Биологическое обоснование использования энтомопатогенных гифомицетов для подавления численности вредных саранчовых тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.09, кандидат биологических наук Левченко, Максим Владимирович

• Левченко, Максим Владимирович
• кандидат биологических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Левченко, Максим Владимирович

Введение.

1. Энтомопатогенные гифомицеты - возбудители микозов саранчовых (Обзор литературы).

1.1. Видовой состав возбудителей и распространенность.

1.2. Жизненный цикл.

4 1.3. Факторы патогенности микромицетов.

1.3.1. Ферментативная активность.

1.3.2. Токсины.

1.4. Культивирование.

1.5. Препаративные формы.

1.6. Применение энтомопатогенных гифомицетов для подавления численности саранчовых.

2. Место, материалы и методы исследований.

2.1. Место проведения исследований.

2.2. Объекты исследований.

2.2.1. Патогены.

2.2.2. Тест-насекомые.

2.3. Методика исследований.

2.3.1. Культивирование грибов, микроспоридий и бактерий.

2.3.2. Изучение продуктивности при поверхностном и глубинном культивировании.

2.3.3. Определение скорости прорастания конидий в капле воды.

2.3.4. Определение жизнеспособности конидий.

2.3.5. Определение токсигенности энтомопатогенных грибов.

2.3.6. Разведение и сбор тест-насекомых.

2.3.7. Лабораторная оценка биологической активности.

2.3.8. Оценка биологической активности в полевых условиях.

2.3.9. Обработка полученных данных.

3. Влияние биологических свойств энтомопатогенных гифомицетов на их вирулентность в отношении саранчовых.

3.1. Изоляция и первичный скрининг штаммов микромицетов по признаку вирулентности к саранчовым.

3.2. Оценка биологической активности изучаемых штаммов на насекомых из других систематических групп.

3.3. Морфо-культуральные свойства изучаемых штаммов мюскардиновых грибов.

3.3.1. Продуктивность грибов при поверхностном и глубинном культивировании.

3.3.2. Динамика прорастания конидий.

3.4. Влияние пассирования на биологическую активность гриба M.anisopliae.

3.5. Влияние сублетальных доз гриба М. anisopliae на его активность.

3.6. Оценка инсектицидной активности экзотоксинов гриба М. anisopliae.

3.7. Зависимость смертности личинок перелетной саранчи от концентрации инокулюма.

4. Влияние популяции хозяина на биологическую активность энтомопа-тогенных грибов. 4.1. Чувствительность различных видов саранчовых к гифомицетам.

4.2. Восприимчивость стадной и нестадной фаз перелетной саранчи к эн-томопатогенным грибам.

4.3. Влияние пола хозяина на биологическую активность мюскардиновых грибов.

4.4. Возрастная чувствительность личинок перелетной саранчи к микозу.

5. Активность смешенных инфекций в отношении личинок перелетной саранчи.

5.1. Микроспоридиально-грибная инфекция.

5.2. Бактериально-грибная инфекция.

6. Оценка биологической эффективности энтомопатогенных грибов в отношении перелетной саранчи в полевых условиях.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биологическое обоснование использования энтомопатогенных гифомицетов для подавления численности вредных саранчовых»

Разработка биологических средств подавления численности вредных саранчовых (стадных и нестадных) является одним из наиболее приоритетных и динамично развивающихся в настоящее время направлений в области борьбы с представителями данной группы вредителей. Подобные исследования активно проводятся во в ряде стран мира - США, Аргентина, Бразилия, Южно-Африканская Республика, Франция, Германия, Испании и др. (Lomer et all, 2001).

Из всех известных групп энтомопатогенных микроорганизмов поражающих саранчовых наибольшее внимание исследователей привлекают мюскардиновые грибы (Deuteromycetes, Hyphomycetes).

Не смотря на то, что в природных условиях естественная зараженность большинством из этих микромицетов обычно не превышает 20%, они обладают высокой агрессивностью в отношении многих видов насекомых, в частности саранчовых, легко выделяются и растут на искусственных питательных средах (как в поверхностной, так и в глубинной культуре), достаточно экономичны в производстве и удобны в применении.

В настоящее время наиболее интенсивные работы ведутся с представителями двух родов мюскардиновых грибов - Metarhizium и Beauveria.

За рубежом в последние два десятилетия проведен целый комплекс исследований, направленных на разработку препаративных форм на основе этих микромицетов для контроля численности саранчовых (Lomer et al., 2001).

В результате проведенных работ было создано и успешно внедрено в интегрированные программы защиты растений от представителей данной группы вредителей два препарата на основе гриба Metarhizium anisopliae var. acridum (Sorok,) Green Muscle® (Африка) Green Guard® (Австралия) (Lange-wald et all, 1997; Lomer et al., 2001).

Указанные препараты обладают высокой биологической эффективностью на уровне - 85-95%в отношении разных видов саранчовых - перелетная, пустынная, мороккская саранча и кобылки.

Интенсивные исследования проводятся и в отношении возможности использования для контроля саранчовых гриба Beauveria bassiana (Bals.).

На основе этого гифомицета в США созданы два экспериментальных противосаранчовых препарата - Mycocide GH® и Mycotrol® (http://www.epa.gov/pesticides/foia/reviews/128924.htm).

В 2004 году на заседании Консультационного комитета по пестицидам при ФАО было рекомендовано широкомасштабное введение в интегрированные системы контроля численности саранчовых биопрепаратов на основе эн-томопатогенных гифомицетов (Сергеев, Лачининский, 2006).

На территории бывшего СССР исследования, посвященные использованию энтомопатогенных микроорганизмов в борьбе с вредными саранчовыми - немногочисленны и носят отрывочный характер. Имеется ряд сообщений о высокой эффективности (до 100%) отдельных штаммов грибов Beauveria bassiana и В. brongneartii (Sacc.) Petch. на стадных и нестадных видах (Евлахова, Ракитин, 1968; Нуржанов, 1989 , Огарков, Огаркова Г.Р., 2000, Штерншис, Цветкова, 2002).

