляционного спектра крови у больных с различными вариантами течения глиобластом: патогенетические и клинические аспекты: Автореф. дис. канд. мед. наук -М., 2006. - 24 с.

33. Верещагин Е.И. Механизмы цитокиновых реакций в ЦНС: дис. Д-ра мед. наук.- Новосибирск, 1998. -312 с.

34. Власов A.A., Новиков В.И., Карандашов В.И., Сидорович И.Г. Послеоперационная иммунотерапия больных со злокачественными новообразованиями. //Российский мед. журнал.- 1996.-№ 6.- С. 17-19.

35. Городилова В.В., Боева М.Н. Иммунобиология опухолевого роста. -М., 1983.-232 с.

36. Захарова Н.С. Дифференцированное лечение и адаптация больных с глиомами головного мозга труднодоступной локализации: Автореф. канд. мед. наук. Новосибирск, 2001.-21 с.

37. Коршунов А.Г., Сычева Р.В. Анализ взаимосвязей между пролиферативной активностью доброкачественных и анапластических астроцитом больших полушарий головного мозга и особенностями их гистоструктуры.//»Вопросы нейрохирургии» - 1997. - №1. - С.30-34.

38. Коршунов А.Г., Голанов A.B., Сычева Р.В., Пронин И.В., Л.М.Фадеева. Прогностическое значение онкоассоциированных белков и апоптоза в глиобластомах больших полушарий головного мозга. //»Архив патологии»-2000.-№1 .-С.7-11.

39. Олюшин В.Е., Филатов М.В., Улитин А.Ю., Бажанов С.П. Специфическая противоопухолевая иммунотерапия на основе дендритных клеток в комплексном лечении больных злокачественными церебральными глиомами. -СПб: Знакъ, 2012.-212 с.

40. Леплина О.Ю., Тихонова М.А., Козлов Ю.П., и др. Частично-зрелые дендритные клетки как потенциальная основа для индукции противоопухолевого ответа у больных злокачественными глиомами // Мед. иммунология. -2005. -Т.7, № 4. -С. 365-374.

41. Крыжановский Г.Г. Общая патофизиология нервной системы. - М., 1997.-350 с.

42. Марченко C.B. Комплексное лечение злокачественных глиом полушарий большого мозга: Автореф. дис. канд. мед. наук. -СПб., 1997. -24 с.

43. Новик A.A., Ионова Т.И., Кайнд П.. Концепция исследования качества жизни в медицине. -СПб., 1999. -232 с.

44. Олюшин В.Е., Улитин А.Ю. Глиальные опухоли. Распространенность в Санкт-Петербурге, результаты лечения. //Материалы II съезда нейрохирургов России в г.Нижн. Новгороде 16-19 июня 1998.-СПб,1998.-С148-149.

45. Савченко А.Ю. Глиомы головного мозга. - Омск, 1997. - 312 с.

46. Савченко А.Ю., Захарова Н.С. Принципы лечения больных с глиомами головного мозга.// Второй съезд нейрохирургов Российской федерации. Материалы. - Нижний Новгород, 1998. - С.110-111.

47. Тайцлин В.И., Сипитый В.И., Инис В.С, Френзель J1.M., Шафранский A.M. Состояние иммунитета и содержание средних молекул в крови у больных с опухолями головного мозга. // Журн. Неврологии и психиатрии им. С.С.Корсакова. - 1991. - Т.91. - №6, - С. 81-84.

48. Улитин А.Ю. Эпидемиология первичных опухолей головного мозга среди населения крупного города и пути совершенствования организации медицинской помощи больным с данной патологией: Автореф. дис. канд. мед. наук -СПб., 1997.- 23 с.

49. Чумаков В.А. Особенности субпопуляционного спектра крови у больных с различными вариантами течения глиобластом: патогенетические и клинические аспекты: Автореф. дис. канд. мед. наук - М., 2006. - 24 с.

50. Леплина, О.Ю., Ступак В.В., Козлов Ю.П., Пендюрин И.В., Никонов С.Д. и др. IFNa-индуцированные дендритные клетки в лечении больных злокачественными глиомами головного мозга. // Клеточные технологии в биологии и медицине -2007.№2.С.92-98.

