Биосинтез, препаративное получение, физико-химические свойства изомальтулозосинтазы Erwinia rhapontici и её применение в биотехнологии тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Божко, Ольга Юрьевна

• Божко, Ольга Юрьевна
• кандидат биологических наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Божко, Ольга Юрьевна

Введение.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Подслащивающие вещества, их классификация и характеристика.

1.1.1. Синтетические подсластители.

1.1.2. Природные подсластители.

1.1.2.1. Подсластители белкового типа.

1.1.2.2. Подсластители гликозидного типа.

1.1.3. Сахарные спирты.

1.1.4. Фруктоолигосахариды.

1.1.5. Сладкие вещества на основе сахарозы.

1.2. Характеристика изомальтулозосинтазы.

1.2.1. Микробный синтез изомальтулозосинтазы.

1.2.1.1. Продуценты изомальтулозосинтазы.

1.2.1.2. Факторы, влияющие на биосинтез изомальтулозосинтазы при культивировании продуцентов.

1.2.2. Локализация изомальтулозосинтазы в бактериальной клетке.

1.2.3. Методы выделения и очистки микробной изомальтулозосинтазы.

1.2.4. Физико-химические свойства изомальтулозосинтазы.

1.2.5. Специфичность действия зомальтулозосинтазы.

1.2.6. Практическое применение изомальтулозы.

Глава 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Объекты исследования.

2.1.1. Оживление чистой культуры бактерий.

2.1.2. Культивирование бактерий Е. rhapontici В-9292.

2.2. Методы исследования.

2.2.1. Определение активности изомальтулозосинтазы.

2.2.2. Количественное определение глюкозы.

2.2.3. Количественное определение сахарозы.

2.2.4. Качественный анализ Сахаров.

2.2.4.1. Тонкослойная хроматография.

2.2.4.2. Высокоэффективная жидкостная хроматография.

2.2.5. Определение степени трансформации сахарозы.

2.2.6. Биохимические и микробиологические методы исследования.

2.2.7. Выделение и очистка фермента.

2.2.8. Определение молекулярной массы нативного фермента.

2.2.8.1. Определение молекулярной массы белка методом электрофореза.

2.2.8.2. Определение молекулярной массы белка методом гель-хроматографии.

2.2.9. Определение гомогенности ферментного препарата.

2.2.10. Статистическая обработка данных.

Глава 3. БИОСИНТЕЗ ИЗОМАЛЬТУЛОЗОСИНТАЗЫ И ИССЛЕДОВАНИЕ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ФЕРМЕНТА

3.1. Скрининг микроорганизмов, обладающих изомальтулозосинтазной активностью.

3.2. Характеристика некоторых культуральных признаков бактерий Erwinia rhapontici В-9292.

3.3. Изучение локализации изомальтулозосинтазы бактерий Erwinia rhapontici В-9292.

3.4. Влияние различных источников углерода и азота на биосинтез изомальтулозосинтазы.

3.5. Факторы, влияющие на биосинтез изомальтулозосинтазы Erwinia rhapontici В-9292.

3.6. Получение ферментного препарата изомальтулозосинтазы и исследование его свойств.

3.6.1. Очистка изомальтулозосинтазы Erwinia rhapontici В-9292.

3.6.2. Определение молекулярной массы фермента.

3.7. Исследование некоторых физико-химических свойств изомальтулозосинтазы.

3.8. Кислотная и термическая инактивация изомальтулозосинтазы.

3.9. Специфичность действия изомальтулозосинтазы.

3.10. Исследование влияния углеводов и ионов металлов на активность изомальтулозосинтазы.

3.10.1. Влияние углеводов на активность изомальтулозосинтазы.

3.10.2. Влияние ионов металлов на активность изомальтулозосинтазы.

Глава 4. БИОТЕХНОЛОГИЯ ПРИРОДНОГО

САХАРОЗАМЕНИТЕЛЯ - ИЗОМАЛЬТУЛОЗЫ ИЗ ВОЗОБНОВЛЯЕМЫХ ИСТОЧНИКОВ РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ

4.1. Факторы, влияющие на процесс трансформации сахарозы.

4.2. Подбор оптимальных условий процесса трансформации сахарозы.

4.3. Ферментативная трансформация тростникового сахара сырца.

Глава 5. ИССЛЕДОВАНИЕ ПРЕБИОТИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ИЗОМАЛЬТУЛОЗЫ

5.1. Исследование процессов роста и развития бифидокультуры на среде с изомальтулозой.

5.2. Гипотетический механизм метаболизма изомальтулозы в организме человека.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биосинтез, препаративное получение, физико-химические свойства изомальтулозосинтазы Erwinia rhapontici и её применение в биотехнологии»

Актуальность проблемы. Проблема получения безвредных натуральных сахарозаменителей с пребиотическими свойствами с целью создания функциональных продуктов питания является одной из важнейших медико-социальных проблем профилактики и лечения сахарного диабета, ожирения, метаболитного синдрома и дисбактериоза. Применение натуральных сахарозаменителей в рационе питания полезно также при занятиях фитнесом, спортсменам, для предотвращения кариеса зубов; они применяются в фармацевтической промышленности.

Среди известных технологий производства натуральных сахарозаменителей технологии на основе биокатализа являются наиболее перспективными и конкурентоспособными.

Одним из природных сахарозаменителей является изомальтулоза (6-О-а-Б-глюкопиранозид-В-фруктоза) - редуцирующий дисахарид, молекулярная масса, вкус и внешний вид которой схожи с сахарозой. Сладость изомальтулозы составляет 40-60 % сладости сахарозы, калорийность около 2 ккал/г. Основными факторами, определяющими растущий интерес к изомальтулозе, являются: низкий гликемический индекс, низкая калорийность, безвредность для организма, отсутствие постороннего или горького привкуса, натуральное происхождение.

Изомальтулозу получают из сахарозы путем биокатализа под действием фермента изомальтулозосинтазы (ИС, КФ 5.4.99.11), также известного как сахарозоизомераза, а-гликозилтрансфераза, продуцируемого некоторыми микроорганизмами. Поиску активных продуцентов фермента, а также вопросам получения изомальтулозы посвящены работы австралийских ученых L.Wu, R.Birch (2004), немецких исследователей M.McAllister, C.T.Kelly (1990), A.Krastanov, D.Blazheva (2006), H.Kawaguti (2007), D.Zhang, X.Li (2002) и других зарубежных авторов. Однако в России исследования по ферментативной трансформации сахарозы не проводятся. Отечественное производство изомальтулозы отсутствует.