Анализ представленных материалов показывает, что использование биопрепаратов на основе мюскардиновых грибов является одним из наиболее перспективных и экологически безопасных направлений в подавлении численности вредных саранчовых. Это вызывает необходимость проведения комплексных работ по созданию, биологической оценке и внедрению в производство отечественных высокоэффективных микоинсектицидов для регуляции численности представителей данной группы вредителей (прежде всего стадных).

Цель работы - отбор видов и штаммов энтомопатогенных гифомицетов -как продуцентов биопрепаратов для борьбы с вредными саранчовыми (перелетная саранча, итальянский прус и др.) и оценка возможности их использования.

В задачи работы входило:

1. Поиск и выделение природных изолятов гифомицетов, паразитирующих на саранчовых, в том числе и в резервациях.

2. Скрининг культур грибов (новых и коллекционных) по признаку вирулентности в отношении различных видов, возрастов и фаз саранчовых;

3. Определение продуктивности отобранных штаммов при поверхностном и глубинном культивировании;

4. Оценка биологической активности отобранных штаммов в полевых условиях.

5. Изучение возможностей совместного использования разных видов патогенов и смешанных инфекций.

Автор выражает искреннюю благодарность сотрудникам ВИЗР И.В. Исси, Ю.С. Токареву, А.О. Берестецкому, С.Г. Удалову, Ф.Б. Ганнибалу, A.M. Наумову; директору ИСиЭЖ СО РАН (Новосибирск) В.В. Глупову и сотрудникам лаборатории патологии насекомых этого института В.Ю. Крюкову и И.М. Дубовскому за всестороннюю помощь в проведении исследований, А.К. Горбунова, зам. директора Астраханского государственного биосферного заповедника (Астрахань), сотрудникам Казахстанского НИИ защиты растений (пос. Рахат, Казахстан) во главе с академиком Сагитовым А.О. за помощь в организации исследований; куратору коллекции микроорганизмов ЗАО «Росагросервис» Б.А. Борисову за предоставленные культуры грибов; заведующему инсектарием Московского зоопарка М.В. Березину за любезно предоставленные культуры насекомых.

Особую благодарность выражаю руководителю группы по энтомопато-генным грибам лаборатории микробиологической защиты растений ВИЗР к.б.н, доценту Г.Р. Ледневу за всестороннюю помощь и консультации на всех этапах выполнении данной работы.

Заключение диссертации по теме «Энтомология», Левченко, Максим Владимирович

ВЫВОДЫ

1. При анализе биологической активности девяти штаммов энтомопатогенных гифомицетов в отношении личинок перелетной саранчи были выявлены две группы культур резко различающиеся по признаку вирулентности: низко - и средневирулентные (до 50%) и высоковирулентные (до 100%). К последней группе относятся и два из трех новых изолятов, выделенных из саранчовых в резервациях: М. anisopliae (МАК-1) и В. bassiana (ББК-1). Различия в уровне вирулентности штаммов обусловлены их биологическими особенностями, гидротермическими условиями районов выделения, видовой принадлежностью насекомых-хозяев и стадиями их развития.

2. Определены основные параметры твердофазного и глубинного культивирования отобранных штаммов. При поверхностном культивировании на зерновых субстратах (пшене, рисе, перловой крупе и горохе) наибольшая продуктивность конидий наблюдается у штамма ББК-1 (до 3,8x109 кони-дий/гр.). Из четырех испытанных субстратов наибольшая продуктивность всех испытуемых штаммов проявляется на перловой крупе и пшене. При глубинном культивировании штаммов наибольший выход бластоспор отмео ченуМАК-1 (до 1,5x10 бластоспор/мл).

3. Наибольшую чувствительность к отобранным штаммам проявляют виды саранчовых, занимающие ксерофитные стации (пустынная саранча, пустынный прус, кобылка Вагнера). Выявлена повышенная чувствительность к микозам стадной фазы перелетной саранчи по сравнению с одиночной фазой. Различия показателей вирулентности достигали 32%.

4. В условиях экспериментального заражения на хозяинно-паразитной системе «перелетная саранча-гриб» разработан метод пассирования перспективных штаммов в целях повышения их вирулентности и проведения стабилизирующего отбора. Однократный пассаж увеличивает вирулентность на 30%.

5. Обнаружено токсическое действие культуральной жидкости гриба М. anisopliae (МАК-1). Токсин продуцируются на шестые сутки культивирования и является термостобильным. К основным симптомам токсикоза отнесена потеря координации движения, необратимый паралич тест-насекомого (перелетная саранча). Покраснение покровов токсицированных насекомых при этом не происходит.

6. Выявлена зависимость смертности личинок саранчовых от инфекционной нагрузки возбудителей. Определены летальные рабочие концентрации изучаемых штаммов для личинок перелетной саранчи (1x107 и 5x107 конидий/мл). Минимальная инфекционная нагрузка для развития микоза достигается при титре рабочей суспензии 1x104.

7. Обнаружено, что при смешанном инфицировании саранчовых изучаемыми штаммами гифомицетов и микроспоридией P. locustae или бактерией Pseudomonas sp. существенно повышается скорость гибели хозяина.

8. В ходе полевых исследований в условиях Астраханского заповедника (РФ) и Алматинской области (республика Казахстан) с 2002 по 2005 годы, отобранные штаммы гифомицетов М. anisopliae (МАК-1), В. bassiana (ББК-1) и В. brongniartii (БТ-86) показали высокую вирулентность в отношении перелетной саранчи. В зависимости от места и времени проведения экспериментов биологическая активность микромицетов варьировала от 40 до 100%.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

I. Руководствуясь литературными данными (Нуржанов, 1989, Lomer et al., 2001) и результатами собственных оригинальных исследований, со значительной степенью вероятности, можно считать, что из всех известных групп эномопатогенных микроорганизмов ведущее место с точки зрения контроля численности саранчовых занимают возбудители грибной этиологии (энто-мофторовые и мюскардиновые грибы). При этом энтомофторовые грибы как типичные облигатные паразиты способные вызывать регулярные массовые эпизоотии в популяциях многих видов данной группы вредителей являются мощным естественным механизмом регуляции их численности. Возбудители же мюскардинозов, являясь факультативными сапротрофами, выступают в качестве наиболее перспективной группы как продуценты новых биологических препаратов.

