Биофункциональные полимерно-неорганические носители для инженерии костной ткани тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.06, кандидат химических наук Коржиков, Виктор Александрович

• Коржиков, Виктор Александрович
• кандидат химических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат химических наук Коржиков, Виктор Александрович

Список сокращений.

Введение.

1. Литературный обзор.

1.1. Метод тканевой инженерии на примере восстановления костной ткани.

1.1.1. Требования к скаффолдам и материалам, используемым в инженерии костной ткани.

1.1.2. Полимерные скаффолды.

1.1.2.1. Биодеградируемые полимеры.

1.1.2.2. Методы получения скаффолдов на основе биодеградируемых полимеров.

1.1.2.3. Гидрогели.

1.1.3. Неорганические скаффолды.

1.1.4. Композитные полимерно-неорганические скаффолды.

1.1.5. Получение биофункциональных гибридных скаффолдов.

1.2. Гидрофильные полимеры для биомедицинского применения.

1.2.1. Основные требования к полимерам-носителям.

1.2.2. Синтез полимеров носителей.

1.2.3. Введение реакционных групп в полимеры-носители.

1.2.4. Поливинилсахариды.

1.2.4.1. Синтез винилсахаридов.

1.2.4.2. Синтез поливинилсахаридов.

1.2.4.3. Биологические свойства поливинилсахаридов.

1.3. Адсорбция полимеров из растворов на твердых поверхностях.

1.3.1. Влияние молекулярной массы полимера на его адсорбцию.

1.3.2. Влияние растворителя на адсорбцию полимеров.

1.3.3. Влияние электростатических взаимодействий на адсорбцию полимеров.

1.3.4. Десорбция полимеров.

1.4. Функционализация гидрофильных полимеров биолигандами.

1.4.1. Регулирование взаимодействия поверхность - клетка и клеточного роста.

1.4.2. Реакции, используемые для модификации полимеров БАВ.

1.4.3. Особенности связывания белков с гидрофильными полимерами.

1.5. Культуры клеток и регенерация ткани.

1.5.1. Источники и типы клеток.

1.5.2. Культуры клеток в тканевой инженерии.

1.5.3. Стадии роста новой костной ткани.

2. Экспериментальная часть.

2.1. Материалы.

2.2. Оборудование.

2.3. Методы.

2.3.1. Синтез полимеров и их альдегидсодержащих производных.

2.3.2. Определение состава и физико-химических параметров полученных полимеров.

2.3.3. Методы исследования адсорбции полученных полимеров на неорганических матрицах.

2.3.4. Методы синтеза конъюгатов полученных полимеров с биолигандами.

2.3.5. Методы качественного и количественного детектирования образования конъюгатов и определения их гидродинамических параметров.

2.3.6. Методы исследования адсорбции и десорбции конъюгатов минеральная матрица Sponceram).

2.3.7. Получение модели клетки и изучение ее взаимодействия с GRGDSP-пептидом методом аффинной хроматографии.

2.3.8. Эксперименты с клеточными культурами.

2.3.9. Оценка погрешностей измерений.

3. Результаты и обсуждение.

3.1. Синтез полимеров-носителей с контролируемым содержанием альдегидных групп.

3.1.1. Синтез пМАГ и получение реакционно-способных альдегидных групп методом полимераналогичных превращений (периодатное окисление).

3.1.2. Изучение возможности введения альдегидных групп на стадии сополимеризации. Синтез сополимеров п(МАГ-со-ВП) и п(МАГ-со-ВП-со-ДААк) и получение их альдегидсодержащих производных.

3.2. Биофункционализация полученных полимеров.

3.2.1. Конъюгаты полимеров с биолигандами различной функциональности.

3.2.2. Создание полифункционального полимерного вектора.

3.3. Гидродинамические характеристики полученных полимеров и конъюгатов.

3.3.1. Изучение гидродинамических параметров методом вискозиметрии.

3.3.2. Исследование полимеров и их конъюгатовметодом светорассеяния.

3.4. Адсорбция полученных полимеров и конъюгатов.

3.4.1. Сравнительное изучение адсорбции синтезированных полимеров на различных минеральных матрицах.

3.4.2. Адсорбция и десорбция синтезированных полимеров на монолитной керамике.

3.4.3. Адсорбция и десорбция синтезированных биоконъюгатов.

3.4.4. Изучение адсорбции полимеров и конъюгатов на Sponceram методом рентгеновской фотоэлектронной спектроскопии.

3.5. Апробация полимерно-неорганических скаффолдов для инженерии костной ткани.

3.5.1. Активность GRGDSP пептида как интегринсвязывающего лиганда.

3.5.2. Эксперименты в культуре клеток.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биофункциональные полимерно-неорганические носители для инженерии костной ткани»

В настоящее время высокомолекулярные соединения широко используются в различных областях биологии и медицины благодаря предоставляемой ими возможности варьировать свойства материала в зависимости от состава и структуры используемых макромолекул. Разработано огромное количество полимерных биоматериалов, удовлетворяющих требованиям биосовместимости и выполняющих различные функции [1-8], в частности, имплантантов для замены поврежденного или утраченного участка костной ткани [9]. Особый интерес представляет использование высокомолекулярных соединений в методе инженерии костной ткани, основанном на помещении клеток, полученных из тканей пациента, на трехмерный носитель (скаффолд) [8], где происходит образование ткани за счет роста и дифференциации клеток [2, 4, 7]. Развитие данного метода продемонстрировало, что для направления процесса в сторону образования костной ткапи скаффолды должны функционировать в качестве системы контролируемой доставки биологических сигналов, управляющих поведением клеток [8, 11]. Поэтому возникает фундаментальный интерес изучения условий прочного связывания биологических молекул (лигандов) с поверхностью скаффолда. Несмотря на интенсивные исследования различных полимерных носителей на основе синтетических полимеров (полилактид, поли-гликолид) и природных биополимеров (хитозан, коллаген) [8], к настоящему моменту не существует скаффолдов, удовлетворяющих как требованиям механической прочности, так и предоставляющих возможности биофункционализации. Кроме полимеров, в качестве обсуждаемых каркасов для инженерии костной ткани используются макропористые керамические матрицы, обладающие достаточной механической прочностью и сходством со структурой неорганической составляющей костей.

В связи с вышесказанным, актуальной задачей представляется создание нового типа скаффолдов, сочетающих в себе керамическую и полимерную составляющие. При этом использование в качестве последней гидрофильных полимеров-носителей, ковалентно модифицированных специальными биологическими молекулами, открывает новые возможности применения полимеров в инженерии костной ткани. Подобный подход является оригинальным и не имеет описанных в литературе аналогов.

Предложенная в данной работе стратегия создания «интеллигентных» гибридных носителей клеток основана на идее адсорбционного покрытия трехмерной макропористой керамической матрицы биосовместимым полимером, способным к ковалентному связыванию биологических молекул (лигандов) без разрушения основной цепи. Биологическая полифункциональность должна обеспечиваться связыванием с полимерной составляющей конструируемого скаффолда лигандов различной специфичности. Минеральная составляющая, в данном случае, обеспечивает механическую прочность и поддержку трехмерного роста клеток, в то время как биофункционализированный полимерный компонент ответствен за передачу клеткам сигналов, управляющих их поведением на поверхности гибридной матрицы.

