Биохимические параметры стресс-редуцирующей реакции гидробионтов при интоксикации тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.16, доктор биологических наук Цветков, Илья Леонидович

• Цветков, Илья Леонидович
• доктор биологических наук
• 2009

Оглавление диссертации доктор биологических наук Цветков, Илья Леонидович

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. Биохимическая адаптация гидробионтов к токсическому воздействию и другим факторам среды (обзор литературы)

1.1. Молекулярные факторы адаптации. Металлотионеины и другие стресс-белки

1.2. Метаболические факторы адаптации

1.2.1. Реакции свободного окисления

1.2.1.1. Ферментативная детоксикация ксенобиотиков

1.2.1.2. Антиоксидантная защита

1.2.1.3. Биомаркеры окислительно-восстановительных процессов в экологическом мониторинге природных водоемов

1.2.2. Адаптивная динамика основных путей метаболизма

1.2.3. Биогенные вещества и специализированные защитные белки в качестве факторов метаболической адаптации

1.3. Клеточная адаптация и её биохимические маркеры

1.3.1. Апоптоз — запрограммированная гибель клеток

1.3.2. Аутолиз и некроз

1.4. Стресс и его общебиологическая природа 108 1.4.1. Основные биохимические маркеры стресса

1.4.2. Развитие стресс-реакции. Неспецифическая и специфическая адаптация

ГЛАВА 2. Материалы и методы

2.1. Материалы

2.1.1. Особенности биологии подопытных животных

2.1.2. Сбор и содержание животных в лаборатории. Постановка токсикологических экспериментов

2.2. Методы

2.2.1. Количественное определение активности ферментов

2.2.2. Энзимэлектрофорез множественных форм ферментов в полиакриламидном геле

2.2.3. Изоэлектрическое фокусирование множественных форм ферментов

2.2.4. Определение субклеточной локализации множественных форм ферментов 1^

2.2.5. Качественное и количественное определение сорбита

ГЛАВА 3. Суммарная активность ферментов в остром токсикологическом эксперименте 145 3.1. Методическая основа и проблемы постановки токсикологических экспериментов

3.1.1. Верификация результатов, полученных с объединённой пробой

3.1.2. Групповая изменчивость и репрезентативные группы

3.2. Изучение динамики суммарной активности ферментов в остром токсикологическом эксперименте

3.2.1. Изменение активности ферментов как следствие интоксикации организма

3.2.2. Колебательная динамика активности ферментов в процессе адаптации

ГЛАВА 4. Изменение состава множественных форм гидролитических ферментов при интоксикации гидробионтов

4.1. Молекулярная гетерогенность ферментов в норме

4.1.1. Процедура разделения и характеристики множественных форм исследованных ферментов

4.1.2. Ферменты или множественные формы?

4.2. Функциональные и патологические изменения состава множественных форм ферментов

4.2.1. Множественные формы ферментов как инструменты метаболической адаптации и маркеры загрязнённости природных

4.2.2. Множественные формы ферментов как факторы специализации тканей, органов и межвидовой дифференциации

ГЛАВА 5. Комплекс кислых фосфатаз живородки речной 214 5.1. Молекулярная гетерогенность и субклеточная локализация

5.1.1. Суммарная активность и состав множественных форм

5.1.2. Тканевая специфичность и субклеточная локализация

5.2. Физико-химические свойства и функции кислых фосфатаз

5.2.1. Очистка ферментов, их зависимость от катионов металлов

5.2.2. Субстратная специфичность и метаболические функции

5.3. Реакция комплекса кислых фосфатаз на токсическое воздействие

5.3.1. Опыты in vitro

5.3.2. Опыты in vivo

5.3.2.1. Динамика суммарной активности комплекса кислых фосфатаз

5.3.2.2. Изменения состава множественных форм кислых фосфатаз

ГЛАВА 6. Обмен побочных метаболитов в состоянии стресса

6.1. Побочные метаболиты живородки речной

6.1.1. Сезонная динамика накопления сорбита

6.1.2. Стресс-индуцированная динамика накопления сорбита

6.2. Динамика активности сопутствующих ферментов

6.2.1. Превращение побочных метаболитов в состоянии холодового и токсического воздействия

6.2.2. Координация факторов срочной и устойчивой адаптации. Структурный след

ГЛАВА 7. Биохимическое тестирование стоков и индикация качества природной воды

7.1. Лабораторный токсикологический эксперимент

7.2. Исследования в природном водоёме

7.2.1. Биологическая индикация качества воды ЗС

7.2.2. Эксперимент в природных условиях (биотестирование путём переселения) 320 ЗАКЛЮЧЕНИЕ 329 ВЫВОДЫ 333 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 338 СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биохимические параметры стресс-редуцирующей реакции гидробионтов при интоксикации»

Актуальность темы. Техногенное загрязнение водной среды — одна из глобальных экологических проблем современного общества и в ряду с климатическими изменениями температуры, освещенности, газового, солевого состава и др. параметров, едва ли не главный по значимости средовой фактор, воздействию которого нередко подвергаются водные животные. Сила воздействия этого фактора на гидробионтов определяется его качественными и количественными признаками. Первые обусловлены вероятностью попадания в гидросферу какого-либо не встречавшегося ранее токсического вещества (некоторые тяжелые металлы, ксенобиотики и пр.), вторые — концентрацией в воде и продолжительностью воздействия на биоту. Если по силе воздействия какой-либо фактор среды выходит за привычные рамки, освоенные животными в результате естественного отбора (популяционно-генетическая адаптация) или онтогенеза (индивидуальная адаптация), организм переходит в состояние стресса — органического или физиологического расстройства, сопровождаемого нарушением обмена веществ.

Впервые понятие стресса (неспецифического адаптационного синдрома) было разработано канадским патологом Гансом Селье. Он рассматривал стресс как механизм сохранения гомеостаза, универсальный для живых организмов [Селье, 1961, 1972, 1979], однако впоследствии выяснилось, что существующее многообразие жизненных форм и уровней организации в живой природе не позволяет одинаково интерпретировать стресс у теплокровных животных и беспозвоночных организмов, таких, как насекомые или моллюски. Фундаментальные отличия в строении и функциях нервных систем, степени их вовлечённости в регуляцию гомеостаза, а также в уровнях развития и преобладании значимости клеточной и организменной регуляции метаболизма в данных примерах столь существенны, что для диагностики стресса невозможно использовать одни и те же симптомы (маркеры).

Более того, понятие стресса по-разному интерпретируется экологами, генетиками, физиологами и биохимиками в связи с существованием разных форм проявления «органических и физиологических расстройств» у животных на метаболическом, клеточном, морфо-функциональном, популяционном и биоценотическом уровнях организации.

В этой связи важно отметить, что для универсальной диагностики стресса оказываются наиболее важными не столько какие-либо физиологические или биохимические маркеры, сколько определённый сценарий развития событий, индуктором которых в организме послужил стресс. Несмотря на различную природу стресс-индуцирующего воздействия (в нашем случае это химическая структура токсических веществ, степень их токсичности для определённых видов гидробионтов и 8 вероятность попадания в водную среду) организм реагирует, отвечая стереотипным набором биохимических и физиологических реакций, направленных на преодоление нарушений его жизнедеятельности. Этот набор в совокупности именуемый стресс-реакцией (он же — неспецифический адаптационный синдром), обеспечивает так называемую неспецифическую или срочную адаптацию.

Срочная адаптация не является окончательной для организма, а представляет собой первую фазу индивидуальной адаптации, из которой развивается вторая фаза — устойчивая или специфическая адаптация. Её важная особенность состоит в способности, во-первых, повышать устойчивость организма к какому-либо определённому или ряду близких по своей природе раздражителей, а во-вторых, формировать так называемый структурный след, который позволяет полностью устранить нарушения гомеостаза и сохранять эту способность в постадаптационный период.

В литературе имеются многочисленные экспериментальные свидетельства того, что вследствие интоксикации у гидробионтов происходит изменение активности и состава множественных форм целого ряда ферментов, непосредственно не связанных с детоксикацией [Немова,

1996, 2008; Немова и др., 1990]. Аналогичная реакция наблюдается в ответ и на другие раздражители, например, радиоактивное, рентгеновское и ультрафиолетовое облучение, повышение температуры воды. В частности, на такие факторы реагируют многие оксидоредуктазы (глюкозо-6фосфат-, лактат—, малат—, сукцинат- и алкогольдегирогеназы) и трансферазы (аспартатаминотрансфераза, гексокиназа), но в гораздо большей степени это относится к ферментам с широкими метаболическими функциями — неспецифичным к субстрату гидролазам (нуклеазы, кислые протеиназы, щелочная и кислая фосфатазы, неспецифические эстеразы и др.).

По ряду признаков, это и есть «изменения обмена веществ» как указывал Селье, которые составляют суть неспецифического адаптационного синдрома. Однако в силу чрезвычайной разрозненности и часто противоречивости литературных данных охарактеризовать неспецифическую адаптацию на биохимическом уровне как единый и универсальный механизм сохранения гомеостаза у гидробионтов пока не представляется возможным.

В тоже время, известны и некоторые устойчивые стрессредуцирующие факторы специфической адаптации. Установлено, например, что большинство токсических веществ подвергается детоксикации путем их постепенной деградации системой цитохромов Р45о органические вещества) или специфического связывания в неактивные комплексы с металлотионеинами (тяжелые металлы) или иммуноглобулинами (токсины белковой природы и другие антигены).

Известны также белки теплового шока или в общем смысле — стрессбелки с невыясненными до конца функциями. Предполагают, что большинство из них играют роль специфических протекторов (например, криопротекторов), некоторые являются сигнальными в генерации стресс-редуцирующих механизмов. Кроме того, описаны белки и другие молекулярные факторы (пептиды, углеводы и их производные), участвующие в изменении проницаемости клеточных мембран, вязкости и плотности жидкостей организма и других физико-химических параметров клеток и тканей.

Очевидно, что, например, повышенное содержание в организме определённых металлотионеинов или иммуноглобулинов, накопление криопротекторов, индукция активности «адаптационных» форм ферментов и др. параметры, выходящие за рамки нормы реакции, являются вполне убедительными признаками структурного следа специфической адаптации. Тем не менее, механизмы координации срочных и возникающих позднее устойчивых стресс-редуцирующих факторов, собственно процесс индукции специфической адаптации как результат стресс-реакции на токсическое воздействие остаются пока не известными.

По нашему убеждению, для разрешения проблем экологической биохимии в области теории адаптации необходим систематический подход к исследованию, а именно, анализ динамики изменений широкого круга метаболических параметров (прежде всего, активности ферментов) у ряда гидробионтов разных систематических групп в ответ на токсическое воздействие различной природы, и интерпретация полученных результатов в концепции неспецифической адаптации. Одновременно детальное изучение физико-химических свойств ферментов позволит определить их участие в адаптации как специфических стресс-редуцирующих факторов и таким образом расшифровать механизмы стресс-реакции и адаптации.

Цель и задачи исследования. Основная цель нашей работы — выявление биохимических механизмов стресс-редуцирующей реакции на сублетальную интоксикацию у пресноводных моллюсков и других гидробионтов. Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

1. Установить основные параметры гидролитических ферментов (активность, тканевую локализацию, состав множественных форм) у пресноводных гидробионтов в норме и выявить их динамику в ответ на слабое токсическое воздействие (на уровне ПДК) в остром опыте.

2. Охарактеризовать универсальные и специфичные аспекты биохимической адаптации в ответ на токсическую нагрузку у разных видов гидробионтов.

3. Выявить механизм стресс-редуцирующей реакции на сублетальное токсическое воздействие и охарактеризовать взаимосвязь биохимических механизмов срочной и устойчивой адаптации у пресноводного моллюска живородка речная (Viviparus viviparus L.).

4. Оценить и обосновать возможность биотестирования и биоиндикации' с использованием активности гидролитических ферментов гидробионтов как маркеров токсического загрязнения воды и водоёмов.

Научная новизна и теоретическая значимость. Впервые охарактеризован механизм метаболической адаптации к токсическому воздействию у живородки речной, включая фазы неспецифической (срочной) и специфической (устойчивой) адаптации, а также процесс их координации с участием комплекса кислых фосфатаз, обладающих различной специфичностью в отношении природных субстратов.

Проанализированы и обобщены изменения ряда физико-химических параметров гидролитических ферментов (общая активность фермента, состав и активность множественных форм) у широкого круга видов пресноводных гидробионтов в ответ на слабое токсическое воздействие. Впервые получены систематические данные о динамике биохимической адаптации у разных видов исследованных животных, которые углубляют классическое представление о неспецифическом адаптационном синдроме (НАС). Эти данные позволяют выявить как индивидуальные особенности разных видов по их стресс-реакции, так и общие (универсальные) закономерности адаптивной динамики метаболизма.

