Биологическая характеристика штамма ВН-96 вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней и разработка биотехнологических параметров его культивирования тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.06, кандидат биологических наук Симоненко, Наталья Валерьевна

• Симоненко, Наталья Валерьевна
• кандидат биологических наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Симоненко, Наталья Валерьевна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Трансмиссивный (вирусный) гастроэнтерит свиней (историческая справка).

1.2. Физико-химические и биологические свойства вируса ТГЭС.

1.3. Культуральные свойства вируса ТГЭС.

1. 4. Влияние различных факторов на уровень накопления вирусов в монослойных культурах клеток.

1.5. Некоторые аспекты стандартизации перевиваемых линий клеток.

1. 6. Стабилизация вируса методом лиофильного высушивания.

1. 7. Средства и методы специфической профилактики ТГЭС.

ГЛАВА 2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2. 1. Материалы и методы.

2. 1. 1. Объекты исследования.

2. 1.2. Подготовка перевиваемой линии клеток.

2. 1.3. Методы индикации микоплазм в клеточных культурах.

2. 1.4. Цитометрические исследования линий клеток.

2. 1.5. Условия культивирования вируса.

2. 1. 6. Цитоморфологические методы изучения инфицированных и контрольных культур клеток.

2. 1. 7. Изучение бляшкообразующей способности штамма ВН-96. 52 2. 1. 8. Физико-химические методы исследования культурального вируса ТГЭ свиней.

2. 1. 9. Лиофилизация вируса.

2.1.10. Проверка антигенной и биологической активности штамма ВН-96 вируса ТГЭС.

2.1.11. Статистическая обработка результатов исследований.

2. 2. Результаты исследований и их обсуждение.

2.2.1. Выделение и биологическая характеристика штамма ВН-96 вируса ТГЭС.

2.2.2. Сравнительная характеристика и оценка чувствительности сублиний клеток почки эмбриона свиньи к штамму ВН-96 вируса ТГЭС.

2.2.3. Стандартизация перевиваемых сублиний клеток СПЭВ - субстратов для производства штамма ВН-96 вируса ТГЭС.

2.2.4. Оптимизация условий культивирования вируса ТГЭС в сублинии клеток СПЭВ-б.

2.2.5. Серийное пассирование штама ВН-96 вируса ТГЭС в сублинии клеток СПЭВ-б.

2.2.6. Опытно-промышленное производство вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней.

2.2.7. Лиофильное высушивание культурального вируса ТГЭС.

2.2.8. Изучение антигенных свойств и биологической активности штамма ВН-96 вируса ТГЭС.

2.2.9. Сравнительная оценка иммунобиологических свойств штамма «ВН-96» вируса ТГЭС в условиях свиноводческого комплекса.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биологическая характеристика штамма ВН-96 вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней и разработка биотехнологических параметров его культивирования»

Трансмиссивный (вирусный) гастроэнтерит свиней (ТГЭС) - остро протекающая, высоко контагиозная болезнь, которая поражает животных t всех возрастных групп, но главным образом поросят до 3-х месячного возг раста и наносит значительный экономический ущерб промышленному свиноводству [101,135,164,193].

Определённые успехи в борьбе с ТГЭС связаны с внедрением в практику живых культуральных моно- и ассоциированных вакцин, результативность применения которых в крупных свинокомплексах, как правило, недостаточно эффективна, что связано с существенными нарушениями технологии содержания и кормления, несоблюдением обязательных ветеринарно-санитарных требований, перегруппировкой и завозом из отдалённых регионов России и зарубежных стран животных, хронически инфицированных вирусами и бактериями с различным уровнем патогенности [1,7, 19,44, 55].

За последние 10-15 лет в мире резко возрос объем научных разработок, связанных с более широким применением перевиваемых линий клеток (ПЛК) в качестве субстрата для производства иммунобиологических препаратов (ИБП). Важное место в решении задач применения ПЛК в биотехнологии занимают вопросы выбора, контроля и стандартизации свойств, совершенствования технологии культивирования ПЛК, создания рабочих и посевных банков клеток в жидком азоте, поиска и апробации новых более эффективных антибактериальных препаратов, а также проблем контаминации и деконтаминации культур клеток и ИБП от бактерий и микоплазм [15, 27, 66,123].

Исследования, направленные на поиск, паспортизацию и стандартизацию ПЛК, предназначенных для получения вируса ТГЭС с выраженными ан- ■ тигенными и иммуногенными свойствами, а также разработка более стабильi ного по генетическим и иммунобиологическим показателям авирулентного штамма вируса ТГЭС, пригодного для профилактики данного заболевания у свиней разных половозрастных групп, является актуальной задачей на современном этапе и имеет большое практическое значение.

Цель работы - изучение биологических свойств штамма ВН-96 вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней, оптимизация условий его культивирования в перевиваемой линии клеток и обоснование использования в качестве потенциального вакцинного препарата.

Для достижения поставленной цели нами были определены следующие задачи:

1. Провести селекцию штамма ВН-96 вируса ТГЭС и изучить его физико-химические свойства.

2. Оценить в сравнительном аспекте чувствительности первичной и перевиваемых тест-культур клеток к вирусу ТГЭС; провести отбор наиболее перспективной ПЛК в качестве субстрата для серийного производства вирусного антигена.

3. Подобрать средства и методы деконтаминации тест-культур с использованием моно- и комплексных препаратов на основе фторхинолонов и поверхностно активных веществ;

4. Осуществить стандартизацию и паспортизацию культуральной модели в качестве субстрата для получения штамма ВН-96 вируса ТГЭС;

5. Определить оптимальные условия культивирования штамма ВН-96 вируса ТГЭС стационарным и роллерным методами; оптимизация условий стабилизации штамма ВН-96 вируса ТГЭС;

6. Изучить антигенные, и иммуногенные свойства штамма ВН-96 вируса ТГЭС; обосновать перспективность его использования в качестве вакцинного препарата.

Научная новизна. Впервые выделен и изучен штамм ВН-96 вируса ТГЭС, определены оптимальные условия его культивирования и изучена бляшкообразующая способность. На основании изучения антигенных и им-муногенных свойств обоснована перспективность использования штамма ВН-96 вируса ТГЭС в качестве вакцинного препарата.

7 '

Впервые доказана возможность и перспективность использования метода проточной цитометрии для экспресс-оценки культуральных, цитометриче-ских и морфологических показателей, а также выбора наиболее перспективной культуральной модели для репродукции вируса ТГЭС.

Практическая значимость. Разработаны методы концентрирования и очистки культурального вируса ТГЭС штамм ВН-96. Апробирован эффективный способ деконтаминации линии клеток почки эмбриона свиньи (СПЭВ) при помощи моно- и комбинации препаратов на основе Энрофлона-К и поверхностно-активных веществ. Определена оптимальная схема деконтаминации ПЛК сублинии СПЭВ-б от микоплазм. Подготовлены для практического использования очищенные от микоплазм-контаминантов эталонный. и рабочий криобанки ПЛК сублинии клеток СПЭВ-б со стабильными кулъ-туральными и цитометрическими показателями. Определены оптимальные условия культивирования вируса ТГЭС в ПЛК сублинии СПЭВ-б стационарным и роллерным методами. Предложена защитная среда оптимального состава, разработаны режимы лиофилизации и условия хранения сухих форм культурального вируса ТГЭС.

По материалам диссертационной работы опубликованы «Методические рекомендации о порядке аттестации и поддержания перевиваемых линий клеток, используемых для культивирования вирусов и производства иммунобиологических препаратов ветеринарного назначения» (в соавторстве с Л. II. Дьяконовым, В. П. Уласовым, Б. В. Соловьевым, 2007), утвержденные академиком-секретарем Отделения ветеринарной медицины РАСХН А.М. Смирновым от 19.10.2007г.

Основные положения, выносимые на защиту <

1. На основании определения размеров и морфологии частиц, изучения физико-химических свойстб, электрофорешческой подвижности и молекулярной массы структурных белков, антигенных и иммуногенных свойств подтверждена подлинность и специфичность штамма ВН-96 вируса ТГЭС.

