Биохимические свойства фенольных соединений некоторых дикорастущих растений Таджикистана тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.04, кандидат биологических наук Рахимова, Файзигул Амонкуловна

• Рахимова, Файзигул Амонкуловна
• кандидат биологических наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Рахимова, Файзигул Амонкуловна

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Природные растительные фенольные соединения.

1.2. Физиологическая роль фенольных соединения.

1.3. Биосинтез фенольных соединений.

1.4. Методы идентификации фенольных соединений.

1.5. Методы получения растительных красящих экстрактов фенольных соединений.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биохимические свойства фенольных соединений некоторых дикорастущих растений Таджикистана»

Актуальность работы. Фенольные соединения - широко распространенная в растительном мире группа соединений, которая в своей основе содержит бензольное кольцо, несущее одну или несколько гидроксидных групп. Фенольные вещества играют важную роль в обмене веществ растений. Они участвуют в дыхании, фотосинтезе; отвечают за стимуляцию или ингибирование роста и развития (растительные гормоны), защиту клеток и метаболитов растения от окисления, повреждения бактериями и грибками и т.п. Предполагают, что они играют роль в образовании иммунитета [1,2,3].

Чрезвычайно широк спектр их биологического воздействия. Они обладают антисептическим, антиоксидантным, кардиотоническим, кардиотропным, спазмолитическим, гипотензивным, седативным, гепатопротекторным, кровоостанавливающим, желчегонным действием. Эти свойства, а также растворимость в воде, возможность получения водорастворимых форм в виде отваров, настоев обуславливает широкое применение фенольных соединений в медицине и биологии [4,5,6].

Этим не исчерпывается значение фенольных соединений растений. Они имеют важное практическое применение в некоторых отраслях промышленности, в том числе пищевой. Современная пищевая промышленность широко применяет растительные экстракты в качестве пищевых и технологических добавок -пищевых красителей, антиоксидантов, консервантов [7,8,9,10,11,12,13,14]. Красящими веществами в этих экстрактах являются в основном фенольные соединения, которые издавна использовались в качестве красителей [15].

При технологической обработке сырья или при хранении цвет готовых изделий может меняться или ослабевать. Поэтому с целью повышения качества большинство продукции кондитерской, мясомолочной, масложировой, консервной, ликероводочной промышленности подкрашивается. В качестве пищевых красителей используются как синтетические, так и натуральные, то есть выделенные из природных объектов, вещества.

В настоящее время в различных странах используются свыше 160 синтетических красителей [16].

Не все они безопасны для человека. Поэтому многие распространенные в прошлом синтетические пищевые красители ныне запрещены к использованию

В современной пищевой промышленности наметилась стойкая тенденция к использованию пищевых натуральных красителей [17,18,19,20,21,22,23,24,25,26].

В связи с этим научные исследования, направленные на выявление новых источников сырья, разработку способов выделения, условий хранения и применения экстрактов фенольных соединений в пищевой промышленности, важны и актуальны. Эта проблема особенно важна для Таджикистана, имеющего богатейшую и уникальную флору. Известно более 120 красильных растений, произрастающих на территории Таджикистана. Анализ литературных данных показывает, что красители, выделяемые из них, применяются в основном для крашения текстильных волокон и тканей. О применении их для окрашивания продуктов питания нет сведений [27].

Целью работы является изучение биохимических свойств природных фенольных соединений, выделенных из некоторых дикорастущих растений, из корней и корневищ ревеня (Rheum turkestanicum Janisch, семейство гречишные), щавеля конского (Rumex confertus Willd, семейство гречишные), солодки (Glycyrrhiza glabra, семейство бобовые) и кизильника (Cotoneaster melanocarpus Fisch. Семейство розоцветных) произрастающих в Таджикистане, определение оптимальных условий их выделения, хранения и применения их в качестве биологических пищевых добавок.

Задачи исследования. Для достижения поставленной цели необходимо решить следующие задачи:

- изучить процесс экстракции красящих фенольных веществ из растительного сырья и влияние на нее различных факторов;

- определить и научно обосновать оптимальные условия извлечения фенольных веществ из растительного сырья;

- изучить биохимические свойства выделенных фенольных соединений;

- изучить превращения фенольных соединений при их выделении и хранении;

- изучить токсичность выделенных фенольных соединений;

- изучить возможность применения экстрактов фенольных соединений для окрашивания различных групп пищевых продуктов;

Научная новизна. В результате проведенных исследований выделены и применены для окрашивания пищевых продуктов красящие фенольные вещества из растений, произрастающих на территории Таджикистана - корней и корневищ ревеня, щавеля конского, солодки и кизильника.

Исследован процесс экстракции красящих веществ из указанного растительного сырья. Изучена зависимость извлечения фенольных соединений от различных факторов: экстрагента, соотношения с сырья и растворителя, температуры, времени нагревания, способа экстракции. На основании полученных результатов разработан способ получения красящих экстрактов фенольных соединений из растительного сырья.

Изучены биохимические свойства экстрактов фенольных веществ, выделенных из корней и корневищ ревеня (Rheum turkestanicum Janisch, семейство гречишные), щавеля конского (Rumex confertus Willd, семейство гречишные), солодки (Glycyrrhiza glabra, семейство бобовые) и кизильника (Cotoneaster melanocarpus Fisch. Семейство розоцветных), имеющие технологическое значение - растворимость в воде и органических растворителях, содержание сухих веществ, содержание красящих веществ, плотность, кислотно-основные свойства.

Изучены превращения фенольных соединений при выделении и хранении и определена их устойчивость к воздействию света, температуры и времени нагревания, pH среды. Выявлена нетоксичность выделенных красящих экстрактов.

Практическое значение.

Разработан способ экстракции фенольных соединений из растительного сырья, содержащего комплекс красящих веществ, определены оптимальные условия для их выделения. Показана возможность их применения в качестве пищевых добавок в пищевой промышленности. Апробация работы.

Результаты диссертационной работы доложены на Международной конференции «Наука, образование», Санкт-Петербург, 27-28 октября 2009г.; Ш Международной конференции «Актуальные вопросы современной техники и технологии». РФ, Липецк, 29 января 2011г.; IV Международной конференции «Актуальные вопросы современной техники и технологии». РФ, Липецк, 23 апреля 2011г.; V Международной конференции «Актуальные вопросы современной техники и технологии». РФ, Липецк, 23 июля 2011г.; Международной заочной научно-практической конференции «Актуальные проблемы естественных наук». Новосибирск, 26 октября 2011г.; УШ Международной научной конференции «Наука и современность», Новосибирск, 15 ноября 2011г. Публикации.

По материалам диссертации опубликованы 2 статьи в журнале, рекомендованном ВАК РФ, 15 статей в сборниках Международных научных конференций.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 135 страницах компьютерного набора, состоит из введения, литературного обзора, экспериментальной части, обсуждения результатов и выводов. Содержит 41 рисунков, 35 таблиц, список литературы, включающий 167 наименования.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Рахимова, Файзигул Амонкуловна

выводы

1. Изучен процесс экстракции фенольных соединений из корней ревеня туркестанского (Rheum turkestanicum Janisch, семейство гречишные), щавеля конского (Rumex confertus Willd, семейство гречишные), солодки голой (Glycyrrhiza glabra, семейство бобовые) и кизильника (Cotoneaster melanocarpus Fisch. Семейство розоцветных), и влияние не нее различных факторов - вида растворителя, соотношения сырья и растворителя, времени и температуры экстракции. На основе проведенных исследований разработан метод получения красящих фенольных веществ из растительного сырья, определены оптимальные режимы экстракции и экстрагенты.

