Биосинтез полиненасыщенных жирных кислот и их производных тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат технических наук Давлетбаев, Игорь Маратович
- Специальность ВАК РФ03.00.23
- Количество страниц 102
Оглавление диссертации кандидат технических наук Давлетбаев, Игорь Маратович
ВВЕДЕНИЕ
1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.
1.2. Биологические функции и области применения арахидоновой кислоты
1.2.L Области применения арахидоновой кислоты.
1.3. Распространение и получение арахидоновой кислоты
1.3.1. Основные промышленные источники получения арахидоновой кислоты .^.
1.3.2. Альтернативные источники получения арахидоновой кислоты
1.3.3. Получение арахидоновой кислоты с помощью генетически модифицированных растений
1.4. Обработка полиненасыщенных жирных кислот микробного происхождения.
1.4.1. Стабильность полиненасыщенных жирных кислот.
1.4.2. Методы разделения полиненасыщенных жирных кислот
1.4.4. Концентрирование полиненасыщенных жирных кислот и их разделение
1.4.5. Другие потенциально полезные методы концентрирования и очистки полиненасыщенных жирных кислот
Рекомендованный список диссертаций по специальности «Биотехнология», 03.00.23 шифр ВАК
Разработка метода получения полиненасыщенных жирных кислот2007 год, кандидат технических наук Рахматуллина, Юлия Рашитовна
Разработка биокаталитических методов получения (R)- и (S)-энантиомеров 1-фенилэтанола и эйкозапентаеновой кислоты2008 год, кандидат технических наук Калимуллина, Лилия Ягфарьевна
Оптимизация процесса биосинтеза арахидоновой кислоты грибами Mortierella alpina из глицерин-содержащих субстратов2022 год, кандидат наук Миронов Алексей Александрович
Липиды в морфогенетических процессах, диморфизме и адаптации мицелиальных грибов2009 год, доктор биологических наук Мысякина, Ирина Сергеевна
Биосинтез лимонной кислоты дрожжами Yarrowia lipolytica из глицерин-содержащих отходов производства биодизельного топлива2011 год, кандидат биологических наук Фатыхова, Алина Ринатовна
Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биосинтез полиненасыщенных жирных кислот и их производных»
Полиненасыщенные жирные кислоты представляют собой уникальный класс органических веществ, играющих важную роль в биологических системах. Исследования последних трех десятилетий вскрыли широкий спектр их функций в живых организмах. ПНЖК подвергаются биотрансформации липоксигеназами или циклооксигеназами, что приводит к образованию многочисленных низкомолекулярных регуляторов процессов, протекающих в клетках, тканях и организме в целом. Одной из самых важных ПНЖК является АК, которая выступает в роли непосредственного предшественника серии простагландинов, лейкотриенов и тромбоксанов. Основными областями применения АК являются: фармакология (предшественник различных лекарственных и профилактических препаратов применяемых при заболеваниях сердечно-сосудистой системы, печени и др.); косметическая промышленность (средства по уходу за кожей); пищевая промышленность (обогащение различных продуктов питания, в том числе искусственных детских молочных смесей и др.); сельское хозяйство (высокоэффективный стимулятор роста и защитных реакций растений) и др. В настоящее время основным источником получения АК являются липидные экстракты из печени свиньи и других органов животных, что делает их крупномасштабное производство неэффективным (содержание АК оставляет не более 0,2% в пересчете на сухую массу). В течение последних двадцати лет значительные успехи были достигнуты в области биотехнологического получения АК с помощью низших грибов и морских водорослей, которые в ряде случаев позволили осуществить ее промышленное производство. Однако существующие на сегодняшний день биотехнологии получения АК далеки от совершенства, поскольку ее выход в лабораторных условиях в лучших случаях составляет 13 г/л (Япония), а в среднем у различных исследователей около 6-10 г/л (Россия, США, Польша и др.). В связи с этим актуальным является поиск и создание отечественных продуцентов АК и эффективных биотехнологий ее получения на их основе.
Данная работа была выполнена по планам важнейших НИР Уфимского государственного нефтяного технического университета (УГНТУ) в соответствии с федеральной целевой программой "Государственная поддержка интеграции высшего образования и фундаментальной науки" на 1997-2001 гг. и 20022006 гг.
Целью данной работы являлось получение новых высокоэффективных продуцентов АК, поиск условий их эффективного культивирования с целью повышения выхода целевого продукта. Совершенствование биотехнологии получения АК. Создание методов биосинтеза практически важных веществ на ее основе.