51. Леплина О.Ю., Тихонова М.А, Козлов Ю.П., Ступак В.В., Останин A.A., Черных Е.Р. Характеристика IFNa-индуцированных дендритных клеток у

больных злокачественными глиомами головного мозга. // Бюллетень СО РАМН -2007.-Т.124.№2.-С.27-33.

52. Хонина Н.А., Центнер М.И., Леплина О.Ю., Тихонова М.А., Ступак В.В. и др. Характеристика и механизмы иммунных нарушений у больных со злокачественными опухолями головного мозга.// Вопросы онкологии -2002.-Т.48.№2.-С. 196-201.

53. Eernest Е, Kelly P.J., Sheithauer B.W. et al. Cerebral astrocytomas: histopathologic correlation of MRI and CT contrast enhancement with stereotaxic biopsy//Radiology. -1998. -V.166.-P.823-827.

54. Iwama Т., Yamada K., Sakai N. et al. Correlation between magnetic resonance imaging and histopatology of intracranial glioma // Neurol Res. -1991. -V. 13, №1. - P.49 - 54.

55. Matsucado Y., MacCarty C.S., Kernohan J. W. The growth of glioblastoma multiform in neurosurgical practice //J.Neurosurg. -1961. -V.18. -P.636-644.

56. Wirtz C.R., Bonsanto M.M., Knauth M. et al. Intraoperative magnetic resonance imaging to update interactive navigation in neurosurgery: metod and prelimenary experience // Comput. Aided. Surg. -1997. -V.2, №3-4. - P. 172 - 179.

57. Berger M. S. Functional mapping-guided resection of low-grade gliomas. //Clin. Neurosurg. -1995.-V. 42.-P. 437-452.

58. Brock C.B., Current perspectives in gliomas (Review) // Medical Oncology. - 1997. -VI4, №2.-P.103- 120.

59. Claus E.B., Horlacher A., Hsu L. et al. Survival rates in patients with low-grade glioma after intraoperative magnetic resonance image guidance // Cancer. -2005. -V.103, №6. -P. 1227- 1233.

60. Duffau H., Capelle L., Denvil D. et al. Functional recovery after surgical resection of low-grade gliomas in eloquent brain: hypothesis of brain compensation. // J. Neurol. Neurosurg. Psychiatry. -2003. -V.74. -P.901-907.

61. Fasano V.A., Zeme S., Frego L., Gunetti R. Ultrasonic aspiration in the surgical treatment of intracranial tumours // J. Neurosurg. Sci. -1981. -V.25, №1. - P.35-40.

62. Finley J.L., Silverman J.F., Dickens M.A. Immunocytochemical evaluation of central nervous system tumors obtained by the Cavitations ultrasonic surgical aspirator// Diagn. Cytopathol. -1990. - V.6, №5. -P.308-312.

63. Jan Jacob A. Mooij. The implementation of fluorescent guided surgery for high-grade gliomas // Perspectives in central nervous system malignancies. -Warsaw, 2007. -P.137-143.

64. Keles G.E., Lamborn K, Berger M.S. Low-grade hemispheric gliomas in adults: a critical review of extent of resection as a factor influencing outcome. // Neurosurgery. -2001. -V.95. -P.735-745.

65. Laws E.R. Radical resection for the treatment of glioma// Clinic. Neurosurg. -1995.-V.42. -P.480-487.

66. Laws E.R., Parney I.F., Huang W. et al. Survival following surgery and prognostic factors for recently diagnosed malignant glioma: data from the glioma outcomes project //J.Neurosurg. -2003.-V.99.-P.467-473.

67. Malhotra V., Malik R., Gondal R. et al. Evaluation of histological appearance of tissues removed by cavitron ultrasonic surgical aspirator (CUSA) // Acta Neurochir. -1986. -V.81, №3-4.-P.132-134.

68. Mehdorn H.M., Nadavi A., Dorner L. Intraoperative magnetic resonance imaging // IV Съезд нейрохирургов России: Материалы съезда: М., 2006. -С.138.

69. Keles G.E., Lamborn К, Berger M.S. Low-grade hemispheric gliomas in adults: a critical review of extent of resection as a factor influencing outcome. // Neurosurgery. -2001. -V.95. -P.735-745.