2. Рассчитаны некоторые кинетические параметры процесса экстракции красящих веществ - средние скорости экстракции, константы скорости и энергия активации.

3. Изучены физико-химические свойства выделенных фенольных соединений, имеющие значение в технологии пищевых продуктов - плотность, содержание сухих веществ, содержание красящих веществ, общая и титруемая кислотность. Установлено, что совокупность указанных физико-химических и органолептических свойств полученных экстрактов фенольных соединений соответствует значениям, известным из литературы, а содержание красящих веществ в полученных красителях составляет до 72г/кг, что выше, чем в известных натуральных пищевых красителях.

4. Изучены биохимические превращения фенольных соединений при экстракции и хранении. Установлено, что процесс окислительной полимеризации, которая приводит к образованию нерастворимых полимерных соединений, не идет в условиях экстракции до конца, а заканчивается на стадии образования окрашенных олигомерных хинонных форм, устойчивых к воздействию света в течение достаточного времени. Установлено также, что в сильнокислых средах происходит образование светлоокрашенных полимерных форм фенольных соединений, а также гидролиз производных катехинов с фенолкарбоновыми кислотами с образованием бесцветной галловой кислоты или эллаговой кислоты, а окислительные реакции, идущие в щелочной среде с разрывом бензольного кольца, не идут до конца.

5. Исследована микробиологическая чистота и токсичность выделенных красящих веществ. Показано, что они не обладают токсичностью.

6. Лабораторными опытами показана возможность окрашивания полученными красителями некоторых видов кондитерских изделий, колбасных изделий, кисломолочных продуктов.

Заключение

Изучение литературных данных по исследуемой проблеме показало, что фенольным соединениям растительного происхождения, их физико-химическим и биохимическим свойствам, а также получению красящих экстрактов фенольных соединений и методам их применения в различных отраслях, в том числе в производстве пищевых продуктов, уделяется много внимания. Тема эта важна и актуальна. Важность и актуальность исследования фенольных соединений обусловлены многообразием фенольных соединений, комплексом их физико-химических и биохимических свойств, физиологической ролью как в самих растениях, так и их воздействием на биологические объекты.

Многообразные фенольные соединения ответственны за вкус и аромат пищевого сырья и продуктов. Их биохимические превращения, зависимость биохимических свойств от различных факторов важны для достижения потребительского качества и безопасности пищевых продуктов.

Одним из перспективных направлений применения фенольных соединений является их использование в качестве технологических пищевых добавок -красителей, консервантов и т.д.

В качестве источников фенольных красящих веществ используются различные части растений - корни и корневища, цветки, листья древесина и кора. Способы выделения красителей основаны на экстракции их различными растворителями.

Экстракция красящих веществ из растительного сырья водой и различными растворителями - наиболее распространенный метод получения фенольных соединений, применяемых в качестве пищевых красителей. Но он не единственный. В литературе описаны также биотехнологические методы получения красящих веществ, а именно их синтез с помощью микроорганизмов. Но, хотя микробиологические методы являются более экономичными, получаемые этими методами красящие вещества имеют хорошие технологические характеристики, имеются возражения против их широкого применения в производстве пищевых продуктов. К примеру, широко применяемый в мясной промышленности пищевой краситель - ферментированный рис, который официально разрешен и является наиболее используемым в мясных изделиях среди пищевых добавок этого класса, в основном благодаря своей низкой стоимости. Этот краситель применяется более двух тысяч лет в Китае и других странах Юго-Восточной Азии как в качестве приправы к пище, так и при лечении различных заболеваний, включая нарушения пищеварения и различные инфекции.

Ферментированный рис имеет следующие технологические свойства: устойчивость к воздействию света, высоким температурам, окислению, ионам металлов, изменению рН среды, не меняет окраску, как в процессе производства, так и в процессе, хранения пищевых продуктов. При комбинировании с органическими кислотами он проявляет консервирующие свойства. К недостаткам этого красителя относится неполная растворимость в воде, что может привести к появлению неоднородного окрашивания мясных продуктов.

Целенаправленное применение ферментированного риса в мясной отрасли без какого-либо вреда для здоровья потребителей продукции с его использованием возможно только при наличии научно обоснованной допустимой нормы по содержанию цитринина в химическом составе препаратов или же при полном его отсутствии. Поэтому необходимо уделить повышенное внимание контролю за содержанием этого агента в коммерческих препаратах ферментированного риса, поступающих на рынок пищевых добавок, с целью введения данного показателя в действующие санитарные нормы и правила по использованию пищевых добавок [116]. Кроме того, поскольку невозможно полностью прогнозировать состав продукта микробиологического производства, необходимо осуществлять контроль общей токсичности получаемых препаратов с помощью биологических объектов.

Вызывает споры и применение другого красителя микробиологического происхождения - каротина [117].

В связи с этим, можно считать, что наиболее перспективным является получение фенольных красящих веществ из растений физико-химическими методами.

Несмотря на большое число разработанных методов получения природных красящих веществ из большого числа растительного сырья, необходимость и актуальность научных исследований по изысканию новых источников сырья, разработку способов выделения, биохимических свойств, условий хранения и областей и методов применения природных фенольных соединений не подлежит сомнению.

2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ 2.1. Получение красящих экстрактов феиольиых соединений из растительного сырья. 2.1.1. Сырье для получения красителей.

В качестве объектов исследования для получения красящих веществ, пригодных для окрашивания пищевых продуктов, нами были выбраны корни и корневища ревеня, щавеля конского, солодки и кизильника. Наш выбор обусловлен следующими причинами:

1. Экстракты из корней ревеня, щавеля конского, солодки кизильника имеют интенсивную окраску и могут быть применены для окрашивания пищевых продуктов;

2. Выбранные растения являются широко известными лекарственными растениями, используются в лечебных целях в народной и современной медицине [118,119,120], содержат многие полезные, биологически активные вещества.

В корнях и корневищах ревеня содержатся дубильные вещества, пектин, крахмал, танногликозиды и антрагликозиды, обладающие антисептическими свойствами. Красящими свойствами обладают в основном антраценпроизводные.

Ревень содержит витамины, макро- и микроэлементы: витамины: витамин РР: 0,1 (мг), бэта-каротин: 0,06 (мг), витамин А (РЭ): 10 (мкг), витамин В1 (тиамин): 0,01 (мг), витамин В2 (рибофлавин): 0,06 (мг), витамин С: 10 (мг), витамин Е (ТЭ): 0,2 (мг), витамин РР (Ниациновый эквивалент): 0,2 (мг).

Макроэлементы: кальций: 44 (мг), магний: 17 (мг), натрий: 2 (мг), калий: 325 мг), Фосфор: 25 (мг).

Микроэлементы: железо 0,6 (мг).

Корни щавеля конского содержат 4—11% дубильных веществ, 2,5% смолы и 25,7% экстрактивных веществ. В надземных частях около 0,1% эмодина, хризофановая кислота, около 4% производных антрахинона, сахар, смола и органические кислоты, до 175 мг% (в листьях - 112 - 272 мг-%.) аскорбиновой кислоты, витамины Р, В, каротин, 8 - 10% дубильных веществ. В незрелых плодах обнаружено 4 - 5% дубильных веществ, 119,3 мг% витамина С, каротин, 0,3% свободного и 0,47% связанного оксиметилантрахинона и др. Кроме того, в растении в фазе цветения обнаружены Са, Р, К, М^;, 31, Р и Мп.

