Биотехнологические способы получения фармацевтических препаратов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, доктор химических наук Баирамашвили, Дмитрий Ильич

• Баирамашвили, Дмитрий Ильич
• доктор химических наук
• 2007

Оглавление диссертации доктор химических наук Баирамашвили, Дмитрий Ильич

ОГЛАВЛЕНИЕ.

ВВЕДЕНИЕ.

ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

1. Генно-инженерный инсулин человека: успехи и перспективы развития.

1.1. Структура и функции инсулина.

1.2. Инсулин человека - основы технологии получения.

1.3. Генно-инженерный инсулин в России.

1.4. Готовые лекарственные формы инсулина.

1.5. Аналоги инсулина. Свойства и применение.

2. Гормон роста человека.

2.1. Способы получения гормона роста человека.

2.2. Механизмы действия соматропина.

2.3. Терапевтическое применение соматропина.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

1. Создание технологии получения и разработка стандарта качества активной фармацевтической субстанции генноинженерного инсулина человека.

1.1 Создание технологии получения активной фармацевтической субстанции генно-инженерного инсулина человека.

1.2. Разработка методов контроля и создание стандарта качества субстанции инсулина.

2. Создание технологии получения и разработка стандартов качества готовых лекарственных форм генно-инженерного инсулина человека.

2.1. Создание технологии получения быстродействующей лекарственной формы инсулина.

2.2. Создание технологии получения пролонгированной лекарственной формы инсулина.

2.3. Стандартизация препаратов ИНСУРАН.

2.4. Стабильность препаратов ИНСУРАН.

2.5. Доклиническое изучение препаратов ИНСУРАН.

2.6. Клинические испытания препаратов ИНСУРАН.

3. Создание технологии получения и разработка стандарта качества активной фармацевтической субстанции рекомбинантного гормона роста человека.

3.1. Создание технологии получения активной фармацевтической субстанции рекомбинантного гормона роста человека.

3.2. Разработка стандарта качества активной фармацевтической субстанции рекомбинантного гормона роста человека.

3.3. Доклинические испытания соматропина.

3.4. Клиническое изучение лекарственной формы соматропина человека (Растан).

4. Организация производства инсулина и соматропина в соответствии с правилами GMP и внедрение препаратов в практику отечественного здравоохранения.

5. Апробация разработанных методологий в смежных разделах биотехнологии.

5.1. Технология получения биологически активных соединений растительного происхождения (культура клеток).

5.2. Технология получения дисахарида клеточной стенки Micrococcus

Luteus (Lysodecticus).

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

1. Материалы.

1.1. Реактивы.

1.2. Непромышленные препараты.

2. Методы исследований.

2.1. Получение и культивирование штаммов продуцентов.

2.2. Выделение и очистка активных фармацевтических субстанций.

2.3. Производство готовых лекарственных форм инсулина человека -ИНСУРАН.

2.4. Контроль качества лекарственных препаратов.

ВЫВОДЫ.

Список сокращений.

Благодарности.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биотехнологические способы получения фармацевтических препаратов»

Развитие с середины 1970-х годов генной инженерии, т.е. технологии получения рекомбинантных ДНК, значительно изменило характер исследований, проводимых в области генетики, биологии развития и эволюции. Разработка методов клонирования ДНК и проведения полимеразной цепной реакции позволяют получать в достаточном количестве необходимый генетический материал, включая рекомбинантные (гибридные) ДНК. Эти методы используются для выяснения тонкой структуры генетического аппарата и отношений между генами и их специфическими продуктами - полипептидами. Вводя в клетки рекомбинантную ДНК, удалось получить штаммы бактерий, способные синтезировать важные для медицины белки, например человеческий инсулин, гормон роста человека и многие другие соединения.

Развитие современной фармакологии невозможно представить без открытия новых препаратов, получаемых с помощью методов генетической инженерии. Успехи медицины сегодняшнего дня все более базируется на активном применении белковых препаратов, полученных с помощью технологии переноса наследственной информации (генов) из одного организма в другой. Целью этой операции является, как известно, использование возможностей организма нового хозяина к считыванию этой генетической информации и трансформации ее в белковый продукт. Способность производства заданного полипептида (его экспрессия) является определяющей в выборе нового хозяина и условий его культивирования. Возможность экспрессировать чужеродные гены в клетках различных организмов (как эукариотических, так и прокариотических) стала по сути одним из революционных событий последних двух декад XX столетия, заложила основы современной биотехнологии и явилась фундаментом самостоятельной отрасли науки - молекулярной биотехнологии. Получение новых лекарств на основе рекомбинантных белков по своей значимости для практического здравоохранения можно сравнить с успехами Дженнера и Пастера в области вакцинации и открытием в середине XX столетия эры антибиотиков. Гетерологическая экспрессия белков наряду с расшифровкой генома человека сделала принципиально возможным создание основ для «компенсирующей», или «ингибирующей» терапии белками, закодированными в геноме и произведенными в необходимых количествах другими клетками-хозяевами. Сбылась давняя мечта врачей - получение искусственным путем с помощью генной инженерии запасных «молекулярных» частей человека. Символично, что первые практические успехи, достигнутые с помощью технологии рекомбинантных ДНК, относятся к области молекулярной эндокринологии. В 80-ые годы прошлого столетия компании Genentech первой удалось получить генно-инженерный инсулин человека в новом хозяине, прокариотической клетке кишечной палочки (Escherichia coli) [1].

К сегодняшнему дню, биофармацевтическая промышленность стала одним из важнейших и быстроразвивающихся секторов high-tech индустрии. Последние 5 лет мировой рынок биофармпрепаратов демонстрирует ежегодные темпы роста в 15-33%, что позволило к 2005 году достичь объема продаж в $55 миллиардов [2]. Инсулин занимает одно из лидирующих положений в списке самых продаваемых рекомбинантных терапевтических белков и моноклональных антител, уступая лишь эритропоэтину [3]. Вместе с тем, рекомбинантные цитокины, колоний-стимулирующие факторы и рекомбинантные антитела становятся также незаменимым орудием в арсенале практического врача и уровни их продаж достигают миллиардных отметок.

В последние годы рекомбинантные белки, традиционно получаемые из плазмы крови, также стали завоевывать позиции на мировом рынке медицинской биотехнологии. Революционное продвижение рекомбинантных белков человека на фармацевтический рынок связано в большинстве случаев с невозможностью их получения из человеческого материала в достаточном количестве, а замена их животными аналогами, применявшейся ранее, во многих случаях приводила к нежелательным иммунным реакциям и побочным эффектам [4]. Кроме того, возникшие в последние годы ограничения на использование препаратов, полученных из плазмы крови доноров или из трупного материала, связаны с проблемами вирусных и прионных контаминаций [5,6]. Первое особенно касается препаратов крови. Разработка и применение тест-систем для детекции гепатитов и ВИЧ удорожает эти относительно дешевые препараты и делает их уже сравнимыми по стоимости с белками, произведенными с помощью технологий рекомбинантных ДНК. При этом необходимо отметить, что некоторые генно-инженерные белковые препараты являются практически незаменимыми в онкологии и при лечении аутоиммунных процессов. В первую очередь это относится к антителам, цитокинам, поверхностным опухолевым антигенам, молекулам адгезии. Современные схемы лечения ревматоидного артрита, рака груди и шейки матки невозможно представить без применения таких препаратов как, например, ремикейд [7] и герцептин [8]. Тем не менее, на пути создания рекомбинантных белковых лекарственных средств стоит еще много трудностей как фундаментального, так и организационного характера. Общая стратегия развития современной молекулярной биологии, биохимии, микробиологии обеспечивает создание новых векторов для переноса генетической информации, разработку штаммов усовершенствованных прокариотических клеток, дрожжей, способов поддержания перевиваемых культур клеток млекопитающих, эффективных схем очистки рекомбинантных, белков и методов промышленной биотехнологии с использованием крупномасштабных биореакторов. На сегодняшнем этапе развития медицинской биотехнологии резервы использования прокариотических клеток-хозяев практически исчерпаны. Новые продукты, а главное - полипептиды большой молекулярной массы, трудно производить в Escherichia coli в биотехнологически оправданных количествах. Для обеспечения своей функциональной активности они требуют адекватной посттрансляционной модификации. В этой связи на повестку дня поставлен вопрос использования эукариотических клеток млекопитающих. В частности, это относится к терапевтическим антителам, факторам свертывания крови, молекулам адгезии. Переход от микроорганизмов к культурам животных клеток удорожает производство белковых продуктов на порядки. Однако все промышленно-развитые страны мира активно включились в эту биотехнологическую гонку, и пошли по пути создания национальных и транснациональных исследовательских и промышленных центров.