Впервые выделены и охарактеризованы кислые фосфатазы из пищеварительной железы моллюска живородка речная (Viviparus viviparus L.). Определены их физико-химические и функциональные параметры (Rf в 5,7% ПААГ, pi, субстратная специфичность), установлена субклеточная локализация и тканеспецифичность этих ферментов. Кроме того, выявлена и подробно изучена индуцибельная (адаптационная) кислая фосфатаза, появляющаяся в ответ на острую интоксикацию хлоридом кадмия.

На основании данных о субстратной специфичности и изменении активности кислых фосфатаз при интоксикации предложена схема участия этих ферментов в адаптивной регуляции гликолиза и накоплении побочных метаболитов (глюкоза, фруктоза, сорбит, глицерин) у пресноводных гидробионтов.

Установлена роль сорбита в метаболизме живородки речной как криопротектора и фактора устойчивости к токсическому воздействию. Предполагается участие сорбита в индукции апоптоза при исчерпании адаптивного потенциала отдельных клеток. Выявлена динамика содержания сорбита и активности ряда ферментов углеводного обмена в пищеварительной железе моллюска. Показано, что сорбит накапливается в пищеварительной железе моллюска как при понижении температуры воды, так и при острой интоксикации, однако происходит это разными путями, поскольку изменения активности сопутствующих накоплению сорбита ферментов (кислая фосфатаза, сорбитолдегидрогеназа, альдозоредуктаза) зависят от характера стресс-индуцирующего воздействия. Это связано с вынужденной оптимизацией регуляторных механизмов в процессе адаптации к определённым неблагоприятным факторам внешней среды и/или необходимостью изменения баланса свободных углеводов (прежде всего, глюкозы и фруктозы) как предшественников сорбита для реализации стресс-редуцирующих реакций организма.

На примере трёх видов моллюсков Viviparus vivparus L., Anodonta stagnalis Gmelin, Unio longirostris Rossmaessler показана изменчивость активности кислой фосфатазы в популяциях живородки речной, обитающих в зонах с различной антропогенной нагрузкой (р. Которосль, г. Ярославль и Ярославская обл.). Исследованы активность и состав множественных форм кислой фосфатазы. Установлены достоверные и очень значительные популяционные различия исследованных биохимических параметров, сохраняющиеся в условиях кратковременного изменения условий обитания (при искусственном переселении).

На основании анализа результатов лабораторных исследований даны обоснованные рекомендации для выбора тест-функции (фермент), тест-объекта (вид животного) и параметров токсикологического эксперимента (продолжительность, концентрация токсиканта). Наглядно продемонстрирован способ биохимического тестирования качества воды в остром опыте с использованием живородки речной (тест-объект) и гидролитических ферментов (тест-функция).

Практическая значимость. Запатентованный нами способ биохимического тестирования качества воды (патент РФ №2308719) состоит в регистрации изменений суммарной активности кислой фосфатазы и дезоксирибонуклеазы в экстракте пищеварительной железы живородки речной по истечении ряда кратковременных экспозиций моллюсков в тестируемой воде. Этот способ имеет универсальное применение в отношении химической природы токсических веществ и их качественного состава в многокомпонентных смесях, т.к. базируется на концепции о неспецифическом адаптационном синдроме, являющейся частью нашего исследования.

Предложен способ биохимической индикации токсического загрязнения природных водоёмов по сравнительным данным о суммарной активности кислой фосфатазы в экстракте пищеварительной железы трёх видов пресноводных моллюсков (V. vivparus, A. stagnalis, U. longirostris). По сравнению с традиционными методами биологической индикации, данный способ значительно проще для реализации, т.к. не требует глубоких знаний в области морфологии и систематике водных животных. В тоже время он позволяет оценить суммарное токсическое загрязнение водоёма или его определённых зон, и, по сути, не ограничен в применении ареалами изученных видов моллюсков, т.к. может быть отработан, и для других видов гидробионтов.

Обоснованность научных положений, выводов, рекомендаций. Научные положения диссертационной работы, выводы и рекомендации являются результатом натурных и лабораторных исследований, проведённых с применением современных биологических, биохимических и физико-химических методов анализа с использованием калиброванной, юстированной и поверенной аппаратуры. Для получения экспериментальных результатов в основном использованы стандартные методы исследований. Корректность полученных результатов подтверждена статистической оценкой сходства и различия выборок при повторных экспериментах и проведении независимых контрольных исследований.

Положения, выносимые на защиту:

1. В ответ на сублетальное токсическое воздействие (на уровне ПДК) активность окислительно-восстановительных и гидролитических ферментов у водных животных меняется циклически, характеризуясь закономерно повторяющимися фазами частичной инактивации и последующей активации через определенные промежутки времени. Эта зависимость представляет собой отражение срочной биохимической адаптации организма к токсическому воздействию, которая, реализуясь на физиологическом уровне, формирует неспецифический адаптационный синдром.

2. У водных животных, разных по уровню биологической организации, существуют универсальные факторы метаболической адаптации к токсическим веществам, которые не зависят от природы токсиканта. Эти факторы обусловлены активностью ферментных систем, напрямую не связанных с детоксикацией, но участвующих в стресс-редуцирующей регуляции обмена веществ и индукции специфических факторов токсикорезистентности. Эти процессы реализуются с помощью множественных форм ферментов, метаболические функции которых могут принципиально отличаться друг от друга, что позволяет производить устойчивые сдвиги обмена веществ (на примере комплекса кислых фосфатаз и их влияния на интенсивность гликолиза и накопление побочных метаболитов).

3. Представления о динамике активности ферментов, участвующих в неспецифической адаптации к токсическому воздействию, могут быть использованы для разработки методов биохимического тестирования и биохимической индикации качества природных и сточных вод.

Апробация работы. Материалы диссертации докладывались I Международной и IV Всероссийской научно-практической конференции «Экология и охрана окружающей среды» (Рязань, 15-16 сентября 1994 г.), VII Съезду Гидробиологического общества РАН (Казань, 14-15 октября

1996 г.), научной конференции «Вузовская наука в решении экологических i проблем Верхне-Волжского региона» (Ярославль, 18-19 апреля 1996 г.), научной конференции «Биологические исследования в Ярославском государственном университете» (Ярославль, 29 ноября 1997 г.), X Международной научной конференции «Эколого-биологические проблемы бассейна Каспийского моря и водоемов внутреннего стока Евразии» (Астрахань, 25-30 апреля 2008 г.), Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы биоэкологи» (Московский областной государственный университет, 21-24 октября 2008 г.), III Всероссийской конференции по водной токсикологии, посвященной памяти Б.А. Флерова, «Антропогенное влияние на водные организмы и экосистемы» (Борок, 11-16 ноября 2008 г.).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 27 работ, из них 10 статей в периодических изданиях, рекомендованных ВАК РФ (1 — в печати), 1 монография, 1 патент на изобретение, 1 рукопись, депонированная в ВИНИТИ, 11 статей в материалах международных, всероссийских и др. конференций, 3 статьи в сборниках трудов вузов.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, отражающего современные представления о биохимических механизмах адаптации к токсическому воздействию in vivo у гидробионтов, участии различных белков, ферментов и метаболитов в разнообразных молекулярных процессах формирования

Заключение диссертации по теме «Экология», Цветков, Илья Леонидович

выводы

1. Охарактеризована стресс-редуцирующая реакция на сублетальное токсическое воздействие, установлены механизмы и выявлена взаимосвязь срочной и устойчивой адаптации с участием комплекса кислых фосфатаз у пресноводного моллюска живородка речная {Viviparus viviparus L.).

2. Биохимические механизмы адаптации к токсическому воздействию имеют общебиологическую природу, однообразно определяются у различных по организации видов гидробионтов и проявляются в закономерных колебаниях активности гидролитических и окислительно-восстановительных ферментов относительно контроля (нормы), которые имеют вид циклической фазной зависимости от экспозиции токсического воздействия. Среди исследованных видов гидробионтов можно выделить токсикодинамичные (беспозвоночные), отличающиеся большими колебаниями активности ферментов (в 2 и более раз относительно контроля), и гомеостатичные (рыбы), у которых амплитуда колебаний ферментативной активности не высока (в 1,5 раза и менее).

3. Химическая природа токсического вещества (тяжелые металлы, органические вещества) и его концентрация не отражается на форме зависимости активности ферментов от продолжительности опыта, а влияет только на величину изменения активности ферментов.

4. Закономерные однообразные колебания активности гидролитических и окислительно-восстановительных ферментов, индуцированные острым токсическим воздействием, являются биохимическим компонентом неспецифического адаптационного синдрома у гидробионтов и служат срочными стресс-редуцирующими факторами, позволяющими корректировать метаболизм при интоксикации.

5. Адаптивная динамика биохимических параметров при интоксикации у рыб может быть выражена слабо из-за частичного замещения (предупреждения) более высокими уровнями адаптации и, прежде всего, поведенческим, сопряженным со способностью свободно передвигаться на значительные расстояния и таким образом избегать локальных загрязнений водоёма.

6. Состав множественных форм ферментов при интоксикации гидробионтов меняется разнообразно, и зависит от типа токсиканта, его концентрации и продолжительности воздействия. Форму кривой биохимической адаптации в целом определяют суммарные ферментативные реакции, тогда как функции каждого из ферментов состоят в специфической коррекции метаболизма посредством активности отдельных множественных форм.

7. Молекулярные формы кислой фосфатазы речной живородки впервые охарактеризованы по электрофоретической подвижности,

334 изоэлектрической точке и субстратной специфичности. Установлено, что в зависимости от большего или меньшего сродства к органическим фосфатам, изученные ферменты могут тормозить или интенсифицировать гликолиз, и, следовательно, обмен углеводов в пищеварительной железе моллюска.

8. В пищеварительной железе речной живородки при интоксикации in vivo происходит индукция одной из форм кислой фосфатазы — КФ 6. Фермент специфичен к фруктозо-6-фосфату (71% активности по отношению к р-нитрофенилфосфату), медленно расщепляет а-глицерофосфат (19% по отношению к р-нитрофенилфосфату) и не действуют ни на один из других природных субстратов, а потому способствует торможению гликолиза и накоплению побочных продуктов метаболизма углеводов (фруктозы, сорбита, глюкозы). Относительная электрофоретическая подвижность КФ б в 5,7%-ном ПААГ составляет 0,21, изоэлектрическая точка равна 7,1.

9. Впервые определено содержание сорбита в пищеварительной железе живородки речной в разные сезоны (осенью — 1,31±0,08, зимой — 155,95±3,85, весной — 1,37±0,07, летом — 0,68±0,06 мкмоль/г ткани) и в острых лабораторных опытах. При содержании моллюсков в холодной воде происходит накопление сорбита (до 508% по отношению к контролю). При интоксикации организма моллюска содержание сорбита увеличивается в разной степени в зависимости от экспозиции (от 117 до 283% по отношению к контролю).

10. Динамика содержания сорбита: в пищеварительной железе живородки речной вызвана изменением активности кислых фосфатаз, сорбитолдегидрогеназы и альдозоредуктазы, которые в зависимости от характера внешнего воздействия, способствуют накоплению сорбита в организме моллюска или его обратному вовлечению- в метаболизм углеводов. Реакция этих ферментов на интоксикацию- организма и воздействие холода различна, в соответствии с чем изменение содержания сорбита в течение острого опыта происходит по-разному: при понижении температуры монотонно нарастает, при интоксикации колеблется, повышаясь относительно контроля и вновь возвращаясь в первоначальному уровню.

11. Кислые фосфатазы пищеварительной железы, речной живородки служат эффекторами для срочной стресс-редуцирующей (адаптивной) регуляции углеводного обмена. Её сущность состоит в модуляции гликолиза (изъятии; промежуточных продуктов углеводного обмена) и индукции, накопления сорбита как устойчивого стресс-редуцирующего фактора (криопротектора, модулятора текучести и проницаемости клеточных мембран), а при исчерпании адаптивного потенциала — вероятного индуктора апоптоза.

12. Изменения активности ферментов, наблюдаемые при интоксикации организма водных животных в остром опыте, могут служить биохимическим показателем загрязнения воды. Этот показатель в отлитие от физико-химических является синергическим, т.е. отражает комплексное

336 воздействие всей взаимозависимой совокупности загрязнения воды и, одновременно характеризуется высокой чувствительностью (на уровне ПДКводн. и ниже) и динамичностью, поскольку первые изменения обнаруживаются уже через несколько часов экспозиции подопытных животных в исследуемой воде.

13. На примере трёх видов молюсков Viviparus vivparus L., Anodonta stagnalis Gmelin, Unio longirostris Rossmaessler показано, что многолетняя изоляция на экологически чистых и в разной степени загрязненных участках водоема приводит к возникновению межпопуляционных различий в суммарной активности кислой фосфатазы, которые сохраняются после вынужденного (искусственного) переселения, а значит, являются следствием генетической изменчивости. Эта изменчивость может количественно характеризовать степень техногенного загрязнения природных вод.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Существование стресса и неспецифической адаптации у животных, значительно отличающихся по уровню организации от млекопитающих (насекомые, моллюски, кольчатые черви), доказать весьма проблематично a priori, поскольку к большинству из них не применима диагностика этого явления по комплексу функциональных маркеров, практикуемая в клинической патологии. Ещё сложнее создать условия для возникновения стресса, такие, чтобы интенсивность воздействия на организм, с одной стороны, превосходила привычную (к которой организм уже адаптирован) и тем самым индуцировала у него закономерную и адекватную ответную реакцию (эустресс), с другой стороны, не была чрезмерной и не вызывала коллапс защитных систем организма с необратимым нарушением гомеостаза (дистресс).