Подземная часть солодки богата биологически активными соединениями, главным из которых ученые считают тритерпеновый сапонин глицерризин (в 40 раз слаще сахара), содержание его колеблется в зависимости от места произрастания и фазы развития растений в пределах от 3 до 23%. Минимальное количество глицирризина и экстрактивных веществ обнаруживается в молодых корневищах 1,8—4,8% и 17,1—32,1%. В корнях найдены 3—4% флавоноидов (не менее 27 компонентов): ликвиритозид, изоликвиритин, ликурозид, ликвиритигенин, 2,4-4-тригидроксихалкон и его гликозид, а также ликвиритин; кроме того, глабровая (глициретовая) кислота, диоксистигмастерин (0,02%), цирризиновая горечь (до 8,1%), эфирное масло (0,02%), желтый пигмент, аспарагин (0,7 - 3,5%), 10-35 мг% витамина С. Кроме того, корни солодки содержат в %:. глюкозу (0,6 - 15,2), сахарозу (0,3 - 11,0), крахмал (до 34), стероиды (1,5 - 2), жироподобные (0,2 - 4.7) и смолистые (1,75 - 4,12) вещества, камеди (1,5 -6,5), нерастворимую горечь (3 - 3,6) и растворимую - (4,9 - 9,7). В траве солодки глицирризин не обнаружен, но содержится 0,77% азотистых оснований, 5,5% дубильных веществ, 8% стероидных и тритерпеновых сапонинов, 2% флавонов, 0,02—0,035% эфирного масла, 2,13% общих Сахаров, 6,2% жирного масла, 2,5% органических кислот, до 704,5 мг% витамина С, 15 мг% каротина, 1% пигмента хлорофилла и следы сердечных гликозидов, около 10 флавоноидных соединений (кемпферол, астрагаллин, гликозид кверцетин, сапонаретин, витексин, глабранин и др.) [121].

Химический состав различных частей кизильника плохо изучен. Тем больший интерес представляет изучение химического состава экстракта из его корней.

Таким образом, все выбранные растения могут быть источником не только красящих пигментов, но также других биологически активных веществ. Известно, что полифенолы растений обладают антисептическими свойствами, следовательно, они могут проявлять помимо красящего и некоторое консервирующее действие.

В соответствии с известными литературными данными, ревень, щавель конский используются не только как лекарственные и пищевые, но и как красильные растения. Из корней щавеля конского получают желтую, красно-оранжевую, бежевую краску для различных текстильных волокон [118,122]. Однако использование красящих веществ из щавеля конского и других выбранных нами растений, кроме корней ревеня [123] для окраски пищевых продуктов неизвестно.

Для выделения красящих веществ нами использованы корни ревеня, щавеля конского, солодки и кизильника. Растения были собраны в весенне-летнее время в Варзобском, Вахдадском и Ванчском районе РТ, высушены на воздухе.

2.1.2. Методы выделения красящих веществ из растений.

Нами выделены фенольные красящие вещества из корней ревеня, щавеля конского, солодки и кизильника. Выделение фенольных красящих веществ из растительного сырья проводилось методом экстракции. Высушенное измельченное растительное сырье смешивали с растворителем и экстрагировали в течение определенного времени при различных температурах. В качестве экстрагирующего вещества использовались дистиллированная вода, водные растворы (1 и 10%-ные) соляной и лимонной кислот и гидрокарбоната натрия, водно-спиртовые растворы, а также 96%-ный этиловый спирт. Красящие вещества были получены в виде концентрированных растворов и сухих порошков.

Для получения сухих порошкообразных фенольных красящих веществ полученные экстракты упаривались под вакуумом и затем выдерживались в эксикаторе над гидроксидом натрия до полного высушивания. Выход сухих красящих веществ составляет от 27 до 61% для экстрактов, выделенных из различных частей растений.

Изучалось влияние соотношения сырья и растворителя. Выделение красящих веществ проводили при соотношении сырья и растворителя 1:2, 1:3,

1:5, 1:8, 1:10, 1:20, 1:30, 1:40, 1:50. Количество фенольных красящих веществ в экстракте определялась фотоэлектроколориметрическим методом по величине оптической плотности раствора, которая, как известно, пропорциональна концентрации.

С целью определения влияния температуры на выделение фенольных красящих веществ экстракцию проводили в интервале температур 20-80°С и при кипячении в колбе с обратным холодильником на водяной бане, а также противоточной экстракцией в аппарате Сокслета.

Также нами была изучена зависимость степени экстракции от времени кипячения. Для этого сырье и растворитель, взятые в соотношении 1:3, кипятили в течение 5 часов, каждый час проверяя степень экстракции. Количественно степень экстракции устанавливалась по значению оптической плотности раствора.

2.2. Исследование физико-химических свойств выделенных красителей

Нами были исследованы физико-химические свойства выделенных фенольных красящих веществ, имеющих технологическое значение -растворимость в воде и спирте, плотность растворов, общая кислотность, титруемая кислотность, содержание сухих веществ, содержание красящих веществ. Определения проводились по методикам, приведенным в литературе [124].

Плотность растворов определялась с помощью ареометров, кислотность -электрометрическим методом, титруемая кислотность - потенциометрическим титрованием, содержание сухих веществ - высушиванием навески красителя в течение 2 ч при температуре 130°С и последующим взвешиванием, содержание красящих веществ определялось фотоэлектроколориметрическим методом по стандартному раствору сульфата кобальта (для красных красителей) и по раствору бихромата калия (для желтый красителей).

2.2.1,Определение растворимости полученных сухих экстрактов

Для определения растворимости сухих экстрактов фенольных соединений в химический стакан емкостью 300 мл наливают 200 мл дистиллированной воды, вносят 2 мл концентрированного натурального красителя или 0,2 г порошкообразного красителя, тщательно перемешивают стеклянной палочкой и рассматривают раствор в проходящем свете. Полученный раствор должен быть прозрачным, без осадка и мути. Растворимость следует определять при 20° С.

2.2.2. Определение относительной плотности полученных красителей

Для полученных жидких экстрактов фенольных соединений была измерена плотность растворов. Плотность полученных вытяжек определялась ареометром. При определении плотности необходимо термостатировать раствор красителя и определения проводить при температуре 20° С. Необходимо также обращать внимание на то, чтобы в растворе не было пузырьков воздуха. Испытуемый краситель наливали в стеклянный цилиндр емкостью 250-300 мл и осторожно погружали в раствор ареометр. Значение плотности отсчитывали по шкале ареометра.

2.2.3. Определение содержания сухих веществ в полученных красителях

Содержание сухих веществ в полученных нами экстрактах определялось гравиметрическим методом. Навеска экстракта в количестве 1-2 г. помещалась в предварительно высушенный и прокаленный тигель и выдерживалась в течение 60 минут в сушильном шкафу при температуре 130° С. до постоянной массы. При определении сухих веществ в жидких концентрированных экстракта 2-3 мл его наливали в высушенный и взвешенный тигель, содержащий 6-8-кратное количество подготовленного особым образом кварцевого песка. Все тщательно перемешивали, подсушивали на водяной бане и сушили в сушильной шкафу в течение 60 минут при температуре 130° С. Песок необходим для увеличения поверхности испарения влаги. Песок предварительно промывается водой, затем соляной кислотои, после чего опять промывается водой до полного удаления кислоты. Хорошо промытый песок необходимо высушить и прокалить в муфельной печи.