Таким образом, целью работы являлось создание полимерной системы, несущей био-лиганды, и адсорбированной на поверхности неорганической матрицы с образованием материала, пригодного для использования в качестве скаффолдов для инженерии костной ткани, обеспечивающих интенсивную адгезию и рост клеток.

В задачи работы входило:

• синтез и исследование полимеров-носителей, содержащих контролируемое количество реакционно-способных групп, способных к ковалентному связыванию биологически активных молекул (биолигандов);

• контролируемое ковалентное связывание биолигандов различной функциональности с полученными полимерами-носителями;

• получение полифункционального полимерного «вектора», содержащего биолиган-ды различных типов;

• изучение гидродинамических характеристик исходных полимеров-носителей и их конъюгатов с биолигандами различных молекулярных размеров;

• исследование адсорбции полученных полимеров-носителей на различных неорганических материалах и выбор матрицы для создания гибридных скаффолдов;

• изучение адсорбции и десорбции синтезированных полимеров-носителей и их конъюгатов с биолигандами на выбранном неорганическом материале;

• оценка цитотоксичности полимеров-носителей и их конъюгатов с целевыми биолигандами и исследование влияния введения различных биолигандов в полимерную составляющую гибридного скаффолда на поведение живых клеток.

Возможность создания нового типа скаффолдов для инженерии костной ткани, состоящих из неорганической составляющей и полимера-носителя, ковалентно модифицированного биологическими молекулами, обеспечивающего биофункциональность поверхности, являлась объектом исследования.

В качестве методов исследования использовались:

• метод свободно-радикальной полимеризации и сополимеризации, периодатного окисления а-гликолей и снятия диэтилацеталыюй защиты для синтеза полимеров-носителей;

• метод N-алкилирования для ковалентного связывания полимеров-носителей с био-лигандами различного молекулярного размера;

• методы ЯМР спектроскопии, а также спектроскопии в ИК-, УФ- и видимой областях для характеристики полученных полимеров-носителей;

• методы вискозиметрия и светорассеяние для изучения гидродинамических параметров полимеров-носителей и их конъюгатов с лигандами различного молекулярного размера;

• методы ГТААГ электрофореза и ИК-спектроскопии для качественного, а также метода флуоресцентного анализа и спектроскопии в видимой области для количественного определения связывания биолигандов с полимерами-носителями;

• методы фотометрического анализа и рентгеновской фотоэлектронной спектроскопии для изучения адсорбции и десорбции полученных полимеров и конъюгатов;

• фронтальный метод анализа в аффинной хроматографии для количественной оценки комплементарного взаимодействия рецептора модели клетки (интегрином) с биолигандом (RGD-пептидом), иммобилизованным на поверхности сорбента, имитирующего скаффолд;

• специальные биологические методы работы с культурами клеток и построения кинетических и концентрационных зависимостей количества жизнеспособных клеток при их контакте с различными материалами.

Научная новнзна работы состоит в следующем:

• Разработана новая стратегия создания биофункциональных полимерно-неорганических скаффолдов для инженерии костной ткани, заключающаяся в использовании гидрофильного полимера-носителя в качестве подвижного спейсера, адсорбционно связанного с поверхностью неорганической макропористой подложки и модифицированного биомолекулами способными интенсифицировать процессы адгезии и роста клеток.

• Впервые получены полимеры-носители на основе поливинилсахаридов, содержащие контролируемое количество реакционно-способных альдегидных групп.

• Впервые проведено контролируемое ковалентное связывание аминосодержащих биолигандов различной функциональности (GRGDSP-пептид, поли-Ь-лизин, фактор роста и дифференциации клеток ВМР-2) с полученными полимераминосителями и доказана возможность создания полифункциольнального полимерного «вектора», содержащего несколько биолигандов на одной полимерной цепи.

• Комплексом независимых методов доказана возможность адсорбции полученных полимеров и конъюгатов на поверхности керамических матриц.

• Методами вискозиметрии и светорассеяния определены гидродинамические параметры полученных конъюгатов поливинилсахаридов с лигандами различного молекулярного размера.

• На основании тестов на цитотоксичность полученных полимеров в растворе и адсорбированном состоянии, а также гибридных скаффолдов, в полимерную составляющую которых введены биомолекулы различной функциональности, показана возможность использования конъюгированных с биолигандами гидрофильных полимеров-носителей в качестве фактора, управляющего поведением клеток.

Практическая значимость работы. Разработан и экспериментально апробирован технологический принцип создания нового типа скаффолдов для инженерии костной ткани. На примере синтезированных альдегидсодержащих поливинилсахаридов, показана перспективность контролируемой модификации полимеров-носителей специальными биомолекулами с получением моно-, би- и полифупкциональных конъюгатов и последующем введением их в состав гибридных скаффолдов путём адсорбции для интенсификации процессов адгезии и роста клеток.

Основные положения, выноснмые па защиту:

• Создано первое поколение гибридных скаффолдов включающих в себя полимер-носитель, несущий лиганды, обеспечивающие адгезию и рост клеток.

• Поливинилсахариды, вследствие проявляемого ими собственного неспецифического сродства к клеточным мембранам, перспективны в качестве полимерной составляющей гибридных скаффолдов;

• Путем полимераналогичных превращений, а также и методом сополимеризации с защищенным альдегидным мономером возможно контролируемое введение в поливинилсахариды альдегидных групп;

• Условия контролируемого введения биолигандов различной функциональности и молекулярного размера в альдегид-содержащие поливинилсахариды с различной структурой реакционно-способного звена, а также получения полифункционального полимерного «вектора», содержащего несколько биолигандов;

• Выбор оптимальной керамической матрицы для создания скаффолдов обсуждаемого типа по результатам сравнительного изучения адсорбции;

• Способность полученных полимеров-носителей и их конъюгатов образовывать адсорбционное покрытие па поверхности минеральной матрицы;

• Отсутствие цитотоксичности полученных полимеров в адсорбированном виде и положительное влияние их конъюгатов с биолигандами на адгезию и рост клеток на поверхности гибридных скаффолдов.