Судя по нашему опыту, наиболее существенным параметром для проведения токсикологических экспериментов является величина ПДК — I концентрация вредных веществ, которая по результатам биологического тестирования не вызывает патологий у ряда тестовых организмов [Методические указания., 1998]. Ориентируясь на эту величину, нам удалось создать сопоставимые условия токсикологических экспериментов с разными по степени токсичности веществами, а также пронаблюдать ответную реакцию на достаточно большом отрезке времени (до 4 суток) и при этом избежать дистресса и слишком интенсивного стресса у подопытных животных, когда стадия сопротивляемости быстро сменяется стадией истощения:

Важнейшим признаком стресс-реакции, а, следовательно, и стресса у различных по уровню организации водных животных при интоксикации на биохимическом уровне является колебательная динамика активности ферментов, достоверно превышающая по амплитуде естественную, наблюдаемую в контроле. Эта динамика универсальна в отношении воздействия разных токсических веществ и стереотипна для множества ферментных систем, не связанных с детоксикацией, и разных видов пресноводных гидробионтов, что позволяет рассматривать её как метаболический фактор неспецифической (срочной) адаптации и использовать для эколого-биохимического мониторинга загрязнений пресных вод. Однако при ближайшем рассмотрении проясняется, что изменения качественного состава множественных форм ферментов, наблюдаемые, как правило, значительно позднее их суммарной ответной реакции, сугубо специфичны и представляют'собой механизм адаптивной настройки метаболизма.

В-частности, для комплекса-кислых фосфатаз нами определена роль регуляторов интенсивности гликолиза и факторов накопления свободных углеводов глюкозы и фруктозы у моллюска живородка речная. Этот стресс-редуцирующий фактор также можно считать неспецифическим, поскольку аналогичная реакция наблюдается в ответ на холодовой стресс,

330 совершенно не схожий с интоксикацией. В тоже время активность сорбитолдегидрогеназы и альдозоредуктазы, сопутствующих превращению свободных углеводов в сорбит и обратно, а также динамика содержания самого сорбита в органах и тканях моллюска специфичны в отношении стресс-индуцирующего воздействия (переохлаждение или интоксикация), а, следовательно, являются факторами устойчивой адаптации. Если же принять за истину предположение, что сорбит у моллюсков действительно может служить защитным метаболитом в условиях токсической нагрузки (косвенные подтверждения тому мы получили в эксперименте с живородкой речной), его повышенное содержание в пищеварительной железе представляет собой структурный след устойчивой адаптации, позволяющий легче переносить повторную интоксикацию.

Таким образом, биохимический механизм стресс-реакции моллюсков на токсическое воздействие состоит в индукции генерализованной колебательной динамики активности ферментов как фактора срочной адаптации, закономерное перераспределение активности между фосфатазами с разной субстратной специфичностью или формировании базы для устойчивой адаптации и, как следствие, генерации устойчивого адаптивного ответа, а именно накопления побочных метаболитов — глюкозы, фруктозы и сорбита и их взаимопревращения с участием соответствующих ферментов. Участие других специфических стресс-редуцирующих факторов в формировании структурного следа,

331 таких как металлотионеины или комплекс цитохромов Р450, также возможно, но их координация с динамикой активности ферментов остаётся не выясненной. Вероятнее всего их индукция связана не с метаболическим, а мембранным или другим биохимическим уровнем адаптации, исследование которых в рамки настоящего исследования не входило.

В тоже время именно метаболический уровень адаптации, в отличие от молекулярного, клеточного, морфо-функционального и тем более популяционно-генетического может позволить с наименьшими техническими трудностями произвести диагностику интоксикации и определить интегральный уровень загрязнения водной среды. Активность ферментов, определённая суммарно или дифференцированно для отдельных множественных форм, — легко выявляемый и весьма информативный симптоматический признак нормального состояния организма, стресса и патологических процессов. Это продемонстрировано нами не только в модельных токсикологических экспериментах с тяжёлыми металлами, но и в опытах со сточной водой неизвестного состава, а также исследованиях в природном водоёме.

Данные примеры послужили нам основой для подготовки патента, который стал логическим итогом развития прикладного аспекта нашего исследования.

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Цветков, Илья Леонидович, 2009 год

1. Албертс Б., Брей Д., Льюис Дж., Рэфф М., Роберте К., Уотсон Дж. Молекулярная биология клетки. В 3-х т. / Пер. с англ. М.: Мир, 1994. Т. 2. 498 с.

2. Алексеев В.А. Основа биоиндикации качества поверхностных вод на уровне организмов. // Водные ресурсы. 1984. Т. 11. №2. С. 107-121.

3. Андреев Н.А., Андерсоне Д.П. Количественные сдвиги изоферментов кислой фосфатазы в крови больных инфарктом миокарда. // Кардиология. 1978. Т. 18. №11. С. 122-124.

4. Березина Н.А. Оценка качества вод р. Которосли и её притоков по составу зообентоса. // Водные ресурсы. 2000. Т. 27. №6. С. 718-727.

5. Биргер П.И. Метаболизм водных беспозвоночных в токсической среде. Киев: Наукова думка, 1979. 190 с.

6. Бочкова А.П., Филиппович Ю.Б., Коничев А.С. Выделение, очистка и свойства кислой дезоксирибонуклеазы грены тутового шелкопряда. // Биохимия. 1982. Т. 47. Вып. 3. С. 489-496.

7. Браун А.Д., Моженок Т.П. Неспецифический адаптационный синдром клеточной системы. JL: Наука, Ленинградское отделение, 1987. 232 с.

8. Введенский Н.Е. Возбуждение, торможение и наркоз (1901). // Избранные произведения. М.: Просвещение, 1951. С. 509-679.

9. Высоцкая Р.У. О влиянии смоляных кислот на активность лизосомальных ферментов в опытах in vivo и in vitro. // В кн.: Экологическая физиология и биохимия рыб. Тез. докл. IV Всесоюз. конфер. Астрахань, 1979. Т. 1. С. 71-72.

10. Высоцкая Р.У., Руоколайнен Т.Р., Сидоров B.C. Изменение активности кислых гидролаз при действии на изолированные лизосомы рыб сульфатного щелока // В кн.: Гидробиология Выгозерского водохранилища. Петрозаводск, 1978. С. 156-165.

11. Высоцкая Р.У., Руоколайнен Т.Р., Чеченков А.В. Изучение активности кислой фосфатазы у молоди лосося при разных условиях выращивания. // В кн.: Биохимия пресноводных рыб Карелии. Петрозаводск, 1980. С. 41-47.

12. Гарбуз Д.Г., Зацепина О.Г., Пржиборо А.А. и др., Исследование механизмов термоустойчивости: эволюция генетических локусов и мутагенез. // Динамика генофондов. Материалы отчетной конференции памяти Ю.П. Алтухова. М.: 2007. С. 118-121.

13. Гаузе Г.Ф. Экологическая приспособляемость. // Успехи соврем, биол. 1941. Т. 14. №2. С. 227-242.

14. Геннис Р. Биомембраны: молекулярная структура и функции. М.: Наука, 1997. 624 с.

15. Голиков А.Н., Голиков Н.В. Угнетение и стимуляция как фазы процесса адаптации. // В кн.: Вопросы теории адаптации. Тр. ЗИН АН СССР. 1987. Т. 160. С. 4-12.

16. Горизонтов П.Д. Резистентность и поражение. Вопросы общей патологии. // В кн.: Патологическая физиология экстремальных состояний. М. Медицина, 1973. С. 7-35.

17. Горомосова С.А., Миловидова Н.Ю., Таможняя В.А., Шапиро А.З. Некоторые эколого-биохимические показатели устойчивости моллюсков к загрязнению. //Гидробиол. журн. 1987. Т. 21. №1. С. 61-66.

18. Грин Н., Стаут У., Тейлор Д. Биология: В 3-х т. / Пер. с англ. М.: Мир. 1990. Т. 1. 368 с.

19. Груздев А.И., Сидоров B.C. Регуляция гликолиза изоферментами лактатдегидрогеназы в тканях радужной форели при влиянии абиетиновой кислоты. // В кн.: Физиология и биохимия гидробионтов. Ярославль: Изд-воЯрГУ, 1987. С. 12-18.

20. Довженко Н.В. Роль антиоксидантной системы в выживании моллюска Anadara broughtoni в условиях аноксии. // Scientific Articles. Ecology 2006. Part 1. Bulgaria: A Company of Union of Scientists in Bulgaria, 2006. P. 11-18.

21. Дубинин Н.П. Общая генетика. М.: Наука, 1976. 572 с. Жизнь животных: В 7-и томах / Под ред. В.Е. Соколова. М.: Просвещение, 1983. Т. 2. С. 14-61, 305-312. Т. 4. С. 271.

22. Жукинский В. Н., Оксиюк О. П., Олейник Г. Н., Кошелева С. Н. Критерии комплексной оценки качества поверхностных пресных вод. // ВIкн.: Самоочищение и биоиндикация загрязненных вод. М.: Наука, 1980. С. 57-63.

23. Завадский К.М. Вид и видообразование. Л.: Наука, Ленинградское отделение, 1968. 404 с.

24. Зарубин С.Л., Цветков И.Л., Урванцева Г.А., Шляпникова Н.А. Исследование индуцированной резистентности Daphnia magna Straus к длительному воздействию хлорида хрома. // Тез. докл. конф.

25. Биологические исследования в Ярославском государственна университете» (Ярославль, 29 ноября 1996 г.). Ярославль, 1997. С. 70-71.

26. Зилов Е.А., Стом Д.И. Модельный эксперимент в водной токсикологии. //Гидробиол. журн. 1990. Т. 26. №1. С. 67-71.

27. Зиновьев В. П. Экспресс методы определения качества вод по зообентосу в реках восточной Сибири. // В кн.: Методы биоиндикацик и биотестирования природных вод. Выпуск 1. Л.: Гидрометиздат, 1987. С. 127-135

28. Зуева Н.Н., Далев П.Г., Лазорева Д.Л. Свойства, получение и практическое применение щелочной фофатазы. // Биохимия. 1993. Т. 58. Вып. 7. С. 1009-1023.

29. Каранова М.В. Антифризные свойства низкомолекулярных гликопротеинов из крови полярных рыб. // Биофизика живой клетки. 1994. Т. 6. №1.С. 68-73.

30. Каранова М.В., Байкова Э.Э., Долгачёва Л.П. Молекулярная природа антифризной активности гемолимфы гаммаруса Gammarus lacusris. // Биофизика живой клетки. 1994. Т. 6. №1. С. 74-76.

31. Каранова М.В., Гахова Э.Н. Биохимическая стратегия выживания пресноводного моллюска Limnaea stagnalis при околонулевых температурах. // Журн. эвол. биохим. и физиол. 2007. Т. 43. №3. С. 258264.

32. Карр Я. Механизмы биологической защиты. М.: Медицина, 1976.108 с.

33. Классификация и номенклатура ферментов. М.: Изд-во иностр. литры, 1962. 198 с.

34. Козловская В.И., Чуйко Г.М., Мензикова О.В., Подгорная В.А. Энзиматический метод определения в воде фосфорорганических пестицидов и их метаболитов. // Биология внутренних вод. Информ. бюлл. СПб.: Наука, Ленинградское отделение. 1996. №100. С. 65-72.

35. Колупаев Е.И. Чувствительность тест-функций как основа для выбора биотестов на токсичность водной среды. // Гидробиол. журн. 1989. Т. 25. №5. С. 52-54.

36. Конарев А.В. Анализ ингибиторов протеиназ из зерна пшеницы методом желатиновых реплик. //Биохимия. 1986. Т. 51. Вып. 2. С. 195-198.

37. Коничев А.С., Попов А.П., Цветков И.Л. Влияние катионов металлов на активность и множественные формы ДНКазы живородки речной {Viviparus viviparus L.). // Труды Центра фундаментальных научных исследований МГОУ. М.: Изд-во МГОУ, 2005. №1. С. 75-78.

38. Коничев А.С., Попов А.П., Цветков И.Л., Филков П.В. Ферменты какбиохимические маркеры загрязнения воды. // Приложение к Вестнику

39. МГОУ. Серия «Естественные науки». География, экология, экономика:344актуальные проблемы науки и образования. М.: Изд-во МГОУ, 2005. С.151-153.

40. Коничев А.С. Физико-химическая и функциональная характеристика множественных форм ферментов насекомых. // Автореф. дисс. . д-ра. биол. наук. М., 1991. 48 с.