К недостаткам существующих зарубежных технологий производства изомальтулозы следует отнести сравнительно низкую каталитическую активность фермента и недостаточно высокий выход целевого продукта (60-70 %). Кроме того, основным субстратом в реакции, катализируемой ИС, является сахароза. Отсутствуют конкретные данные о способности бифидобактерий развиваться на среде с изомальтулозой, пребиотические свойства углевода изучены недостаточно.

В связи с этим поиск высокоактивных продуцентов ИС, оптимизация процесса биосинтеза фермента, исследование его физико-химических характеристик с целью интенсификации процесса трансформации сахарозы являются актуальной задачей и имеют важное теоретическое и практическое значение.

Цель и задачи исследования. Цель диссертационной работы заключалась в получении высокоактивной изомальтулозосинтазы микробного происхождения, исследование ее физико-химических характеристик с целью разработки биотехнологии натурального бифидогенного сахарозаменителя - изомальтулозы.

Для достижения поставленной цели были сформулированы следующие задачи:

1. Выбор активного продуцента ИС.

2. Оптимизация условий биосинтеза целевого фермента.

3. Получение очищенного ферментного препарата ИС и изучение его физико-химических и кинетических характеристик.

4. Определение рациональных условий биотрансформации сахарозы.

5. Исследование пребиотических свойств полученной изомальтулозы.

6. Разработка биотехнологии изомальтулозы из возобновляемых источников растительного сырья.

Научная новизна. Подобран высокоактивный продуцент изомальтулозосинтазы Erwinia rhapontici В-9292, способный трансформировать сахарозу в изомальтулозу. Полученные данные позволяют расширить представления о биохимических и каталитических характеристиках изомальтулозосинтазы. Исследованы физико-химические свойства очищенного ферментного препарата, установлена высокая специфичность, дана термодинамическая характеристика процессов его кислотной и термической инактивации. Изучен процесс биотрансформации сахарозы. Представлен гипотетический механизм метаболического пути изомальтулозы в организме человека и бифидогенности полученного углевода.

Практическая значимость работы. Разработана биотехнология натурального сахар озамените ля изомальтулозы с применением высокоактивной изомальтулозосинтазы бактериального происхождения. Установлены рациональные режимы биотрансформации сахарозы в изомальтулозу, позволяющие увеличить выход конечного продукта до 9295 %. Показана целесообразность получения изомальтулозы из тростникового сахара-сырца, что удешевит стоимость целевого продукта. По результатам оформлено две заявки на изобретение: № 2006139255/13(042801), получено решение о выдаче патента от 27.08.2008 г., № 2007128643/13 (031195) приоритет от 25.07.2007 г. Установлены пребиотические свойства полученной изомальтулозы, что позволяет применять данный углевод в качестве компонента питательной среды в биотехнологиях пробиотиков, а также для профилактики и лечения дисбактериозов.

Апробация работы. Основные положения и результаты диссертационной работы докладывались и обсуждались на конференциях различного уровня. Они были представлены на отчетных научных конференциях ВГТА (2004-2006), межрегиональных конференциях, посвященных памяти А.А. Землянухина «Организация и регуляция физиолого-биохимических процессов» (Воронеж, 2006, 2007); 10-ой Пущинской школы-конференции молодых ученых «Биология-наука XXI века» (Пущино, 2006); V-й Международной научно-технической конференции «Техника и технология пищевых производств» (Могилев, 2006); Московском Международном форуме «Биотехнология и современность» (Санкт-Петербург, 2006); Всероссийской научной молодежной конференции «Основные направления функционального питания и безопасность пищевых продуктов» (Улан-Удэ, 2006); Общероссийской конференции молодых ученых «Пищевые технологии» (Казань, 2006-2007); четвертом Московском международном конгрессе «Биотехнология: состояние и перспективы развития» (Москва, 2007); 2-ом международном форуме «Актуальные проблемы современной науки» (Самара, 2006); V Всероссийской научно-практической конференции «Роль социальных, медико-биологических и гигиенических факторов в формировании здоровья населения» (Пенза, 2007), международной научно-практической конференции «Биотехнология. Вода и пищевые продукты» (Москва, 2008).

Данная работа была представлена на конкурс инновационных проектов в рамках Воронежского Промышленного Форума (2008 г.), отмечена дипломом, а также на конкурс молодых ученых, проходивший в рамках международной научно-практической конференции

Биотехнология. Вода и пищевые продукты», отмечена дипломом и медалью.

Публикации. По результатам проведенных исследований опубликовано 26 работ.

Структура и объем работы. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, обсуждения результатов, выводов, списка использованной литературы и представлена на 151 странице машинописного текста. Иллюстративный материал включает 36 рисунков и 24 таблицы. Библиография включает 182 наименований, в т. ч. 104 иностранных.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Божко, Ольга Юрьевна

выводы

1. В результате скрининга микроорганизмов выбран высокоактивный продуцент изомальтулозосинтазы - бактерии Е. rhapontici В-9292, каталитическая активность фермента - 3000 Е/г, что в 20-30 раз превышает значение таковой среди известных продуцентов фермента.

2. Подобраны оптимальные условия для глубинного культивирования бактерий Е. rhapontici и биосинтеза ими изомальтулозосинтазы, что позволило увеличить исходный уровень активности фермента в 1,5-2 раза.

3. Разработана схема очистки изомальтулозосинтазы, при которой удельная активность фермента составляет 3560 Е/мг белка. Установлено, что фермент является мономером с молекулярной массой 73,0±1,2 кДа.

4. Установлены оптимальные значения рН и температуры изомальтулозосинтазы, при которых фермент проявляет наибольшую стабильность. Оптимум рН и температурный оптимум составляют, соответственно, 6 и 30 °С.

5. Установлено, что фермент изомальтулозосинтаза проявляет высокое сродство к сахарозе (Кт= 62,5±1,02 мМ). Раффиноза, стахиоза, инулин, леван оказались полностью нереакционноспособными при действии фермента.

6. Разработаны рациональные условия процесса биотрансформации сахарозы свекловичного происхождения, а также тростникового сахара-сырца с использованием изомальтулозосинтазы, позволяющие увеличить выход изомальтулозы до 92 - 95 %.

7. Выявлено, что культивирование бифидобактерий Bifidobacterium bifidum in vitro на среде с содержанием изомальтулозы отличается высокой активностью их роста, уровнем накопления биомассы, продукцией органических кислот, что свидетельствует о пребиотических свойствах данного заменителя сахара.