2. Перевиваемая : линия клеток СПЭВ-б наиболее чувствительна к штамму ВН-96 вируса ТГЭС.

3. Эффективная деконтаминация линии клеток почки эмбриона свиньи от микошазменной инфекции достигается при использовании энрофлона-К и комбинаций препаратов норфлоксацина с этонием и энрофлона-К с твином 80. . ' < ' ' ' ^ ' ' \ . . . V;-'. , . . - •/.

4. Оптимальными условиями для выращивания линии клеток СПЭВ-б и репродукции штамма ВН-96 вируса ТГЭС являются: посевная концентра-. ция клеток150 тыс:/мл, заражение в суспензию в дозе 5,0-6,01g ТЦДзо, время адсорбции вируса клетками не менее 60 минут при 37°СУ применение феталь ной сыворотки крови крупного рогатого скота и культивирование вируса роллерным методом.

5. Для замораживания и лиофилизации штамма ВН-96 вируса ТГЭС в биотехнологическом процессе эффективно использование защитной среды вгнки-з. ' .

Работа выполнена в лаборатории бактериальных и вирусных инфекций ГНУ Саратовский научно исследовательский ветеринарный институт Россельхозакадемии:

Апробация работы. Материалы диссертации представлены на: Международной научно-производственной конференции «Экологобиологические проблемы повышения продуктивного долголетия животных» (Екатеринбург, 2006 г.); Международной научно-практической конференции «Проблемы профилактики и борьбы. а особо опасными, экзотическими и.малоизученными инфекционными болезнями животных» (Покров, 2008); Всероссийской научно-практической конференции «Проблемы, задачи и пути научного 1 - ' ■ ' ' ! обеспечения приоритетного национального проекта «Развитие АПК» (Новочеркасск, 2008)1 ; ,

Публикации. '-.'»"

По теме диссертации опубликовано 7 работ, из них 3 статьи в журналах, рекомендованных ВАК РФ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 158 страницах машинописного текста и состоит из следующих разделов: введения, обзора литературы, собственных исследований, включающих материалы и методы и результаты исследований и их обсуждение, заключения, выводов, практических предложений, списка литературы. Список литературы включает 218 источников, в том числе 136 отечественных и 82 зарубежных. Работа иллюстрирована 27 таблицами и 12 рисунками.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология (в том числе бионанотехнологии)», Симоненко, Наталья Валерьевна

ВЫВОДЫ

1. Показано, что по размерам и морфологии частиц, электрофоретической подвижности и молекулярной массе структурных белков, по наличию в треках, ПЦР вирусной нуклеиновой кислоты характерной фракции комплементарной ДНК (кДНК) величиной 886 пар нуклеотидов вирионы штамма ВН-96*соответствуют показателям коронавируса свиней. Специфичность штамма ВН-96 подтверждена в реакции нейтрализации со специфической сывороткой крови и в ПЦР.

2. Установлена различная чувствительность первичной культуры клеток почек эмбриона поросят и перевиваемых сублиний клеток СПЭВ к штамму ВН-96 вируса ТГЭС. Наиболее чувствительной и перспективной культуральной моделью для практического применения является ПЛЕС сублинии СПЭВ-б.

3. Выявлено, что деконтаминация линии клеток СПЭВ в максимальных концентрациях, не превышающих 40-50 тыс./мл, от микоплазменной инфекции наиболее успешна при использовании моно-препарата на основе энрофлона-К по методу Мовлеса и двух комбинированных препаратов: норфлоксацин (50мг/мл) + этоний (7мкг/мл) и энрофлон-К (35 мкг/мл) + твин-80 (7мкг/мл).

4. Определена целесообразность применения метода проточной цитомет-рии для экспресс-оценки и выбора наиболее перспективной культуральной модели для производства антигена и контроля активности вакцины против ТГЭ свиней. Установлена обратная зависимость ростовых свойств и величины апоп-тоза сублинии клеток СПЭВ-б.

5. Максимальное накопление вируса (6,67-7,33 lg ТЦД50/мл) происходит при посевной концентрации ПЛК сублинии клеток СПЭВ-б 150тыс/мл, заражении в суспензию клеток ПЛК штамма ВН-96 вируса ТГЭС из расчета 5,0 lg ТЦД5о/мл, адсорбции вируса клетками в течение 60 минут при 37°С. Оптимальной ростовой питательной средой является среда «Игла МЕМ» с 2-4% фетальной сывороткой крови; накопление вируса роллерным методом достоверно выше на 0,7-1,0 ^ ТЦД5о/мл, чем в стационарной культуре.

6. Определена эффективная защитная среда - ВГНКИ-3, в которой лио-фильно высушенный штамма ВН-96 сохраняет безвредность для лабораторных животных\и исходную активность не менее двух лет, при температуре хранения 4-6° и минус 20°С.

7. Штамм ВН-96 вируса ТГЭС обладает безвредностью, авирулентностью для лабораторных животных и поросят, сохраняет исходные биологические свойства в течение 5-и пассажей, генетически стабилен в процессе серийного пассирования, характеризуется выраженными антигенными и иммуногенными свойствами, что позволяет использовать его для конструирования вакцины против вируса ТГЭС.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Методические рекомендации о порядке аттестации и поддержания перевиваемых линий клеток, используемых для культивирования вирусов и производства иммунобиологических препаратов ветеринарного назначения // Дьяконов Л. П., Уласов В. Н., Соловьев Б. Н., Симоненко Н. В. и др. - М. - 2006 г.

2. Методические указания по поддерживанию, хранению и контролю линии клеток «СПЭВ-б», утвержденные ФГУ ВГНКИ от 6 апреля 2007 г.

3. Для деконтаминации линии клеток СПЭВ от микоплазменной инфекции рекомендуется использовать моно-препарат на основе энрофлона-К и два комбинированных препарата на основе норфлоксацина с этонием и энрофлон-К с твином-80. Максимальные концентрации обрабатываемых ПЛК не должны превышать 40-50 тыс./мл. Сыворотки крови, вносимые в питательную среду, необходимо предварительно обработать с профилактической целью энрофло-ном-К в дозе 20 мкг/мл в течение 72 часов при 37°С.

4. Рекомендуется для экспресс-оценки и выбора наиболее перспективной культуральной модели для производства антигена использовать метод проточной цитометрии, при котором достигается быстрая оценка характеристик клеток по показателям: размеры клеток, гранулярность, распределение ДНК по фазам клеточного цикла и запрограммированная клеточная гибель — апоптоз.

5. Для лиофилизации штамма ВН-96 вируса ТГЭС предлагается применять защитную среду ВГНКИ-3, обеспечивающую его безвредность для лабораторных животных и сохранение исходной активности штамма не менее двух лет при температуре хранения 4-6° и минус 20° С.

6. Рекомендуется использовать штамм ВН-96 вируса ТГЭС в качестве производственного аттенуированного штамма для изготовления диагностических и иммунобиологических препаратов против трансмиссивного гастроэнтерита свиней.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Трансмиссивный (вирусный) гастроэнтерит свиней (ТГЭС) - остро протеt ! кающая, высоко контагиозная болезнь, которая поражает животных всех возрастных групп, но главным образом поросят до З-х месячного возраста и наносит значительный экономический ущерб промышленному свиноводству [27, 29, 54, 134, 176]. Основным средством борьбы с вирусом ТГЭС является специфическая профилактика при помощи моно- и ассоциированных вакцин, а также инактивированных препаратов, технология изготовления-и схема применения которых несовершенны, поэтому результативность вакцинации животных' недостаточно эффективна. Не отвечают современным требованиям и вопросы подбора, контроля и паспортизации культуральных моделей, условия получения и оценка качества антигена, а также контроля активности и подлинности штамма вируса ТГЭС. Следует также указать на целый ряд нерешенных и малоизученных проблем по применению иммунобиологических препаратов (ИБП) в неблагополучных по ТГЭС хозяйствах [98, 121, 134,135].