Организационной составляющей отмечаемых трудностей работы с рекомбинантными белками и продвижением их на рынок являются вопросы биобезопасности и патентной чистоты. Белковая молекула, произведенная в чужеродной клетке-хозяине, может быть выделена с примесями, в том числе - с фрагментами ДНК клетки-хозяина, ее белками, полисахаридами и эндотоксинами. Применение препаратов с указанными контаминациямй чревато серьезными осложнениями в области иммунопатологии [9].

На фармацевтическом рынке присутствуют как оригинальные препараты, так и дженерики - воспроизведенные копии оригинальных препаратов. Ситуация с химически синтезированными препаратами достаточно понятная: в большинстве стран по истечению срока патентной защиты на оригинальный препарат другие компании могут предлагать препарат дженерик после стандартной демонстрации его биологической эквивалентности и безопасности. В отношении так называемых биодженериков, т.е. аналогов биосинтетических, препаратов, вопрос «оригинальности» и «воспроизведенности» препарата является более сложным. Многие такие препараты представляют собой точные биосинтетические копии обычных белков человека и тем самым не могут полностью рассматриваться как оригинальные препараты. Как правило, патентная защита биосинтетических препаратов распространяется на способ производства, но при универсальности методик, заложенных в фундаментальные основы молекулярной и клеточной биологии, заранее предусмотренные изменения в схеме получения биодженерика обеспечивают патентную чистоту препарата. В то же время, демонстрация биоэквивалентности биодженерика является достаточно сложной задачей. В этой связи практическому врачу важно понимать возможные отличия биодженериков от оригинальных препаратов, связанные со способом их получения и реализацией системы контроля качества субстанции и готовой лекарственной формы.

Биотехнологическая промышленность России в «дорекомбинантную» эру находилась на одном из передовых рубежей. По производству фармацевтических и белковых препаратов для животноводства мы отставали лишь от США и Японии. Научный потенциал нашей страны позволял сделать эффективный переход к промышленному освоению технологии рекомбинантных ДНК чего, к сожалению, не случилось на рубеже XX столетия по известным политическим и экономическим причинам. Сегодня фармацевтические генно-инженерные белки, являясь весьма дорогостоящей составляющей страховой медицины в развитых странах, практически недоступны для населения нашей страны из-за высокой стоимости и несовершенства организационных структур национального здравоохранения. В то же время, современные позитивные тенденции к улучшению лекарственного обеспечения, в том числе рекомбинантными препаратами, обеспечивают возрастающую финансовую нагрузку на бюджет здравоохранения и также лимитируют количество пациентов, которые могут получить терапию такими препаратами. Создание отечественной технологической платформы производства этих препаратов позволит внести значительный вклад в решение проблемы биобезопасности России, а также заложить основы импортозамещения. Обеспечение «биотехнологической самостоятельности» России является первоочередной составляющей отечественной химической, медицинской и биологической науки.

Учитывая вышеизложенное, были сформулированы цель и задачи диссертационной работы: создание технологий производства рекомбинантных лекарственных препаратов инсулина и гормона роста человека, организация экономически эффективного производства и внедрение системы обеспечения качества в соответствии с требованиями GMP, апробация разработанных методологий в смежных разделах биотехнологии.

В соответствии с поставленной целью были определены следующие задачи исследования:

1. Конструирование высокопродуктивных бактериальных штаммов-продуцентов рекомбинантных инсулина и гормона роста человека и разработка на их основе высокоэффективных способов получения активных фармацевтических субстанций.

2. Создание технологии получения быстродействующей и пролонгированной инъекционных лекарственных форм инсулина человека.

3. Разработка методов контроля качества и создание стандартов качества фармацевтических препаратов инсулина и гормона роста человека.

4. Масштабирование и оптимизация опытно-промышленной технологии, проведение доклинических и клинических испытаний созданных лекарственных средств.

5. Организация производства в соответствии с правилами GMP и внедрение препаратов в практику отечественного здравоохранения.

6. Использование полученных научных и технологических решений в культивировании клеток растений и в производстве лекарственного препарата «Ликопид».

ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

Заключение диссертации по теме «Другие cпециальности», Баирамашвили, Дмитрий Ильич

221 ВЫВОДЫ

1. На основании проведенных исследований обоснованы принципы и реализованы пути создания активных фармацевтических субстанций на основе рекомбинантных белков. Полученные результаты можно рассматривать как общее методическое направление при создании новых лекарственных препаратов генно-инженерного происхождения.

2. Созданы высокопродуктивные бактериальные штаммы-продуценты ГИЧ и рГРЧ, Изучена их экспрессия и стабильность, исследованы условия культивирования, показана возможность применения в производственном биосинтезе.

3. Исследованы условия рефолдинга и очистки экспрессируемых рекомбинантных белков, изучены условия их ферментативного расщепления, определены условия выделения и очистки ГИЧ и рГРЧ. На основе полученных данных разработаны высокоэффективные способы получения активных фармацевтических субстанций инсулина человека и соматропина человека.

4. Разработана технология получения быстродействующей инъекционной лекарственной формы инсулина человека 40 и 100 МЕ/мл, изучены активность и стабильность препаратов.

5. Разработана технология получения пролонгированной (комплекса протамин-инсулин) инъекционной лекарственной формы инсулина человека 40 и 100 МЕ/мл, изучены активность, стабильность и эффект пролонгации препаратов.

6. Изучены физико-химические и биологические свойства полученных белков, разработаны методы контроля качества и созданы национальные стандарты качества фармацевтических препаратов инсулина и гормона роста человека - Фармакопейные статьи предприятия.

7. Исследована возможность масштабирования разработанных процессов, создана и оптимизирована опытно-промышленная технология АФС инсулина и соматропина и готовых лекарственных форм ГИЧ: Инсуран Р и Инсуран НПХ 40/100 МЕ/мл.

8. Проведены доклинические и клинические исследования созданных лекарственных средств, показана их высокая эффективность и безопасность.

9. Разработана в полном объеме научно-техническая документация -опытно-промышленные регламенты на созданные фармацевтические препараты, получены регистрационные удостоверения МЗ РФ.

10.Организовано производство субстанции и готовых лекарственных форм ГИЧ и АФС соматропина в соответствии с правилами GMP, осуществлено внедрение препаратов в практику отечественного здравоохранения.

11.Показана возможность применения полученных научных и технологических решений в культивировании клеток растений и в производстве лекарственного препарата «Ликопид».