8. Разработан гипотетический механизм бифидогенности изомальтулозы.

9. Получен натуральный заменитель сахара из источников растительного сырья, биотехнология которого может быть положена в основу его промышленного производства.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Исследован процесс трансформации сахарозы в изомальтулозу ИС Е. rhapontici В-9292. Установлены оптимальные условия трансформации сахарных растворов: величина рН 6,0, концентрация сахарозы 10 %, дозировка фермента 5 Е/мг сахарозы, температура 30 °С, продолжительность 3- 3,5 ч.

В работе показана возможность получения изомальтулозы из тростникового сахара-сырца. Применение в качестве сырья не только сахарозы свекловичного происхождения, но и тростникового сахара-сырца позволит снизить стоимость целевого продукта по сравнению с зарубежными аналогами, а также открывает широкую перспективу использования различных сахарозосодержащих источников растительного сырья с целью получения изомальтулозы.

ГЛАВА 5. ИССЛЕДОВАНИЕ ПРЕБИОТИЧЕСКИХ СВОЙСТВ

ИЗОМАЛЬТУЛОЗЫ

5.1. ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОЦЕССОВ РОСТА И РАЗВИТИЯ БИФИДОКУЛЬТУРЫ НА СРЕДЕ С ИЗОМАЛЬТУЛОЗОЙ

Стремительное развитие нового направления в науке о питании -функционального питания - требует создания заменителей сахара нового поколения - не только обладающих чистым сладким вкусом, безопасностью и высокими технологическими характеристиками, но и способных проявлять функциональные свойства, т. е. оказывать положительное регулирующее воздействие на организм в целом, либо на его отдельные органы и системы [4, 22, 27, 30, 36].

В последнее время, после открытия специфического биологического действия некоторых сахарозаменителей (неусваиваемых) и особой их ценности для здоровья человека они стали предметом специального изучения. Было установлено, что некоторые неусваиваемые углеводы являются пребиотиками - веществами, которые не гидролизуются и не всасываются в верхней части желудочно-кишечного тракта, но являются субстратом для полезных бактерий, обитающих в толстом кишечнике. Как все пребиотики, эти вещества регулируют кишечную микрофлору, индуцируют полезные эффекты не только на уровне желудочно-кишечного тракта, но и организма в целом, способствуя поддержанию иммунной системы человека [25, 76].

Известно, что бифидобактерии являются наиболее значимыми представителями нормобиоценоза [10, 26, 37, 43, 44, 72]. В качестве объекта исследования служил типовой вид рода - Bifidobacterium bifidum. Это анаэробные микроорганизмы, морфологически представляющие собой крупные грамположительные неспорообразующие палочки с раздвоенными концами, способные к полиморфизму [21].

Ранее было показано, что бактерии В. bifidum способны к росту на средах с фруктозой, глюкозой, галактозой, лактозой и других углеводах [59]. Данные представлены в таблице 5.1.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Божко, Ольга Юрьевна, 2008 год

1. Азрилевич М.Р. Заменители сахара / М.Р. Азрилевич // Пищевые ингридиенты, сырье и добавки. 2002. - № 2. - С. 42-45.

2. Антипова Л.В. Прикладная биотехнология / Л.В. Антипова, И.А. Глотова, А.И. Жаринова. СПб.: ГИОРД, 2003. - 288 с.

3. Биология и микробиология : учебное пособие / Г.П. Шуваева и др.. Воронеж, гос. технолог, акад. Воронеж, 2003. - 300 с.

4. Богатырев А.Н. Качество пищи и культура питания / А.Н. Богатырев // Пищевая промышленность. 2006. - № 8. - С. 68-69.

5. Бугаенко И.Ф. Сахар и заменители // И.Ф. Бугаенко. М. : ООО «Телер», 2004. - 75 с.

6. Бугаенко И.Ф. Тростниковый сахар-сырец и его промышленная переработка на свеклосахарных заводах // И.Ф. Бугаенко, Г.И. Абрамова. -М. : ЦИНТИпищепром, 1964. 32 с.

7. Варфоломеев С.Д. Кинетические методы в биохимических исследованиях / С.Д. Варфоломеев, С.В. Зайцев. М. : Изд-во МГУ, 1982. -343 с.

8. Варфоломеев С.Д. Биокинетика : практический курс / С.Д. Варфоломеев, К.Г. Гуревич. М. : ФИР-ПРЕСС, 1999. - 720 с.

9. Влияние гликозидов сахарола на энергетический обмен у животных с нарушенной толерантностью к углеводам / И. Смоляр и др. // Вопросы питания. 1993. - № 1. - С. 38 - 39.

10. Выделение, идентификация и некоторые биологические свойства бифидобактерий из кишечника человека / С.Г. Карпушина и др. // Биотехнология. 1998. - № 2. - С. 28 - 36.

11. Галь Э. Электрофорез в разделении биологических макромолекул / Э. Гааль, Г. Медьеши, Л. Верецкеи. М. : Мир, 1982. - с. 149-258.

12. Ганина В.И. Пробиотики. Назначение, свойства и основы биотехнологии : монография / В.И. Ганина. М. : МГУПБ, 2001. - 169 с.

13. Гаппаров М.М. Новый подсластитель неогесперидин дигидрохалкон (цитроза) / М.М. Гаппаров // Пищевая промышленность. -1999.-№8.-С. 58.

14. Готтшалк Г. Метаболизм бактерий / Г. Готтшалк. М. : Мир, 1982.-310с.

15. Грачев Ю.П. Математические методы планирования экспериментов / Ю.П. Грачев. М. : Пищ. пром-ть. - 1979. - 192 с.

16. Грачев Ю.П. Математические методы планирования эксперимента / Ю.П. Грачев, Ю.М. Плаксин. М.: ДеЛи принт, 2005. - 296 с.

17. Диксон М. Ферменты. В 3-х т. / М. Диксон, Э. Уэбб. М. : Мир, 1982.- 1118 с.

18. Емцев В.Т. Микробиология / В.Т. Емцев, Е.Н. Мишустин. М. : Дрофа, 2006. - 444 с.

19. Жеребцов Н.А. Амилолитические ферменты в пищевой промышленности Текст. / Н.А. Жеребцов. М. : Легкая и пищевая пром-сть, 1984.- 160 с.

20. Жеребцов Н.А. Биохимия: учебник / Н.А. Жеребцов, Т.Н. Попова, В.Г. Артюхов. Воронеж : Изд. Воронежского гос. университета, 2002. -696 с.

