Антимикробные белки и пептиды как эндогенные иммуномодуляторы при экспериментальном стрессе тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.03, кандидат наук Янкелевич, Ирина Алексеевна

• Янкелевич, Ирина Алексеевна
• кандидат наук
• 2014

Оглавление диссертации кандидат наук Янкелевич, Ирина Алексеевна

ОГЛАВЛЕНИЕ

1. ВВЕДЕНИЕ

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1. Морфо-функциональная характеристика нейтрофильных гранулоцитов

2.2. Характеристика белков и пептидов нейтрофильных гранулоцитов

2.2.1. Лактоферрин

2.2.2. Антимикробные пептиды. Структура. Классификация. Механизмы действия

2.2.2.1. Дефенсины нейтрофильных гранулоцитов крыс

2.3. Антимикробные белки и пептиды в реакциях врожденного и приобретенного иммунитета

2.4. Физиология стресса

2.5. Стресс и иммунная система

2.5.1. Стресс и система крови

3. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Экспериментальные животные и модель исследования

3.2. Получение биологического материала

3.2.1. Получение экссудата

3.3. Выделение дефенсинов из нейтрофилов экссудата крыс

3.3.1. Экстракция катионных пептидов из лейкоцитарных клеток

3.3.2. Ультрафильтрация

3.3.3. Высокоэффективная жидкостная хроматография

3.3.4. Удаление примеси липополисахарида

3.4. Электрофоретические методы

3.4.1 Электрофорез в кислой буферной системе

3.5. Иммунохимические методы исследования

3.5.1. Получение антисывороток к дефенсинам

3.5.1.1. Конъюгация дефенсинов крысы с овальбумином

3.5.1.2. Иммунизация кроликов конъюгатом дефенсинов с

овальбумином

3.5.2. Выделение антител к дефенсинам крысы из антисывороток

3.5.2.1. Связывание дефенсинов крысы с цианоген бромид-активированной агарозной матрицей

3.5.2.2. Выделение из антисыворотки фракции белков, обогащенной иммуноглобулинами, методом высаливания

3.5.2.3. Выделение антител к дефенсинам крысы из фракции белков, обогащенной иммуноглобулинами, методом аффинной хромотографии

3.5.3. Конъюгация антител с пероксидазой хрена

3.5.4. Иммуноцитохимический метод анализа сыворотки на наличие специфических антител

3.5.5. Процедура иммуноферментного анализа по определению концентрации Яа1МР-3 в плазме крови экспериментальных крыс

3.5.6. Иммуноферментный анализ по определению концентрации кортикостерона

3.6. Цитологические методы исследования

3.6.1. Подсчет лейкоцитарной формулы крови

3.6.2. Подсчет количества лейкоцитов в камере Горяева

3.7. Определение примеси ЛПС в пробах

3.8. Метод полимеразой цепной реакции

3.8.1. Выделение матричной РНК из спленоцитов крыс

3.8.2. Получение к ДНК из мРНК

3.8.3. Проведение полимеразной цепной реакции

3.9. Статистическая обработка результатов

4. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

4.1. Выделение дефенсинов крыс из нейтрофильных гранулоцитов

4.1.1. Экстракция катионных белков и пептидов из лейкоцитов крысы

и их фракционирование методом ультрафильтрации

4.1.2. Очистка и разделение дефенсинов методом обращенно-фазовой

высокоэффективной жидкостной хроматографии

4.2. Разработка иммуноферментной тест-системы для определения концентрации Б^МР-З в биологических жидкостях крыс

4.3. Иммуномодулирующие свойства антимикробных белков и

пептидов нейтрофильных гранулоцитов

4.3.1. Динамика изменений концентрации кортикостерона, распределения лейкоцитов в крови и дегрануляции нейтрофильных гранулоцитов у крыс при экспериментальном стрессе

4.3.2. Динамика изменений экспрессии генов цитокинов и Т1Л4 в селезенке крыс при экспериментальном стрессе

4.3.3. Влияние введения лактоферрина человека и дефенсина крысы Яа1ЫР-3 на лейкоцитарный состав крови, продукцию кортикостерона, экспрессию генов цитокинов и ТЬЯ4 крысы в отсутствии стрессирующего воздействия

4.3.4. Влияние введения лактоферрина человека на развитие стресс-реакции в условиях экспериментального стресса

4.3.5. Влияние введения лактоферрина и ЛПС на стресс-индуцированные изменения в экспрессии генов про- и противовоспалительных цитокинов и ТЫ14

4.3.6. Влияние введения дефенсина крыс Ка1ЫР-3 на течение экспериментального стресса

4.3.7. Влияние введения антител к суммарной фракции дефенсинов

крыс на течение экспериментального стресса

5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

6. ВЫВОДЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

•и

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Антимикробные белки и пептиды как эндогенные иммуномодуляторы при экспериментальном стрессе»

1. ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы

Антимикробные белки (лактоферрин, пероксидазы, лизоцим, серпроцидины) и пептиды (дефенсины, кателицидины) животных являются ведущими молекулярными факторами врожденного иммунитета. За два последних десятилетия активного изучения этих белково-пептидных соединений были описаны их различные структурные и функциональные свойства, наиболее изученным из которых является их прямая антимикробная активность. В последнее время появляется все больше данных о том, что роль катионных антимикробных белков и пептидов в защитных реакциях организма не ограничивается только их антибиотическим действием. Особый интерес представляют иммуномодулирующие свойства этих соединений как эндогенных регуляторов иммунного ответа. Показано, что лактоферрин, связывая липид А, может оказывать влияние на иммунные реакции, в которые вовлечены липополисахариды, в частности, на высвобождение цитокинов клетками мононуклеарной фагоцитирующей системы [54]. Кроме того, лактоферрин может избирательно связываться с ДНК и влиять на экспрессию некоторых генов [109]. Существуют публикации, указывающие на возможное участие белков нейтрофильных гранулоцитов - лактоферрина [142] и миелопероксидазы [224] в регуляции синтеза интерлейкина 1 - одного из ключевых модуляторов защитных функций организма [13].

Описано действие антимикробных пептидов (АМП) на ряд таких процессов, как хемотаксис, апоптоз, транскрипция и продукция цитокинов [200; 202]. Кроме того, существуют данные о роли АМП в заживлении ран и ангиогенезе [1; 27; 28].

Одной из самых распространенных причин, вызывающих изменения иммунного ответа, являются стрессирующие воздействия, которые приводят >\1< "V < ' ■ У " ; 1 • ■ ! 'и'Л"."4 ■

к перераспределительным реакциям лейкоцитов крови, изменению гормонального уровня и продукции цитокинов [12; 235]. Несмотря на то, что нейтрофилез является давно известным и одним из классических проявлений стресс-реакции, биологический смысл этого явления остается до конца не ясным. Поиски ведутся преимущественно в направлении изучения стресс-индуцированных изменений функциональной активности этих клеток [36; 88].

В то же время можно предположить, что те антимикробные белки и пептиды, которые секретируются из нейтрофилов, обладают не только антибиотическим действием, но и в соответствии с принципами регуляции физиологических реакций могут оказывать влияние на развитие стресс-реакции и иммунного ответа. Показано, что введение лактоферрина изменяет поведенческие реакции у крыс в тесте «замирания», вызванного страхом [218] и нормализует иммунный ответ у животных, подвергнутых иммобилизационному стрессу [87]. В свою очередь, стрессорные гормоны влияют на степень насыщения лактоферрина железом и его функциональные свойства [89].

Установлено, что дефенсины могут влиять на антителообразование [79] и на уровень кортикостероидов в условиях экспериментального стресса у животных [2; 22].

Совокупность рассмотренных данных свидетельствуют о многостороннем характере взаимодействий между антимикробными белками и пептидами, цитокиновой сетью и стрессорными гормонами, многие стороны биологической значимости которых остаются в значительной степени не изученными.

Настоящая работа посвящена изучению роли антимикробных белков и пептидов как эндогенных иммуномодуляторов в регуляции иммунных и нейроэндокринных реакций при экспериментальном стрессе.

Целью работы явилось изучение иммуномодулирующего действия антимикробного белка лактоферрина и пептидов дефенсинов в условиях стрессирующего воздействия на организм экспериментальных животных.

Задачи исследования:

1. Выделить в высокоочищенном виде дефенсины из лейкоцитов крысы, получить поликлональные антитела к ним и на их основе разработать иммуноферментную тест-систему для выявления дефенсина крысы И^ЫР-З в биологических жидкостях.