За последние 10-15 лет в мире резко возрос объем научных разработок, связанных с более широким применением перевиваемых линий клеток (ПЛК) в качестве субстрата для производства иммунобиологических препаратов (ИБП). При общей тенденции более широкого применения ПЛК в биотехнологии существует целый ряд нерешенных и малоизученных проблем, тормозящих процессы разработки и совершенствования ИБП и, в частности, вакцин против. ТГЭС. Важное место в решении этих задач занимают вопросы выбора, контроля и стандартизации свойств, высокочувствительных к вирусу ТГЭС культу-ральных моделей, совершенствования технологии культивирования ПЖ, характеристики и методов получения штаммов вируса ТГЭС в больших объемах, i i 1 создания рабочих и посевных банков клеток в жидком азоте, стабилизации свойств и условий хранения вируса, поиска и апробации новых более эффективных антибактериальных препаратов, а также проблем контаминации и деконтаминации культур клеток и ИБП от бактерий и микоплазм [20, 123]. Поэтому исследования, направленные на поиск, паспортизацию и стандартизацию ПЛК, предназначенных для получения вируса ТГЭС с выраженными антигенными и иммуногенными свойствами, а также вопросы оптимизации условий культивирования вируса ТГЭС, представляют для ветеринарии бесспорную! актуальность. 1

В результате селекции штамма «РИМС» был получен стабильный крупно-бляшечный вариант вируса ТГЭС размером бляшек 4,5-5,0 мм, условно названный ВН-96, и изучены его морфологические, физико-химические и биологические показатели.

Использование современных физико-химических методов достоверно показало, что по морфологии вирионов, электрофоретической подвижности, молекулярной массе структурных белков, а также по результатам ПЦР исследуемый вирус следует квалифицировать, как штамм вируса ТГЭС.

В результате выполненных исследований были получены деконтаминиро-ванные от микоплазм сублинии клеток СПЭВ. Установлено, что наиболее приемлемой в научном и практическом плане является перевиваемая сублиния клеток, сохраняемая в ВНИИВВ и М (СПЭВ, 184 пассаж), и условно обозначенная нами как СПЭВ-б. Данная культура характеризуется однородной клеточной популяцией, нормальной морфологией, высоким ростовым потенциалом и оптимальными показателями проточной цитометрии (ПЦ). Она стабильна по ка-риотипу, интенсивно пролиферирует, длительно сохраняется в жидком азоте и поэтому перспективна для массового производства вируса ТГЭС. Кроме того, линия клеток СПЭВ-б характеризуется высокой чувствительностью к вирусу ТГЭС и обеспечивает максимально высокое накопление штамма ВН-96 на уровне 7,0-7,33 ^ ТЦД50, поэтому сублиния клеток СПЭВ-б была предложена нами в качестве тканевого субстрата для производства антигена.

Экспериментально подтверждена зависимость величины апоптоза и качества тест-культуры. Этот факт указывает на возможность использования метода

ПЦ для экспресс-оценки и стандартизации образцов перевиваемых линий клеток (ПЛЕС) гомологичного вида, а также позволяет рассматривать апоптоз в качестве практически значимого показателя, при выборе наиболее перспективного клеточного субстрата.

Анализ полученных данных показывает, что результативность культивирования вируса ТГЭС существенным образом зависит от исследуемых факторов. Наибольшее влияние на уровень накопления штамма • ВН-96 в сублинии клеток СПЭВ-б оказывают: концентрация клеток в суспензии, доза и способ заражения, время адсорбции вируса, качество сыворотки крови и способ культивирования. Эти показатели являются наиболее существенными, взаимозависимыми и определяющими в итоге уровень накопления вируса ТГЭС. Остальные факторы культивирования вируса имеют относительно постоянные величины, поэтому их следует поддерживать на уровнях близких к оптимальным значениям. В указанных условиях накопление штамма ВН-96 вируса ТГЭС достигало 6,5-7,5 и даже 8,0 ^ ТЦД50/мл, что было подтверждено в экспериментальных условиях и в последующем-в условиях производства. Стабильное изготовление стерильного антигена наиболее реально при использовании Энрофлона-К, обладающего выраженными анти-бактериальными и антимикоплазменными свойствами.

Наибольшее преимущество имеет роллерный метод культивирования, который обеспечивает, в итоге, оптимальные условия для репродукции-штамма ВН-96 вируса ТГЭС в большей части клеточной популяции и накопление больших объёмов антигена с.активностью не ниже 7,33-7,5 \% ТЦЩо/мл.

В результате сравнительных исследований для практического использования были предложены защитная среда ВГНКИ-3 и оптимальные режимы высушивания полуфабриката, обеспечивающие сохранность штамма ВН-96 вируса ТГЭС не менее 2-х лет хранения, как в замороженном состоянии, так и в условиях бытового холодильника.

Таким образом, в результате исследовании установлено, что выделенный штамм ВН-96 вируса ТГЭС свободен от бактериальной, грибковой и микоплаз-менной контаминации, сохраняет исходные биологические свойства в течение 5-и пассажей, генетически стабилен в процессе серийного (20 пассажей) пассирования, невирулентен для лабораторных животных и свиней различного возраста, а также обладает высокой антигенной активностью.

Испытания штамма ВН-96 в условиях свинокомплекса подтвердили его безвредность, авирулентность, отсутствие контагиознасти и наличие выраженных антигенных и иммуногенных свойств. Не установлено отрицательного влияния на привесы и сохранность животных.

Результаты проведённых исследований позволяют рекомендовать штамм ВН-96 в качестве производственного для изготовления диагностических и иммунобиологических препаратов против трансмиссивного гастроэнтерита свиней.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Симоненко, Наталья Валерьевна, 2011 год

1. Алипер Т.И. Трансмиссивный гастроэнтерит свиней; разработка методов- лабораторной диагностики и средств специфической профилактики: дис. .д-ра. биол. наук/Т.И.Алипер. -М. -2001. -С.41-42.

2. Аноятбеков М.В. Профилактика и меры борьбы с трансмиссивным-гастроэнтеритом, ротавирусной болезнью и колибактериозом свиней в условиях Таджикистана: дис. . д-равет. наук/М.В. Аноятбеков М. - 1997. - С. 10-32.

3. Ануфриев П.А. Трансмиссивный гастроэнтерит свиней (эпизоотология, диагностика и профилактика): дис. канд. вет. наук/ П.А. Ануфриев Воронеж. -1999.-122 с.

4. Апоптоз: начало будущего/ А.Н. Маянский и др.// Журнал микро-биол. 1997. - №2. - С. 88-94.

5. Белополска П. Культивирание на вируса трансмисивания гастроэнтерит в постоянна клетъчна линия/ П. Белополска, А. Мотовски // Вет. науки. -2004. — Т. 21. -№б. С. 11-17.

6. Биологические свойства некоторых штаммов трансмиссивного гастроэнтерита свиней/ Л.А. Мельникова и др. .// Труды ВГНКИ. 1990. - Т. 29-30. -С. 47-51.

7. Бут В.И. Морфология тимуса при ТГЭ свиней/ В.И. Бут// Диагностика, патоморфология, патогенез и профилактика болезней в пром. животноводстве: Межвуз. науч. сб. Саратов. - 1990. - Ч. 2. - С. 69-71.

8. Васильев В.Ф. Трансмиссивный гастроэнтерит свиней: вирусоносигель-ство и специфическая профилактика: автореф. дис. +канд. вет. наук/ Васильев В.Ф. Воронеж. - 1997. - 18 с.

9. Вирусные болезни сельскохозяйственных животных: Тез. докл. всерос. науч.-практ. конф., 17-21 апр. / ВНИИЗЖ//Владимир, 1995. 306 с.

10. О.Вишневская В.И. Механизмы повреждения и криопротекции биологических структур/В.И. Вишневская//Киев. 1997. - С. 11-12.

11. Влияние некоторых физико-химических факторов на структуру и свойства вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней/ А.П. Пономарев и др. .// Тр. Фед. центра охр. здоровья животных. Владимир: ФГУ ВНИИЗЖ. -2005.-Т. 3.-496 с.

12. Выделение и культивирование in vitro вирулентного* штамма вируса1 трансмиссивного гастроэнтерита свиней/ Г.Г. Рухадзе и др.// Вопр. вирусол. — 1993.- №6.-С. 272-273.