II. Проведенные многолетние исследования показали, что наибольшей вирулентностью к саранчовым обладают штаммы гифомицетов {В. bassiana (ББК-1) и М. anisopliae (МАК-1)), выделенные из целевой группы насекомых-хозяев в районах с пониженной относительной влажностью воздуха, где ГТК ниже 1. При этом повышенную чувствительность к микозам проявляют виды саранчовых занимающие ксерофитные стации (сухие степи и полупустыни).

III. Исходя из полученных данных по активности как моно грибных, так и смешанных инфекций можно предположить два основных способа биологического контроля численности саранчовых:

1) Интродукция комплекса эномопатогенных микроорганизмов в местах резерваций вредителей. Данный метод предполагает создание мощного постоянного инфекционного фона грибной и микроспоридиальной этиологии, в первую очередь в пределах гнездилищ перелетной саранчи (плавни рек и озер).

2) обработка микоинсектицидами на основе отобранных высоковирулентных штаммов кулиг саранчовых на фазе личинок младших возрастов.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Левченко, Максим Владимирович, 2007 год

1. Андросов Г. К. Энтомопатогенные грибы таежных биогеоценозов как агенты биологической борьбы с вредными насекомыми. Автореф. дис. докт.лбиол. наук. М., 1986. 45 с.

2. Бегляров Г. А., Шумилов В. А., Девяткина Г. А., Пономарева И. А., Мелехин С. С. Механизированное получение вертициллиума // Защита растений. 1986. № 5. С. 37 39.

3. Беленикина 3. В., Ищенко В. Л., Луговская Е. В., Чигалейчик А, Г. Хитинолитическая активность энтомопатогенных грибов // Проблемы создания и применения микробиологических средств защиты растений. Тез. докл. Велегож, 1989. С. 212.

4. Борисов Б. А. Проблемы создания и использования микоинсектицидных препаратов. // Изучение энтомопатогенных микроорганизмов и разработка технологий производства и применения. Научн. раб. симп. СЭВ. Бухарест, 1990. С. 8 23.

5. Борисов Б.А., Серебров В.В., Новикова И.И., Бойкова И.В. Энтомопатогенные аскомицеты и дейтеромицеты. // Патогены насекомых: структуральные и функциональные аспекты. М., 2001. С. 352-427.

6. Варли К. Д., Хассел М. П., Градуэлл Д. Р. Экология популяций насекомых. М., 1978. 220 с.

7. Вейзер Я. Микробиологический метод борьбы с вредными насекомыми. М.: Колос, 1972. 639с.

8. Велицкая И. С. Изучение токсического компонента энтомопатогенного гриба Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. // Микология и фитопатология. 1973. Т.63. № 7. С. 229 230.

9. Воронина Э. Г. Биологические основы использования энтомофторовых грибов в защите растений против тлей. Автореф. дис. докт. биол. наук. Л., 1989.45 с.

10. Гештовт Н. Ю., Сулейменова Ж. Б., Баймагамбетов Е. Ж. Критерии селекционного отбора высоковирулентных штаммов энтомопатогенных грибов. // Актуальные проблемы защиты растений в Казахстане. Алма-Бастау. Кн. 1. 2002. С. 316 340.

11. Гештовт Н.Ю. Энтомопатогенные грибы. Биотехнологические аспекты. Алматы, 2002. 288 с.

12. Глупов В.В. Механизмы резистентности насекомых. // Патогены насекомых: структуральные и функциональные аспекты. М., 2001. С. 475-557

13. Гораль В. М. Биологические особенности энтомопатогенного гриба Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. в условиях глубинно поверхностного культивирования. Автореф. дис. канд. биол. наук. Киев, 1970. 24 с.

14. Гораль В.М. Энтомоцидная активность мускардинных грибов как функция условий культивирования. // VI съезд Украинского микробиол. о-ва. Киев, 1984. ч.1.С. 186-187.

15. Гораль В. М., JIanna Н. В. Технология производства энтомопатогенного препарата метаризина. // Теоретические и прикладные аспекты биотехнологии. Украинской акад. аграр. наук. Киев, 1991. С. 29 30.

16. Гоголев А.Н. Возможность использования энтомопатогенных грибов рода Beauveria в борьбе с нестадныии саранчовыми в Центральной Якутии. Экологические проблемы защиты растений. Тез. докл. Л., 1990. С 220.

17. Гулий В. В, Иванов Г. М., Штерншис М. В. Микробиологическая борьба с вредными организмами. М.: Колос, 1982. 272 с.

18. Долженко В.И. Вредные саранчовые: биология, средства и технология борьбы. С-Пб, 2003. 216 с.

19. Евлахова А.А., Швецова О.И. Болезни вредных насекомых. М.: Колос, 1965. 52с.

20. Евлахова А.А. Микозы вредных насекомых. Автореф. дис. докт. биол. наук. Пушкин, 1969. 36с.

21. Евлахова А.А. Энтомопатогенные грибы. Систематика, биология, практическое значение. Л.: Наука, 1974. 260с.

22. Евлахова А.А., Ракитин А.А. Электрическая активность нервной цепочки восточной саранчи Locusta migratoria manilensis Меу. в условиях экспериментального микоза. // Докл. АН СССР. 1968. Т. 178. № 2. С. 485-488.

23. Коваль Э.З. Определитель эномофильных грибов СССР. Киев: Наукова Думка, 1974. 260 с.

24. Курдюков В.В., Наумович О.Н. Видовая и межвидовая изменчивость чувствительности саранчовых к инсектицидам. // Бюлл. ВНИИ защиты растений. Л., 1984. №58. С. 7-12.

25. Лаппа Н. В., Гораль В. М. Изучение и использование мускардиновых грибов в защите растений. // Микробиологические методы борьбы с вредителями сельскохозяйственных растений. Тр. ВИЗР. Л., 1976. Т. 47. С. 53 -67.