70. Palma L. Trends in surgical management of astrocytomas and other brain gliomas // Forum -Trends in Exp. & Clin. Med. -1998. -V.8, №3. -P.272-281.

71. Ramasanov R., Dreval O.N., Akatov О. V. et al. Ultrasound microneurosurgery // Neurol/Res. -1999.-V.21 .-P.73-76.

72. Rampling R., James A., Papanastassiou V. The present and future management of malignant brain tumors: surgery, radiotherapy, chemotherapy // Neurol Neurosurg Psychiatry. -2004. V.75 (Suppl II). -P. 1124-1130.

73. Reithmeier T., Krammer M., Gumprecht H. et al. Neuronavigation combined with electrophysiological monitoring for surgery of lesions in eloquent brain areas in 42 cases: a retrospective comparison of the neurological outcome and quality of resection with a control group with similar lesions // Minim. Invasive Neurosurg. -2003. №46. -P.65-71.

74. -. Sawaya R., Hammoud M., Schoppa D. et al. Neurological outcomes in a modern series of 400 craniotomies for treatment of parenchymal tumors. // Neurosurgery. - 1998. -V.42. -P. 1044-1056.

75. Yasargil M.G., Kadri P.A.S., Yasargil D.C.H. Microsurgery for Malignant Gliomas // J. Neurooncol. -2004. - V.69, №1. -P.67-81.

76. DeVita V.T. The relationship between tumor mass and resistance to chemotherapy. Implications to surgical adjuvant treatment of cancer // Cancer. - 1983. -V.51, №4. -P.1209-1220.

77. Harsh G.R., Levin V.A., Gutin P.H. et al. Reoperation for recurrent glioblastoma and anaplastic astrocytoma // Neurosurgery. -1987. -V.21, №5. -P.615-621.

78. McCormack B.M., Miller D.C., Budzilovich G.N. et al. Treatment and survival of low-grade astrocytoma in adults // Neurosurgery. -1992. -V.31, №4. -P.636-642.

79. Ray B.S. Surgery of recurrent intracranial tumor // Clin. Neurosurg. -1964. -V.10, №5. -P.l-30.

80. Pool J.L. The management of recurrent gliomas // Clin. Neurosurg. -1969. -V.15, №8. -P.265-287.

81. Salcman M. Effect of age and reoperation and survival in combined multimodality treatment of malignant astrocytomas // Neurosurgery. -1982. -V.10, №2. -P.454-463.

82. Salcman M., Scholtz H, Kaplan R.S., Kulik S. Long-term survival in patients with malignant astrocytoma //Neurosurgery. -1994. -V.34, №2. -P.213-220.

83. Weitzner M.A., Meyers C.A., Byrne K. Psychosocial functioning and quality of life in patients with primary brain tumors // J. Neurosurgery. -1996. -V.84. -P.29-34.

84. Wilson C.B. Reopreration for primary tumors // Semin. Oncol. -1975. -V.2. -P. 19-20.

85. Young B., Oldfield E.H., Markesbery W.R. et al. Reoperation for glioblastoma // J. Neurosurgery. -1981. -V.55, №5. -P.917-921.

86. Burger A.M., Double J.A., Newell D.R. Inhibition of telomerase activity by cisplatin in human testicular cancer cells // Eur. J. Cancer. -1997. -V.33. -P.638-644.

87. Damm K., Hemmann U., Garin-Chesa P. et al. A highly selective telomerase inhibitor limiting human cancer cell proliferation // EMBO J. -2001. -V. 20. -P.6958-6968.

88. Gray K.S. et al. Exploiting chemical libraries, structure, and genomics in the search for kinase inhibitors // Science. -1998. -V.281. -P.533-538.

89. Isabelle Sansal, William R. The Biology and Clinical Relevance of the PTEN Tumor Suppressor Pathway // Sellers Journal of Clinical Oncology. -2004. -V.22, №14. -P.2954-2963.

90. Meijer L., Leclerc S., Leost M. Properties and potential-applications of chemical inhibitors of cyclin-dependent kinases // Pharmacol Ther. -1999. -V. 82, №-3. - P.279-284.