2. Исследовать секрецию содержимого гранул нейтрофильных гранулоцитов крыс, оцениваемую по динамике изменений концентрации эндогенных дефенсинов в плазме крови крыс с помощью разработанной иммуноферментной тест-системы, в условиях экспериментального стрессирующего воздействия.

3. Изучить динамику изменений экспрессии генов про- и противовоспалительных цитокинов в клетках селезенки крыс в условиях иммуносупрессивного стрессирующего воздействия (плавание в холодной воде), введения дефенсина крысы И^ЫР-З, лактоферрина человека и ЛПС.

4. Исследовать динамику стресс-инду цированных изменений продукции кортикостерона и перераспределения лейкоцитов крови при введении экспериментальным животным дефенсина крысы К^ЫР-З и лактоферрина человека.

5. Изучить стресс-индуцированную продукцию кортикостерона у крыс в условиях выведения эндогенных дефенсинов из циркуляции с использованием специфических антител.

Научная новизна работы

1. Разработана иммуноферментная тест-система для выявления дефенсинов крысы в биологических жидкостях. Установлено, что средняя концентрация дефенсина И^КР-З в плазме крови у интактных животных составляет 36±6,18 нг/мл (среднее±ошибка среднего), а относительное содержание - 9,82±3,02 нг/1 млн нейтрофилов.

2. Впервые показано, что в условиях экспериментального стресса (плавание в холодной воде при температуре +2°-4°С) имеет место повышение экспрессии генов противовоспалительного цитокина 1Ь-4 и паттерн-распознающего рецептора ТЫ14 в клетках селезенки экспериментальных животных.

3. Впервые продемонстрировано, что введение дефенсина крысы К^ЫР-З и лактоферрина человека экспериментальным животным модулирует перераспределение лейкоцитов крови, уровень экспрессии про- и противовоспалительных цитокинов в клетках селезенки крыс и снижает уровень кортикостерона при экспериментальном стрессе.

4. Впервые показано, что выведение эндогенных дефенсинов крысы из циркуляции с использованием специфических антител влияет на продукцию кортикостерона при экспериментальном стрессе.

Теоретическая и практическая значимость результатов работы

Исследование направлено на изучение роли молекулярных компонентов системы врожденного иммунитета - антимикробных белков и пептидов, в реализации и регуляции нейроэндокриноиммунных взаимодействий в условиях стрессирующего воздействия на организм. Получены приоритетные данные о взаимодействии компонентов цитокиновой сети - провоспалительных и противовоспалительных цитокинов, стрессорных гормонов, антимикробных пептидов дефенсинов и

антимикробного белка лактоферрина в процессе регуляции защитных функций организма при экспериментальном стрессирующем воздействии. В частности, получены доказательства участия эндогенных дефенсинов в регуляции уровня глюкокортикоидов в крови. Показано, что в условиях экспериментального стресса в клетках селезенки возрастает экспрессия гена паттерн-распознающего рецептора ТЬРМ, что говорит об активации рецепторных механизмов врожденного иммунитета в условиях, не связанных напрямую с взаимодействием организма с патогенами. Продемонстрировано, что введение дефенсинов и лактоферрина нормализует стресс-индуцированые изменения количества нейтрофильных гранулоцитов в крови и экспрессии генов цитокина 11>-4 и ТЬЯ4 в клетках селезенки.

Результаты работы способствуют расширению представлений о механизмах реализации и регуляции нейроэндокриноиммунных взаимодействий у животных в условиях стрессирующего воздействия.

Полученные данные об иммуномодулирующем действии антимикробных белков и пептидов могут иметь важное практическое значение для разработки на их основе новых лекарственных препаратов, сочетающих в себе свойства антибиотиков и иммуномодуляторов.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Разработана иммуноферментная тест-система для выявления дефенсина крысы И^ЫР-З в биологических жидкостях. Установлено что средняя концентрация дефенсина К^ЫР-З в плазме крови у интактных животных составляет 36±6,18 нг/мл (среднее±ошибка среднего), а относительное содержание - 9,82±3,02 нг/1 млн нейтрофилов.

Эмоционально-физическое стрессирующее воздействие (плавание в холодной воде) вызывает повышенную секрецию дефенсинов, оцениваемую по концентрации дефенсина, отнесенной к абсолютному количеству нейтрофилов.

2. Введение лактоферрина человека и дефенсина крысы И^КР-З снижает индуцированное стрессом повышение концентрации кортикостерона в крови крыс через 30 минут после аппликации стресса.

3. Лактоферрин человека и дефенсин К^ЬТР-З нормализуют стресс-индуцированный сдвиг лейкоцитарной формулы крови.

4. Дефенсин И^МР-З и лактоферрин человека снижают стресс-индуцированное повышение экспрессии гена противовоспалительного цитокина 1Ь-4, а также гена паттерн-распознающего рецептора ТЬЯ4 в спленоцитах крыс на сроке 3 часа после аппликации стресса.

5. Введение ЛПС не влияет на модулирующее действие лактоферрина в отношении стресс-индуцированной экспрессии генов 1Ь-4 и ТЬЯ4 в селезенке крыс и это иммуномодулирующее действие не связано с кортикостатической активностью лактоферрина.

6. Введение антител к дефенсинам крысы влияет на стресс-индуцированный уровень корикостерона в крови, поддерживая высокий уровень гормона через 3 часа после стрессирующего воздействия.

Апробация работы

Материалы диссертации изложены в 9-и публикациях, из них 3 в журналах, рекомендованных ВАК, в том числе представлены на международных и Всероссийских конференциях:

1. III Международный Симпозиум "Взаимодействие нервной и иммунной систем в норме и патологии", 7-10 июня, 2011 г.,

2. IV Международный Симпозиум "Взаимодействие нервной и иммунной систем в норме и патологии", 18-21 июня, 2013 г., Санкт-Петербург, Россия.

3. Объединенный иммунологический форум - 2013, 30 июня — 5 июля 2013 года, Нижний Новгород, Россия

4. 38-ой Конгресс Федерации Европейских биохимических обществ, Санкт-Петербург, Россия, 6-11 июля, 2013 г.

5. XI Международная конференция по лактоферрину: структура, функции и применение, 6-10 октября, 2013 г., Рим, Италия.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 147 страницах и включает 50 рисунков, 4 таблицы. Работа состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов работы, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов и списка цитируемой литературы. Библиографический указатель содержит 247 источников, в том числе 28 работ на русском и 219 -на иностранных языках.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Антимикробные белки и пептиды животных представляют собой ключевые молекулярные факторы врожденного иммунитета. Механизмы врожденного иммунитета отвечают, прежде всего, за неотложное реагирование организма животных и человека на инфекцию, заключающееся в распознавании ее природы, дискриминации от «своего» и последующей элиминации патогенного начала. У позвоночных эта система иммунной защиты является также базовой, определяющей как резистентность к большинству инфекционных агентов, так и осуществляющей инструктивную роль в реализации иммунных реакций приобретенного типа, которые протекают с участием иммуноглобулинов и Т-лимфоцитов [11; 95].

Реализация экстренной защиты осуществляется с участием специальных рекогносцировочных и эффекторных молекулярных факторов, которые появились и были отобраны в ходе эволюции. По современным представлениям функции эффекторных молекул выполняют антимикробные белки и пептиды (АБП). В настоящее время охарактеризовано более тысячи полипептидов и белков с антимикробными свойствами, выделенных из тканей различных видов позвоночных и беспозвоночных животных. Некоторые из этих соединений, локализованы в гранулах фагоцитарных клеток, другие являются гуморальными факторами и выявляются в различных биологических жидкостях организма.

Рекогносцировочные механизмы врожденного иммунитета детектируют стереотипные и консервативные в эволюции молекулы микроорганизмов. Эти молекулы получили в современной иммунологической литературе название «патоген-ассоциированных молекулярных паттернов», а распознающие их структуры животных клеток и жидкостей получили наименование «паттерн-распознающих рецепторов (молекул)» [129; 130; 131]. Патоген-ассоциированные молекулярные

одновременно целым группам микроорганизмов (липид-А липополисахаридов грамотрицательных бактерий, пептидогликаны клеточной стенки бактерий, липотейхоевые кислоты грамположительных бактерий, формилметиониловые пептиды как N-концевые фрагменты синтезируемых бактериями белков, белок бактериальных жгутиков флагеллин, неметилированные по цитозину CpG пары ДНК микроорганизмов, двуспиральные и односпиральные РНК вирусов). Они детектируются паттерн-распознающими рецепторами клеток иммунной системы животных, что обеспечивает запуск эффекторных (нейтрализирующих и элиминирующих патогены) механизмов врожденного иммунитета. Паттерн-распознающие рецепторы (молекулы) могут быть представлены как гуморальными (маннозо-связывающий лектин, липополисахарид-связывающий белок, пептидогликан-распознающие белки, компоненты системы комплемента, антибиотические пептиды), так и клеточно-связанными молекулами (рецепторы комплемента, макрофагальный маннозный рецептор, Толл-подобные рецепторы, NOD белки, скавенджер рецепторы). Рассматривая эволюционное происхождение этих молекул, необходимо отметить, что многие из них или их предковые формы имеют отношение к морфогенетическим процессам (резорбция, метаморфоз, апоптоз), а их участие в иммунных реакциях формируется в результате межмолекулярных взаимодействий в каждой конкретной ситуации, связанной с необходимостью обеспечения стерильности внутренней среды животного организма [11].

