Биотехнологические и биохимические пути изучения механизмов регуляции биосинтетических, ростовых и коммуникационных процессов бактериальных клеток тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, доктор биологических наук Панкрушина, Алла Николаевна

• Панкрушина, Алла Николаевна
• доктор биологических наук
• 2002

Оглавление диссертации доктор биологических наук Панкрушина, Алла Николаевна

Введение.

Обзор литературы

Глава 1. Регуляция роста и деления бактериальных клеток.

1.1. Факторы, участвующие в регуляции роста и деления бактериальных клеток; биотехнологические аспекты их применения.

1.2. Генно-инженерные подходы к изучению механизмов контроля роста и деления бактериальных клеток, межклеточной коммуникации. Гены, участвующие в синтезе компонентов бактериальных клеточных стенок.

Глава 2. Строение и химический состав бактериальных клеточных стенок.

2.1. Строение оболочки клеток грамотрицательных бактерий

2.2. Строение оболочки клеток грамположительных бактерий.

2.3. Химический состав и строение пептидогликанов и липополисаха-ридов; их роль в процессах клеточного роста и деления, в определении токсичных и коммуникационных свойств бактериальных клеток.

2.3.1. Бактериальные пептидогликаны.

2.3.2. Липополисахариды грамотрицательных бактерий.

Глава 3. Биосинтез бактериальных пептидогликанов и липополисаха ридов.

3.1. Биосинтез пептидогликанов.

3.1.1. Пенициллин-связывающие протеины - ферменты, участвующие в синтезе пептидогликанов.

3.2. Биосинтез липополисахаридов.

Глава 4. Биохимические и физико-химические механизмы межклеточной коммуникации в бактериальных колониях. 64 4.1. Факторы химической природы, участвующие в межклеточной коммуникации.

4.2. Факторы физической природы, участвующие в межклеточной коммуникации.

Экспериментальная часть

Глава 5. Материалы и методы исследований.

5.1. Объекты исследования.

5.1.1.Клетки Е. coli и плазмиды.

5.1.2.Клетки Salmonella.

5.1.3. Клетки Bacillus.

5.1.4. Клетки Micrococcus.

5.2. Методы генно-инженерной модификации; фенотипической и генотипической характеристики трансформированных бактериальных клеток.

5.2.1. Трансформация клеток.

5.2.2. Выделение и анализ плазмид.

5.2.2.1. Выделение плазмид методом щелочного крекинга.

5.2.2.2.Выделение плазмид SDS - щелочным методом.

5.3. Таксономическое изучение новых бактериальных изолятов.

5.3.1. Фенотипическая характеристика.

5.3.2. Определение композиции оснований ДНК новых изолятов и степени гибридизации.

5.4. Выращивание клеток.

5.4.1. Питательные среды и условия культивирования.

5.4.2. Получение препаратов вегететивных клеток и спор

B.subtilis и нового вида B.carboniphilus.

5.5. Получение ферментных препаратов и определение белка в них.

5.5.1. Получение препаратов мембран из клеток Е. coli.

5.5.2. Получение препаратов мембран из клеток Salmonella.

5.5.3. Получение препаратов «растворимых» гликозил-трансфераз из клеток Salmonella.

5.6. Определение содержания пенициллин-связывающих протеинов в мембранах.7 В

5.7. Реактивы и аналитическая техника.

• Коммерческие препараты ферментов и тест-системы для определения их активности.

• Антибиотики.

• Радиоактивные и нерадиоактивные нуклеотидсахара.

• Полипренилфосфаты и их производные.

• Углеродсодержащие соединения.

• Микроскопирование.

• Выявление радиоактивных веществ.

• Хроматография на бумаге.

• Электрофорез на бумаге.

• Электрофорез в SDS/полиакриламидном геле.

• Гель-фильтрация на колонках (1X40 см) с сефадексами.

• Хроматография на пластинках в тонком слое закреплённого силикагеля.

• Хроматография на пластинах в тонком слое целлюлозы.

5.8. Методика проведения ферментативного синтеза пептидогликана in vitro из [14С]1ЮРМигНАс-пентапептида и UDPGlcNAc.

5.9. Методика проведения ферментативных реакций для изучения биосинтеза О-специфических полисахаридов Salmonella.

5.10. Идентификация полипрешшпирофосфатолигосахаридов.

5.10.1. Фенольная обработка.

5.10.2. Обработка щелочной фосфатазой.

5.10.3. Кислотный гидролиз.

5.10.4. Мягкая щелочная обработка.

5.11. Получение три- и тетрасахаридных производных полипренилпирофосфата и их полимеризация.

5.12. Исследование способности синтетических липидных производных служить донором остатков глюкозы.

5.13. Методика выявления участия акустических сигналов в межклеточной коммуникации бактериальных клеток.

5.13.1. Аппаратура для определения чувствительности В. carboniphi-lus к внешним звуковым воздействиям.

5.13.2. Аппаратура для выявления звуковых волн, производимых B.subtilis.

Результаты исследований

Глава 6. Изучение процесса биосинтеза пептидогликана в трансформированных генно-инженерным путем клетках Escherichia coli.

6.1. Исследование совместного участия РВР2 и RodA протеинов в синтезе пептидогликана.

6.2. Изучение образования пептидогликана и липидсвязанных предшественников в мембранах рекомбинантных клеток E.coli, суперпродуцентов РВРЗ и FtsW.

6.3. Реконструирование системы РВРЗ - FtsW in vitro.

Глава 7. Изучение биосинтеза О-специфических полисахаридов сальмонелл серологических групп Е4 {Salmonella senftenberg), С2 (Salmonella newport) и С3 {Salmonella kentucky) с использованием синтетических полипренилфосфатсахаров.

7.1. Исследование процесса биосинтеза повторяющегося звена основной цепи полисахарида S. senftenberg — маннозил-рамнозил-галактозы.

7.2. Исследование процесса сборки повторяющихся звеньев основных цепей полисахаридов S. newport и S. kentucky.

7.3. Исследование процесса глюкозилирования О-специфических полисахаридов клеток S. senftenberg, S.newport и S. kentucky.

7.3.1. Идентификация полипренилфосфатглзокозы.

7.3.2. Выявление участия полипренилмонофосфатглюкозы в реакциях глюкозилирования олигосахаридных звеньев.

7.3.3. Определение степени специфичности мембраносвязанных ферментов, катализирущих глюкозилирование, к структуре липидного остатка.

7.4. Осуществление ферментативной полимеризации олигосахаридных звеньев с препаратами мембран S. senftenberg, S. newport и S. kentucky.

Глава 8. Изучение регуляторного влияния некоторых экзогенных физико-химических факторов на рост и развитие бактериальных клеток.

8.1. Изолирование бактериальных штаммов, нуждающихся в присутствии углеродсодержащих материалов для роста клеток в стрессовых условиях.

8.2. Описание нового вида бактерии рода Bacillus - B.carboniphilus.

8.2.1. Фенотипические свойства новых изолятов.

8.2.2. Генотипическая характеристика новых изолятов.

8.3. Изучение влияния углеродсодержащих материалов на рост и развитие бактериальных клеток в условиях солевого и температурного стрессов.

8.3.1. Выявление ростостимулирующего эффекта препаратов графита на клетки B.carboniphilus в стрессовых условиях.

8.3.2. Изучение "дистантного" эффекта графита на образование бактериальных колоний.

8.3.3. Стимулирующее влияние графита на рост термофильной бактерии В. stearothermophilus в условиях низкотемпературного стресса.

8.4. Изучение механизма действия углеродсодержащих материалов на бактериальные клетки.

8.5. Изучение росторегулирующего влияния бактериальных клеток на соседние клетки гомологичных и гетерологичных видов в стрессовых условиях.

8.6. Выявление участия звуковых и ультразвуковых колебаний в межклеточной коммуникации и определение их частотных характеристик.

8.6.1. Изучение влияния внешних акустических колебаний на формирование колоний B.carboniphilus в условиях солевого и высокотемпературного стрессов.

8.6.2. Выявление звуковых и ультразвуковых колебаний, испускаемых клетками B.subtilis, и определение их частотных характеристик.

Обсуждение.

1. Создание и обоснование научно-методической базы комплексного изучения факторов эндогенной и экзогенной природы как регуляторов биосинтетических, ростовых и коммуникационных процессов бактериальных клеток.

2. Регуляторная роль RodA и FtsW протеинов - продуктов ftsl и ftsW генов E.coli - в функционировании РВР2 и РВРЗ протеинов при образовании бактериального пептидогликана.

3. Биосинтез О-специфических полисахаридов Salmonella, относящихся к серологическим группам С2, Сз и Е4 и возможность его экзогенной регуляции.

4. Новый вид экзогенной регуляции роста бактериальных клеток под действием внешних акустических сигналов.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биотехнологические и биохимические пути изучения механизмов регуляции биосинтетических, ростовых и коммуникационных процессов бактериальных клеток»

Исследование молекулярных основ взаимодействия живых клеток друг с другом и окружающей средой является в настоящее время одной из важнейших проблем биохимии, биотехнологии, биохимической экологии. Её решение представляет не только теоретический интерес, но и большую практическую значимость, т.к. имеет непосредственное отношение к таким явлениям, как иммунитет, чувствительность клеток к лекарственным препаратам, злокачественный рост клеток, межклеточная коммуникация и т.д.

Изучение биополимеров, находящихся на поверхности бактериальных клеток, в том числе механизмов их биосинтеза и его регуляции, является составной частью этой проблемы (Goldman R.C., Branstrom А., 1999).

В настоящее время надёжно установлена основополагающая роль поверхностных структур в процессах жизнедеятельности бактериальных клеток, в осуществлении межклеточных взаимодействий. В отличие от эукариотических, где большинство функций выполняются клеточными органеллами, в прокариотических клетках основная функциональная нагрузка ложится на бактериальную клеточную поверхность, состоящую из плазматической мембраны и покрывающей её снаружи клеточной стенки.

Наружный слой клеточной поверхности - клеточная стенка - состоит из гликоконьюгатов (Park J.T., 1996; Czaja J. et al., 2000), которые в комбинации с ионами металлов и плазматическими мембранами, связанными с их коровыми последовательностями, могут обеспечивать стабильность, придавая механическую прочность клеточной поверхности. Среди многих компонентов (тейхоевые и тейхуроновые кислоты, гликолипиды, липополисахариды и др.) важнейшую роль в организации функционирования клеточной поверхности играют базальные структуры бактериальной клеточной стенки - пептидогликаны, присутствующие в составе клеточных стенок как у грамотрицательных, так и грамположительных бактерий. Эти полимеры образуют не только жёсткий каркас, окружающий плазматические мембраны, придавая клетке физико-химическую стабильность и механическую прочность, но и играют ведущую роль в процессах элонгации и деления клетки (Koch A.L., 1998), в связи с чем изучение механизма их биосинтеза важно не только с точки зрения исследования самого процесса их образования, но и для более глубокого понимания сложных механизмов роста и деления бактериальных клеток в целом и выявления путей их регуляции (как эндогенных, так и экзогенных) с использованием современных методов биотехнологии, в том числе генно-инженерной трансформации бактериальных штаммов.

Помимо несомненного теоретического интереса, изучение путей образования, функционирования бактериальных пептидогликанов и других гликоконьюгатов и их регуляции имеет важное прикладное значение.

Практическая значимость исследования механизма биосинтеза пептидогликана связан с тем, что антибиотики пенициллинового ряда ингибируют транспептидазную реакцию при образовании пептидогликана септы, подавляя тем самым синтез клеточных стенок, в результате чего бактерии погибают. Именно на этом принципе основан механизм действия пенициллина и некоторых других антибиотиков (Busse W.D., Zeiler HJ., Labischinski H., 1997).

С другой стороны, многие компоненты клеточных стенок и связанные с ними вещества определяют патогенность бактерий. Сравнительно недавно была выявлена биологическая активность пептидогликана грамположительных и грамотрицательных бактерий в формировании их патогенности (Sriskandan S., Cohen J.,1999), однако главными антигенами бактериальных клеток служат комплексы полисахаридов с белками и липидами (Wiuff С. et al., 2000). В кишечной группе бактерий, среди которых находятся возбудители сальмонеллёза, дизентерии, тифа и др., поверхностными антигенами служат специфические полисахариды, связанные с липидами, получившие название О-антигенов. Эти гликоконьюгаты обеспечивают патогенные свойства бактериальных клеток (вирулентность), являясь эндотоксинами. Более того, их тонкая структура обусловливает специфичность взаимодействия микроорганизмов с окружающей средой: они ответственны за рецепцию фагов, бактериоцинов; за межклеточные взаимодействия, что и определяет в целом теоретическую и практическую значимость изучения путей биосинтеза бактериальных О-антигенов и его регуляции.