Апробация работы. Основные результаты диссертационной работы докладывались в виде устных и стендовых сообщений на следующих международных симпозиумах и конференциях: 1-я Санкт-Петербургская конференция молодых ученых с международным участием «Современные проблемы науки о полимерах» (Санкт-Петербург, Россия, 2005), The Young Scientists' and Students' International Scientific Conference «Modern problems of microbiology and biotechnology» (Одесса, Украина, 2007), «European BioPerspectives 2007» (Кёльн, Германия, 2007), «20lh Meeting of the European Society for Animal Cell Technology» (Дрезден, Германия, 2007), «Baltic Polymer Symposium 2007» (Друскининкай, Литва, 2007), 4-я Санкт-Петербургская конференция молодых ученых с международным участием «Современные проблемы науки о полимерах» (Санкт-Петербург, Россия, 2008), 6th International Symposium «Molecular Order and Mobility in Polymer Systems» (Санкт-Петербург, Россия, 2008). Кроме того, результаты диссертационной работы обсуждались на научно-практических семинарах в Институте Высокомолекулярных Соединений РАН (Санкт-Петербург, Россия, 2007) и в Институте Технической Химии Университета Ганновера (Ганновер, Германия, 2007). Работа была поддержана грантами РФФИ (№ 05-03-32310) и Немецкого Научного Общества (DFG, КА 1784/4-1). Для выполнения части исследования на территории Германии автор получил персональную стипендию Немецкой Службы Академических Обменов (DAAD, с 1.09.2006 по 28.02.2007).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано тринадцать печатных работ, включающих 4 полнотекстовые статьи в журналах Journal of Applied Polymer Science, Bioconju-gate Chemistry, Журнал Прикладной Химии и в Трудах Международной конференции «Baltic Polymer Symposium 2007», а также 9 тезисов устных и стендовых докладов.

Вклад автора состоял в выполнении всех представленных в диссертации экспериментов, активном участии в интерпретации полученных результатов, а также в подготовке докладов и публикаций.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из Введения, Обзора литературы, Экспериментальной части, Обсуждения результатов, Выводов, Списка литературы и Приложения. Материалы диссертации изложены на 166 страницах, проиллюстрированы 24 таблицами и 61 рисунком, список цитируемой литературы включает 197 источников.

Заключение диссертации по теме «Высокомолекулярные соединения», Коржиков, Виктор Александрович

Выводы

1. Разработана стратегия получения полимерно-неорганических биораспознающих носителей клеток, или скаффолдов, для инженерии костной ткани, основанная на адсорбционном покрытии макропористой керамической основы биосовместимыми (со)полимерами винилса-харидов, модифицированными управляющими поведением клеток биологическими молекулами (биолигандами).

2. Впервые методом свободно-радикальной полимеризации синтезирован гомологичный ряд полимеров на основе винилсахарида 2-деокси-М-метакрилоил-амидоглюкозы (МАГ): го-мополимер, сополимер с N-винилпирролидоном и тройной сополимер с N-винилпирролидоном и диэтилацеталем акролеина; в последнем случае N-винилпирролидон выполнял роль инертного интермедиата, позволяющего вводить в структуру сополимера МАГ реакционноспособные альдегидные группы.

3. Впервые методами полимераналогичных превращений и сополимеризации с защищенной формой акролеина с дальнейшей активацией альдегида в полученном сополимере синтезированы новые альдегидсодержащие полимеры, принадлежащие к классу поливинилсахари-дов, а именно, окисленная периодатом натрия поли(2-деокси-М-метакрилоиламидоглюкоза) и поли([2-деокси-К-метакрилоиламидо-глюкоза]-со-[1-винилпирролидин-2-он]-со-[акролеин]). Показана возможность контролируемого введения альдегидных групп в полученные макро-молекулярные соединения.

4. Разработаны методы контролируемого синтеза моноконъюгатов полученных полимеров с лигандами различной биологической функциональности, а именно, фактором неспецифической адгезии клеток макромолекулярным поли-Ь-лизином, фактором роста и дифференциации клеток белком ВМР-2, а также низкомолекулярным интегрин-связывающим RGD-пептидом. Экспериментально установленные закономерности реакций конъюгирования позволили предложить метод создания «смешанных» конъюгатов - би- и трифункциональных полимерных векторов, представляющих собой контролируемое сочетание двух или трех био-лигандов в структуре выбранных полимеров.

5. Исследованы процессы адсорбции и десорбции полученных полимеров и их биоконъю-гатов. Установлено влияние химического строения полимеров-носителей и присоединяемых биолигандов на процесс адсорбции. Показана практическая необратимость адсорбции полимеров и конъюгатов, как в модельных экспериментах, так и в культуральной среде, используемой для роста клеток.

6. Показано, что синтезированные альдегидсодержащие полимеры на основе винилсаха-рида в виде их биофункциональных конъюгатов значительно стимулируют прикрепление клеток к поверхности скаффолда, ускоряют их рост и образование ткани по сравнению с не-модифицированной керамической основой скаффолда.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Коржиков, Виктор Александрович, 2009 год

1. Bancroft G.N., Mikos A.G. Bone tissue engineering by cell transplantation // In: Ikada Y., Oshima N. (eds.) Tissue engineering for therapeutic use. New York: Elseveir, 2001. P. 151.

2. Mistry A.S.,' Mikos A.G. Tissue Engineering Strategies for Bone Regeneration // In: Ioannis V. Yannas (ed.) Regenerative Medicine 2: clinical and preclinical applications. Adv. Biochem. Engin. / Biotechnol. 2005. V. 94. P. 2-22.

3. Brown K.L. Cruess R.L. Bone and cartilage transplantation in orthopaedic surgery. A review // J. Bone Joint Surg. Am. 1982. V. 64. P. 270-279.

4. Enneking W.F., Eady J.L., Burchardt H. Autogenous cortical bone grafts in the reconstruction of segmental skeletal defects // Bone Joint Surg Am. 1980. V. 62. P. 1039-1058.

5. Gitelis S., Saiz P. What's new in orthopaedic surgery // J Am Coll Surg. 2002. V. 194. P. 788-791.

6. Bostrom R.D., Mikos A.D. Tissue engineering of bone // In: Atala A. Mooney D. J. (eds.) Synthetic biodegradable polymer scaffolds. Berlin: Birkhauser, 1997. P. 215-234.

7. Ma P., Elisseeff J. (Eds.) Scaffolding in tissue engineering. London, New York: CRC Taylor&Francis, 2006. 638 p.

8. Штильмаи М.И. Полимеры медико-биологического назначения. М.: Академкнига, 2006. 399 с.

9. Ma P. Biomimetic Materials for Tissue Engineering // Adv Drug Deliv Rev. 2008. V.60, №.2. P. 184-198.

10. American Academy of Orthopaedic Surgeons (2003) Facts about fractures. In: American Academy of Orthopaedic Surgeons website http://www.aaos.org/wordhtml/research/stats/factshtm.

11. Goldberg C.F., Stevenson S. Bone graft options: fact and fancy // Orthopedics. 1994. V.17. P. 809810.

12. Шехтер А.Б., Розанова И.Б. Тканевая реакция на имплантант. В книге: Биосовместимость. / Отв. ред. Севастьянов В. И. М.: Медицина, 1999. 368 с.

13. Hodneland C.D., Lee Y.-S., Min D.-H., Mrkish M. Selective immobilization of proteins to self-assembled monolayers presenting active site-directed capture ligands // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2002. V.99. P. 5048-5052.

14. Brekke J.H., Toth J.M. Principles of Tissue Engineering Applied to Programmable Osteogenesis // J Biomed. Mater. Res. (Appl Biomater). 1998. V. 43. P. 380-398.

15. Holland T.A., Mikos A.G. Review: Biodegradable Polymeric Scaffolds. Improvements in Bone Tissue Engineering through Controlled Drug Deliveiy // Adv Biochem Engin/Biotcchnol. 2006. V. 102. P.161-185.