В то же время по мере расширения спектра исследованных патоген-ассоциированных паттернов и соответствующих рецепторов накапливалось все больше данных о том, что эта система не ограничивается только противоинфекционной защитой организма. Показано, что значительное количество эндогенных соединений, получивших название "аларминов" [241], среди которых есть и антимикробные белки и пептиды нейтрофильных гранулоцитов (лактоферрин, миелопероксидаза, дефенсины), являются

лигандами паттерн-распознающих рецепторов [52; 104; 181]. Также в работах отечественных исследователей было показано, что нейтрофильные гранулоциты и их гранулярные белки и пептиды оказывают регулирующее влияние на систему мононуклеарных фагоцитов, иммунный, воспалительно-репаративный ответы, эритропоэз, противоопухолевую устойчивость [7].

В свете этих данных можно предположить, что роль нейтрофилов (и их антимикробных белков и пептидов) в системе защитных реакций организма не ограничивается только противоинфекционным действием, начало исследованиям которого положили классические морфофизиологические работы И.И. Мечникова и его учеников, изучавших феноменологию фагоцитарного процесса, осуществляемого нейтрофильными гранулоцитами (микрофагами) и макрофагами, и показавших его незаменимую роль во врожденном иммунитете животных к инфекционным агентам различной биологической природы.

2.1. Морфо-функциональная характеристика нейтрофильных

гранулоцитов

Нейтрофильные гранулоциты (НГ) - наиболее многочисленная популяция лейкоцитов. В течение суток в костном мозге человека образуется до 10п клеток, средний период полувыведения которых из циркуляции составляет 6-8 часов. Нейтрофилы - наиболее мобильные клетки организма. Нейтрофильный гомеостаз определяется тонким балансом между гранулоцитопоэзом, нахождением в костном мозге, выходом в кровяное русло, пристеночным стоянием, клиренсом и деструкцией. Клетки маргинального пула уходят в определенные органы (селезенку, печень, костный мозг, слизистую желудочно-кишечного тракта), где они осуществляют свои функции, а потом входят в апоптоз и подвергаются перевариванию макрофагами [175].

Зрелый НГ, выходящий из костного мозга в кровь и ткани, содержит в своих гранулах в преформированном состоянии большинство белково-пептидных веществ, необходимых для выполнения своей основной, наиболее изученной функции - защиты макроорганизма от инфекционных агентов путем фагоцитоза. Формирование этих структур происходит на ранних этапах гранулоцитопоэза НГ в костном мозге, где гранулоциты проходят несколько последовательных стадий созревания, каждая из которых характеризуется специфическими морфобиохимическими изменениями. Начальная клетка - миелобласт, образующаяся в результате деления унипотентной клетки-предшественницы, имеет незернистую цитоплазму и большое овальное ядро. Миелобласт путем деления дает начало промиелоциту. Интенсивный синтез РНК, липидов, полисахаридов и белков — основная особенность обмена веществ промиелоцита. На этом этапе от внутренних цистерн пластинчатого комплекса начинают отпочковываться инициальные вакуоли. Слияние таких вакуолей уже вне зоны аппарата Гольджи приводит к формированию в промиелоцитах азурофильных (первичных) гранул [135].

В зрелых азурофильных гранулах содержатся дефенсины, кислые гидролазы (р-глицерофосфатаза, Ы-ацетил-р-гликозаминидаза, Р-глюкуронидаза, а-маннозидаза, катепсин Т>, катепсин В), нейтрально-щелочные протеазы (эластаза, катепсин в), лизоцим и миелопероксидаза (МПО). Прекращение синтеза МПО совпадает с окончанием формирования азурофильных гранул и переходом клетки после одного-двух делений в следующую стадию дифференцировки - миелоцитарную [60].

На этом этапе своего созревания клетка уменьшается в размерах, ядро становится сегментированным, хроматин более конденсированным. Заметно уменьшается количество митохондрий, рибосом, начинает редуцироваться эндоплазматический ретикулум и комплекс Гольджи. Вместе с тем идет синтез новых белков и образование еще одного типа гранул - специфических

(вторичных). В отличие от азурофильных в этом случае инициальные

!("УИ V ^ 'Ч ' м ч 1" '! '!'}'»' 1 ' ' 1 '' ^ 1 Ч1'1

вакуоли отпочковываются от внешних цистерн аппарата Гольджи. Так же как и азурофильные, зрелые специфические гранулы образуются путем слияния инициальных вакуолей и конденсации их содержимого. Специфические гранулы меньше азурофильных по размеру и значительно менее электронноплотные [135].

Содержимое специфических гранул существенно отличается от такового азурофильных. Общим белком для обоих типов гранул является только лизоцим. В специфических гранулах отсутствуют кислые гидролазы, для них характерно присутствие лактоферрина, белка, связывающего витамин В12, из нейтральных протеиназ содержится только разновидность коллагеназы - желатиназа [60].

Миелоцит является последней делящейся клеткой миелоидного ряда лейкоцитов. На последующих стадиях созревания НГ (метамиелоцита, папочкоядерного и сегментоядерного НГ), не сопровождающихся делением клеток, наблюдается гетерохроматинизация ядерного материала, редукция трансляционного и митохондриального аппарата, исчезновения эргастоплазмы и пластинчатого комплекса. В то же время гранулообразование продолжается вплоть до стадии палочкоядерного НГ, когда происходит формирование желатиназных (третичных) гранул, основным белком которых является желатиназа [60; 174].

Кроме разницы в содержимом, гранулы еще различаются по степени и последовательности их участия в экзоцитозе (дегрануляции) в ответ на различные стимулы. Первыми мобилизуемыми гранулами являются секреторные везикулы [59; 116; 207]. Содержимое этих везикул составляют белки плазмы крови [116; 212]. В то же время их мембрана содержит большое количество рецепторов (табл. 2.1.1 [60]), которые при мобилизации везикул становятся частью рецепторного аппарата мембраны нейтрофила и способствуют его превращению из «пассивной» клетки, циркулирующей в кровотоке в (32-интегрин-экспрессирующую клетку [69; 194], что

содержимое во внеклеточную среду - желатиназные (третичные) гранулы, затем - специфические (вторичные) и в последнюю очередь - азурофильные (первичные) [164; 206; 238; 239; 240].

В очаге воспаления имеет место полная активация нейтрофилов, инициирующая окислительный взрыв и мобилизацию специфических и азурофильных гранул. Эти гранулы сливаются с фаголизосомой или высвобождают свое содержимое в ткани. Слияние специфических гранул с плазматической мембраной НГ особенно важно для реализации окислительного взрыва, так как цитохром Ь558, являющийся ведущим компонентом НАДФН-оксидазной системы, исходно расположен на мембране специфических гранул [233].

Хотя способность зрелых нейтрофилов к синтезу de novo очень ограничена, для активированных клеток показано увеличение экспрессии целого ряда генов, включая гены цитокинов (IL-ip, IL-12, TNFa и др.), хемокинов (IL-8, MIP-la, MIP-ip) и транскрипционных факторов (NFkB, IRF3 и др.) [103; 196].