Определённые успехи в поиске механизмов биосинтеза пептидогликанов и О-специфических полисахаридов были получены после открытия липидсвязанных олигосахаридов, участвующих в этих процессах в качестве интермедиатов (Mankowski Т. et aL, 1977; Shibaev V.N., 1986; Matsuhashi M. et al., 1990). Дальнейший прогресс был достигнут после разработки биотехнологических методов генноинженерной трансформации баш-ериальных клеток с использованием технологии рекомбинантных ДНК, в результате чего прояснилась роль ряда индивидуальных протеинов в ходе биосинтеза пептидогликанов. Однако общая картина биосинтеза данных гликоконьюгатов и их липидсвязанных предшественников и его регуляции, также как и определение роли этих биополимеров в процессах роста и деления бактериальных клеток, требуют дальнейшего изучения с использованием комплекса современных методов биотехнологии (в том числе генной инженерии), биохимии, микробиологии и т.д., что и определяет актуальность данной работы.

В качестве объектов исследования при изучении механизмов биосинтеза пептидогликанов и О-специфических полисахаридов (О-антигенов) бактериальных клеточных стенок и их регуляции, нами были выбраны классические представители кишечной группы грамотрицательных энтеробактерий, относящиеся к родам Escherichia и Salmonella, обладающим близким генетическим родством (семейство Enterobacteriaceae, подгруппа I), обитающие в кишечном тракте человека и других позвоночных животных. E.coli (род Escherichia) - является компонентом нормальной кишечной микрофлоры и вызывает заболевания лишь в исключительных случаях. Род Salmonella включает патогенные виды бактерий, вызывающие кишечные заболевания у человека и животных. Таким образом, выбранная в качестве объекта исследований группа микроорганизмов является актуальной в эпидемиологическом аспекте, а изучение биохимии этих организмов имеет определенное теоретическое и практическое значение.

Среди грамотрицательных бактерий структура пептидогликанов клеточной стенки наиболее полно изучена для клеток E.coli. Более того, анализ генов, участвующих в образовании пептидогликанов, проведён в большей степени у E.coli, чем у других бактерий (Matsuhashi М. et al., 1990). В частности, для клеток Salmonella только гены, ответственные за образование О- и Н-антигенов, изучены достаточно хорошо.

В связи с вышеизложенным, биосинтез пептидогликанов исследовался нами в клетках E.coli. Мы предполагали, что анализ генов, вовлекаемых в данный процесс, и их белковых продуктов может внести ясность в понимание механизма клеточного роста и деления, сопровождаемого синтезом пептидогликана, и его регуляции. Как показали результаты проведённого исследования, выбранные экспериментальные подходы оказались удачными.

При изучении биосинтеза О-специфических полисахаридов мы использовали клетки Salmonella, относящиеся к серологическим группам Е4 (,S.senftenberg), С2 (S.newport) и СЗ (S.kentucky\ для которых механизм образования О-антигенов ранее не изучался.

В связи с отмеченной практической значимостью исследований поверхностных структур бактериальных клеток, особую актуальность приобретают вопросы, связанные с регуляцией (эндо- и экзогенной) их биосинтезов и, в более широком аспекте, регуляцией ростовых и коммуникационных процессов у микроорганизмов, выявлением новых регуляторных факторов различной природы. Несмотря на большое количество исследований, посвященных данной проблеме, чёткие представления на этот счёт в литературе отсутствуют, более того, для целого ряда биологических феноменов, в том числе роста клеток и их дифференциации, адекватные механизмы регуляции до сих пор не выявлены (Noms V. et al., 1996; Voorst F., Kruijff В., 2000). Для разностороннего управления функционированием организма, вероятно, необходимо множество отличающихся друг от друга сигналов, в том числе биохимической и физической природы. Нами был изучен комплекс физико-химических регуляторных факторов, что позволило получить принципиально новые данные о механизмах регуляторного действия углеродсодержащих материалов, а также выявить новый вид межклеточной регуляции ростовых процессов в бактериальных клетках, основанный на действии на соседние клетки физических сигналов, вероятно, акустической природы.

Таким образом, актуальность работы заключается в создании научно-методической основы изучения механизмов биосинтеза важнейших гликоконьюгатов бактериальных клеточных стенок (пептидогликанов и О-специфических полисахаридов) и их регуляции, позволившей получить более детальные представления о протекании этих процессов и выявить новый вид регуляции ростовых и коммуникационных процессов в форме акустических сигналов («биозвук»).

Полученные данные могут быть использованы для выявления новых механизмов бактериальной резистентности; в связи с поиском специфических «мишеней» для разработки новых антибиотиков, при получении которых широко используются новые биотехнологические (генно-инженерные) подходы; для терапии заболеваний, связанных с нарушением клеточного цикла, а также для дальнейшего развития антибиотикотерапии в сочетании с акустическими воздействиями; в биотехнологии для разработки практических методов культивирования изолированных клеток (возможно в стрессовых условиях); для осуществления биотехнологической очистки воды и т.д.

Цель и задачи исследования

Целью настоящей работы явилось изучение влияния эндогенных и экзогенных регуляторных факторов на функционирование комплексных ферментных систем биосинтеза пептидогликанов и О-антигенных полисахаридов бактериальных клеточных стенок, ответственных за ростовые и коммуникационные процессы, у представителей кишечной группы грамотрицательных энтеробактерий, относящихся к родам Escherichia и Salmonella (семейство Enterobacteriaceae, подгруппа I), и выявление новых факторов регуляции этих процессов. Были поставлены следующие задачи: создать научно-методическую основу комплексного изучения факторов эндогенной и экзогенной природы как регуляторов метаболических процессов, происходящих в бактериальных клетках; => получить трансформированные методами генной инженерии рекомбинантные штаммы Е. coli - суперпродуценты протеинов и их систем, участвующих в биосинтезе пептидогликана при росте и делении бактериальных клеток: РВР2; RodA; РВР2 - RodA; РВРЗ; FtsW;. РВРЗ -FtsW; изучить совместное участие РВР2 и RodA; а также РВРЗ и FtsW -комплексных систем в процессе биосинтеза пептидогликана и его регуляции; изучить закономерности биосинтеза О-специфических полисахаридов, ответственных за взаимодействия клеток в иммунных процессах, и выявить роль полипренилмонофосфатглзокозы в реакциях глюкозилирования олигосахаридных звеньев сальмонелл, относящихся к серологическим группам Е4 (S. senftenberg% С2 (S. newport) и СЗ (S. kentucky), с участием экзогенных полипренилфосфатов; изучить степень специфичности мембраносвязанных ферментов изучаемых штаммов сальмонелл, катализирующих глюкозшшрование основных О-специфических цепей, к структуре липидного остатка; оценить возможность полимеризации олигосахаридных звеньев, синтезированных in vitro с растаем экзогенных полипренилфосфатов и препаратов мембран из клеток S. senftenberg, S. newport и S. kentucky; исследовать регуляторное влияние углеродсодержащих материалов, таких как графит и активированный уголь, на жизнедеятельность бактерий в стрессовых условиях; провести фенотипическое, биохимическое и генетическое изучение вновь изолированных бактериальных штаммов, чувствительных к присутствию углеродсодержащих материалов в питательной среде; исследовать влияние внешних звуковых и ультразвуковых сигналов на формирование колоний B.carboniphilus в условиях солевого и высокотемпературного стрессов; определить частотные характеристики звуковых и ультразвуковых колебаний, испускаемые клетками B.subtilis.

Экспериментальная часть работы выполнялась в лаборатории химии углеводов Института органической химии им. Зелинского (г.Москва), в лаборатории молекулярной биологии Института прикладной микробиологии Токийского университета (г.ТокиоДпония) и в отделении биохимии и биотехнологии Токайского университета (г.НумазуДпония), а также на кафедре биохимии и биотехнологии Тверского государственного университета.

Научная новизна

Разработаны научно-методические основы для комплексного изучения эндогенных и экзогенных факторов, участвующих в регуляции различных метаболических процессов в бактериальных клетках.

Методами генетической инженерии сконструированы штаммы Е. coli JST9753/ pHS506 (содержащие РВР2 и RodA); JST9753/ pHS503 (содержащие РВР2); JST9753/ pHS504 (содержащие RodA); а также штаммы Е. coli JST975/ pIWA (содержащие РВРЗ и FtsW); JST975/pI2 (содержащие РВРЗ) и JST975/pW2 (содержащие FtsW). Впервые проведено успешное реконструирование системы РВРЗ - FtsW в мембранах клеток Е. coli in vitro.

С использованием разработанных нами методических подходов изучена регуляторная роль интегральных мембранных протеинов - RodA и FtsW - в процессе биосинтеза бактериальных пептидогликанов и показано, что эти белковые факторы необходимы для проявления ферментативных активностей РВР2 и РВРЗ, участвующих на заключительных стадиях синтеза, способствуя, вероятно, повышенному образованию липидсвязанных предшественников и их активному транспорту с внутренней стороны мембраны к наружному акцептору повторяющихся звеньев.

Проведённые исследования с использованием комплекса микробиологических, биохимических и аналитических методов позволили впервые продемонстрировать in vitro образование полипренилпирофосфат-олигосахаридов с углеводными звеньями, соответствующими структуре основной цепи О-специфических полисахаридов клеток S.newport (серологическая группа С2), S.kentucky (серологическая группа Сз) и S.senftenberg (серологическая группа Е4), для которых путь биосинтеза О-антигенного полисахарида ранее не изучался, а также осуществить их полимеризацию.

Показана принципиальная возможность эффективной замены эндогенного бактериального полипренилфосфата (бактопренилфосфата) на синтетический растительный фосфат морапренола (морапренилфосфат) в качестве полипренильного акцептора и донора моносахаридных остатков в биосинтетических реакциях с ферментными системами растворимых гликозилтрансфераз из клеток используемых штаммов сальмонелл. Впервые установлено, что реакции глюкозилирования олигосахаридных звеньев, т.е. построение разветвлений основных цепей О-антигенных полисахаридов, имеют место до осуществления полимеризации, что позволяет рассматривать включение остатка глюкозы в олигосахаридные предшественники как одну из стадий биосинтеза повторяющегося звена полисахарида, а не как модификацию растущей или уже построенной полимерной цепи. Исследована и выявлена довольно широкая субстратная специфичность мембраносвязанных ферментов, катализирующих глюкозилирование основного звена О-специфического полисахарида изученных штаммов сальмонелл с участием полипренилмонофосфатглюкозы в качестве донора остатков глюкозы, к структуре липидного остатка.

Получены принципиально новые данные о механизме регуляторного действия углеродсодержащих материалов, таких как графит и активированный уголь, на рост бактерий в стрессовых условиях. Впервые изолированы бактерии, нуждающиеся в присутствии графита или активированного угля для роста в условиях солевого и высокотемпературного стрессов, идентифицированные нами на основании результатов морфологических, биохимических и генетических исследований как новый вид рода Bacillus - В. carboniphilus (от лат.- "любящий уголь").

Выявлен новый тип межклеточной регуляции ростовых процессов в бактериальных клетках, основанный на действии на соседние клетки физических сигналов, вероятно, акустической природы. Впервые зафиксированы звуковые и ультразвуковые колебания, производимые клетками B.subtilis в диапазоне частот между 8 и 43 кГц, совпадающие с диапазонами частот акустических колебаний, индуцирующих образование колоний В. carboniphilus Кб в стрессовых условиях (6-10, 18-22 и 28-38 кГц), что также было нами продемонстрировано.

Использование в экспериментах суперчувствительной аппаратуры наряду с применением широко апробированных методов математической обработки полученных данных позволяет говорить об адекватности оценки исследуемых физико-биологических процессов в бактериальных клетках.

Научно-практическая значимость

На основе комплексного использования биотехнологических (генно-инженерных), микробиологических, биохимических и аналитических позволяющая проводить исследования биосинтетических процессов, протекающих в объектах не только микробного, но и, возможно, любого другого происхождения in vitro.

Полученные в работе данные являются новой информацией для расшифровки механизмов регуляции метаболических процессов, приводящих к образованию в бактериальных клетках важнейших гликоконьюгатов - пептидогликанов и О-антигенных полисахаридов, участвующих в осуществлении процессов роста и деления клеток, ответственных за взаимодействия клеток в иммунных процессах.