13. Гаффаров Х.З. Антигенная активность ассоциированной вакцины против гемофилезного полисерозита, трансмиссивного гастроэнтерита свиней и отечной болезни поросят-отъемышей/ Х.З. Гаффаров, М.А. Ефимова, Г.Н. Спиридонов // Вет. врач. -2003. №3. - С. 41-44.

14. Госманов Р.Г. Ветеринарная вирусология/ Р.Г. Госманов, Н.М. Колычев// Учебники и учеб. пособия для студентов высш. учеб. заведений. Колос. -М.-2006.-304 с.

15. Герасимов Н.И. Разработка лабораторного способа поддержания перевиваемых культур клеток СПЭВ, GH-91, VERO/ Н.И. Герасимов, С.К. Ста-ров, В.Н. Герасимов// Вет. патология. -2006. №4. - С. 168-170.

16. Гриве Р. Лиофилизация вирусов/ Р. Гриве// Доклад на симпозиуме по лиофилизации. Лион. — 1968.

17. Грачев В.П. Оценка перевиваемых клеточных линий, как субстрата, для производства биологически активных веществ/ В.П. Грачев, Д.Петриччиани// ЖМЭИ. 1985. -№2. - С. 276-277.

18. Демидова С.А. Контаминанты клеточных культур/ С.А. Демидова, Н.М. Ритова// Вопр. вирусол. 1974. - №5. - С. 521-527.

19. Душук Р.В. Трансмиссивный гастроэнтерит свиней/ Р.В. Дущук// М: Наука,-1982. 56 с.

20. Дьяконов Л.П. Животная клетка в культуре/ Л.П. Дьяконов, В.М. Ситькова// Спутник М. -2000. - 400 с.

21. Дьяконов JI.П. Результаты исследований по диагностике микоплазма-контаминации и деконтаминации культур клеток/ Л.П. Дьяконов, A.A. Позд-нчков, М.Т. Гололобова// Тр. ВИЭВ. 1991. - Т. 53. - С.63-67.

22. Защитная среда для приготовления сухой вирусной вакцины/ Э.Ф. То-карик и др. .// Ветеринария. 1995. - Т.2. - С. 15-20.

23. Изучение иммунобиологических свойств вакцины против трансмиссивного гастроэнтерита свиней с различными адыовантами/ О.С. Пузанкова и др. .// Науч. основы произ-ва вет. биол. преп.: Тез. докл. Щелково. -2000. -С. 85-87.

24. Иммунная реакция и «лактогенный иммунитет» при пероральной вакцинации свиноматок против трансмиссивного гастроэнтерита/ И.И. Касюк и др. .// С.-х. биология. -2000. №7. - С. 116-117.

25. Иммунобиологические свойства аттенуированых штаммов вируса TTC./ Т.И. Алипер и др.// Ветеринария. 2002. - №3. - С. 21-26.

26. Карелин А.И. Трансмиссивный гастроэнтерит свиней и меры борьбы/ А.И. Карелин// Ветеринария. 1985. - №2. - С. 41-43.

27. Карелин А.И. Влияние температурно-влажностного режима помещений на устойчивость поросят-сосунов к вирусному (трансмиссивному) гастроэнтериту свиней/ А.И. Карелин, В.Н. Ласкавый// Бюлл. ВИЭВ. 1985. - Вып. 60.-С. 35-37.

28. Карелин А.И. Профилактика и меры борьбы с трансмиссивным гастроэнтеритом свиней/ А.И. Карелин, Г.А. Надточей, Т.С. Коростелева// Бюл. ВИЭВ. -1982. -Вып. 46. С. 8-9.

29. Карелин А.И. Клинические признаки и диагностика трансмиссивного гастроэнтерита свиней/ А.И. Карелин, П.А. Надточей, В.Н. Ласкавый// Ветеринария. 1987. - №8. - С. 43-46.

30. Карпухина О.Г. Энрофлон-К как средство для профилактики и декон-таминации клеточных культур и иммунобиологических препаратов от бактериальной и микоплазменной инфекции: дис. . канд. мед. наук/ О.Г. Карпухина — М., 2003.-С. 27-40.

31. Каган Г.Я. Микоплазма инфекция в культурах клеток/ Г. Я. Каган, И. В. Раковская//Л.: Медицина. -1998. - 173 с.

32. Клестова З.С. Влияние температуры на изменение инфекционной активности и состава популяции вируса ТГЭ/ З.С. Клестова// Тез. докл. науч.-произв. конф. Витебск: ВВИ, Белорус. НИИ экспер. ветер, им. С.Н. Вышелес-ского// - Минск. -2000. - 260 с.

33. Кобатов А.К. Сублимационное высушивание вирусных препаратов/ А.К. Кобатов, В.О. Виноходов, Д.О. Виноходов// Приложение к тому 1 (48) «Архив ветеринарных наук». Санкт-Петербург. - Ломоносов. -1998. - С. 5470.

34. Кобыльников Н.В. Иммуногенность сухой культуральной вирусной вакцины против ТГЭ свиней из штамма ВГНКИ/ Н. В. Кобыльников// Контроль качества биологических ветеринарных препаратов: Сб. науч. тр. М. - 1987. -С. 42-45.

35. Ковальская Л.А. Защитная среда для вирус-вакцины против ньюкасл-ской болезни птиц (штамм Ла-сота): автореф. дис. +канд. биол. наук/ Ковальская Л. А. -Москва, 1986. -16 с.

36. Колышкин В.М. Разработка и совершенствование средств диагностики, профилактики и терапии при чуме плотоядных: дис. . канд. биол. наук/ В. М. Колышкин -Москва, 1999. С. 46-56.

37. Конопаткин A.A. Вирусный (трансмиссивный) гастроэнтерит/ А. А. Конопаткин// Эпизоотология- и инфекционные болезни с/к животных. М. -2004.-С. 363-369.

38. Кузнецова М.С. Оценка антигенности и иммуногенности вакцинных препаратов1 против трансмиссивного гастроэнтерита свиней в производственных условиях: автореф. дис. +канд. вет. наук/ Кузнецова М. С. — Москва, 1991. -21с.

39. Кузнецова М.С. Изучение иммуногенности и антигенности препаратов против ТГЭС в зависимости от схемы иммунизации/ М. С. Кузнецова, Т. И. Алипер// Тез. докл. всерос. науч.-практ. конф. Владимир, 1995. - С. 129.

40. Кузнецова М.С. Изучение иммуногенности препаратов против ТГЭС в зависимости от концентрации вирусного антигена/ М.С. Кузнецова, Т.И. Алипер; В.А. Сергеев// Тез. докл. 4-ой Всесоюз. конф. ВИЭВ. - М.- 1991. -С. 62-63.

41. Культивирование и обнаружение коронавирусов в культуре клеток/ И.Н. Соколова и др.// Бюл. ВИЭВ. 1993. - Вып. 49. - С. 46-48.

42. Лабораторная диагностика вирусных гастроэнтеритов при эпизооти- * ческом исследовании больных свиней/ А.П. Старчеус и др.// Тез. докл. 3 Всесоюз. конф. по эпизоотол. Новосибирск. - 1991, - С. 259-260.

43. Ласкавый В.Н. Профилактика (трансмиссивного) гастроэнтерита свиней в промышленных комплексах: автореф. дис. +д-ра вет. наук/ Ласкавый В.Н. -Москва, 1998.-38 с.

44. Левантин Д. Развитие-свиноводства в странах мира/ Д. Левантин// Свиноводство. 2000. -№4. - С. 26-28.

45. Методика выявления антител к вирусу трансмиссивного гастроэнтерита свинейвреакции нейтрал из ациина панелях/ O.G. Пузанкова// Владимир. -2004. -18 с.

46. Методические указания (РД 42-28-10-89) по аттестации перевиваемых клеточных линий-субстратов производства-и контроля медицинских иммунобиологических препаратов. М. - 1989. — 21 с.

47. Методы получения сывороток против трансмиссивного гастроэнтерита свиней/ М.М. Пятрайтите и др.// Тр. ВГНКИ. М. - 1980. - Т. 29-30. - С. 55-58.