Таблица 2.1.1 Содержимое гранул нейтрофилов гранулоцитов человека

Азурофильные гранулы Специфические i ранулы Желашназные гранулы Секреюрные везикулы

Мембрана Мембрана Мембрана Мембрана

CD63 CD lib CD lib Щелочная фосфатаза

CD68 CD 15 Цитохром Ь558 CR1

V-тиа f-T-A ("Фазы CD66 Диацилглииерол-деацилирующий фермент Цитохром bîsg

CD67 fMLP-R CDS lb

Цитохром b5s8 SCAMP CD14

fMLP-R Рецешор акшватора плазмнногина урокиназнаго мша CD16

Фибронекшн-R VAMP-2 1MLP-R

G-белок „-субьсдсница V-typeH'-ATPase SCAMP

Ламинин-R Рецешор ак! ива юра илазмино! и на урокиназнаго шла

NB 1 антиген V-гип Ц'-АТФазы

19-kD белок VAMP-2

155-kD белок CD10, CD13, CD45

Rapl, Rap2 рецептор Сlq

SCAMP DAF

Тромбоспондин-R

TNF-R

Активатор плазминогина урокиназнаго типа-R

VAMP-2

Витронектин-R

Азурофильные гранулы Специфические гранулы Желатиназные гранулы Секреторные везикулы

Матрикс Матрикс Матрикс Матрикс

Кислый мукополисахарид Коллагеназа Ацетилтрансфераза Плазменные белки

О]-Антитрипсин Желатиназа р2-Микроглобулин

а-Маннозидаза ЬСАР-18 Желатиназа

Азуроцидин/САР37/гепарин связывающий белок Гнетам иназа Лизоцим

Бактерицидный белок, увеличивающий проницаемость мембран Гепариназа

Р-Глицерофосфатаза Иактоферрин

Р-глицерофосфатазная кислота Лизоцим

Р-Глю куронидаза ШАЬ

Катепсины Урокиназный активатор плазминогена

Дефенсины Сиалидазы

Эластаза 8вР28

Лизоцим ВитаминВ^-связывающий белок

Миелопероксидаза р2-Микроглобулин

М-ацетил-Р-глюкозаминидаза

Протеиназа-3

Сиалидаза

Убиквитин-белок

2.2 Характеристика белков и пептидов нейтрофильных гранулоцитов

Необходимо отметить, что секреция содержимого гранул происходит не только во время фагоцитоза в местах воспаления. В плазме крови в норме всегда присутствуют гранулярные белки и пептиды, количество которых может меняться при некоторых заболеваниях. С точки зрения клиницистов, эти белки и пептиды прежде всего - маркеры функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов, которые рассматриваются в качестве ведущих клеточных факторов врожденного иммунитета, а также как универсальные звенья гомеостаза, реагирующие на многочисленные сигналы о нарушении постоянства внутренней среды [17]. Выявление этих соединений связано, во-первых, с использованием их для оценки резервных возможностей защитных функций макроорганизма, во-вторых, для определения глубины и динамики патологических процессов, прежде всего связанных с инфекцией.

В работах, посвященных выявлению гранулярных белков нейтрофилов в биологических жидкостях - чаще всего миелопероксидазы, лактоферрина и дефенсинов - показано, что инфекционный процесс приводит, как правило, к первоначальному повышению содержания этих белков и пептидов в сыворотке и плазме крови [5; 9; 44; 94; 151; 183; 184; 203], которое снижается до нормы при благоприятном течении болезни. Резкое возрастание концентрации этих белков в крови особенно характерно для бактериальных инфекций: сепсиса [94; 183], муковисцидоза, бактериальной инфекции нижних дыхательных путей [44], пневмонии [9], перитонита [15].

Несколько иная картина имеет место при вирусных заболеваниях. Показано, что при некоторых острых вирусных инфекциях содержание ЛФ в нейтрофилах и плазме крови снижается [49]. ВИЧ-инфицированные пациенты имеют уровень ЛФ в плазме крови значительно ниже нормы [122]. Установлено, что в ходе обострения хронической герпетической инфекции уровень ЛФ в сыворотке крови не превышает норму, но возрастает по мере

развития ремиссии, в то время как уровень МПО остается выше нормы на всем протяжении заболевания, как при обострении, так и при ремиссии [26].

Данные, полученные при исследовании содержания МПО, ЛФ и дефенсинов в сыворотке крови при различных инфекциях позволяют сделать вывод, что такие измерения дают возможность не только прогнозировать течение болезни, но и диагностировать различные формы заболевания. Так повышение уровня МПО в сыворотке крови больных бронхиальной астмой говорит о бактериальной природе заболевания [44].

Рассмотрим подробнее свойства лактроферрина -многофункционального белка, маркера специфических гранул нейтрофильных гранулоцитов и антимикробных пептидов, содержащихся в азурофильных гранулах, так как эти соединения являются объектом наших исследований.

2.2.1. Лактоферрин

Лактоферрин (ЛФ) - катионный белок с молекулярной массой около 80 кДа, являющийся гликопротеином, который относится к семейству трансферриновых железосвязывающих белков. Впервые ЛФ был выделен Соренсеном и Соренсеном из коровьего молока в 1939 году. В 1960 году тремя независимыми лабораториями было установлено, что ЛФ является основным белком связывающим железо в молоке человека [105; 132; 167]. В последующих исследованиях было установлено, что основным источником ЛФ в плазме крови являются специфические гранулы нейтрофилов [46]. Кроме того, ЛФ был обнаружен в различных жидкостях организма, включая слезы, слюну, жидкости бронхоальвеолярного лаважа, вагинальные выделения и семенную плазму [158]. Лактоферрин человека состоит из одной полипептидной цепи, уложенной в две глобулярные доли [39], с С-(карбокси) и Ы- (амино) концевыми участками полипептидной цепи. Доли

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Янкелевич, Ирина Алексеевна, 2014 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Влияние антимикробного пептида бактенецина 5 и его укороченных фрагментов на пролиферацию фибробластов кожи человека, и на процесс заживления ран у экспериментальных животных [Электронный ресурс] / Е.В. Ямщикова [и др.] // Современные проблемы науки и образования. -2012. - № 3 - Режим ДОСТупа:1ЖЬ: www.science-education.ru/103-6127.

2. Влияние дефенсинов на некоторые иммунологические показатели при иммуносупрессии, вызванной Холодовым стрессом / О.В. Шамова [и др.] // Тезисы конф. «Актуальные проблемы патофизиологии экстремальных состояний». - СПб. 1993.-с. 176.

3. Горизонтов, П. Д. Стресс. Система крови в механизме гомеостаза / П.Д. Горизонтов // Стресс и болезни, в кн.: Гомеостаз. - М., 1981. - с. 538-570.

4. Горизонтов, П.Д. Стресс и система крови / П.Д. Горизонтов, О.И. Белоусова, М.И.Федотова. -М.: Медицина, 1983. - 236 с.

5. Госпитальные респираторные инфекции у детей / Л.В. Осидак [и др. ] // Вестник Российской академии медицинских наук. - 1994. - № 9. - С.10-15.

6. а-Дефенсины из лейкоцитов крови обезьяны Papio hamadryas / Е.В. Цветкова [и др.] // Биохимия. - 2006. - Т. 71, вып. 8. - С. 1083-1090.

7. Долгушин, И.И., Нейтрофилы и гомеостаз / И.И. Долгушин, О.В. Бухарин - Екатеринбург: Изд. УрО РАН, 2001. - 280 с.

8. Дыгай, A.M. Теория регуляции кроветворения / A.M. Дыгай // Бюл. сибирской медицины. - 2004. - №4. - С. 5-10.

9. Клинико-диагностическое значение исследований ферритина и лактоферрина при доброкачественных и злокачественных поражениях легких и плевры / Г.А. Трубников [и др.] // Клиническая медицина. - 1998. -№ 3. - С. 21-26.

10. Кокряков, В.Н. Биология антибиотиков животного происхождения / В.Н. Кокряков. - СПб.: Наука, 1999. - 162с.

11. Кокряков, В.Н. Очерки о врождённом иммунитете / В.Н. Кокряков. -СПб.: Наука, 2006. - 206с.

12. Корнева, Е.А. Гормоны и иммунная система / Е.А. Корнева, Э.К. Шхинек - Л.:Наука., 1988.-251с.

13. Корнева, Е.А. Интерлейкин-1 в реализации стресс-индуцированных изменений функций иммунной системы / Е.А. Корнева, С.Н. Шанин, Е.Г. Рыбакина // Росс. Физиол. Жур. им И.М. Сеченова. - 2000. - Том 86, №3. -С. 292-302.

14. Кэтти, Д. Иммуноферментный анализ / Д. Кэтти , Ч. Райкундалиа // в кн. «Антитела. Методы», - М.: Мир, 1991, кн.2 - С.152-238.

15. Лечебный плазмалейкоцитаферез как метод детоксикации и аутоиммунокоррекции при перитоните / В.Н. Мельникова [ и др.] // Материалы научн.-практ. конф. "Лечебный плазмаферез", - С.-Петербург, 1997. - С.33-35.