Особую практическую значимость для решения проблем бактериального роста, антибиотикорезистентности, имеют результаты исследования механизма биосинтеза пептидогликанов и его регуляции, в частности участия мембранных протеинов РВР2 и RodA; а также РВРЗ и FtsW в этих процессах.

Результаты исследования по замене эндогенных полипренилфосфатов на экзогенные в качестве доноров или акцепторов моносахаридных остатков в процессе биосинтеза О-специфических полисахаридов сальмонелл имеют важное значение для теории и практики химико - ферментативного синтеза бактериальных О-антигенов in vitro. Полученные данные, в частности, позволяют использовать в этом процессе растительный моралренилфосфат в качестве эффективной замены бактериального - бактопренилфосфата.

Исследование регуляторной роли экзогенных углеродсодержащих соединений, в частности, разных форм графита и активированного угля привели к обнаружению нового вида углефильной бактерии рода Bacillus, -B.carboniphilus, нуждающейся в присутствии углеродсодержащих соединений для роста в стрессовых условиях. Разработанный нами научно-методический подход позволил выявить ряд других бактерий, на жизнедеятельность которых сильное влияние оказывает углерод (В. firmus, В. pumilus, Exiguobacterium aurantiacum, Pseudomonas sp.). Углефильные бактерии могут найти самое широкое практическое применение в различных отраслях биологии, биотехнологии, биохимической экологии. Изолированные нами штаммы B.carboniphilus с высокой эффективностью использованы в системах для очистки воды после предварительного адсорбирования клеток на углеродных волокнах (Отани С., 2000).

Выявлен новый тип межклеточной регуляции ростовых процессов, основанный на действии на соседние клетки физических сигналов, вероятно, акустической природы («биозвук»), и определены их частотные характеристики. В связи с обнаружением нового типа регуляции, результаты нашей работы могут быть использованы в различных отраслях биотехнологии и медицины, в частности, для интенсификации биотехнологических процессов, для разработки практических методов культивирования изолированных клеток (в обычных и стрессовых условиях); для терапии заболеваний, связанных с нарушением клеточного цикла, а также для дальнейшего развития антибиотикотерапии в сочетании с акустическими воздействиями. Выявленные акустические эффекты могут быть использованы и для объяснения механизма дезинтегрирующего действия ультразвука высокой интенсивности на бактериальные клетки с участием явления резонанса. Результаты проведённого нами исследования могут способствовать развитию нового направления биотехнологии, прикладной биохимии и биофизики, связанного с изучением биологического действия акустических колебаний, применением новых материалов.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Панкрушина, Алла Николаевна

ВЫВОДЫ

1. На основе сочетания методов генетической инженерии, биохимических и аналитических физико-химических подходов разработана научно-методическая основа комплексного изучения факторов эндогенной и экзогенной природы как регуляторов метаболических и коммуникационных процессов бактериальных клеток.

2. Получены рекомбинантные клетки мутантных штаммов Е. coli (РВР1В-), образующие в результате проведённых генно-инженерных модификаций повышенные количества индивидуальных пептидогликансинтезирующих ферментов или ферментных систем: РВР2 (Е. coli JST9753/pHS503); RodA (Е. coli JST9753/pHS504); PBP2 - RodA (E. coli JST9753/pHS506); PBP3 (E.coli JST975/pl2); FtsW iE.coli JST975/pW2);. PBP3 - FtsW (E. coli JST975/ pIWA). Показано образование пептидогликана in vitro с мембранными препаратами из рекомбинантных клеток Е. coli JST9753/pHS506 суперпродуцентов РВР2 - Яос1А или рекомбинантных клеток Е. соЫ 18Т975/ рША - суперпродуцентов РВРЗ - но не индивидуальных протеинов в отдельности.

3. Изучена регуляторная роль ЛобА и FtsW протеинов в процессе биосинтеза пептидогликана. Установлено, что присутствие ЯоёА протеина необходимо для проявления пептидогликансинтезирующей активности РВР2, тогда как для проявления энзиматической активности РВРЗ требуется присутствие Иб^^У протеина. Обнаружено увеличение синтеза липидсвязанных предшественников при совместном функционировании РВРЗ- FtsW. Вероятно, эта комплексная система контролирует образование липидсвязанных предшественников, с чем связано наращивание повторяющихся звеньев пептидогликана в процессе его биосинтеза в клетках Е. соИ.

4. Впервые с участием экзогенных полипренилфосфатов изучены закономерности биосинтеза О-специфических полисахаридов сальмонелл серологических групп Е4 (& вегфепЬе^), С2 (5. печгроП) и СЗ (Я. кеШиску). Показана возможность эффективной замены эндогенного бактериального бактопренилфосфата на экзогенный синтетический растительный морапренилфосфат в качестве полипренильного акцептора моно- и олигосахаридных звеньев в изученных процессах, что свидетельствует о широкой субстратной специфичности соответствующих гликозилтрансфераз к структуре липидных акцепторов остатков Сахаров.

5. Установлено, что процесс глюкозилирования О-антигенных полисахаридов & зетфепЬе^, Б. печ>роН и & кеШиску протекает через образование полилренилмонофосфатглюкозы, с которой остаток глюкозы переносится на образующийся полипренилпирофосфатолигосахарид. Акцепторами в данной реакции могут служить полипренильные производные ди- и трисахаридов для & яегфепЬег&, и три- и тетрасахаридов для Я. пеууроП и 5. кепШску. Показано, что включение остатков глюкозы в разветвления основных углеводных цепей происходит до их полимеризации, в связи с чем этап глюкозилирования может быть представлен как один из последовательных шагов сборки повторяющихся олигосахаридных звеньев, а не как модификация уже синтезированных основных цепей О-специфических полисахаридов.

6. Выявлена широкая субстратная специфичность ферментной системы S. senftenberg, катализирующей реакцию глюкозилирования в процессе синтеза О-специфического антигенного полисахарида. Показано, что производные нормальных алифатических спиртов СЮ—С16, пергидроретинола и моралренола - С50—СбО-полипренола из листьев шелковицы, могут заменить обычный субстрат в реакции глюкозилирования полипренолпирофосфаттрисахарида; однако их эффективность падает при изменении природы радикала в следующем ряду: морапренил->пергидроретинил-гексадецил>пентадецил>три-децил>децил.

7. Изучена возможность полимеризации олигосахаридных звеньев, синтезированных in vitro с участием экзогенных полипренилфосфатов и препаратов мембран S. senftenberg, S.newport и S. kentucky. Показано, что препарат мембран из клеток S. senftenberg катализирует полимеризацию полипренилпирофосфат-тетрасахаридов до полисахаридов с м.м. 8000 Да; препараты мембран из клеток S.newport и S.kentucky катализируют полимеризацию пентасахаридных производных до полисахаридов с м.м. 4500 Да и 2000 Да.

8. Исследовано регуляторное влияние углеродсодержащих материалов на рост бактерий в стрессовых условиях. Впервые изолированы бактерии, на жизнедеятельность которых сильное влияние оказывает углерод (углефильные бактерии). Таксономическое изучение показало, что анализируемые изоляты являются членами нового вида рода Bacillus, для которого нами предложено название Bacillus carboniphilus (от лат.-"любящий уголь").

9. Предложен гипотетический механизм биологического действия углерода и углеродсодержащих материалов путем конверсии внешней энергии, вероятнее всего электромагнитной природы, после чего трансформированная энергия (возможно в форме акустических волн) индуцирует рост бактериальных клеток в стрессовых условиях.

10. Впервые выявлен новый вид межклеточной коммуникации через испускаемые и воспринимаемые клетками акустические сигналы («биозвук», «Ыозотс»), посредством которых клетки взаимодействуют друг с другом. Использование суперчувствительной аппаратуры наряду с применением широко апробированных методов компьютерной обработки записываемых акустических сигналов позволяет говорить об адекватности оценки исследуемых физико-биологических процессов.

11. Впервые зафиксированы звуковые и ультразвуковые колебания, испускаемые клетками В.виЫШз в диапазоне частот между 8 и 43 кГц. Изучение их частотных характеристик показало, что спектр этих колебаний состоит из комплекса волн, образующих широкие и узкие пики в областях частот 8,5; 19; 29; 32 и 37 кГц.

12. Обнаружено, что звуковые и ультразвуковые волны в диапазонах частот 610 кГц, 18-22 кГц и 28-38 кГц индуцируют формирование колоний В.сагЬотрИЦш в стрессовых условиях с эффективностью 12%, 16% и 22% соответственно. Сравнение выявленных диапазонов частот звуковых колебаний, индуцирующих образование колоний В.сагЬотрЫЫз в стрессовых условиях, с частотами звуковых колебаний, производимых клетками В.яиЬиШ (8,5; 19; 29; 32 и 37 кГц), обнаружило сходство их спектральных характеристик, что может быть одним из факторов коммуникационных взаимодействий физической природы.

219

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Панкрушина, Алла Николаевна, 2002 год

1. Бациллы. Генетика и биотехнология. Под ред. Харвуда К. М.: Мир, 1992.

2. Вергунова Г.И., Глуходед И.С., Данилов Л.Л., Елисеева Г.И., Кочетков Н.К., Троицкий М.Ф., Усов А.И., Шашков A.C., Шибаев В.Н. Структура морапренола и синтез морапренилфосфата. // Биоорган, химия. 1977. - Т.З. -№11. - С. 1484 - 1492.

3. Винников Я.А., Соколова М.М. Сорбция витального красителя волосковыми клетками кортиева органа морской свинки в условиях относительного покоя и звукового воздействия. // Докл. АН СССР. 1961. -Т.137. -№1. - С.236 - 239.

4. Вязникова М.Ю., Николаева С.С., Быков В.А. Изучение состояния воды в растительной клетке и проницаемости мембран методом ЯМР. // Боимедицинские технологии. 1995. - Вып. 2. - С.35 - 39.

5. Данилов Л.Л., Дружинина Т.Н., Шибаев В.Н., Кочетков Н.К. Химический синтез промежуточных соединений биосинтеза О-антигена Salmonella senftenberg. // Биоорган, химия. 1980. - Т.6. - № 3. - С.468 - 469.

6. Дружинина Т.Н., Панкрушина А.Н., Шибаев В.Н., Лихолат Т.В. Биосинтез растительных углеводсодержащих полимеров. II Биохимия. -1981. Т.46. - №8. - С.1145 - 1257.

7. Дружинина Т.Н., Сизова О.В., Шибаев В.Н., Рожнова С.Ш. Включение остатка паратозы в Salmonella О-специфический полисахарид, используя энзиматические реакции. // Биоорг. химия. 1990. - Т.16. - №6. - С.816

8. Дружинина Т.Н., Шибаев В.Н., Кочетков Н.К., Рожнова С.Ш., Килессо В. А. Химико-энзиматический синтез О-специфического полисахарида Salmonella newington и его модифицированных производных. // Биоорг. химия. 1984. -Т.10. -№11. - С.1548 - 1552.

9. Блинов Н.П. Основы биотехнологии. С. П.: Наука, 1995.

10. Блинов Н.П. Химическая микробиология. М.: Высшая школа, 1989.

11. Блинов Н.П. Химия микробных полисахаридов. М.: Высшая школа, 1984.

12. Жирмунский A.B. Изменение прижизненной окраски коры большого мозга мышей при действии на них сильного звука. // Докл. АН СССР. 1957. -Т.112. -№3. - С.553 - 556.

13. Иванова Т.А. О закономерностях действия ЭМИ на живые организмы и их энергетическое обеспечение. // Материалы научно-технической конференции «Пищевой белок и экология». М., 2000. - С.209 -211.

14. Книрель Ю.А., Кочетков Н.К. Структура липополисахаридов грамотрицательных бактерий. // Биохимия. 1994. - Т.59. - №12. - С. 1784 -851.

15. Мацухаши М., Эндо Ш., Такеучи С. Механизм действия углерода на микроорганизмы (яп.). // Тансо. 2000. - №94. - С.288 - 293.

16. Машко С.В. Оптимизация экспрессии чужеродных генов в клетках

17. Escherichia coli. II В кн. Генетика промышленнх микроорганизмов и биотехнология. Под ред. Дебабова В.Г., М.: Наука. 1990. - С.220 - 239.

18. Мейкелл Дж., Мейкелл Э. Экспериментальная микробиология. М.: Мир, 1967.

19. Молекулярные и клеточные аспекты биотехнологии. Под ред. Инге -Вечтомова С.Г. Л.: Наука, 1986.

20. Насонов Д.Н. Местная реакция протоплазмы и распространяющееся возбуждение. М., 1959.