26. Лаппа Н. В., Гораль В. М., Анохина В. П., Круть М. В. Сравнительное действие энтомопатогенных грибов на тепличную белокрылку. // Инф. Бюл, ВПС МОББ. 1988. № 23. С. 43 47.

27. Лачининский А.В., Сергеев М.Г., Чильдебаев М.К., Черняховский М.Е., Локвуд Дж.А., Камбулин В.Е., Гаппаров Ф.А. Саранчовые Казахстана, Средней Азии и сопредельных территорий. Ларами, 2002. 387с.

28. Леднев Г.Р., Борисов Б.А., Митина Г.В. Возбудители микозов насекомых. Пособие по диагностике. С-Пб., 2003. 79с.

29. Логинов Е.В., Павлюшин В. А. Биологическая оценка инфекционности некоторых изолятов Bacillus для персиковой и гороховой тлей. // Бюл. ВИЗР. 1987. №67. С. 5-11.

30. Лозинская Я.Л. Изменение активности детоксицирующих ферментов и антиоксидантного статуса личинок Galleria mellonella L. При микроспоридиозе. Автореф. дис. канд. биол. наук. Новосибирск, 2002. 19с.

31. Митина Г. В. Энтомоцидные токсины гриба Verticillium lecanii (Zimm.) Vieg. продуцента биопрепарата вертициллин М. Автореф. дис. канд. биол. наук. С-Пб., 1992. 19 с.

32. Митина Г. В., Сокорнова С.В., Павлюшин В.А. Выделение и изучение спектра действия фосфолипидов с инсектицидной активностью энтомопатогенного гриба Lecanicillium lecanii. // Микология и фитопатология. 2002. Т. 36. Вып. 6. С. 53-59.

33. Нуржанов А. А. Микозы саранчовых в Каракалпакии. // Защита культур от основных вредителей и сорняков в Каракалпакской АСС. Нукус, 1988. С. 130-134.

34. Нуржанов А. А. Энтомопатогенные микроорганизмы стадных саранчовых Узбекистана и перспективы их использования в биологической защите растений. Автореф. канд. дис. биол. наук. Л., 1989. 18 с.

35. Нуржанов А. А., Лачининский А.В. Энтомопатогенные микроорганизмы стадных саранчовых в Узбекистане. // Саранчовые. Экология и меры борьбы. Л., 1987. С. 62-69.

36. Нуржанов А.А., Павлюшин В.А. Вирулентность энтомопатогенных грибов для личинок итальянского пруса. // Экологические проблемы защиты растений. Тез. докл. Л., 1990. С. 246.

37. Одум Ю. Основы экологии. М.: Мир. 1975. 740 с.

38. Огарков Б. Н. Биологическое обоснование способов создания и использования грибных препаратов для борьбы с насекомыми: Автореф. дис. докт. биол. наук. Л., 1990. 44 с.

39. Огарков Б. Н. Методы выделения и оценки высоковирулентных штаммов мускардиновых грибов. // Вопросы методологии и методики научных исследований по сельскому хозяйству. Вып. 1. Новосибирск. 1972. С. 93-94.

40. Огарков Б.Н., Огаркова Г.Р. Энтомопатогенные грибы Восточной Сибири. Иркутск, 2000.134 с.

41. Огаркова Г.Р., Огарков Б.Н., Полегуева Е.П. Перспективность использования энтомопатогенных грибов для микробиологической защиты растений от вредных насекомых. // Биологический метод защиты растений. Минск, 1990. С. 158-159.

42. Павлюшин В. А. Факторы вирулентности гриба Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. и патогенез мускардиноза насекомых. Дис. канд. биол. наук. Д., 1979.205 с.

43. Павлюшин В.А. Научные основы использования энтомопатогенов и микробов. Дис. докт. биол. наук. СПб, 1998. 68с.

44. Работнова И. JI. Физиология микроорганизмов и управляемое культивирование // Успехи микробиологии. 1990. № 24, С. 88 99.

45. Сергеев М.Г., Лачининский А.В. Стадные саранчовые: начало грядущего века. // Энтомологические исследования в Северной Азии. Новосибирск, 2006. С. 284-286.

46. Серебров В.В., Алексеев А.А., Глупов В.В. // Известия РАН. Сер. биол. 2000. (в печати).

47. Тарасов JI. Г. Разработка одноэтапной технологии производства боверина и испытание его инсектицидной активности. Автореф. дис. канд. биол. наук. JI., 1970. 22 с.

48. Токарев Ю.С. Иммунные реакции гемолимфы прямокрылых насекомых при микроспоридиозе. Автореф. дис. канд. биол. наук. СПб., 2003. 22 с.

49. Тюльпанова В. А., Тюльпанов В. Г., Козлова Т. JI., Малиновский А, и др. Метаболические особенности гриба Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. при поверхностном и глубинном культивировании. // Микология фитопатология. 1987. Т.21. №3. С. 259 265.

50. Тюльпанова В. А., Козлова Т. Д., Малиновский A. JL, Нечаев А Факторы, лимитирующие рост и спорообразование энтомопатогенного гриба Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. // Лимитирование и ингибирование роста микроорганизмов. Пущино, 1989. С. 4 7.

51. Увалиева К. К., Бондарчук Т. И., Гештовт Н. Ю. Перспективы использования микробиологических средств в качестве регуляторов численности слизней вредителей сельскохозяйственных культур. // Вестник с/х науки Казахстана. 1991. № 12. С. 38 - 40.

52. Федоринчик Н. С. Микробиологический метод борьбы с вредителями с болезнями сельскохозяйственных растений. // Биологические средства защиты растений. М.: Колос, 1974. С. 263 280.

53. Федорова С. Ж. Энтомопатогенные бактерии и грибы регуляторы численности клещей Argas persicus Oken. Фрунзе: Илим, 1988. С. 148.

54. Хлопцева Р. И. В ожидании большого скачка // Защита растений. 1992. №7. С. 17-19.

55. Цыпленков Е.П. Методические указания по борьбе с вредными саранчовыми. М.: Колос, 1979. 31с.