21. Иммуностимулирующее влияние перорального введения бифидобактерий различных штаммов в эксперименте / Э.Н. Трушина и др. // Вопросы питания. 2006. - Т. 75. - № 5. - С. 70 - 74.

22. Казьмин В.Д. Диабет. Секреты его компенсации, профилактика, лечение осложнений / В.Д. Казьмин, З.В. Казьмин. М. : ИКЦ МарТ, 2004. -256 с.

23. Капрельянц Л.В. Неусваиваемые олигосахариды пищевые и функциональные добавки / Л.В. Капрельянц // Пищевые ингридиенты, сырье и добавки. - 2002. - № 1. - С. 36 - 38.

24. Капрельянц Л.В. Пребиотики и их роль в функциональном питании / Л.В. Капрельянц // Молочная промышленность. 2002. - № 1. -С. 44 - 46.

25. Капрельянц Л.В. Пребиотические пищевые ингредиенты. Современное состояние и перспективы / Л.В. Капрельянц // Продукты и ингредиенты. 2005. - № 6. - С. 60 - 62.

26. Квасников Е.И. Молочнокислые бактерии и пути их использования / Е.И. Квасников, О.А. Нестеренко. М. : Наука, 1975. - 384 с.

27. Киселева Т.Ф. Модификация ингредиентного состава пищевых продуктов для снижения гликемического индекса / Т.Ф. Киселева // Пищевая промышленность. 2006. - № 6. - С. 68 - 69.

28. Комаров В.И. К вопросу систематизации типовых пищевых добавок / В.И. Комаров, А.И. Гурьянов // Пищевая промышленность. 1998. -№ 7. - С. 64 - 65.

29. Корнеева О.С. Карбогидразы: препаративное получение, структура и механизма действия на олиго- и полисахариды / О.С. Корнеева. -Воронеж : Изд-во Воронежского гос. университета, 2001. 186 с.

30. Коррекция нарушения микробиоценоза человека с помощью пробиотиков / М.Ю. Волков и др. // Вопросы питания. 2006. - № 4. - С. 3234.

31. Крылова Э.Н. Сахарозаменители при производстве карамели / Э.Н. Крылова // Пищевая промышленность. 1999. - № 3. - С. 16.

32. Лакин Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин. М. : Высшая школа, 1990.352 с.

33. Ленинджер А. Основы биохимии. В 3-х т. / А. Ленинджер. М. : Мир, 1985.-975 с.

34. Лисицин В.Н. Новые технологии производства диабетических и диетических продуктов на основе продукции переработки растения стевии / В.Н. Лисицин, Е.Л. Воловик // Пища, вкус, аромат. 1999. - № 4. - С. 8 - 9.

35. Лисицин В.Н. Стевия источник здоровья и долголетия нации /

36. B.Н. Лисицин, И.П. Ковалев // Пищевые ингридиенты, сырье и добавки. -2004. № 2. - С. 46.

37. Лобыкина Е.Н. Гликемический индекс продуктов и использование его в диетотерапии ожирения / Е.Н. Лобыкина, В.З. Колтун, О.И. Хвостова // Вопросы питания. 2007. - Т. 76. - № 1.- С. 14 - 21.

38. Методы биохимического исследования растений / А.И. Ермаков и др.. М. : Изд-во сельскохозяйственной литературы, 1952. - С. 149 - 177.

39. Мешкова Н.П. Практикум по биохимии / Н.П. Мешкова,

40. C.Е. Северин. М. : МГУ, 1979. - 430 с.

41. Моделирование и оптимизация технологических процессов отрасли : практикум по курсу: учеб. пособие / А.И. Бывальцев, Н.М. Дерканосова, А.А. Журавлев. Воронеж, гос. технол. акад. Воронеж, 2004. -140 с.

42. Нечаев А.П. Пищевые добавки / А.П. Нечаев, А.А. Кочеткова, А.Н. Зайцев. М.: Колос, 2001.-256 с.

43. Нечаев А.П. Подсластители и сахарозаменители / А.П. Нечаев // Пищевая промышленность. 2003. - № 2. - С. 50.

44. Новик Г.И. Архитектоника популяций бифидобактерий: субмикроскопический аспект когезии клеток Bifidobacterium adolescentis и Bifidobacterium bifidum / Г.И. Новик, В.В. Высоцкий // Микробиология. -1995. Т. 64. - № 2. С. 222 - 227.

45. Новик Г.И. Исследование физико-биохимических особенностей бифидобактерий на поздних стадиях развития популяций / Г. И. Новик,

46. Н.И. Астапович, А.А. Самарцев // Микробиология. 2001. - Т. 70. - № 4. -С. 495-502.

47. Об использовании нового сахарозаменителя эритрита в диетотерапии больных сахарным диабетом 2 типа / Х.Х. Шарафетдинов и др. // Вопросы питания. 2002. - № 3. - С. 19-23.

48. Определитель бактерий Берджи. В 2-х т. М. : Мир, 1997. - Т. 1. -С. 180-252.

49. Оптимальная переработка сахара-сырца / А.Р. Сапронов и др. // Сахар. 2006. - № 9. - С. 48 - 49.

50. Орещенко А.В. Сунетт перспективный подсластитель на рынке диетических напитков / А.В. Орещенко, О.Г. Лысюк // Пищевая промышленность. - 1998. - № 3. - С. 22 - 23.

51. Остерман Л.А. Исследование биологических макромолекул / Л.А. Остерман. М. : Мир, 1983. - 233 с.

52. Очистка тростникового сахара-сырца с уменьшенным расходом извести / В.А. Лосева и др. // Сахар. 2007. - № 5. - С. 31-32.

53. Павлов М.Б. Еще раз об искусственных сахарозаменителях / М.Б. Павлов // Пищевая промышленность. 1999. - № 7. - С. 43 - 45.

54. Павлова Г.Н. Стевия источник натурального подсластителя продуктов питания Текст. / Г.Н. Павлова, Л.Д. Ершанова, Л.А. Алехина // Пищевая промышленность. - 1997. - № 5. - С. 9.

55. Пат. № 1011056. Способ получения изомальтулозы. К. Бак, П.С.Д. Читем. 1983, Бюл. № 13.

56. Пат. № 1022663. Способ энзиматического получения изомальтулозы. В. Крюгер, Л. Драт, М. Мунир. 1977, Бюл. № 21.

57. Пат. № 1512489. Способ получения изомальтулозы. М. Мунир. 1989, Бюл. № 36.