21. Насонов Д.Н., Равдоник К.С. Прямое влияние слышимых звуков на нервные клетки изолированных спинномозговых ганглиев кроликов. // Докл. АН СССР. 1950. - Т.71. - №5. - С.985 - 987.

22. Насонов Д.Н., Розенталь Д.Л. Прямое влияние слышимых звуков на эпителий почечных канальцев лягушки. // Докл. АН СССР. 1950. - Т.71. -№6. - С. 1163 - 1166.

23. Наумов A.B., Шабалин Ю.А., Вагабов В.М., Кулаев И.С. Два пути дефосфорилирования долихилдифосфата в дрожжах. // Биохимия. 1985. -Т.50. - С.652 - 658.

24. Рыбчин В.Н. Основы генетической инженерии. Минск, 1986.

25. Себякин Ю.Л., Волкова Л.В., Маркин B.C., Евстигнеева Р.П. Алкилфосфаты ß-Д-глюкопиранозы новый вид детергентов анионного типа. //Биоорган, химия. - 1979. -Т.5. -№12. - С.1816 - 1818.

26. Сугио Отани. Применение углеродных волокон для очистки вод (яп.) // Тансо. 2000. - №194. - С.276 - 287.

27. Тетц В.В., Рыбальченко О.В., Савкова Г.А. Взаимодействия между клетками в бактериальных колониях. // Ж. Микроб. Эпидем. Иммунобиол. -1991. Т.2. - С.7 - 13.

28. Шакулов P.C. Алармоны регуляторы метаболизма бактерий. И В кн. Генетика промышленнх микроорганизмов и биотехнология. - М.: Наука, -1990.-С.187-200.

29. Шибаев В.Н., Данилов Л.Л., Чекунчиков В.Н., Кусов Ю.Ю., Кочетков

30. Н.К. Новый синтез полипренилпирофосфатсахаров. // Биоорган, химия. -1979. -Т.5. -№2. С.308 - 309.

31. Шибаев В.Н., Дружинина Т.Н., Попова А.Н., Кочетков Н.К., Рожнова С.Ш., Килессо В.А. Биосинтез О-специфического полисахарида Salmonella senftenberg. //Биоорган, химия. 1979. -Т.5.-№7. - С.1071 - 1082.

32. Щелкунов С.Н. Клонирование генов. Новосибирск: Наука, 1986.

33. Уша Б.В., Сапфиров С.Г., Иванова Т.А. О механизмах генерации клеткой КВЧ-колебаний. // М.: Материалы научно-технической конференции «Пищевой белок и экология». ~ 2000. С.208 - 209.

34. Янковский Н.К. Конструирование и анализ клонотек геномов. // В кн. Генетика промышленнх микроорганизмов и биотехнология. Под ред. Дебабова В.Г., М.: Наука. 1990. - С.200 - 219.

35. Adler J. How motile bacteria sense and respond to chemicals. It Ann N Y Acad. Sci. 1987. - V.510. - P.95 - 97.

36. Atrih A., Bâcher G., Allmaier G., Williamson M.P., Foster S.J. Analysis of peptidoglycan structure from vegetative cells of Bacillus subtilis 168 and role of PBP 5 in peptidoglycan maturation. // J. Bacteriol. 1999. - V.181. - N13. -P.3956 - 3966.

37. Atrih A., Foster S.J. The role of peptidoglycan structure and structural dynamics during endospore dormancy and germination. // Antonie Van Leeuwenhoek. 1999. - V.I5. - N4. - P.299 - 307.

38. Aurell C.A., Wistrom A.O. Critical aggregation concentrations of gramnegative bacterial lipopolysaccharides (LPS). // Biochem. Biophys. Res. Commun.- 1998. V.253. - NI. -P.119 - 123.

39. Bachmann B.J. Linkage map of Escherichia coli К 12. // Microbiol.Reviews.- 1990.-V.54.-P.130-197.

40. Baquero M. R., Bouzon M., Quintela J. C., Ayala J. A. and Moreno F. DacD, an Escherichia coli gene encoding a novel penicillin - binding protein (PBP6b) with D, D-carboxypeptidase activity. // J. Bacteriol. - 1996. - V.178. - P.7106 -7111.

41. Baumberg S. Origin of bacterial adaptation. // Nature. 1991. - V.352. -P.274.

42. Bayer M.H., Keck W. and Bayer M.E. Localization of penicillin binding protein lb in Escherichia coli: imaiunoelectron microscopy and immunotransfer studies. // J. Bacteriol. - 1990. - V.172. - P.125 - 135.

43. Beardsley T. Shocking genes. Electromagnetic fields stimulate genetic activity. // Sci. Am. 1990. - V.263. -Nl. -P.26.

44. Begg, K.J., Donachie W.D. Cell shape and division in Escherichia coli: experiments with shape and division mutants. // J. Bacteriol. 1985. - V.163. -P.615 - 622.

45. Bell A.G. On the production and reproduction of sound by light. // Am.J.Sci.Arts. 1880. - Ser.3. - V.20. -P.305 - 324.

46. Belousov L.V., Popp F.A., Kazakova N.I. Ultraweak emissions from chicken eggs and embryos: the nonadditive interaction of 2 emitters and stable nonequilibrium. // Ontogenez. 1997. - V.28. - N5. - P.377 - 388.

47. Ben Jacob E., Cohen I., Gutnick D.L. Cooperative organization of bacterial colonies: from genotype to morphotype. // Annu. Rev. Microbiol. - 1998 - V.52 -P.779 - 806.

48. Ben Jacob E., Schochet O., Tenenbaum A., Cohen I., Czirok A., Vicsek T. Generic modelling of cooperative growth patterns in bacterial colonies. // Nature. -1994. - V.368. - P.46 - 49.

49. Bermudes D., Hinkle G., Margulis L. Do prokaryotes contain microtubules? //

50. Microbiol. Rev. 1994. - V.58. - N3. - P.387 - 400.

51. Bi E. F., Lutkenhaus J. FtsZ ring structure associated with division in Escherichia coli. // Nature. 1991. - V.354. - P. 161 - 164.

52. Blumberg P.M., Strominger J.L. Interaction of penicillin with the bacterial cell: penicillin binding proteins and penicillin - sensitive enzymes. // Bacteriol. Rev. -1974.-V.38.-P.292-335.

53. Boer P.A., Cook W.R., Rothfield L.I. Bacterial cell division. it Annu. Rev. Genet. 1990. - V.24. - P.249 - 274.

54. Booth I.R., Louis P. Managing hypoosmotic stress: aquaporins and mechanosensitive channels in Escherichia coli. // Curr. Opin. Microbiol. 1999. -V.2. -N2. - P. 166 - 169.

55. Bramhill D. Bacterial cell division. // Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 1997. -V.13-P.395 -424.

56. Bramhill D., Thompson C.M. GTP dependent polymerization of Escherichia coli FtsZ protein to form tubules. // Proc. Natl. Acad. Sei. USA. - 1994. - V.91 -N13.-P.5813 - 5817.

57. Braun V. and Wolff H. The murein lipoprotein linkage in the cell wall of Escherichia coli. Ii Eur. J. Biochem. - 1970. - V. 14. - P.387 - 391.

58. Buiman L. G., Park J. T. Molecular model for elongation of the murein sacculus of Escherichia coli. // Proc. Natl. Acad. Sei. USA. 1984. - V.81. -P. 1844 - 1848.

59. Caparros M., Pisabairo A.G., De Pedro M. A. Effect of D-amino acids on structure and synthesis of peptidoglycan in Escherichia coli. // J. Bacteriol. 1992. -V.174.-P.5549-5559.

60. Cayley D.S., Guttman H.J., Record M.T. Biophysical characterization of changes in amounts and activity of escherichia coli cell and compartment waterand turgor pressure in response to osmotic stress. // Biophys. 2000. - V.78. -P. 1748 -1764.

61. Chalut C., Remy M. H., Masson J.-M. Disulfide Bridges Are Not Involved in Penicillin-Binding Protein lb Dimerization in Escherichia coli. H J. Bacteriol. -1999. - V.181. - P.2970 - 2972.

62. Chicurel M.E., Chen C.S., Ingber D.E. Cellular control hes in the balance of forces. // Curr. Opin. Cell Biol. 1998. - V. 10. - №2. - P.232-239.

63. Chopra I. Structure of bacterial surfaces. // Biochem. Soc. Trans. 1989. -V.17. -N3. -P.453 -454.

64. Clarke L., Carbon J. A colony bank containing synthetic ColEl hybrid plasmids representative of the entire E. // Coli genome. Cell 1976. - V.9. - P.91 -99.

65. Clause D., Berkeley C.W. The genus Bacillus. // In Bergey's manual of systematic bacteriology (Sneath P.H.A., Mair N.S., Sharpe M.E.@ Holt J.G., ed.), Williams@Wilkins Co., Baltimore. 1986. - V.2. -P.1105 - 1139.

66. Cook W.R., Rothfield L.I. Biogenesis of cell division sites in itsA and ftsZ filaments. //Res. Microbiol. 1991. - V.142. -P.321 -324.

67. Cook W.R., Rothfield L.I. Development of the cell division site in FtsAfilaments. //Mol. Microbiol. 1994. - V.14. -N3. -P.497-503.

68. Cook W.R., Rothfield L.I. Nucleoid independent identification of cell division sites in Escherichia coli. // J. Bacterid. - 1999. - V. 181. - N6. - P. 19001905.

69. Cooper S. Bacterial growth and division. Academic Press, Inc., San Diego, Calif.-1991.

70. Cooper S., Hsieh M.-L. and Guenther B. Mode of peptidoglycan synthesis in Salmonella typhimurium: single strand insertion. // J. Bacterid. - 1988. - V.170. -P.3509 -3512.

71. Cowan S.T. Cowan and Steel's manual for the identification of medical bacteria. 2nd ed. Cambridge University Press, Cambridge. 1974.

72. Curd H., Liu D., Reeves P.R. Relationships among the O-antigen gene clusters of Salmonella enterica groups B, Dl, D2, and D3. // J. Bacteriol. 1998. - V.180. -N4. -P.1002 -1007.

73. Czaja J., Jachymek W., Niedziela T., Lugowski C., Aldova E., Kenne L. Structural studies of the O-specific polysaccharide from plesiomonas shigelloides strain CNCTC 113/92. //Eur. J. Biochem. -2000. V.267. -N6. -P.1672 - 1679.

74. Datta A.K., Basu S., Roy N. Chemical and immunochemical studies of the O-antigen from enteropathogenic Escherichia coli 0158 hpopolysaccharide. // Carbohydr. Res. 1999. - V.322. -P.219 -227.

75. De Boer P.A., Cook W.R. and Rothfield L.I. Bacterial cell division. // Annu. Rev. Genet. 1990. - V.24. - P.249 - 274.

76. Demchick P., Koch A.L. The permeability of the wall fabric of Escherichia coli and Bacillus subtilis. Ii J. Bacteriol. 1996. - V. 178. - N3. - P.768 - 773.

77. De Pedro M.A., Quintela J.C., Holtje J.-V. and Schwarz H. Murein segregation in Escherichia coli. // J. Bacteriol. 1997. - V.179. - P.2823 - 2834.

78. Di Berardino M., Dijkstra A., Stuber D., Keck W. and Gubler M. The monofunctional glycosyltransferase of Escherichia coli is a member of a new class of peptidoglycan synthesising enzymes. // FEBS Lett. - 1996. - V.392. - P.184 -188.

79. Dijkstra A. J., Hermann F., Keck W. Cloning and controlled overexpression of the gene encoding the 35 kDa soluble lytic transglycosylase from Escherichia coli. // FEBS Lett. 1995. - V.366. - P.l 15 - 118.

80. Dijkstra A.J., Keck W. Identification of new members of the lytic transglycosylase family in Haemophilus influenzae and Escherichia coli. // Microb. DrugResist. 1996. - V.2. -P.141 - 145.

81. Dijkstra A.J., Keck W. Peptidoglycan as a barrier to transenvelope transport. // J. Bacteriol. 1996. - V.178. - P.5555 - 5562.

82. Donachie W.D. The cell cycle of Escherichia coli. // Annu. Rev. Microbiol. -1993.-V.47.-P.199-230.

83. Doull J.L., Vining L.C. Global physiological controls. // Biotechnology. 1995. V.28. P.9 63.

84. Driehuis F., de Jonge B., Nanninga N. Cross linkage and cross - linking of peptidoglycan in Escherichia coli: definition, determination, and implications. // J. Bacteriol. - 1992. - V.174. - N6. - P.2028 - 2031.