91. Nair S.K., Heiser A., Boczkowski D. et al. Induction of cytotoxic T cell responses and tumor immunity against unrelated tumors using telomerase reverse transcriptase RNA transfected dendritic cells // Nature Med. -2000. - V.6. -P. 1011-1017.

92. Bhattacharjee A.K., Nagashima T., Kondoh T., Tamaki N. Quantification of early blood-brain barrier disruption by in situ brain perfusion technique // Brain Res. Brain Res. Protoc. -2001. -V.2.-P.126-131.

93. Matsukado K, Sugita M., Black K.L. Intracarotid low dose bradykinin infusion selectively increases tumor permeability through activation of bradykinin B2 receptors in malignant gliomas // Brain Res. -1998. -V.792. -P. 10-15.

94. Uchida M., Chen Z., Liu Y, Black K.L. Overexpression of bradykinin type 2 receptors on glioma cells enhances bradykinin-mediated blood-brain tumor barrier permeability increase // Neurol. Res. -2002 . -V.8. -P.739-746.

95. Wang Y.B., Peng C., Liu Y.K. Low dose of bradykinin selectively increases intracellular calcium in glioma cells // J. Neurol. Sci. -2007 . -V.258, №(1-2). - P.44-51.

96. Zhao Y., Xue Y., Liu Y. et al. Study of correlation between expression of bradykinin B2 receptor and pathological grade in human gliomas // Br J Neurosurg. -2005 . - V. 4. - P. 322-326.

97. Choucair A. K., Levin V. A., Gutih P. H. et al. Development of multiple lesions during radiation therapy and chemotherapy in patients with gliomas // J. Neurosurg. -1986. -V. 65. -P.654-658.

98. DeAngelis L. M. Brain tumors // N. Engl. J. Med. -2001. -V.344. -P.114-

123.

99. Eichhorst S.T., Muller M., Li-Weber M. et al. A novel AP-1 element in the CD95 ligand promoter is required for induction of apoptosis in hepatocellular carcinoma cells upon treatment with anticancer drugs // Mol. Cell. Biol. -2000. -V.20. -P.7826-7837.

100. Emiko L. Kreklau, Naili Liu, Zhaohua Li, et al. Comparison of single-versus double-bolus treatments of 06-benzylguanine for depletion of 06-methylguanine DNA methyltransferase (MGMT) activity in vivo: development of a novel fluorometric oligonucleotide assay for measurement of MGMT activity // J. Pharm. Exper. Therapeutics. -2001. -V.297. -P.524-530.

101. Fei P., El-Deiry W. S. p53 and radiation responses // Oncogene. -2003. -V.22. -P.5774-5783.

102. Findley H.W., Gu L., Yeager A.M., Zhou M. Expression and regulation of Bcl-2, Bcl-xl, and Bax correlate with p53 status and sensitivity to apoptosis in childhood acute lymphoblastic lutathio //Blood. -1997. -V.89. -P.2986-2993.

103. Friesen C, Herri., Krammer P.H, Debatin, K.M. Involvement of the CD95 (APO-1/FAS) receptor/ligand system in drug-induced apoptosis in lutathio cells // Nat. Med. -1996. -V.2.-P.574-577.

104. Gladson C.L., Cheresh D.A. Glioblastoma expression of vitronectin and the anb3 integrin: adhesion mechanism for transformed glial cells // J. Clin. Invest. -1991. -V. 88. -P. 1924-1932.

105. Gladson C.L., Wilcox J.N., Sanders L. et al. Cerebral microenvironment influences expression of the vitronectin gene in astrocytic tumors // J. Cell Sci. -1995. -V.108. -P.947-956.

106. Micheau O., Solary E., Hammann A., et al. Fas ligand independent, FADD-mediated activation of the Fas death pathway by anticancer drags // J. Biol. Chem. -1999. -V.274.-P.7987-7992.

107. Stahnke K., Fulda S., Friesen C. et al. Activation of apoptosis pathways in peripheral blood lymphocytes by in vivo chemotherapy // Blood. -2001. -V.98. -P.3066-3073.

108. Wu G.S., Burns T.F., McDonald E.R. et al. Induction of the TRAIL receptor KILLER/DR5 in p53-dependent apoptosis but not growth arrest//Oncogene. -1999.-V.18.-P.6411-6418.