Содержание сухих веществ определяется по формуле: х = т-<-а-ь'>,т т

Где х - содержание сухих веществ, %; а - масса тигля с экстрактом до выслушивания, г;

Ь - масса тигля с красителем после выслушивания, г; т - масса навески экстракта, г.

2.2.4,Определение количества красящих веществ в полученных экстрактах.

Содержания фенольных красящих веществ в выделенных нами экстрактах определялось фотоэлектроколориметрическим методом.

Фотоэлектроколориметрический метод определения количества красного пигмента в растворах предложен Леоновым Б. И [124]. В НИИ кондитерской промышленности этот метод детально изучен, уточнен и опробован при определении количества красящих веществ в ряде натуральных красных пищевых красителей.

Содержание красящих веществ в красителе определяют путем сравнения интенсивности окраски стандартного и испытуемого раствора. Определение количества красящих веществ в натуральных красных пищевых красителях проводится по стандартному раствору сульфата кобальта.

Стандартный раствор готовят следующим образом: взвешивают точно 20 г кристаллического сульфата кобальта (Со804*7Н20), растворяют в химическом стакане в дистиллированной воде и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл. Раствор в колбе доводят до метки дистиллированной водой при температуре 20°С и все хорошо перемешивают. Приготовленный стандартный раствор сульфата кобальта по интенсивности окраски соответствует содержанию 22 мг красящего вещества (энина) в 1 л.

Затем готовят испытуемый раствор красящего экстракта. С этой целью навеску хорошо перемешанной средней пробы образца красителя в количестве 1 -4 г (в зависимости от содержания пигмента) взвешивают с точностью до 0,0002 г, разбавляют в химическом стакане дистиллированной водой, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл. В случае, когда цвет фенольных красящих веществ изучаемого экстракта обусловлен антоцианами, к раствору мерным цилиндром приливают 40 мл концентрированной соляной кислоты (плотностью 1190 кг/м , х. ч.) и содержимое колбы доводят дистиллированной водой с температурой 20°С до метки.

Приготовленный раствор должен быть совершенно прозрачным. Если раствор мутный или содержит нерастворимые частицы, его фильтруют через стеклянный фильтр или центрифугируют.

Интенсивность окраски исследуемого раствора и стандартного сравнивают на колориметре любого типа. Испытуемым раствором красителя наполняют кювету с толщиной измеряемого слоя 10 мм и определяют ее оптическую плотность на фотоэлектроколориметре при зеленом светофильтре (А,=540 нм). Оптическую плотность стандартного раствора сернокислого кобальта определяют заранее.

При расчете количества красящих веществ исходят из того, что оптическая плотность раствора красителя пропорциональна концентрации пигмента в нем, т. е.

Б,: В2 = С,: С2. где В] - оптическая плотность стандартного раствора сернокислого кобальта;

- оптическая плотность испытуемого раствора красителя;

С1 - концентрация энина;

- концентрация пигмента в 1 л раствора красителя.

Содержание красящих веществ х в граммах в 1 л красителя рассчитывают по следующей формуле, выведенной из приведенного выше соотношения: с, А о,

0,022Д -1000 , или х =---г/л;

22 Д , „ или х =-- г/л; Где га - масса навески красителя, г.

Метод определения содержания красящих веществ в желтых красителях, например в куркуме и ее спиртовых экстрактах, основан на колориметрировании испытуемого раствора и определении количества желтого пигмента по предварительно построенной калибровочной кривой. Кривую строят по стандартному водному раствору бихромата калия (К2Сг207), содержащему 360 мг этой соли в 1000 мл. 1 мл стандартного раствора К2Сг207 соответствует 2,08 мкг каротина.

Для приготовления стандартного раствора используют трижды перекристаллизованный бихромат калия, навеску которого в количестве 0,360 г, отвешенную с точностью 0,0002 г, растворяют в дистиллированной воде в мерной колбе вместимостью 1000 мл.

Для построения калибровочной кривой приготовленный стандартный раствор К2Сг207 из бюретки точно дозируют в мерные колбы вместимостью 50 мл в количестве соответственно 45, 40, 35 мл и т. д.

Затем содержимое каждой колбы разбавляют дистиллированной водой при температуре 20°С до метки.

В полученных растворах бихромата калия определяют оптическую плотность на фотоэлектроколориметре в кювете с толщиной слоя 10 мм при синем светофильтре (^=480 нм). В табл.2.2.4.1 представлены средние данные определения оптической плотности разведенных водой стандартных растворов.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Рахимова, Файзигул Амонкуловна, 2012 год

1. Кретович B.J1. Биохимия растений. М., 1980.-445с.

2. Биохимия фенольных соединений// под ред Дж.Харборна. М., 1968.- 451с.

3. Гудвин Т., Мерсер Э. Введение в биохимию растений. М., 1,Т.2- С. 167-203.

4. Базарнова Ю.Г. Исследование содержания некоторых биологически активных веществ, обладающих антиоксидантной активностью, в дикорастущих плодах и травах.\\Вопросы питания. 2007.-Т.76.- №1.-С.22-25.

5. Барабой В.А. Растительные фенолы и здоровье человека. -М., 1984.-С160.

6. Липкан Г.Н. Применение плодово-ягодных растений в медицине. Киев- 1988.-С.120-122.

7. Спиричев В.Б., Шатнюк JI.H. Обогащение пищевых продуктов микро-нутриентами: современные медико-биологические аспекты. \\Пищевая промышленность.- 2002.- №7.-С. 98-101.

8. Касьянов Г.И., Кизим.И.Е., Холодцов М.А. Применение пряно-ароматических и лекарственных растений в пищевой промышленности.\\Пищевая промышленность.-2000.- №5. -С.33-35.

9. Толкунова H.H., Чуева E.H., Бидюк А .Я. Влияние экстрактов растений на развитие микроорганизмов // Пищевая промышленность.-2002.-№ 8.- С.70-71.

10. Демидов И.Н., Данилова Л.А., Чернова Л.А., Гладкая В.Ф. и др. Влияние добавок растительных экстрактов на окисление жиров // Пищевая промышленность.-1992.- № 9.- С.35.

11. Толкунова H.H. Влияние эфирных масел на микробиологические показатели мясопродуктов. //Пищевая промышленность,2002. -№12.- С.56-58.

12. Вагин В.В. Повысить качество колбасных изделий.//Пищевая промышленность.-1992.- № 9.- С.36-37.

13. Карнаушенко Л.И., Золотарева Л.А. Калугина И.М. Фитодобавки и их влияние на реологические свойства мармеладной массы. \\Пищевая промышленность.- 1999. -№ 3.- С.27.

14. Климантова Е.В. Использование каротиноидов в качестве красителей.// Пищевая промышленность.-1996. -№6,- С.28-29.

15. Петров А.А.,Бальян X.B.,Трощенко А.Т. Органическая химия.-М., 1969.-671с.

16. БакулинаО.Н. Натуральные пищевые красители.//Пищевая промышленность.-1999.- №8. С.46-48.

17. Архипова А.Н. Пищевые красители, их свойства и применение. \\Пищевая промышленностью.- 2000.- № 4.- С.66-69.

18. Харламова O.A., Кафка Б.В. Натуральные пищевые красители.\\Пищевая промышленность.- 1979. -№ 6.-С.21-23.

19. Гулин А.Н. Перспективы использования каротиноидов в качестве красителей. \\Пищевая промышленность.- 2003.- №10.- С.72-73.

20. Колмакова Н.С. Последние исследования в области безопасности синтетических красителей и тенденции развития рынка. //Пищевая промышленность.- 2008.- №11.- С.56-57.