48. Михайлова-Г.Е. Использование антибиотиков для деконтаминации клеточных культур от микоплазм./Г.Р. Михайлова, Т.М. Хижнякова, Р.Я. Под-черняева//Ж. Вет. патология. -№ 1. -2005. С. 48-51.

49. Мониторинг и измерение процессов по ИСО 9000:2000 / «Трек» -М. -2001,-№11.-24с.

50. Мораска Л. Проточная цитометрия/ Л. Мораска, Э. Эрба// Культура животных клеток. Методы. -М. 1989. - С. 182-214.

51. Мосин В.Н. Трансмиссивный гастроэнтерит свиней (Распространение, профилактика и меры борьбы): автореф. дис. + канд: вет. наук/ Мосин В.Н: — Минск, 1998. 22 с.

52. Мотовски А. Опити за пероральна вакцинация на новорождены пара-сета срещу трынамиссивен гастроентерит/А. Мотовски, П. Булопека, С. Йорданов// Вет. мед. науки. - 1985. - Т. 22, №5. - С. 11-15.

53. Мотовски А. Изшггване на низкопасажен клеточнокултурален вирус а катоваксина на срещу ТГЕ/А. Мотовски, П. Белополска, С. Челебиева// Проблема иммунит. и спец. проф.: Сб. науч. тр. София. -2005. - Т. 2. - С. 222-223.

54. Нежута А А. Экспериментальное обоснование и совершенствование режимов сублимационной сушки биопрепаратов: автореф. дис. +канд. техн. наук/ Нежута А. А. Одесса, 1981. - 25 с.

55. Некоторые аспекты культивирования вирусов болезней свиней/ В.И.Балышева и др.// Диагностика, профилактика и меры борьбы с особо опасными и экзотич.- болезнями животных: Матер, междунар. науч.- практ. конф. Покров. - 1998. - С. 108.

56. Непоклонов Е.А. РГА и РНГА для выявления вируса ТГЭС и специфических антител/ Е.А. Непоклонов// Тез. докл. Всерос. науч.- практ. конф. — Владимир. 1995.-С. 60.

57. Непоклонов Е.А. Использование различных культуральных систем для аттенуации вируса ТГЭ/ Е.А. Непоклонов, В.А. Филатов, Е.С. Федорова// Вет. пробл. промышленного свиноводства: Тез. докл. Киев. - 1983. - С. 32.

58. Нестеренко В.Ф. Патология органов дыхания и пищеварения/ В.Ф. Нестеренко, Е.С. Воронин// Действие диметилсульфоксида (ДМСО) на репродукцию вируса ТГС в культуре клеток. Москва. —2005. — С. 32-35.

59. Николаева Н.П. Оценка физико-химических свойств вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней/ Н.П. Николаева, Л.А. Мельникова // С.-х. биология. -2003. -№>4 С. 105-108.

60. Никитин Е.Е. Замораживание и высушивание биологических препаратов/ Е.Е. Никитин, И.В. Звягин// Колос. М. -1971. - 342 с.

61. Новохатский Л.С. Клеточные культуры в вирусологии/ Л.С. Новохат-ский// Общая вирусология: Руководство. М. - 1982. -Т. 1. - С. 463-493.

62. Ночевный В.Т. Профилактика и методы деконтаминации клеточных культур от бактерий и микоплазм при помощи фторхинолонов (обзор)/ В Т.

63. Ночевный, A.C. Новохатский, О.Г. Карпухина// Клеточные культуры. Информ. Бюл. Санкт-Петербург. -2002. - Вып. 17. - С. 9-15.

64. Ночевный В.Т. Суспензионое культивирование некоторых первичных перевиваемых клеток для вирусологических целей/ В.Т. Ночевный, Д.Ф. Осид-зе// Актуальн. вопр. вет. вирус. -М. 1976. - С. 58-60:

65. Ночевный В.Т. Культура клеток кожи перепелиных эмбрионов/ В.Т. Ночевный, C.B. Хайдуков// Аграрная наука. 2001. - №б. - С. 22-24.

66. Обухов И.Л. Динамика репродукции штаммов вируса ТГС в культуре клеток/ И.Л. Обухов// Профилактика эффективных спец. ср-в защиты животных и методы контроля и качества биопрепаратов: Сб. науч.тр. -М. -1991. Т. 53. -С. 95-99.

67. Орлянкин Б.Г. Классификация вирусов и номанклатура вирусов позвоночных/ БХ. Орлянкин// Методическое пособие РАСХН ВИЭВ. М. -1998.-63 с.

68. Орлянкин Б.Г. Особенности функционирования иммунной системы слизистых оболочек и стратегия специфической профилактики вирусных гастроэнтеритов поросят: Обзор/ Б.Г. Орлянкин, Т.И. Алипер// С.-х. биология. Сер. Биология животных. 2003. - № 2. - С. 10-19.

69. Орлянкин Б.Г. Структура и биология вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней: Обзор/ Б.Г. Орлянкин, Т.И. Алипер, Е.А. Непоклонов// С.-х. биология. Сер. Биология животных. — 2002. № 2. - С. 8-18.

70. Осидзе Д.Ф. Получение культур клеток из тканей животных и их использование в вирусологии: дис. .д-ра биол. наук/ Д.Ф. Осидзе -Москва, 1974.-485с.

71. Осидзе Д.Ф. Получение культур клеток из тканей животных и их использование в вирусологии: дис. .д-ра биол. наук/ Д.Ф. Осидзе Москва, 1974.-485с.

72. Патент на изобретение №2140982. Аттенуированный штамм трансмиссивного гастроэнтерита свиней (Transmissive gastrroenteritis virus)/ И. Ф. Вишняков и др.// ВНИИВВиМ. Покров. - 1998. -3 с.

73. Патент на изобретение 734279. Вакцинный штамм вируса (Transmissive gastrroenteritis №5 ВГНКИ)/Л. А. Мельникова и др.//ВГНКИ. -М 1980.

74. Патент на изобретение №2266328. Штамм «Ильиногорский» вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней для изготовления диагностических и» вацинных препаратов/ О. С. Пузанкова и др.// ФГУ ВНИИЗЖ. -Владимир. -2005. -8 с.

75. Патент на изобретение №2266327. Штамм «Краснодонский» вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней для изготовления диагностических и вацинных препаратов/ О. С. Пузанкова и др.// ФГУ ВНИИЗЖ. Владимир. -2005. -8 с.

76. Патент на изобретение №2266326. Штамм «Ленинградский» вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней для изготовления диагностических и вацинных препаратов/ О. С. Пузанкова и др.// ФГУ ВНИИЗЖ. Владимир. -2005. -8 с.

77. Патент на изобретение №1238294. Способ получения вакцины против трансмиссивного гастроэнтерита свиней/Д. Ф. Осидзе и др.//ВГНКИ. М. -1995. -2 с.

78. Падейская E.H. Фторхинолоны/ E.H. Падейская, В.П. Яковлев// Био-информ. М. - 1995. - 208 с.

79. Париж Б.М. Изучение стабильности лиофилизированного вируса гриппа/ Б.М. Париж, Р.Л. Балик, A.A. Парубель// Матер. XXII науч. сессии инта вирусологии АМН СССР. -М. 1964. - Т. 2. - С. 23-24.

80. Перспективы использования метода проточной цитометрии для стандартизации перевиваемыхлиний клеток /В:-Т. Ночевный и др. .// Матер, меж-дун. науч. конф. Владимир. - 2003. - С. 498-500.

81. Погоняйло Г. Ф. Гастроэнтероколитусвиней/ Г.Ф. Погоняйло, А.П: Тарасов, П.И. Пирог//Бюл. науч.- тех: информ. Ленинградского НИВИ. 1956. -Вып. 2.-С. 12-13.

82. Полетаев А:И. Проточная цитометрия и сортировка в цитологии, молекулярной биологии, биотехнологии и медицине/ А.И. Полетаев// Итоги науки и техники ВИНИТИ. Сер. Общие проблемы физико-химической биологии, М; - 1999; - Т. 12. - С. 3-87.