58. Пекич Б. Биосинтез декстранов штаммами Leuconostoc различного происхождения / Б. Пекич, JI. Вбрашки, М. Хаук // Прикладная биохимия и микробиология. 1991. - Т. 35. - № 6. - С. 866 - 870.

59. Пешкетова О.В. Подсластители / О.В. Пешкетова // Пищевая промышленность. 2001. - № 7. - С. 54-55.

60. Подбельцев Д.А. Влияние пребиотиков на морфологическую структуру слизистой оболочки толстой кишки крыс / Д.А. Подбельцев, Д.Б. Никитюк, A.J1. Поздняков // Вопросы питания. 2006. - № 2. - С. 26 - 29.

61. Практикум по микробиологии : учебное пособие / под ред. проф. Н.С. Егорова. М. : Изд-во Московск. ун-та, 1976. - С. 275 - 281.

62. Применение бактерийных биологических препаратов в практике лечения больных кишечными инфекциями. Диагностика и лечение дисбактериоза кишечника : метод, рекомендации. М. : Минздрав СССР, 1986.-№ 10-11/31.-С. 14-23.

63. Путнам Ф. Денатурация белков / Ф.Путнам. М.: Мир,- 1984.24 с.

64. Роуз Э. Химическая микробиология / Э. Роуз. М. : Мир, 1971.294 с.

65. Рубин А.Б. Биофизика. В 2-х т. / А.Б. Рубин. М. : Книжный дом «Университет», 1999. - Т. 1. - 448 с.

66. Рухлядева А.П. Методы определения активности гидролитических ферментов / А.П. Рухлядева, Г.В. Полыгалина. М. : Легкая и пищевая промышленность, 1981. - 288 с.

67. Скоупс Р. Методы очистки белков / Р. Скоупс. М. : Мир, 1985.358 с.

68. Слюсаренко Т.П. Лабораторный практикум по микробиологии и пищевых производств / Т.П. Слюсаренко. М. : Легкая пром-ть, 1984. - 208 с.

69. Смолянский Б.Л. Лечение сахарного диабета / Б.Л. Смолянский,

70. B.Г. Лифляндский. СПб. : Издательский Дом Нева, 2004. - 384 с.

71. Стевиозид натуральный подсластитель / Г.О. Магомедов и др. // Кондитерское производство. - 2004. - № 1. - С. 14 - 15.

72. Сулимина О.Г. Сладкая альтернатива / О.Г. Сулимина // Пищевая промышленность. 1994. - № 11. - С. 20.

73. Сулимина О.Г. Функциональный углевод палатиноза / О.Г. Сулимина // Пищевая промышленность. 2007. - № 1. - С. 22.

74. Характеристика полисахаридов, секретируемых Bifidobacterium adolescentis 94 БИМ / Г. И. Новик и др. // Микробиология. 2002. - Т. 71. -№ 2. С. 205 - 210.

75. Хиль Г.Н. Подслащивающие вещества в пищевой промышленности за рубежом / Г.Н. Хиль // Пищевая промышленность. -1986.-№4.- С. 61 -62.

76. Чернышев Г.А. Вероятность и статистика в биологии и химии / Г.А. Чернышев, В.Н. Стариков. Воронеж: ВГУ, 1998 - 270 с.

77. Шевелева С.А. Пробиотики, пребиотики и пробиотические продукты / С.А. Шевелева // Вопросы питания. 1999. - № 2. - С. 32 - 39.

78. Шендеров Б.А. Пробиотики, пребиотики и синбиотики / Б.А. Шендеров // Пищевые ингридиенты, сырье и добавки. 2005. - № 2.1. C. 23 26.

79. Шлегель Г. Общая микробиология / под ред. Е.Н. Кондратьевой. М. : Мир, 1987. - 567 с.

80. Шубина О. Г. Пищевые ингридиенты как замена сахара / О.Г. Шубина, А.А. Кочеткова // Пищевые ингридиенты, сырье и добавки. -2006. № 2. - С. 24 - 27.

81. A revision of current data and views on membrane hydrolysis and transport in the mammalian small intestine based on a comparison of techniques of chronic and acute experiments: experimental reinvestigation and critical review /

82. А. М. Ugolev et al. // Сотр. Biochem. Physiol. 1986. - V. 85. - № 4. P. 593 -612.

83. Assessment of acid production by various human oral microorganisms when palatinose or leucrose is utilized / H.C. Peltroche-Llacsahuanga et al. // Journal of Dental Research. 2001. - V. 80. - P. 378 - 384.

84. Avigad G. Synthesis of glucosylfructoses by the action of a yeast alpha-glucosidase / G. Avigad // Biochemical Journal. 1959. - V. 73. - P. 587 -593.

85. Bhosale S.H. Molecular and industrial aspects of glucose isomerase / S.H. Bhosale, M.B. Rao, V.V. Deshpande // Microbiol. Rev. 1996. - V. 60. - № 2. -P. 280 -300.

86. Bornke F. Cloning and Charactirization of the Gene Cluster for Palatinose Metabolism from the Phytopathogenic Bacterium Erwinia rhapontici / F. Bornke, M. Hajirezaei, U. Sonnewald // Journal of Bacteriology. 2001. - V. 183.-№8.-P. 2425 -2430.

87. Bornke F. Potato tubers as bioreactors for palatinose production / F. Bornke, M. Hajirezaei, U. Sonnewald // Biotechnology. 2002. - V. 96. - № 1. - P. 119-124.

88. Bourne E.J. Oligosaccharides in dextran-producing cultures of Streptococcus bovis / E.J. Bourne, D.H. Hutson, H. Weigel // Biochem. J. 1961. -V. 79.-P. 549 - 553.

89. Cariogenicity of isomaltulose (palatinose), sucrose and mixture of these sugars in rats infected with Streptococcus mutans E-49 / N. Sasaki et al. // Swed. Dent. J. 1985. - V. 9. - P. 149 - 155.

90. Cheetham P.S.J. The formation of isomaltulose by immobilized Erwinia rhapontici / P.S.J. Cheetham, C.E. Imber, J. Isherwood // Nature. 1982. -V. 299. - P. 628 - 631.

91. Cheetham P.S.J. The extraction and mechanism of a noval isomaltulose-synthesizing enzyme from Erwinia rhapontici / P.S.J. Cheetham // Biochem. J. 1984. - V. 220. - P. 213 - 220.

92. Cheetham P.S.J. Isomaltulose production using immobilized cells / P.S.J. Cheetham, G. Clark, J. Clark//Biotechnol Bioeng. 1985. - V. 27. - P. 471 -481.

