Биолюминесцентная АТФ-метрия в клинической и санитарной микробиологии тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат химических наук Фунджян, Валерий Гайкович

• Фунджян, Валерий Гайкович
• кандидат химических наук
• 1999

Оглавление диссертации кандидат химических наук Фунджян, Валерий Гайкович

5

II. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1. МЕТОДОЛОГИЯ БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ АТФ В «БЫСТРОЙ МИКРОБИОЛОГИИ»

1.1. МЕТОДЫ «БЫСТРОЙ МИКРОБИОЛОГИИ»

1.2. ВНУТРИКЛЕТОЧНЫЙ АТФ КАК ИНДИКАТОР ПРИСУТСТВИЯ 8 ЖИЗНЕСПОСОБНЫХ КЛЕТОК (ЖИВОТНЫХ, РАСТИТЕЛЬНЫХ, МИКРОБНЫХ) В РАЗЛИЧНЫХ ОБРАЗЦАХ

1.3. ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНОГО 9 МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ АТФ

1.4. ПОДГОТОВКА ОБРАЗЦОВ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АТФ

1.5. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АТФ В РАЗЛИЧНЫХ ОБРАЗЦАХ

1.5.1. Определение суммарного содержания (пула) АТФ

1.5.2. Определение соматического АТФ

1.5.3. Определение микробного (бактериального) АТФ

1.6. ОПРЕДЕЛЕНИЕ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ОБСЕМЕНЕННОСТИ 22 ОБРАЗЦОВ БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНЫМ МЕТОДОМ

2. НЕКОТОРЫЕ ОБЛАСТИ ПРИМЕНЕНИЯ

БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНОГО МЕТОДА АТФ-МЕТРИИ

2.1. БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЙ МЕТОД АТФ-МЕТРИИ В

МЕДИЦИНЕ

2.1.1. Регистрация различных метаболических изменений на клеточном уровне

2.1.2. Диагностика бактериемии и бактериурии

2.1.3. Мониторинг концентрации антибиотиков в клинических образцах, определение величины минимальной ингибирующей концентрации антибиотиков, постантибиотических эффектов

2.1.4. Оценка антибиотикочувствительности микрофлоры в клинических образцах

2.2. БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЙ МЕТОД АТФ-МЕТРИИ В

ПИЩЕВОЙ ПРОМЫШЛЕННОСТИ

2.2.1. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЩЕЙ БАКТЕРИАЛЬНОЙ 42 ОБСЕМЕНЕННОСТИ МОЛОКА

2.2.1.1. Сырое молоко

2.2.1.2. Пастеризованное и сухое молоко

2.2.1.3. Факторы, влияющие на точность и воспроизводимость 54 определения ОБО молока биолюминесцентным методом

2.2.2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ МИКРОБНОЙ ОБСЕМЕНЕННОСТИ МЯСА

2.2.3. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЧИСТОТЫ ПОВЕРХНОСТЕЙ 60 ТЕХНОЛОГИЧЕСКОГО ОБОРУДОВАНИЯ И ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРОЦЕССОВ СТЕРИЛИЗАЦИИ

Ш. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

3.1. ВЕЩЕСТВА, РЕАГЕНТЫ И МАТЕРИАЛЫ

3.2. ОБЪЕКТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.3. ИСПОЛЬЗОВАННАЯ АППАРАТУРА

3.4. МЕТОДИКИ ПРОВЕДЕНИЯ ЭКСПЕРИМЕНТОВ

3.4.1. БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЙ МЕТОД АНАЛИЗА

РАЗЛИЧНЫХ ОБРАЗЦОВ

3.4.1.1. Определение содержания АТФ в цельной крови и её 66 форменных элементах у подопытных животных, подвергавшихся поражающим воздействиям, и у человека

3.4.1.2. Определение антибиотикочувствительности крови при 70 бактериемии

3.4.1.3. Определение общей бактериальной обсемененности молока

3.4.1.4. Определение специфической обсемененности мороженого 73 или поверхностей технологического оборудования бактериями группы кишечной палочки

3.5. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА

3.6. СТАТИСТИЧЕСКАЯ ОБРАБОТКА ПОЛУЧЕННЫХ 75 РЕЗУЛЬТАТОВ

IV. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

4.1. СОДЕРЖАНИЕ АТФ В КРОВИ И ЕЁ ФОРМЕННЫХ 76 ЭЛЕМЕНТАХ КАК ПОКАЗАТЕЛЬ ОТДАЛЕННОГО ВО ВРЕМЕНИ ВОЗДЕЙСТВИЯ НЕБЛАГОПРИЯТНЫХ ВНЕШНИХ ФАКТОРОВ

4.1.1. Влияние ксенобиотиков и/или радиации на содержание АТФ в 78 эритроцитах и нейтрофилах крови крыс

4.1.2. Содержание АТФ в нейтрофилах и цельной крови у 82 обследованных женщин, проживающих в селах Алтайского края

4.2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АНТИБИОТИКОЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ 86 КРОВИ ПРИ БАКТЕРИЕМИИ БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНЫМ МЕТОДОМ

4.2.1. Удаление немикробного АТФ из крови

4.2.2. Оптимизация условий гемолиза

4.2.3. Определение антибиотикочувствительности крови при 92 бактериемии биолюминесцентным методом на примере модельной системы

4.2.4. Сравнение результатов определения величины относительного 95 подавления роста микробных клеток под действием антибиотиков биолюминесцентным методом и методом посева разведений

4.3. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЩЕЙ БАКТЕРИАЛЬНОЙ 97 ОБСЕМЕНЕННОСТИ СЫРОГО МОЛОКА БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНЫМ МЕТОДОМ

4.3.1. Оптимизация условий обработки молока

4.3.2. Биолюминесцентное определение бактериальной обсемененности 103 искусственно контаминированного молока

4.3.3. Биолюминесцентное определение общей бактериальной 106 обсемененности сырого молока