56. Чумакова А. Я. Естественная изменчивость гриба Entomophthora thaxteriana Petch. и пути отбора высоковирулентных форм. Автореф. дис канд. биол. наук. JL, 1983. 18 с.

57. Штерншис М.В., Цветкова В.П. Микробиологический метод контроля саранчовых. // Защита и карантин растений. 2002. № 6. С. 26-27.

58. Штейнхауз Э. Микробиология насекомых. М.: Изд-во иностранной литературы, 1950. 778 с.

59. Цыпленков Е.П. Вредные саранчовые насекомые СССР. JL: Колос, 1970. 272 с.

60. Al-Aidroos К., Seifert А. М. Polisaccharide and protein degradation, germination and virulence against mosguitous in the entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae. // Canad. J. Gen. 1980. V. 36. P. 29 34.

61. Alves S. В., Pereira R. M, Production of Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorok. and Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. in plastic trays. // Ecosistema. 1989. V. 14. P. 188 192.

62. Arthurs S. P., Thomas M. B, Factors affecting horizontal transmission of entomopathogenic fungi in locusts and grasshoppers. // Aspects Appl. Biol. 1999. V. 53.-P. 89-98.

63. Balfour-Browne F.L. The green muscardine disease of insect, with special reference out an epidemic in swarm of locusts in Eritrea. // Proc. Roy. Entomol. Soc. London. 1960. V. 35. P. 65-74.

64. Bateman R. P. Methods of Appl. of microbial pesticide formulations for the control of locusts and grasshoppers. // Memoirs Entomol. Canad. Soc. 1997. V. 171. P. 69-8.

65. Bateman R. P. The development of a mycoinsecticide for the control of locusts and grasshoppers. // Outlook on Agriculture. 1997. V. 26. P. 13 -18.

66. Bello V. A., Paccola-Meirelles L. D. Localization of auxotrophic and benomyl resistance markers through the parasexual cycle in the Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. entomopathogen. // J. Invert. Pathol. 1998. V. 72. N 2. P. 97 103.

67. Bidochka M. J., Khachatourians G. G. Identification of Beauveria bassiana extracellular protease as a virulence factor in pathogenicity toward the migratory grasshopper, Melanoplus sanguinipes. // J. Invert. Pathol. 1990. V. 56. P. 362 -370.

68. Bidochka M. L, Khachatourians G. G, Protein hydrolysis In Grasshopper cuticulars by Entomopathogenic fungal extracellular proteases. // J. Invert. Pathol. 1994. V. 63. P. 7- 14

69. Binnington K., Retnakaran A. Epidermis a biologically active target for metabolic inhibitors. // Physiology of insect epidermis. East Melbourne: Inkata Press Pty Ltd., 1991. P. 307 334.

70. Brey P. Т., Ohayon H., Lesourd M., Roucache., Latge J. P. Ultrastructure and chemical composition of the outer layers of the cuticle of the pea aphid s Acyrthosiphon pisum (Harris). // Сотр. Biocem. Physiol. 1985. V. 82. P. 401— 411.

71. Burge M. N. The scope of fungi in biological control. // Fungi in biological control systems. Manchester New York: Manchester University Press, 1988. P. 1 -18.

72. Butt Т. M., Ibrahim L., Clare S.J., Beckett A. The germination behaviour of Metarhizium anisopliae on the surface of aphid and flea beetle cuticules. // Mycol. Res. 1995. V. 99. P. 945 950.

73. Champlin F. R., Cheung P. Y. K., Pekrul S., Smith R. J., et al. Virulence of Beauveria bassiana mutants for the pecan weevil. // J. Econom. Entomol. 1981. V. 74. P. 617-621.

74. Charnley A. K. Entomopathogenic fungi and their role in pest control. // The Mycota IV. Environmental and microbial relationships. - D. Wicklow and M. Soderstrom, Eds. - Springer - Verlag, Heidelberg, Germany. 1997. P. 185 -201.

75. Charnley A. K. Physiological aspects of destructive pathogenesis in insects by fungi: A speculative review. // Brit. Mycol. Soc. Symp. 1984. V. 6. P. 132-141.

76. Claydon N. Insecticidial secondary metabolites from the entomopathogenic fungus Entomophthora virulenta. // J. Invert. Pathol. 1978. V. 32. N. 3. P. 319 324.

77. Claydon N., Grove P. D. Insecticidal secondary metabolic products from the entomopatogenous fungus Verticillium lecanii. // J. Invert. Pathol. 1982. V. 40. N. 3. P. 413 -418.

78. Cliquet S., Jackson M. A. Comparison of air drying methods for evaluating the desiccation tolerance of liquid culture - produced blastospores of Paecilomyces fiimosoroseus. // World J. Microbiol. Biotech. 1997. V. 13. P. 299 -303.

79. Cortat M., Turian G. Conidiation of Neurospora crassa in submerged culture without mycelial phase. // Arch. Microbiol. 1974. V. 95. P. 305 309.

80. Dahlberg K. R., Van Etten J. L. Physiology and biochemistry of fungal sporulation. // Ann. Rev. Phytopathol. 1982. V. 20. P. 281 301.

81. Delgado F.X., Brittonl J.H, Lobo-Lima M.L., Razafindratiana2 E., Swearingen W. Small-scale field trials with entomopathogenic fungi against Locusta migratoria capito in Madagascar and Oedaleus senegalensis in Cape Verde. In preparation.

82. Fargues J. Luz C. Effects of fluctuating moisture and temperature regimes on the infection potential of Beauveria bassiana for Rhodnius prolixus. // J. Invert Pathol. 2000. V. 75. N. 3. P. 202 211.

83. Fargues J., Goettel M. S., Smits N., Ouedraogo A., et al. Variability in susceptibility to simulated sunlight of conidia among isolates of entomopathogenic hyphomycetes. //Mycopathologia. 1996. V. 35. P. 171 181.

84. Fenice M., Selbmann L., Di Giambattista R., Federici F., Chitinolytic activity at low temperature of an Antarctic strain (A3) of Verticillium lecanii. // Res. Microbiol. 1998. V. 149. N. 4. P. 289 300.