16. Hench L.L., Jones J.R. (Eds.) Biomaterials, artificial organs and tissue engineering. Boca Raton: CRC Press, 2005.284 р.

17. Nair L.S., Laurencin C.T. Polymers as Biomaterials for Tissue Engineering and Controlled Drug Delivery//Adv Biochem Engin/Biotechnol. 2006. V. 102. P. 47-90

18. Пхакадзе Г.А. Биодеструктируемые полимеры, Киев.: Наукова думка, 1990. 160 с.

19. Морфологические и биохимические аспекты биодеградации полимеров / под ред. Пхакадзе Г.А. Киев: Наукова думка, 1986. 152 с.

20. Гумаргалиева К.З., Заиков Т.Е., Моисеев Ю.В. Макрокинетические аспекты биосовместимости и биодеградируемости полимеров // Успехи химии. 1994. Т. 63, №10. С. 905-921.

21. Middleton J.С., Tipton A.J. Synthetic biodegradable polymers as orthopedic devices // Biomaterials. 2000. V. 21, №. 23. P. 2335-2346.

22. Gunatillake P.A., Adhikari R. Biodegradable synthetic polymers for tissue engineering // European Cells and Materials. 2003. V. 5. P. 1-16.

23. Hakkarainen M. Aliphatic Polyesters: Abiotic and Biotic Degradation and Degradation Products // Advances in Polymer Science. 2002. V. 157. P. 115-134.

24. Reed A.M., Gilding D.K. Biodegradable polymers for use in surgery poly(glycolic)/poly(lactic acid) homo- and copolymers: 2 In vitro degradation // Polymer. 1979. V. 20. P. 1459-1464.

25. Bertoldi C., Zaffe D., Consolo U. Polylactide/polyglycolide copolymer in bone defect healing in humans // Biomaterials. 2008. V. 29. P. 1817-1823.

26. Freier T. Biopolyesters in Tissue Engineering Applications // Adv Polym Sci. 2006. V. 203. P. 161.

27. Yang M., Zhu S., Chen Y., Chang Z., Chen G., Gong Y„ Zhao N., Zhang X. Studies on bone marrow stromal cells affinity of poly(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyhexanoate) // Biomaterials. 2004. V. 25. P. 1365-1373.

28. Heller J., Barr J., Ng S. Y., Schwach-Abdellaoui K., Gurny R. Poly(orthoesters): synthesis, characterization, properties and uses // Adv. Drug. Deliv. Rev. 2002. V. 54. P. 1015-1039.

29. Parkar M.H., Gellynck K., Buxton P.G. Osteogenic differentiation of hMSCs in dense collagen scaffolds for bone tissue engineering // European Cells and Materials V. -2007. V. 14. P. 84.

30. Osathanon Т., Linnes M. L., Rajachar R. M., Ratner B. D., Somerman M. J., Giachelli С. M. Microporous nanofibrous fibrin-based scaffolds for bone tissue engineering // Biomaterials. -2008. V. 29,1. 30. P. 4091-4099.

31. Solchaga L.A., Dennis J.E., Goldberg V.M., Caplan A.I. Hyaluronic acid-based polymers as cell carriers for tissue-engineered repair of bone and cartilage // J. Orthop. Res. 1999. V. 17. P. 205213.

32. Zhang Y., Ni M., Zhang M.Q., Ratner B. Calcium phosphate-chitosan composite scaffolds for bone tissue engineering // Tissue. Eng. 2003. V. 9. P. 337-345. r

33. Alsberg E., Anderson K.W., Albeiruti A., Franceschi R.T., Mooney D.J. Cell-interactive alginate hydrogels for bone tissue engineering // J. Dent. Res. 2001. V. 80. P. 2025-2029.

34. Lao C., Chen C., Chen J., Chiang S., Lin Y., Chang K. Fabrication of porous biodegradable polymer scaffolds using a solvent merging/particulate leaching method // J. Biomed. Mater. Res. 2002. V. 59. P. 676-681.

35. Mikos A.G., Sarakinos G., Leite S.M., Vacanti J.P., Langer R., Laminated three-dimensional biodegradable foams for use in tissue engineering // Biomaterials. 1993. V. 14. P. 323-330.

36. Zhang R., Ma P.X. Processing of polymer scaffolds: phase separation // In: Methods of Tissue Engineering/ Eds. Atala A., Lanza R.P. San Diego.: Academic Press, 2002. P. 715-724.

37. Ma P.X., Zhang R. Synthetic nano-scale fibrous extracellular matrix // J. Biomed. Mater. Res. 1999. V. 46. P. 60-72.

38. Richardson T.P., Peters M.C., Mooney D.J. Processing of polymer scaffolds gas foaming process // In: Methods of tissue engineering. / Eds. Atala A., Lanza R.P- San Diego.: Academic Press,2002. P. 733-740.

39. Roy T.D., Simon J.L., Ricci J.L., Rekow E.D., Thompson V.P., Parsosns J.R. Perfomance of degradable composite bone repair products made via three-dimensional fabrication techniques // J. Biomed. Mater. Res. 2003. V. 66A, I. 2. P. 283-291.

40. Simon J. L., Roy T. D., Parsons J. R., Rekow E. D., Thompson V. P., Kemnitzer J., Ricci J. L. Engineered cellular response to scaffold architecture in a rabbit trephine defect // J. Biomed. Mater. Res. 2003. V. 66A. P. 275-282.

41. Taboas J.M., Maddox R.D., Krebsbach P.H., Hollister S.J. Indirect solid free form fabrication of local and global porous, biomimetic and composite 3D polymer-ceramic scaffolds // Biomaterials.2003. V. 24. P. 181-194.

42. Giordano R.A., Wu B.M., Borland S.W., Cima M.J., Sachs E.M., Cima M.J. Mechanical properties of dense polylactic acid structures fabricated by three dimansional printing // J. Biomater. Sci. Polym. Ed. 1996. V. 8. P. 63-75.

43. Varghese S., Elisseeff J.H. Hydrogels for Musculoskeletal Tissue Engineering // Adv. Polym. Sci. 2006. V. 203. P. 95-144.

44. Lee K.Y., Mooney D.J., Hydrogels for tissue engineering // Chem. Rev. 2001. V. 101. P. 18691879.

45. Cai K.Y., Yao K.D., Cui Y.L., Lin S.B., et al. Surface modification of poly(D,L-lactic acid) with chitosan and its effects on the culture of osteoblasts in vitro // J. Biomed. Mater. Res. 2002. V. 60. P. 398-404.

46. Tan W., Krishnaraj R., Desai T.A. Evaluation of nanostructured composite collagen-chitosan matrices for tissue engineering // Tissue Engineering. 2001. V. 7. P. 203-210.

47. Chung T.W., Lu Y.F., Wang H.Y., Chen W.P., Wang S.S., Lin Y.S., Chu S.H. Growth of human endothelial cells on different concentrations of Gly-Arg-Gly-Asp grafted chitosan surface // Artif. Organs. 2003. V. 27. P. 155-161.