93. Cheetham P.S.J. Production of isomaltulose using immobilized microbial cells / P.S.J. Cheetham // Meth Enzymol. 1987. - V. 136. - P. 432 - 454.

94. Chen H.-L. Effects of Isomalto-Oligosaccharides on Bowel Functions and Indicators of Nutritional Status in Constipated Elderly Men / И.-L. Chen, Y.-H. Lu // Journal of the American College of Nutrition. 2001. - V. 20. - № 1. - P. 44 - 49.

95. Coudray C. Effects of Dietary Fibers on Magnesium Absorption in Animals and Humans / C. Coudray, C. Demigne, Y. Rayssiguier // J. Nutr. 2003. -V. 133.-P. 1 -4.

96. Draper N. R. «Ridge analysis» of Response Surfaces / N. R. Draper // Technometrics. 1963. - № 4, 5. - P. 3 - 18.

97. Elling L. Investigation of sucrose synthase from rice for the synthesis of various nucleotide sugars and saccharides / L. Elling, M Grothus // Glycobiology. 1993. - V. 3. - P. 349 - 355.

98. Enhanced conversion of sucrose to isomaltulose by a mutant of Erwinia rhapontici / S-J. Ahn et al. // Biot. Letter. 2003. - V. 25. - № 14. - P. 1179- 1183.

99. Expression, purification, crystallization and preliminary X-ray crystallographic studies of the trehalulose synthase MutB from Pseudomonasmesoacidoghila MX-45 / S. Ravaud et al. // Acta Cryst. 2005. - V. 61. - P. 100 -103.

100. Extron J.H. Control of gluconeogenesis in liver. General features of gluconeogenesis in the perfused livers of rats / J.H. Extron, C.R. Park // J. Biol. Chem. 1967. - № 242. - P. 2622 - 2636.

101. Fujisawa T. Intestinal absorption of fructose in the rat / T. Fujisawa, J. Riby, N. Kretchmer // Gastroenterology. 1991. - V. 101. - P. 360 - 367.

102. Glinsmann W.H. Evaluation of health aspects of sugars contained in carbohydrate sweeteners. Report of Sugar Task Force / W.H. Glinsmann, H.Irausquin, Y.K. Park // J. Nutr. 1986. - V. 116. - P. 48 - 92.

103. Goda T. Hydrolysis of palatinose by rat intestinal sucrase-isomaltase complex / T. Goda, N. Hoyosa // Nihon Eiyo Shokuryo Gakkaishi. 1983. - V. 36. -P. 169- 173.

104. Goda T. Hydrolysis of palatinose condensates by rat intestinal disaccharidases / T. Goda, S. Takase, N. Hosoya // Nihon Eiyo Shokuryo Gakkaishi. 1991. - V. 44. - № 5. - P. 395 - 398.

105. Godshall M.A. How carbohydrates influence food flavors / M.A. Godshall // Food Technol. 1997. - V. 51. - P. 63 - 66.

106. Goulfi K. Disaccharides as a new class of nonaccumulated osmoprotectants for Sinorhizobium meliloti / K. Goulfi, N. Pica, V. Pichereau, C. Blanco // Appl. Environ. Microbiol. 1999. - V. 65. - P. 1491 - 1500.

107. Hashimoto H. Glucosylation of methyl (3-D-arabinofuranoside with 6'-chloro-6'-deoxysucrose and immobilized Protaminobacter rubrum / H. Hashimoto, K. Yamada, О Yoshimura // Biotechnol. Lett. 1987. - № 9. - P. 849 - 854.

108. Hers H.G. Fructokinase of the liver/ H.G. Hers // Biochim. Biophys. Acta. 1952. - V. 8. - P. 416 - 423.

109. Hers H.G. Triokinase / H.G. Hers // Academic Press. New York. Methods in enzymology. 1962. - V. 5. - P. 362-364.

110. Heuvel E. Oligofructose stimulates calcium absorption in adolescents 1,2,3 / E. Heuvel, T. Muys, W. Dokkum, G. Schaafsma // American Journal of Clinical Nutrition. 1999. - V. 69. - № 3. - P. 544 - 548.

111. Huang J.H. Conversion of sucrose to isomaltulose by Klebsiella planticola CCRC 19112 / J.H. Huang, L.H. Hsu, Y.C. Su // Journal of Industrial Microbiology and Biotechnology. 1998. - V. 21. - P. 22 - 27.

112. Interaction of structural isomers of sucrose in the reaction between sucrose and glucosyltransferases from mutants streptococci / T. Minami et al. // Oral Microbiol. 1990. - V. 5. - P. 189 - 194.

113. Isolation and characterization of a trehalulose-producing strain of Agrobacterium / J. Nagai Miyata et al. // Biosci. Biotechnol. Biochem. - 1993. -Y. 57. - P. 2049-2053.

114. Isolation and characterization of isomaltulose- and trehalulose -producing bacteria from Thailand soil / K. Tsuyulci et al. // J. Gen. Appl. Microbiol. 1992. - V. 38. - P. 483 - 490.

115. Isolation and characterization of oligosaccharides produced from sucrose by transglucosylation action of Serratia plymuthica / S. Fujii et al. // Nippon Shokuhin Kogyo Gakkaishi. 1983. - V. 30. - P. 339 - 344.

116. Isolation and characterization of Pseudomonas mesoacidoghila producing trehalulose / Y. Miyata et al. // Biosci. Biotechnol. Biochem. 1992. -V. 54.-P. 1680-1681.

117. Isomaltulose Synthase (Pall) of Klebsiella sp. LX3 / D. Zhang et al. // J. Biol. Chem. 2003. - V. 278. - № 37. - P. 35428 - 35434.

118. Kawaguti H.Y. Production of glucosyltransferase by Erwinia sp. using experimental design and response surface methodology / H.Y. Kawaguti,

119. E.Manrich, L.F. Fleuri, H.H. Sato // Brazillian journal of Microbiology. 2005. -V. 36.-P. 227-234.

120. Kawai K. Changes in blood glucose and insulin after an oral palatinose administration in normal subjects / K. Kawai, Y. Okuda, K. Yamashita // Endocrinol. Jpn. 1985. - V. 32. - P. 933 - 936.

121. Klebsiella singaporensis sp. a novel isomaltulose-producing bacterium / X. Li et al. 11 Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 2004. - V. 54. - P. 2131 -2136.

122. Krastanov A. Conversion of sucrose into palatinose in a batch and continuous processes by immobilized Serratia plymutica cells / A. Krastanov, D. Blazheva, I. Yanakieva, M. Kratchanova // Enzyme and Microbial Technology. -2006.-V. 39.-P. 1306- 1312.