109. Bradly L.W. A new treatment for high grade gliomas of brain //Cancer J. Fuag. -1999. -V.162.-P.28-33.

110. Mahaley M.S., Gentry R.E., Bigner D.D. Immunology of primary intracranial tumors. The evaluation of chemotherapy and immunotherapy protocols using the avian sarcoma virus glioma model //J. Neurosurg: -1977. -V47. -P.35-43.

111. Reu H, Boulikas T., Lemdstom K. et al. Immunogene therapy of recurrent glioblastoma multiforme with a liposomally encapsulated replication incompetent semliki forest virus vector earring of human interleikin 12 gene. - a phase I/II clinical protocol //J. Neurooncol. -2003. -V.12.-P.147-154.

112. Coakley K.J., Huston J., Scheithauer B.W. et al. Pilocytic astrocytomas: well-demarcated magnetic resonance appearance despite frequent infiltration histologicaly // Mayo Clinical Proceeding. -1995. -V.70, №8. -P.747-751.

113. Didenko V.V., Ngo H.N., Minchew C. et al. Apoptosis of T-lymphocytes in glioblastomas multitorme: a possible tumor defense mechanism //J.Neurosurg. -2002. V.96, №3. -P.580-584.

114. Fontana F, Kristensen F, Dubs R. et al. Production of prostaglandin E and interlikin 1 like factor by cultured astrocytes and C6-gliome cells //J.Immunol. -1982. -V.129. -P.2412-2419.

115. Elliot L., Brooks W.,. Roszman T. Role of interleukin-2 (IL-2) and IL-2 receptor expression in the proliferative defect observed in mitogen-stimulated lymphocytes from patients with gliomas //J.Nat.Cancer Inst. -1987. -V.78. -P.919-922.

116. Hishi H., Nitta T., Ishida H. et al. Human derived interleukin 10 inhibits antitumor immune respouses in vitro //Neurosurgery. -1995. -V.37. -P.l 160-1167.

117. Huettner C. Messenger RNA. Expression of the immunosuppressive cytokine IL-10 in human gliomas //Am.J.Pathol. -1995. -V.146. -P.317-322.

118. Saas P., Walker P.R., Hahne H. et al. Fas ligand expression by astocytoma in vivo. Maintaining immune privilege in the brain //J.Clin, investigation. -1997. -V.99. -P.l 173-1178.

119. Bodey B., Groger A.M., Bodey B. et al. Immunohistochemical detection of p53 protein expression in various childhood astrocytoma subtypes: significance in tumor progression // Anticancer Res. -1997. -V.17,№2A. -P.l 187-1194.

120. Boon K., Edwards J.B., Eberhart C. G., Riggins G.J. Identification of astrocytoma associated genes including cell surface markers // BMC Cancer. -2004. -V.4. -P. 1-39.

121. Camby I., Nagy N., Lopes M.B. et al. Supratentorial pilocytic astrocytomas, anaplastic astrocytomas and glioblastomas are characterized by a differential expression of SI00 proteins // Brain Pathol. -1999. -V.9, -P. 1-19.

122. Cheng Y., Ng H., Ding M. et al. Molecular analysis of microdissected de novo glioblastomas and paired astrocytic tumors // J. Neuropathol. Exp. Neurol. -1999. -V.58. -P.120-128.

123. Collins V.P. Brain tumors: classification and genes // J. Neurol. Neurosurg. Psychiat. -2004. -V.75, Suppl.2.-P.2-11.

124. Hill С., Hunter S.B., Brat D.J. Genetic markers in glioblastoma: prognostic significance and future therapeutic implications // Adv. Anat. Pathol. -2003. -V.10. -P.212-217.

125. Kavsan V., Shostak K., Dmitrenko V. et al. Characterization of genes with increased expression in human glioblastomas // Цитология и генетика. -2005. -Т.39, №6. -С.37-49.

126. Louis D.N. A molecular genetic model of astrocytoma histopathology // Brain Pathol. -1997. -V.7.-P.755-764.

127. Nutt C.L., Mani D.R., Betensky R.A. et al. Gene expression-based classification of malignant gliomas correlates better with survival than histological classification // Cancer Res. -2003. -V.63.-P. 1602-1607.