Список литературы диссертационного исследования доктор химических наук Баирамашвили, Дмитрий Ильич, 2007 год

1. Ни X., Ma Q., Zhang S. Biopharmaceuticals in China. // Biotechnol. J. 2006. - Vol. 1. - P. 1215-1224. Review.3 . Nightingale P., Martin P. The myth of the biotech revolution. //TRENDS in Biotechnology. 2004. Vol. 22.-No.ll.

2. Katahira M. Relationship between anti-insulin antibodies and albuminuria or proteinuria in human insulin-treated type 2 diabetes mellitus // Endocr J. 2001. -Vol. 48. - (4). - P. 487491.

3. Овчинников Ю.А. Биоорганическая химия. -М.: Просвещение, 1987.- 247-249 с.

4. Марри Р., Греннер Д., Мейес П., Родуэлл В. Биохимия человека. М.: Мир, 1993.- т.2, С. 247-263.

5. Brange J. Galenics of Insulin. Springer-Verlag. Berlin-Heidelberg. 1987. - P. 1-99.

6. Исаева И.В., Ковалева C.B., Пешая T.B. и др. Инсулин, его аналоги и лекарственные средства // Ведомости научного центра экспертизы государственного контроля лекарственных средств.- 2001,- № 2.- С.39-47.

7. Derewenda U., Derewenda Z., Dodson E.J. e.a. Phenol stabilizes more helix in a new symmetrical zinc insulin hexamer // Nature. -1989. Vol. 338. - P. 594-596.

8. Mirmira R.J., Tager H.S. Role of the Phenylalanine B24 Side Chain in Directing Insulin Interation with its Receptor. // J. of Biological Chemistry. 1989. - Vol.264. - P. 6349-6354.

9. Olsen H.B., Ludvigsen S., Kaarsholm Solution Structure of an Engeineered Insulin Monomer at Neutral pH. // N.C. Biochemistry. 1996. - Vol.35. - P. 8836-8845.

10. Steiner D.F., Oyer P.F. The biosynthesis of insulin and a probable precursor of insulin by a human islet cell adenoma. // PNAS USA.-1967. Vol.57. - P.473-480.

11. Steiner D.F., Hallund O., Rubenstein A. e.a. Isolation and properties of proinsulin, intermediate form, and other minor components from crystalline bovine insulin. // Diabetes.- 1968.-Vol.17.-P.725-736.

12. Машковский М.Д. Лекарственные средства. Харьков: Торсинг, - 1998. - № 2.-16 с.

13. Sonksen P. and Sonksen J. Insulin: Understanding its Action in Health and Disease. // J. Brit. J. Anaes.-2000. Vol. 85. - P. 69-79.

14. White M.F., Kahn C.R. The insulin signaling system. // J. Biol. Chem. 1994. - Vol. 269. -P. 1-4.

15. Zimmet P., Alberti K, G. Shaw Global and Societal Implication of the Diabetes Epidemic. // J. Nature. 2001. - Vol. 414. - P. 782-787.

16. Хигинс И., Бест Д., Джонс Дж. (Ред.) Биотехнология. Принципы и применение. М.: Мир,- 1988.-С. 325-338.

17. Строков И.А., Аметов А.С. Клиника диабетической невропатии. // Российский Медицинский журнал. -1998. т.6. - №12. www.rmj.ru.

18. Чазова Т.Е. Основные принципы лечения сахарного диабета 1 типа. // Российский Медицинский журнаЬ. 2003. - т.И. - №27. - С. 1507-1514.

19. Schmidt М., Babu K.R., Khanna N. е.а. Temperature-induced production of recombinant human insulin in high-cell density cultures of recombinant Escherichia coli, // J. Biotechnology. 1999. - Vol.68. - P. 71-83.

20. Kjeldsen Т., Yeast secretory expression of insulin precursors. // Appl. Microbiol. Biotechnol. -2000.-Vol. 54. P. 277-286.

21. Goeddel D.V., Kleid D.G., Bolivar F. e.a. Expression in Escherichia coli on chemically synthesized genes for human insulin. // PNAS USA. 1979. - Vol.76. - P. 106-110.

22. Crea R., Kraszewski A., Hirose T. e.a. Chemical synthesis of genes for human insulin.// PNAS USA. -1978. Vol.75. - P.5764-5769.

23. Miller W.L., Baxter J.D. Recombinant DNA A new source of insulin. // Diabetologia. -1980.-Vol.18. -P. 431-436.

24. Chance R.E., Hoffman J.A. Patent US, № 4421685,1983.

25. Williams D.C., Frank R.M., Muth W.L. e.a. Cytoplasmic Inclusion Bodies in Escherichia coli Producing Biosynthetic Human Insulin Proteins. // Science. 1982. - Vol. 215. (5).1. P. 687-689.

26. Патрушев Л.И. Искусственные генетические системы. Генная и белковая инженерия. -М.: Наука. 2004. - т. 1. - С. 171-173.

27. Burnett J.P. Experimental Manipulation of Gene Expression. // N.Y. Acad.Press. 1983. -P. 261-271.

28. Chance R.E., Hoffman J.A., Kroeff E.P. e.a. In: Rich, D.H., Gross, E. (Eds.). Peptides: synthesis-structure-function.: Proceeding of the Seventh American Peptide Symposium. Pierce Chemical Company. Rockford: USA. - 1981. - P. 721-728.

29. Frank B.H., Pettee J.M., Zimmerman RE. e.a., In: Rich, D.H., Gross, E. (Eds.), Peptides: synthesis-structure function.: Proceeding of the Seventh American Peptide Symposium. Pierce Chemical Company. Rockford:USA. -1981. - P. 729-738.

30. Petrides D., Sapidou E., Calandranis. J. Computer-Aided Process Analysis and Economic Evaluation for Biosynthetic Human Insulin Production A Case Study // Biotechnology and Bioengineering. -1995. - Vol. 48. - P. 529-541.

31. Nilsson J., Jonasson P., Samuelsson E. e.a. Integrated production of human insulin and its C-peptide. // J. Biotechnology. 1996. Vol. 48. - P. 241-250.

32. Jonasson P., Nilsson J., Samuelsson E. e.a. Integrated production of human insulin and its C-peptide. // Eur.J. Biotechnology. 1996. - Vol. 236. - P. 656-661.

33. Cereghino G.P.L., Cregg G.M. Application of yeast in biotechnology: Protein production and genetic analysis. // Curr.Opin.Biotechnol. 1999. Vol. 10. - P. 422-427.

34. Thim L., Hansen M.T., Norris K. e.a. Secrecion and Processing of insulin precursors in yeast. // PNAS USA. 1986. Vol. 83. - P. 6766-6770.

35. Shin C.S., Hong M.S., Kim D.Y. e.a. Synthesis of mini-proinsulin precursors using N-termini of human TNF a as fusion partners in recombinant Escherichia coli. // J. of Industrial Microbiology & Biotechnology. 1999. Vol. 22. - P. 176-180.

36. Овчинников Ю.А., Ефимов B.A., Чахмакчева О.Г. Химико-ферментативный синтез и клонирование гена проинсулина человека. ДАН СССР. 1983. т. 270. - №3. - с.743-747.

37. Ovchinnikov Yu.A., Efimov V.A., Ivanova I.N. e.a. Synthesis of DNA coding for human proinsulin. // Gene. 1984. Vol. 31. - P. 65-78.

38. Овчинников Ю.А., Ефимов B.A., Чахмакчева О.Г. и др. АС СССР, № SU 1321063, 1987.

39. Овчинников Ю.А., Ефимов В.А., Чахмакчева О.Г. и др. АС СССР, № SU 1352950, 1987.