4.4. ОПРЕДЕЛЕНИЕ БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНЫМ МЕТОДОМ 111 СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ОБСЕМЕНЕННОСТИ ОБРАЗЦОВ БАКТЕРИЯМИ ГРУППЫ КИШЕЧНОЙ ПАЛОЧКИ

НА ПРИМЕРЕ МОРОЖЕНОГО И ПОВЕРХНОСТЕЙ ТЕХНОЛОГИЧЕСКОГО ОБОРУДОВАНИЯ)

V. ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биолюминесцентная АТФ-метрия в клинической и санитарной микробиологии»

Биолюминесценция - не только одно из красивейших явлений природы, но и мощный аналитический инструмент, широко используемый в методах «быстрой микробиологии». Методы «быстрой микробиологии» позволяют оперативно (в течение нескольких минут или часов) определять микробную обсемененность различных объектов или оценивать энергетический статус клеток (микробных, растительных, животных) и поэтому представляют большую практическую ценность для медицины, ветеринарии и сельского хозяйства, нужд коммунального хозяйства, пищевой, фармацевтической, парфюмерно-косметической и радиоэлектронной промышленности, экологического мониторинга т.д. Эти методы основаны на определении какого-либо физико-химического параметра анализируемого образца, абсолютная величина которого или её изменение пропорциональны количеству присутствующих в образце клеток или отражают их энергетический статус. Среди большого разнообразия методов, используемых для этих целей, наибольшей точностью, воспроизводимостью и экономичностью отличаются методы, основанные на определении различных внутриклеточных или внеклеточных метаболитов, в первую очередь, внутриклеточного АТФ.

АТФ - универсальный внутриклеточный метаболит, содержащийся в относительно высоких концентрациях в клетках любых микро- и макроорганизмов, и который можно определять при помощи биолюминесценции с большой точностью даже при ультрамалом содержании в образце - до 10"14-Н0"16 моль/кювета люминометра [1, 2]. Однако универсальность АТФ как внутриклеточного метаболита в большинстве случаев обусловливает определенную сложность при детекции клеток микро- и макроорганизмов или определении их энергетического статуса, т.к. в зависимости от природы образца и назначения анализа необходимо селективно определять только микробный или немикробный, т.е. целевой АТФ. Подготовка образцов для определения целевого АТФ представляет основную сложность биолюминесцентного метода и часто является сдерживающим фактором для его широкого практического применения, в то время как сама процедура измерения АТФ при помощи люциферин/люциферазной системы светляков в настоящее время достаточно полно разработана [3].

Целью данной работы являлась разработка методов биолюминесцентного определения целевого АТФ (соматического и микробного) в различных образцах в клинической и санитарной микробиологии при:

1. исследовании влияния на содержание АТФ в цельной крови и её форменных элементах отдалённых во времени неблагоприятных внешних факторов;

2. определении антибиотикочувствительности крови больных бактериемией без выделения из образца микробных клеток;

3. определении ОБО сырого молока, основанном на использовании материалов и реагентов преимущественно отечественного производства и позволяющем устанавливать класс молока в соответствии с ГОСТ 9225-84 с изменением N2 от 28.09.89;

4. определении специфической обсемененности образцов бактериями группы кишечной палочки (на примере мороженого и поверхностей технологического оборудования).

II. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Фунджян, Валерий Гайкович

V. выводы

1. На основании результатов биолюминесцентного определения содержания АТФ в эритроцитах и нейтрофилах крыс, подвергавшихся действию ионизирующего излучения и/или ксенобиотиков, а также содержания АТФ в цельной крови и нейтрофилах женщин, проживающих на территориях Алтайского края с радионуклидным загрязнением местности, сделан вывод, что уровень АТФ в нейтрофилах можно рассматривать как показатель метаболических изменений, вызванных отдаленными во времени поражающими воздействиями.

2. Разработан биолюминесцентный экспресс-метод (6-ч тест) определения антибиотикочувствительности крови при бактериемии, который не требует выделения из образца чистой культуры микробных клеток. Метод основан на разрушении немикробного АТФ в крови путём гемолиза с последующим инкубированием гемолизированной крови в течение 5 ч в питательной среде в присутствии (проба) и в отсутствии (контроль) антибиотика и сравнении содержания АТФ в пробе и контроле.

3. Оптимизирован биолюминесцентный экспресс-метод (30+35 мин на один образец) определения ОБО сырого молока (предел обнаружения 0,5х105 КОЕ/мл молока), который основан на использовании реактивов и материалов преимущественно отечественного производства. Метод включает обработку молока смесью детергента и ферментного препарата (неонола-10 и панкреатина медицинского) при повышенной температуре, удаление небактериального АТФ фильтрованием через бактериальный мембранный фильтр и биолюминесцентное определение концентрации бактериального АТФ в полученном образце. Показана высокая степень совпадения результатов, полученных биолюминесцентным методом и методом посева разведений, как для чистых культур основных представителей микрофлоры молока (Rs=0,89+0,99,

8ху=0,09+0,29), так и для сырого сборного молока (118=0,83, 8ху=0,54). Для молока, производимого в Московской области, предложена градуировочная таблица, которая позволяет определять по содержанию бактериального АТФ в образце класс сырого молока в соответствии с ГОСТ 9225-84 с изменением N2 от 28.09.89. Данный метод был утвержден в виде МЕТОДИЧЕСКИХ РЕКОМЕНДАЦИЙ на заседании Отделения ветеринарной медицины РАСХН 11.11.98 г.

4. Показана возможность быстрого, в течение 4+6 ч, определения специфической обсемененности мороженого и поверхностей технологического оборудования БГКП (1+10 КОЕ/мл на фоне большого избытка микроорганизмов других групп) при помощи биолюминесценции. Предложенная методика основана на использовании селективной питательной среды Вп1а-Ьои11юп, в которой развиваются преимущественно клетки БГКП, с последующим определением их количества в полученном образце биолюминесцентным методом.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Фунджян, Валерий Гайкович, 1999 год

1. Sala-Newby G.B., Goodfield C., Johnson I.R. et al. Ultra-sensitive detection of microbes by ATP analysis. In: ATP Luminescence: Society for the Applied Bacteriology. 1989. P.261-269.