85. Eaton D., Ensign J.C. Streptomyces viridochromogenes spore germination initiated by calcium ions. // J. Bacteriol. 1980. - V.143. - N1. - P.377 - 382.

86. Ehlert K., Holtje J.V. Role of precursor translocation in coordination of mureinand phospholipid synthesis in Escherichia coli. // J. Bacteriol. 1996. - V.178. -N23P.6766 -6771.

87. Ehlert K., Holtje J.V., Templin M.F. Cloning and expression of a murein hydrolase lipoprotein from Escherichia coli. // Mol. Microbiol. 1995. - V.16. -P.761 -768.

88. Einolf C.W., Carstensen E.L. Passive electrical properties of microorganisms. V. Low frequency dielectric dispersion of bacteria. // Biophys. J. - 1973. - V.13. -Nl.-P.8-13.

89. Engel H., Smink A.J., Van Wijngaarden L., Keck W. Murein-metabolizing enzymes from Escherichia coli: existence of a second lytic transglycosylase. // J. Bacteriol. 1992. - V.174. - P.6394 - 6403.

90. Feeley J.C., Gibson R.J., Gorman G.W., Langford N.C., Rasheed J.K., Mackel D.C., Baine W.B. Charcoal yeast extract agar: primary isolation medium for Legionella pneumophila. // J.Clin.Microbiol. - 1979. - V.10. -P.437 - 441.

91. Freestone P., Grant S., Toth I., Norris V. Identification of phosphoproteins in Escherichia coli. // Mol. Microbiol. 1995. - V.15. - N3. - P.573 - 580.

92. Freestone P., Grant S., Trinei M., Onoda T., Norris V. Protein phosphoiylationin Escherichia coli L. // Microbiology. 1998. - V.144. - N12. - P.3289 - 3295.

93. Freestone P., Nystrom T., Trinei M., Norris V. The universal stress protein, UspA, of Escherichia coli is phosphorylated in response to stasis. // J. Mol. Biol. -1997. V.274.-N3.-P.318 - 324.

94. Ghuysen J.-M. Penicillin-binding proteins wall peptidoglycan assembly and resistance to penicillinfacts, doubts and hopes. // Int. J. Antimicrob. 1997. - V.8. -P.45-60.

95. Ghuysen J.-M. Serine beta lactamases and penicillin - binding proteins. // Annu. Rev. Microbiol. - 1991. - V.45. - P.37 - 67.

96. Glass V., Kennet S.J. The effect of various forms of particulate carbon on the growth of the Gonococcus and Meningococcus. // J.Pathol. Bacteriol. 1939. -V.49. -P.125 -133.

97. Glauner B. and Holtje J.-V. Growth pattern of the murein sacculus of Escherichia coli. // J. Biol. Chem. 1990. - V.265. - P.18988 - 18996.

98. Glauner B., Holtje J.-V. and Schwarz U. The composition of the murein of Escherichia coli. II J. Biol. Chem. 1988. - V.263. - P.10088 - 10095.

99. Glauner B. Separation and quantification of muropeptides with highperformance liquid chromatography. // Anal. Biochem. 1988. - V.172. - P.451 -464.

100. Goffin C., Ghuysen J.M. Multinodular penicillin-binding proteins: an enigmatic family of orthologs and paralogs. // Microbiol. Mol. Biol. Rev. 1998. -V.62.-N4.-P.1079 -1093.

101. Goodell E.W. and Higgins C.F. Uptake of cell wall peptides by Salmonella typhimurium and Escherichia coli. // J. Bacteriol. 1987. - V.169. - P.3861 -3865.

102. Goldman R.C., Branstrom A. Targeting cell wall synthesis and assembly in microbes: similarities and contrasts between bacteria and fungi. // Curr. Pharm. Des. 1999. - V.5. -N7. - P.473 - 501.

103. Goldman R.C., Hunt F. Mechanism of O-antigen distribution in lipopolysaccharide. //J. Bacterid. 1990. - V.172. -N9. -P.5352 - 5359.

104. Gollop N., March P.E. Localization of the membrane binding sites of Era in Escherichia coli. // Res Microbiol. 1991. - V.142. - N2. - P.301 - 307.

105. Gordon R.E., Haynes W.C., Pang C.H. The genus Bacillus. Agricalture Handbook no.427. U.S. Department of Agriculture, Washington. 1973.

106. Gray K.M. Intercellular communication and group behavior in bacteria. // Trends Microbiol. 1997. - V.5. - N5. - P.184 - 188.

107. Grundler W., Kaiser F., Keilmann F., Walleczek J. Mechanisms of electromagnetic interaction with cellular systems. // Naturwissenschaften. 1992. -V.79.-N12-P.551 - 559.

108. Grundler W., Keilmann F., Frolich H. Resonant growth rate response of yeast cells irradiated by weak microwaves. // PhysXett. 1977. - V.62A. - P.463 - 466.

109. Grundler W., Keilmann F., Putterlik P. Resonant like dependence of yeast growth rate on microwave frequencies. // Br. J. Cancer Suppl. - 1982. - V.45. -N5. -P.206 -208.

110. Grundler W., Keilmann F. Resonant microwave effect on locally fixed yeast microcolonies. // Z. Naturforsch. 1989. - V.44. - P.863 - 866.

111. Guzman L.M., Weiss D.S., Beckwith J. Domain swapping analysis of FtsI, FtsL, and FtsQ, bitopic membrane proteins essential for cell division in Escherichia coli. // J. Bacteriol. - 1997. - V.179. - N16. - P.5094 - 5103.

112. Hale C.A., de Boer P.A. Recruitment of ZipA to the septal ring of Escherichia coli is dependent on FtsZ and independent of FtsA. // J. Bacteriol. 1999. - V.181.-Nl.-P. 167- 176.

113. Hancock I.C. Bacterial cell surface carbohydrates: structure and assembly. II Biochem. Soc. Trans. 1997. - V.25. - Nl. -P.183 - 187.

114. Hara H., Yasuda S., Horiuchi K., Park J.T. A promoter for the first nine genes of the Escherichia coli mra cluster of cell division and cell envelope biosynthesis genes, including ftsl and ftsW. 11 J. Bacteriol. 1997. - V.179. - N18. - P.5802 -5811.

115. Harold F.M. From morphogenes to morphogenesis. // Microbiology. 1995. -V.141. - P.2765 - 2778.

116. Harris F., Phoenix D.A. The Escherichia coli low molecular mass penicillin-binding proteins and a putative membrane bound protein complex. // Membr. Cell Biol. 1998. - V.ll. -N5. -P.591 - 596.

117. Hartmann E. and Konig H. Comparison of the biosynthesis of the methanobacteria! pseudomurein and the eubacteriai murein. II Naturwissenschaften.-1990.-V.77.-P.472 475.

118. Harz H., Burgdorf K. and Holtje J.-V. Isolation and separation of the glycan strands from murein of Escherichia coli by reversed phase high - performance liquid chromatography. II Anal. Biochem. - 1990. - V.190. -P.120 - 128.

119. Hazelbauer G.L. The bacterial chemosensory system. // Can J Microbiol. -1988. V.34. - N4. - P.466 - 474.

120. Heijenoort J. Assembly of the monomer unit of bacterial peptidoglycah. // Cell Mol. Life Sci. 1998 - V.54. - N4. - P.300 - 304.

121. Henriques A.O., Glaser P., Piggot P.J., Moran C.P. Control of cell shape and elongation by the rodA gene in Bacillus subtilis. // Mol. Microbiol. 1998. - V.28. -N2. -P.235 -247.

122. Hoffman P.S., Pine L., Bell S. Production of superoxid and hydrogen peroxide in medium used to culture Legionella pneumophila: Catalitic decomposition by charcoal. //Appl.Environ.Microbiol. -1983. V.45. -P.784 - 791.

123. Holland I.B., Casaregola S., Nonis V. Cytoskeletal elements and calcium: do they play a role in the Escherichia coli cell cycle? II Res. Microbiol. 1990.1. V.141-N1.-P.131 -136.

124. Holtje J. A hypothetical holoenzyme involved in the replication of the murein sacculus of Escherichia coli. 11 Microbiology. 1996. - V.142. - P.1911 - 1918.

125. Holtje J.V. From growth to autolysis: the murein hydrolases in Escherichia coli. //Arch. Microbiol. 1995. - V.164. -P.243 -254.

126. Holtje J.V. Growth of the stress bearing and shape - maintaining murein sacculus of Escherichia coli. II Microbiol. Mol. Biol. Rev. - 1998. - V.62. - N1. -P.181 -203.

127. Holtje J.V. Molecular interplay of murein synthases and murein hydrolases in Escherichia coli. // Microb. Drug. Resist. 1996. - V.2. - N1. - P.99 - 103.

128. Holtje J.-V., Kopp U., Ursinus A., Wiedemann B. The negative regulator of -lactamase induction AmpD is a N-acetyl-anhydromuramyl-L-amidase. II FEMS Microbiol. Lett. 1994. - V.122. -P.159 - 164.

129. Hong J.-S., Ames B.N. Localized mutagenesis of any specific small region of the bacterial chromosome. II Proc.NatLAcad.Sci.USA. 1971. - V.68. - P.3158 -3162.

130. Hu Z., Mukherjee A., Pichoff S., Lutkenhaus J. The MinC component of the division site selection system in Escherichia coli interacts with FtsZ to prevent polymerization. // Proc. Natl. Acad. Sei. USA. 1999. - V.96. - N26. - P.14819 -14824.

131. Huang K., Tang J., Liu Y., Xu L. Interference of electromagnetic waves in dynamic metabolism. // Sei. China. 1995. - V.38. -Nil. -P.1355 - 1360.

132. Isaac L. and Ware G.C. The flexibility of bacterial cell walls. // J. Appl. Bacterid. 1974. - V.37. - P.335 - 339.

133. Ishino F., Jung N.K., Ikeda M., Wachi M., Matsuhashi M. New mutation its— 36, lts-33, ftsW clastered in the mra region of the Escherichia coli cromosome induce thermosensitive cell growth and division. // JJBacteriol. 1989. - V.171. -P.5523 - 5530.

134. Izaki K., Matsuhashi M., Strominger J.L. Glycopeptide transpeptidase and D -alanine carboxypeptidase: penicillin sensitive enzymatic reactions. // Proc.Nat.Acad.Sci.USA. - 1966. - V.55. - P.656 - 663.

135. Jacobs C., Frere J. M. and Normark S. Cytosolic intermediates for cell wall biosynthesis and degradation control inducible - lactam resistance in gram -negative bacteria. // Cell. - 1997. - V.88. - P.823 - 832.

136. Jacobs C., Huang L. J., Bartowsky E., Normark S. and Park J. T. Bacterial cell wall recycling provides cytosolic muropeptides as effectors for beta lactamase induction. // EMBO J. - 1994. - V.13. - P.4684 - 4694.

137. Jonge B.L., Wientjes F.B., Jurida I., Driehuis F., Wouters J.T., Nanninga N. Peptidoglycan synthesis during the cell cycle of Escherichia coli: composition and mode of insertion. //J. Bacterid. 1989. - V.171. -Nil. -P.5783 - 5794.

138. Kaiser D. Bacteria also vote. ¡1 Science. 1996. - V.272. - P.1598 - 1599.

139. Kaiser D. Cell fate and organogenesis in bacteria. // Trends Genet. 1999. -V.15. - N7. -P.273 -277.

140. Kaiser D. How and why mycobacteria talk to each other. // Curr. Opin. Microbiol. 1998. - V.l. -N6. - P.663 - 668.

141. Kaiser D., Losick R. How and why bacteria talk to each other. // Cell. 1993. -V.73. - N5. - P.873 - 885.

142. Kandler O. and Konig H. Cell envelopes of archaebacteria. II In The bacteria. Woese C. R. and Wolfe R. S. (ed.), Academic Press, Inc., New York, N.Y. 1985. -P.413 - 457.

143. Khan S.A., Everest P., Servos S., Foxwell N., Zahringer U., Brade H., Rietschel E.T., Dougan G., Charles I.G., Maskell D.J. A lethal role for lipid A in Salmonella infections. // Mol.Microbiol. 1998 - V.29. - N2. - P.571 - 579.

144. Khattar M.M., Addinall S.G., Stedul K.H., Boyle D.S., Lutkenhaus J. and Donachie W.D. Two polypeptide products of the Escherichia coli cell division gene ftsW and a possible role for FtsW in FtsZ function. // J. Bacteriol. 1997. -V.179. - P.784 - 793.

145. Kholodenko B.N., Hoek J.B., Westerhoff H.V. Why cytoplasmic signalling proteins should be recruited to cell membranes. // Trends Cell Biol. 2000. -V.10.-N5-P.173 -178.