21. Поваляева H.A. Каротиноидные красители.// Пищевая промышленность. -2003.- №5. С.52-53.

22. Колмакова Н.С. Последние исследования в области безопасности синтетических красителей и тенденции развития рынка// Пищевая промышленность.-2008.- №11.- С.56-571.

23. Прянишников В.В.,Микляшевски П., Гиро Т.М. АКТИВ-РЕД натуральный пигмент для мясных продуктов. // Мясная индустрия .-2010.- №3.- С.28-30.

24. Гусейнов В.М., Алиев С.А., Асланова В.А., Садыхова P.A. О возможности применения красителей растительного происхождения для производства колбасных изделий // Мясная индустрия .-1986.- №3.- С.25-28.

25. Семенова A.A., Беретов JI.A. Если мясной продукт красный, значит он небезопасный? // Мясная индустрия.-2009.-№ 10.С.20-24.

26. Исупов В.П. Пищевые добавки и пряности. История, состав, применение. СПб.ГИОРД. 2007,230 с.

27. Ходжиматов М. Дикорастущие лекарственные растения Таджикистана. Душанбе,1989.-С.137-144.

28. Блажей А., Шутый J1. Фенольные соединения растительного происхождения, М., Мир, 1968, 120с.

29. Филлипцова Г.Г., Смолич И.И. Основы биохимии растений. Минск БГУ, 2003.- 136с.

30. Неницеску К. Органическая химия. -М., 1963- 330с.

31. Скорикова Ю.Г. Полифенолы плодов и овощей и формирование цвета продуктовЛШшцевая промышленность. 1973.- №3. -С.9-32.

32. Яковлева Г.А. Лекарственное сырье растительного происхождения. \\Фармакогнозия. -2006.- 845 с.

33. Головкин Н., Руденская Р.Н., Трофимова И.А., Шретер А.И. Биологически активные вещества растительного происхождения / Б.-М., Наука.- 2002.-205с.

34. Горелик М. В. Химия антрахинонов и их производных.- М., 1983-301с.

35. Ullmann's Encyclopedic, 4 Aufl., Bd 7, Weinheim.- 1974 S. 579.

36. Johanson JF. Sonnenberg A, Koch TR: Clinical epidemiology of chronic constipation. J Clin Gastroenterol, 1989; II: 525-36

37. Запрометов, M.H. Фенольные соединения. Распространение, метаболизм и функции в растениях / М.Н. Запрометов М.: Наука, 1993, 272с.

38. Валиева А.И., Абдурахимова И.Р. Вторичные метаболиты растений: физиологические и биохимические аспекты (часть 3. Фенольные соединения) Казань, КФУ.- 2010,- 40 с.

39. Evans J.R. Carbon fixation profiles do reflect light absorption profiles in leaves // Aust. J. Plant Physiol.-1995. V.22, P. 865-873.

40. Feild T.C., Lee D.W., Holbrook N.M. Why leaves turn red in autumn. The role of anthocyanins in senscing leaves of red-osier dogwood. Plant Physiol. 2001, V.127. P.566-574.

41. Phenolic Compounds in Food and Their Ef fects on Health. I: Analysis, Occurrence, and Chemistry (Ho CT, Lee CY, Huang MT, eds.), American Chemical Society, Washington, DC.- 1992.- P. 102-117.

42. Velioglu YS, Mazza G, Gao L, Oomah BD: Antioxidant activity and total phenolics in selected fruits, vegetables and grain prod ucts. J Agric Food Chem.- 1998. V. 46.- P. 4113-4117.

43. Олениченко Н.А. Фенольные соединения и устойчивость мягкой пшеницы (Triticum aestivum L.) к низкотемпературному воздействию. Диссертации кандидата биологических наук. М.: ИФР РАН.-2006.-131с.

44. Brett С.Т., Waldron Е.К. Physiology and biochemistry of plant cell wall.- Eds. Black M., Cahapman E.J.- London: Unwin Hyman.- 1990.- 194p.

45. Чернов Ю.Н., Бузлама A.B., Дронова Ю.М. Полифенольные соединения: структура, свойства и прикладные аспекты применения // Фарматека. 2004. -№8. С. 43-48.

46. Бриттон Г. Биохимия природных пигментов.- М.,Мир.- 1986- 422с.

47. Георгиевский В.П. Биологически активные вещества лекарственных растений. Новосибирск, Наука.- 1990.-144с.

48. Танчев С.С. Антоцианы в плодах и овощах.- М. Пищевая промышленность.-1980-304с.

49. Биохимия фенольных соединений. Под ред. Н.М.Эммануэля М.: Мир.- 1968.-451с.

50. Редико Е.Э. Анализ и стандартизация полифенольного комплекса листьев и жома плодов черной смородины. Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук, 2010, 133 с.

51. Пасешниченко В.А. Растения продуценты биологически активных веществ. \\Соросовский образовательный журнал.-2001.-Т.7.- №8.-С.13-19.

52. Левицкий А.П., Вертикова Е.К., Селиванова Н.А. Хлорогеновая кислота: биохимия и физиология. Микробиология и биотехнология.-2010.- №2.-С.6-20.

53. Winkel-Shirley В. Flavonoid biosynthesis. A colorful model for genetics, biochemistry, cell biology, and biotechnology. Plant Physiol. 2001 V.126.- P.485-493.

54. Лукнер M. Вторичный метаболизм у микроорганизмов, растений и животных.М., Мир,1979-548с.

55. Высочина Г.И. Эволюция и филогенетические отношения родов в семействе POLEGONACEAE гречишные в связи с биогенезом фенольных соединений. Растительный мир Азиатской России.- 2008 С. 1-8.

56. A.C. 1693002 СССР. Способ получения пищевого красителя. Р.А.Атакузиева, Х.Т.Саломов, К. Давронов, Т.Т.Саилова, А.А.Алимбаева. № 4745199/13 заявлено 03.10.89, опубликовано 23.11.91.Бюл. № 43.

57. A.C. 126570 СССР. MKU С 09Ь6/00 Способ получения пищевого красителя. Б.И.Леонов, Н.М.Руднев, Г.Б.Леонов. № 633761/28, заявлено 13.06.1959. Опубликовано Бюллетень изобретений № 5 за 1960.

58. A.C. 189974 СССР. МПК С 09Ь 61/00 А231 1/27. Способ производства пищевого красителя. Ф.Г.Ахметзянова, В.Г.Сперанский № 1006179/28-13, заявлено 07.05.1965, опубликовано 16.12.1966, бюллетень №1 «Открытия и изобретения».

59. A.C. 571492 СССР МКл2 С 09 В 61/00 А 23 L 1/27. Способ получения красного пищевого красителя. Б.В.Кафка, С.А.Салихов, А.С.Султанходжаев, М.А.Аскаров. № 2063427/13, заявлено 24.09.74 , опубликовано 05.09.77, бюллетень № 33.

60. A.C. 277155, МПК С 09Ь 61/00. Способ получения красного пищевого красителя. М.П.Каджая. № 1344877/28-13. заявлено 02.07.1969, опубликовано 22.07.1970, бюллетень № 24.

61. Балиян А.Р., Эгамбердиев Н.Б., Наралиева Б.Ф. Новый пищевой краситель для кондитерской и безалкогольной отраслей. \\ Пищевая промышленность.- 1994,-№6.- С.13.

62. Касумов М.А. Новые красильные растения. //Пищевая промышленность.-1991.- №12.-С.75-77.