В соответствии с поставленной целью решались следующие задачи:
- скрининг микроорганизмов потенциальных продуцентов АК;
- исследование морфологических, физиолого-биохимических и патогенных свойств найденных перспективных продуцентов;
- исследование влияния условий культивирования перспективных штаммов на выход биомассы, липидов и АК;
- поиск условий биосинтеза сложных эфиров АК и глицерина с помощью липолитических микроорганизмов;
- обоснование принципиальной схемы получения АК с использованием найденных перспективных штаммов.
В результате выполненных исследований при проведении скрининга микроорганизмов, был выделен и идентифицирован новый высокоэффективный штамм - продуцент АК - Mortierella alpina 18-1. Исследовано влияние условий его культивирования на скорость и селективность биосинтеза АК. Найдены параметры осуществления эффективного биосинтеза АК с выходом 10,8 г/кг среды при температуре 20-25 °С, рНнач.^6,5-7,0 и времени культивирования 19 суток на базе штамма Mortierella alpina 18-1. На основе исследования промежуточных метаболитов, зависимости их выхода от условий культивирования предложена гипотетическая схема биосинтеза ПНЖК у исследуемой культуры гриба Mortierella alpina 18-1. Установлены условия синтеза сложного эфира АК и глицерина с помощью липолитических микроорганизмов.
Таким образом, в результате проведенных исследований разработан высокоэффективный метод получения АК с помощью выделенного продуцента Mortierella alpina 18-1 и научно обоснована биотехнология ее получения. Доказана эффективность разработанной биотехнологии, обеспечивающей возможность получения АК с выходом до 10,8 г/кг среды. Разработан метод биосинтеза сложного эфира АК и глицерина, используемого в фармакологии, косметике. Результаты научных исследований легли в основу создания новых лабораторных работ и используются в учебном процессе подготовки специалистов по специальности "Биотехнология" (прил. А).
Диссертация включает введение, обзор литературы (глава 1), описание объектов и методов исследования (глава 2), экспериментальную часть и обсуждение результатов (глава 3), выводы и список цитируемой литературы, содержащий 128 наименований. Работа изложена на 102 страницах машинописного текста и содержит 29 рисунков и 10 таблиц.
Похожие диссертационные работы по специальности «Биотехнология», 03.00.23 шифр ВАК
Биокаталитические системы на основе иммобилизованных клеток гриба Rhizopus oryzae: Способы получения и свойства2006 год, кандидат химических наук Спиричева, Ольга Васильевна
Эколого-биотехнологические аспекты конверсии растительных субстратов2002 год, доктор биологических наук Саловарова, Валентина Петровна
Скрининг продуцентов гиполипидемических соединений2005 год, кандидат биологических наук Чмель, Ярослава Валентиновна
Биокаталитическое получение акрилата аммония2005 год, кандидат биологических наук Полтавская, Светлана Викторовна
Научно-практические аспекты технологии модификации растительных масел для жировых продуктов с функциональными свойствами2012 год, доктор технических наук Шеламова, Светлана Алексеевна
Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Давлетбаев, Игорь Маратович
выводы
1. В результате обширного скрининга микроорганизмов, способных синтезировать АК, выделен и охарактеризован штамм Mortierella alpina 18-1, являющийся эффективным продуцентом АК.
2. Осуществлена оптимизация основных параметров биосинтеза АК и найдены условия: температура, рНнач., продолжительность культивирования, позволяющие осуществить эффективный рост Mortierella alpina 18-1 при поверхностном культивировании на глюкозо-картофельной среде.
3. Показано, что биостимуляторы кинетин, индолилуксусная кислота и эргостерин позволяют увеличить выход АК в расчете на единицу объема питательной среды при поверхностном культивировании. При этом наибольший эффект оказывает кинетин.
4. Показано, что при выращивании на обогащенной источником углерода среде (картофель - 600 г/л, глюкоза - 6%) с отношением площади поверхности к объему питательной среды равной 12 обеспечивается максимальный выход АК на уровне 10,8 г/кг среды.
5. Идентифицированы промежуточные метаболиты (олеиновая, линолевая, у-линоленовая и дигомо-у-линоленовая кислоты) на пути превращения стеариновой кислоты в АК. Предложена гипотетическая схема биосинтеза основных полиненасыщенных жирных кислот у гриба Mortierella alpina 18-1.
6. Установлено влияние вида и количества инокулята на рост и синтез липидов штамма Mortierella alpina 18-1. Показано, что оптимальным видом инокулята является мицелий, вносимый в количестве 2,5% от объема питательной среды.