2. Угарова H.H., Бровко Л.Ю., Лебедева О.В. Иммобилизованные биолюминесцентные системы. // Итоги науки и техники. Сер. Биотехнология. Т.6. М.: ВИНИТИ, 1986. С.88-163.

3. Иосипенко А.Д., Щеголев С.Ю., Шендеров Б.А. и др. Спектротурбидиметрический метод быстрой оценки чувствительности микроорганизмов к действию антибиотиков. // Антибиотики. 1985. Т.ЗО. N.3. С.208-212.

4. Ogden I.D., Cann D.C. A modified conductance medium for the detection of Salmonella spp. //J. Applied Bacteriology. 1987. V.63. P.459-464.

5. Gibson D.M. Some modification of the media for rapid automated detection of salmonellas by conductance measurement. // J. Applied Bacteriology. 1987. V.63. P.299-304.

6. Bishop J.R., White C.H. Assessment of dairy product quality and potential shelf-life. A review. // J. Food Protection. 1986. V.49. N.9. P.739-753.

7. O'Tool D.K. A review. Methods for the direct and indirect assessment of the bacterial count of milk. //J. Applied Bacteriology. 1983. V.55. N.2. P.187-201.

8. Бирюков B.B., Кантере B.M. Оптимизация периодических процессов микробиологического синтеза. М.: Наука, 1985 г. 289 с.

9. Purnendu C.V. Rapid methods and automation in dairy microbiology. J. Dairy Science. 1993. Y.76. P.3101-3113.

10. Rowlands A., Barkworth H., Hosking Z., Kemphorne O. Dye tests as measures of the keeping quality of milk. //J. Dairy Research. 1950. V.17. P. 161-191.

11. Petty R.D., Sutherland L.A., Hunter E.M., Cree I.A. Comparison of MTT and ATP-based assays for the measurements of viable cell number. // J. Bioluminescence and Chemiluminescence. 1995. V.10. P.29-34.

12. Kroll R.G. The cytochrome oxidase test for the rapid detection of psychrotrophic bacteria in milk. // J. Applied Bacteriology. 1985. V.59. N.2. P. 137-141.

13. Угарова H.H., Бровко Л.Ю., Лебедева O.B., Березин И.В. Биолюминесцентные методы и реагенты для целей медицинской диагностики. // Вестник Академии Медицинских Наук СССР. 1985. N7, С.88-94.

14. Cousins С.М., Rodrigues U.M., Fulpord R.J. The pyruvate test for monitoring the bacteriological quality of raw silo milk. // J. Dairy Research. 1981. V.48. P.45-50.

15. Oleniacz W.D., Pisano M.A., Risenfeld M.H. Detection of microorganisms by an automated chemiluminescent technique. In: Automation in Analytical Chemistry. / Eds. Technicon Corp., New-York. 1966. P.323-325.

16. Брусиловский Л.П., Драгунова С.Ф., Вайнберг И.А. Экспресс-метод определения бактериальной обсемененности молока. // Молочная промышленность. 1998. N.5. С. 2325.

17. Jay L.M. The Lymulus lysate endotoxin assay as a test of microbial quality of ground beef. // J. Applied Bacteriology. 1977. V.49. P.99-109.

18. Dood C.E., Stewart G.S., Waites W.M. Biotechnology-based methods for the detection, enumeration and epidemiology of food poisoning and spoilage organisms. // Biotechnology and Genetic Engineering Reviews. 1990. V.8. N.ll. P 1-49.

19. Угарова H.H., Бровко Л.Ю., Трдатян И.А., Райнина Е.И. Биолюминесцентные методы анализа в микробиологии. // Прикладная биохимия микробиология. 1987. Т23. N.1. С. 14-24.

20. Kennedy J.E. and J.R., Oblinger J.I. Application of bioluminesence to rapid determination of microbial levels in ground beef. // J. Food Protection. 1985. V.48. N.4. P.334-340.

21. Patel P.D., Williams A.P. A note on estimation of food spoilage yeasts by measurement of adenosine triphosphate (ATP) after growth at various temperatures. // J. Applied Bacteriology. 1985. V.59. N.2. P.133-136.

22. Lundin A. Analitical aplication of bioluminescence: the firefly system. / Clinical and Biochemical Luminescence. Eds. Kricka L.J. & Carter T.J.N. N.Y.: Marcel Dekker Inc. 1982. P.43-74.

23. Романова H.A., Бровко Л.Ю., Сепульведа-Бессера M., Угарова Н.Н. Изменение пула адениновых нуклеотидов в клетках бактерий E.coli 1257 при воздействии низкоинтенсивного He-Ne-лазвра. // Биохимия. 1993. Т.58. Вып.З. С.376-384.

24. Bishop J.R. Assessment of dairy product quality and potential shelf-life. A review. // J. Food Protection. 1986. V.49. N.9. P.739-753.

25. Мецлер Д.Э. Биохимия, пер. с английского. М.: Мир, 1980. 340 с.

26. Угарова Н.Н., Бровко Л.Ю. Биолюминесценция и биолюминесцентный анализ. М.: Издательство МГУ, 1981. 138 с.

27. Угарова Н.Н. Биоаналитические применения люциферазы светляков (обзор). // Прикладная биохимия микробиология. 1993. Т.29. N.2. С.180-191.

28. Lundin A., Richardson A., Thore A. Continuous monitoring of ATP converting reactions by purifiied firefly luciferase. // Analytical Biochemistry. 1976. V.75. P.611-620.

29. Cutter C.N., Dorsa W.J., Siragusa G.R. A rapid microbial ATP bioluminescence assay for meat carcasses. //Dairy, Food and Environmental Sanitation. 1996. V.16. N.ll. P.726-736.