123. Kuramitsu H.K. Molecular genetic analysis of the virulence of oral bacterial pathogens: an historical perspective / H.K. Kuramitsu // Crit. Rev. Oral Biol. Med. 2003. - V. 14. - № 5. - P. 331 - 344.

124. Laemli U.K. SDS-electrophoresis / U.K. Laemli // Nature. 1970. -V. 227. - P. 680 - 685.

125. Levi B. Long-term fructose consumption accelerates glycation and several age-related variables in male rats / B. Levi, M.J. Werman // J. Nutr. 1998. - V. 128. - № 9. - P. 1442 - 1449.

126. Li X. Substrate induction of isomaltulose synthase in a newly isolated Klebsiella sp. LX3 / X. Li, C. Zhao, Q. An, D. Zhang // Journal of Applied Microbiology. 2003. - V. 95. - P. 521 - 527.

127. Lichtenthaler F.W. a-D-Glucopyranosyl-D-fructoses: distribution of furanoid and pyranoid tautomers in water, dimethyl sulfoxide, and pyridine / F.W. Lichtenthaler, S. Ronninger // J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1990. - V. 2. - P. 1489- 1497.

128. Lina B.A.R. Embryotoxicity / teratogenicity study with isomaltulose (palatinose) in rats / B.A.R. Lina, S. Prooije, W. Berendsen // Food Chem Toxicol. -1997. -V. 35. P. 309-314.

129. Lina B.A.R. Isomaltulose (Palatinose): a review of biological and toxicological studies / B.A.R. Lina, D. Jonker, G. Kozianowski // Food and Chemical Toxicology. 2002. - V. 40. - P. 1375 - 1381.

130. Lowry O.H. Protein estimation with folin phenol reagent /

131. H. Lowry, N.J. Resebrough, A.L. Farr, R.J. Randell // J. Biol. Chem. 1951. -V. 193.-№ l.-P. 265 -275.

132. Lund B.M. Nature of reducing compounds formed from sucrose by Erwinia carotovora var. atroseptica / B.M. Lund, G.M. Wyatt // Journal of General Microbiology. 1973. - V. 78. - P. 331 - 336.

133. MacDonald I. The bioavailability of isomaltulose in man and rat /

134. MacDonald, J.W. Daniel // Nutr. Rep. Int. 1983. - V. 28. - № 5. - P. 1083 -1090.

135. Mann M. Mass spectrometric sequencing of proteins from silver-stained polyacrylamide gels / M. Mann // Anal. Chem. 1996. - V. 68. - № 5. - P. 850-858.

136. Matthysse A.G. Attachment of Rhizobiaceae to plant cells / A.G. Matthysse, J.W. Kijne // Kluwer Academic Publishers, Dordrecht. 1998. -P. 235 - 249.

137. Mayes P.A. Effects of acute and long-term fructose administration on liver lipid metabolism / P.A. Mayes, M.E. Laker // Progress in Biochemical Pharmacology. 1986. - V. 21. - P. 33 - 58.

138. Mayes P.A. Intermediary metabolism of fructose / P.A. Mayes // Am. J. Clin. Nutr. 1993. - V. 58. - P. 754 - 765.

139. McAllister M. The isomaltulose-synthesizing enzyme of Serratia plymuthica / M. McAllister, C.T. Kelly, E. Doyle, W.M. Fogarty // Biotechnol. Lett. 1990. - V. 12. - P. 667 - 672.

140. Munir M. 1-0-alpha-d-glucopyranosyl-d-fructose: Preparation from saccharose and reduction to 1-Oalpha-d-glucopyranosyl-d-glucitol / M. Munir, B. Schneider, H. Schiweck // Carbohydrate Research. 1987. - V. 164. - P. 477 -485.

141. Nagai Y. Characterization of a-glucosyltransferase from Pseudomonas mesoacidophila MX-45 / Y. Nagai, T. Sugitani, K. Tsuyuki // Biosci.Biotech.Biochem. 1994. - V. 58. - № 10. - P. 1789 - 1793.

142. Nakajima Y. Manufacture and utilization of palatinose / Y. Nakajima //J. Jpn. Soc. Starch. Sci. 1988. - V. 35. - P. 131 - 139.

143. New developments in the use of sucrose as an industrial bulk chemical / H. Schiweek et al. // Carbohydrates as Organic Raw Materials ed. Lichtenthaler F.W. 1991. - P. 57 - 94.

144. Non cariogenicity of the disaccharide palatinose in experimental dental caries of rats / T. Ooshima et al. // Infect. Immun. - 1983. - V. 39. - P. 43 -49.

145. Palatinose a sucrose substitute / I. Takazoe et al. // Swed. Dent. J. -1985.-V. 9.-P. 81 -87.

146. Park Y.K. Conversion of sucrose to isomaltulose by microbial glucosyltransferase / Y.K. Park, R.T. Uekane, A.M. Pupin // Biot. Letter. 1992. -V. 14.-№7.-P. 547- 551.

147. Park Y.K. Biochemical characterization of a microbial glucosyltransferase that converts sucrose to palatinose / Y.K. Park, R.T. Uekane, H.H. Sato // Revista De Microbiologia. 1996. - V. 27. - P. 131 - 136.

148. Pat. № 082555 (U.S.) Process of the production of isomaltulose and other products. H. Heikkila, M. Sarkki, M. Lindroos, P. Ojala, V. Ravanko, M. Tylli. 2000.

149. Pat. № 201462 (U.S.) Production of isomaltulose. C. Burcke, P.S.J. Cheetham. 1982.

150. Pat. № 21252 (U.S.) Glucopyranosido-l,6~mannitol, a process for producing the same and its use as a sugar substitute. H. Schiweck, G. Steinle, L. Muller, W. Gau, M. Munir. 1980.

151. Pat. № 4670387 (U.S.) Fermentative production of isomaltulose. C. Bucke, P.S.J. Cheetham.

152. Pat. № 5786140 (U.S.) DNAs encoding sucrose isomerase and palatinase. R. Mattes, K. Klein, H. Schiwech, M. Kunz, M. Munir. 1998.

153. Pat. № 59002695. Production of isomaltulose by use of immobilized bacterial cell. M. Muniiru. 1984.

154. Pat. № 7618381. Enzyme and production of isomaltulose. K. Carl, S-K. Gunter, S. Hermann. 1982.

155. Pat. № 8124779. Method of producing am immobilized alpha-glucosyltransferase useful in the production of palatinose from sucrose. J. Shimizu, K. Suzuki, Y. Nakajima. 1982.