128. Ohgaki H., Kleihues P. Epidemiology and etiology of gliomas // Acta Neuropathol. -2005. -V.109.-P.93-108.

129. Law M., Young R.J., Babb J.S. et al. Gliomas: predicting time to progression or survival with cerebral blood volume measurements at dynamic susceptibility-weighted contrast-enhanced perfusion MR imaging // Radiology. -2008.-247.-P.490-498.

130. Okamoto Y., Di Patre P.L., Burkhard C. et al. Population-based study on incidence, survival rates, and genetic alterations of low-grade diffuse astrocytomas and oligodendrogliomas //Acta Neuropathol. -2004. -V.108. -P. 49-56.

131. Petersen D., Chandramouli G. V.R., Geoghegan J. et al. Three microarray platforms: an analysis of their concordance in profiling gene expression // BMC Genomics. -2005. -V.6. -P.63.

132. Raza S.M., Fuller G.N., Rhee C.M. et al. Identification of necrosis-associated genes in glioblastoma by cDNA microarray analysis // Clin. Cancer Res. -2004. -10 Pt 1. -P.212-221.

133. Reifenberger G., Louis D.N. Oligodendroglioma: toward molecular definitions in diagnostic neuro-oncology // J. Neuropathol. Exp. Neurol. -2003. -V.62. -P.l 11-126.

134. Schena M., Shalon D., Davis R.W, Brown P.O. Quantitative monitoring of gene expression patterns with a complementary DNA microarray // Science. -1995. -V.270. -P.467-470.

135. Smith J.S., Jenkins R.B. Genetic alterations in adult diffuse glioma: occurrence, significance, and prognostic implications // Frontiers in Bioscience. -2000. -V.5. -P.d213-d231.

136. Sonoda Y, Iizuka M., Yasuda J. et al. Loss of heterozygosity at 1 lpl5 in malignant glioma// Cancer Res. -1995. - №10. -P.2166-2168.

137. Steck P.A., Pershouse M.A., Jasser S.A. et al. Identification of a candidate tumour suppressor gene, MMAC1, at chromosome 10q23. that is mutated in multiple advanced cancers //Nat. Genet. -1997. -V.15. -P.356-362.

138. Van den Boom J., Whiter M., KuickR. et al. Characterization of gene expression profiles associated with glioma progression using oligonucleotide-based microarray analysis and real-time reverse transcription-polymerase chain reaction // Am. J. Pathol. 2003. -V.163. -P. 1033-1043.

139. Von Deimling A., Louis D.N., von Ammon K. et al. Evidence for a tumor suppressor gene on chromosome 19q associated with human astrocytomas, oligodendrogliomas, and mixed gliomas // Cancer Res. -1992. -V.52. -P.4277-4279.

140. Watson M.A., Perry A., Budhjara V. et al. Gene expression profiling with oligonucleotide microarrays distinguishes World Health Organization grade of oligodendrogliomas//Cancer Res. -2001. -V.61. -P. 1825-1829.

141. Yokota T., Kouno J., Adachi K.. et al. Identification of histological markers for malignant glioma by genome-wide expression analysis: dynein, alpha-PIX and sorcin // Acta Neuropathol. -2006. -V 111. -P.29-38.

142. Christopher J.W., Keith L., Gentao Liu et al. Thymic CD8+ T cell production strongly influences tumor antigen recognition and age-dependent glioma mortality // The Journal of Immunology, -2003, Vol.l71.-P.4927-4933.

143. Velpula K. K., Dasari V. R., Tsung A.J. et al. Regulation of glioblastoma progression by cord blood stem cells is mediated by downregulation of cyclin D1 // PLoS One -2011. -Vol.6. №3. -P. 1-13.

144. Maes W., Rosas G.G., Verbinnen B. Van Gool S.W. et al. DC vaccination with anti-CD25 treatment leads to long-term immunity against experimental glioma // Neuro-Oncology -2009. -Vol. 12. №3. -P.529-542.

145. Prins R.M., Soto H., Konkankit V. Gene expression profile correlates with T-cell infiltration and relative survival in glioblastoma patients vaccinated with Dendritic cell immunotherapy // Clin Cancer Res -2010. -Vol.17. №6. -P. 1603-1615.