63. A.C. РФ 1693002 AI 09 В 61/00 Способ получения пищевого красителя Р.А.Атакузиева, Х.Т.Саломов, К.Давронов, К.Т.Саилова, А.А.Алимбаев № 554275. Заявлено 03.10.1989, опубликовано 23.11.91, бюллетень № 43.

64. A.C. 1055749 СССР С 09 В 61/00 Способ получения красителя из плодов тутового дерева. Р.З.Алиев, Р.А.Зумеров, Л.Г.Сентюрова. № 3402773/28-13. Заявлено 25.02.1982, опубликовано 23.11.83, бюллетень № 43.

65. A.C. 2158743 РФ. 7 С 09 В 61/00. Способ получения антоцианового красителя из растительного сырья. В.А. Смирнов, В.В.Сидоров, В.В.Смирнова. № 000110391/13. Заявлено26.04.2000, опубликовано 10.11.2000, бюллетень № 31

66. A.C. 277987 AI С 09 В 61/00 Способ получения красного пищевого красителя. З.К.Чхеидзе № 1319201/13. Заявлено 10.04.1969, опубликовано 05.08.1970, бюллетень № 25.

67. A.C. 1501054 AI С 09 В 61/00 Способ получения красного пищевого красителя. В.А.Бурыгин, С.А.Салихов, A.C. Султанходжаев, С.Ф.Фахрутдинов, А.Н.Зайцев и В.Ж.Муратова. № 2020654/13. Заявлено 29. 04.74, опубликовано 07.01.76, бюллетень № 4.

68. A.C. 1669950 AI С 09 В 61/00 Способ получения пищевого красителя. Д.К.Шапиро, В.В.Вересковский, С.Ю. Буслович, Н.А.Каган, Л.Г.Бирюкова, М.А.Кудинов. № 3976460/13. Заявлено 18. 12.85, опубликовано 15.08.91, бюллетень № 30.

69. Хайрутдинова А.Д. Разработка технологии антоциановых красителей из растимтетльного сырья: диссертация на соискание ученой степени кандидата технических наук, Воронеж, 2004, 224 с.

70. A.C. 15982318 AI С 09 В 61/00; А 23 L 1/27 Способ получения красного пищевого красителя. В.Б.Кулиев, Ф.А.Мамедов, Г.Л.Филонова, Р.А.Ермакова., Н.А.Комракова, В.В.Трейс. № 4482497/30-13. Заявлено 15.09.89, опубликовано 15.09.90, бюллетень № 34.

71. A.C. 340673 СССР. M. Кл. С. 09b 61/00 Способ получения красного пищевого красителя из свеклы. Ю.Т.Жук, И.Э. Цапалова № 1440878/13, Заявлено 18.05.70, опубликовано 05.06.72, бюллетень № 18.

72. АС. 1742295 СССР. МПК С 09Ь 61/00 А231 1/27. Способ получения пищевого красителя. Р.Г.Бинеев, Л.П.Зарипова, А.Г.Лиакумович, С.И.Агаджанян и Н.В.Шильникова. № 2068809, заявлено 26.06.1989, опубликовано 23.06.1992, бюллетень №23.

73. A.C. 405923 СССР. М. Кл. С. 09Ь 61/00 Способ производства пищевого красителя из растительного сырья. Н.И.Манциводо, М.С.Горбачевкая, Б.Г.Залецкая, В.В .Малаш, В.Н.Залецкий. № 1427475/28-13, Заявлено 04.05.70, опубликовано 05.11.73, бюллетень № 45.

74. A.C. 267783 СССР. М.Кл. С. 09Ь 61/00. Способ получения пищевого красителя из пленки зерен сорго. Л.Е.Олифсон, А.П.Нечаев, Н.Д.Осадчая, Л.И.Михайлова « 1292119/28-13 Заявлено 25.12.68, опубликовано 02.04.70, бюллетень №13.

75. Патент РФ, 2280660 С1 С. 09В 61/00. Способ получения пищевого красителя на основе скорлупы орехов. О.М. № 98100503/13. Заявлено 14.01.98, опубликовано 20.05.99, бюллетень № 14.

76. A.C. 460286 СССР. М. Кл С 09Ь 61/00 Способ получения красного пищевого красителя из растительного сырья. З.К.Чхеидзе, О.Р.Кобаладзе, И.И.Бурачевский. № 1927733/28-13. Заявлено 05.06.73, опубликовано 15.02.75, бюллетень № 6.

77. A.C. 869305 СССР, С 09 В 61/00 Способ получения пищевого красителя из свеклы для клеймения мясных туш. О.А.Кремнев, Боровский В.Р., Лопатин В.В., Демченко В.В. №2991603/13.Заявлено 23.10.80, опубликовано 15.10.93, бюллетень №37-38

78. Патент РФ 2001070 С1 с 09 В 61/00 Способ получения красного красителя. Астанов С., Вафоев Б.У., Сохибов Э.Р. № 5019699/13. Заявлено 28.12.91, опубликовано 15.10.92, бюллетень № 37.

79. A.C. 440393 СССР, МПК С. 09Ь 61/00. Способ получения пищевого красителя из сырья растительного происхождения. М.Г.Абуталыбов, Р.М.Аббасов, С.М.Асланов № 1819928/28-13. Заявлено 10.08.72, опубликовано 25.08.74, бюллетень №31.

80. A.C. 231051 СССР, МПК С. 09Ь 61/00. Способ получения пищевого красителя из выжимок плодов и ягод. В.В.Андреев, Э.М.Шприцман № 845824/28-13. Заявлено 08.07.63, опубликовано 15.11.68, бюллетень № 35.

81. Патент RU 2133621, МПК 6 А 61 К 35/78. Способ получения растительного полифенольного экстракта. О.Б.Максимов, Н.И.Кулеш, J1.C. Степаненко, П.Г.Горовой. опубликовано 27.07.1999, бюллетень № 21.

82. A.C. 2158743 РФ. 7 С 09 В 61/00. Способ получения антоцианового красителя из растительного сырья. В.А. Смирнов, В.В.Сидоров, В.В.Смирнова. № 000110391/13 Заявлено26.04.2000, опубликовано 10.11.2000, бюллетень № 31.

83. Патент РФ, 264423 С1 С. 09В 61/00. Способ производства пищевого красителя. № 98100503/13. Заявлено 14.01.98, опубликовано 20.05.99, бюллетень № 14.

84. A.C. 460287 СССР, МПК С. 09Ь 61/00. Способ получения красного пищевого красителя из растительного сырья. З.К.Чхеидзе. № 192773228-13, заявлено0506.73, опубликовано 15.02.75, бюллетень № 6.

85. A.C.501054 СССР, М. Кл.2 С. 09Ь 61/00. Способ получения пищевого красителя. В.А.Бурыгин, С.А.Салихов, А.С.Султанходжаев, С.А.Фахрутдинова, А.Н.Зайцев, В.Ж. Муратова. № 2020654/28-13, заявлено2904.74, опубликовано 30.01.76, бюллетень № 4.

86. A.C. 1081188 А СССР, С. 09Ь 61/00. Способ получения красного красителя из кошенили. 3. Инерсисян, A.B. Мушигян, К.Э. Хачатурян. № 3481422/23-05, заявлено 04.08.82, опубликовано 23.03.84, бюллетень № 11.

87. A.C. 343987 СССР, M. Кл. С. 09Ь 61/00. Способ получения пищевого красителя из семян орлеана. П.Ф.Разинков, Б.М.Гаврилов, Н.В.Клочкова. № 1448693/28-13. Заявлено 15.06.70, опубликовано 07.07.72, бюллетень № 21.