16. Мазинг, Ю.А. Морфофункциональные основы антимикробной активности фагоцитов: дис. ... докт. биол. наук : 14.00.23 / Мазинг Юрий . - МЛ995. -244 с.

17. Маянский, А.Н. Клинические аспекты фагоцитоза / А.Н. Маянский, О.И. Пикуза. - Казань, 1993. - 192 с.

18. Мечников, И.И. Лекции о сравнительной патологии воспаления / И.И. Мечников. - СПб.: Издание К.Л.Риккера, 1892. - 162 с.

19. Мечников, И.И. Невосприимчивость в инфекционных болезнях / И.И. Мечников. - СПб.: Издание К.Л.Риккера, 1903. - 604 с.

20. Миелопероксидаза и лактоферрин в сыворотке крови и ликворе детей больных менингитом / Н.М. Ботерашвили [и др.] // Медицинская иммунология. - 2002. - Т. 4. - № 4-5 - С. 565-572.

21. Мороз, Б.Б. Актуальные проблемы патофизиологии / Б.Б. Мороз. - М: Медицина, 2001. - 424 с.

22. Орлов, Д.С. Эффекты действия дефенсинов при стрессе. Автореф. Дисс. ... канд. биолог, наук . СПб. 1998. - 20 с. ; >

23. Пигаревский, В.Е. Зернистые лейкоциты и их свойства / В.Е. Пигаревский. -М., 1978.- 128 с.

24. Пшенникова, М.Г. Роль опиоидных пептидов в реакции организма на стресс / М.Г. Пшенникова // Пат. физиол. - 1987 - № 3. - С. 85-90.

25. Фенотипическая и функциональная характеристика субпопуляций Т-лимфоцитов-регуляторов, принимающих участие в стимуляции гемопоэза при стрессе / A.M. Дыгай [и др.] // Бюл. эксперим. биологии и медицины. -1989. - Т. 107, N5. - С. 590-593.

26. Функциональная активность нейтрофильных гранулоцитов у больных рецидивирующим герпесом / Т.С. Брязжикова [ и др.] // Бюлл. эксперим. биол. и мед. - 1995. -Т. 120, №9. - С. 329-331.

27. Шамова О.В. Молекулярно-клеточные основы реализации биологической активности антимикробных пептидов лейкоцитов. Автореф. Дис. ... докт. Биолог. Наук. СПб. 2013. - 46 с.

28. Эффект многократного внутримышечного введения дефенсина на противосвертывающую систему и ангиоархитектонику скелетной мышцы / Б. Кудряшов [и др.] // ДАН СССР сер. биол. - 1989. - Т. 304, № 2. - С. 494498.

29. Activation of human neutrophils by phorbol ester decreases the cytoplasm compactness and the lactoferrin content of the granulocytes / N. Esaguy [et al.] // Journal of Leukocyte Biology. - 1991. - Vol. 50. - P. 444-452.

30. Activation of human neutrophils through L-selectin and mac-1 molecules / E. Crockett-Torabi [et al.] //J. Immunol. - 1995. - Vol. 154. - P. 2291-2311.

31. Adenoviral Transduction of Mesenchymal Stem Cells: In Vitro Responses and In Vivo Immune Responses after Cell Transplantation /О. Treacy [et al.]// PLoS ONE. - 2012. - Vol. 7, No. 8. - e42662.

32. Ader, R. Psychoneuroimmunology / R. Ader , D.L. Felten, N.Cohen. - 3rd ed. -N.Y.: Academic Press, 2001. - 278 p.

33. Agarwal, S.K. Stress effects on immunity and its application to clinical Immunology / S.K. Agarwal, G.D. Marshall // Clinical and Experimental Allergy. - 2001. - Vol. 3. - P. 25-31.

34. Aisen, P. Lactoferrin and transferrin: a comparative study / P. Aisen, A. Liebman // Biochimica et Biophysica Acta. - 1972. - Vol. 257. - P. 314-323.

35. Aleshina, G.M. The effect of a-defensins on cytokine networks function in rats under experimental stress / G.M. Aleshina, V.N. Kokryakov// Abstracts of the International Symposium "Interaction of the nervous and immune systems in health and disease" May 31 - June 2, 2007.- Saint-Petersburg, Russia. - P. 9]

36. Altered human neutrophil function in response to acute psychological stress / R. Khanfer [et al.] // Psychosomatic Medicine. - 2010. - Vol. 72. - P. 636-640.

37. Amoebicidal activity of milk, apo-lactoferrin, slgA and lysozyme / Leon-Sicairos N. [et al.] // Clin Med Res. - 2006. - Vol. 4. - P. 106-113.

38. An enzyme immunoassay for human defensins / A.V. Panyutich [et al.] // J Immunol Methods.-1991.-Vol. 141.-P. 149-155

39. Anderson, B. F. Structure of human lactoferrin at 3.2-Aresolution/ B.F. Anderson, H.M. Bakerh, J. Dodsone // Proc Natl Acad. - 1987. - Vol. 84. - P. 1769-1773.

40. Antimicrobial peptides: mediators of innate immunity as templates for the development of novel anti-infective and immune therapeutics /P.S. Hiemstra [et al.] // Curr Pharm Des. - 2004. - Vol. 10. - P. 2891 -2905.

41. Antimicrobial peptides: properties and applicability / van't Hof W. [et al.] // Biol. Chem. - 2001. - Vol. 382. - P. 597-619.

42. Antiviral activities of lactoferrin / B.W.A. Van der Strate [et al.] // Antiviral Res. - 2001. - Vol. 52. - P. 225-239.

43. Ashorn, R.G. Effect of the progesterone-inducible proteins human lactoferrin and chicken avidin on lymphocyte proliferation / R.G. Ashorn [et al.] // Human Reproduction. - 1986. - Vol. 1. - P. 149-151.

44. Assessment of serum myeloperoxidase in children with bronchial asthma / E. Tauber [et al.] // Allergy. - 1999. - Vol.54, №2. - P. 177-182.

45. Avitsur, R. Social interactions, stress, and immunity / R. Avitsur , D.A. Padgett, J.F. Sheridan // Neurol Clin. - 2006. - Vol. 24. - P. 483-491.

46. Bagiolini, M. Association of lactoferrin with specific granules in rabbit heterophil leukocytes / Bagiolini M., de Duve C., Masson P.L., Heremans J.F. // J.Exp.Med. 1970. Vol.131, N 3. P.559-570.

47. Baker, E.N. Lactoferrin molecular structure, binding properties and dynamics of lactoferrin / E.N. Baker, H.M. Baker // Cell Mol Life Sci. - 2005. - Vol. 62. -P.2531-2539.

48. Baker, E.N. Structure and reactivity of transferrins / E.N. Baker // Advances in Inorganic Chemistry. - 1994. - Vol. 41. - P. 389-463.

49. Baynes, R.D. Neutrophil lactoferrin content in viral infections / R.D. Baynes, W.R. Bezwoda, N. Mansoor // Am. J. Clin. Pathol. - 1988. - Vol.89. - №2. -P.225-228.

50. Bennett, R.M. Lactoferrin interactswith deoxyribonucleic acid: a preferential reactivity with double-stranded DNA and dissociation of DNA-anti-DNA complex / R.M. Bennett, J. Davis // J Lab Clin Med. - 1982. - Vol. 99. - P. 127138.

51. Bevins, C.L. Paneth cells, antimicrobial peptides and maintenance of intestinal homeostasis / C.L. Bevins, N.H. Salzman // Nature Reviews Microbiology. -2011.-Vol. 9.-P. 356-368.

52. Bianchi, M.E. DAMPs, PAMPs and alarmins: all we need to know about danger / M.E. Bianchi // J. Leukoc.Biol. - 2007. - Vol. 81. - P. 1-5.

53. Biondi, M. Psychological stress, neuroimmunomodulation, and susceptibility to infectious diseases in animals and man: a review / M. Biondi, L.G. Zannino // Psychother Psychosom. - 1997. - Vol. 63. - P. 3-26.

54. Biophysical characterization of lipopolysaccharide and lipid A inactivation by lactoferrin / Brandenburg K. [et al.] // Biol. Chem. - 2001. - Vol. 382. - P.1215-1225.

55. Black, P.H. Central Nervous System-Immune System Interactions: Psychoneuroendocrinology of Stress and Its Immune Consequences/ P.H. .

Black // Antimicrobial agents and chemotherapy. - 1994. - Vol. 38, No 1. - P. 1-6.

56. Blalock, J.E. A molecular basis for bidirectional communication between the immune and neuroendocrine systems / J.E. Blalock // Physiol Rev. - 1989. -Vol. 69, No l.-P. 1-32.