48. Caterson E.J., Nesti L.J., Li W.J., Danielson K.G., Albert T.J., Vaccaro A.R., Tuan R.S. Three-dimensional1 cartilage formation by bone marrow-derived cells seeded on polylactide/alginate amalgam // J. Biomed. Mater. Res. 2001. V. 57. P. 394-403.

49. Bouhadir K.H., Lee K.Y., Alsberg E., Datum K.L., Anderson K.W., Mooney D.J. Synthesis Degradation of partially oxidized alginate and its potential application for tissue engineering // Biotechnol. Prog. 2001. V. 17. P. 945-950.

50. Hench L.L., Wilson J. An introduction to bioceramics. Singapore.: World scientific, 1993. 396 p.

51. Путляев В.И. Современные биокерамические материалы // Соросовский образовательный журнал. 2004. Т. 8, №1. С. 44-50.

52. Zhang R.Y., Ma P. Poly(alpha-hydroxyl acids) hydroxyapatite porous composites for bone tissue engineering. I. Preparation and morphology // J. Biomed. Mater. Res. 1999. V. 44. P. 446-455.

53. Zhang Y., Zhang M.Q., Synthesis and characterization of macroporous chitosan/calcium phosphate composite scaffolds for tissue engineering // J. Biomed. Mater. Res. 2001. V. 55. P. 304-312.

54. Tenhuisen K.S., Martin R.I., Klimkiewicz M., Brown P. W. Formation and properties of a synthetic bone composite: hydroxyapatite-collagen // J. Biomed. Mater. Res. 1995. V. 29. P. 803810.

55. Katchalski-Katzir E., Kraemer D.M. Eupergitw C.A carrier for immobilization of enzymes of industrial potential//J. Mol. Catal. B: Enzymatic. 2002. V. 10. P. 157-176.

56. Macario A., Katovic A., Giordano G., Forni L., Carloni F., Filippini A., Setti L. Immobilization of Lipase on microporous and mesoporous materials: studies of the support surfaces // Stud. Surf. Sci. Catal. 2005. V. 155. P. 381-394.

57. Mann B.K., Schmedlen R.H., West J.L. Tethered TGF-beta increases extracellular matrix production of vascular smooth muscle cells // Biomaterials. 2001. V. 22. P. 439-444.

58. Wong S.S. Chemistry of protein conjugation and cross-linking. Boca Raton.: CRC Press, 1991. 340 p.

59. Penzol G., Armisen P., Fernandez-Lafuente R., Rodes L., Guisan J. M. Use of dextrans as long and hydrophilic spacer arms to improve the performance of immobilized proteins acting on macromolecules // Biotechnol. Bioeng. 1998. V. 60. P. 518-523.

60. Ohya S., Nakayama Y., Matsuda T. Thermoresponsive artificial extracellular matrix for tissue engineering: hyaluronic acid bioconjugated with poly(N-isopropylacrylamide) grafts // Biomacromolecules. 2001. V. 2. P. 856-863.

61. Molyneaux P. Water soluble synthetic polymers, properties and behaviour. V. 1. Boca Raton, FL.: CRC Press, 1984. 146 p.

62. Платэ H.A., Васильев A.E. Физиологически активные полимеры. М.: Химия, 1986. 296 с.

63. Панарин Е.Ф. Полимерные лекарства и биологически активные вещества. Итоги полувековых исследований и перспективы // Полимеры и медицина. 2005, № 1. С. 20-24.

64. Duncan R.,-Ringsdorf Н., Satchi-Fainaro R. Polymer Therapeutics: Polymers as Drugs, Drug and Protein Conjugates and Gene Delivery Systems: Past, Present and Future Opportunities // Adv. Polym. Sci. 2006. V. 192. P. 1-8.

65. Duncan R. The dawning era of polymer therapeutics // Nat. Rev. Drug Discov. 2003. V. 2. P. 347360.

66. Duncan R., Kopecek J. Soluble Synthetic Polymers as Potential Drug Carriers // Advances in Polymer Science. 1984. V. 57. P. 51-101.

67. Davis K.A., Matyjaszewski K. Statistical, Gradient, Block, and Graft Copolymers by Controlled Living Radical Polymerizations // Advances in Polymer Science. 2002. V. 159. P. 1-169.

68. Kopecek J., Bazilova H. PolyN-(2-hydroxypropyl) methacrylamide] 1. Radical polimerisation and copolymerisation // Eur. Polym. J. 1973. V. 9. P. 7-14.

69. Soga O., van Nostrum C.F., Hennink W.E. Poly(N-(2-hydroxypropyl) Methacrylamide Mono/Di Lactate): A New Class of Biodegradable Polymers with Tuneable Thermosensitivity // Biomacromolecules. 2004. V. 5. P. 818-821.

70. Redi N.S. , Panarin E.F. Synthesis and study of the polymeric derivatives of levorin // Khimiko-farmatsevticheskii Zhurnal. 1978. V. 12, №. 5. P. 96-100.

71. Haaf A.S., Straub F. Polymers of N-vinylpyrrolidone: synthesis, characterization and uses // Polym. J. 1985. V. 17,1. 1. P. 143-152.

72. Zelikin A.N., Such G.K., Postma A., Caruso F. Poly(vinylpyrrolidone) for bioconjugation and surface ligand immobilization // Biomacromolecules. 2007. V. 8. P. 2950-2953.

73. Ranucci E., Spagnoli G., Sartore L., Ferruti P. Synthesis and molecular weight characterization of low molecular weight end-functionalized poly(4-acryloylmorpholine) // Macromol. Chem. Phys. 1994. V. 195. P. 3469-3479.

74. Panarin E.F., Ivanova N.P., Belokhvostova A.T., Potapenkova L.S. Immunomodulating properties of homo- and copolymers of N-vinylamides // Pharmaceutical Chemistry Journal. 2006. V. 40, №. 3.P. 141-144.

75. Solovskii M.V., Zaikina N.A., Panarin E.F., Denisov V.M., Pautov V.D., Ivanova O.G. Biological activity of polymeric derivatives of undecylenic acid // Pharmaceutical Chemistry Journal. 1997. V. 31, №. 7. P. 370-373.

76. Maeda H., Ueda M., Morinaga Т., and Matsumoto T. Conjugation of poly(styrene-co-maleic acid) derivative to the antitumor protein neocarzinostatin: pronounced improvements in pharmacological properties //J. Med. Chem. 1985. V. 28. P. 455-461.

77. Mathiowitz E. (Ed.) Encyclopedia of controlled drug delivery. New York.: Wiley, 1999. P. 786816.

78. Li Y.-Y., Zhang X.-Z., Cheng H., Kim G.-C., Cheng S.-X., Zhuo R.-X. Novel Stimuli-Responsive Micelle Self-Assembled from Y-Shaped P(UA-Y-NlPAAm) Copolymer for Drug Delivery // Biomacromolecules. 2006. V. 7. P. 2956-2960.

79. Harris J.M. (Ed.) Poly(ethylene glycol) Chemistry: Biotechnical and Biomedical Applications. New York.: Plenum Press, 1992. 385 p.