85. Ferron P. Biological control of insect pests by entomogenous fungi. // Ann. Rev. Entomol. 1978. V. 3. P. 409 442.

86. Galani G., Andrei A. M. Effect of some formulation substances on germination and virulence of Beauveria bassiana and Verticillium lecanii conidia. // Insect pathogenes and insect parasitic nematodes. Bull. IOBC // WPRS. 1996. V. 19. N. 9. P. 218-220.

87. Gelernter W. D., Lomer C. J. Success in biological control of above -ground insects by pathogens. // Measures of Success in Biological Control. G. Gurr and S. Wratten, Eds. 2000. P. 127 139.

88. Griffiths J., Bateman R, Evaluation of the Francome Mkll exhaust nozzle sprayer to apply oil based formulations of Metarhizium flavoviride for locust control. // Pesticide Sci. 1997. V. 51. P. 176 - 184.

89. Gupta S. C., Leathers T. D., El-Sayed G. N. Insect cuticle degrading enzymes from the entomogenous fungus Beauveria bassiana. // Exp. Mycol. 1992. V. 16. P. 132- 137.

90. Gupta S. C., Leathers T. D., El-Sayed G. N., Ignoffo С. M. Relationships among enzyme activities and virulence parametres in Beauveria bassiana infection of Galleria mellonella and Trichoplusia. // J. Invert. Pathol. 1994. V. 64. P. 13 17.

91. Hall F. R. Biorational pest control agents: formulation and delivery // ACS Symposium. 1995. V. 595. P. 306.

92. Hernandez-Velazquez V. M., Hunter D. M., Barrientos-Lozano L., Lezama-Gutierrez R., Reyes-Villanueva F. Susceptibility of (Orthoptera: Acrididae) to Metarhizium anisoplia var. acridum (Deuteromycotina:

93. Hyphomycetes): laboratory and field trials.// J. Orthoptera Res. 2003. V 12. N 1. P. 89-92.

94. Huber J. Untersuchungen zur Physiologic insektentotenden Pilze. // Arch. Mikrobiol. 1958. V. 29. P. 257 276.

95. Inglis G. D., Johnson D. L., Goettel M. S. Effect of bait substrate and formulation on infection of grasshopper nymphs by Beauveria bassiana. // Biocontrol Sci. Technol. 1996. V. 6. P. 35 50.

96. Jackson A. M., Whipps J. M., Lynch J. M. Effects of temperature, pH and water potential on growth of four fungi with disease biocontrol potential. // J. Microbiol. Biotechnol. 1991. V. 7. P. 494 501.

97. Jackson C. W., Heale J. В., Hall R. A. Traits associated with virulence to the aphid Mcicrosiphoniella sanborni in eighteen isolates of Verticillium lecanii //Ann Appl. Biol. 1985. V. 106. P. 39 48.

98. Jackson M. A., McGuire M. R. Lacey LA., Wraight S. P. Liquid culture production of dedication tolerant blastospores of the bioinsecticidal fungus Paecilomyces fumosoroseus. // Mycol. Res. 1997. V. 101. P. 35 41.

99. James R. R, Effect of exogenous nutrients on conidial germination and virulence against the silverleaf whitefly for two Hyphomycetes. // J. Invert. Pathol. 2001. V. 77. N.2. P. 99-107

100. Jenkins N. E., Goettel M. S. Methods for mass production of microbial control agents of grasshoppers and locusts. //Memoirs Entomol. Canad. Soc. 1997. V. 171. P. 37-48.

101. Jenkins N. E., Heviefo G., Langewald J., Cherry A. J., Lomer C. J. Development of mass production technology for aerial conidia for use as mycopesticides. // Biocontrol News Info. 1998. V. 19. P. 21 31.

102. Jenkins N. E., Thomas M. B. Effects of formulation and Appl. method on the efficacy of aerial and submerged conidia of Metarhizium flavoviride for locust and grasshopper control. // Pesticide Sci. 1996. V. 46. P. 299 306.

103. Kmitowa K. The effect of different amounts of nitrogenous compounds in the culture medium on the growth and pathogenicity of entomopathogenic fungi. // Bull. Acad. Pol. Sci. 1979. V. 2. N. 27. P. 949 952.

104. Kooyman C., Bateman R. P., Langewald J., Lomer, C. J., et al. Operational scale Appl. of entomopathogenic fungi for control of Sahelian grasshoppers. // Proc. Royal Society. 1997. V. 264. P. 541 546.

105. Kosir J. M., MacPherson J. M., Khachatourians G. G. Genomic analysis of a virulent and a less virulent strain of the entomopathogenic fungus. // Can. J. Microbiol. 1991. V. 37. N 7. P. 534 541.

106. Krasnoff S.B., Gupta S., Leger R.J. St, Renwick J. A.A., Roberts D.W. // J. Invertebr. Pathol. 1991. - 58. - P. 180-188.

107. Kreuger S. R, Villani M. G., Martins A. S., Roberts D. W. Efficacy of soil Appl.s of Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorokin conidia, and standard and lyophilized mycelial particles against Scarab grubs. // J. Invert. Pathol. 1992. V. 59. P. 54 60.

108. Lane В. S., Trinci A. P. J., Gillespie A. T. Influence of cultural conditions on the virulence of conidia and blastospores of Beauveria bassiana to the green leafhopper, Neaphotettix virescens. // Mycol. Res. 1991. V. 95. N 7. P. 829 833.

109. Langewald J., Cherry A. Prospects for microbial control in West Africa. // Biocontrol News Info. 2000. V. 21. P. 51 56.

110. Latchininsky A.V., Launois-Luong M.H. Le Criquet marocain, Dociostaurus marrocanus (Thuberg, 1815), dans la distribution. // Etude monographique relative a lex -USSR et aux pays proches. 1992. 289 p.

111. Leger R. J., Charnley A. K., Cooper R. M. Cuticle degrading enzymes of entomopathogenic fungi: synthesis in culture on cuticle. // J. Invert. Patrol. 1986. V. 48. N. l.P. 85 -89.