57. Bocchinfuso, G. Different mechanisms of action of antimicrobial peptides: insights from fluorescence spectroscopy experiments and molecular dynamics simulations / G. Bocchinfuso //Journal of Peptide Science. - 2009. - Vol. 15. -P. 550-558.

58. Boman, H.G. Peptide antibiotics and their role in innate immunity/ H.G. Boman // Annu. Rev. Immunol. - 1995. - Vol. 13. - P. 61-92.

59. Borregaard, N. Chemoattractant-regulated mobilization of a novel intracellular compartment in human neutrophils / N. Borregaard, L. Miller, T.A. Springer // Science. - 1987. - Vol. 237. - P. 1204-1215.

60. Borregaard, N. Granules of the human neutrophilic polymorphonuclear leukocyte / N. Borregaard, J.B. Cowland // Blood. - 1997. - Vol. 89, No 10. - P. 3503-3521.

61. Bovine lactoferrin: benefits and mechanism of action against infections / K.Yamauchi [et al.] // Biochem Cell Biol. - 2006. - Vol. 84. - P. 291-296.

62. Brown, K.L. Cationic host defense (antimicrobial) peptides / K.L. Brown, R.E.W. Hancock // Current Opinion in Immunology. - 2006. - Vol. 18. - P. 2430.

63. Broxmeyer, H.E. The opposing actions in vivo on murine myelopoiesis of purified preparations of lactoferrin and the colony stimulating factors / H.E. Broxmeyer//Blood Cells. - 1987. - Vol.13. - P. 31-48.

64. Bury, T.B. Effect of prolonged exercise on neutrophil myeloperoxidase secretion / T.B. Bury, F. Pirnay // Int J Sports Med. - 1995. - Vol. 16. - P. 410412.

65. Calcagani, E. Stress System Activity, Innate and T Helper Cytokines, and Susceptibility to Immune-Related Diseases / E. Calcagani, I. Elenkov // Ann. N.Y. Acad. Sci. - 2006. - Vol. 1069. - P. 62-76.

66. Callard, R.E. Immunoregulation by interleukin-4 in man /R.E. Callard // Br J Haematol. - 1991. - Vol. 78. - P. 293-299.

67. Callard, R.E. The role of interleukin 4 in specific antibody responses by human B cells / R.E. Callard , S.H. Smith, K.E. Scott // Int Immunol. - 1991. - Vol. 3. -P. 157-163.

68. Cellular mechanisms of cold stress-related immunosuppression and the action of interleukin / E.G. Rybakina [et al.] // Int J Tissue React. - 1997. - Vol.19, № 3-4.-P. 135-140.

69. Changes in the subcellular localization and surface expression of L-selectin, alkaline phosphatase, and Mac-1 in human neutrophils during stimulation with inflammatory mediators / N. Borregaard [et al.] // J. Leukoc. Biol. - 1994. -Vol. 56.-P. 80-102.

70. Chrousos, G. P. The hipotolamic-putuitery-adrenal axis and immune-mediated inflammation / G.P. Chrousos // Seminars in medicine of the beth Israel hospital. - Boston. - 1995. - Vol. 332., No 20. - P. 1351-1362.

71. Cohen, S. Psychological Stress and Antibody Response to Immunization: A Critical Review of the Human Literature / S. Cohen, G. Miller, B.S. Rabin // Psychosom Med. - 2001. - Vol. 63. - P. 7-18.

72. Cohn, Z.A. The influence of phagocytosis on the intracellular distribution of granule-associated components of polymorphonuclear leukocytes / Z.A. Cohn, J.G Hirsch. // J. Exp. Med. - 1960. - Vol. 112, No 6. - P. 1015-1022.

73. Connely, O.M. Antiinflammatory activities of lactoferrin / O.M. Connely // J Am Coll Nutr. - 2001. - Vol. 20. - P. 389-395.

74. Corticotropin-releasing factor and the urocortins induce the expression of TLR4 in macrophages via activation of the transcription factors PU.l and AP-1. / Tsatsanis [et al.] // J Immunol. - 2006. - Vol. 176, No 3. - P. 1869-77.

75. Crocker, P.R. Isolation and characterisation of resident macrophages and hemopoietic cell cluster from mouse bone marrow / P.R. Crocker, S. Gordon // J. Exp. Med. - 1985. - Vol. 162, N 3. - P. 993-1014.

76. Crouch, S.P. Regulation of cytokine release from mononuclear cells by the iron-binding protein lactoferrin / S.P. Crouch, K.J. Slater, J. Fletcher // Blood. -1992.-Vol. 80.-P. 235-240.

77. Crystal structure of defensin HNP-3, an amphiphilic dimer: Mechanisms of membrane permeabilization / C.P. Hill [et al.] // Science. - 1991. - Vol. 25, No l.-P. 1481-1485.

78. Deak, E. Exposure to forced swim stress does not alter central production of IL-1 / E. Deak , C. Bellamy, L.G. D'Agostino // Brain Res. - 2003. - Vol. 972. - P. 53-63.

79. Defensin-induced adaptive immunity in mice and its potential in preventing periodontal disease / K.A. Brogden [et al.] // Oral Microbiol. Immunol. - 2003. -Vol. 18.-P. 95-99.

80. DeRijk, R.H. Glucocorticoid receptor variants: clinical Implications / R.H. DeRijk, M. Schaaf, E.R. Kloet // J. Steroid Biochem. - 2002. - Vol. 81. - P. 103122.

81. Devy, A.S. Lactoferrin contains structuralmotifs of ribonuclease / A.S. Devy, M.R. Das, M.W. Pandir // Biochem Biophys Acta. - 1994. - Vol. 114. - P. 299306.

82. Dhoplea, V. The human beta-defensin-3, an antibacterial peptide with multiple biological functions / V. Dhoplea, A. Krukemeyera, A. Ramamoorthy // Biochim. Biophys. Acta. - 2006. - Vol. 1758-P. 1499-1512.

83. Differential effects of alpha- and beta-defensin on cytokine production by cultured human bronchial epithelial cells / N. Sakamoto [et al.] // Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. - 2005. - Vol.288. - P. 508-513.

84. Diurnal and acute stress-induced changes in distribution of peripheral blood leukocyte subpopulations / F.S. Dhabhar [et. al.] // J. Immun. - 1994. - Vol. 8, No l.-P. 66-79. , . ^i,. l . . . ., \ ■, , ,. , .. ,,.. .. ..

85. Effect of exercise to exhaustion on myeloperoxidase and lysozyme release from blood neutrophils / V.l. Morozov [et al.] // Eur J Appl Physiol. - 2003. - Vol. 89. - P. 257-262

86. Effector T cell interactions with meningeal vascular structures in nascent autoimmune CNS lesions / I. Bartholomäus [et al.]// Nature. - 2009. - Vol. 462. -P. 94-98.

87. Effects of lactoferrin on the immune response modified by the immobilization stress / M. Zimecki [et al.] // Pharmacol Rep. - 2005. - Vol. 57. - P. 811-817.

88. Ellard, D.R. The effect of a short-term mental stressor on neutrophil activation / D.R. Ellard, P.C. Castle, R. Mian // Int J Psychophysiol. - 2001. - Vol. 41. - P. 93-100.].

89. Elucidation of the mechanism by which catecholamine stress hormones liberate iron from the innate immune defense proteins transferrin and lactoferrin / S.M. Sandrini [et al.] // J Bacteriol. - 2010. - Vol. 192. - P. 587-594.

90. Emeny, R.T. Beta 1-adrenergic receptors on immune cells impair innate defenses against Listeria / R.T. Emeny,D. Gao, D.A. Lawrence // J. Immunol -2007. - Vol. 178. - P. 4876-4884.

91. Epand, R.M. Diversity of antimicrobial peptides and their mechanisms of action / R.M. Epand, H.J. Vogel // Biochim. Biophys. Acta. - 1999. - Vol. 1462. - P. 11-28.

92. Evaluation of the effects of peptide antibiotics human beta-defensins-l/-2 and LL-37 on histamine release and prostaglandin D(2) production from mast cells /

F. Niyonsaba [et al.] // Eur J Immunol. - 2001. - Vol. 31. - P. 1066-1075.

93. Everly, G.S. Jr. A clinical guide to the treatment of the human stress response /

G.S. Everly, J.M. Lating. - N.Y: Springer, 2013.-456 p.

94. Fast double antibody radioimmunoassay of human granulocyte myeloperoxidase and its application to plasma / J. Pincemail [et al.] // J. Immunol. Methods. - 1991. - Vol. 13 7. - P. 181 -191.