30. Weibel K.E., Мог J.-R., Fiechter A. Rapid sampling of yeast cells and automated assay of adenylate, citrate, pyruvate and glucose-6-phosphate pools. // Analytical Biochemistry. 1974. V.58. N.l. P.208-216.

31. Selan L., Berlutty F., Passariello C., Thaller M., Renzini G. Reliability of bioluminescence ATP assay for detection of bacteria. // J. Clinical Microbiology. 1992. V.30. N. 7. P. 17391742.

32. Webster J.A.J., Hampton G.J., Leach F.R. ATP in soil: a new extractant and extraction procedure. // Soil Biology and Biochemistry. 1984. V.16. N. 4. P.335-342.

33. Jenkinson D.C., Oades J.M. A method for measuring of adenosin triphosphate in soil. // Soil Biology and Biochemistry. 1979. V.ll. P.193-199.

34. Lundin A., Thore A. Comparison of methods for Extraction of bacterial adenine nucleotides determined by firefly assay. // Applied Microbiology. 1975. V.30. N.5. P.713-721.

35. Vosjan J.H., Newland G., Ernst W., Bluszcz T. Shipboard comparison of two methods of extraction and measurements of ATP applied to antarctic water samples. // Netherlands J. Sea Research. 1987. V.21. N.2. P.107-112.

36. Bancroft K., Paul E.A. Wihe W.J. The extraction and measurement of adenosine triphosphate from marine sediments. // Limnology and Oceanography. 1976. V.21 P.473-480.

37. Sheppard E.P., Gow J. A., Georghiou P.E. Luciferin-luciferase assay of ATP from bacteria. A comparison of DMSO and acetone with other solvents. // Microbios. 1987. V.52. N.210. P.39-50.

38. Vaara M. The outer membrane as the penetration barrier against mupirocin in gramnegative enteric bacteria. // Microbiology Review. 1992 . V.56. N.3. P.395-411.

39. Lundin A. Extraction and automated luminometric assay of ATP, ADP and AMP. In: Analytical Application of Bioluminescence and Chemiluminescence. / Eds. Kricka L.J., Stanley P.E., Thore G.H.G, Whitehead T.P. Orlando, USA: Academic Press. 1984. P.491-502.

40. Kahru A., Vilu R. Use of luciferin-luciferase assay of ATP for measuring the bacterial growth: Application to Escherichia coli. II Acta Biotechnology. 1988. V.8. N.l. P.93-98.

41. Theron D.P., Prior B.A., Lategan P.M. Determination of bacterial ATP levels in raw milk: selectivity of non-bacterial ATP hydrolysis. // J. Food Protection. 1986. V.49. N. 1. P.4-7.

42. Романова H.A., Бровко Л.Ю., Угарова H.H. Сравнение методов экстракции внутриклеточного АТФ микроорганизмов различного типа для биолюминесцентного определения клеток микроорганизмов. // Прикладная биохимия микробиология. 1997. T.33.N.3. С.344-349.

43. Шлегель Г. Общая микробиология, пер. с немецкого. М.: Мир, 1987. 567 с.

44. Лукомская К.А. Микробиология с основами вирусологии. М.: Просвещение, 1987. 192 с.

45. Бирюзова В.И. Мембранные структуры микроорганизмов. М.: Наука, 1973. 136 с.

46. Simpson W.J., Hammond J.R.M. Method for ATP extraction. / United States Patent. Patent Number 5,004,684. Date of Patent: Apr. 2, 1991.

47. Угарова H.H. Люцифераза светляков. Кинетика и механизм регуляции. // Биохимия. 1989. Т.54. Вып.5. С.734-739.

48. Webster, Hall M.S., Rich C.N., Gilliland S.E., Ford S.R., Leach F.R. Improved sensitivity of the bioluminescent determination of numbers of bacteria in milk samples. // J. Food Protection. 1988. V.51. N.12. P.949-954.

49. Sutherland A.D., Bell C., Limond A., Deakin J., Hunter E.A. The Biotrace method for estimating bacterial number in milk by bioluminescence. // J. Society of Dairy Technology. 1994. V.47. N.4. P.l 17-121.

50. Bautista D.A., Mclntyre L., Laleye L., Griffiths M.W. The application of ATP bioluminescence for the assessment of milk quality and factory hygiene. // J. Rapid Methods and Automation in Microbiology. 1992. V.l. P.179-193.

51. Langeveld L.P.M., Van der Waals C.B. The ATP platform test, the A ATP test and the direct microscopic count procedure as methods of estimating the microbial quality of raw milk. // Netherlands Milk and Dairy J. 1988. V.42. P. 173-182.

52. Han S.H., Kim C.H., Kim J.B., Shin H.K., Lee S.B. Determination of bacterial number in milk by ATP assay monitored by luciferin-luciferase bioluminescence reaction. // Korean J. Animal Science. 1985. V.27. P.782-784.

53. Bossuit R. A 5-minute ATP platform test forjudging the bacteriological quality of raw milk. // Netherlands Milk and Dairy J. 1982. V.36. P.355-364.

54. Botha W.C., Luck J., Jooste P.J. The application of adenosine triphosphate method as a rapid bacteriological platform test. // South African J. Dairy Technology. 1985. V.17. P.59-64.

55. Langeveld L.P.M., van der Waals C.B. De ATP-verschilmethode en de microscopishe telmethode voor de kwaliteitscontrole van rauwe melk. // Voedingsmiddelentechnologie. 1987. V.19. P.20-23.

56. Van Crombrugge J., Waes G. Methods for assessing the bacteriological quality of raw milk form the farm. // Bulletin of the International Dairy Federation. 1991. N.256. P.53-60.

57. Flower A.J., Edyvean R.G.J., McCarthy B.J. The use of ATP-bioluminescence to detect bacterial activity on cleaned surfaces. In: Proceedings of the 8th International Symposium on

58. Biolum. and Chemilum. «Bioluminescence and Chemiluminescence. Fundamentals and Applied Aspects», 1994, Cambridge. / Eds. Campbell A.K., Kricka L.J., Stanley P.I.: J. Wiley & Sons, 1994. P.446-449.