40. Ефимов В.А., Алексюк И.В., Бурякова А.А. и др. Синтез принсулина человека в клетках Escherichia coli. // Биоорганическая химия. 1989. - т.15. - №8. - С. 1078-1090.

41. Ефимов В.А.,Фрадков А.Ф., Калинкина A.JI. и др. Экспрессирующие векторы, обеспечивающие синтез рекомбинантных белков в виде гибридов с металлсвязывающими пептидами. // Биоорганическая химия. 1995. - т.21. - №1.1. С. 9-16.

42. Навашин С.М., Яроцкий С.В., Иванкин А.Н. и др. Инсулин человека: физико-химические свойства и получение. // Антибиотики и химиотерапия. 1988. - т.ЗЗ. -№9.-С. 701-708.

43. Иванкин А.Н., Яроцкий С.В., Наващин С.М. и др. АС СССР, № SU 1828133,1993.

44. Уваров В.Ю., Нечаев В.Н., Маркин С.С. и др. Патент РФ, № RU 2122549,1998.

45. Маркин С.С., Уваров В.Ю., Ляшенко А.А. и др. Патент РФ, № RU 2148641,2000.

46. Klyushnichenko V., Vulfson A. Recombinant human insulin.II. Size-exclusion HPLC of biotechnological precursors-factors influencing on retention and selectivity. // Pure Appl. Chem. 1993. - Vol. 65. - P. 2265-2272.

47. Миргородская О.А., Казанина Г.А., Миргородская Е.П. и др. Протеолиз проинсулина человека, катализируемый нативным, модифицированным и иммобилизованным трипсином. // Биоорганическая химия. 1997. - т.23 - №2. - С. 91-97.

48. Лабораторный технологический регламент №2 на получение генно-инженерного инсулина человека. М.: Минмедпром СССР, ВНИИА, - 1988.

49. Инсулин человека. Временная фармакопейная статья ВФС 42-212892 от 19.06.1992, МЗ РФ.

50. Степанов А.В, Родионов П.П, Байдусь А.Н. Первый отечественный генно-инженерный инсулин. // Terra Medica nova. (СПб). 2004. - №3. - С. 33-34.

51. КалининЮ.Т., Степанов А.В., Байдусь А.Н. и др. Патент РФ, № RU 2232813,2003.

52. Шматченко В.В., Пискарева О.А., Шматченко Н.А. и др. Патент РФ, № RU 2263147, 2004.

53. Древаль А.В. Массовая инсулинофобия. М.:Профессионал-Центр, 2003.- С. 88-94.

54. Vajo Z., Duckworth W.C. Genetically engineered insulin analogs: diabetes in the new millenium. // Pharmacological Reviews. 2000. Vol. 52. - No 1. - P 1-9.

55. Vajo Z., Fawcett J., Duckworth W.C. Recombinant DNA technology in the treatment of diabetes: insulin analogs. // Endocrine Reviews. 2001. Vol. 22. - No 5. - P. 706-717.

56. Анциферов М.Б., Майоров А.Ю. Перспективы использования аналога человеческого инсулина. // Русский Медицинский журнал. 1998. - т. 6. - №12. www.rmj.ru

57. Sieker L.J., Sundell К. // Diabetes. -1991. Vol. 40. (Suppl.l). - 168A (Abstract).

58. Rosskamp R.H., Park J. Long-acting insulin analogs. // Diabetes Care. 1999. - Vol. 22. (Suppl.2) P. 109-113.

59. McKeage K. and Goa K.L. Insulin glargine: a review of its therapeutic use as a long-acting agent for the management of type 1 and 2 diabetes mellitus. // Drugs. 2001. Vol. 61. (11). -P.1599-1694.

60. Heinemann L., Linkeshova R., Rave K. e.a. Time-action profile of the long-acting insulin analog insulin glargine (HOE901) in comparison with those of NPH insulin and placebo. // Diabetes Care. 2000. - Vol. 23. - P. 644-649.

61. Heinemann L., Sinha K., Weyer C. e.a. Time-action profile of the soluble, fatty acid acylated, long-acting insulin analogue NN304. // Diabet Med. 1999. - Vol. 16. - P. 332338.

62. Myers S.R., Yakubu-Madus F.E., Johnson W.T. e.a. Acylation of human insulin with palmitic acid extends the time action of human insulin in diabetic dogs. // Diabetes. 1997. -Vol. 46. - P. 637-642.

63. Banting F.G., Best C.H. Pancreatic extracts. // J Lab Clin Med. 1922. - Vol. 7. - P. 464-472

64. Платэ H.A., Старосельцева Л.К., Валуев Л.И. и др. Раствор инсулина для пероральноговведения. // Химико-фармацевтический журнал. 2006. - Т.40. - №4. - С. 47-50.

65. Kuznetsova E.G., Salomatina L.A., Skaletskiy N.N. e.a.: 1st EUFEPS Conference on Optimizing Drug Delivery and Formulation: New Challenges in Drug Delivery. Versailles, France, 2003. 177-178 p.

66. Севастьянов В.И., Саломатина Л.А., Кузнецов Е.Г. и др. Трансдермальные системы введения инсулина. // Медицинская техника. 2003. - №2. - С. 21-24.

67. Nightingale P. and Martin P. The myth of the biotech revolution. // Trends in Biotechnology. 2004. - Vol. 22. - №11. - P. 564-569.

68. Roskam W.G., Rougeon F. Molecular cloning and nucleotide sequence of the human growth ; hormone structural gene. // Nucl.Acids Res. 1979. - Vol. 7. - P. 305-320.

69. Martial J.A., Hallewell R.A., Baxter J.D., Goodman H.M. Human growth hormone: complementary DNA cloning and expression in bacteria. // Science. -1979. Vol. 205. -No 4406. - P. 602-607.

70. Herington AC. Identification and characterization of growth hormone receptors on isolated rat adipocytes. // J Recept Res. 1981. Vol. 82.2(4). - P. 299-316.

71. Simionescu L, Dimitriu V, Zamfir-Grigorescu D, Aman E, Terbancea M. The simultaneous isolation of human pituitary hormones. //1. Human growth hormone. Endocrinologie. 1982. Oct-Dec. Vol. 20(4). - P. 273-83.

72. Rappaport EB. Iatrogenic Creutzfeldt-Jakob disease. // Neurology. 1987. Sep. Vol. 37(9) -P. 1520-1522.

73. Carter MJ, Facklam TJ, Long PC, Scotland RA. Are continuous cell lines safe as substrates for human drugs and biologies? A case study with human growth hormone. // Dev Biol Stand.-1989. Vol. 70.-P. 101-107.

74. Olson КС, Fenno J, Lin N, Harkins RN, Snider C, Kohr WH, Ross MJ, Fodge D, Prender G, Stebbing N. Purified human growth hormone from E. coli is biologically active. // Nature. -1981,- Oct. 1.293(5831). P. 408-411.

75. Meisinger M.A., Cirillo V.J., Davis G.E., Reisfeld R.A. // Nature. 1964. - Vol. 2010. -P. 820—821.

76. Fiddes J.C., Seeburg P.H., DeNoto F.M. e. a. Structure of genes for human growth hormone and chorionic somatomammotropin. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1979. - Vol. 76.1. P. 4294-4298.

77. Dalton R., Schiermeier Q. Genentech pays $200m over growth hormone 'theft'. // Nature. -1999.-Vol. 402.-P. 335.

78. Yamashiro D., Li C.H. Preparation of N-a-Boc-N-epsilon-P-BRZ-lysine and N-a-Boc-O-M-Brbzl-tyrosine and their use for the solid phase synthesis of an octapeptide occurring in the HGH molecule. // Int. J. Pept. Protein Res. 1972. - Vol. 4. - P. 181—185.