95. Fearon, D.T. The instruclive role of innate immunity in the acquired immune response / D.T. Fearon, R.M. Locksley // Science. - 1996. - Vol. 272. - P.50-54.

96. Finlay, B.B. Can innate immunity be enhanced to treat infections / B.B. Finlay, R.E.W. Hancock // Nat Rev Microbiol. - 2004. - Vol. 2. - P. 497-504.

97. Fleming, A. On a remarkable bacteriolytic ferment found in tissues and secretions / A. Fleming // Proc. Roy. Soc. Lond. - 1922. - Vol.93. - P.306-317.

98. Freidmann, E.M. A role for CRH and the sympathetic nervous system in stress-induced immunosupression / E.M. Freidmann, M.R. Irwin // Ann. N. Y. Acad. Sci.- 1995.-Vol.771 - P. 396 -418.

99. Furmanski, P. Multiple molecular forms of human lactoferrin / P. Furmanski, Z.P. Li, M.B. Fortuna // J Exp Med. - 1989. - Vol. 170. - P. 415-429.

100. Gera, J. F. Human neutrophil peptide defensins induce single strand DNA breaks in target cells / J.F. Gera, A. Lichtenstein // Cell Immunol. - 1991. - Vol. 138.-P. 108-120.

101. Giuliani, A. Antimicrobial peptides: an overview of a promising class of therapeutics / A. Giuliani, G. Pirri, S.F. Nicoletto // Central European Journal of Biology.-2007.-Vol. 2, N 1.-P. 1-33.

102. Glaser, R. Handbook of human stress and immunity / R. Glaser, J. Kiecolt-Glaser. - San Diego: Academic Press, 1994. - pp. 320-341.

103. Global changes in gene expression by human polymorphonuclear leukocytes during receptor-mediated phagocytosis: cell fate is regulated at the level of gene expression / S.D. Kobayashi [et al.] // Proc Natl Acad Sci USA. - 2002. - Vol. 99(10).-P. 6901-6906.

104. Gordon, S. Pattern recognition receptors: doubling up for the innate immune response / S. Gordon // Cell. 2002. - Vol. 111. - P. 927-930.

105. Groves, M.L. The isolation of a red protein from milk / M.L. Groves // J. of the American Chemical Society. - 1960. - Vol. 82. - P. 3345-3350.

106. Ganz, T. Human antimicrobial peptides: analysis and application / T. Ganz // BioTechniques. - 2000. - Vol. 29., N 4. - P. 830-831.

< ' I \ ' < 1 ' r , ' 1» • I

107. Hancock, R.E.W Cationic peptides: a new source of antibiotics / R.E.W. Hancock, R. Lehrer // Trends Biotechnol. - 1998. - Vol. 16. - P. 82-88.

108. Hancock, R.E.W. Antimicrobial and host-defense peptides as new anti-infective therapeutic strategies /R.E.W. Hancock, H.G. Sahl // Nat. Biotechnol. - 2006. -Vol. 24.-P. 1551-1557.

109. He, J. Sequence specificity and transcriptional activation in the binding of lactoferrin to DNA / J. He , P. Furmanski // Nature. - 1995. - Vol. 373. - P.721-724.

110. Human beta-defensin 2 induces a vigorous cytokine response in peripheral blood mononuclear cells / M. Boniotto [et al.] // Antimicrob Agents Chemother. -2006.-Vol.50.-P.1433-1441.

111. Human blood neutrophil responses to prolonged exercise with and without a thermal clamp / S.J. Laing [et al.] // J Appl Physiol. - 2008. - Vol. 104. - P. 2026.

112. Human lactotransferrin: amino acid sequence and structural comparisons with other transferrins / M.H. Metz-Boutique [et al.] // European J. of Biochemistry. - 1984. - Vol.145. - P. 659-676.

113. Human milk-derived lactoferrin inhibits mitogen and alloantigen induced human lymphocyte proliferation / Ellen R. Richie [et al.] // Journal of Reproductive Immunology. - 1987. - Vol 12. - P. 137-148.

114. Human neutrophil defensins selectively chemoattract naive T and immature dendritic cells / D. Yang [et al.] // J Leukoc Biol. - 2000. - Vol. 68. - P. 9-14.

115. Human polymorphonuclear leukocytes inhibit Aspergillus fumigatus conidial growth by lactoferrin-mediated iron depletion / K.A. Zarember [et al.] // J Immunol. -2007. - Vol. 178. - P.6367-6373.

116. Identification of a highly mobilizable subset of human neutrophil intracellular vesicles that contains tetranectin and latent alkaline phosphatase / N. Borregaard [et al.] // J. Clin. Invest. - 1990. - Vol. 85. - P. 408-417.

117. Identification of defensin-1, defensin-2, and CAP37 azurocidin as T-cell chemoattractant proteins released from interleukin-8-stimulated neutrophils / O. Chertov [et al.] // J Biol Chem. - 1996. - Vol. 271. - P. 2935-2940.

118. IL-4, IL-10 and IL-13 modulate A beta(l-42)-induced cytokine and chemokine production in primary murine microglia and a human monocyte cell line / A.M. Szczepanik [et al.] // J Neuroimmunol. - 2001. - Vol. 113. - P. 49-62.

119. Immunomodulatory activities of small host defense peptides / D.M. Bowdish [et al.] //Antimicrob Agents Chemother. - 2005. - Vol. 49. - P. 1727-1732.

120. Immunosuppression in calves caused by heat and cold stress / K.W. Kelley [et al.] // J. of Animal Science. - 1980. - Vol. 51, N. 1. - P. 147.

121. Impact of LL-37 on anti-infective immunity / D.M. Bowdish [et al.] // J Leukoc Biol. - 2005. - Vol. 77. - P. 451-459.

122. Impairment of circulating lactoferrin in HIV-1 infection / M.C. Defer [et al.] // Cell Mol. Biol. (Noisy-le-grand). - 1995. - Vol.41, №3. -P.417-421.

123. Increased neutrophil mobilization and decreased chemotaxis during Cortisol and epinephrine infusions / J.M. Davis [et al.] // Journal of Trauma and Acute Care Surgery. - 1991. - Vol. 31. - P. 725-731.

124. Influences of orally administered lactoferrin on IFN-gamma and IL-10 production by intestinal intraepithelial lymphocytes and mesenteric lymph-node cells / N. Takakura [et al.] // Biochem Cell Biol. - 2006. - Vol.84, No 3. - P. 363-368.

125. Inhibition of activation of the classical pathway of complement by human neutrophil defensins. / van den Berg R. [et al] // Blood. - 1998. - Vol. 92. - P. 3898-3903.

126. Innervation of lymphoid organs and implications in development, aging, and autoimmunity / D.L. Bellinger, [et al.] // Int. S. Immunopharm. - 1992. - Vol 4. -P. 329-344.

127. Interleukin-1 and defensins in thermoregulation, stress and immunity / E.A. Korneva [et. al.] // Annals of NY Acad. Sci. - 1997. - Vol. 812. - P.465-474.

i 1 * i i < 11 L, ' ' « . 1 I t < , > | * '< > I I , ' • ' '

I 1» 1 1 | I

128. Isolation and structure of corticostatic peptides from rabbit fetal and adult lung / Q. Zhu [et al.] // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1988. - № 85. - P. 592-596.

129. Janeway, Ch. Jr. A trip through my life with an immunological theme / Ch. Janeway // Annu. Rev. Immunol. - 2002. - No. 20. - P. 1-28.

130. Janeway, Ch. Jr. Approaching the asymptote? Evolution and revolution in immunology / Ch. Janeway // Cold Spring Harbor Symp. Quant.Biol. - 1989. -Vol. 54.-P. 1-13.

131. Janeway, Ch. Jr. Immunobiology. The immune system in health and disease / Ch.A. Janeway, P. Travers. - 3d ed. - New York, London, 1997. - 540 p.

132. Johanson, B. Isolation of an iron containing red protein from human milk /B. Johanson // Acta Chemica Scandinavica. - 1960. - Vol.14. - P. 510-512.

133. Kemeny, M.E. Psychoneuroimmunology update / M.E. Kemeny, T.L. Gruenewald // Semin Gastrointest Dis. - 1999. - Vol.10. - P. 20-29.

134. Killing of Candida albicans by lactoferricin B, a potent antimicrobial peptide derived from the N-terminal region of bovine lactoferrin / W. Bellamy [et al.] // Med Microbiol Immunol. - 1993. - Vol.182. - P. 97-105.