7. Показана возможность получения практически важного сложного эфира АК и глицерина с помощью липолитических микроорганизмов.
8. На основе проведенных исследований предложена принципиальная технологическая схема биосинтеза и выделения АК с использованием найденного штамма Mortierella alpina 18-1.
Заключение
Увеличение спроса на АК а также другие ПНЖК привело к разрыву между текущим уровнем их производства из традиционных источников (растения, рыбы, млекопитающие) и потребностью в них рынка. Подобная ситуация стимулировала поиск альтернативных источников их получения, таких как водоросли, грибы и бактерии.
Наиболее перспективным источником АК на сегодняшний день являются грибы рода Mortierella. Однако, несмотря на значительные успехи в области получения АК с помощью различных штаммов Mortierella alpina приведшие в ряде случаев к промышленному их использованию и ненасыщенности рынка этим продуктом весьма актуальным является поиск способов понижения стоимости липидов содержащих АК получаемых биотехнологическими путем и популяризация продуктов обогащенных ею. Основными направлениями в этой области являются: поиск новых штаммов продуцентов и создание мутантов на основе уже имеющихся синтетиков АК, поиск дешевых субстратов и оптимизация условий культивирования найденных продуцентов, поиск активаторов и ингибиторов десатураз, сокращение этапов и совершенствование обработки микробных липидов.
Настоящая работа была направлена на получение новых высокоэффективных продуцентов АК, поиск условий их эффективного культивирования с целью повышения выхода целевого продукта, совершенствование биотехнологии получения АК, создание методов биосинтеза практически важных веществ на ее основе путем: скрининга микроорганизмов потенциальных продуцентов АК; исследования морфологических, физиолого-биохимических и патогенных свойств найденных перспективных продуцентов; исследования
46 влияния условий культивирования перспективных штаммов на выход биомассы, липидов и АК; поиска условий биосинтеза сложных эфиров АК и глицерина с помощью липолитических микроорганизмов для обоснования принципиальной технологической схемы получения АК с использованием найденных перспективных штаммов.
2. ОБЪЕКТЫ, МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
В данном разделе рассмотрены основные объекты, материалы и методы, а также физико-химические и спектральные характеристики (масс и ЯМР-13С спектры) соединений используемых или полученных в ходе выполнения экспериментальных исследований. Приведены результаты математической оценки качества проведенных экспериментов.
2.1. Объекты исследования
Объектом исследования служили выделенные штаммы низших почвенных грибов, полученные в результате многократных пассажей на агаризо-ванном сусле и/или картофельной среде при пониженной и/или комнатной температуре и отобранные из них 22 штамма обладающих высокой чувствительностью к ацетилсалициловой кислоте - необратимому ингибитору цик-лооксигеназы (рис. 1.2).
2.2. Материалы исследования
Материалами исследования служили чистые реактивы российского и зарубежного производства (табл. 2.1).
Список литературы диссертационного исследования кандидат технических наук Давлетбаев, Игорь Маратович, 2002 год
1. German J.B., Dillard С. J., Whelan J. Symposium: Biological Effects of Dietary Arachidonic Acid—Introduction//!. Nutr. 1996. - Vol. 126. - P. 1076-1080.
2. Гуннько В., Андреева С. Биологически активные вещества в косметических средствах по уходу за кожей лица// Провизор. 2002. - №12. -С.65-72.
3. Кульнев А.И., Соколова Е. А. Многоцелевые стимуляторы защитных реакций, роста и развития растений. Пущино// ОНТИ ПНЦ РАН. -1997. 100с.
4. Eroshin V. К. and Dedyukhina Е. G. Effect of lipids from Mortierella hygrophila on plant resistance to phytopathogens// World J. of Microbiol. & Biotechnol. 2002. - Vol. 18. - P. 165-167.
5. Igbal Gill and Rao Valivety. Polyunsaturated fatty acids, part 1: Occurrence, biological activities and applications// Tibtech October. 1997. - Vol. 15.-P. 401-409.
6. Ratledge C. Single cell oils—have they a biotechnological future?// Trends Biotechnol. 1993. - Vol. 11. - P. 278-284.
7. Bajpai P., Bajpai P.K., Arachidonic acid production by microorganisms// Biotechnol. Appl. Biochem. 1992. - Vol. 15. - P. 1-10.
8. Shimizu S., Shinmen Y., Kawashima H., Akimoto K., Yamada H. Production of C-20 polyunsaturated fatty acids by fungi// Proceeding of World Conference on Biotechnology for the Fats and Oils Industry. 1987. - AOCS, Champaign, IL. - P. 1000-1006.