83. Получение концентрированного очищенного препарата вируса трансг миссивного ■ гастроэнтерита свиней и изучение его антигенных свойств/ В: А. Сергеев и др. .// Вопр. вирусол. -1997. №б. - С. 718-724:

84. Промени в митотичия индекс на клетки от линия СПЕВ след инфекция с вируса на трансмисивния гастроэнтерит/ Г. Татаров и др. . // Вёт. сбирка. -1990:-4.-С. 27-29;

85. Профилактика вирусных гастроэнтеритов новорожденных телят и поросят/ В.И. Геведзе и др:.// Вет. наука произ-ву. Минск. — 1995. — Вып. 28: -С. 66-70.

86. Притулин П.И. Болезни свиней/ ПИ. Притулин// Колос. М. - 1999. -С. 48-56.

87. Раковская И.В. Биологическая характеристика микоплазм-контаминантов тканевых культур: дис. . канд. мед. наук/И.В. Раковская — М., 1966.-215 с.

88. Рухадзе Г.Г. Какой быть вакцине против вирусных гастроэнтеритов: проблемы и перспективы/ Г.Г. Рухадзе, Т.И. Алипер, В.А. Сергеев// Вопр. виру-сол. -1989. — №1. — С. 5-16.

89. Рухадзе Г.Г. Разработка тест-системы иммуноферментного анализа для выявления антигена вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней/ Г.Г. Рухадзе, Т.И. Алипер, В.А. Сергеев//Вопр. вирусол. -2000. -№3. С. 315-319.

90. Романенко В.Ф. Инфекционные желудочно-кишечные болезни свиней/ В.Ф. Романенко// Колос М. - 1984. - С. 3-158.

91. Сергеев В.А. Вирусные вакцины/ В.А. Сергеев// Киев: Урожай, 1993. -283-288 с.

92. Сергеев В.А. Вирусные гастроэнтериты свиней: Основные результаты исследований и разработок/ В.А. Сергеев, Е.А. Непоклонов, Т.И. Алипер// Тр. ВИЭВ. 2003. - Т. 73. - с. 72-78.

93. Сергеев В. А. Размножение вирусов животных в культуре ткани/ В.А. Сергеев//Колос. -М., 1999.-311 с.

94. Сергеев В.А. Специфическая профилактика и вирусоносительство при ТГЭ/ В.А. Сергеев// Ветеринария. 2007. - № 4. - С. 34-36.

95. Сергеев В.А. Особенности иммунитета и стратегия вакцинопрофи-лактики вирусных инфекций/ В.А. Сергеев, Т.И. Алипер, Г.Г. Рухадзе// С.-х. биология. -1988. №4. - С. 28-32.

96. Сергеев В.А. Оценка антигенной активности вакцинных штаммов вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней и ротавируса свиней/ В.А. Сергеев, Т.И. Алипер, Г.Г. Рухадзе//Ветеринария. 1989. -№l. - С. 30-32.

97. Специфическая профилактика инфекционных болезней, животных/

98. A.B. Селиванов и др. .// Ветеринария. 1997. - №5. - С. 17-20.

99. Способ изготовления вакцины против трансмиссивного гастроэнтерита свиней и способ профилактики трансмиссивного гастроэнтерита свиней/

100. B.А. Сергеев и др. .//Авторское свидетельство № 1398131, 1988.

101. Сравнительное испытание иммуногенных свойств культивированных штаммов ТГЭ и вакцины ГДР и ЧССР/ Е.А. Непоклонов и др.// Тр. ВИЭВ. -1984.-Т. 60.-С. 70-80.

102. ПО. Стегний М.Ю. Влияние продолжительности хранения вирусов в условиях умеренно-низких температур на их ультраструктуру и биологическуюактивность / М.Ю. Стегний// Експериментальна I клйична медицина 2004. -№2.- С. 68-71.

103. Суспензионное культивирование вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней/В.А. Сергеев и др.//Вопр. вирусол. 1989. -№ 1. - С. 103-106.

104. Султанова З.Д. Сравнительная морфологическая, культуральная и вирусологическая характеристика перевиваемых линий клеток/ З.Д. Султанова, К.С. Куликова, Э.Б. Гуревич // Вопр. вирусол. 1998. - № 3. - С. 291-298.

105. Собко А.И. Получение очищенного коронавируса ТГЭ свиней для выявления в иммуноферментном анализе иммуноглобулинов класса А и G/ А.И. Собко//М.,2003,-242 с.

106. Собко А.И. Гладенко И. Н. Справочник по болезням свиней/ А. И. Собко, И.Н. Гладенко// Киев: Урожай, 1981. С. 39-46.

107. Стефанова В.Н. Культура клеток СПЭВ: анализ структурно-функциональной организации хромосом/ В.Н. Стефанова// Совр. Достижения и проблемы биотехнологии с/х жив-х 6-я Международн.науч.конф. -Дубровицы (ВГНИИ животноводства) . -2006. С 174.

108. Стрижакова О.М. Разработка средств и методов-дифференциальной диагностики и иммунопрофилактика TTC и респираторной коронавирусной инфекции свиней/ О.М. Стрижакова// Покров,. 1997. Т. 2. - С. 21.

109. Сюрин В.Н. Руководство по ветеринарной вирусологии/ В.Н. Сюрин // Колос. М. - 1986. - С. 286-295.

110. Сюрин В.Н. Ветеринарная вирусология/ В.Н. Сюрин, Р.В. Белоусова, Н.В. Фомина//Колос. -М. -1984. 376 с.

111. Сюрин В.Н. Вирусные болезни животных/ В.Н. Сюрин, А.Я. Самуй-ленко, Б.В. Соловьев //Колос. -М. -1998. С. 165-183.

112. Сюрин В.Н. Частная ветеринарная вирусология/ В.Н. Сюрин, Н.В. Фомина// Колос. М. -1979.— 472 с.

113. Тарасов В.Н. Клеточные культуры в производстве биологически активных веществ/ В.Н. Тарасов// Итоги науки и техники ВИНИТИ. Сер. Вирусология. -М. -2005. Т. 8. - С. 135-139.

114. Тарасов В.Н. Клеточные культуры в вирусологии // Итоги науки и техники ВИНИТИ/ В. Н. Тарасов// Сер. Вирусология. М. - 1990. - №9. - 167с.

115. Требования к перевиваемым линиям клеток, используемым для производства биологических препаратов/ Комитет экспертов ВОЗ по стандартизации биологических препаратов// Серия технических докладов ВОЗ № 745. М. -1988.-С. 85-89.

116. Троценко Н.И. Практикум по ветеринарной вирусологии / Н.И. Тро-ценко, Р.В. Белоусова, Э. Преображенская// Колос. М. - 2000. - С. 23-30.

117. Файбич М.М. Стабилизация вакцинных препаратов в процессе высушивания и хранения/ М.М. Файбич// ЖМЭИ. 1968. - № 2. - С. 59-66.

118. Федорова Е.С. Культуральные свойства вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней (TTC)/ Е.С. Федорова, Е.А. Непоклонов, Т.В. Гальнбек// Бюл. ВИЭВ. 1985. - Вып. 60. - С. 29-32. '

119. Фильченков A.A. Апоптоз и рак/ A.A. Фильченков, P.C. Стойка// Морион. Киев. - 1999. - 184 с.

120. Хаертынов С.Х. Рекомендации по профилактике, диагностике кон-таминирования культур клеток микроорганизмами и мерам их деконтаминации/ С.Х. Хаертынов, Л.П. Дьяконов, А.Н. Курносов // Казань, 1998. 33 с.

121. Шкабура Ю.П. Стандартизация методов изготовления сухой вирус-вакцины против трансмиссивного гастроэнтерита свиней на основе глубинного культивирования вируса: автореф. дис. +канд. биол. наук/ Шкабура Ю.П. М., 1999.-20 с.

122. Шкабура Ю.П. Глубинное культивирование вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней/ Ю.П. Шкабура, В.Т. Ночевный// Омский биокомбинат,

123. ВГНКИ. Акт. вопр. ветер.: Тез. докл. 1-ой науч.- практ. конф. фак. вет. мед. НГАУ. Новосибирск. - 1997. -123 с.