41. Конькова А.Ф., Магай И.А., Шехаева О.М. Энергетический гомеостаз и адаптационные возможности человека в экстремальных условиях. // Изв. АН СССР. Сер. биол. 1987. № 4. С. 506-515.

42. Короленко Т.А. Биохимические аспекты лизосомотропизма. Новосибирск: Наука, 1983. 118 с.

43. Кочетов Г.А. Практическое руководство по энзимологии. М.: Высшая школа. 1971. 352 с.

44. Кочетов Г.А. Практическое руководство по энзимологии. М.: Высшая школа. 1980. 272 с.

45. Лакин Г.Ф. Биометрия: Учеб. пособие для биол. спец. вузов. М.: Высшая школа, 1990. 352 с.

46. Лизенко Е.И. Липидный состав и липолитические ферменты лизосом. // Успехи совр. биол. 1982. Т. 94. №1. С. 94-110.

47. Линник П.Н., Набиванец Б.И. Формы миграции металлов в пресных поверхностных водах. М.: Гидрометеоиздат, 1986. 270 с.

48. Лобашев М.Е., Инге-Вечтомов С.Г. Физиологическая генетика. Л.: Медицина, 1976. 472 с.

49. Лозина-Лозинский Л.К. Адаптации и устойчивость организмов и клеток к низким и сверхнизким температурам. // Очерки по криобиологии. Л.: Наука. Ленинградское отделение, 1972. С. 288.

50. Лойда 3., Госсрау Р., Шиблер Т. Гистохимия ферментов. Лабораторные методы. / Пер. с англ. М.: Мир, 1982. 272 с.

51. Лукьяненко В.И. Биохимические тесты в ихтиотоксикологии. // В кн.: Теоретические вопросы биотестирования. Волгоград, 1983а. С. 38-45.

52. Лукьяненко В.И. Энзимодиагностика токсикозов рыб. // В кн.: Теоретические вопросы биотестирования. Волгоград, 19836. С. 46-52.

53. Маляревская А.Я. Биохимические механизмы адаптации гидробионтов к токсическим веществам. // Гидробиол. журн. 1985. Т. 21. №3. С. 70-82.

54. Маляревская А.Я., Карасина Ф.М. Влияние азотнокислого свинца на физиолого-биохимические показатели некоторых водных беспозвоночных. //Гидробиол. журн. 1987. Т. 23. №1. С. 79-84.

55. Маляревская А.Я. Обмен веществ у рыб в условиях антропогенного эвтрофирования водоёмов. Киев: Наукова думка, 1979. 254 с.

56. Манихин В.И., Коновалов Г.С. Изучение обмена химическими компонентами между донными отложениями и водой. // В кн.: Опыт иметоды экологического мониторинга. Пущино: Б.И., 1978. С. 277-290.

57. Меерсон Ф.З. Защитные эффекты адаптации и некоторые перспективы развития адаптационной медицины. // Успехи физиол. наук. 1991. Т. 22. №2. С. 52-89.

58. Меерсон Ф.З. Патогенез и предупреждение стрессорных и ишемических повреждений сердца. М.: Медицина, 1984. 272 с.

59. Методические рекомендации по сбору и обработке материалов при гидробиологических исследованиях на пресноводных водоемах. Зообентос и его продукция. Л.: ЗИН АН СССР, 1983. 52 с.

60. Методические указания по установлению эколого-рыбохозяйственных нормативов (ПДК и ОБУВ) загрязняющих веществ для воды водных объектов, имеющих рыбохозяйственное значение / Под. ред. О.Ф. Филенко и С.А. Соколовой. М.: Изд-во ВНИРО. 1998. 145 с.

61. Методическое руководство по биотестированию воды РД-118-02-90. М., 1991. С. 5-11.

62. Мецлер Д. Биохимия: Химические реакции в живой клетке. В 3-х томах. / Пер. с англ. М.: Мир, 1980. Т. 2. 606 с.

63. Митин А.В. Спектры изоформ ферментов гемолимфы нимф подёнок при воздействии на них промышленных стоков. // Гидробиол. журн. 1985. Т. 21. №5. С. 84-89.

64. Нахшина Е.П. Тяжёлые металлы в системе «вода-донные отложения» водоёмов (обзор). // Гидробиол. журн. 1985. Т. 21. №2. С. 8090.

65. Немова Н.Н. Внутриклеточные протеиназы в эколого-биохимических адаптациях у рыб. // Автореф. дисс. . д-ра биол. наук. М., 1992. 43 с.

66. Немова Н.Н. Внутриклеточные протеолитические ферменты у рыб. Петрозаводск: Карел, науч. центр РАН, 1996. 104 с.

67. Немова Н.Н, Крупнова М.Ю., Кяйвяряйнен Е.И., Волков И.В. Влияние токсических факторов на протеолитическую активность в икре и ранних личинках рыб. // Изв. АН. Сер. биол. 1994. Т. 4. С. 528-534.

68. Немова Н.Н., Кяйвяряйнен Е.И., Крупнова М.Ю. Влияние промышленных стоков на активность внутримышечных кальций-зависимых протеиназ ряда пресноводных рыб. // Вопр. ихтиол. 1996. Т. 26. №3. С. 420-422.

69. Немова Н.Н., Сидоров B.C. Влияние некоторых токсических факторов на лизосомальные протеиназы пресноводных рыб. // Гидробиол. журн. 1990. Т. 26. №4. С. 69-73.

70. Неорганическая биохимия: В 2-х томах / Пер. с англ. М.: Мир, 1978. Т. 1.711 с.

71. Оксиюк О. П., Жукинский В. Н. Комплексная экологическая классификация качества поверхностных вод суши. // Гидробиол. журн. 1993. Т. 29. №4. С. 62-76.

72. Оно С. Генетические механизмы прогрессивной эволюции. М.: Наука, 1973. 227 с.

73. Определитель пресноводных беспозвоночных Европейской части СССР. Д.: Гидрометеоиздат, 1977. 512 с.

74. Основы общей промышленной токсикологии (руководство) / Под ред. Н.А. Толоконцева, В.А. Филова. JL: Медицина. Ленинградское отделение, 1976. 303 с.

75. Панасенко О.О., Ким М.В., Гусев Н.Б. Структура и свойства малых белков теплового шока. // Успехи биологической химии. 2003. Т. 43. №1. С. 59-98.

76. Панин Л.Е., Маянская Н.Н. Лизосомы: роль в адаптации и восстановлении. Новосибирск: Наука, Сибирское отделение, 1987. 198 с.

77. Пахомова В.М. Основные положения современной теории стресса и неспецифический адаптационный синдром у растений // Цитология. 1995. Т. 37. №1/2. С. 66-91.

78. Покровский А.А., Коровников К.А. К вопросу о функциональном значении изоферментов дегидрогеназ. // В кн.: Проблемы медицинской химии. М.: Медицина, 1973. С. 5-36.

79. Покровский А.А., Крыстев Л.П. Печень, лизосомы и питание. София: Изд-во Болгарской академии наук, 1977. 207 с.

80. Покровский А.А., Тутельян В.А. Лизосомы. М.: Наука, 1976. 382 с.

81. Полевой В.В., Саламатова Т.С. Живое состояние клетки и биология старения. СПб.: Изд-во С.-Петерб. Ун-та, 2004. 136 с.

82. Попов А.П., Коничев А.С., Цветков И.Л. Влияние токсичныхсоединений техногенного происхождения на активность и множественные349формы кислой ДНКазы живородки речной (Viviparus viviparus L.). // Прикл. биохим. и микробиол. 2003. Т. 39. №5. С. 518-523.

83. Попов А.П., Цветков И.Л., Коничев А.С. Биохимическое тестирование токсического загрязнения вод: планирование эксперимента и выбор тест-объекта. // Вестник МГОУ. Серия Естественные науки. 2006. № 4. С. 87-92.

84. Попов А.П., Цветков И. Л., Коничев А.С. Разделение и характеристика дезоксирибонуклеаз гепатопанкреаса живородки речной в норме и при модельной интоксикации in vivo. II Биохимия. 20086. Т. 73. Вып. 8. С. 1161-1167.

85. Райдер К., Тейлор К. Изоферменты. / Пер. с англ. М.: Мир, 1983.106 с.

86. Рублёва И.М., Ромадина Е.С. Методы очистки и анализ сточных вод. Ярославль: Изд-воЯрГУ, 1984. 84 с.

87. Руоколайнен Т.Р., Высоцкая Р.У. Активность лизосомальных ферментов в печени окуня из разных зон Онежского озера. // В кн.: Сравнительная биохимия водных животных. Петрозаводск: Изд-во Карел, науч. центра РАН, 1983. С. 85-95.

88. Руоколайнен Т.Р., Высоцкая Р.У., Крупнова М.Ю. Влияние абиетиновой кислоты на изолированные лизосомы рыб. // В кн.: Экспериментальные исследования влияния загрязнений на водные организмы. Аппатиты, 1979. С. 122-127.

89. Руоколайнен Т.Р., Высоцкая Р.У. Лизосомальные ферменты различных органов радужной форели при хроническом токсикозе, вызванном смоляными кислотами // Тез. докл. II Всесоюзного симп. «Структура и функции лизосом». Новосибирск, 1980. С. 157-158.

90. Руоколайнен Т.Р., Высоцкая Р.У., Сидоров B.C. Влияние смоляных кислот на молекулярную гетерогенность кислой фосфатазы печени форели. // В кн.: Теоретические вопросы биотестирования. Волгоград, 1983. С. 60-64.

91. Руоколайнен Т.Р., Сидоров B.C. Модификация спектра молекулярных форм кислой фосфатазы печени рыб при интоксикации смоляными кислотами. // В кн.: Методы ихтиотоксикологических исследований. Л.: Наука. Ленинградское отделение, 1987. С. 114-116.

92. Рязанов Е.М. Действие противоопухолевых препаратов на лизосомальный аппарат нормальных и опухолевых клеток. // Автореф. дисс. . канд. наук. Л., 1978. 29 с.

93. Селье Г. Неспецифическая резистентность. // Физиологический журнал СССР. 1961. № 3. С. 3-15.

94. Селье Г. На уровне целого организма. М.: Наука, 1972. 121 с.

95. Селье Г. Концепция стресса как мы ее представляем в 1976 г. // В кн.: Новое о гормонах и механизме их действия. Киев: Наукова думха, 1977. С. 27-51.

96. Селье Г. Стресс без дистресса. М.: Прогресс, 1979. 122 с.

97. Сёмин В.А., Иголкина Е.Д. Энзимоиндикация загрязнения водных экосистем. // В кн.: Проблемы экологического мониторинга и моделирования экосистем. Л.: Гидрометеоизат, 1983. Т. 6. С. 137-145.

98. Сергиевский С.О. Полиморфизм как универсальная адаптивная стратегия популяций. // Вопросы теории адаптации. Л.: Зоол. Ин-т АН СССР. 1987. С. 41-58.

99. Сидоров B.C. Возможная роль лизосом и пероксисом в механизмах реализации патологического воздействия. // Тезисы докл. научн. конф. биол. Карелии, поев. 250-лет. АН СССР. Петрозаводск, 1974. С. 87-88.

100. Сидоров B.C., Высоцкая Р.У. Природоохранительные аспекты экологической биохимии рыб. // В кн.: Природные ресурсы Карелии, их использование и охрана. Петрозаводск: Карел, филиал АН СССР, 1988. С.132-144.

101. Сидоров B.C. Значение биохимического изучения нормы ипатологии органелл для водной токсикологии. // В кн.: Теоретическиепроблемы водной токсикологии. М.: Наука, 1983. С. 110-120.

102. Сидоров B.C. Эволюционные и экологические аспекты биохимиирыб. Автореф. дисс. . д-ра биол. наук. М., 1986. 56 с.

103. Современные методы в биохимии / Под ред. В.Н. Ореховича. М.: Медицина, 1968. 372 с.

104. Спиро Т.Г. Неорганическая биохимия / Под ред. Эпхгорна Г.М. М.:

105. Мир, 1978. Т. 1. С. 633-644; 656.

106. Таиров М.Т. Рыбоводство и рыболовство. Алма-Ата: Кайнар, 1985.342 с.

107. Тимофеева А.И. Влияние сублетальных концентраций CuS04 на показатели роста радужной форели. // С. науч. трудов ГосНИОРХ. СПб., 2000. Вып. 326. С. 257-265.

108. Тимофеев-Ресовский Н.В., Воронцов Н.Н., Яблоков А.В. Краткий очерк теории эволюции. М. Наука, 1977. 297 с.

109. Тодоров И.Н., Тодоров Т.Н. Стресс, старение и их биохимическая коррекция. М.: Наука, 2003. 479 с.

110. Токин И.Б., Зензеров B.C. К проблеме изучения механизма действия загрязнителей на клеточном и субклеточном уровнях. // В кн.: Проблема изучения действия загрязнителей. Аппатиты, 1977. С. 22-43.