9. Milan Certik, Eiji Sakuradani and Sakayu Shimizu. Desaturase-defective fungal mutants: useful tools for the regulation and overproduction ofpolyunsaturated fatty acids// Tibtech December. 1998. - Vol. 16. - P.500-505.
10. Eroshin V. K., Satroutdinov A. D., Dedyukhina E. G., Chistyakova T. I. Arachidonic acid production by Mortierella alpina with grown-coupled lipid synthesis// Proc. Biochem. 2000. - Vol. 35. - P. 1171-1175.
11. Hugo Streekstra. On the safety of Mortierella alpina for the production of food ingredients, such as arachidonic acid// J. Biotechnology. 1997. -Vol. 56.-P. 153-165.
12. Singh A., Ward O. P. Production of high yields of arachidonic in a fed-batch system by Mortierella alpina ATCC 32222// Appl. Vicrob. Biotechnol. 1997. - Vol. 48. - P. 1-5.
13. Hung-Der Jang, Yuh-Yih Lin and Shang-Shyng Yang. Polyunsaturated fatty acid production with Mortierella alpina by solid substrate fermentation. Bot. Bull. Acad. Sin. 2000, №41, p.41-48.
14. Желифонова В. П., Зинченко Г. А., Белов А. П., Дедюхина Э. Г., Ерошин В. К. Исследование состава липидов Mortierella hygrophila продуцента арахидоновой кислоты// Прикл. биохим. и микробиол. - 1994. - Т. 30. -Вып. 4-5.-С. 610-616.
15. Yasushi Kamisaka; Naomi Noda, Tatsuya Sakai, Kazunori Kawasaki. Lipid bodies and lipid body formation in an oleaginous fungus, Mortierella ra-manniana var. angulispora// Biochim. Et. Biophys. Acta. 1998. -Vol. 1438. - P. 185-198.
16. Eroshin V.K., Dedyukhina E.G., Chistyakova T.I., Zhelifonova V.P., Kurtzman C.P., Bothast R.J. Arachidonic-acid production by species of Mortierella!! World J. Microbiol. Biotechnol. 1996. - Vol. 12. - P. 91-96.
17. Totani N., Watanabe A., Oba K. An improved method of arachidonic acid production by Mortierella alpinall J. Jpn. Oil Chem. Soc. 1987. - Vol. 36. -328-331.
18. Ward O. Microbial production of long-chain PUFAs// INFORM. Vol. 6.- 1995.-P. 683-688.
19. Bigelis R. Fungal metabolites in food processing// Arora, D.K., Mukerji, K.G., Marth, E.H. (Eds.). 1991, Handbook Applied Mycology Vol. 3:
20. Foods and Feeds. Marcel Dekker, New York, P. 426-428.
21. Martek Corporation. World Patent No. W09212711-A1 1992. (www.martekbio.com)
22. Rjbles Medina A., Molina Grima E., Gimenez Gimenez A. and Ibanez Gonzales M. J. Downstream processing of algal polyunsaturated fatty acids// Bio-technol. Advances. 1998. - Vol. 16. - №3. - P. 517-580.
23. Smith W. L. and Borgeat P. Biochemistry of Lipids and Membranes (Vance D. E and Vance J. E., eds.).// Benjamin Cummings, Redwood City, CA, USA.-1985.-P. 325-360.
24. Grammatikos S.I, Subbaiah P.V., Victor T.A., Miller W.M. Diverse effects of essential (n-6 and n-3) fatty acids on cultured cells// Cytotechnology. -1994.-Vol. 15.-P. 31-50.
25. German J. В., Dillard C. J. and Whelan J. Biological effects of dietary arachidonic acid. Introduction// J. Nutr. Apr. 1996. - №126:4. - P. 1076-1080.
26. Sardesai V. M. The essential fatty acids// J. Nutr. Biochem. 1992. -№7:3.-P. 562-579.
27. Lands W. E. M. Eicosanoids and health// Ann NY Acad. Sci. 1993. -Mar., Vol. 15.-P. 46-59.
28. Fletcher J. R. Eicosanoids. Critical agents in the physiological process and cellular injury// Arch. Surg. 1993. - Nov., - №128:11. - P. 1192-1196.
29. Simopoulos A. P. Omega-3 fatty acids in health and disease and in growth and development// Am. J. Clin. Nutr. 1991, Sep., №54:3. - P.438^163.