112. Leger R. J., Charnley A. K. Kinetics of the digestion of insect cuticle by a protease from Metarhizium anisopliae. // J. Invert. Pathol. 1991. V. 57. P. 146 -147.

113. Leger R. J., Durrands P. K., Charnley A. K., Cooper R. M. Role of extracellular chymoelastase in the virulence of Metarhizium anisopliae for Manduca sexta // J, Invert. Pathol. 1988. V. 52. N. 2. P. 285 293.

114. Leger R. J., Staples R. C. Entomopatogenic isolates of Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana and Aspergillus flavus product multiple extracellular chitinase isoensymes. // J. Invert. Pathol. 1993. V 61. P. 81 84.

115. Lockey К. H. Lipids of the insect cuticle origin, composition and function. // Сотр. Biochem. Physiol. 1988. P. 595 602.

116. Lomer C. J. Metarhizium flavoviride recent results in the control of locusts and grasshoppers. // New Strategies in Locust Control. 1997. P. 159 169.

117. Lomer C. J., Bateman R. P., Dent D., DeGroote H. Development of strategics for the incorporation of microbial pesticides into the integrated management of migratory pests. // Agricultural and Forest Entomology. 1999. V. 1. P. 71 -88.

118. Lomer C. J., Bateman R. P., Godonou 1., Kpindou D. Field infection of Zonocerus variegatus following Appl. of an oil based formulation of Metarhizium flavoviride conidia. // Biocontrol Sci. Technol. 1993. V. 3. P. 337 346.

119. Lomer C. J., Bateman R. P., Johnson D. L., Langewald J., Thomas M. B. Biological control of locusts and grasshoppers. // Ann. Review Entomol. 2001. V. 46. P. 667-702.

120. Maiga I. H., Douro Kpindou О. K., Lomer C. J., Langewald J. Pratiques paysannes et utilisation potentielle de Metarhizium flavoviride Gams and Rozsypal en lutte antiacridienne au Niger. // Insect Sci. and its Appl. 2000. V. 19. P. 163 -171.

121. Maiga I. H., Douro Kpindou О. K., Lomer C. J., Langewald J. Utilisation de Metarhizium flavoviride Cams and Rozsypal centre les sauteriaux dans des essais participatifs en milieu paysan au Niger. // Insect Sci. and its Appl. 1999. V. 18 P. 279-284.

122. Manocha M. S., Begum A. Properties of chitin synthetase from mucoraceous hosts of a mycoparasite. // Can. J. Microbiol. 1985. V. 31. P. 6 12.

123. Milner R., Wright Т., Welton M., Budau C., Gringorten L, Tyrell D. Identification and partial purification of a cell lytic factor from Entomophaga aulicae. // J. Invert. Pathol. 1994. V. 64. - P. 253 - 259.

124. Mollier P., Lagnel J., Foumet В., Aioun A., Riba G. A glycoprotein highly toxic for Galleria mellonella larvae secreted by the Entomopathogenic fungus Beauveria sulfyrescens. // J. Invert. Pathol. 1994. V. 64. P. 200 207.

125. Mollier P., Lagnel J., Quiot J. M., Aioun A., Riba O. Cytotoxic activity in culture filtrates from the Entomopathogenic fungus Beauveria sulfyrescens. // J. Invert. Pathol. 1994. V. 64. P. 208 213.

126. Moore D., Douro Kpindou О. K., Jenkins N. E., Lomer C. J. Effects of moisture content and temperature on storage of Metarhizium flavoviride conidia. // Biocontrol Sci. Technol. 1996. V. 6. P. 51 - 61.

127. Moore D., Higgins P. M., Lomer C. J. Effects of simulated and natural sunlight on the germination of conidia of Metarhizium flavoviride Gams and Rozsypal and interactions with temperature. // Biocontrol Sci. Technol. 1996. V. 6. P. 63 76.

128. Moore D., Langewald J., Obognon F. Effects of rehydration on the conidial viability of Metarhizium flavoviride mycopesticide formulations. // Biocontrol Sci. Technol. 1997. V. 7. P. 87 94.

129. Napolitano R., Juarez M. P. Entomopathogenous fungi degrade epicuticular hydrocarbons of Triatoma infestans. // Arch. Biochem. Biophys. 1997. V. 311.N. LP. 208 -216.

130. Ouedraogo A., Fargues J., Goettel M., Lomer C. Effects of temperature on vegetative growth among isolates of Metarhizium anisopliae and M. flavoviride. // Mycopathol. 1997. V. 137. P. 37-43.

131. Paterson I. E., Charnley A. K., Cooper R. M., Clarkson J. M, Specific induction of a cuticle degrading protease of the insect pathogenic fungus Metarhizium anisopliae. //Microbiology. 1994. V. 140. P. 185 - 189.

132. Peczynska Czoch W., Wieczorek J., Urbanczyk M. J. Gemagglutinins of Beauveria bassiana strains: the effect of growth conditions on their production. // Arch. Immunol. Ther. Exp. (Warsz). 1992. V.40. N. 5 - 6. P. 313 - 320.

133. Peczynska Czoch W., Zal Т., Czerwinski M., Szulc M. Purification and some properties of hemagglutinin from Beauveria bassiana. // Arch. Immunol. Ther. Exp. (Warsz). 1992. V. 40. N 5 - 6. P. 320 - 324.

134. Pereira R. M., Roberts D. W. Alginate and cornstarch mycelial formulations of entomopathogenic fungi, Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae . //J. Econ. Entomol. 1991. V. 84. P. 1657 1661.

135. Pereira R. M., Roberts D. W. Dry mycelium preparations of entomopathogenic fungi, Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana. // J. Inver. Pathol. 1990. V. 56. P. 39 46.

136. Prior C., Jollands P., Patourel G. Infectivity of oil and water formulations of Beauveria bassiana (Deyteromicotina: Hyphomycetes) to the cocoa weevil pest Pantorhytes plutus (Coleoptera: Curculionidae). // J. Invert. Pathol. 1988. V. 52. P. 66 72.