59. Bell C., Stallard P.A., Brown S.E., Stanley J.T.E. ATP-bioluminescence techniques for assessing the hygiene condition of milk transport tankers. // International Dairy J. 1994, V.4. N.7. P.629-640.

60. Seeger K., Griffiths M.W. Adenosine triphosphate bioluminescence for hygiene monitoring in health care institutions. // J. Food Protection. 1994. V.57. N.6. P.509-512.

61. Murphy S.C., Kozlowski S.M., Bandler D.K., Boor K.J. // Evaluation of adenosine triphosphate-bioluminescence hygiene monitoring for trouble-shooting fluid milk shelf-life problem. //J. Dairy Science. 1998. V.81. N.2. P.817-820.

62. Пархоменко И.М., Перишвили Г.В., Туровецкий В.Б., Кудряшов Ю.Б., Рубин А.Г., Бровко Л.Ю. Эффект малых доз. //Радиобиология. 1993. Т.ЗЗ. N.1. С. 104-109.

63. Кондратов С.Ю., Ширина Л.И., Кржечковская В.В., Бровко Л.Ю. Влияние голодания на функциональную активность тучных клеток и содержание микросомальных цитохромов в печени. //Вопросы питания. 1992. N.5-6. С.45-47.

64. Baldwin D.R., McFalls Е.О., Jaimes D., Fashingbauer P., Nemzek T. Myocardial glucose metabolism and ATP levels are decreased two days after global ischemia. // J. Surgical Research. 1996. V.63. N.6. P.35-38.

65. Arai A.E., Pantely G.A., Thoma W.J., Anselone C.G., Bristow J.D. Energy metabolism and contractile function after 15 beats of moderate myocardial ischemia. // Circulation Research . 1992. V.70. N.6. P.l 137-1145.

66. Hsu S., Meno J.R., Gronka R, Kushmerick M., Winn H.R. Moderate hyperglycemia affects ischemic brain ATP levels but not intracellular pH.// American J. Physiology. 1994. V.266. N.l. Part 2. P. H258-H262.

67. Girotti S., Ferri E., Cascione M.L., Orlandini A., Farina L. Methodological problems of direct bioluminescent ADP assay in platelets and erythrocytes. // Analytical Biochemistry. 1991. V.192. P.350-357.

68. Pestina T.I., Mareeva T.B., Morozova N.G., Sokovnina Y.M., Votrin I.I. Importance of adenine nucleotides content evaluation in blood platelets at various steps of chronic myeloleukosis. //Voprosy Meditsinskoi Khimii. 1991. V. 37. N. 5. P.56-58.

69. Felbel J.M., Siess E.A., Zollner N. Effects of hypercholesterolemia on the nucleotide content in human blood cells. // European J. Clinical Investigation. 1992. V.22. N.5. P.326-332.

70. Kuzmanova M., Ivanov S., Nankova V., Marko M. Effects of extremely high frequency electromagnetic fields on electrophoretic mobility and ATP content in rat erythrocytes. // Bioelectrochemistry and Bioenergetics. 1994. V.35. N.l-2 P.53-56.

71. Kawabata A., Hata T. Characterization of platelet hypofunctions in rats under S ART stress (Repeated Cold Stress). // Thrombosis Research. 1993. V. 69. N.2. P. 197-207.

72. White C.H. Rapid methods for estimation and prediction of shelf-life of milk and dairy products. //J. Dairy Science. 1993. V.76. N.10. P.3126-3132.

73. Reybroeck W., Schram E. Improved filtration method to assess bacteriological quality of raw milk based on bioluminescence of adenosine triphosphate. // Netherlands Milk and Dairy J. 1995. V.49. P.1-14.

74. Bishop S., Rankine D., Talbott J.N. The nucleotides in normal human blood. // J. Biologycal Chemistry. 1959. V.234. N.5. P.1233-1237.

75. Stannard S.J., Wood J.M. The rapid estimation of microbial contamination of meat by measurement of adenosine triphosphate (ATP). // J. Applied Bacteriology. 1983. V.55. N.3. P.429-438.

76. Бровко Л.Ю., Трдатян И.А., Угарова H.H. Оптимизация биолюминесцентного метода определения микробной биомассы. // Прикладная биохимия микробиология. 1991. Т27. N.1. С.134-140.

77. Schram Е., Van Witzenburg A.-W. Improved ATP methodology for biomass assay. // J. Bioluminescence and Chemiluminescence. 1989. V.4. P.390-398.

78. Sakakibara Т., Murakami S., Nattori N., Nakajimu M., Imai K. Enzymatic treatment to eliminate the extracellular ATP for improving the detectability of bacterial intracellular ATP.// Analytical Biochemistry. 1997. V.250. P.157-161.

79. Гаврилова E.M. Люминесцентный иммуноанализ. // Итоги науки и техники. Сер. Биотехнология. Т. 3. М.: ВИНИТИ. 1987. С. 6-55.

80. Hanberger Н., Nillson L. Е., Kihlstrom Е., Mailer R. Postantibiotic effect on P-lactam antibiotics on Escherichia coli evaluated by bioluminescence assay of bacterial ATP. // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 1990. V.34. N.l. P.102-106.

81. Littel K.J., Pikelis S., Spurgash A. Bioluminescent ATP assay for rapid estimation of microbial numbers in fresh meat. // J. Food Protection. 1986. V.49. N.l. P. 18-22.

82. Siragusa G.R., Cutter C.N., Dorsa W.J., Koohmaraie M. Use of rapid microbial ATP bioluminescence assay to detect contamination of beef and pork carcasses. // J. Food Protection. 1995. V.58. N.7. P.770-775.

83. Bautista D.A., Vaillancourt J.P., Clarke R.A., Renwick S., Griffiths M.W. Rapid assessment of the microbial quality of poultry carcasses using ATP bioluminescence. // J. Food Protection. 1995. V.38. N5. P.551-554.