30. Fernandes G. and Venkatraman J. T. Role of Omega-3 Fatty Acids in Health and Disease// Nutr. Res. 1991. - Vol. 13. - P.19-45.
31. Dyerberg J. and Bang H. O. Haemostatic function and platelet polyunsaturated fatty acids in Eskimos// Lancet. 1979. - Vol. 11. - P. 433-440.
32. Chow C.K. ed. Fatty acids in meats and meat products. Fatty acids in foods and their health implications// New York: Marcel Dekker, Inc. 1992. - P. 65-93.
33. Hummel D. S. Dietary Lipids and Immune Functions Prog// Food. Nutr. Sci. 1993. - Vol. 17. - P. 327-329.
34. Efamol Holdings pic European Patent No. EP490561-A2, 1992.
35. Scotia Holdings pic European Patent No. EP609001-A2, 1994.
36. Agostoni C., Verduci E. Die Rolle der ungesattigten Fettsauren bei der Diat im Sauglings- und Kindesalter// J. ERNAHRUNGSMED. Vol. 1. - 1999. -P. 17-21.
37. Igbal Gill and Rao Valivety. Polyunsaturated fatty acids, part 2: biotransformations and biotechnological applications// Tibtech October. 1997. -Vol. 15.-P. 470-478.
38. Владимиров В. А. свободные радикалы и антиоксиданты// Вестник Рос. Академии мед. Наук. 1998 . - №7. - С. 43-51.
39. Gunstone F. D., Harwood J. L. and Padley F. B. Occurrence and characteristics of oils and fats// The Lipid Handbook (Editors, F D Gunstone, J L Harwood and F В Padley), Chapman and Hall, London. 1994. - P. 47-223. - ISBN 0412^13320 6.
40. Van der Westhuizen J.P.J., Kock J.L.F., Botha A. and Botes P J. The distribution of the w3 and w6 series of cellular long - chain fatty acids in fungi// Systematic and Appl. Microbiol. - 1994. - Vol. 17. - P. 327-345.
41. Ahlgren G., Gustafsson I. B. and Boberg M. Fatty acid content and chemical composition of freshwater microalgae// J. Phycol. 1992. - Vol. 28. -P.37-50.
42. Blomquist G. J., Borgeson С. E. and Vundla M. Polyunsaturated fatty acids and eicosanoids in insects// Insect Biochem. 1991. - Vol. 21. - P.99 - 106.
43. Allman M. A. Plant sources of n-3 fatty acids// J. Food. 1995. -Aust., Vol. 47. - P. 14-17.
44. Yongmanitchai W. and Ward O. P. Omega-3 fatty acids: Alternative sources of production// Proc. Biochem. 1989. - Vol. 9. - P. 117 -125
45. Ratledge С. Technological Advances in Improved and Alternative Sources of Lipids (Kamel B. S. and Kakuda Y. eds)// Blackie Acad. 1994. - P. 235-291.
46. Панькина И. О., Конова И. В. Жирные кислоты фитофторовых грибов при их росте на различных средах// Микробиол. 1996. - Т.65, №2. -С. 177-181.
47. Chini Zittelli G., Lavista F., Bastianini A., Rodolfi L., Vincenzini M., Tredici M. R. Production of eicosapentaenoic acid by Nannochloropsis sp. Cultures on outdoor tubular photobioreactors// J. Biotechnol. 1999. -Vol. 70. - P. 299-312.
48. Tadao Y., ed. Advances in Polyunsaturated Fatty// Acids Reserch. -1993. Vol. 1025. - International Congress Series, Excerpta Medica, Tokyo.
49. Ohlrogge J. B. Design of new plant products: engineering of fatty acid metabolism// J. Plant Physiol. 1994. - Vol. 104. - P.821-826.
50. Reddy A. S. and Thomas T. L. Expression of a cyanobacterial delta6-desaturase gene results in gamma-linolenic acid production in transgenic plants// J. Nat. Biotechnol. 1996. - Vol. 14. - P. 639-642.
51. Ratledge C. Biotechnology of oils and fats in industrial Applications of Single Cell Oils (Kyle D.J. and Ratledge C., eds)// American Oil Chemists Society, Champaign, IL, USA. 1992. - P. 1 - 15.
52. Folch J., Lees М. and Stanley G. M. A simple method for the isolation and purifications of total lipids from animal tissues// J. Biol. Chem. 1957. - Vol. 226.-P. 497-509.
53. Галанина Jl. А., Соловьева H. JI., Конова И. В. Образование эйко-заполиеновых кислот Pythium debarianum при культивировании на различных средах//Микробиол. 1999. - Т. 68, №4. - С. 473-479.