146. Kholodenko B.N., Rohwer J.M., Cascante M., Westerhoff H.V. Subtleties in control by metabolic channelling and enzyme organization. // Mol. Cell Biochem. -1998.-V.184.-P.311 -320.

147. Kimball G.C. The growth of yeast in a magnetic field. // J.Bacteriol. 1937. -V.35. -P.109 -122.

148. Kloszewska M. Biosynthesis of bacterial peptidoglycan. // Acta Microbiol. Pol. 1996. - V.45. - N2. - P. 119 - 130.

149. Koch A.L. Additional arguments for the key role of "smart" autolysins in the enlargement of the wall of Gram negative bacteria. // Res. Microbiol. - 1990. -V.141. - P.529 - 541.

150. Koch A. L. and Holtje J. V. A physical basis for the precise location of the division site of rod-shaped bacteria: the central stress model. // Microbiology. -1995.-V.141.-P.3171-3180.

151. Koch A.L. Biophysics of bacterial walls viewed as stress-bearing fabric. //

152. Microbiol. Rev. 1988. - V.52. - N3. - P.337 - 353.

153. Koch A.L. Orientation of the peptidoglycan chains in the sacculus of Escherichia coli. // Res. Microbiol. 1998. - V.149. - N10. - P.689 - 701.

154. Koch A.L. The three for - one model for gram - negative wall growth: a problem and a possible solution. // FEMS Microbiol. Lett. - 1998. - V.162. - N1. -P.127 -134.

155. Koch A.L. The wall of bacteria serves the roles that mechano-proteins do in eukaiyotes. // FEMS Microbiol. Rev. 1991. - V.8. - N1. - P. 15 - 25.

156. Komagata K. Bacteria. I. The aerobic bacteria. // In Classification and identification of microorganisms (Hasegava T., ed.), Gaccai Schuppan, Tokyo. -1985.-V.2.-P.99-161.

157. Korat B., Mottl H. and Keck W. Penicillin binding protein 4 of Escherichia coli: molecular cloning of the dacB gene, controlled overexpression, and alterations in murein composition. // Mol. Microbiol. - 1991. - V.5. - P.675 - 684.

158. Kraft A.R., Prabhu J., Ursinus A., Holtje J-V. Interference with Murein Turnover Has No Effect on Growth but Reduces beta -Lactamase Induction in Escherichia coli. // J. Bacteriol. 1999. - V.181. -P.7192 - 7198.

159. Labischinski H, Goodell E.W., Goodell A. and Hochberg M.L. Direct proof of a "more-than-single-layered" peptidoglycan architecture of Escherichia coli W7: aneutron small-angle scattering study. // J. Bacteriol. 1991. - V.173. - P.751 -756.

160. Laemmli U.K., Favre M. Maturation of the head of bacteriophage T4 I. DNA packihg events. // J.Mol.Biol. 1973. - V.80. - P.579 - 599.

161. Laskey R.A., Mills A.D. Quantitative film detection of 3H and 14C in polyaciylamide gels by fluorography. // Eur.J.Biochem. 1975. - V.56. - P.335 -341.

162. Leduc M., Ishidate K., Shakibai N., Rothfield L. Interactions of Escherichia coli membrane lipoproteins with the murein sacculus. // J. Bacteriol. 1992. -V.174. -N24. -P.7982 - 7988.

163. Lennox E.S. Transduction of linked genetic characters of the host by bacteriophage PI. // Virology. -1955. V.l. -P.190 -206.

164. Leroy A., Noe V., Mareel M., Nelis H. Glycoconjugate cross-talk in metastatic cancer cells, leucocytes, parasites and bacteria. // Biochem. Soc. Trans. 1997. -V.25.-N1- P.28 - 34.

165. Li Z., Clarke A.J., Beveridge T.J. Gram-negative bacteria produce membrane vesicles which are capable of killing other bacteria. // J. Bacteriol. 1998. - V.80. -N20 - P.5478 - 5483.

166. Lindberg B. Components of bacterial polysaccharides. // Adv. Carbohydr. Chem. Biochem. 1990. - V.48. -P.279 - 318.

167. Lindquist S., Weston Hafer K., Schmidt H., Pul C., Korfmann G., Erikson J., Sanders C., Martin H.H. and Normark S. AmpG, a signal transducer in chromosomal -lactamase induction. // Mol. Microbiol. - 1993. - V.9. - P.703 -715.

168. Linnerborg M., Weintraub A., Widmalm G. Structural studies of the O-antigen polysaccharide from the enteroinvasive Escherichia coli 0164 cross-reacting with Shigella dysenteriae type 3. // Eur. J. Biochem. 1999. - V.266. - N2. - P.460 -466.

169. Lippmann C., Lindschau C., Vijgenboom E., Schroder W., Bosch L., Erdmann V.A. Prokaryotic elongation factor Tu is phosphorylated in vivo. /7 J. Biol. Chem.- 1993. V.68. -Nl. -P.601-607.

170. Lommatzsch J., Templin M., Kraft A. R., Vollmer W., Holtje J.-V. Outer membrane localization of murein hydrolases: MltA, a third lipoprotein lytic transglycosylase in Escherichia coli. // J. Bacteriol. 1997. - V.179. - P.5465 -5470.

171. Losick R., Kaiser D. Why and how bacteria communicate. // Sci. Am. 1997.- V.276. N2. - P.68 - 73.

172. Lowry O.H., Rosebrough N.J., Fair A.L., Randall R.J. Protein measurement with die Folin phenol reagent. II J. Biol. Chem. 1951. - V.193. - P.265 - 275.

173. Lutkenhaus J., Addinall S.G. Bacterial cell division and the Z ring. // Annu. Rev. Biochem. 1997. - V.66. - P.93 - 116.

174. Maddock J.R., Alley M.R., Shapiro L. Polarized cells, polar actions. 11 J Bacteriol. 1993. - V.175. -N22. -P.7125 - 7129.

175. Magnusson K.E. Physicochemical properties of bacterial surfaces. // Biochem. Soc. Trans. 1989. - V.17. -N3.~P.454 - 458.

176. Maniatis T., Fritsch E.F., Sambrook J. Molekular cloning: a laboratory manual. II Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, N. Y. 1982.

177. Marino P.A., McGrath B.C., Osborn M.J. Energy dependence of O-antigen synthesis in Salmonella typhimurium. II J. Bacteriol. 1991. - V.173. - N10. -P.3128 - 3133.

178. Marolda C.L., Feldman M.F., Valvano M.A. Genetic organization of the 07-specific lipopolysaccharide biosynthesis cluster of Escherichia coli VW187 (07.K1). // Microbiology. 1999. - V.145. - N9. - P.2485 - 2495.

179. Matsuhashi M., Pankrushina A.N., Kobayashy M., Yazawa H., Watanabe H., Endoh K., Mano Y. Physical signals promoting plant cell growth. 1 .Plant cells also transmit and receive growth-regulatoiy signals. I 1 Abstracts of Japaniese Agrcult.

180. Chem. Soc. Meet., Tokyo, Japan. 1995. -P.66.

181. Matsuhashi M., Wachi M. and Ishino F. Machinery for cell growth and division: penicillin-binding proteins and other proteins. // Res. Microbiol. 1990. -V.141.-P.89-103.

182. Matsuzava H., Asoh S., Kunai K., Muraiso K., Takasuga A., Ohta T. Nucleotide sequence of the rodA gene, responsible for the rod shape of E.coli. // J.Bacteriol. 1989. - V.171. -P.558 - 560.

183. McGrath B.C., Osborn M.J. Evidence for energy-dependent transposition of core lipopolysaccharide across the inner membrane of Salmonella typhimurium. // J. Bacteriol. 1991. - V.173. - N10. - P.3134 - 3137.

184. McGrath B.C., Osborn M.J. Localization of the terminal steps of O-antigen synthesis in Salmonella typhimurium. // J. Bacteriol. 1991. - V.173. - N2. -P.649 - 654.

185. Mekalanos J.J. Bacterial response to host signals: analysis and applications. // Harvey Lect. 1993 - V.94. -P.l - 13.

186. Mendes P., Kell D.B., Westerhoff H.V. Why and when channelling can decrease pool size at constant net flux in a simple dynamic channel. // Biochim.

187. Biophys. Acta. 1996. - V.1289. -N2. -P.175 - 186.

188. Murray T., Popham D. L., Setlow P. Bacillus subtilis Cells Lacking Penicillin-Binding Protein 1 Require Increased Levels of Divalent Cations for Growth. II J. Bacterid. 1998. - V.180. -P.4555 -4563.

189. Moore R.L. Biological effect of magnetic fields: Studies with microorganisms. // Can.J.Microbiol. 1979. - V.25. - P. 1145 - 1151.

190. Mottl H. and Keck W. Purification of penicillin-binding protein 4 of Escherichia coli as a soluble protein by dye-affinity chromatography. // Eur. J. Biochem-1991 .-V.200.- P.767 773.

191. Msadek I. Stress and sensitivity. // Trends Microbiol. 2000. - V.8. - N1. -P.10-12.

192. Muir W.H., Hildebrandt A.C., Riker AJ. Plant tissue cultures produced from single isolated cells. // Science. 1954. - V. 119. - P.877 - 878.

193. Mukherjee A.K., Dai K. and Lutkenhaus J. Escherichia coli cell division protein ftsZ is a uanine nucleotide binding protein. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1993.-V.90.-P.1053-1057.

194. Mulder E., Woldringh C.L. Autoradiographic analysis of diaminopimelic acid incorporation in filamentous cells of Escherichia coli: repression of peptidoglycan synthesis around the nucleoid. // J. Bacterid. 1991. - V.173. - P.4751 - 4756.

195. Murray T., Popham D., Setlow P. Identification and characterization of pbpA encoding Bacillus subtilis penicillin-binding protein 2A. // J. Bacteriol. 1997. -V.179.-N9.-P.3021 -3029.

196. Nagl W., Popp F.A. A physical (electromagnetic) model of differentiation. 1. Basic considerations. // Cytobios. 1983. - V.37. - N145. - P.45 - 62.

197. Nakamura M., Maruyama I. N., Soma M., Kato J. I., Suzuki H. and Hirota Y. On the process of cellular division in Escherichia coli: nucleotide sequence of the gene for penicillin-binding protein 3. //Mol. Gen. Genet.- 1983.- V.191. -P.l 9.

198. Nambu T., Minamino T., Macnab R M., Kutsukake K. Peptidoglycan-Hydrolyzing Activity of the FlgJ Protein, Essential for Flagellar Rod Formation in Salmonella typhimurium. // J. Bacteriol. 1999. - V. 181. - P. 1555 - 1561.

199. Nanninga N. Cell division and peptidoglycan assembly in Escherichia coli. // Mol. Microbiol. 1991. - V.5. - N4. - P.791 - 795.

200. Nanninga N. Morphogenesis of Escherichia coli. // Microbiol. Mol. Biol. Rev. 1998. - V.62. - N1. - P. 110 - 129.

201. Nanninga N., Wientjes F.B., de Jonge B.L. and Woldringh C.L. Polar cap formation during cell division in Escherichia coli. // Res. Microbiol. 1990. -V.41. -P.103 -118.

202. Nelson D.E., Young K.D. Penicillin binding protein 5 affects cell diameter, contour, and morphology of escherichia coli. // J. Bacteriol. 2000. - V.182. - N6. -P.1714 -1721.

203. Ng S.P., Tsang R.S., Luk J.M., Ng M.H., Im S.W. Two murine monoclonal antibodies against serogroup E Salmonellae. // Appl. Environ. Microbiol. 2000. -V.66.-N1- P.419 - 421.

204. Nguyen Disteche M., Fraipont C., Buddelmeijer N., Nanninga N. The structure and function of Escherichia coli penicillin-binding protein 3. // Cell Mol. Life Sei. - 1998. - V.54. - N4. - P.309 - 316.

205. Nikaido K., Nikaido N. // J.Biol.Chem. 1971. - V.246. -P.3912 - 3919.

206. Niki H., Hiraga S., Moriya S. Progressing molecular cell biology in bacteria:chromosome partitioning and cell division. Article in Japanese. // Tanpakushitsu Kakusan Koso. 2000. - V.45. - N2. - P. 153 - 163.

207. Nnalue N.A., Lindberg A.A. O-antigenic determinants in Salmonella species of serogroup CI are expressed in distinct immunochemical populations of chains. // Microbiology. 1997. - V.143. - N2. - P.653 - 662.