146. Fadul C.E., Fisher J.L., Gui J. et al. Immune modulation effects of concomitant temozolomide and radiation therapy on peripheral blood mononuclear cells in patients with glioblastoma multiforme // Neuro Oncol. -201 l.-Vol.l3.№4. -P.393-400.

147. Sampson J.H., Heimberger A.B., Archer G.R. et al. Immunologic escape after prolonged progression-free survival with epidermal growth factor receptor variant III peptide vaccination in patients with newly diagnosed glioblastoma // Jor. Clin. Oncol. -2010. -Vol.28.№31. -P.4722-4729.

148. Krex D., Klink B., Hartmann C. et al. Long-term survival with glioblastoma multiforme // Brain.-2011.-Vol.134.№8.-P.2596-2606.

149. Jansen M., Yip S., Louis D.H. Molecular pathology in adult gliomas: diagnostic, prognostic, and predictive markers // Lancet Neurol -2010. -Vol.9. -P.717-726.

150. Toy H., Yavas O., Eren O., Gene M., Yavas C. Correlation between osteopontin protein expression and histological grade of astrocytomas // Pathol. Oncol. Res. -2009. -Vol.15. №2. -P.203-207.

151. Labussiere M., Wang X.W., Idbaih A., Ducray F., Sanson M. Prognostic markers in gliomas // Future Oncology. -2010. -Vol.6.№5.-P. 733-739.

152. Kanaly W.C., Ding D., Heimberger A.B., Sampson J.H. Clinical applications of a peptide-based vaccine for glioblastoma // Neurosurg Clin N Am. -2010. -Vol.21.№1.-P.95-109.

153. Clarke J., Butowski N., Chang S. Recent advances in therapy for glioblastoma // Arch Neurol. -2010. -Vol.67.№3.-P.279-283.

154. Greenfield J.P., Jin D.K., Young L.M., Christos P.J., Abrey L., Rafii S., Gutin P.H. Surrogate markers predict angiogenic potential and survival in patients with glioblastoma multiforme //Neurosurgery. -2009. -Vol.64.№5. -P.819-826.

155. Sreekanthreddy P., Srinivasan H., Kumar D.M., Identification of potential serum biomarkers of glioblastoma: serum osteopontin levels correlate with poor prognosis // Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev. -2010.-Vol.l9.№6.-P. 1409-1422.

156. Gerhard G.G., Roedel C.M., Paulus W. et al. Supratentorial Low-Grade glioma: results and prognostic factors following postoperative radiotherapy // Strahlentherapie und Onkologie. -2000.-Vol.l76.-P.259-264.

157. Lin C.L., Lieu A.S., Lee K.S. et al. The conditional probabilities of survival in patients with anaplastic astrocytoma or glioblastoma multiforme // Surgical Neurology.-2003.-Vol.60.-P.402-406.

158. Van Meir E.G., Hadjipanayis C.G, Norden A.D. et al. Exciting new advances in neuro-oncology: the avenue to a cure for malignant glioma // A Cancer Journal for Clinicians. -2010.-Vol.60.-P.166-193.

159. Fecci P.E., Mitchell D.A., Whitesides J.F. et al. Increased regulatory T-cell fraction amidst a diminished CD4 compartment explains cellular immune defects in patients with malignant glioma // Cancer Research -2006.-Vol.66.-P.3294-3302.

160. Jordan J.T., Sun W., Hussain S.F. et al. Preferential migration of regulatory T cells mediated by glioma-secreted chemokines can be blocked with chemotherapy // Cancer Immunology, Immunotherapy -2008.-Vol.57.-P.123-131.

161. Humphries W., Jun W., John H. et al. The Role of Tregs in Glioma-Mediated Immunosuppression: Potential Target for Intervention // Neurosurgery Clinics of North America-2010 .-Vol .21 .-P. 125-137.

162. Knutson K.L., Disis M.L., Salazar L.G. CD4 regulatory T cells in human cancer pathogenesis // Cancer Immunology, Immunotherapy -2007.-Vol.56.-P.271-285.

163. Wheeler C.J., Ying H., Yu J.S. et al. Thymic CD8+ T-cell production strongly influences tumor antigen recognition and age-dependent glioma mortality // The Journal of Immunology -2003.-Vol.l71.-P.4927-4933.