111. Финогенова Н.П., Алимов А.Ф. Оценка степени загрязнения вод по составу донных животных. // В кн.: Методы биологического анализа пресных вод. Л.: Изд-во Зоол. ин-та АН СССР, 1976. С. 95-106.

112. Флеров Б.А. Биотестирование: терминология, задачи, перспективы. // В кн.: Теоретические вопросы биотестирования. Волгоград, 1983. С. 13-20.

113. Флеров Б.А. Экспериментальные исследования фенольного отравления рыб. // В кн.: Влияние фенола на гидробионтов. Л.: Изд-во ЛГУ, 1973. С. 5-18.

114. Хейсин Е.М. Краткий определитель пресноводной фауны. М.: Учпедгиз РСФСР, 1962. 148 с.

115. Хоружая Т.А. Перспективы использования биохимических тест-функций в биомониторинге пресных вод. // Гидробил. журн. 1989. Т. 25. №5. С. 47-52.

116. Хочачка П., Сомеро Д. Стратегия биохимической адаптации. / Пер. с англ. М.: Мир, 1977. 398 с.

117. Цветкова М.А., Цветков И.Л., Коничев А.С. Содержание гликоалкалоидов и состав белков в листьях картофеля при повреждении колорадским жуком. // С.-х. биология. Серия: Биология растений. 2004. №1. С. 97-104.

118. Цветков И.Л., Зарубин С.Л., Урванцева Г.А. Кислая фосфатаза разных внутривидовых форм катушки роговой как индикатор загрязнения вод тяжелыми металлами. / Деп. в ВИНИТИ. 19956. №709-В95 от 15.03.95. 11 с.

119. Цветков И.Л., Зарубин С.Л., Урванцева Г.А., Коничев А.С., Филиппович Ю.Б. Кислая фосфатаза гидробионтов как фермент-индикатор биохимической адаптации к воздействию токсических веществ. //Изв. АН. Сер. биол. 1997. №5. С. 539-545.

120. Цветков И.Л. Изменчивость активности комплекса кислых фосфатаз моллюсков в адаптации организма к среде обитания. // Науч. труды МПГУ им. В.И. Ленина. Серия: естественные науки. М.: Прометей, 1997. С. 7172.

121. Цветков И.Л., Коничев А.С. Стресс-индуцированная динамика сорбита и активности сопутствующих ферментов в пищеварительной железе живородки речной. // Биохимия. 2009. Т. 74. Вып. 11. С. 1548-1554.

122. Цветков И.Л., Коничев А.С. Экологическая биохимия гидробионтов. М.: Изд-во МГОУ, 2006. 104 с.

123. Цветков И.Л., Попов А.П., Коничев А.С. Комплекс кислых фосфатаз живородки речной в норме и при интоксикации ионами кадмия. // Биохимия. 2003. Т. 68. Вып. 12. С. 1648-1656.

124. Цветков И.Л., Попов А.П., Коничев А.С. Способ определения токсического загрязнения сточных и природных пресных вод. / Патент РФ №2308719. // Бюлл. № 29 от 20.10.2007.

125. Цветков И.Л., Попов А.П., Коничев А.С., Урванцева Г.А. Влияние хлорида кадмия на активность фосфатазного комплекса ферментов. // Науч. труды МПГУ. Серия: Естественные науки. М.: Прометей, 1998. С.242-243.

126. Цветков И.Л., Цветкова М.А., Зарубин С.Л., Семерной В.П., Коничев А.С. Оценка качества сточных и природных вод с помощью биохимического показателя — активности кислой фосфатазы пресноводных моллюсков. // Водн. рес. 2006. Т. 33. №1. С. 62-70.

127. Цветков И.Л., Зарубин СЛ., Урванцева Г.А., Коничев А.С., Филиппович Ю.Б. Кислая фосфатаза гидробионтов как фермент-индикатор биохимической адаптации к воздействию токсических веществ. //Изв. АН. Сер. биол. 1997. №5. С. 539-545.

128. Шапиро А.З., Бобкова А.Н. Влияние ядов противообрастающих покрытий на ферменты углеводного обмена некоторых организмов обрастания. // Гидробиол. журн. 1986. Т. 22. №6. С. 79-82.

129. Шапиро А.З., Бобкова А.Н. Изменение активности ферментов гликолиза в тканях балянусов под влиянием некоторых ядов. // Биология моря. Киев, 1979. Вып. 48. С. 75-80.

130. Шилов И.А. Стресс как экологическое явление. // Зоол. журн. 1984. Т. LXIII. №6. С. 805-812.

131. Шнырева М.Г., Цунрун В.Л., Стемалыцук В.Я., Егоров С.Н. Анализ четвертичной структуры секретируемой репрессибельной кислой фосфатазы "дрожжей Saccharomyces cerevisia. II Биохимия. 1992. Т. 57. Вып. 7. С. 1100-1108.

132. Юровицкий Ю.Г., Сидоров B.C. Эколого-биохимический мониторинг и эколого-биохимическое тестирование в районах экологического неблагополучия. //Изв. АН. Сер. биол. 1993. №1. С. 74-82.

133. Allen S.L., Adams J., Rushford C.L. Interspecies relationships in the Paramecium aurelia complez: acid phosphatase variation. // J. Protozool. 1983. Vol. 30.Nol.P. 143-147.

134. Allen S.L., Nerad T.A., Rushford C.L. Comparison of the esterases and acid phosphatases in Paramecium, multimicronucleatum, syngens 1—5, P. jenningsi, P. caudatum, and the P. aurelia complex. // J. Protozool. 1983 a. Vol. 30.Nol.P. 148-154.

135. Allen S.L., Nerad T.A., Rushford C.L. Intraspecies variability in the Paramecium aurelia complex. // J. Protozool. 1983b. V. 30. Nol. P. 131-143.

136. Alnemri E.S., Livingston D.J., Nicholson D.W., Salvesen G., Thornberry N.A., Wong W.W., Yuan J.Y. Human ICE/Ced-3 protease nomenclature. // Cell. 1996. Vol. 87. No2. P. 171.

137. Alves-Araujo C., Pacheco A., Almeida M.J., Spencer-Martins I., Leao C., Sousa M.J. Sugar utilization patterns and respiro-fermentative metabolism in the baker's yeast Torulaspora delbrueckii // Microbiology. 2007. Vol. 153. Iss. 3. P. 898-904.

138. Amaral A.F., Anselmo H., da Cunha R.M., Rodrigues A.S. The connective tissue index of Helix aspersa as a metal biomarker. // Biometals. 2004. Vol. 17. No6. P. 625-629.

139. Amiard J.C., Amiard-Triquet C., Barka S., Pellerin J., Rainbow P.S. Metallothioneins in aquatic invertebrates: Their role in metal detoxification and their use as biomarkers. // Aquat. Toxicol. 2006. Vol. 76. No2. P. 160-202.

140. Au D.W. The application of histo-cytopathological biomarkers in marine pollution monitoring: a review. // Mar. Pollut. Bull. 2004. Vol.48. No 9-10. P. 817-834.

141. Au D.W., Wu R.S.S. A field study on EROD activity and quantitative hepatocytological changes in an immature demersal fish. // Environ. Pollut. 2001. Vol. 115.Nol.P. 23-32.

142. Au D.W., Wu R.S.S., Zhou B.S., Lam P.K.S. Relationship between ultrastructural changes and EROD activities in liver of fish exposed to benzo(a)pyrene. // Environ. Pollut. 1999. Vol. 104. N08. P. 235-247.

143. Avila J.L. The influence of the type of sulphate bond and degree of sulphation of glycosaminoglicans on their interaction with lysosomal enzimes // Biochem. J. 1989. Vol. 171. Nol9. P. 9789-9792.

144. Bard S.M. Multixenobiotic resistance as a cellular defense mechanism in aquatic organisms. // Aquat. Toxicol. 2000. Vol. 48. No4. P. 357-389.

145. Baron D.N. Isoenzymes and their clinical application. // Ann. R. Coll. Surg. Engl. 1965. Vol. 37. No5. P. 263-271.

146. Beattie J.H., Black D.J., Wood A.M., Trayhurn P. Coldinduced expression of the metallothionein-1 gene in brown adipose tissue of rats. // Am. J. Phys." 1996. Vol. 270. P. R971-R977.

147. Bebianno M.J., Cravo A., Miguel C., Morais S., Metallothionein concentrations in a population of Patella aspera: variation with size. // Sci. Total Environ. 2003. Vol. 301. Nol-3. P. 151-161.

148. Bebianno M.J., Geret F., Hoarau P., Serafim M.A., Coelho M.R., Gnassia-Barelli M., Romeo M. Biomarkers in Ruditapes decussatus: a potential bioindicator species. // Biomarkers. 2004. Vol. 9. No4-5. P. 305-330.

149. Bennett V.V., Lee R. Modeling seasonal changes in intracellular freeze-tolerance of fat body cells of the gall fly Eurosta solidaginis (Diptera, Tephritidae). //J. Exp. Biol. 1997. Vol. 200. Part 1. P. 185-192.

150. Bessey O.A., Lowry O.H., Broock M.J. A method for the rapid determination of alkaline phosphatase with five cubic millimeters of serum. // J. Biol. Chem. 1946. Vol. 164, No4. P. 321-329.

151. Binelli A, Ricciardi F, Riva C, Provini A. Integrated use of biomarkers and bioaccumulation data in Zebra mussel (Dreissena polymorpha) for site-specific quality assessment. // Biomarkers. 2006. Vol. 11. No5. P. 428-448.

152. Blaise C., Gagne F., Pellerin J., Hansen P.D., Trottier S. Molluscan shellfish biomarker study of the Quebec, Canada, Saguenay Fjord with the soft-shell clam, Mya arenaria. // Environ. Toxicol. 2002. Vol. 17. No3. P. 170-186.

153. Block W. Water or ice? — the challenge for invertebrate cold survival // Sci. Prog. 2003. Vol. 86. Part 1-2. P. 77-101.

154. Bocchetti R, Regoli F. Seasonal variability of oxidative biomarkers, lysosomal parameters, metallothioneins and peroxisomal enzymes in the Mediterranean mussel Mytilus galloprovincialis from Adriatic Sea. // Chemosphere. 2006. Vol. 65. No6. P. 913-921.

155. Boyd J.B. Characterization of acid deoxyribonuclease from the larval salivary glad of Drosophila Pujdei. II Biochim. Biophys. Acta. 1970. Vol. 209. No2. P. 349-356.

156. Bonacci S., Browne M.A., Dissanayake A., Hagger J.A., Corsi I., Focardi

157. S., Galloway T.S. Esterase activities in the bivalve mollusc Adamussium361colbecki as a biomarker for pollution monitoring in the Antarctic marine environment. // Mar. Pollut. Bull. 2004. Vol. 49. No5-6. P. 445-455.

158. Borner C., Monney L. Apoptosis without caspases: an inefficient molecular guillotine? // Cell Death and Differentiation. 1999. Vol. 6. P. 497507.

159. Bozzola J.J., Russell L.D. Electron Microscopy. London: Jones and Bartlett Publishers, 1992. 256 p.

160. Bradford M. Rapid and sensitive method for quantitation the principle of protein-dye binding/ // Anal. Biochem. 1976. Vol. 72. No2. P. 248-254.

161. Braunbeck Т., Storch V., Bresch H. Species-specific reaction of liver ultrastructure in zebrafish {Brachydanio rerio) and trout (Salmo gairdneri) after prolonged exposure to 4-chloroaniline. // Arch. Environ. Contam. Toxicol. 1990. Vol. 19. P. 405-418.

162. Broeg K., Kohler A., Westernhagen H.V. Disorder and recovery of environmental health monitored by means of lysosomal stability in liver of European flounder Platichthys flesus L. // Mar. Environ. Res. 2002. Vol. 54. P. 569-573.

163. Brown H.D., Patel A.B., Chattopadhyay S.K., Pennington S.N. Support matrices for apyrase. // Enzymologia. 1968. Vol. 35. No4. P. 233-238.

164. Brown R.J., Galloway T.S., Lowe D., Browne M.A., Dissanayake A., Jones M.B., Depledge M.H. Differential sensitivity of three marine invertebrates to copper assessed using multiple biomarkers. // Aquat. Toxicol. 2004. Vol. 66. No3. P. 267-278.

165. Buckland-Nicks J., Tompkins G. Paraspermatogenesis in Ceratostoma foliatum (Neogastropoda): confirmation of programmed nuclear death. // J. Exp.

166. Zoolog. А Сотр. Exp. Biol. 2005. Vol. 303. No9. P. 723-741.

167. Cajaraville M.P., Orbea A., Marigomez I., Cancio I. Peroxisomeproliferation in the digestive epithelium of mussels exposed to the wateraccommodated fraction of three oils. // Сотр. Biochem. Physiol. С Toxicol.