137. Quimby P. C., Zidack N. K., Boyette C. D., Grey W. E. A simple method for stabilizing and granulating fungi. // Biocontrol Sci. Technol. 1999. V 9. P. 5 -8.

138. Quintela E. D., McCoy C. W. Conidial attachment of Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana to the larval cuticle of Diaprepes abbreviatus

139. Coteoptera: Curculionidae) treated with imidacloprid. // J. Invert. Pathol. 1998. V. 72. N 3. P. 220 230.

140. Rhodes D. J. Formulation of biological control agents. // Exploitation of microorganisms. D. G. Jones, Ed. London. 1993. P. 411 - 439.

141. Rhodes D. J. Formulation requirements for biological control agents. // Aspects Appl. Biol. 1990. V. 24. P. 145 153.

142. Robert A., Messing-Al-Aidroos K. Acid production by Metarhizium anisopliae: effect on virulence against mosquites and detection of in vitro amylase, protease and lipase activity. // J. Invert. Pathol. 1985. V. 45. P. 9 15.

143. Rombach M. C. Production of Beauveria bassiana (Deuteromycotina Hyphomycetes) sympoduloconidia in submerged culture. // Entomophaga. 1989. V. 34. N 1. P. 45 -52.

144. Rosato Y. В., Messias C. J., Azevedo J. L. Production of extracellular enzymes by isolated of Metarhizium anisopliae. // L. Invert. Pathol. 1981. V. 38. P. 1-3.

145. Samsinakova A., Misikova S. Enzyme activities in certain entomophagous representatives of Deuteromycetes (Moniliales) in relationship to their virulence. // Ceska mycologie. 1973. V. 27. N. 1. P. 55 60.

146. Santharam G., Easwaramoorthy S., Regupathy A., Jayaraj S. I. Possibility of increasing the pathogenicity of the white halo fungus Cephalosporium lecanii on coffee green bug Coccus viridis during summer. // J. Plantation Crops. 1997. V. 5. P. 121 122.

147. Shah P.A., Kooyman C., Paraiso A., Surveys for fungal pathogens of locusts and grasshoppers in Africa and the Near East. // Memoirs Entomol. Soc. Canada. 1997. V. 171. P. 27-35.

148. Shimizu S., Tshuchitani Y., Matsumoto T. Serology and substrate specificity of extracellular proteases from four species of Entomopathogenic Hyphomycetes. // J. Invert. Pathol. 1993. V. 61. P. 192 195.

149. Sosa-Gomez D. R., Boucias D. G., Nation J. L. Attachment of Metarhizium anisopliae to the southern green stink bug Nezara viridula cuticle andfungistatic effect of cuticular lipids and aldehydes. // J. Invert. Pathol. 1997. V 69. P. 31 -39.

150. Steenberg Т., Humber R. A. Entomopathogenic potential of Verticillium and Acremonium species (Deuteromycotina: Hyphomycetes). // J. Invert. Pathol. 1999. V. 73. N. 3. P. 309 314.

151. Stephan D., Welling M., Zimmerman G. Locust control with Metarhizium flavoviride; formulation and Application of blastospores. / Insect pathogenes and insect parasitic nematodes. //Bull, IOBC/WPRS. 1996. V. 19. N. 9. P. 232 235.

152. Swanson D. Economic feasibility of two technologies for production of mycopesticides in Madagascar. // Memoirs Entomol. Canad. Soc. 1997. V. 171. P. 101-113.

153. Takahashi S., Kakinuma N., Uchida K., Hashimoto R., Pyridovericin and pyridomacrolidin: novel metabolites from entomopathogenic fungi Beauveria, bassiana. // J. Antibiot. Tokyo, 1998. V. 51. N. 6. P. 596 604.

154. Thomas К. C., Khachatourians G. G., Ingledew W. M, Production and properties of Beauveria bassiana conidia cultivated in submerged culture. // J. Can. Microbiol. 1986. V. 33. P. 12 20.

155. Thomas M. В., Blanford S. Current and future strategies for locust and grasshopper control. // Pesticide Outlook. 1998. V. 9. P. 13-16.

156. Thomas M. В., Blanford S., Gbongboui C., Lomer C. J, Experimental studies to evaluate spray Apples of a mycoinsecticide against the rice grasshopper, Hieroglyphus daganensis, in Northern Benin. // Entomol. Exper. App. 1998. V. 87. P. 93 102.

157. Thomas M. В., Blanford S., Lomer C. J, Reduction of feeding by the variegated grasshopper, Zonocerus variegalus, following infection by the fungal pathogen. Metarhizium flavoviride. // Biocontrol Sci. Technol. 1997. V 7. P. 327 -334.

158. Vey A., Quiot J. M., Vago C., Fargues J. Effect immunodepresseur de toxines fongiques: Inhibition de la reaction d'encapsulement multicellulaire par les destruxines. // C. R. Acad. Sci. 1985. V. 300. N. 3. P. 647 651.

159. Vey A., Riba G. Toxines insecticides issues de champignons entomopathogenes. Etat actuel des conaissances dutilsation de leurs activites. // C. R. Acad. Agr. Fr. 1989. V.75. N. 6. P. 143 149.

160. West E.J., Briggs J.D. In vitro toxin production by the fungus Beauveria bassiana and bioassay in greater wax moth larvae. // J. Econom. Entomol.1968. V. 61. N. 3. P. 684-689.

161. Wood S. N., Thomas M. B. Space, time and persistence of virulent pathogens. // Proceed. Royal Soc. London, 1996. V. 263. P. 673 680.

162. Yeuniaux C. Chitinous structures. //Comprehensive Biochemistry. 1971. V. 26. P. 595 632.

163. Zacharuk R. Y. Fine structure of the fungus Metarhizium anisopliae infecting three species of larvae Elateridae (Coleoptera). Conidial germ tubes and appressoria. // J. Invert. Pathol. 1970. V. 15. N. 3. P. 81 91.

164. Zimmermann G. The entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae and its potential as a biocontrol agent. // Pesticide Sci. 1993. V. 37. P. 375 379.