88. A.C. 1758049 А 1 СССР, С. 09Ь 61/00. Способ получения концентрата желтого красителя из цветков сафлора. А.А.Кулиев, И.В.Копмане, Г.М.Насирова. № 4822772/05. Заявлено 23.03.90, опубликовано 30.08.92, бюллетень № 32.

89. Патент РФ ,2001072 С1 С. 09В 61/00. Способ получения красителя из шелухи лука. JI.M. Ильина, О.М. Квасенков. № 5038855/13. Заявлено 21.04.92, опубликовано 15.10.93, бюллетень № 37-38.

90. Патент РФ ,2130472 С1 С. 09В 61/00. Способ производства красителя из шелухи лука. О.М. Квасенков, В.А. Ломачинский, Э.С. Гореньков. № 98100503/13. Заявлено 14.01.98, опубликовано 20.05.99, бюллетень № 14.

91. A.C.18819275 СССР, М. Кл. С. 09Ь 61/00. Способ получения пищевого красителя для пищевых продуктов. И.И. Сафронова, А.Г. Губанова, Л.Я. Полищук, Г.С. Христоферзен. №987960 . Заявлено 11.09.90, опубликовано 30.05.93, бюллетень № 20.

92. A.C. 510492 СССР, МПК С. 09Ь 61/00. Способ получения пищевого красителя из растительного сырья. М.Г.Абуталыбов, С.М. Асланов, Н.М.Исмаилов, Э.Н. Новрузов № 2043247/-13. Заявлено 09.07.74, опубликовано 15.04.76, бюллетень №31.

93. Патент РФ, 2154075 С1 09 В 61/00. Способ получения пигментной добавки из растительного сырья. Кацерикова Н.В., Ильина Н.Г., Казанкова O.A., Мусин Ю.В. №98121967/13. Заявлено 03.12.1998, опубликовано 10.08.2000, бюллетень №22.

94. A.C. 878770 СССР, М.Кл2 С. 09В 61/00. Способ получения концентрата каротиноидов. С.М.Асланов, Э.Н.Новрузов, О.В.Ибадов, Л.А.Шамси-заде. № 2780187/28-13. Заявлено 26.10.79, опубликовано 07.11.81, бюллетень № 41.

95. A.C. 1567589 AI СССР, С. 09В 61/00. Способ производства каротинсодержащего красителя из моркови. Л.А.Брикмане, А.Н.Морорзов,

96. Д.Л.Лиепа, У.Я.Кулиныд № 4312214/31-13. Заявлено 02.10.87, опубликовано 30.05.90, бюллетень № 20.

97. Патент RU 2174011, МПК 7 А 61 К 35/78, С 07 С 37/80. Способ получения полифенолов / Рубчевская Л.П., Лебедева О.И., Ушанова В.М., Лис Е.В., Репях С.М. Опубл. 27.09.2001, бюллетень №27.

98. Патент RU 2175236, МПК 7 А 61 К 35/78, 31/05, С 07 С 39/04. Способ получения суммы полифенолов / Безпалько Л.В. и соавт. Опубл. 7.10.2001, бюллетень №30.

99. Патент RU 2171111, МРК. А 61 К 35/78. Экстракт листьев аронии, обладающий биологической активностью, и способ его получения. / Платова О.М. и соавт. опубликовано 27.07.2001, бюллетень № 21.

100. Касумов М.А., Гасымов A.A. Полифенольные желтые пищевые красители. \\ Пищевая промышленность. -1996. -№ 6.- С. 12.

101. A.C. 266117 СССР, МПК С. 09В 61/00. Способ получения пищевого зеленого красителя из растительного сырья. Касперская Т.В., Семенова Н.П. № 1307201/28-13. Заявлено 17.11.1969, опубликовано 17.03.1970, бюллетень № 11.

102. Мустафина A.C., Помозова В.А., Сорокопуд А.Ф. Исследование процесса экстрагирования черной смородины// переработка сельскохозяйственного сырья: тезисы научных работ.- Кемерово, 1999.- С 42 43.

103. A.C. 275271 СССР, МПК С. 09В 61/00.Пищевой краситель М.А.Бокучавы и Г.Н.Пруидзе, содержащий естественные красящие вещества и витамины. 902552/28-13. Заявлено 26.05.64, опубликовано 03.07.70, бюллетень № 22.

104. Патент РФ, 2126025 С1 6 С 09 В 61/00. Способ получения таннидов из растительного сырья. Шекуров В.Н., Ефремов Б.А., Ибрагимов Ш.Н.,

105. Чеченев Л.А., Лазько A.C. заявлено 09.06.1994, опубликовано 10.02.1999, бюллетень № 4.

106. Патент РФ, 2159257 С1 7 С. 09В 61/00. Способ получения черного красителя из природного происхождения. А.П. Хачатрян, Р.Г.Хачатрян № 99118612/13. Заявлено 02.02.98, опубликовано 20.11.2000, бюллетень № 32.

107. Патент РФ ,2159258 С1 7 С. 09В 61/00. Способ получения черного красителя из природного происхождения. А.П. Хачатрян, Р.Г.Хачатрян № 99125162/13. Заявлено 06.12.99, опубликовано 20.11.2000, бюллетень № 32.

108. Патент СССР , 584799 М. Кл2 С1 7 С. 09В 61/00. Способ получения красного пищевого красителя. Х.Р.Молл, Д.Р.Фарр. № 2187199/05. Заявлено 06.11.75, опубликовано 15.12.77, бюллетень № 46.

109. A.C. 1786048 СССР, С. 09В 61/00. Способ получения пищевого красителя . Ляшенко Е.С./, Мелетьтев А.Е.,Проценко А.Т., СеменоваТ.С., Калашнюк Л.В. Гайворон Е.Ф. № 4837657/13. Заявлено 08.06.90, опубликовано 07.01.93, бюллетень № 1.

110. A.C. 1689389 А 1 СССР, С. 09В 61/00. Способ получения красного пищевого красителя. Атакузиева P.A., Саломов Х.Т. № 4730900/13. Заявлено 22.08.89, опубликовано 07.11.91, бюллетень № 41.

111. Патент СССР, 1819275 A3 С 09 В 61/00. Способ получения красителя для пищевых продуктов Сафронова И.И., Губанова А.Г., Полищук Л.Я. № 4865074/13. Заявлено 11.09.90, опубликовано 30.05.93, бюллетень №20.

112. Семенова A.A., Беретов Л.А., Черемных Е.Г. Новый пищевой краситель для мясных продуктов // Мясная индустрия.-2007.- № 10.-С. 34-36.

113. Семенова А.П., Беретов Л.А. О безопасности ферментированного риса // Мясная индустрия. -2007.- № 8.-С.8.

114. Кричман Е.С. Тартразин и другие. //Пищевая промышленность.-2002.- №7.-С.62.

115. Нуралиев Ю. Лекарственные растения Таджикистана Душанбе, Маориф.-1989.-С.183.

116. Шукуров А.Ш., Станюкович М.Б. Основные красильные растения Таджикистана // Изв. АН Тадж.ССР. Отд-ние биол. наук, 1974. №2 (47). С. 1924.

117. Соколов С.Я., Замотаев И.П. Справочник по лекарственным растениям (фитотерапия) М: Медицина.-1985- 463с.

118. Гаммерман А.Ф.Дадаев Г.Н. и др. Лекарственные растения. М., Высшая школа. 1975, 400 с.

119. Жизнь растений. Под ред. А.А.Тахтаджяна. М.: Просвещение.-1980.-С.330.