168. Pharmacol. 1997. Vol. 117. No4. P. 233-242.

169. Cajaraville M.P., Uranga J.A., Angulo E. Light microscopic catalase histochemistry in mussel digestive gland tissue. // Histol. Histopathol. 1993. Vol. 8. P. 537-546.

170. Calderon S., Holmstrup M., Westh P., Overgaard J. Dual roles of glucose in the freeze-tolerant earthworm Dendrobaena octaedra: cryoprotection and fuel for metabolism. // J. Exp. Biol. 2009. Vol. 212. Part 6. P. 859-866.

171. Cashikar A.G., Kumaresan R., Rao N.M. Biochemical characterization and subcellular localization of the red kidney bean purple acid phosphatase. // Plant Physiol. 1997. Vol. 114. No3. P. 907-915.

172. Chaimovich H., Nome F. The acid phosphatase from bovine cerebrum: purification and characterization. // Arch. Biochem. Biophys. 1970. Vol. 139. Nol.P. 9-13.

173. Cheeseman M.T. Characterization of apyrase activity from the salivary glands of the cat flea Ctenocephalides felis. // Insect. Biochem. Mol. Biol. 1998. Vol. 28. Nol2. P. 1025-1030.

174. Cheung V.V., Wedderburn R.J., Depledge M.H. Molluscan lysosomal responses as a diagnostic tool for the detection of a pollution gradient in Tolo Harbour, Hong Kong. // Mar. Environ. Res. 1998. Vol. 46. No2. P. 237-241.

175. Chinnaiyan A.M., Dixit V.M. The cell death machine. // Curr. Biol. 1996. Vol. 6. No5. P. 555-562.

176. Churchill T.A., Storey K.B. Freezing survival of the garter snake Thamnoplus sirtalisparietalis. II Can. J. Zool. 1992. Vol. 70. Nol. P. 99-105.

177. Churchill T.A., Storey K.B. Metabolic responses to freezing and anoxia by the periwinkle Littorina littorea. // J. Therm. Biol. 1996. Vol. 21. Nol. P. 5763.

178. Ciocan C.M., Rotchell J.M. Cadmium induction of metallothionein isoforms in juvenile and adult mussel (Mytilus edulis). // Environ. Sci. Technol. 2004. Vol. 38. No4. P. 1073-1078.

179. Clark M.S., Worland M.R. How insects survive the cold: molecular mechanisms-a review. // J. Сотр. Physiol. B. 2008. Vol. 178. No8. P. 917-933.

180. Collins C.A., Wells W.W. Identification of phosphatidylinositolkinase in rat liver lysosomal membranes // J. Biol. Chem. 1983. Vol. 288. No4. P. 827831.

181. Collins C.A., Wells W.W. Characterisation of endogenous protein phosphorilatin in isolated rat liver lysosomes // J. Biol. Chem. 1982. Vol. 257. No2. P. 2130-2143.

182. Contardo-Jara V., Krueger A., Exner H.J., Wiegand C. Biotransformation and antioxidant enzymes of Dreissena polymorpha for detection of site impact in watercourses of Berlin. // J. Environ. Monit. 2009. Vol. 11. No6. P. 1147— 1156.

183. Cook G. Lysosomes and adaptation // Lysosomes in Biology and Patology / In ed. J. Dungle, H. Fell. Amsterdam, North Holland, 1973. Vol. 111. P. 7389.

184. Cziko P.A., Evans C.W., Cheng C.H., De Vries A.L. Freezing resistance of antifreeze-deficient larval Antarctic fish. // J. Exp. Biol. 2006. Vol. 209. Part 3. P. 407-420.

185. Dallinger R., Chabicovsky M., Berger B. Isoform-specific quantification of metallothionein in the terrestrial gastropod Helix pomatia. I. Molecular, biochemical, and methodical background. // Environ. Toxicol. Chem. 2004. Vol. 23. No4. P. 890-901.

186. Damiens G, Gnassia-Barelli M, Loques F, Romeo M, Salbert V. Integrated biomarker response index as a useful tool for environmental assessment evaluated using transplanted mussels. // Chemosphere. 2007. Vol. 66. No3. P. 574-583.

187. Damiens G., His E., Gnassia-Barelli M., Quiniou F., Romeo M. Evaluation of biomarkers in oyster larvae in natural and polluted conditions. // Сотр. Biochem. Physiol. С Toxicol. Pharmacol. 2004. Vol. 138. No2. P. 121128.

188. Davis B.J. Disc electrophoresis. II. Method and application to human serum proteins. //Ann. N.Y. Acad. Sci. 1964. Vol. 121. No3. P. 404-408.

189. Davis J.C., Averill B.A. Evidence for a spin-coupled binuclear iron unit at the active site of the purple acid phosphatase from beef spleen. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA Biol. Sci. 1982. Vol. 79. Nol5. P. 4623-4627.

190. De Duve C. Lysosomal revisited // Eur. J. Biochem. 1983. Vol. 137. No4. P. 391-397.

191. De Jonceere J.F., Dierickx PJ. Determination of acid phosphatase and leucine amino peptidase activity as an identification method for pathogenic Naegleria fowleri. II Trans. Roy. Soc. Trop. Med. and Hyd. 1982. Vol. 76. No6. P. 773-775.

192. Desoize В., Veiler V., Pourny С., Сотое L., Jardillier J.C. Isoenzymes of alkaline and acid phosphatases as bones metastasis marker in breast cancer patients. // Anticancer. Res. 1989. Vol. 9. No4. P. 1105-1109.

193. De Wolf M., Hilderson H.J., Lagrou A., Dierich W. Phospholipase A from bovine thireoid lisosomes // Arch. Intern. Physiol. Biochem. 1977. Vol. 35. No5. P. 969-971.

194. Dolcetti L., Zuanna L.D., Venier P. DNA adducts in mussels and fish exposed to bulky genotoxic compounds. // Mar. Environ. Res. 2002. Vol. 54. No3-5. P. 481-486.

195. Domenech C.E. Lisa T.A., Salmano M.A., Garrido M.N. Pseudomonas aeruginosa acid phosphatase. Activation by divalent cations and inhibition by aluminium ion. // FEBS Lett. 1992. Vol. 299. Nol. P. 96-98.

196. Dondero F., Piacentini L., Banni M., Rebelo M., Burlando В., Viarengo A. Quantitative PCR analysis of two molluscan metallothionein genes unveils differential expression and regulation. // Gene. 2005. Vol. 345. No2. P. 259270.

197. Driedzic W.R., Ewart K.V. Control of glycerol production by rainbow smelt (Osmerus mordax) to provide freeze resistance and allow foraging at low winter temperatures // Сотр. Biochem. Physiol. B. Biochem. Mol. Biol. 2004. V. 139. No3. P. 347-357.

198. Ellis R.E., Yuan J., Horvitz H.R. Mechanisms and functions of cell death. // Ann. Rev. Cell. Biol. 1991. Vol. 7. P. 663-698.

199. English Т.Е., Storey K.B. Freezing and anoxia stresses induce expressionof metallothionein in the foot muscle and hepatopancreas of the marine369gastropod Littorina littorea 11 J. Exp. Biol. 2003. Vol. 206. Part. 14. P. 2517— 2524.

200. Ericson G., Skarphedinsdottir H., Zuanna L.D., Svavarsson J. DNA adducts as indicators of genotoxic exposure in indigenous and transplanted mussels, Mytilus edulis L. from Icelandic coastal sites. // Mutat. Res. 2002. Vol. 516. No 1-2. P. 91-99.

201. Francis J.M., Moss D.W., Collinet E., Calam D.H., Bullock D.J. A reference preparation of human prostatic acid phosphatase: purification, characterisation and field trials. // Ann. Clin. Biochem. 1992. Vol. 29. No2. P. 176-183.

202. Frenette G., Thabet M., Sullivan R. Polyol pathway in human epididymis and semen // J. Androl. 2006. Vol. 27. No 2. P. 233-239.

203. Galka M., Dziembor-Gruszlciewicz E., Kos S., Ostrowski W. Properties of low-moleculair-weight acid phosphatases isolated from cytosol and chromatin of rat liver. // Acta Biochem. Pol. 1980. Vol. 27. No3-4. P. 281-293.

204. Galloway T.S., Brown R.J., Browne M.A., Dissanayake A., Lowe D., Jones M.B., Depledge M.H. A multibiomarker approach to environmental assessment. //Environ. Sci. Technol. 2004. Vol. 38. No6. P. 1723-1731.

205. Geffard A., Amiard J.C., Amiard-Triquet C. Use of metallothionein in gills from oysters (Crassostrea gigas) as a biomarker: seasonal and intersite fluctuations. //Biomarkers. 2002. Vol. 7. No2. P. 123-137.

206. Gellatly K.S., Moorhead G., Duff S., Lefebvre D.D., Plaxton W.C. Purification and Characterization of a Potato Tuber Acid Phosphatase Having Significant Phosphotyrosine Phosphatase Activity. // Plant. Physiol. 1994. Vol. IO6.N0I.P. 223-232.

207. Geret F., Cosson R.P. Induction of specific isoforms of metallothionein in mussel tissues after exposure to cadmium or mercury. // Arch. Environ. Contam. Toxicol. 2002. Vol. 42. Nol. P. 36-42.

208. Gibson G., Lake B. Peroxisomes: Biology and Importance in Toxicology and Medicine. London: Taylor & Francis, 1993. 238 p.

209. Goldberg A.F., Takakura K., Rosenthal R.L. Electrophoretic separation of serum acid phosphatase isoenzymes in Gaucher's disease, prostatic carcinoma and multiple myeloma. //Nature. 1966. Vol. 211. No5044. P. 41-43.

210. Gorbi S., Regoli F. Total oxyradical scavenging capacity as an index of susceptibility to oxidative stress in marine organisms. // Comments Toxicol. 2003. Vol. 9. P. 303-322.

211. Ghosh R., Sen P.C., Biswas S. Mimosa pudica apyrase requires polysaccharide and Ca for the activity. // Mol. Cell. Biochem. 1998. Vol. 187. No 1-2. P. 47-55.

212. Gravato C., Oliveira M., Santos M.A. Oxidative stress and genotoxic responses to resin acids in Mediterranean mussels. // Ecotoxicol. Environ. Saf. 2005. Vol. 61. No2. P. 221-229.

213. Hamer В., Hamer D.P., Muller W.E., Batel R. Stress-70 proteins in marine mussel Mytilus galloprovincialis as biomarkers of environmental pollution: a field study. // Environ. Int. 2004. Vol. 30. No7. P. 873-882.

214. Handa M., Guidotti G. Purification and cloning of a soluble ATP-diphosphohydrolase (apyrase) from potato tubers {Solarium tuberosum). II Biochem. Biophys. Res. Commun. 1996. Vol. 218. No3. P. 916-923.

215. Heinonen J.K., Lahti R.A. A new and convenient colorimetric determination to the assay of inorganic pyrophosphatase. // Anal. Biochem. 1981. Vol. 113. No2. P. 313-317.

216. Heinrikson R.L. The acid phosphatase from bovine liver // J. Biol. Chem. 1969. Vol. 244. No3. P. 299-310.

217. Hermes-Lima M., Storey K.B. Antioxidant defenses and metabolic depression in a pulmonate land snail. // Am. J. Physiol. 1995. Vol. 268. No6. Part 2. P. R1386-R1393.

218. Hofmann G., Somero G. Evidence for protein damage at environmental temperatures: seasonal changes in levels of ubiquitin conjugates and hsp70 in the intertidal mussel Mytilus trossulus. II J. Exp. Biol. 1995. Vol. 198. Part. 7. P. 1509-1518.

219. Holmstrup M., Costanzo J.P., Lee Jr.R.E. Crioprotective and osmotic responses to cold acclimation and freezing in freeze-tolerant earthworms. // J. Сотр. Physiol. 1999. Vol. 169B. No2. P. 207-214.

220. Holmstrup M., S0rensen L.I., Bindesb0l A.M., Hedlund K. Cold acclimation and lipid composition in the earthworm Dendrobaena octaedra. 11

221. Сотр. Biochem. Physiol. A Mol. Integr. Physiol. 2007. Vol. 147. No4. P. 911919.

222. Jing G., Xie L.-P., Li L.Y., Zhang R.-Q. Purification and partial characterization of two acid phosphatase forms from pearl oyster {Pinctada fucatd). II Сотр. Biochem. and Physiol. 1996. Vol. 32. No6. P. 10134-10146.

223. Kelly B.M., Waheed A., Van Etten R., Chang P.L. Heterogeneity of lysosomes in human fibroblasts. // Mol. Cell. Biochem. 1989. Vol. 87. No2. P. 171-183.

224. Keough D.T., Beck J.L., Jersey J., Zerner B. Iron-containing acid phosphatases: interaction of phosphate with the enzyme from allantoic fluid. // Biochem. and Biophys. Res. Commun. 1982. Vol. 108. No4. P. 1643-1648.