54. Budziszewski G. J., Croft К. Р. С. and Hildebrand D. F. Uses of biotechnology in modifying plant lipids// J. Am. Oil Chem. Soc. 1996. - Vol. 31. -P. 557 -569
55. Yamada H., Shimizu H., Shinmen Y., Akimoto K., Kawashima H. and Jareonkitmongkol S. Industrial Applications of Single Cell Oils (Kyle D. J. and Ratledge C., eds)// American Oil Chem. Society, Champaing, IL, USA. 1992. -P. 118-138.
56. Панькина И. О., Конова И. В. Липидные характеристики Phy-tophthora cryptogeall Микробиол. 1996. - Т.65, №2. - С. 182-188.
57. Gertik М., Sereke Berhan S., Sajbidor J. Lipid production and fatty acid composition of select strain belonging to Mucoralesll Acta Biotechnol. -1993.-Vol. 13.-P.193-196.
58. Cohen Z., Didi S. and Heimer Y. M. Overproduction of y-linolenic and eicosapentaenoic acids by algae// J. Plant Physiol. 1992. - Vol. 98. - P. 569572.
59. Kyle D., Behrens P., Bingham S., Arnett K. and Leibennan D. Biotechnology for the Fats and Oils Industry// American Oil Chemists' Society, Champaign, IL, USA. (Applewhite Т. H., ed.). 1988. - P. 117-121.
60. Kyle D. J., Sicotte V. J. and Reeb S. E. Industrial Applications of Single Cell Oils// American Oil Chemists' Society, Champaign, IL, USA (Kyle D. J. and Ratledge C., eds). -1992. P. 287-300.
61. Yazawa K., Watanabe K., Ishikawa C., Kondo K. and Kimura S. Industrial Applications of Single Cell Oils// American Oil Chemists' Society, Champaign, IL, USA (Kyle D. J. and Ratledge C., eds).- 1992. P. 29-51.
62. Ratledge C. Biotechnology of oils and fats in Microbial Lipids// Academic Press (Ratledge C. and Wilkinson S. G., eds). 1992. - Vol. 2. - P. 567 -668.
63. Certik M. and Shimizu S. Recent Research Developments in Oil Chemistry// Transworld Research Network, Trivandrum, India. (Pandalai, S. G., ed.)- 1998. Vol. 2. - P. 89-103.
64. Shimizu S. and Jareonkitmongkol S. Biotechnology in Agriculture and Forestry// Springer-Verlag (Bajaj, Y. P. S., ed.). 1995. - Vol. 33. - P. 308-325.
65. Napier J. A., Hey S. J., Lacey D. J. and Shewry P. R. Identification of a Caenorhabditis elegans D6 fatty acid desaturase by heterologous expression in Saccharomyces cerevisiaell J. Biochem. 1998. -Vol. 330. - P. 611-614.
66. Shimizu S., Akimoto K., Sugano M. and Yamada H. Essential Fatty Acids and Eicosanoids// AOCS Press, Champaign, USA (Sinclair, A. and Gibson, R, eds).- 1993.-P. 31-41.
67. Napier J.A. Transgenic plants for the production of pharmaceutical fatty acids// Bundesgesundheitsbl Gesundheitsforsch - Gesundheitsschutz. -2000.-Vol. 43.-P. 99-103.
68. Mehlenbacher V. C., Analisis de Grasas у Aceites. Estabilization de aceite de perscado con propoleo// Bilbao: Editorial Urmo, Spain. 1970. - P.538-543.
69. Lundberg W. O. and Jarvi P. Peroxidation of polyunsaturated fatty compounds// Progress in the Fats and Other Lipids. London: Pergamon Press. -1966.-Vol. 9.-P. 265-275.
70. Holman R. T. General introduction to polyunsaturated acids// Progress in the Fats and Other Lipids. London: Pergamon Press. 1966. - Vol. 9. - P. 1-11.
71. Hara A. and Radin N.S., (1978) Lipid extraction of tissues with a lowtoxicity solvent// Anal. Biochem. Vol. 90. - P. 420-426.
72. Ito N., Hirose M., Fukushima S., Tsuda,H., Tatematsu M., and Asamoto M., Modifying Effects of Antioxidants on Chemical Carcinogenesis// FoodChem. Toxicol. 1986-Vol. 14.-№. 3.-P. 315-323.
73. Humeau C., Girardin M., Rovel В., Miclo A. Enzymatic synthesis of fatty acid ascorbyl esters/ J. of Mol. Catalysis B: Enzymatic. 1998. - Vol. 5. - P. 19-33.