164. Ueda R., Low K.L., Zhu X. et al. Spontaneous immune responses against glioma-associated antigens in a long term survivor with malignant glioma // Journal of Translation^ Medicine -2007.-Vol.68.-P.1479-1486.

165. Banchereau J., Briere F., Caux C. et al. Immunobiology of dendritic cells // Annual Review of Immunology -2000.-Vol.l8.-P.767-811.

166. Wang M., Wan Y., Li J. et al. A subset of myeloid dendritic cells derived from peripheral blood monocytes represented a predominant subset characterized by their potential tumor-inhibiting activity // In Vitro Cellular and Developmental Biology -2009.-Vol.45.-P.398-404.

167. Chauvin C., Josien R. Dendritic cells as killers: mechanistic aspects and potential roles // Journal of Immunology -2008.-Vol.l8.-P.l 1-16.

168. Morford L.A., Elliott L.H., Carlson S.L. et al. T cell receptor-mediated signaling is defective in T cells obtained from patients with primary intracranial tumors // Jornal of Immunology-1997.-Vol.159.-P.4415-4425.

169. Roszman T.L., Brooks W.H. Immunobiology of primary intracranial tumors. Demonstration of a qualitative lymphocyte abnormality in patients with primary brain tumors // Clinical and Experimental Immunology -1980.-Vol.39.-P.395-402.

170. Learn C.A., Fecci P.E., Schmittling R.J. et al. // Profiling of CD4+, CD8+, and CD4+CD25+CD45RO+FoxP3+ T cells in patients with malignant glioma reveals differential expression of the immunologic transcriptome compared with T cells from healthy volunteers // Clinical Cancer Research -2006.-Vol.24.-P.7306-7315.

171. Wu A., Wei J., Kong L.Y. et al. Glioma cancer stem cells induce immunosuppressive macrophages in microglia // Neuro-Oncology -2010.-Vol.l 1-P.l 13-125.

172. Rodrigues J.C., Gonzalez G.C., Zhang L. et al. Normal human monocytes exposed to glioma cells acquire myeloid-derived suppressor cell-like properties // Neuro-Oncology -2010.-Vol.4 -P.351-365.

173. Wei J., Barr J., Kong L.Y. et al. Glioma associated cancer-initiating cells induce immune suppression // Clinical Cancer Research -2010.-Vol.l6.-P.461-473.

174. Hiraoka N., Onozato K., Kosuge T., et al. Prevalence of FOXP3+ regulatory T cells increases during the progression of pancreatic ductal adenocarcinoma and its premalignant lesions // Clin. Cancer Res.- 2006.- Vol. 12.- P. 5423-5434

175. Hueman M.T., Stojadinovic A., Storrer C.E., et al. Levels of circulating regulatory CD4+CD25+ T cells are decreased in breast cancer patients after vaccination with a HER2/neu peptide (E75) and GM-CSF vaccine // Breast Cancer Res. Treat.-2006,- Vol. 98, N 1.- P. 17-29.

176. Kasparowicz D.J., Droin N., Soper D.M., et al. Dynamic regulation of FoxP3 expression controls the balance between CD4+ T cell activiti // Eur.J.Immunol.-2005,- Vol. 35.- P. 3424-3434.

177. Fontenot J.D., Gavin M.A., Rudensky A.Y. Foxp3 programs the development and function of CD4+CD25+ regulatory T cells // Nat. Immunol.- 2003.-Vol. 4,- P. 330-336.

178. Hori S., Nomura T., Sakaguchi S. Control of regulatory T cell development by the transcription factor Foxp3 // Science.- 2003.- Vol. 299.- P. 1057-1061.

179. Schreiber T.H. The use of FoxP3 as a biomarker and prognostic factor for malignant human tumors // Cancer Epidemiology Biomarkers & Prevention.- 2007.-Vol. 16.- P. 1931-1934.

180. Somasundaram R., Jacob L., Swoboda R. Inhibition of cytolytic T lymphocyte proliferation by autologous CD4+CD25+ regulatory T cells in a colorectal carcinoma patient is mediated by transforming growth factor-P // Cancer Res.- 2002.-Vol. 62,- P. 5267-5272.