80. Jiang H.-L., Kim Y.-K., Arote R., Nah J.-W., Cho M.-H., et al. Chitosan-graft-polyethylenimine as a gene carrier // Journal of Controlled Release. 2007. V. 117,1. 2. P. 273-280.

81. Kwon G.S. (Ed.) Polymeric Drug Delivery Systems. Boca Raton.: Taylor & Francis, 2005. 653 p.

82. Vilaseca L.A., Rose K., Werlen R., Meunier A., Offord R.E., Nichols C.L., Scott W.L. Protein conjugates of defined structure: synthesis and use of a new carrier molecule // Bioconjugates Chem. 1993. V. 4. P. 515-520.

83. Вирник А.Д., Хомяков К.П., Скокова И.Ф. Декстран и его производные // Успехи химии. 1975. V. 44. Р. 1280-1307.

84. Афиногенов Г.Е., Панарин Е.Ф. Антимикробные полимеры. СПб: Гиппо-крат, 1993. 264 с.

85. Boyer F.S., Greffe L., Davies G.L., Moroz О., Christiansen L. et. al. Highly efficient synthesis of beta(l-4)-oligo- and -polysaccharides using a mutant cellulase // J. Am. Chem. Soc. 2000. V. 122. P. 5429-5437.

86. Johansson G., Joelsson M. Preparation of Cibacron Blue F3G-A-polyethylene glycol in large scale for use in affinity partitioning//Biotechnol. Bioeng. 1985. V. 27. P. 621-625.

87. Zalipsky S., Gilon C. and Zilkha A. Attachment of drugs to polyethylene glycols // Eur. Polym. J. 1983. V. 19. P. 1177-1183.

88. Khue N.V., Galin J.C. Antiinflammatorypolymer-bound steroids for topical applications I. Synthesis and characterization // J. Appl. Polym. Sci. 1985. V. 30. P. 2761-2778.

89. Monfardini C., Veronese F.M. Stabilization of Substances in Circulation // Bioconjugates Chem. 1998. V. 9. P. 418-450.

90. Ravin H.A., Seligman A.M., Fine, J. Polivinylpyrrolidone as plasma expander: studies on its excretion, distribution and metabolism //N. Engl. J. Med. 1952. V. 247,1. 24. P. 921-929.

91. Von Specht B.W., Seinfeld H., Brendel W. Polivinylpyrrolidone as a soluble carrier of proteins // Hope-Seyler's Z. Physiol. Chem. 1973. V. 354. P. 1659-1660.

92. Сидельковская Ф.П. Химия N-винилпирролидона и его полимеров. М.: Наука, 1970. 150 с.

93. Панарин Е.Ф., Гаврилова И.И., Нестеров В.В. Синтез и свойства сополимеров винилпирролидона с диэтилацеталем акролеина // Высокомолекулярные соединения. 1978. Т. 20Б, №1. С.66-69.

94. Tennikova Т.В., Panarin E.F., Mirgorodskaya О.А., Samsonov G.V., Moskvichev B.V. Immobilization of the proteolitic enzyme terrilytin on a water-soluble polymeric matrix // Khimiko-Farmatsevticheskii Zhurnal. 1977. V. 11, №. 7. P. 86-90.

95. Pap B.A., Макаров E.A., Юровский В.В., Мещерякова Е.А., Андронова Т.М., Иванов В.Т. Синтетические иммуногенные комплексы на основе пептида поверхностного белка вируса ящура//Биоорганическая химия. 1990. Т. 16, № 7. С. 904-915.

96. Varma A.J., Kennedy J.F., Galgali P. Synthetic polymers functionalized by carbohydrates: a review//Carbohydrate Polymers. 2004. V. 56. P. 429-445.

97. Klein J., Herzog D. Poly(vinylsaccharide)s, 2: Synthesis of some poly(vinylsaccharide)s of the amide type and investigation of their solution properties // Makromol. Chem. 1987. V. 188. P. 1217-1232.

98. Wurff G., Schmid J., Venhoff T. The synthesis of polymerizable vinyl sugars // Macromol. Chem. Phys. 1996. V. 191. P. 259-274.

99. Klein J., Blumenberg K. Poly(vinylsaccharide)s, 4: Synthesis and polymerization of 6-0-methylallylgalactose derivatives // Makromol. Chem. 1988. V. 189. P. 805 813.

100. Панарин Е.Ф., Иванова Н.П., Кевер E.E. Ферментативный синтез винилсахаридов и полимеры на их основе // Высокомолек. соед. 1998. Т. 40А, № 1. С. 15-23.

101. Сливкин А.И., Лапенко В.Л., Искра Л.И, Кацнель Е.М. Углеводсодержащие винильные полимеры // Вестник Воронежского государственного университета. Сер. Химия и биология. 2001, № 2. С. 31-44.

102. Ladmiral V., Melia Е., Haddleton D. М. Synthetic glycopolymers: an overview // European Polym. J. 2004. V. 40. P. 431-449.

103. Ouchi Т., Sakamoto Y., Jokei S., Chikashita H. Synthesis of an acryloyl-type polymer pending D-glucose analog of N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-isoglutamine // Macromol. Chem. 1984. V. 185,1. 2. P. 255-262.

104. Klein J., Herzog D., Hajibegli A. PoIy(vinyl saccharide)s, 1. Emulsion polymerization of poly(methacryloylglucose) // Makromol. Chem. Rapid Comm. 1985. V. 6,1. 10. P. 675-678.

105. Grande D., Baskaran S,, Chaikof E. L. Synthesis of non-sulfated and sulfated glycopolymers // Polymer Prepration (ACS, Division Polymer Chemistry). 2000. V. 41,1. 1. P. 1000-1001.

106. Иванова Н.П., Панарин Е.Ф., Денисов B.M. Синтез сополимеров винилпирролидона с монозамещенными эфирами углеводов и ненасыщенных карбоновых кислот // Журнал Прикладной Химии. 1998. Т. 71., № i.e. 114-118.

107. Панарин Е.Ф., Иванова Н.П. Синтез сополимеров N-винилформамида с метакриламидоглюкозой //Журнал Прикладной Химии. 2005. Т. 78, № 8. С. 1340-1343.

108. Назарова О.В., Фомина Н.Г., Афанасьева Е.Ф., Панарин Е.Ф. Сополимеры N-метакрилоиламиноглюкозы, содержащие звенья непредельных кислот и активированных сложных эфиров //Журнал Прикладной Химии. 2003. Т.76, № 10. С. 1692-1695.

109. Павлов Г.М, Корнеева Е.В., Михайлова Н.А., Иванова Н.П., Панарин Е.Ф. Гидродинамические свойства и молекулярные характеристики полиметакрилоилглюкозамина // Высокомол. соед. сер. А. 1993. Т. 35, №10. С. 1647-1650.

110. Pavlov G.M., Ivanova N.P, Korneeva E.V., Mikhailova N.A., Panarin E.F. Molecular characteristics of poly(methacrylamido D-glucose) // J. Carbohydr. Chem. 1996. V. 15, I. 4, P. 419-433.

111. Spain S., Gibson M., Cameron N. Recent advances in the synthesis of well-defined glycopolymers // J. Polym. Sci. Part A: Polym. Chem. 2007. V. 45. P. 2059-2072.