208. Norris V.A Calcium flux at the termination of replication triggers cell division in Escherichia coli. Hypothesis. // Cell Calcium. 1989. - V.10. - N8. - P.511 -517.

209. Norris V., Ayala J.A., Begg K., Bouche J.P., Bouloc P., Boye E., Canvin J., Casaregola S., Cozzone A.J., Crooke E., et al. Cell cycle control: prokaryotic solutions to eukaryotic problems? // J. Theor. Biol. 1994. - V.168. - N2. - P.227 -230.

210. Norris V., Chen M„ Goldberg M., Voskuil J., McGurk G., Holland I.B. Calcium in bacteria: a solution to which problem? // Mol. Microbiol. 1991. -V.5. - N4. - P.775 - 778.

211. Norris V., Gascuel P., Guespin-Michel J., Ripoll C., Saier Jr. Metabolite-induced metabolons: the activation of transporter-enzyme complexes by substrate binding. //Mol. Microbiol. 1999. - V.31. -N5. -P.1592 - 1595.

212. Norris V., Grant S., Freestone P., Canvin J., Sheikh F.N., Toth I, Trinei M., Modha K., Norman R.I. Calcium signalling in bacteria. // J. Bacterid. 1996. -V.178.-N13.-P.3677 - 3682.

213. Norris V., Hyland G.J. Do bacteria sing? // Mol .Microbiol. 1997. - V.24. -N4. -P.879 - 880.

214. Norris V. Hypotheses and the regulation of the bacterial cell cycle. // Mol.

215. Microbiol. 1995. - V.15. - N4. -P.785 - 787.

216. Nonis V., Madsen M.S., Freestone P. Elements of a unifying theory of biology. II Acta Biotheor. 1996. - V.44. - P.209 - 218.

217. Norris V., Manners B. Deformations in the cytoplasmic membrane of Escherichia coli direct the synthesis of peptidoglycan. The hernia model. II Biophys. J. 1993. - V.64. -N6. - P. 1691 - 1700.

218. Norris V. Phospholipid flip-out controls the cell cycle of Escherichia coli. II J. Theor. Biol. 1989. - V.139. -N1. -P.l 17 - 128.

219. Obermann W., Holtje J.-V. Alterations of murein structure and of penicillin-binding proteins in minicells from Escherichia coli. II Microbiology. 1994. -V.140. -P.79 - 87.

220. Osborn M.J., Cynkin N.A., Gilbert J.M., Muller V., Sing M. //In Methods in Enzymol. (Golowick C.P., Kaplan N.O., ed.), Complex Carbohydrates, part B, Acad.Press, New York London. - 1972. - P.583 - 601.

221. Ovadi J., Srere P.A. Macromolecular compartmentation and channeling. II Int. Rev. Cytol. 2000. - V.192. - P.255 - 280.

222. Ovadi J., Srere P.A. Metabolic consequences of enzyme interactions. // Cell Biochem. Funct. 1996. - V.14. - N4. - P.249 - 258.

223. Park J.T. The convergence of murein recycling research with beta-lactamase research. // Microb. Drug Resist. 1996. - V.2. - N1. - P. 105 - 112.

224. Park J.T. The murein sacculus. // In Escherichia coli and Salmonella: cellular and molecular biology, Neidhardt F.C., R. Curtiss III, Ingraham J. L., Lin E.

225. C.E.C., Low K.B., Magasanik B., Reznikoff W.S., Riley M., Schaechter M. and Umbarger H.E. (ed.), 2nd ed. American Society for Microbiology, Washington,1. D.C. 1996. - P.48 - 57.

226. Park J.T. Turnover and recycling of the murein sacculus in oligopeptide permease-negative strains of Escherichia coli: indirect evidence for an alternative permease system and for a monolayered sacculus. H J. Bacterid. 1993. - V.175. -P.7-11.

227. Park J.T. Why does Escherichia coli recycle its cell wall peptides? II Mol.

228. Microbiol. 1995. - V.17. - P.421 - 426.

229. Paton A.W., Paton J.C. Molecular characterization of the locus encoding biosynthesis of the lipopolysaccharide O antigen of Escherichia coli serotype 0113. // Infect. Immun. 1999. - V.67. - N11. - P.5930 - 5937.

230. Pattus F., Lakey J., Dargent B. Bacterial proteins which form membrane pores: a biophysical approach. // Microbiol. Sei. 1988. - V.5. - N7. - P.207 - 210.

231. Pedersen L.B., Angert E.R., Setlow P. Septal Localization of Penicillin-Binding Protein 1 in Bacillus subtilis. // J. Bacterid. 1999. - V. 181. - P.3201 -3211.

232. Pedro M.A., Quintela J.C., Holtje J.V., Schwarz H. Murein segregation in Escherichia coli. II J. Bacterid. 1997. - V.179. - N9. - P.2823 - 2834.

233. Perry M.B., MacLean L.L. Structural characterization of the antigenic O-chain of the lipopolysaccharide of Escherichia coli serotype 065. II Carbohydr. Res. -1999. V.322. - P.57 - 66.

234. Phillips J.L. Effects of electromagnetic field exposure on gene transcription. II J. Cell Biochem. 1993. - V.51. -N4. -P.381 - 386.

235. Pinho M.G., De Lencastre H., Tomasz A. Transcriptional Analysis of the Staphylococcus aureus Penicillin Binding Protein 2 Gene. II J. Bacterid. 1998. -V.180. -P.6077 - 6081.

236. Popham D.L., Gilmore M.E., Setlow P. Roles of low-molecular-weight penicillin-binding proteins in Bacillus subtilis spore peptidoglycan synthesis and spore properties. // J. Bacteriol. 1999. - V.181. -Nl. -P.126 -132.

237. Pozmogova I.N. Effect of superoptimal temperatures on bacteria and yeasts. It Biol. Bull. Acad. Sei. USSR. 1978. - V.5. - N4. - P.463 - 471.

238. Priest F.G., Goodfellow M., Todd C. A numerical classification of the genus Bacillus. // J.Gen.Microbiol. 1988. - V.134. - P.1847 - 1882.

239. Puente J., Blanco L., Montoya M., Miranda D., Contreras I., Vines E., Wolf M.E., Mosnaim A.D. Effect of Salmonella typhi wild type and O-antigen mutants on human natural killer cell activity. // Int.J. Immunopharmacol. 2000. - V.22. -N5. -P.55 -364.

240. Pugsley A.P. Attractive propositions: microbial responses to chemical signals. // Microbiol Sei. 1987. - V.4. - N4. - P.105 - 107.

241. Rahman M.M., Guard-Petter J., Carlson RW. A virulent isolate of Salmonella enteritidis produces a Salmonella typhi-like lipopolysacchaiide. II J. Bacteriol. -1997. V.179. -N7. - P.2126 - 2131.

242. Ramos J.L., Duque E., Rodriguez Herva J.J., Godoy P., Haidour A., Reyes F., Fernandez - Bairero A. Mechanisms for solvent tolerance in bacteria. II J. Biol. Chem. - 1997. - V.272. - N7. - P.3887 - 3990.

243. Raskin D.M., de Boer P.A. Rapid pole-to-pole oscillation of a protein required for directing division to the middle of Escherichia coli. II Proc. Natl. Acad. Sei. USA. 1999. - V.96. - N9. - P.4971 - 4976.

244. RayChaudhuri D. and Park J.T. Escherichia coli cell-division gene ftsZ encodes a novel GTP-binding protein. // Nature. 1992. - V.359. - P.251 - 254.

245. Rechenberg M., Ursinus A., Holtje J. V. AfSnity chromatography as a means to study multienzyme complexes involved in murein synthesis. II Microb. Drug Resist. 1996. - V.2. - N1. - P. 155 - 157.

246. Reeves P.R., Hobbs M., Vaivano M.A., Skurnik M., Whitfield C., Coplin D.,

247. Kido N., Klena J., Maskell D., Raetz C.R., Rick P.D. Bacterial polysaccharide vsynthesis and gene nomenclature. // Trends Microbiol. 1996. - V.4. - N12. -P.495 - 503.

248. Roberts R.C., Mohr C.D., Shapiro L. Developmental programs in bacteria. // Curr. Top. Dev. Biol. 1996. - V.34. - P.207 - 257.

249. Robinson A.C., Kenan D.J., Hatful G.F., Sillivan N.F., Spiebelberg R., Donachie W.D. DNA sequence and transcriptional organization of essential cell division genes ftsQ and ftsA of E.coli. U J.Bacteriol. 1984. - V.160. - P.546 -555.

250. Rocchetta H.L., Burrows L.L., Lam J.S. Genetics of O-antigen biosynthesis in Pseudomonas aeruginosa. // Microbiol Mol Biol Rev. 1999. - V.63. - N3. -P.523 - 553.

251. Rodionov D.G., Ishiguro E.E. Dependence of peptidoglycan metabolism on phospholipid synthesis during growth of Escherichia coli. // Microbiology. 1996.- V. 142. N10. - P.2871 - 2877.

252. Rodionov D.G., Ishiguro E.E. Direct correlation between overproduction of guanosine 3',5'-bispyrophosphate (ppGpp) and penicillin tolerance in Escherichia coli. // J. Bacterid. 1995. - V. 177. - P.4224 - 4229.

253. Rohwer J.M., Postma P.W., Kholodenko B.N., Westerhoff H.V. Implications of macromolecular crowding for signal transduction and metabolite channeling. // Proc. Natl.Acad. Sei. USA. 1998. - V.95. -N18. -P.10547 - 10552.

254. Romeis T., Holtje J.-V. Penicillin-binding protein 7/8 of Escherichia coli is a D, D-endopeptidase. // Eur. J. Biochem. 1994. - ¥.224. - P.597 - 604.

255. Romeis T. and Holtje J.-V. Specific interaction of penicillin-binding proteins 3 and 7/8 with the soluble lytic transglycosylase in Escherichia coli. // J. Biol. Chem.- 1994. V.269. -P.21603 -21607.

256. Roszak D.B., Colwell R.R. Survival strategies of bacteria in the natural environment. // Microbiol. Rev. 1987. - V.51. - N3. - P.365 - 379.

257. Rothfield L.I. and Justice S.S. Bacterial cell division: the cycle of the ring. II Cell. 1997. - V.88. -P.581 - 584.

258. Rothfield L.I. and Zhao C.R. How do bacteria decide where to divide? // Cell. -1996.-V.84.-P.183-186.

259. Saito H., Miura K. Preparation of transforming deoxyribonucleic acid by phenol treatment. // Biochim. Biophis. Acta. 1963. - V.72. - P.619 - 629.

260. Schachter H. The Glycoconjugates. (Horowits M.I., Pigman W., eds.). Acad.Press. London-N.Y. 1978. - V.ll. -P.114 - 121.

261. Schiffer G., Holtje J.-V. Cloning and Characterization of PBP 1C, a Third Member of the Multimodular Class A Penicillin-binding Proteins of Escherichia coli. // J. Biol. Chem. 1999. - V.274. - P.32031 - 32039.

262. Schuster S., Kholodenko B.N., Westerhoff H.V. Cellular information transfer regarded from a stoichiometry and control analysis perspective. // Biosystems. -2000.-V.55.-P.73-81.

263. Seydel U., Schromm A.B., Blunck R., Brandenburg K. Chemical structure, molecular conformation, and bioactivity of endotoxins. // Chem. Immunol. 2000. -V.74.-P.5-24.

264. Shapiro J.A. Pattern and control in bacterial colony development. // Sci. Prog. -1992.-V.76.-P.399-424.

265. Shapiro L., Kaiser D., Losick R. Development and behavior in bacteria. // Cell. 1993. - V.73. -N5. - P.835 - 836.

266. Shibaev V.N. Biosynthesis of bacterial polysaccharide chains composed of repeating units. II Adv. Carbohydr. Chem. Biochem. 1986. - V.44. - P.277 -339.

267. Shibata H., Miyoshi S., Osato T., Tani I., Hashimoto T. Involvement of calcium in germination of coat-modified spores of Bacillus cereus T. II Microbiol. Immunol. 1992. - V.36. - N9. - P.935 - 946.

268. Shockman G.D., Holtje J.-V. Microbial peptidoglycan (murein) hydrolases. II In Bacterial cell wall. Ghuysen J.-M. and Hakenbeck R. (ed.), Elsevier Science Publishing, Amsterdam, The Netherlands. 1994. - P. 131 - 166.

269. Signoretto C., Boaretti M., Canepari P. Peptidoglycan synthesis by Enterococcus faecalis penicillin binding protein 5. II Arch. Microbiol. 1998. -V.170. -N3. -P.185 - 190.