84. Ward DR., LaRocco K.A., Hopson D.J. Adenosine triphosphate bioluminescent assay to enumerate bacterial number in fresh fish. // J. Food Protection. 1986. V.49. N.8. P.647-650.

85. Nichols W.W., Curtis G.D.W., Johnston H.H. Detection of bacteriuria by bioluminescence; effect of pre-analysis centrifugation of specimens. // J. Applied Bacteriology. 1984. V.54. P.247-257.

86. Britz T.J., Bezudenhout J.J., Dreyer J.M., Stein P.L. Use of adenosine triphosphate as an indicator of the microbial counts in milk. // South African J. Dairy Technology. 1980. V.12. P.89-91.

87. Stannard C.J., Wood J.M. The rapid estimation of microbial contamination of raw meat by measurement of adenosine triphosphate (ATP). // J. Applied Bacteriology. 1983. V.55. N.3. P.429-438.

88. Molin O., Ansehn S. Rapid detection of bacterial growth in blood cultures by bioluminescent assay of bacterial ATP. // J. Clinical Microbiology. 1983. V.18. N.3. P.521-525.

89. Pahuski E.E., Martin L.S., Murphy P. Rapid ATP-based microbiological assay for milk samples. // Collaborative Study Report. Simposium on ATP Rapid Microbiology for the Food and Beverage Industries. Cambridge, UK. 1992, June 17.

90. Griffiths M.W., Phillips J.D. Prediction of the shelf-life of pasteurized milk at different storage temperatures. // J. Applied Bacteriology. 1988b. V.65. P. 269-277.

91. Lundin A., Hasenson M., Persson J., Pousette A. Estimation of biomass in growing cell lines by adenosine triphosphate assay. // Methods in Enzymology. 1986. V. 133. P.27-42.

92. Chapman A.G., Fall L., Atkinson D.E. Adenylate energy change in Escherichia coli during growth and starvation. // J. Bacteriology. 1971. V. 108. P. 1072-1086.

93. Theron D.P., Prior B.A., Lategan P.M. Sensitivity and precision of bioluminescent techniques for enumeration of bacteria in skim milk. // J. Food Protection. 1986. V.49. N.l. P.8-11.

94. Bishop J.R., White C.H., Firstenberg-Eden R. Rapid impedimetric method for detecting the potential shelf-life of pasteurized whole milk. // J. Food Protection. 1984. V.47. P.471-475.

95. Stewart G.S.A.B. A review. In vivo bioluminescence: new potentials for microbiology. // Letters in Applied Microbiology. 1990. V.10. P. 1-8.

96. Lay-King N.G., Taylor D.E. Stiles M.E. Estimation of Campylobacter spp. in broth culture by bioluminescence assay of ATP. // J. Applied and Environmental Microbiology. 1985. N.3. P.730-731.

97. Sarkis G.J., Jacobs W.R., Jr and G.F. Hatfull. L5 luciferase reporter mycobacteriophages: a sensitive tool for the detection and assay of live mycobacteria. // Molecular Microbiology. 1995. V.15. N.6. P.1055-1067.

98. Stewart G.S.A.B., Williams P. Review article. Lux genes and the application of bacterial bioluminescence. //J. General Microbiology. 1992. V.138. P. 1289-1300.

99. Stewart G.S.A.B., Denyer S.P., Lewington J. Microbiology illuminated: gene engineering and bioluminescence. // Trends in Food Science & Technology. 1991. V.2. N. 1. P.7-10.

100. Baker J.M., Griffiths M.W., Colin-Thompson D.L. Bacterial bioluminescence: application in food microbiology. // J. Food Protection. 1992. V.55. P. 62-70.

101. Griffiths M.W. Bioluminescence and the food industry. // J of Rapid Methods and Automation in Microbiology. 1995. V.4. P.65-75.

102. Griffiths M.W. Application of bioluminescence in the dairy industry. // J. Dairy Science. 1993. V.76.N.10. P.3118-3125.

103. Nilsson L.E., Molin Ö., Ansehn S. Bioluminescent assay of bacterial ATP for rapid detection of bacterial growth in clinical blood cultures. // J. Bioluminescence and Chemiluminescence. 1989. V.3. N.3 P. 101-104.

104. Hallander H.O., Kallner A., Lundin A., Osterberg E. Evaluation of rapid methods for the detection of bacteriuria (screening) in primary health care. // Acta Pathologica, Microbiologica et Immunologica Scandinavica. 1986. V.39. Sect.B. P.39-49.

105. Lundin A. Clinical applications of luminometric ATP monitoring. Clinical Research Centre, Karolinska Institute Dissertation. Huddinge, Sweden: Department of Clinical Chemistry and the Clinical Research Centre, 1990. 80 p.

106. Schifman R.B., Wieden M., Brooker J., Chery M. at al. Bactreriuria screening by direct bioluminescence assay of ATP. // J. Clinical Microbiology. 1984. V.20. N.10. P.644-648.

107. Schifman R.B., Wieden M., Brooker J., Chery at al. Bacteriuria screening by direct bioluminescence assay of ATP. //J. Clinical Microbiology. 1984. V.20. N.10. P.644-648.

108. Alexander D.N., Ederer G.M. Evaluation of an ATP assay as a screening method to detect significant bacteriuria. // J. Clinical Microbiology. 1976. V.3. N.l. P.42-46.

109. Gastrin B., Gustafson R., Lundin A. Evaluation of bioluminescence assay for the detection of bacteriuria. // Scandinavian J. Infectious Diseases. 1989. V.21. N.4. P.409-419.

110. Johnston H.H., Mitchel C.J., Curtis G.D.W. An automated test for the detection of significant bacteriuria. //Lancet. 1976. V.21. N. 8 P.400-402.

111. Thore A., Lundin A., Ansehn S. Firefly luciferase ATP assay as a screening method for bacteriuria. // J. Clinical Microbiology. 1983. V.17. N.2. P.218-224.