74. Kates M,. Techniques of Lipidology: Isolation, Analysis and Identification of Lipids// Separation of lipid mixtures, Amsterdam: Elsivier. 1988. -2nd edition, - pp. 186-278.
75. Zhukov A. V. and Vereshchagin A. G. Current techniques of extraction, purification and preliminary fractionation of polar lipids of natural origin// Adv. in Lipid Reserch. 1981. -Vol. 18. -P. 247-282.
76. Cohen Z. and Cohen S. Preparation of eicosapentenoic acid (EPA) concentrate from Porphyridium cruentumll J. Am. Oil Chem. Soc. 1991. - Vol. 68.-P. 16-19.
77. Domart C., Miyauchi D.T., Sumerwell W.N. The fractionation of marine-oil fatty acids with urea// J. Am. Oil Chem. Soc. 1955. Vol. 32. -P. 481483.
78. Bligh E. G. and Dyer W. J. A rapid method of total lipid extraction and purification// Can. J. Biochem. Physiol. -1959. Vol. 37. -P. 911-917.
79. Molina Grima E., Robles Medina A., Gimenez Gimenez A., Sanchez Perez, J.A., Garcia Camacho, F. and Garcia Sanchez, J.L., Comparison between extraction of lipids and fatty acids from microalgal biomass// J. Am. Oil Chem. Soc. 1994. -Vol. 71. -P. 955-959
80. Ibanez Gonzalez M.J., Robles Medina A., Molina Grima E. and Gimenez Gimenez A., Method purifications oil from Phaeodactylum tricornutum!'/ J. Am. Oil Chem. Soc. 1997. Vol. 86. - P. 145-151.
81. Cartens M., Molina Grima E., Robles Medina A., Gimenez Gimenez A. and Ibanez Gonzalez M.J.// Eicosapentaenoic acid (20:5n-3) from the marine microalga Phaeodactylum tncornulum. J. Am. Oil Chem. Soc. - 1996. -Vol. 72.-P. 1-7.
82. Belter P. A., Cussler E. L. and Hu W. S.// Bioseparation: Downstream Processing for Biotechnology. New York: John Wiley. -1988. -P. 209-213.
83. Hara A. and Radin N.S. Lipid extraction of tissues with a low-toxicity solvent// Anal. Biochem. 1978. - Vol. 90. -P. 420-426.
84. Ahlgren G. and Merino L. Lipid analysis of freshwater microalgae: A method study// Arch. Hydrobwi. 1991. - Vol. 121. -P. 295-306.
85. Nagle, N. and Lemke, P., (1990) Appl. Biochem. Bioiechnol. 24/25, 355-361 Production of methyl ester fuel from microalgae.
86. Schlenk H. Urea inclusion compounds of fatty acids// Progress in the Fats and other Lipids. -1954. Vol. 2. - P. 243-267.
87. Swern, D, Fatty Acids. Their Chemistry, Properties, Production, and Uses, Markley, К S (ed.). New York: Interscience Publishers Techniques of separation. Urea complexes. -1964. Part 3. - 2nd edition. - P. 2309-2358.
88. Smith A.E. The crystal structure of the urea-hydrocarbon complexes// Acta Crysl. -1952. Vol. 5. P. 224-235.
89. Abu-Nasr A.M. and Holman R.T., J. Highly unsaturated fatty acids. II Fractionation by urea inclusion compounds// Am. Oil Chem. .Sue. 1954. Vol. 31. P. 16-31.
90. Ratnayake W.M.N., Olsson В., Matthews D. and Ackman R.G., Preparation of omega-3 PUFA concentrates from fish oils via urea complexation// Fat Sci. Technol. 1988. - Vol. 10. P. 381-386.
91. Gruger E.H. Jr., Methods of separation of fatty acids from fish oils with emphasis on industrial applications// 11th Annual Conference of Pacific Fisheries Technologists, Gerhart, OR, March. 1960. - Vol. 27-28. - P. 31-40.
92. Robles Medina A., Gimenez Gimenez A., Molina Grima E. and Garcia Sanchez, J.L., Obtencion de concentrados de acidos grasos poliinsaturados porel metodo de los compuestos de inclusion de urea// Grasas у Aceiles- 1995. Vol. 42. P. 174-182.
93. Iverson J.L., Weik R-W., Correlation of fatty acid structure with preferential order of urea complex formation// J. Am. Oil Chem. Soc. 1967. Vol. 50. P. 1111-1118.