225. Kerr J.F.R. Shrinkage necrosis: a distinct mode of cellular death. // J. Pathol. 1971. Vol. 105. Nol. P. 13-20.

226. Kim E.Y., Hahn M.E. cDNA cloning and characterization of an aryl hydrocarbon receptor from the harbor seal (Phoca vitulina): a biomarker of dioxin susceptibility? //Aquat. Toxicol. 2002. Vol. 58. Nol-2. P. 57-73.

227. Kohler A., Wahl E., Soffker K. Functional and Morphological changes of lysosomes as prognostic biomarkers of toxic liver injury in a marine flatfishсPlatichthys flesus (L.)). // Environ. Toxicol. Chem. 2002. Vol.21. Noll. P. 2434-2444.

228. Komoszynski M., Wojtczak A. Apyrases (ATP diphosphohydrolases, EC 3.6.1.5): function and relationship to ATPases. // Biochim. Biophys. Acta. 1996. Vol. 1310. No2. P. 233-241.

229. Krishnakumar P.K., Casillas E., Varanasi U. Cytochemical responses in the digestive tissue of Mytilus edulis complex exposed to microencapsulated PAHs or PCBs. // Сотр. Biochem. Physiol. С Toxicol. Pharmacol. 1997. Vol. II8.N0I.P. 11-18.

230. Kroemer G., Zamzami N., Susin S. Mitochondrial control of apoptosis. // Immunol. Today. 1997. Vol. 18. No 1. P. 44-51.

231. Kunitz M. Cristalline soybean tripsin inhibitor. General properties. // J. Gen. Physiol. 1947. Vol. 30. P. 318-326.

232. C.J., Jam L.T., Lam K.W. Acid phosphatase isoenzymes in human leukocytes in normal and pathologic conditions. // J. Histochem. Cytochem. 1970. Vol. 18. No7. P. 437-481.

233. Mans B.J., Gaspar A.R., Louw A.I., Neitz A.W. Apyrase activity and platelet aggregation inhibitors in the tick Ornithodoros savignyi (Acari: Argasidae). 11 Exp. Appl. Acarol. 1998. Vol. 22. No6. P. 353-366.

234. Marigomez I., Orbea A., Olabarrieta I., Etxeberria M., Cajaraville M.P.

235. Structural changes in the digestive lysosomal system of sentinel mussels asbiomarkers of environmental stress in musselwatch programmes. // Сотр. Biochem. Physiol. С Toxicol. Pharmacol. 1996. Vol. 113. No3. P. 291-297.

236. Marshall CB, Fletcher GL, Davies PL. Hyperactive antifreeze protein in a fish. //Nature. 2004. Vol. 429. No6988. P. 153.

237. Martin-Diaz M.L., Blasco J., Sales D., Delvalls T.A. Biomarkers study for sediment quality assessment in spanish ports using the crab Carcinus maenas and the clam Ruditapesphilippinarum. II Arch. Environ. Contam. Toxicol. 2007. Vol. 53. Nol. P. 66-76.

238. Matsumoto Т., Sugiyama Y., Deguchi К., Okano K. An ADPase-like substance in placental extracts. // Asia Oceania J. Obstet. Gynaecol. 1990. Vol. 16. No3. P. 267-274.

239. Maunsbach A. Lysosomes and adaptation // Lysosomes in Biology and Patology / In ed. J. Dangle, H.B. Fell. Amsterdam. North Holland, 1966. Vol. 1. P. 115-127.

240. Methoden der Enzymatischen Analyse / Herausgegeben von H.U. (Bergmeyer). Berlin: Academie-Verlag, 1970. Bd 2. P. 1292-1299.

241. Micic M., Bihari N., Jaksic Z., Muller W.E., Batel R. DNA damage and apoptosis in the mussel Mytilus galloprovincialis. // Mar. Environ. Res. 2002. Vol. 53. No3. P. 243-262.

242. Minn A.J., Velez P., Schendel S.L., Liang H., Muchmore S.W., Fesik S.W., Fill M., Thompson C.B. Bcl-XL forms an ion channel in synthetic lipid membranes. //Nature. 1997. Vol. 385. No6614. P. 353-357.

243. Mitchelmore C.L., Birmelin C., Livingstone D.R., Chipman J.K. Detection of DNA strand breaks in isolated mussel (Mytilus edulis L.) digestive gland cells using the "Comet" assay. // Ecotoxicol. Environ. Saf. 1998. Vol. 41. Nol.P. 51-58.

244. Moalem S., Storey K.B., Percy M.E., Peros M.C., Perl D.P. The sweet thing about Type 1 diabetes: a cryoprotective evolutionary adaptation // Med. Hypotheses. 2005. Vol. 65. No 1. P. 8-16.

245. Moody D.E. Peroxisome proliferation: an overview. // In: Moody, D.E. (Ed.), Peroxisome Proliferator: Unique Inducers of Drug-Metabolizing Enzyme. CRC Press, Boca Raton, FL. 1994. P. 1-15.

246. Moore M.N. Biomarkers of contaminant exposure and effect: a way forward in marine environmental toxicology. // Sci. Total Environ. 1993 (Suppl.)P. 1335-1343.

247. Moore M.N., Icarus Allen I.J., McVeigh A. Environmental prognostics: An integrated model supporting lysosomal stress responses as predictive biomarkers of animal health status. // Mar. Environ. Res. 2006. Vol. 61. No3. P. 278-304.

248. Moore M.N. Lysosomal cytochemistry in marine environmental monitoring. //Histochem. J. 1990. Vol. 22. No2. P. 187-191.

249. Mortimore G.E., Poso A.R. Lysosomal pathways in hepatic protein degradation: regulatory role of amino acid // Fed. Proc. 1980. Vol.43. No5. P. 1289-1295.

250. Mrsa V., Barbaric S., Ries В., Mildner P. Comparative studies of natural and carbohydratedeplet yeast acid phosphatase. // Biochem. Soc. Trans. 1981. Vol. 9. No2. P. 144-152.

251. Murphy D.J. Freezing resistance in intertidal invertebrates. // Annu. Rev. Physiol. 1983. Vol. 45. P. 289-299.

252. Niyogi S., Biswas S., Sarker S., Datta A.G. Seasonal variation of antioxidant and biotransformation enzymes in barnacle, Balanus balanoides, and their relation with polyaromatic hydrocarbons. // Mar. Environ. Res. 2001b. Vol. 52. Nol.P. 13-26.

253. Nasci C., Da Ros L., Campesan G., Van Vleet E.S., Salizzato M., Sperni L., Pavoni B. Clam transplantation and stressrelated biomarkers as useful tools for assessing water quality in coastal environments.,// Mar. Pollut. Bull. 1999. Vol. 39. P. 255-260.

254. Nicholson S. Cytological and physiological biomarker responses from green mussels, Perna viridis transplanted to contaminated sites in Hong Kong coastal waters. // Mar. Pollut. Bull. 1999a. Vol. 39. P. 261-268.

255. Nicholson S. Cardiac and lysosomal responses to periodic copper in the mussel Perna viridis. // Mar. Pollut. Bull. 1999b. Vol. 38. P. 1157-1162.

256. Nishimoto M., Varanasi U. Benzoa.pyrene metabolism and DNA adduct formation mediated by English sole liver enzymes. // Biochem. Pharmacol. 1985. Vol. 34. No2. P. 263-268.

257. Niyogi S., Biswas S., Sarker S., Datta A.G. Seasonal variation ofantioxidant and biotransformation enzymes in barnacle, Balanus balanoides, andtheir relation with polyaromatic hydrocarbons. I I Mar. Environ. Res. 2001b.1. Vol. 52. Nol. P. 13-26.

258. O'Brien M.M., Schofield P.J., Edwards M.R. Polyol-pathway enzymes ofhuman brain. Partial purification and properties of sorbitol dehydrogenase. //

259. Biochem. J. 1983. Vol. 211. Nol. P. 81-90.

260. Ohkubo I., Kondo Т., Taniguchi N. Purification ofnucleosidediphosphatase of rat liver by metal-chelate affinity chromatography.

261. Biochim. Biophys. Acta. 1980. Vol. 616. Nol. P. 89-93.

262. Olive P.L. DNA precipitation assay: a rapid and simple method fordetecting DNA damage in mammalian cells. // Environ Molec. Mutagen. 1988.1. Vol. 11. No3. P. 487-495.

263. Orbea A., Cajaraville M.P. Field validation of peroxisome proliferation inmussels as biomarker of organic pollution: a transplant experiment. // In: 11th

264. Annual Meeting of SETACEurope, 6-10 May 2001, Madrid, Spain. 2001. P. 73.

265. Orbea A., Marigomez I., Fernandez C., Tarazona J.V., Cancio 'I.,

266. Cajaraville M.P. Structure of peroxisomes and activity of the marker enzymecatalase in digestive epithelial cells in relation to PAH content of mussels fromtwo basque estuaries (Bay of Biscay): seasonal and site-specific variations. //

267. Arch. Environ. Contam. Toxicol. 1999. Vol. 36. P. 158-166.

268. Overgaard J., Tollarova M., Hedlund K., Petersen S.O., Holmstrup M.

269. Seasonal changes in lipid composition and glycogen storage associated with384freeze-tolerance of the earthworm, Dendrobaena octaedra. II J. Сотр. Physiol.

270. B. 2009 Vol. 179. No5. P. 569-577.

271. Pain S., Parrant M. Response of multixenobiotic defense mechanism in

272. Dreissena polymorpha exposed to environmental stress. // Chemosphere. 2003.

273. Vol. 52. No7. P. 1105-1113.

274. Pampanin D.M., Marangon I., Volpato E., Campesan G., Nasci C. Stressbiomarkers and alkali-labile phosphate level in mussels {Mytilusgalloprovincialis) collected in the urban area of Venice (Venice Lagoon, Italy).

275. Environ. Pollut. 2005. Vol. 136. Nol. P. 103-107.

276. Pan K., Wang W.X. The subcellular fate of cadmium and zinc in thescallop Chlamys nobilis during waterborne and dietary metal exposure. // Aquat.

277. Toxicol. 2008. Vol. 90. No4. P. 253-260.

278. Parant M., Pain S. Potential use of multixenobiotic defense mechanism

279. MXDM) in Dreissena polymorpha as a biomarker for the monitoring offreshwater pollution. // Water Res. 2001. Vol. 35. No 15. P. 3743-3748.

280. Pearson J.D., Carleton J.S., Gordon J.L. Metabolism of adeninenucleotides by ectoenzymes of vascular endothelial and smooth-muscle cells inculture. // Biochem. J. 1980. Vol. 190. No2. P. 421-429.

281. Pena-Llopis S., Ferrando M.D., Pena J.B. Impaired glutathione redoxstatus is associated with decreased survival in two organophosphate-poisonedmarine bivalves. // Chemosphere. 2002. Vol. 47. No5. P. 485-497.

282. Petrovic S., Semencic L., Ozretic В., Ozretic M. Seasonal variations of physiological and cellular biomarkers and their use in the biomonitoring of north Adriatic coastal waters (Croatia). // Mar. Pollut. Bull. 2004. Vol. 49. No9-10. P. 713-720.

283. Pfeifer C.J., Cho C.H., Cheema A., Salman D. Reserpine induced gastric ulcers: petection by lysosomal stabilisation due to zine // Eur. J. Pharmacol. 1980. Vol. 61. No4. P. 347-354.

284. Pieber M., Valenzuela M.A., Kettlun A.M., Mancilla M., Aranda E., Collados L., Traverso-Cori A. ATPase-ADPase activities of rat placental tissue. // Сотр. Biochem. Physiol. B. Biochem. Mol. Biol. 1991. Vol. 100. No2. P. 281-285.

285. Pissing J., Johnsen A.H., Sensalaugh G.f. Human red cell acid phosphatase (ACP 1). The amino acid sequence of the two isosimes Bf and Bs encoded by the ACP 1* В allele. // J. Biol. Chem. 1991. Vol.266. No31. P. 20619-20625.

286. Ploch S.A., King L.C., Kohan M.J., Di Giulio R.T. Comparative in vitro and in vivo benzoa.pyrene-DNA adduct formation and its relationship to CYP1A activity in two species of ictalurid catfish. // Toxicol. Appl. Pharmacol. 1998. Vol. 149. Nol. P. 90-98.

287. Press By M.C., Lee J.A. Acid phosphatase activity in Sphagnum species in relation to phosphate nutrition. // New Phytol. 1983. Vol. 93. No4. P. 567573.

288. Pruski A.M., Dixon D.R. Effects of cadmium on nuclear integrity and DNA repair efficiency in the gill cells of Mytilus edulis L. // Aquat. Toxicol. 2002. Vol. 57. No3. P. 127-137.

289. Puff S.M., Plaxton W.C., Lefebre D.D. Phosphate-starvation response in plant cell: de novo sinphesis and degradation of acid phosphatases. // Proc. Nat. Acad. Sci USA. 1991. Vol. 88. No21. P. 9538-9542.