156. Pat. № 82109404.2 Immobilization of the sucrose mutase in whole cells of Protaminobacter rubrum. O.J. Lantero. 1983.

157. Pat. № 857808 (U.S.) Immobilization of microorganisms on weakly basic anion exchange substance for producing isomaltulose. M. Sarkki, H. Heikkila, T. Viljava. 1999.

158. Phosphorylation and metabolism of sucrose and its five linkage-isomeric alpha-D-glucosyl-D-fructoses by Klebsiella pneumoniae / J. Thompson et al. // Carbohydr. Res. 2001. - V. 331. - № 2. - P. 149 - 161.

159. Pikis A. Metabolism of sucrose and its five isomers by Fusobacterium mortiferum / A. Pikis, S. Immel, S.A. Robrish, J. Thompson // Microbiology. 2002. - V. 148. - P. 843 - 852.

160. Rumessen J.J. Absorption capacity of fructose in healthy adults. Comparison with sucrose and its constituent monosaccharides / J.J. Rumessen, E. Gudmand-Hoyer//Gut. 1986.-V. 27.-№ 10. P. 1161 - 1168.

161. Salvucci M.E. Distinct sucrose isomerases catalyze trehalulose synthesis in whiteflies, Bemisia argentifolii and Erwinia rhapontici / M.E. Salvucci // Comparative Biochem. and Physiology. 2003. - V. 135. - P. 385 -395.

162. Schlosser A. MsiK-dependent trehalose uptake in Streptomyces reticuli / A. Schlosser // FEMS Microbiol. Lett. 1999. - V. 184. - P. 187 -192.

163. Schmidt-Berg-Lorenz S. Ein weiterer isomaltulose bildener bakterienstamm / S. Schmidt-Berg-Lorenz, W. Mauch // Zeilschrifi Zuckerindustrie. 1964. - B. 14. - S. 625 - 627.

164. Shevchenko A. Mass spectrometric sequencing of proteins from silver-stained polyacrylamide gels / A. Shevchenko, M. Wim, O. Vorm, M. Mann // Anal. Chem. 1996. - V. 68. - № 5. - P. 850 - 858.

165. Smith M.M. Carbohydrate absorption from fruit juice in young children / M. M. Smith, M. Davis, F. I. Chasalow, F. Lifshitz // Pediatrics. 1995. -V. 95. - № 3. - P. 340-344.

166. Somogyi M.J. Determination of reducing sugar / M.J. Somogyi // J. Biol. Chem. 1952. - V. 195. - P. 19 - 23.

167. Stodola F.H. The preparation, properties and structure of the disaccharide leucrose / F.H. Stodola, E.S. Sharp, H.J. Koepsell // Journal of the American Chemical Society. 1956. - V. 78. - P. 2514 - 2518.

168. Takazoe I. New trends on sweeteners in Japan / I. Takazoe // Int. Dent. J. 1985. - V. 35. - P. 58 - 65.

169. Takazoe I. Palatinose an isomeric alternative to sucrose / I. Takazoe // Progress in Sweeteners ed. Grenby Т.Н. - 1989. - P. 143 - 167.

170. Thermostabilization praline substitution in an alkaline, liquefying alfa-amylase from Bacillus sp. strain KSM-1378 / K. Igarashi et al. // Biosci. Biotechnol. Biochem. 1999. - V. 63. - P. 1535 - 1540.

171. Topitsoglou V. Effect of frequent rinses with isomaltulose (palatinose) solution on acid production in human dental plaque / V. Topitsoglou, N. Sasaki, G. Frostell // Caries Res. 1984. - V. 18. - P. 47 - 51.

172. Trehalulose does not induce dental caries in rats infected with mutants streptococci / T. Ooshima et al. // Caries Res. 1991. - V. 25. - P. 277 -282.

173. Usefulness of palatinose as a caloric sweetener for diabetic patiens / K. Kawai et al. // Horm. Metab. Res. 1989. - V. 21. - P. 338 - 340.

174. Van den Berghe G. Fructose metabolism and short-term effects on carbohydrate and purine metabolism pathway / G. Van den Berghe // Progress in Biochemical Pharmacology. 1986. - V. 21. P. 1 - 32.

175. Veronese T. Mechanism of sucrose conversion by the sucrose isomerase of Serratia plymuthica ATCC 15928 / T. Veronese, P. Perlot // Enzyme Microb. Technol. 1999. - V. 24. - P. 263 - 269.

176. Veronese T. Proposition for the biochemical mechanism occurring in the sucrose isomerase active site / T. Veronese, P. Perlot // FEBS Letters. 1998. -V. 441.-P. 348-352.

177. Veronese Т. Rapid method for trehalulose production and its purification by preparative high-performance liquid chromatography / T. Veronese, A. Bouchu, P. Perlot // Biotechnol. Techniques. 1999. - V. 13. - P. 43 -48.

178. Vieille C. Thermozymes: identifying molecular determinants of protein structural and functional stability / C. Vieille, J.G. Zeikus // Trends Biotechnol. 1996. - V. 14. - P. 183 - 190.

179. Weidenhagen R. Palatinose 6-(-a-Glucopyranoside)-fractofuranose., ein neues bakterielles Umwadlungsprodukt der Saccharose / R. Weidenhagen, S. Lorenz// Z. Zuckerindust. 1957. - B. 7. - S. 533 - 534.

180. Wu L. Characterization of Pantoea dispersa UQ68J: producer of a highly efficient sucrose isomerase for isomaltulose biosynthesis / L. Wu, R. Birch // Journal of Applied Microbiology. 2004. - V. 97. - P. 93 - 103.

181. Wu L. Doubled sugar content in sugarcane plants modified to produce a sucrose isomer / L. Wu, R. Birch // J. Plant Biotechnology. 2007. -№5.-P. 109- 117.

182. Zhang D. Isomaltulose synthase from Klebsiella sp. strain LX3: gene cloning and characterization and engineering of termostability / D. Zhang, X. Li, L-H. Zhahg // Applied and Environmental Microbiology. 2002. - V. 68. - № 6. -P. 2676 - 2682.

183. Ziesenitz S.C. Cariological assessment of leucrose D-glucopyranosyl-a-(l-5)-D-fructopyranose. as a sugar substitute / S.C. Ziesenitz, G. Siebert, T. Imfeld// Caries Res. 1989. - V. 23. - P. 351 - 357.