124. Энрофлон-К эффективное средство для профилактики и деконта-минации линий клеток от микоплазменной и бактериальной инфекции/ В.Т Но-чевный и др. .// Аграрная наука. — 2003. - № 6. - С.13-16.

125. Ястребов A.C. Вирусные гастроэнтериты свиней/ A.C. Ястребов // Хата. Минск. - 1999. - 80 с.

126. Ястребов A.C. Вирусные гастроэнтериты свиней (распространение, диагностика и специфическая профилактика): автореф. дис. +д-ра вет. наук/ Ястребов A.C.-Минск, 1999. 32 с.

127. Ястребов A.C. Диагностическая эффективность реакции диффузной преципитации в агаровом геле при вирусном трансмиссивном гастроэнтерите свиней/ A.C. Ястребов// Бюл. ВИЭВ. -1995. Вып. 60. - С. 38-40.

128. Ястребов A.C. Концентрирование вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней с помощью мембран/ A.C. Ястребов, Д.В. Бучукури, А. М. Быч-ковский//Вет. наука произв-ву. Минск. - 1990. - Вып. 28. - С. 3-6.

129. Ястребов A.C. Антигенная активность инактивированной вакцины против трансмиссивного гастроэнтерита, ротавирусной болезни и колибакге-риоза свиней/ A.C. Ястребов и др.// Вет. наука произ-ву. Минск. - 1992. -Вып. 30. - С. 6-10.

130. Список использованной иностранной литературы.

131. Birch J. Suppresion of programmed cell death in industrial scale biological production systems/ J. Birch// Demonstration' project within EC-framework V «Quality of Life and Managemrnt of Living Resurses». 2002.

132. Bohl E. H. The use of cell cultures for the study of TGE virus of swine/ E.H. Bohl, T. Kumagai// Proc. 69th. Ann. Meet. U. S. Livestock San. Ass. -2000. P. 342-350.

133. Boswarthe B.T. Induction of the 2-5A sistem by interferon and transmis-sibe gastroenteritis virus/ B.T. Boswarthe, N.J. Maclachian, M.I. Johnaton// J. Interferon Res. 1989. - Vol. 11. - 45. - P. 277-288.

134. Brian D. A. Genome of porcine transmissible gastroenteritis virus/ D.A. Brian, D.E. Dennis, J.S. Guy// J Virol. -2003 May. -34(2):410-15.

135. Brown T.T. Jr. Laboratory evaluation of selected disinfectants as virucidal agents againstporcine parvovirus, pseudorabiesvirus, and transmissible gastroenteritis virus/ T.T. Jr. Brown// Am J Vet Res. 1981 Jun. - 42(6): 1033-6.

136. Completion of the sequence of the genome of the coronavirus avian infectious bronchitis virus/M. E. Boursnell et al.// J Gen Virol. 1987. - 68. - P. 57-77.

137. Cepica A. Antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity and spontaneus cell-mediated cytotoxicity against cells infected with porcine transmissible gastroenteritis virus/ A. Cepica, J.B. Derbyshire// Can. J. Сотр. Med. -1983. 47. - P. 298303.

138. Chen K.S. Enzymatic and acidic sensitivy profiles of selected virulent and attenuated transmissible gastroenteritis viruses of swine/K.S. Chen//Am. J. Vet. Res. -2003.-46.-P. 632-636.

139. Contribution of passive immunity to porcine respiratiry Coronavirus to protection against transmissible gastroenteritis virus challenge exposure in sucking' pigs/ K. Sestak et al .// Am. J. Vet. Res. 1996. - 57. - P. 664-671.

140. Coriell L. Methods of prevention of bacterial, fungal and other contaminations/ L. Coriell.// Contamination f Tissue Culture. NY; London. - 1973. - P. 308-345.

141. Detection of transmissible gastroenteritis virus by RT-PCR and differentiation from porcine respiratory Coronavirus/ D. Paton et al.//J Virol Methods. — 1997 Jul.-66(2):303-9.

142. Doyle L. Transmisible gastroenteritis in pigs/ L. Doyle, L. Hutchigs// J. Am. Vet. Med. Ass. 1946. - Vol.108. -43. - P. 257-289.

143. Dulas C.C. Isolement du virus la transmissibe gastroenteritis du porc sur cultures allulaires et comparisons antigenique aves deux souches uricanes/ C.C. Dulas, P. Boulanger, J.B. Phnaeuf// Can. Vet. J. -2002. Vol. 16. - P. 77-81.

144. Durimanv A.G. A new continuous teline kidney cell culture (FK-91) for reproduction of the carnivore .parvoviruses/ A.G. Durimanv, A. M. Shestopalov, O.V. Trapezov// Intern. Sei. Congr. On Animal Production, 60%, Proc. Warsawa. — 1996.-P. 173-175.

145. Frederick G. T. Local and systemic cell-mediated immunity against transmissible gastroenteritis, an intestinal viral infection of swine/ G.T. Frederick, E.H. Buhl// J. Imunol. -2003. 116:1000-1004.

146. Enjuanes L.P. Molecular basis of transmissible gastroenteritis virus epidemiology in the Coronaviridae/ L. Enjuanes, Van der Zeijst B. A. M.// Ed. S.G. Sid-dell. New York: Plenum Press. 1995. - P. 337-376.

147. Etude comparee de tris souches du cornavirus de ia gastrenterite trsnsmis-sible: conditions de ia replication virale et de ia synthese des antigenes structuraúx/ T.D. Nguyen et al .// Ann. Inst. Pasteur, Virol. 1987. - Vol. 138. - 3. -P. 315-330.

148. Ford R.B. Enrofloxacin: a new antimicrobial strategy in small animal practice/R.B. Ford//Western Veter. Conf. (Nevada). -1988. -P. 48-51.

149. Furuuchi S. Field trials on transmissible gastroenteritis live virus vaccine in newborn piglets/ S. Furuuchi, M. Shimizu, Y. Shimizu// Natl. Inst. Anim. Health Q., (Tokyo). -2001. -18:135-142.

150. Furuuchi S. Vaccination of newborn pigs with an attenuated strain of transmissible gastroenteritis virus/ S. Furuuchi, Y. Shimizu, T. Kumagai// Am. Vet. Res.-1976.-37:1401-1404.

151. Garwes D.J. et al./ Edv ExpM Biol. 1987. - 218 : 509.

152. Garwes D.J. et al./ Vet. Res. 1988. - 122 : 86.

153. Garwes D.J. Coronaviruses in animals// virus Intestions the gsstroenteritis Tract / d. A.J. Tyrell, A.Z. Karikian.Waker. NY. - Basel. -2001. -315 p.

154. Harada K. Cytopathogenicity of transmissibe gastroenteritis virus in pigs/ K. Harada, T. Kumagai, J. Sasahara//Nate. Inst. Animal Healht Quarrt. 1963. - 1661. P

155. Henning E.R. Comparison of intramuscular and oral moditied live virus TGE vaccines/ E.R. Henning, P.C. Thomas// Vet. Med. Small. Anim. Clin. -2001, -76:1789-1792.

156. Hess R.G. Active immunization of feeder pigs against transmissible gastroenteritis (TGE); Influence of maternal antibodes/ R.G. Hess, Y.S. Chen, P.A. Bachmann//Proc. Int. Congr. Pig Vet. Soc.2003. 7:1.

157. Histchemical and immunohistchemical study f the mucsal tymphoid system in swin/ J.A. Ramos et al.// Am. J. Vet. Res. -1999. 53:1418-1426.

158. Horzinek M.C. Antigenic relationships among Homologous structural polypeptides of porcine, Feline, and canine coronaviruses/ M.G. Horzinek, H. Lutz, N.C. Pedersen// Infection and immunity. 1982. - Vol. 37. - 3. - P. 1148-1155.

159. Induction of milk Ig A antibodes by porcine respiratory coronavius infection/ P. Callebaut et al// Adv. Ep. Med. Biol: 1990. - 276. - P. 421-428.