270. Spatt B.J. Distinct PBP involved in the division, elongation and shape of Escherichia coli K12. // Proc.Nati.Acad.Sci.USA. 1975. - V.72. - P.2999 -3003.

271. Spatt B.J., Pardee A.B. PBP and cell shape in E.coli. II Nature. 1975. -V.254- P.516 - 517.

272. Sriskandan S., Cohen J. Gram-positive sepsis. Mechanisms and differences from gram-negative sepsis. II Infect Dis. Clin. North Am. 1999. - V.13. - N2. -P.397 - 412.

273. Suginaka H., Blumberg P.M., Strominger J.L. Multiple penicillin-binding components in B.subtilis, B.cereus, St.aureus, E.coli. II J.Biol.Chem. 1972. -V.247. - P.5279 - 5288.

274. Suzuki H., Nishimura Y., Hirota Y. On the process of cellular division in Escherichia coli: a series of mutants altered in the PBPs. II Proc.Nat.Acad.Sci.USA. 1978. - V.75. -P.664 - 668.

275. Suzuki M., Pankrushina A.N., Endoh K., Ohshima H., Yoshimura M., Hiraoka N., Takeuchi S., Matsuhashi M. Sonic signal transduction for cell regulation. 2.

276. Growth regulation of yeast cells. // Abstracts of Japan-ese Agricult.Chern. Soc.Meet., Kyoto, Japan. 1996. - P.136.

277. Swift S., Throup., Williams P., Sahnond G.P., Steward G.S. Quorum sensing: A population-density component in the determination of bacterial phenotype. II TIBS. 1996. - V.21. - P.214 - 219.

278. Tamaki S., Matsuzawa H., Matsuhashi M. Claster of mrdA and mrdB genes responsible for the rod shape and mecillinamsensitivity of Escherichia coli. 11 J.Bacteriol. 1980. - V.141. - P.52 - 57.

279. Tamaki S., Nakajima S., Matsuhashi M. Thermosensitive mutation in Escherichia coli simultaneously causing defects in PBP1B and in enzyme activity for peptidoglycan synthesis in vitro. 11 Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 1977. - V.74. -P.5472 - 5476.

280. Tamaoka J., Komagata K. Determination of DNA base composition by reversed-phase high-performance liquid chromatography. II FEMS Microbiol. Lett. -1984.-V.25.-P.125-128.

281. Templin M. F., Ursinus A., Holtje J.-V. A defect in cell wall recycling triggers autolysis during the stationaiy growth phase of Escherichia coli. // EMBO J. -1999.-V.18- P.4108 4117.

282. Tetz V.V. Formation and structure of mixed bacterial communities. If APMIS. 1999. - V.107. -N7. -P.645 - 654.

283. Tetz V.V., Rybalchenko O.V., Savkova G.A. Ultrastructura! features ofmicrobial colony organization. 11 J. Basic Microbiol. 1990. - V.30. - N8. - P.597 -607.

284. Tetz V.V., RybaJchenko O.V., Savkova G.A. Ultrastructure of the surface film of bacterial colonies. // J. Gen. Microbiol. 1993. V.139. - N4. - P.855 - 858.

285. Tetz V.V., Rybaichenko O.V. Ultrastructure of colony-like communities of bacteria. 11APMIS. 1997. - V.105. - N2. - P.99 - 107.

286. Thellier M, Sceller L.L., Norris V., Verdus M.C., Ripoll C. Long-distance transport, storage and recall of morphogenetic information in plants. The existence of a sort of primitive plant "memory". // C. R. Acad Sci. 2000. - V.323. - N1. -P.81 -91.

287. Tipper D.J., Strominger J.L. Mechanism of action of penicillins: a proposal based on their structural similarity to acyl-D-alanyl-D-alanine. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1965. - V.54. - P.l 133 - 1141.

288. Tippner D., Afflerbach H., Bradaczek C., Wagner R. Evidence for a regulatory function of the histone-like Escherichia coli protein H-NS in ribosomal RNA synthesis. // Mol. Microbiol. 1994. - V. 11. - N3. - P.589 - 604.

289. Tol E.A., Holt L., Li F.L., Kong F.M., Rippe R., Yamauchi M., Pucilowska J., Lund P.K., Sartor R.B. Bacterial cell wall polymers promote intestinal fibrosis by direct stimulation of myofibroblasts. II Am. J. Physiol. 1999. - V.277. -P.G245 -255.

290. Tomasz A. Penicillin-binding proteins and the antibacterial effectiveness of beta-lactam antibiotics. // Rev. Infect. Dis. 1986. - V.8. - P.260 - 378.

291. Torgov V.I., Shibaev V.N., Shashkov A.A., Rozhnova S.S. Structural studies of the O-specific polysaccharide from Salmonella kentucky strain 98/39 (0:8, H:i, Z6). // Carbohydr. Res. 1990. - V.208. - P.293 - 300.

292. Tormo A., Ayala J.A., De Pedro M.A., Aldea M., Vicente M. Interaction of FtsA and PBP3 proteins in the Escherichia coli septum. 11 J. Bacterid. 1986. -V.166.-N3.- P.985 -992.

293. Toth A., Medgyes A., Bajza I., Liptak A., Batta G., Kontrohr T., Peterffy K., Pozsgay V. Synthesis of the repeating unit of the O-specific polysaccharide of

294. Shigella sonnei and quantitation of its serologic activity. // Bioorg. Med. Chein. Lett.-2000.-V. 10 .-N1.- P. 19 21.

295. Van den Bosch L., Manning P.A., Morona R. Regulation of O-antigen chain length is required for Shigella flexneri virulence. // Mol. Microbiol. 1997. -V.23.-N4- P.765 - 775.

296. Van Heijenoort J. Biosynthesis of the bacterial peptidogiycan unit. II In Bacterial cell wall, Ghuysen J. M. and Hakenbeck R. (ed.), Elsevier Science Publishing, Amsterdam, The Netherlands. - 1994. - P.39 - 54.

297. Varón M., Choder M. Organization and cell-cell interaction in starved saccharomyces cerevisiae colonies. // J. Bacteriol. 2000. - V.182. - N13. -P.3877 - 3880.

298. Vicente M. and Errington J. Structure, function and controls in microbial division. // Mol. Microbiol. 1996. - V.20. - P.l - 7.

299. Vieira J., Messing J. Production of single-stranded plasmid DNA. // Methods Enzymol.-1987.-P.153.

300. Volkov S.N, Kosevich A.M. Theory of low-frequency vibrations in DNA macromolecules. // J. Biomol. Struct. Dyn. 1991. - V.8. - N5. - P. 1069 - 1083.

301. Von Rechenberg M., Ursinus A. and Holtje J. V. Affinity chromatography as a means to study multi-enzyme-complexes involved in murein synthesis. II Microb. Drug Resist. - 1996. - V.2. - P. 155 - 157.

302. Voorsti F., Kruijff B. Role of lipids in the translocation of proteins across membranes. // J. Biochem. 2000. - V.347. - P.601 - 612.

303. Wachi M., Doi M., Okada Y, Matsuhashi M. New mre genes mreC and mreD, responsible for formation of the rod shape of E.coli cells. II J.Bacteriol. 1989. -V.171. -P.6511 -6516.

304. Wachi M., Doi S., Tamaki S., Park W., Nakajima S., Matsuhashi M. Mutantisolation and molecular cloning of mre genes, wich determine cell shape, sensitivity to mecillinam, and amount of PBPs in E.coli. // J.Bacteriol. 1987. -V. 169. - P.4935 - 4940.

305. Wachi M., Matsuhashi M. Negative control of cell division by mreB, a gene that functions in detennining the rod shape of E.coli cells. // J.Bacteriol. 1989. -V.171. -P.3123 -3127.

306. Wang H.C., Gayda R.C. High-level expression of the FtsA protein inhibits cell septation in Escherichia coli K-12. // J. Bacteriol. 1990. - V.172. - N8. - P.4736 -4740.

307. Wang H., Gayda R.C. Quantitative determination of FtsA at different growth rates in Escherichia coli using monoclonal antibodies. // Mol. Microbiol. 1992. -V.6. - N17. - P.2517 - 2524.

308. Wang L., Khattar M.K., Donachie W.D., Lutkenhaus J. FtsI and FtsW are localized to the septum in Escherichia coli. // J. Bacteriol. 1998. - V. 180. - N11. -P.2810 - 2816.

309. Watanabe H., Pankrushina A.N., Miyori H., Matsuhashi M., Hyodo M. Effect of sonic signals upon animals cells. // Abstracts of 2nd Symp.on high-tech. Toward next centuiy, Tokai Univ., Japan. 1996. - P. 16.

310. Watson D.J., Gilman M., Witkowski J., Zoller M. Recombinant DNA. 2nd ed, Scientific American Books, N.-Y. 1993. - P.274.

311. Weiss D. S., Chen J.C, Boyd J. M., Beckwith J. Localization of FtsI (PBP3) to the Septal Ring Requires Its Membrane Anchor, the Z Ring, FtsA, FtsQ, and FtsL. // J. Bacteriol. - 1999. - V.181. - N2. - P.508 - 520.

312. Weiss D.S., Chen J.C., Ghigo J.M., Boyd D., Beckwith J. Localization of FtsI (PBP3) to the septal ring requires its membrane anchor, the Z ring, FtsA, FtsQ, and FtsL. //J. Bacteriol. 1999. - V.181. -N2. -P.508 - 520.

313. Whitfield C., Amor P.A., Koplin R. Modulation of the surface architecture of gram-negative bacteria by the action of surface polymer:lipid A-core ligase and by determinants of polymer chain length. II Mol.Microbiol. 1997. - V.23. - N4. -P.629 - 638.

314. Whitfield C. Biosynthesis of lipopolysaccharide O antigens. // Trends Microbiol. 1995. -V.3. -N5. -P.178- 185.

315. Whitfield C., Valvano M.A. Biosynthesis and expression of cell-surface polysaccharides in gram-negative bacteria. II Adv. Microb. Physiol. 1993. -V.35. -P.135 -246.

316. Wientjes F.B. and Nanninga N. On the role of the high molecular weight penicillin-binding proteins in the cell cycle of Escherichia coli. II Res. Microbiol. -1991.-V.142.- P.333-344.

317. Wientjes F.B., Woldringh C.L., Nanninga N. Amount of peptidoglycan in cell walls of gram-negative bacteria. // J. Bacteriol. 1991. - V.173. -N23. -P.7684 -7691.

318. Wijk R., Aken H., Mei W., Popp F.A. Light-induced photon emission by mammalian cells. // J. Photochem. Photobiol. 1993. - V.18. - N1. - P.75 - 79.

319. Williams P. Compromising bacterial communication skills. II J. Pharm. Pharmacol. 1994. - V.46. - N4. - P.252 - 260.

320. Wise E.M., Park Jr.J.T. Penicillin: its basic site of action as an inhibitor of a peptide cross-linking reaction in cell wall mucopeptide synthesis. II Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1965. - V.54. -P.75 -81.

321. Wong K.K., Pompliano D.L. Peptidoglycan biosynthesis. Unexploited antibacterial targets within a familiar pathway. II Adv. Exp. Med. Biol. 1998.1. V.456. P. 197 - 217.

322. Yao X., Jericho M., Pink D., Beveridge T. Thickness and Elasticity of GramNegative Murein Sacculi Measured by Atomic Force Microscopy. II J. Bacterid. -1999.-V.181.-P.6865-6875.

323. Yang L., Glaser M. Formation of membrane domains during the activation of protein kinase C. // Biochemistry. 1996. - V.35. - N44. - P. 13966-13974.

324. Yoshinaga A., Hsieh Y. M., Sawada T., Gohshi Y. Laser induced photoacoustic spectrometry with single particle sample. // Anal.Sci. - 1989. - V.5. -P.147 -149.

325. Zhou L., Srisatjaluk R., Justus D.E., Doyle R.J. On the origin of membrane vesicles in gram-negative bacteria. II FEMS Microbiol. Lett. 1998. - V.163. -N2. -P.223 - 228.

326. Zijderveld C.A., Aarsman M.E., Nanninga N. Differences between inner membrane and peptidoglycan-associated PBP1B dimers of Escherichia coli. II J. Bacteriol. 1995. - V.177. -N7. -P.1860 - 1863.

327. Zijderveld C.A., Waisfisz Q., Aarsman M.E., Nanninga N. Hybrid proteins of the transglycosylase and the transpeptidase domains of PBP1B and PBP3 of Escherichia coli. II J. Bacteriol. 1995. - V.177. - N21. - P.6290 - 6293.