79. Blake J., Li C.H. Synthesis and growth-promoting activity of N-alpha-acetyl-HGH-(95-136). // Ibid. 1973. - Vol. 5. - P. 123—125.

80. Noble R.L., Yamashiro D., Li C.H. Human somatotropin 53. Synthesis and biological activity of the amino terminal fifty-four residue fragment. // Ibid. 1977. - Vol. 10.1. P. 385—393.

81. Wade J.D., Ng F.M., Bornstein J. Diabetogenic action of human growth hormone. Synthesis and activity of C-terminal fragments. // Ibid. 1979. - Vol. 13. - P. 195—200.

82. Kopchick J.J. History and future of growth hormone research. // Horm. Res. 2003. - Vol. 60. - Suppl 3.-P. 103—112.

83. Ross R.J., Grossma A., Preece M.A. e. a. Growth hormone releasing hormone in the assessment and long-term treatment of growth hormone deficiency. // Acta Paediatr. Scand. Suppl. -1987. Vol. 331. - P. 42—47.

84. Izdebski J., Pinski J., Horvath J.E. e. a. Synthesis and biological evaluation of superactive agonists of growth hormone-releasing hormone. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1995. -Vol. 92. - P. 4872—4876.

85. Zarandi M., Kovacs M., Horvath J.E. e. a. Synthesis and in vitro evaluation of new potent antagonists of growth hormone-releasing hormone (GH-RH). // Peptides. 1997. - Vol. 18. -P. 423—430.

86. Ghigo E., Arvat E., Muccioli G., Camanni F. Growth hormone-releasing peptides. // Eur. J. Endocrinol. 1997. - Vol. 136. - P. 445—460.

87. Akman M.S., Girard M., O'Brien L.F. e. a. Mechanisms of action of a second generation growth hormone-releasing peptide (Ala-His-D-beta Nal-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2) in rat anterior pituitary cells. // Endocrinology. -1993. Vol. 132. - P. 1286—1291.

88. И.И.Воробьев, А.И.Мирошников. Гормон роста человека: структура, функции и биотехнологический потенциал. // Российский химический журнал. 2005. - t.XLIX. -№1. - С.46-54.

89. Locatelli V., Torsello A. Growth hormone secretagogues: focus on the growth hormone-releasing peptides. // Pharmacol. Res. 1997, - Vol. 36. - P. 415—423.

90. Popovic V., Micic D., Damjanovic S. e. a. Growth hormone secretagogues in pathologicalstates: diagnostic implications. // Acta Paediatr. Suppl. -1997. Vol. 423. - P. 97—101.

91. Fuh V.L., Bach M.A. Growth hormone secretagogues: mechanism of action and use in aging. // Growth Horm. IGF Res. 1998. - Vol. 8. - P. 13—20.

92. Selden R.F., Skoskiewicz M.J., Howie K.B. e. a. Implantation of genetically engineered fibroblasts into mice: implications for gene therapy. // Science. 1987. - Vol. 236. - P. 714— 718.

93. Barr E., Leiden J.M. Systemic delivery of recombinant proteins by genetically modified myoblasts. // Science. 1991. - Vol. 254. - P. 1507—1509.

94. Limonta J.M., Castro F.O., Martinez R. e. a. Transgenic rabbits as bioreactors for the production of human growth hormone. // Biotechnol. -1995. Vol. 40. - P. 49—58.

95. Pavlakis G.N., Hizuka N., Gorden P. e. a. Expression of two human growth hormone genes in monkey cells infected by simian virus 40 recombinants. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1981.-Vol. 78.-P. 7398—7402.

96. Carter M.J., Facklam T.J., Long P.C., Scotland R.A. Are continuous cell lines safe as substrates for human drugs and biologies? A case study with human growth hormone. // Dev. Biol. Stand. -1989. Vol. 70. - P. 101—107.

97. Tokunaga Т., Iwai S., Gomi H. e. a. Expression of a synthetic human growth hormone gene in yeast. // Gene. -1985. Vol. 39. P. 117—120.

98. Циоменко А.Б., Туйметова Г.П., Эльдаров М.А. и др. Просегмент дрожжевого альфа-фактора направляет гетерологичный белок (гормон роста человека) в культуральную среду Saccharomyces cerevisiae. // Биохимия. -1994. т. 59. - С. 1675—1688.

99. Lee J., Choi S.I., Jang J.S. e. a. Novel secretion system of recombinant Saccharomyces cerevisiae using an N-terminus residue of human IL-1 beta as secretion enhancer. // Biotechnol. Prog. 1999. - Vol. 15. - P. 884—890.

100. Franchi E., Maisano F., Testori S.A. e. a. A new human growth hormone production process using a recombinant Bacillus subtilis strain. // J. Biotechnol. -1991. Vol. 18.1. P. 41—54.

101. Cronin M.J. Pioneering recombinant growth hormone manufacturing: pounds produced per mile of height. // J. Pediatr. 1997. - Vol. 131. - P. S5—S7.

102. Adelman J.P., Hayflick J.S., Vasser M., Seeburg P.H. In vitro deletional mutagenesis for bacterial production of the 20,000-dalton form of human pituitary growth hormone. // DNA. 1983.-Vol. 2.-P. 183—193.

103. Kaplan S.L., Underwood L.E., August G.P. e. a. Clinical studies with recombinant-DNA-derived methionyl human growth hormone in growth hormone deficient children. // Lancet. -1986.-Vol. l.-P. 697—700.

104. Le H.V., Trotta P.P. Purification of secreted recombinant proteins from Escherichia coli. // Bioprocess Technol. 1991. - Vol. 12. - P. 163—181.

105. Gray G.L., Baldridge J.S., McKeown K.S. e. a. Periplasmic production of correctly processed human growth hormone in Escherichia coli: natural and bacterial signal sequences are interchangeable. // Gene. -1985. Vol. 39. - P. 247—254. .

106. Becker G.W., Hsiung H.M. Expression, secretion and folding of human growth hormone in Escherichia coli. Purification and characterization. // FEBS Lett. 1986. - Vol. 204.1. P. 145—150.

107. Chang C.N., Rey M., Bochner B. e. a. High-level secretion of human growth hormone by Escherichia coli. // Gene. 1987. - Vol. 55. - P. 189—196.

108. Gellerfors P., Eketorp G., Fholenhag K. e. a. Characterisation of a secreted form of recombinant derived human growth hormone, expressed in Escherichia coli cells. // J. Pharm. Biomed. Anal. 1989. - Vol. 7. - P. 173—183.

109. Rasmussen L.H., Zachmann M., Nilsson P. Authentic recombinant human growth hormone. Results of a multicenter clinical trial in patients with growth hormone deficiency. // Helv Paediatr. Acta. 1989. - Vol. 43. - P. 443-^48.

110. Tabandeh F., Shojaosadati S.A., Zomorodipour A. e. a. Heat-induced production of human growth hormone by high cell density cultivation of recombinant Escherichia coli. // Biotechnol. Lett. 2004. - Vol. 26. - P. 245—250.

111. Patra A.K., Mukhopadhyay R., Mukhija R. e. a. Optimization of inclusion body solubilization and renaturation of recombinant human growth hormone from Escherichia coli. // Protein Expr Purif. 2000. - Mar. 18(2). P. 182-92.

112. Mukhija R., Rupa P., Pillai D., Garg L.C. High-level production and one-step purification of biologically active human growth hormone in Escherichia coli. // Gene. 1995. - Vol. 165.-P. 303—306.