94. Haagsma N., Van Gent C.M., Luten J.B., De Jong R.W. and van Doom E. Preparation of an co-3 fatty acid concentrate from cod liver oil// J. Am. Oil Chem. Soc. 1988. -Vol. 59. P. 117-118.
95. Traitler H., Wille H.J. and Studer A. Fractionation of blackcurrant seed oil// J. Am. Oil Chem. Soc.- 1988/-Vol. 65.-P. 755-760.
96. Wille H.J., Traitler H. and Kelly M. Production of polyenoic fish oil fatty acids by combined urea fractionation and industrial scale preparative HPLC// Revue Francaise des corps gran. 1987. - Vol. 34. - P. 69-73.
97. Domart C., Miyauchi D.T. and Sumerwell W.N. The fractionation of marine-oil fatty acids with urea// J. Am. Oil Chem. Soc. 1955. - Vol. 32. - P. 481-483.
98. Shukla V. Recent advances in the high performance liquid chromatography of lipids// Prog. Lipid Res. 1988. - Vol. 27. - P. 5-38.
99. Scholfield C.R. Silver nitrate-high performance liquid chromatography of fatty methyl esters// J. Am. Oil Chem. Soc. 1979. - April. - P. 510-511.
100. Ozcimder M. and Hammers W.E. Fractionation of fish oil fatty acid methyl esters by means of argentation and reverse-phase high-performance liquid chromatography, and its utility in total fatty acid analysis// J. Chromatog. 1980. -Vol. 187.-P. 307-317.
101. Hartley F.R Thermodynamic data for olefin and acetylene complexes of transition metals// Chem. Rev. 1973. - Vol. 73. - P. 163-190.
102. Aveldano M.I., van Roollins M. and Horrocks L.A. Separation and quantitation of free fatly acids and fatty acid methyl esters by reverse phase high pressure liquid chromatography // J. Lipid Res. 1983. - Vol. 24. - P. 83-93.
103. Henke H. and Schubert J. HPLC of fatty acid esters of mono- and polyhydric alcohols, part 1: Analytical separation// .J. High Resol. Chromat. &
104. Chromat. Comm. -1980. Vol. 3. -P. 69-78.
105. Privett O.S. Preparation of polyunsaturated fatty acids from natural sources // Progress in the Chemistry of bats and Other Lipids. Holmnan R.T. (ed.). - 1968. - Vol. 9, Chapter 11, part 3, Pergamon Press. - P. 409-452.
106. Schlenk H. Crystallization of fatty acids// J. Am. Oil Chem. Soc. -1961.-Vol. 38.-P. 728-736.
107. Shinowara G.Y. and Brown J.B. Studies on the chemistry of the fatty acids. VI The application of crystallization methods to the isolation of arachidonic acid, with a comparison of the properties// J. Biol. Chem. 1940. -Vol. 134. - P. 331-340.
108. Markley K.S. Interscience Publishers Technique of separation A Distillation, salt solubility, low-temperature crystallization// Fatty Acids, Their Chemistry, Properties, Production, and Uses, Markley, KS (ed.), 2nd edition. Part 3, 1964.-P. 1983-2123.
109. Teramoto M., Matsuyama H., Ohnishi N., Uwagawa S. and Nakai K. Extraction of ethyl and methyl esters of polyunsaturated fatty acids with aqueous silver nitrate solutions.// Ind. Eng. Chem. Res. 1994. -Vol. 33. -P. 341-345.
110. Shantha N.C and Ackman R.G. Silica gel thin-layer chromatographic method for concentration of longer-chain polyunsaturated fatty acids from food and marine lipids// Can. Inst. Sci. Technol. J. 1991. - Vol. 24. - P. 156-160.
111. Hardy R. and Keay J.N. The isolation of the polyunsaturated acids of the fish oils as their methyl esters by preparative scale gas chromatography// J. Chormatog. 1967. - Vol. 27. -P. 474^179.
112. Wrigth S.W., Kuo E.Y., Corey E.J. An effective process for the isolation of docosahexaenoic acid in quantity from cod liver oil// J. Org. Chem. 1987. -Vol. 52.-P. 4399-4401.
113. Corey EJ. and Wright S.W. Convenient method for the recovery of ei-cosapentaenoic acid from cod liver oil// J. Org. Chem. 1988. - Vol. 53. - P. 5980-5981.
114. Gaiday N.V., Imbs A.B., Kuklev D.V. and Latyshev N.A. Separation of natural polyunsaturated fatty acids be means of iodolactonization.// J. Am. Oil.
Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.