112. Bernard J., Нао X., Davis T. P., Barner-Kowollik C., Stenzel M. H. Synthesis of Various Glycopolymer Architectures via RAFT Polymerization: From Block Copolymers to Stars // Biomacromolecules. 2006. V. 7. P. 232-238.

113. Панарин Е.Ф., Иванова Н.П., Белохвостова A.T., Потапенкова JI.C. Синтез и иммуномодулирующие свойства сополимеров N-винилпирролидона и винилсахаридов // Хим.-Фарм. Журнал. 2002. Т. 36, № 4. С. 19-22.

114. Панарин Е.Ф., Иванова Н.П., Белохвостова А.Т., Потапенкова JI.C. Изучение иммуностимулирующих свойств поливинилсахаридов // Иммунология. 1999, № 2. С.26-28.

115. Chytry V., Kopecek J., Leibnitz E. et al. Copolymers of 6-O-methacryloyl-D-galactose and N-(2-hydroxypropyl)methacrylamide: Targeting to liver after intravenous administration to rats // New Polymeric Mat. 1987. V. 1, № 1. P. 21-28.

116. Duncan R., Kopeckova-Rejmanova P., Stroham J. et al. Anticancer agents coupled to N-(2-hydroxypropyl)methacrylamide copolymers. I. Evaluation of daunomycin and puromycin conjugates in vitro//Br. J. Cancer. 1987. V. 55. P. 165-174.

117. Miura Y. Synthesis and biological application of glycopolymers // J. Polym. Sci. Part A: Polym. Chem. 2007. V. 45. P. 5031-5036.

118. Холмберг К., Йёнссон Б., Кронберг Б, Линдман Б. Поверхностно-активные вещества и полимеры в водных растворах. Пер. с англ. М.: Бином, 2007. - 528 с.

119. Липатов 10.С., Сергеева Л.М. Адсорбция полимеров. Киев.: Наукова думка, 1972. 195 с.

120. Скворцов A.M., Беленький Б.Г., Ганкина Э.С., Тенников М.Б. О соответствии поведения реальной макромолекулы и гауссовой цепи при адсорбции в порах // Высокомол. соед, сер. А. 1978. Т. 20, № 3. С. 678-685.

121. Скворцов A.M., Горбунов А.А., Жулипа Е.Б., Бирштейн Т.М. Поведение макромолекул в ограниченных объемах // Высокомол. соед. сер. А. 1978. Т. 20, № 4. С.816-824.

122. Беленький Б.Г., Вилепчик Л.З. Хроматография полимеров. М.: Химия, 1978. 344 с.

123. Chibowski S. Dependence of the adsorption behavior of polyvinyl alcohol at the polystyrene latex-solution interface on the molecular weight//J. Colloid Interface Sci. 1990. V. 134,1. 1. P. 174180.

124. Malmsten M., Lindman B. Ellipsometry studies of the adsorption of cellulose ethers // Langmuir. 1990. V. 6,1. 2. P. 357-364.

125. Fleer J. G., Cohen Stuart M. A., Scheutjens J. M. H. M., Cosgrove Т., Vincent B. Polymers at Interfaces. London.: Chapman & Hall, 1993. 502 p.

126. Laos K., Parker R., Moffat J., Wellner N., Ring S.G. The adsorption of globular proteins, bovine serum albumin and b-lactoglobulin, on poly-L-lysine-furcellaran multilayers // Carbohydr. Polym. 2006. V. 65. P. 235-242.

127. Matuszewska В., Norde W., Lyklema J. Competitive adsorption of human plasma albumin and dextran on silver iodide // J. Colloid Interface Sci. 1981. V. 84, №2. P. 403-408.

128. Chapman R.G., Ostuni E., Takayama S., Holmlin R.E., Yan L., and Whitesides G.M. Surveying for surfaces that resist the adsorption of proteins // J. Am. Chem. Soc. 2000 V. 122 - P. 83038304.

129. Mano F., Sousa A., Boesel F., Neves M., Reis L. Bioinert, biodegradable and injectable polymeric matrix composites for hard tissue replacement: state of the art and recent developments // Composites Science and Technology. 2004. V.64, №6. P. 789-817.

130. Matsumoto Т., Mooney J.D. Cell Instructive polymers // Adv. Biochem. Engin. / Biotechnol. 2006.V. 102. P. 113-137.

131. Schmedlen R.H., Masters K.S., West J.L. Photocrosslinkable PVA hydrogels that can be modified with cell adhesion peptides for use in tissue engineering // Biomaterials 2002 - V. 23. P. 43254332.

132. Lee K.Y., Peters M.C., Anderson K.W., Mooney D.J. Controlled growth factor release from synthetic extracellular matrices //Nature. 2000. V. 408, №6815. P. 998-1000.

133. Кольман Я., Рём К.-Г. Наглядная биохимия. 2-е изд.: Пер. с нем. М.: Мир, 2004. 469 с.

134. De Arcangelis A., Georges-Labouesse Е. lntegrin and ЕСМ functions: roles in vertebrate development // Trends Genet. 2000. V. 16. P. 389-395.

135. Hynes R.O. Integrins: bi-directional, allosteric, signaling machines // Cell. 2002. V. 110. P. 673687.

136. VandeVondele S., Voros J., Hubbell J. A. RGD-grafted poly-l-lysine-gra/i^polyethylene glycol) copolymers block non-specific protein adsorption while promoting cell adhesion // Biotechnology and Bioengineering. 2003. V. 82, №7. P. 784-790.

137. Spoerkea E.D., Stupp S.I. Synthesis of a poly(L-lysine)-calcium phosphate hybrid on titanium surfaces for enhanced bioaetivity // Biomaterials. 2005. V. 26. P. 5120-5129.

138. Werner C., Pompe Т., Salchert K. Modulating Extracellular Matrix at Interfaces of PolymericMaterials // Adv. Polym. Sci. 2006. V.203. P. 63-93.

139. Woo K.M., Chen V.J., Ma P.X. Nano-fibrous scaffolding architecture selectively enhances protein adsorption contributing to cell attachment// Journal of Biomedical Materials Research Part A. 2003. V. 67, №2. P. 531-537.

140. Ito Y., Kajihara M., Imanishi Y. Materials for enhancing cell adhesion by immobilization of cell-adhesive peptide//J. Biomed. Mat. Res. 1991. V. 25. P. 1325-1337.

141. Mann B.K., Tsai A.T., Scott-Burden Т., West J.L. Modification of surfaces with cell adhesion peptides alters extracellular matrix deposition // Biomaterials. 1999. V. 20. P. 2281-2286.

142. Humphries M.J. The molecular basis and specificity of integrin-ligand interactions // J. Cell Biol. 1990. V. 97. P. 585-592.

143. Massia S.P., Hubell J.A. An RGD spacing of 440 nm is sufficient for integrin mediated fibroblast spreading and 140 nm for focal contact and stress fiber formation // J. Cell Biol. 1991. V. 114. P. 1089-1100.