113. Shin N.K., Kim D.Y., Shin C.S. e. a. High-level production of human growth hormone in Escherichia coli by a simple recombinant process. // J. Biotechnol. -1998. Vol. 62.1. P. 143—151.

114. Lauritzen C., Pedersen J., Madsen M.T. e. a. Active recombinant rat dipeptidyl aminopeptidase I (cathepsin C) produced using the baculovirus expression system. // Protein Expr. Purif. 1998. - Vol. 14. - P. 434—442.

115. Ho Y., Liebhaber S.A., Cooke N.E. Activation of the human GH gene cluster: roles for targeted chromatin modification. // Trends. Endocrinol. Metab. 2004. - Vol. 15. - P. 40— 45.

116. Cunningham B.C., Mulkerrin M.G., Wells J.A. Dimerization of human growth hormone by zinc. // Science. 1991. - Vol. 253. - P. 545—548.

117. Mayo K.E., Miller T.L., DeAlmeida V. e. a. The growth-hormone-releasing hormone receptor: signal transduction, gene expression, and physiological function in growth regulation. // Ann. NY Acad. Sci. -1996. Vol. 805. - P. 184—203.

118. Kojima M., Hosoda H., Date Y. e. a. Ghrelin is a growth-hormone-releasing acylated peptide from stomach. // Nature. 1999. - Vol. 402. - P. 656—660.

119. Bertherat J. Nuclear effects of the cAMP pathway activation in somatotrophs. // Horm. Res. 1997.-Vol. 47.-P. 245—250.

120. Pellegrini-Bouiller I., Morange-Ramos I., Barlier A. e. a. Pit-1 gene expression in human pituitary adenomas. // Horm. Res. 1997. - Vol. 47. - P. 251—258.

121. Van Cauter E., Plat L., Copinschi G. Interrelations between sleep and the somatotropic axis. // Sleep. 1998. - Vol. 21. - P. 553—566.

122. Obal F.Jr., Krueger J.M. The somatotropic axis and sleep. // Rev. Neurol. Paris. 2001. -Vol. 157.-P. S12—S15.

123. Carter-Su C., Schwartz J., Smit L.S. Molecular mechanism of growth hormone action. // Annu. Rev. Physiol. 1996. - Vol. 58. - P. 187—207.

124. Somers W., Ultsch M., De Vos A.M., Kossiakoff A.A. The X-ray structure of a growth hormone-prolactin receptor complex. //Nature. 1994. - Vol. 372. - P. 478—481.

125. Kossiakoff A.A., Somers W., Ultsch M. e. a. Comparison of the intermediate complexes of human growth hormone bound to the human growth hormone and prolactin receptors. // Protein Sci. 1994. - Vol. 3. - P. 1697—1705.

126. Clackson Т., Wells J.A. A hot spot of binding energy in a hormone-receptor interface. // Science. 1995. - Vol. 267. - P. 383—386.

127. Cunningham B.C., Bass S., Fuh G., Wells J.A. Zinc mediation of the binding of human growth hormone to the human prolactin receptor. // Science. 1990. - Vol. 250. - P. 1709— 1712.

128. Fuh G., Cunningham B.C., Fukunaga R. e. a. Rational design of potent antagonists to the human growth hormone receptor. // Science. -1992. Vol. 256. - P. 1677—1680.

129. Campbell G.S. Growth-hormone signal transduction. //J. Pediatr. 1997. - Vol. 131. -P. S42—S44.

130. Но K.K., O'Sullivan A.J., Hoffman D.M. Metabolic actions of growth hormone in man. // Endocr. J. 1996. - Vol. 43. Suppl. - P. S57—S63.

131. Laron Z. Clinical use of somatomedin-1: yes or no? // Paediatr. Drugs. 1999. - Vol. 1. -P. 155—159.

132. Feld S., Hirschberg R. Growth hormone, the insulin-like growth factor system, and the kidney. // Endocr. Rev. 1996. - Vol. 17. - P. 423^80.

133. Sekine N., Wollheim C.B., Fujita T. GH signalling in pancreatic beta-cells. // Endocr. J. -1998. Vol. 45. Suppl. - P. S33—S40.

134. Nielsen J.H., Svensson C., Galsgaard E.D. e. a. Beta cell proliferation and growth factors. e. a. // J. Mol. Med. 1999. - Vol. 77. - P. 62—66.

135. Geffner M. Effects of growth hormone and insulin-like growth factor I on T- and B-lymphocytes and immune function. // Acta Paediatr. 1997. - Vol. 423. Suppl. - P. 76—79.

136. Hansen Т.К., Thiel S., Dall R. e. a. GH strongly affects serum concentrations of mannan-binding lectin: evidence for a new IGF-I independent immunomodulatory effect of GH. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2001. - Vol. 86. - P. 5383—5388.

137. Bozzola M., De Benedetti F., De Amici M. e. a. Stimulating effect of growth hormone on cytokine release in children. // J. Endocrinol. 2003. - Vol. 149. - P. 397—401.

138. Alsat E., Guibourdenche J., Luton D. e. a. Human placental growth hormone. //Am. J. Obstet. Gynecol. 1997. - Vol. 177. - P. 1526—1534.

139. Alsat E., Guibourdenche J., Couturier A., Evain-Brion D. Physiological role of human placental growth hormone. // Mol. Cell Endocrinol. 1998. - Vol. 140. - P. 121—127.

140. Procter A.M., Phillips J.A., 3rd, Cooper D.N. The molecular genetics of growth hormone deficiency. // Hum. Genet. 1998. - Vol. 103. - P. 255—272.

141. Binder G. Isolated growth hormone deficiency and the GH-1 gene: update 2002. // Horm. Res. 2002. - Vol. 58. Suppl 3. - P. 2—6.

142. Clement K., Vaisse C., Lahlou N. e. a. A mutation in the human leptin receptor gene causes obesity and pituitary dysfunction. //Nature. -1998. Vol. 392. т P. 398—401.

143. Rappaport R., Brauner R. Growth and endocrine disorders secondary to cranial irradiation. // Pediatr. Res. 1989. - Vol. 25. - P. 561—567.

144. Nagel B.H., Palmbach M., Petersen D., Ranke M.B. Magnetic resonance images of 91 children with different causes of short stature: pituitary size reflects growth hormone secretion. // Eur. J. Pediatr. 1997. - Vol. 156. - P. 758—763.

145. Laron Z., Kowadlo-Silbergeld A., Eshet R., Pertzelan A. Growth hormone resistance. // Ann. Clin. Res. 1980. - Vol. 12. - P. 269—277.

146. Laron Z. The syndrome of familial dwarfism and high plasma immunoreactive human growth hormone. // Birth Defects Orig. Artie. Ser. 1974. - Vol. 10. - P. 231—238.

147. Parks J.S., Brown M.R., Faase M.E. The spectrum of growth-hormone insensitivity. // J. Pediatr. 1997. - Vol. 131. - P. S45—S50.

148. Rosenfeld R.G., Hwa V. New molecular mechanisms of GH resistance. // Eur. J. Endocrinol.-2004. Vol. 151. Suppl 1. - P. SI 1—S15.

149. Powell D.R. Powell D.R. Effects of renal failure on the growth hormone-insulin-like growthfactor axis. // J. Pediatr. 1997. - Vol. 131. - P. S13—SI6.

150. Adams E.F., Buchfelder M., Lei Т., Petersen В., Fahlbusch R. Molecular biology of growth-hormone-secreting human pituitary tumours: biochemical consequences and potential clinical significance. // Acta Neurochir. 1996. - Vol. 65. Suppl. - P. 7—10.