160. Jimine G. et al.// J Virol. 1986. - 60 :131.

161. Kaji T. Pasive immunization against transmissible gastroenteritis virus in piglets of ingetions of milk of sows inoculated with attenuated virus/ T. Kaji, Y. Shi-mizu// Natl. Inst. Anim. Health Q. Tokyo. -2002. -18: 43-52.

162. Kenny G. The susceptibilities of Mycoplasma hominis and Ureaplasma urealyticym to the never guinolones/ G. Kenny, F. D. Cartwriht // 7th Int. eongr. Int. Organ. Mycoplasmol. (JOW). Baden near Vienna, June 2-9. 1988: compend. Abstr. -Wien., S. A.-P. 9.

163. Kerr J.F. R. Apoptosis a basic biolgical phenomenon with wideranging implication in tissue kinetics/ J.F. R. Kerr, A. . Wyllie, A.R. Currie// Br. J. Cancer. -1972. - 26. - P. 239-257.

164. Kerzner D. Sodiun transport and the inestinol epithelins during the coarse of viral enterity/D. Kerzner// Gastroenterology. -2003. Vol. 72. - P. 457.

165. Lactogenic immunity to transmissible gastroenteritis (TGE) virus. Passive protection of piglets and detection of serum and milk antibody classes by ELISA/ S. Bernard et al .// Vet. immunol. immunopathol. 1990. - Vol. 24. - 1. - P.37-47.

166. Laude H. In vitro properties of low- and high-passaged strains of transmissible-gastroenteritis Coronavirus of swine/ H. Laude, J. Gelfi, J. M. Aynaud// Am J Vet Res. -. 1981 Mar. 42(3):447-9.

167. Laviada M. D. Proteins specified by swine transmissible gastroenteritis virus: identification of non-structural proteins by two-dimensional electrophoresis/ M. D. Laviada, de Diego M., J. M. Escribano// Microbiología. -1991 Sep. 7(2):90-7.

168. Lee K.M. Propogation of transmissibe gastroenteritis virus in tissue culture/ K.M. Lee// Am. N. Y. Acad. Sci. -2000. Vol. 66. - 191p.

169. Mac Kenzie, A.P. The physicochemical basis for the freeze-drying process/Mac Kenzie, A.P.//Develop. Iol. Stand. 1977. - Vol. 36: - P. 51-67.

170. Mocsari E. Properties of the "Ckp " transmissible gastroenteritis virus srtain. 1. Immunofluorescence assay on the viral replication in cell cultures/ E. Mocsari// Acta Vet. Acad. Sci. Hung. 1976. - Vol. 26. - 3. - P. 341-350.

171. Moscari E./ Acta Vet AcadSci Hung. 1980. - 28 :341.

172. Moscari E./ Acta Vet Acad Sci Hung. 1980. - 28 : 131.

173. Mowles J. M. The use for ciprofloxacin for the elimination of mycplasma from naturally infected cell lines/ J.M. Mowles// Cytotechnology. 1988. - Y. 1. - P. 355-358.

174. Moxley R.A. 1989. Clinical evaluation of transmissible gastroenteritis virus vaccination procerdures for inducing lactgenic immunity in sows/ R.A. Moxley, L.D. Olson//Am. J. Vet. Res. -2003.-50:111-118.

175. Nguyen TD. et al.// J Gen Virol. 1986. - 67:939.

176. Paltineanu D. Valoarea testelor de imunofluorescenta in diagnostiqul ga-strenteritei trsnsmissible a porcului (GET).2. Evidentieria anticorpilor specifici/ D.Paltineanu, A D. Stanuica// Prod. Anim. Zootehn. Med. Vet. 1988. -Vol. 38. -11.-P. 39-44.

177. Pike B.V. Lipids of transmissibe gastroenteritis virus and relation to thuse of two different host cells/ B.V. Pike, D.J. Garwes// J. gen. Virol. 1997. - 3-4. - P. 531-535.

178. Pensaert M. B. Immunity in TGE of swine after ifection and vaccination in Viral Enteritis in Humans and Animals/ M. B Pensaert// Ed. F. Bricout and R. Scherrer INSERM. Paris. - 2004. - 90:281-293.

179. Robinzon L. Contamination of human cell-cultures by PPLO/ L. Robin-zon, R. Wichelhausen, B. Roisman//Science. 1956. - Vol. 124. - P. 1147-1148.

180. Saif L.J. Enteric viral infection of swine/ L.J. Saif// In: Proc. 15th IPVS congress. Birmingham. -2001. - 1. - P. 57-61.

181. Saif L.J. Immunity to transmissible gastroenteritis virus and porcine respiratory Coronavirus infections in swine/ L.J. Saif, J.L. Van Cott, T.A. Brim// Vet. Immunol. Immunopathol. -2001. 43. -P 89-97.

182. Saif L. J. Transmissible gastroenteritis and porcine respiratory Coronavirus/ L.J. Saif, R. Wesley// In: Disesases f Swine. Iowa State Univ. Press. -1999. P. 295-325.

183. Saif L.J. Mucosal immunity: an overview and studies of enteritic and respiratory Coronavirus infection in a swine model of enteric disease/ L. J. Saif// Vet.Immunol. Immunpathol. -1996.-54. -P 163-169.

184. Schrder Y. Enrofloxacin a new antimicribial agents/ Y. Schrder// Aft. Vet. Ver. 1989. - Vol. 61. -2. - P. 122-124.

185. Seroprevalence- of porcine, respirstor Coronavirus infection in spanish breding sows/L. Lanza et al.// Prev. Vet. Med. -1993. 17:263-269.

186. Shimizu M.Lymphocyte prolifirative response to viral antigen in feeder pigs infected with transmissible gastroenteritis/ M. . Shimizu, Y. Shimizu// Infect. Immun. -1979. -23. -P. 239-243.

187. Seiiii K.K. Myciplasma interactions with cell cultues, unculturadad living cell and the problems posed by their presence in tisue cultures/ K.K. Sethi, M.Teschner// Klin. Wscht. -2004. Bd. 50. - 2. - P. 26-33.

188. Sprino P. Intestinal immune response of feeder pigs to infection with, transmissible gastroenteritis virus/ P. Sprino, Morilla, M. Ristic// Am J. Vet. Res. -2005.-Vol. 37.-P. 171-175.

189. Sprino P.J. Intestinal;, pulmonary, and serum antiboyresponses of feding pigs exposed to transmissible gastroenteritis virus by oral and oral-intranasal routes of inoculation/ P.J. Sprino, M. Ristic// Am. J. Vet. Res. -1983. 43. - P. 255-261.

190. Sune S. et al .// Virol. 1990. - 177 :559.

191. The multiplication of transmissible gastroenteritis viruses in several cell lines originated from porcine kidney and effects of trypsin on the growth of the virus/ E. Honda et al . // Jap. J. Vet. Sei. 1990. - Vol. 52. - № 2. - C. 217-224.

192. The transmissible gastroenteritis coronavirus contains a spherical core shell consisting of M and N proteins/ C. Risco et al.// Prod. Anim. Zootehn. Med. Vet. 1988. -Vol. 38. - 11. - P. 39-44.

193. Transmissible gastroenteritis (TGE) of swine: Survivor selection of TGE virus mutants in stomach juice of adult pigs/ J.M. Aynaud et al.// J. Gen. Virol. -1985: -66:1911-191.

194. Use of flow cytometry technigues in studying mechanisms off apoptosis in leukemic cells/ A.M. Gorman et al .// Cytometry. 1997. - Vol. 29. - P. 97-195:

195. Welch S.K.W. et al .//Arch Virol. 1988. - 101 : 221.

196. Welch S.K.W. Cell-mediated immune-responses of nursing pigs inoculated with attenuated or virulent transmissible gastroenteritis virus/ S.K.W. Welch, L.J. Salf, S. Ram//J. Virol. -2005.-65:3369-3373.

197. Welch S.K.W. Cellmediated immune responses of sucking pigs inoculated with attenuated of virulent transmissible gastroenteritis virus/ S.K.W. Welch, L. J. Salf, S. Ram//Am. J. Vet. Res. -1988. Vol. 49.-8. -P. 9631.