144. Trippel S.B. Growth factors as therapeutic agents // Instr. Course Lect. 1997. V. 46. P. 473-476.

145. Эллиот В., Эллиот Д. Биохимия и молекулярная биология. Пер. с англ. М.: МАИК «Наука/Интерпериодика», 2002. 446 с.

146. Kim J., Kim I.S., Chod Т.Н., Lee K.B. Bone regeneration using hyaluronic acid-based hydrogel with bone morphogenic protein-2 and human mesenchymal stem cells // Biomaterials. 2007. V. 28. P. 1830-1837.

147. Wozney J. M. Overview of bone morphogenetic proteins // Spine. 2002. V.27. P. S2-S8.

148. Boyne P.J., Animal studies of application of rhBMP-2 in maxillofacial reconstruction // Bone. 1996. V. 19. P. S83-S92.

149. Kuhl P.R., Griffith-Cima L.G. Tethered epidermal growth factor as paradigm for paradigm for growth factor-induced stimulation from the solid phase //Nat. Med. 1996. V. 2. P. 1022-1027.

150. Gobin A.S., West J.L. Effects of epidermal growth factor on fibroblast migration through biomimetic hydrogels // Biotech. Prog. A 2003. V.67. P. 255-259.

151. Sakiyama S.E., Hubbel J.A. Development of fibrin derivatives for controlled release of heparin-binding growth factors // J. Contr. Release. 2000. V. 65. P.389-402.

152. Kapur T.A., Shoichet M.S. Chemically bound nerve growth factor for neural tissue engineering applications // J. Biomater. Sci. Polym. Ed. 2003. V. 14. P.383-394.

153. Платэ H.A., Литманович А.Д., Hoa O.B. Макромолекулярные реакции. M.: Химия. 1977. 254 с.

154. Власов В.В., Грачев М.А., Лаврик О.И. и др. Аффинная модификация биополимеров. Новосибирск: Наука, 1983. 241 с.

155. Kovensky J., Cirelli A.F. Chemical modification of glycosaminoglycans. Sulphation of heparan sulphate derivatives obtained by periodate oxidation/borohydride reduction // Carbohydr. Polym. 1996. V. 31. P. 211-214.

156. Tiziani S., Sussich F., Cesaro A. The kinetics of periodate oxidation of carbohydrates 2. Polymeric substrates // Carbohyd. Res. 2003. V. 338. P. 1083-1095.

157. Pasut G., Veronese F.M. Polymer-drug conjugation, recent achievements and general strategies // Progress in Polymer Science. 2007. V. 32, №8-9. P. 933-961.

158. Thordarson P., Le Droumaguet В., Velonia K. Well-defined protein-polymer conjugates— synthesis and potential applications // Applied Microbiology and Biotechnology. 2006. V. 73, № 2. P. 243-254.

159. Freshney R.I. Culture of animal cells: a manual of basic technique. 2-nd edn. NY.: Alan R. Liss, 1987-672 p.

160. Адаме P. Методы культуры клеток для биохимиков. Пер. с англ. М.: Мир, 1983. 263 с.

161. Freshney R.I. Use of tissue culture in predictive testing of drug sensitivity // Cancer Topics. 1978 -V.l.P. 5-7.

162. Lloyd C.W., Rees D.A., Smith C.G., Judge F.J. Mechanism of cell adhesion: early-forming junctions between aggregating fibroblasts // J. Cell Sci. 1976. V. 22. P. 671-684.

163. Troyanovsky S. M. Mechanism of cell-cell adhesion complex assembly // Current Opinion in Cell Biology. 1999. V. 11, №5. P. 561-566.

164. Luo E., Liu X., Wei S.C., Cai X.X., Hu J. Osteoblast adhesion to clodronate-hydroxyapatite composite // Applied Surface Science. 2008. V. 255, № 2. P. 308-311.

165. Buma P., Schreurs W., VerdonschotN. Skeletal tissue engineering-from in vitro studies to large animal models // Biomaterials. 2004. V. 25. P. 1487-95.

166. Liu Q., Cen L., Yin S., Chen L., Liu G., Chang J., Cui L. A comparative study of proliferation and osteogenic differentiation of adipose-derived stem cells on akermanite and p-TCP ceramics // Biomaterials. 2008. V. 29, № 36. P. 4792-4799.

167. Lane R.F., Tripp E.J. Basic fuchsin and the preparation of Schiffs reagent // Med Lab Technol. 1971. V. 28, №1. P. 26-34.

168. Досон P., Эллиот Д., Эллиот У., Джонс. К. Справочник биохимика. М.: Мир, 1991. 556 с.

169. Калашникова И.В. Адсорбция биологических частиц (вирусов) на функционализированной поверхностиполимерных сорбентов монолитного типа: Дис. канд. хим. наук. СПб.: 2008. 170 с.

170. Svec F., Huber C.G. Monolith Materials. Promises, Challenges, Achievements // Anal. Chem. 2006. V. 78. P. 2100-2107.

171. Organization for Economic Cooperation and Development, Principles of Good Laboratory Practice. OECD Publications.: Paris, 1998. 39 p.

172. Whistler R.L. (Ed.) Methods in carbohydrate chemistiy. V. 5 // General polysacharides. NY, London: Academic Press, 1965. 463 p.

173. Наканиси К. Инфракрасные спектры и строение органических соединений. М.:Мир, 1965. 251 с.

174. Структурные исследования макромолекул спектроскопическими методами. Пер. с англ. / Под ред. Бучаченко A.JI. М.: Химия, 1980. 304 с.

175. Кулькова А.Е., Малькова Л.В., и др. Получение и свойства сополимеров аллиловых эфиров фтапевых и алкилакриловых кислот с метилметакрилатом // Высокомолекул. соедин. 1980. Т. 22Б, №2. С. 131-134.

176. Органические реакции. Сборник 13. Пер. с англ. / Под ред. Луценко И. Ф. М.: Мир, 1966. 490 с.

177. Vlakh E., Panarin E., Tennikova Т., Suck K., Kasper C. Development of multifunctional polymer-mineral composite materials for bone tissue engineering // J. Biomed. Mat. Res. 2005. V. 75. P. 333-341.

178. Smith J.W., Cheresh D.A. The Arg-Gly-Asp binding domain of the vitronectin receptor // J. Biol. Chem. 1988. V.263, № 35. P. 18726-18731.

179. Brinke G.,-Ruokolainen J., Ikkala O. Supramolecular materials based on hydrogen-bonded polymers//Adv. Polym. Sci. 2007. V. 207. P. 113-177.

180. Benke D., Olah A., Mohler H. Protein-chemical analysis of Bio-Oss bone substitute and evidence on its carbonate content// Biomaterials. 2001. V.22. P. 1005-1012.

181. Svec F., Tennikova T.B. Polymeric separation media for chromatography of biopolymers in a novel shape: macroporous membranes // J. Bioact. Compat. Polym. 1991. V. 6. P. 95-107.

182. Gendler E., Gendler S., Nimni E. Toxic reactions evoked by glutaraldehyde-fixed pericardium and cardiac valve tissue bioprothesis // J. Biomed. Mat. Res. 1984. V. 18. P. 727-736.