151. Ranke M.B. Human growth hormone therapy of non-growth hormone deficient children. // Pediatrician. 1987. - Vol. 14. - P. 178—182.

152. Darendeliler F., Hindmarsh P.C., Brook C.G. Non-conventional use of growth hormone: European experience. // Horm. Res. 1990. - Vol. 33. - P. 128—136.

153. Benfield M.R., Kohaut E.C. Growth hormone is safe in children after renal transplantation. // J. Pediatr. 1997. - Vol. 131. - P. S28—S31.

154. Friedman A.L. Growth hormone is not safe for children with renal transplants. // J. Pediatr. 1997. - Vol. 131. - P. S25—S27.

155. Allen D.B. Rundle A.C. Graves D.A., Blethen S.L. Risk of leukemia in children treated with human growth hormone: review and reanalysis. // J. Pediatr. 1997. - Vol. 131. —1. P. S32—S36.

156. Shalet S.M., Brennan B.M., Reddingius R.E. Growth hormone therapy and malignancy. // Horm. Res. 1997. - Vol. 48. Suppl 4. - P. 29—32.

157. Frasier S.D. Human pituitary growth hormone (hGH) therapy in growth hormone deficiency. // Endocr. Rev. 1983. - Vol. 4. - P. 155—170.

158. Van Loon K. Safety of high doses of recombinant human growth hormone. // Horm. Res. 1998. - Vol. 49. Suppl 2. - P. 78—81.

159. Gomberg-Maitland M., Frishman W.H. Recombinant growth hormone: a new cardiovascular drug therapy. //Am. Heart. J. -1996. Vol. 132. - P. 1244—1262.

160. Lombardi G., Colao A., Ferone D. e. a. Effect of growth hormone on cardiac function. // Horn. Res. 1997. - Vol. 48. Suppl 4. - P. 38—42.

161. Lamberts S.W., van den Beld A.W., van der Lely A.J. The endocrinology of aging. // . Science. 1997. - Vol. 278. - P. 419—424. ' ' " " V.

162. Sugimoto Т., Nakaoka D., Nasu M. e. a. Effect of recombinant human growth hormone in elderly osteoporotic women. // Clin. Endocrinol. (Oxf). 1999. - Vol. 51. - P. 715—724.

163. Saaf M., Hilding A., Thoren M. e. a. Growth hormone treatment of osteoporotic postmenopausal women a one-year placebo-controlled study. // Eur. J. Endocrinol. - 1999. - Vol. 140. - P. 390—399.

164. Goffin V., Bernichtein S., Carriere 0. e. a. The human growth hormone antagonist B2036 does not interact with the prolactin receptor. // Endocrinology. 1999. - Vol. 140.1. P. 3853—3856.

165. Parkinson C., Scarlett J.A., Trainer P.J. Pegvisomant in the treatment of acromegaly. // Adv. Drug Deliv. Rev. 2003. - Vol. 55. - P. 1303—1314.

166. Pursel V.G., Hammer R.E., Bolt D.J. e. a. Integration, expression and germ-line transmission of growth-related genes in pigs. // J. Reprod. Fertil. 1990. - Vol. 41. Suppl. -P. 77—87.

167. Vandeputte-Van Messom G.V., Burvenich C. Effect of somatotropin on changes in milk production and composition during coliform mastitis in periparturient cows. // J. Dairy Sci.1993.-Vol. 76.-P. 3727—3741.

168. Hammond B.G., Collier R.J., Miller M.A. e. a. Food safety and pharmacokinetic studies which support a zero (0) meat and milk withdrawal time for use of sometribove in dairy cows. // Ann Rech. Vet. 1990. - Vol. 21. Suppl 1. - P. 107S-120S.

169. Laron Z., Galatzer A.Growth hormone, somatomedin and prolactin-relationship to brain function. // Brain Dev. 1985. - Vol. 7. - P. 559—567.

170. Aloia J.F., Zanzi I., Cohn S.H. Absence of an effect of chronic administration of growth hormone on serum lipids. // Metabolism. 1975. - Vol. 24. - P. 795—798.

171. Neely E.K., Rosenfeld R.G. Use and abuse of human growth hormone. // Annu Rev. Med.1994.-Vol. 45.-P. 407—420.

172. Clark W., Kendall M.J. Growth hormone treatment for growth hormone deficient adults. // J. Clin. Pharm. Ther. 1996. - Vol. 21. - P. 367—372.

173. Shadid S., Jensen M.D. Effects of growth hormone administration in human obesity. // Obes. Res. 2003. - Vol. 1L - P. 170—175. 1

174. Bradley C.A., Sodeman T.M. Human growth hormone. Its use and abuse. // Clin. Lab. Med. 1990.-Vol. 10.-P. 473—477.

175. Kicman A.T., Cowan D.A. Peptide hormones and sport: misuse and detection. // Br. Med. Bull. 1992. Vol. 48. - P. 496—517.

176. Minuto F., Barreca A., Melioli G. Indirect evidence of hormone abuse. Proof of doping? // J. Endocrinol. Invest. 2003. - Vol. 26. - P. 919—923.

177. Frisch H. Growth hormone and body composition in athletes. // J Endocrinol Invest. -1999.-Vol. 22.-P. 106—109.203. von Werder K. The somatopause is no indication for growth hormone therapy. // J Endocrinol Invest. 1999. - Vol. 22. - P. 137—141.

178. Cronin M.J. Pioneering recombinant growth hormone manufacturing: pounds produced per mile of height. // J Pediatr. 1997. Jul. Vol. 131(1 Pt 2). - P. S5-7.

179. Le H.V., Trotta P.P. Purification of secreted recombinant proteins from Escherichia coli. // Bioprocess Technol. 1991. -Vol. 12.-P. 163-181.

180. Vimpani G.V., Vimpani A.F., Lidgard G.P., Cameron E.H., Farquhar J.W. Prevalence of severe growth hormone deficiency. // Br Med J. 1977. - Vol. 2. - P. 427-430.

181. Darendeliler F., Hindmarsh P.C., Brook C.G. Non-conventional use of growth hormone: European experience. // Horm Res. 1990. - Vol. 33. - P. 128-136.

182. Lombardi G., Colao A., Ferone D., Marzullo P., Orio F., Longobardi S., Merola B. Effect of growth hormone on cardiac function. // Horm Res. 1997. -Vol. 48 Suppl 4. - P. 38-42.

183. Low J.F., Herndon D.N., Barrow R.E. Effect of growth hormone on growth delay in burned children: a 3-year follow-up study. // Lancet. 1999. - Vol. 354. - P. 1789.

184. Charton E., Miller J. H., Briancon F., Rautmann G. Capillary electrophoresis for the control of impurities of rDNA somatropin. // Pharmeuropa Bio. 2004 №1. - P 47-58.

185. Баирамашвили Д.И. Генноинженерный инсулин человека: успехи и перспективы. // Российский химический журнал. 2005. - Т. XLIX. - №1. - С. 34-45.

186. Коробко В.Г., Болдырева Е.Ф., Шингарова Л.Н. и^др. Патент РФ, № RU 2144958, 2000. / .„ Г.

187. Патрушев Л.И., Баирамашвили Д.И., Мирошников А.И. Штамм бактерий Escherichia coli BL-07 продуцент проинсулина человека. Патент РФ, № 2267534,2006.

188. Зинченко А.А., Мелихова Т.Д., Гордеева Е.А., Толстое Д.Н., Михалев А.В., Костромина Т.И., Баирамашвили Д.И., Мирошников А.И., Иванов В.Т. Способ получения генно-инженерного инсулина человека. Патент РФ, № 2208637,2003.