120. Кацерикова. Н.В. Пищевая промышленность.- 2000.- № 1.-С.33-34.

121. Харламова O.A., Кафка Б.В. Натуральные пищевые красители. \\Пищевая промышленность.-1979.- № 5.-С.22-23.

122. Западнюк И.П., Западнюк В.И. , Захария Е.Г., Западнюк Б.В. Лабораторные животные. Разведение, содержание, использование в эксперименте. Киев, «Вища школа».-983-383с.

123. Кишкун A.A. Руководство по методам диагностики М., «ГЭОТАР-Медиа».-2007-779 с.

124. Гуськова Т.А. Оценка безопасности лекарственных средств различных фармакологических групп.// Новые препараты в фармакологии.-Москва.-2003.- №9.-С.20-30.

125. Ашмарин И.П. Статистические методы в микробиологических исследованиях / Л. Из-во мед. лит.-1986-184 с.

126. Использование лабораторных животных в токсикологическом эксперименте. Под ред. П.И.Сидорова. Архангельск.-2002- 20 с.

127. Долгов В.В., Морозова В.А. Клинико-диагностическое значение лабораторных показателей. -М.: Медицина.- 1997.-160с.

128. Мокеев А.Н. Применение карамельных красителей в хлебобулочных кондитерских изделиях и выпечке.// Пищевая промышленность. -2002.- №11.-С. 52-53.

129. Истомина М.М. Технология и техника механизированного производства тортов и пирожных. М: Пищевая промышленность.-1975-252с.

130. Журавлева Е.И. Технологи я кондитерского производства. М: Пищпромиздат.-1962-442С.

131. Кузнецова Л.С., Седанова М.Ю. Технология приготовления мучных кондитерских изделий. М: «Мастерство».-2002-319с.

132. Лурье И.С. Технология и технохимический контроль кондитерского производства. М: Легкая и пищевая промышленность.-1981-325с.

133. Газаева М.С., Хамицаева A.C., Мамукаев З.М. Вареная колбаса «Осетинская» для лечебно-профилактического питания // Пищевая промышленность.-2007.-№6.-С.60-61.

134. Шумиляк К., Скрабка Т. Применение красителей в производстве мясопродуктов. //Пищевая промышленность.- 1991.- №8.- С.93-97

135. Кученев П. В., Барабанщиков И.В. Практикум по «молочному делу» М: «Колос».- 1968-190с.

136. Химия древесины. Под ред. Иванова М.А., М., Лесная промышленность.-1982.-С.173-184.

137. Герасимов Я.И. Курс физической химии.- М., Химия.-1973.С.24.

138. Киреев В.А. Курс физической химии. М., Химия.- 1975.-С.627.

139. Жуховицкий A.A., Шварцман Л.А. Физическая химия. М., Государственное научно-техническое издательство цветной металлургии.-1963.- 646с.

140. Райд К. Курс физической органической химии. М. Мир.-1972.- 552с.

141. Миронов В.А., Янковский С.А. Спектроскопия в органической химии. М., Химия,- 1985.- 232 с.

142. Кунаева Р. М. Гидролитические и окислительные ферменты обмена фенольных соединений растений. Диссертации доктора биологических наук, Алма-Ата.-1984. -320с.

143. Дренин A.A. Флавоноиды и изофлавоноиды трех видов растений родов TRIFOLIUM L. и VICIA L. Автореферат диссертации на соискание учепной степени кандидат химических наук. -2008.- 24с.

144. Браславский В.Б., Куркин В.А., Исследование электронных спектров флавоноидов тополя и прополиса. \\ Медицинский альманах, №2,(156). -2011.-С.140-144.

145. Росивал Л., Энгст Р., Соколай А. Посторонние вещества и пищевые добавки в продуктах. \\ Легкая и пищевая промышленность.-1982.- С.117

146. Буланкин Д.Г. Исследование по стандартизации и разработке лекарственных средств на основе листьев гинкго двулопастного. Диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук. -2011.Д 10 е.

147. Давитян Н.А. Разработка технологи и нормирование качества жидкого и сухого экстрактов травы стальника полевого. Диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук. 2007 г., 173 с.

148. Вичуткина Е.А. Создание фитосбора «Нефролен» с использованием рационального химико-фармакологического подхода. Диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук. 2007 г., 173 с.

149. Мирович В.М. Фармакогностическое исследование представителей родов ORIGANUM L. И RHODODENDRON L. Флоры Восточной Сибири. Диссертации на соискание ученой степени доктора фармацевтических наук. 2010 г., 308 с.

150. Johanson JF. Sonnenberg A, Koch TR.Clinical epuiemiology of chronic constipation. \\ J Clin Gastroenterol. 1989.-P. 525-36.

151. Read NW, Celik AF, Katsinelos P. Constipation and incontinence in the elderlyA\ J Clin Gastroenterol. 1995.- V.20. P.61-70.

152. Whitehead WE., Chaussade S, Corazzian E. Kumar D: Report of an international workshop on management of constipation. Gastroenterology International. 1991.-V.-20. P.61-113.

153. Heaton KW, Radvan 3, Cripps H et al: Defecation frequency and timing, and stool form in the general population: a prospective study. Gut. 1992/ V.33/- P.818-24.

154. Haran D, Gunvitz JH, Avorn J et al: Bowel habit in relation to age and gender. Findings from the national health survey and clinical implications. Arch Intern Med. 1996.-V.56. P.315-20.

155. Андрушкевич В. В. Биохимические показатели крови, их референсные значения, причины изменения уровня в сыворотке крови г. Новосибирск. 2006-172с.

156. Жаринов А.И., Воякин М.П. Технологизмы» мясного производства // Мясная индустрия. 2008.-№1.- С. 30-33.

157. Месхи А.И. Биохимия мяса, мясопродуктов и птицепродуктов.\\ Легкая и пищевая промышленность.- 1984- 280с.

158. Соколов А. А. Физико-химические и биологические основы технологии мясопродуктов. \\Пищевая промышленность.- 1965- 490с.

159. Гусейнов В.М., Алиев С.А., Асланова В.А., и др. Возможности применения красителей растительного происхождения для производства колбасных изделий // Мясная индустрия.-1986.- № 3.- С.79.

160. А. С. 1261611 СССР, кл. А22С 5/00. Способ цветообразования мясных изделий/В.М. Горбатов, В.М. Чесников (СССР).-№3742305/28-13; Заявлено 23.05.84; опубл. 07.10.86. Бюл. № 37 // Открытия. Изобретения.- 1983-37.-С.77.

161. Ефимова И.Е., Белодедова A.C. Использование кармина при производстве мясных изделий // Пищевая промышленность.-2003.-№8.- С.96.

162. Семенова A.A., Беретов Л.А., Черемных Е.Г. Новый пищевой краситель для мясных продуктов // Мясная индустрия.-2007.- № 10.- С.34-36.

163. Касьянов Г.И., Алешкевич Ю.С. Пути формирования цвета мясных продуктов// Пищевая промышленность.-1999.- №4.-С.41.

164. A.C. 1011092 СССР, кл. А22С 11/00. Способ цветообразования мясных изделий /И.П. Кривопишин и А.Д. Игнатьев .- №3363965/28-13; Заявлено 08.12.81; опуб. 15.04.83, бюл. № 14 // Открытия. Изобретения.- 970.- № 14.-С. 63.

165. Куликов Ю.И., Дадян Н.К. Новый натуральный краситель для производства вареных колбас.\\ Мясная индустрия.- 2009.- №10.- С.26-29.