112. Nilsson L. Luciferase assay of bacterial ATP as a tool for rapid antibiotic assay. Linköping University Medical Dissertation N 109. Linköping, Sweden: Department of Clinical Bacteriology Linköping University, 1981. 94 p.

113. Thore A., Nilsson L., Höjer H. Effects of ampicillin on intracellular levels of adenosine triphosphate in bacterial cultures related to antibiotics. // Acta Pathologica et Microbiologica Scandinavica. 1977. V. 85. Sect.B. P. 161-166.

114. Nilsson L. Rapid bioluminescent assay of serum amikasin. // J. Antimicrobial Chemotherapy. 1981. V. 10. P. 125-130.

115. Nilsson L. Rapid bioluminescent assay for determining netilmicin and tobramycin concentrations in serum. // European J. Clinical Microbiology. 1983. V.2. P.564-567.

116. Nilsson L. New rapid bioassay of gentamicin based on luciferase assay of extracellular ATP in bacterial cultures. // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 1978. V.14. N.6. P.812-816.

117. Nilsson L., Hojer H., Ansehn S., Thore A. A rapid semiautomated bioassay of gentamicin based on luciferase assay of bacterial adenosine triphosphate. // Scandinavian J. Infectious Diseases. 1977. V.9. P.232-236.

118. Hojer H., Nilsson L. Rapid determination of doxycyline based on luciferase assay of bacterial adenosine triphosphate. // J. Antimicrobial Chemotherapy. 1978 V.4. P.503-508.

119. Hojer H., Nilsson L., Ansehn S, Thore A. Evaluation of a rapid semiautomated bioassay of antibiotics. // Current Chemotherapy. 1978. V.l. P.525-523.

120. Nilsson L. Factors affecting gentamicin assay. // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. V.l7. N.6. P.918-921.

121. Толстых П.И., Титов A.M., Романова H.A., Угарова Н.Н., Бровко Л.Ю. Экспресс-метод определения микробной обсемененности мягких тканей и антибиотикочувствительности при лечении гнойных инфекций. Методические рекомендации. /М.: Минздрав СССР, 1991. 16 с.

122. Hattory N., Nakajima М.-О., O'Hara К., Sawai Т. Novel antibiotic susceptibility test by the ATP-bioluminescence using filamentous cell treatment. // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 1998. V.42. N.6. P.1406-1411.

123. Schifman R.B., Reid L.L. Rapid susceptibility testing of Enterobacteriaceae: bioluminescence and Abbot Avantage methods compared. // Biological Luminescence. 1989. V.l. N.4. P.1-3.

124. Nilsson L.E., Hoffher S.E., Ansehn S Rapid susceptibility testing of Mycobacterium tuberculosis by bioluminescence assay of mycobacterial ATP. // J. Antimicrobial Agents Chemotherapy. 1988. V.32. P. 1208-1212.

125. Hanberger H. Pharmacodynamic effects of antibiotics studies on bacterial morphology, initial killing, postantibiotic effect and effective regrowth time. // Scandinavian J. Infectious Diseases. 1992. suppl.81. P.l

126. McWalter P.W. Determination of susceptibility of Staphylococcus aureus to merticillin by luciferin-luciferase assay of bacterial adenosine triphosphate. // J. Applied Bacteriology. 1984. V.54. P.145-150.

127. Chen F., M.T.Cushion. Use of an ATP bioluminescent assay to evaluate viability of Pneumocystis carinii from rats. // J. Clinical Microbiology. 1994. V.32. N. 11. P. 2791-2800.

128. Титов А.И., Романова H.A., Данилова T.M. и др. // Биолюминесцентный метод определения чувствительности микрофлоры к антибиотикам. Лабораторное дело. 1990. N.10. С.61-66.

129. Sharpe A.N., Woodrow N.N., Jackson А.К. Adenosinetriphosphate (ATP) levels in foods contaminated by bacteria. // J of Applied Bacteriology. 1970. V.33. P.758-767.

130. Griffiths M.W. Application of bioluminescence in the dairy industry. // J. Dairy Science. 1993. V.76. N.10. P. 3118-3125.

131. Richardson G.L., McGann T., Kearney R.D. Levels and location of adenosine 5'-triphosphate in bovine milk. // J. Dairy Research. 1980. V.47. P.91-96.

132. Bossuit R. Usefulness of an ATP assay technique in evaluating the somatic cell content in milk. //Milchwissenschaft 1978. V.33. P.ll-13.

133. Theron D.P., Prior B.A., Lategan P.M. Effect of temperature and media on adenosine triphosphate cell count in Enterobacter aerogenes. II J. Food Protection. 1983. V.46. N.3. P. 196-198.

134. Van Crombrugge J., Waes G., Reybroeck W. The ATP F-test for estimation of bacteriological quality of raw milk. // Netherlands Milk and Dairy J. 1989. V.43. P.347-354.

135. Bautista D.A., J.-P. Vaillancourt, Clarke R.A. Adenosine triphosphate bioluminescence as a method to determine microbial levels in chill and chill tanks at a poultry abattoir. // Poultry Science. 1994. V.37. N.ll. P. 1673-1675.

136. Siragusa G.R., Cutter C.N. Microbial ATP bioluminescence as a mean to detect contamination on artificially contaminated beef carcass tissue. // J. Food Protection. 1995. V.58. N.7. P.764-769.

137. Bacteria-counting ATP technique. Surfaces. In Reports of New Horizonts Diagnostics Corporation (Columbia Maryland, USA). October 1997.

138. Hammond J. Application of ATP bioluminescence methods in the brewing industry. // J. Bioluminescence and Chemiluminescence. 1992. V.7. P.258.

139. Littel K.J., LaRocco K.A. Bioluminescent standard curves for quantitive determination of yeast contaminants in carbonated beverages. // J. Food Protection. 1985. V.48. N.12. P. 10221024.