189. Зинченко А.А., Нокель Е.А., Толстов Д.Н., Гордеева Е.А., Баирамашвили Д.И., Мирошников А.И. Способ выделения карбоксипептидазы В. Патент РФ, № 2177997, 2002.

190. Гусаров Д.А., Востриков В.В., Ручко Е.А., Баирамашвили Д.И. Использование ОФ ВЭЖХ для очистки генно-инженерного инсулина человека. // Биотехнология. 2006. -№2. - С. 44-49.

191. Смирнов А.В., Гукасова Е.А., Баирамашвили Д.И., Мирошников А.И. Способ получения гидрофильного геля. Патент РФ, № 2187363,2002.

192. Отраслевой стандарт МЗ РФ ОСТ 91500.05.001-00. Стандарты качества лекарственных средств: Сборник нормативных актов по нормированию фармацевтического производства (Стандарты GMP). М., 2000. - С. 497-538.

193. The United States Pharmacopeia (USP24). Supplement 3. Philadelphia, USA, 2000.

194. European Pharmacopeia. 4th Edition. 4.02 Version. Strasbourg, France, 2002.

195. Александров А.Н., Скоблов Ю.С., Скоблов М.Ю., Шибанова Е.Д., Баирамашвили Д.И. Полуколичественное определение ДНК в препаратах рекомбинантных белков методом ПЦР.//Биоорганическая химия. 2005. - Т.31. - №1. - С. 71-76.

196. Государственная фармакопея СССР. // Под редакцией Бабаяна Э.А. М.: Медицина, 1990. - Вып.2. - С. 125.

197. Баирамашвили Д.И., Каратеева Р.И., Сизова Н.В., Говорухина Е.И., Давыдов В.Л., Мирошников А.И. Способ приготовления быстродействующего раствора инсулина для инъекций. Патент РФ, № 2202365,2003.

198. Баирамашвили Д.И., Говорухина Е.И., Давыдов В.Л., Каратеева Р.И., Сизова Н.В., Костецкий П.В., Тимченко Т.В. Инсулин человека для инъекций 40 ЕД/мл.// Лабораторный регламент ЛР 02699487-02-02. 2002. - С. 1-86.

199. Баирамашвили Д.И., Косолапова С.В., Давыдов B.JL, Сизова Н.В., Говорухина Е.И, Дьячкова С.Н., Тимченко Т.В., Костецкий П.В. ИНСУРАН Р, раствор для инъекций 100 МЕ/мл. // ОПР 02699487-06-04. 2004. - С. 1-83.f ч

200. Баирамашвили Д.И., Говорухина Е.И., Сизова Н.В., Костецкий П.В., Тимченко Т.В. Инсуран НПХ 40 ЕД/мл. // Лабораторный регламент ЛР 02699487-03-02. 2002. - С. 1101.

201. Баирамашвили Д.И., Косолапова С.В., Давыдов В.Л., Сизова Н.В., Говорухина Е.И, Дьячкова С.Н., Тимченко Т.В., Костецкий П.В. ИНСУРАН НПХ, суспензия для подкожного введения 100 МЕ/мл. // ОПР 02699487-07-04. 2004. - С. 1-90.

202. Britisch Pharmacopeia. http://www.pharmacopoeia.org.uk/i

203. Воробьев И.И., Пономаренко Н.А., Габибов А.Г., Баирамашвили Д.И., Дурова О.М., Шустер A.M. Высокоэффективный метод получения гормона роста человека.: Сборник тезисов VIII чтений, посвященных памяти академика Ю.А.Овчинникова. -Пущино, 2006.-С. 119.

204. Chen, G.Q., Gouaux, Е. Overexpression of a glutamate receptor (GluR2) ligand binding domain in Escherichia coli: application of a novel protein folding screen. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997. - V. 94. - P. 13431-13436.

205. Бобрускин А.И., Свешникова Е.В., Кожевников Г.О., Кононова Н.В. Субстанция соматропина человеческого.//Опытно-промышленный регламент ОПР 58567817- 0104.- 2004.- С. 1-80.

206. Баирамашвили Д.И. GMP в биотехнологическом производстве рекомбинантных фармацевтических белков. Новая технологическая платформа биомедицинских исследований. Ростов на Дону, 2006. - С. 82.

207. Баирамашвили Д.И., Мирошников А.И. Актуальные вопросы биофармацевтики. Создание отечественной научно-технологической платформы.: Материалы четвертого съезда общества биотехнологов России им. Ю.А.Овчинникова. Пущино, 2006.1. V С. 25. .1? * .

208. T.B.Karyagina, V.V.Urmantceva, D.I.Bairamashvili. Antiseptic Dye Shikonin from Arnebia euchroma Cell Culture. // Ernarungforschung. - 2000. - Vol. 45. - P. 189-190.

209. V.V.Urmantceva, O.A.Gaevskaya, D.I.Bairamashvili. Produktion of berberine by Thalictrum minus cell culture. // Absracts of Posters. Biosynthesis and Accumulation of Secondary Products. Halle (Germany). 2000. - P. 16.

210. Урманцева B.B., Карягина Т.Б., Черткова P.B., Муравьева Т.И., Баирамашвили Д.И. Индукция фенилаланинаммиаклиазы под действием метилжасмоната в культуре клеток Arnebia euchroma. // Физиология растений. 1999. - Т. 46. - №.6. - С. 855-860.

211. Урманцева В.В., Гаевская О.А., Карягина Т.Б., Баирамашвили Д.И. Влияние аминокислот на образование протобербериновых алкалоидов в культуре клеток василистника малого (Thalictrum minus L). // Физиология растений. 2005. - Т. 52. №3. -С. 388-391.

212. Урманцева В.В., Гаевская О.А., Смирнов А.В., Гукасова Е.А., Баирамашвили Д.И. Особенности культуры клеток Thalictrum minus как продуцента алкалоидов. // Физиология растений. 2000. - Т. 47. №1. - С. 58-64.

213. Карягина Т.Б., Арзуманян В.Г., Тимченко Т.В., Баирамашвили Д.И., Антимикробная активность препаратов шиконина. // Химико-фармацевтический журнал. 2001. - №8. -С. 31-35.

214. Т.Б.Карягина, М.А.Томилина, А.В.Михалев, Д.И.Баирамашвили. Культура Linum Flavum как источник лигнанов.: Тезизы докладов VI международного симпозиума «Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования». Пущино, 2005.-Т. III.-С. 330-332. •

215. Карягина Т.Б., Миронова Н.И., Тимченко Т.В., Баирамашвили Д.И., Белоусов М.В. Косметические препараты на основе природных шиконинов.: Материалы конференции «Косметические средства и сырье XXI век». - М., 2000. - С. 67.

216. Андронова Т.М., Пинегин Б.В. Ликопид (ГМДП) современный отечественный высокоэффективный иммуномодулятор. - М.: Россия, 2005. - 3 с.

217. Ионообменное выделение дисахарида клеточной стенки Micrococcus Luteus (Lysodeikticus). А.В.Смирнов, Е.А.Гукасова, С.А.Косарев, П.В.Феденюк Д.И.Баирамашвили. // Биотехнология. 2003. - №5. - С. 57-65.

218. Смирнов А.В., Косарев С.А., Феденюк П.В., Костромина Т.И., Давыдов В.Л., Баирамашвили Д.И., Мирошников А.И. Способ получения дисахарида. Патент РФ, № 2230119, 2004.

219. Maniatis, Т., Fritsch, Е. F. and Sambrook, J. Molecular Cloning: a Laboratory Manual. -NY, 1982, Cold Spring Harbor Laboratory Press.