290. Ramadan A.A., Yousif W.B., Ali A.M. The effect of methotrexate on the small intestine of the mouse IV. The Golgi apparatus, phosphatases and esterases // Funct. and Dev. Morfol. 1992. Vol. 2. No2. P. 111-112.

291. Rassel W., Khorama H. Studies on polynucleotides. X. Enzyme degradation. Some properties and mode of action of spleen phosphodiesterase. // J. Biol. Chem. 1961. Vol. 236. No4. P. 1144.

292. Reddy J.K., Mannaerts G.P. Peroxisomal lipid metabolism. // Ann. Rev. Nutr. 1994. Vol. 14. P. 343-370.

293. Regoli F. Total oxyradical scavenging capacity (TOSC) in polluted and translocated mussels: a predictive biomarker of oxidative stress. // Aquat. Toxicol. 2000. Vol. 50. No4. P. 351-361.

294. Regoli F., Winston G.W. Quantification of total oxidant scavenging capacity (TOSC) of antioxidants for peroxynitrite, peroxyl radicals and hydroxyl radicals. //Toxicol. Appl. Pharmacol. 1999. Vol. 156. No2. P. 96-105.

295. Rocha J.B., Battastini A.M., Sarkis J.J., Dias R.D. Effects of undernutrition during suckling on ATP and ADP hydrolysis by synaptosomes from the cerebral cortex of adult rats. // Braz. J. Med. Biol. Res. 1991. Vol. 24. No5. P. 515-526.

296. Rushmore Т.Н., Kong A.-N.T. Pharmacogenomics, regulation and signaling pathways of phase I and II drug metabolizing enzymes. // Current Drug Metabolism. 2002. Vol. 3. No5. P. 481^89.

297. Sarkis J.J., Salto C. Characterization of a synaptosomal ATP diphosphohydrolase from the electric organ of Torpedo marmorata. II Brain. Res. Bull. 1991. Vol. 26. No6. P. 871-876.

298. Schendel S.L., Xie Z.H., Montal M.O., Matsuyama S., Montal M., Reed J.C. Channel formation by antiapoptotic protein Bcl-2. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1997. Vol. 94. NolO. P. 5113-5118.

299. Schetinger M.R., Vieira V.L., Morsch V.M., Balz D. ATP and ADP hydrolysis in fish, chicken and rat synaptosomes. // Сотр. Biochem. Physiol. B. Biochem. Mol. Biol. 200L Vol. 128. No4. P. 731-741.

300. Scheuhammer A.M., Cherian, M.G. Quantification of metallothioneins by a silver-saturation method. I I Toxicol. Appl. Pharmacol. 1986. Vol. 82. No3. P. 417^25.

301. Schlesinger P.H., Gross A., Yin X.M., Yamamoto K., Saito M., Waksman

302. Gand Korsmeyer SJ. Comparison of the ion channel characteristics ofproapoptotic Bax and antiapoptotic Bcl-2. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1997.

303. Vol. 94.No21.P. 11357-11362.

304. Serafim A., Bebianno M.J. Metallothionein role in the kinetic model ofcopper accumulation and elimination in the clam Ruditapes decussatus. II

305. Environ Res. 2009. Vol. 109. No4. P. 390-399.

306. Serafim M.A., Bebianno M.J. Variation of metallothionein • and metalconcentrations in the digestive gland of the clam Ruditapes decussatus: sex andseasonal effects. // Environ. Toxicol. Chem. 2001. Vol. 20. No3. P. 544-552.

307. Shaw J.P., Large A.T., Chipman J.K., Livingstone D.R., Peters L.D.

308. Seasonal variation in mussel Mytiius edulis digestive gland cytochrome P4501Aand 2E-immunoidentified protein levels and DNA strand breaks (Comet assay).

309. Mar. Environ. Res. 2000. Vol. 50. Nol-5. P. 405-409.

310. Shaw J.P., Large A.T., Livingstone D.R., Doyotte A., Renger J., Chipman

311. J.K., Peters L.D. Elevation of cytochrome P450-immunopositive protein and

312. DNA damage in mussels {Mytiius edulis) transplanted to a contaminated site. //

313. Mar. Environ. Res. 2002. Vol. 54. No3-5. P. 505-509.

314. Skarpheinsdottir H., Ericson G., Dalla Zuanna L., Gilek M. Tissuedifferences, dose-response relationship and persistence of DNA adducts in blue390mussels {Mytilus edulis L) exposed to benzoa.pyrene. // Aquat. Toxicol. 2003. Vol. 62. No2. P. 165-177.

315. Slee E.A., Harte M.T., Kluck R.M., Wolf B.B., Casiano C.A., Newmeyer D.D., Wang H.-G., Reed J.C., Nicholson D.W., Alnemri E.S., Green D.R.,

316. Martin S.J. Ordering the cytochrome c-initiated caspase cascade: hierarchicaliactivation of caspases-2, -3, -6, -7, -8, and -10 in a caspase-9-dependent manner // J. Cell Biol. 1999. Vol. 144. No2. P. 281-292.

317. Slotsbo S., Maraldo K., Malmendal A., Nielsen N.C., Holmstrup M. Freeze tolerance and accumulation of cryoprotectants in the enchytraeid Enchytraeus albidus (Oligochaeta) from Greenland and Europe. // Cryobiology. 2008. Vol. 57. No3. P. 286-291.

318. Smital Т., Kurelec B. Inhibitors of the multixenobiotic resistance mechanism in natural waters: in vivo demonstration of their effects. // Environ. Toxicol. Chem. 1997. Vol. 16. Issue 10. P. 2164-2170.

319. Srinivasula S.M., Ahmad M., Fernandes-Alnemri Т., Alnemri E.S. Autoactivation of procaspase-9 by Apaf-l-mediated oligomerization. // Mol. Cell. 1998. Vol. 1. No7. P. 949-957.

320. Storey K.B., Churchill T.A. Metabolic responses to anoxia and freezing by the freeze-tolerant marine mussel Geucensia demissus. // J. Exper. Marine Biol. Ecol. 1995. Vol. 188. Nol. P. 99-114.

321. Storey K.B., Storey J.M., Brooks S.P.J., Churchill T.A., Brooks R.J. Hatchling turtles survive freezing during winter hibernation. // Procl. Nat. Acad. Sci. USA. 1987. Vol. 85. No3. P. 8350-8354.

322. Storey K.B., Storey J.M., Churchill T.A. Freezing and anoxia tolerance of slugs: a metabolic perspective. // J. Сотр. Physiol. B. 2007. Vol. 177. N08. P. 833-840.

323. Storey K.B., Storey J.M. Freeze tolerance in animals. // Physiol. Rev. 1988. Vol. 68.N0I.P. 27-84.

324. Sugiura Y., Kavabe H., Tanaka H., Fujimoto S., Ohara A. First evidence for manganese binding to sulfur donor group in metalloprotein Mn(III)-containing acid phosphatase. // J. Amer. Chem. Soc. 1981. Vol. 103. No4. P. 963-964.

325. Sunila I., LaBanca J. Apoptosis in the pathogenesis of infectious diseases of the eastern oyster Crassostrea virginica. II Dis. Aquat. Organ. 2003. Vol. 56. No2. P. 163-170.

326. Szuwart Т., Kierdorf H., Kierdorf U., Clemen G. Histochemical andtultrastructural studies of cartilage resorption and acid phosphatase activity during antler growth in fallow deer (.Dama dama). II Anat. Rec. 2002. Vol. 268. Nol.P. 66-72.

327. Terahara K., Takahashi K.G., Mori K. Pacific oyster hemocytes undergo apoptosis following cell-adhesion mediated by integrin-like molecules. //

328. Сотр. Biochem. Physiol. A Mol. Integr. Physiol. 2005. Vol. 141. No2. P. 215-222.

329. Thornalley P., Vasak M. Possible role for metallothionein in protection against radiation-induced oxidative stress. Kinetics and mechanism of its reaction with superoxide and hydroxyl radicals. // Biochim. Biophys. Acta. 1985. Vol. 827. Nol. P. 36-44.

330. Traverso-Cori A., Traverso S., Reyes H. Different molecular forms of potato apyrase. //Arch. Biochem. Biophys. 1970. Vol. 137. Nol. P. 133-142.

331. Twardowski J. Hiver Raman spectroscopy of acid phosphatase from rat liver ander neuraminidase treatment. // Biochim. Biophys. Acta. 1979. Vol. 581. Nol. P. 116-120.

332. Valenzuela J.G., Charlab R., Galperin M.Y., Ribeiro J.M. Purification, cloning, and expression of an apyrase from the bed bug Cimex lectularius. A new type of nucleotide-binding enzyme. // J. Biol. Chem. 1998. Vol. 273. No46. P. 30583-30590.

333. Vergani L., Grattarola M., Borghi C., Dondero F., Viarengo A. Fish and molluscan metallothioneins. //FEBS J. 2005. Vol. 272. No23. P. 6014-6023.

334. Verlecar X.N., Jena K.B., Chainy G.B. Biochemical markers of oxidative stress in Perna viridis exposed to mercury and temperature. // Chem. Biol. Interact. 2007. Vol. 167. No3. P. 219-226.

335. Viarengo A., Burlando В., Cavaletto M., Marchi В., Ponzano E., Blasco J. Role of metallothionein against oxidative stress in the mussel Mytilusgalloprovincialis. II Am. J. Physiol. 1999. Vol.277. N06. Part 2. P. R1612-R1619.

336. Viarengo A., Burlando В., Ceratto N., Panfoli I. Antioxidant role of metallothioneins: a comparative overview. // Cell Mol. Biol. 2000. Vol. 46. No2. P. 407-417.

337. Viarengo A., Nott J.A. Mechanisms of heavy metal cation homeostasis in marine invertebrates. // Сотр. Biochem. Physiol. С Toxicol. Pharmacol. 1993. Vol. 104. No5.P. 355-372.

338. Voituron Y., Barre H., Ramlov H., J Douady C. Freeze tolerance evolution among anurans: Frequency and timing of appearance. // Cryobiology. 2009 (in press).

339. Waite W., Griffin H.D., Franson R. The phospholypases A of lysosomes // In: Lysosomes in Biol, and Pathol. Amsterdam. North Holland, 1976. Vol. 5. P. 257-305.

340. Wallweler G.J., Lilli W.W, Purification and characterisation of the two constitutively produced acid phosphatase isosymes from Schizophillum commune. И Mycol. Res. 1992. Vol. 96. No9. P. 792-797.

341. Walters K.R.Jr., Sformo Т., Barnes B.M., Duman J.G. Freeze tolerance in an arctic Alaska stonefly. // J. Exp. Biol. 2009. Vol. 212. Part 2. P. 305-312.

342. Weils W. W., Collins C.A., Kurtz J.W. Meyabolic regulation of lysosome activity // In: Lysosomes in Biol, and Pathol. Amsterdam. North Holland, 1975. Vol. 3.P. 200-238.

343. Wells W.W., Collins C.A. Phosphorylation of lysosomal membrane components as a possibly regulatory mechanism // In: Lysosomes in Biol, and Pathol. Amsterdam. North Holland, 1984. Vol. 7. P. 119-141.

344. Wilson C.L., Safe S. Mechanisms of ligand-induced aryl hydrocarbon receptor-mediated biochemical and toxic responses. // Toxicol. Pathol. 1998. Vol. 26. No5. P. 657-671.

345. Wilson M.R. Apoptosis: unmasking the executioner. // Cell Death Differ. 1998. Vol. 5. No8. P. 646-652.

346. Winston G.W., Regoli F., Dugas A.J., Blanchard K.A., Fong J.H. A rapid gas chromatographic assay for determining oxyradical scavenging capacity of antioxidants and biological fluids. // Free Radic. Biol. Med. 1998. Vol. 24. No3. P.480-493.

347. Whyte M. Ice/Ced-3 proteases In apoptosis. // Trends Cell. Biol. 1996. Vol. 6. No7. P. 245-248.

348. Zou H., Henzel W.J., Liu X., Lutschg A., Wang X. Apaf-1, a humanprotein homologous to C. elegans CED-4, participates in cytochrome c-dependent activation of caspase-3. // Cell. 1997. Vol. 90. No3. P. 405-413.

349. Yi F.X., Sun P., Huang S.L., Liu W.L., Guo Z.G. Characteristics of apyrase (EC 3.6.1.5) on cultured bovine endocardial endothelial cells. // Sheng Li Xue Bao. 1999. Vol. 51. No4. P. 425-429.

350. Yoshimoto M., Kimura Т., Miamoto Т., Sacamoto J., Hatano S. Purification and properties of acid phosphatase from Japanese radish. // Biosci. Biotechnol. and Biochem. 1992. Vol. 56. Nol. P. 147-148.

351. Yuan J.Y., Shaham S., Ledoux S., Ellis H.M., Horvitz H.R. The C-elegans cell death gene Ced-3 encodes a protein similar to mammalian interleukin-l-betaconverting enzyme. // Cell. 1993. Vol. 75. P. 641-652.