140. Graumlich T.R. Estimation of microbial population in orange juice by bioluminescence. // J. Food Science. 1985. V.50. P. 116-117.

141. Walker A.J., Holah J.T., Denyer S.P., Stewart G.S.A.B. The antibacterial activity of Virkon measured by colony growth and bioluminescence of lux recombinant Listeria monocytogenes. II Letters in Applied Microbiology. 1992. V.15. P.80-82.

142. Levin G.V., Schort J.R., Hess W.C. Methodology for application of adenosine triphosphate determination in waste water treatment. // Environmental Science Technology. 1975. V. 10. P.951-965.

143. Страйер Л. Биохимия в 3-х томах. М.: Мир, 1985. Т.2. 308 с.

144. Klofat W., Picciolo G., Chappelle E.W. et al. Production of adenosine triphosphate in normal and sporulation mutants of Bacillus subtilis. II J. Biological Chemistry. 1969. V.244. N.12. P.3270-3276.

145. Slayman C.L. Adenine nucleotide levels in Neurospora as influenced by conditions of growth and by metabolic inhibitors. // J. Bacteriology. 1973. V.l 14. N.2. P.752-766.

146. Егоров H.C. Основы учения об антибиотиках. М.: Высшая школа, 1986. 461 с.

147. International IDF Standard 169:1994. Quality Control in the Microbiological Laboratory. Analyst Performance Assessment for Colony Count. / IDF General Secretariat. Belgium. September 1991.

148. International IDF Standard 100B:1991. Milk and Milk Products. Enumeration of microorganisms colony count technique at 30°C. / IDF General Secretariat. Belgium. September 1991.

149. ГОСТ 9225-84 с изменением N2 от 28.09.89. Молоко и молочные продукты (Методы микробиологического анализа).

150. ГОСТ 9225-84. Молоко и молочные продукты (Методы микробиологического анализа).

151. Pettipher G.H., Mansell R., McKinnon H., Cousins С. Rapid membrane filtration-epifluorescent microscopy technique for direct enumeration of bacteria in raw milk. // Applied and Environmental Microbiology. 1980. V.39. N.2. P.423-429.

152. Семенихина В.Ф. Научное обоснование биотехнологических процессов производства цельномолочных продуктов с целью повышения качества и гигиенической надежности. Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора технических наук. М: 1991. 49 с.

153. Галат Б.Ф., Машкин Н.И., Козача Л.Г. Справочник по технологии молока. Киев: Урожай, 1990. 188 с.

154. Карташова В.М., Якубчак О.Н. Изменение видового состава микроорганизмов сырого молока. // Доклады РАСХН. 1995. N.5. С.45-46.

155. Якубчак О.Н. Роль некоторых бактерий в снижении качества молока и разработка ускоренных методов его санитарно-ветеринарной экспертизы. Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук. М: 1997. 49 с.

156. Setlow P. Germination and outgrowth. / The Bacterial Spore. London: Academic Press, 1983. V.2. P.211-254.

157. Pettipher G.H., Rodrigues U.M. Rapid enumeration of microorganisms in foods by the epifluorescent filter technique. // J. Applied and Environmental Microbiology. 1982. V.44. P.809-813.

158. Угарова H.H., Бровко Л.Ю. и др. Способ иммобилизации люциферазы светляков. Авторское Свидетельство N 660378 от 08.01.1987.

159. Беккер Г., Бергер В., Домшке Г. и др. Органикум. Практикум по органической химии. М.: Мир, 1979. Т.2. 360 с.

160. Карташова В.М. Индикация патогенных бактерий в молоке и молочных продуктах. М.: Колос, 1973. 120 с.

161. Киселев В.И., Лобарев В.М., Шойхет Я.Н. II Вестник научной программы "Семипалатинский полигон Алтай". 1994. N.1. С. 1-9.

162. Лобарев В.М., Судаков В.В., Зеленов В.И. и др. // Вестник научной, программы "Семипалатинский полигон Алтай". 1994. N.1. С.27-56.

163. Колядо В.В. Ядерные испытания, окружающая среда и здоровье населения Алтайского края. Барнаул: Алтайский Мединститут, 1993. Т.4. 4.2. С. 140-153.

164. Molecular Cloning. A Laboratory Manual / Eds J.Sambrook., E.F.Fritsch, T.Maniatis. New York: Cold Spring Harbor Lab. Press, 1989. P.1.6.

165. MacKenzie E.F.W. // J. General Microbiology. 1948. V.2. P. 197-204.

166. Архангельский И.И., Карташова В.М. Гигиена молока и контроль его качества. М.: Колос, 1966. 247 с.

167. Zählung coliformer bacterien in Milch und Milchprodukten. International Standard FIL-IDF 73:1974. //Milchwissensxhaft. 1976. V.31. N.10. P.606-611.

168. Бровко Л.Ю., Романова H.A., Фрунджян В.Г., Угарова H.H. Способ количественного определения микробной обсемененности биологического жидкого образца. Патент РФ N2061045 от 27.05.96.

169. Фрунджян В.Г., Бровко Л.Ю., Угарова H.H. Биолюминесцентный метод определения антибиотикочувствительности септической крови. // Прикладная биохимия микробиология. 1997. Т.ЗЗ. N.4. С.455-460.

170. Пол У. Иммунология. М.: Мир, 1982. 240 с.

171. Фрунджян В.Г., Бабунова B.C., Бровко Л.Ю., Карташова В.М., Угарова Н.Н. Биолюминесцентное определение общей бактериальной обсемененности сырого молока. //Молочная Промышленность. 1998. N6. С.38-39.

172. Фрунджян В.Г., Бабунова B.C., Бровко Л.Ю., Карташова B.M., Угарова Н.Н. Биолюминесцентный метод определения общей бактериальной обсемененности сырого молока. //Прикладная биохимия микробиология. 1999. Т.35. N.3. С. 1-7.

173. Поляков А.А. Ветеринарная дезинфекция. М.: Колос, 1975. 560 с.