135. Klebanoff, S. J. The neutrophil: function and clinical disorders / Seymour J. Klebanoff, Robert Amos Clark. // North-Holland Publishing Company - 1978. -810 p.

136. Kuhara, T. Bovine lactoferrin induces interleukin-11 production in a hepatitis mouse model and human intestinal myofibroblasts / T. Kuhara, K. Yamauchi, K. Iwatsuki // Eur J Nutr. - 2012. - Vol.51. - P. 343-351.

137. Kvetnansky, R. Catecholaminergic systems in stress: structural and molecular genetic approaches / R. Kvetnansky // Physiol. Rev. - 2009. - Vol. 89. - P. 535606.

138. Lactoferrin down-regulates the LPS-induced cytokine production in monocytic cells via NF-kappa B / L. Haversen [et al.] // Cellular Immunology. — 2002. -Vol. 220. - P. 83-95.

139. Lactoferrin given in food facilitates dermatophytosis cure in guinea pig models / H.Wakabayashi [et al.] // J Antimicrob Chemother. - 2000. - Vol. 46. - P. 595601.

140. Lactoferrin or a fragment thereof inhibits the endotoxin-induced interleukin-6 response in human monocytic cells / I. Mattsby-Baltzer [et al.] // Pediatr Res. -1996.-Vol. 40.-P. 257-262.

141. Lactoferrin reduces colitis in rats via modulation of the immune system and correction of cytokine imbalance / J. Togawa [et al.] // Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. - 2002. - Vol. 283. - P. 187-95.

142. Lactoferrin release and interleukin-1, interleukin-6, and tumor necrosis factor production by human polymorphonuclear cells stimulated by various lipopolysaccharides: relationship to growth inhibition of Candida albicans / C. Palma [et al.] // Infect Immun. - 1992 - Vol. 60. - P. 4604-4611.

143. Lactoferrin: a modulator of immune and inflammatory responses / D. Legrand [et al.] // Cellular and Molecular Life Sciences. - 2005. - Vol. 62. - P. 25492559.

144. Lactoferrin-mediated protection of the host from murine cytomegalovirus infection by T-cell-dependent augmentation of natural killer cell activity / K. Shimizu [et al.] //Arch Virol. - 1996. - Vol.141. - P. 1875-1889.

145. Lactoferrin-modified PEG-co-PCL nanoparticles for enhanced brain delivery of NAP peptide following intranasal administration / Z. Liu [et al.] // Biomaterials. -2013.-Vol. 34, No 15.-P. 3870-3881.

146. Lauwasser, M. Depressed mitogen responsiveness of lymphocytes at skin temperature / M. Lauwasser , J.W. Shands // Infect. Immun. - 1979. - Vol. 24. -P. 454-459.

147. Legrand, D. Lactoferrin, a key molecule in immune and inflammatory processes / D. Legrand // Biochem Cell Biol. - 2012. - Vol. 90, No 3. - P. 252-268.

148. Lehrer, R. I. Defensins: Endogenous antibiotic peptides of animal cells / R.I. Lehrer, T. Ganz, M.E. Selsted // Cell. - 1991. - Vol. 64. - P. 229-230.

149. Lehrer, R.I. Evolution of antimicrobial peptides: a view from the cystine chapel / R.I. Lehrer // P.S. Hiemstra and S.A.J. Zaat (eds.), Antimicrobial Peptides and Innate Immunity, Progress in Inflammation Research. - Springer Basel. - 2013. P. 1-28.

150. Leitch, E.C. Elucidation of the antistaphylococcal action of lactoferrin and lysozyme / E.C. Leitch, M.D. Willcox // J Med Microbiol. - 1999. - Vol.48 - P. 867-871.

151. Levels of antimicrobial molecules defensin and lactoferrin are elevated in the cerebrospinal fluid of children with meningitis / F.A. Maffei [et al.] // Pediatrics. - 1999. - Vol. 103. - P. 987-992.

152. Levy, O. Antibiotic proteins of polymorphonuclear leukocytes / O. Levy // Eur. J. Haematol. - 1996. - Vol. 56. - P. 263-277.

153. Machnicki, M. Lactoferrin regulates the release of tumour necrosis factor alpha and interleukin 6 in vivo / M. Machnicki, M. Zimecki, T. Zagulski // International Journal of Experimental Pathology. - 1993. -Vol. 74. - P. 433439.

154. Madden, K.S. Catecholamine action and immunologic reactivity / K.S. Madden, S. Livnat // Psychoneuroimmunology, second ed. / In: Ader R, Cohen N, Felten DL, eds. - N.Y.: Academic Press, 1991. - P. 283-310.

155. Madden, K.S. Catecholamines, sympathetic innervation, and immunity / K.S. Madden // Brain Behav. Immun. - 2003. - Vol. 17. - P. 5-10.

156. Majzoub, J. A. Corticotropin-releasing hormone physiology / J.A. Majzoub // European Journal of Endocrinology - 2006. - Vol.155. - P. 71-76.

157. Mammalian defensins in immunity: more than just microbicidal / D.Yang [et al.] // Trends Immun. - 2002. - Vol. 23. - P. 291-296.].

158. Masson, P.L. An iron-binding protein common to many external secretions. / Masson P.L., Heremans J.F., Dive C. // Clin. Chim. Acta. -1966. -Vol. 14, No. 5. -P.735-739.

159. Mechanism of interaction of different classes of cationic antimicrobial peptides with planar bilayers and with the cytoplasmic membrane of Escherichia coli / M.Wu [et al.] // Biochemistry. - 1999. - Vol.38. - P. 7235-7242.

160. Mechanisms for induction of acquired host immunity by neutrophil peptide defensins / J.W. Lillard [et al.] // Proc. Natl. Acad. - 1999. - Vol. 96. - P. 651656.

161. Melo, M.N. Antimicrobial peptides: linking partition, activity and high membrane-bound concentrations / M.N. Melo, R. Ferre, M.A. Castanho // Nat. Rev. Microbiol. - 2009. - Vol. 7 - P. 245-250.

162. Melo, M.N. The mechanism of action of antimicrobial peptides: lipid vesicles vs. bacteria / M.N. Melo, M.A.R.B. Castanho // Front. Immunol. - 2012. - P. 14.

163. Microbial endocrinology: how stress influences susceptibility to infection / P.P. Freestone [et al.] // Trends Microbiol. - 2008. - Vol. 16, No 2. - P. 55-64.

164. Mobilization of granules and secretory vesicles during in vivo exudation of human neutrophils / H. Sengelov [et al.] // J. Immunol. - 1995. - Vol. 154. - P. 4157-4163.

165. Molecular basis for membrane selectivity of an antimicrobial peptide, magainin 2 / Matsuzaki K. [et al.] // Biochemistry. - 1995. - Vol. 34. - P. 3423-3429.

166. Monocytechemotactic activity of defensins from human neutrophils / M.C. Territo [et al.]// J Clin Invest. - 1989. - Vol. 84. - P. 2017-2020.

167. Montreuil, J. Preparation and properties of lactosiderophilin (lactotransferrin) of human milk / J. Montreuil, J. Tonnelat, S. Mullet // Biochimica et Biophysica Acta. - 1960. - Vol. - 45. - P. 413-421.

168. Mosmann, T.R.The expanding universe of T-cell subsets: Thl, Th2 and more / T.R. Mosmann, S. Sad // Immunol Today. - 1996. - Vol. 17. - P. 138-140.

169. Muller, M. Genetic modification of corticosteroid receptor signalling: novel insights into pathophysiology and treatment strategies of human affective disorders / M. Muller, F. Holsboer, M.E. Keck // Neuropeptides. - 2002. - Vol. 36.-P. 117-131.

170. Multiple enzymatic activities of human milk lactoferrin / T.G. Kanyshkova [et al.] // Eur J Biochem. - 2003. - Vol. 270. - P. 3353-3361.

171. Natural killer cell cytotoxic activity and c-Fos protein synthesis in rat hypothalamic cells after painful electric stimulation of the hind limbs and EHF irradiation of the skin / S.N. Shanin [et al.] // Med. Sei. Monit. - 2005. - Vol. 11, №9.-P. 309-315.

172. Neutrophil alpha-defensin human neutrophil peptide modulates cytokine production in human monocytes and adhesion molecule expression in endothelial cells / Y.V. Chaly [et al.] // Eur Cytokine Netw. - 2000. - Vol. 11(2).-P. 257-266.

173. Neutrophil defensins induce histamine secretion from mast cells: mechanisms of action/ A.D. Befus [et. al.] // J Immunol. - 1999. - Vol. 163. - P. 947-953.

174. Neutrophil function: from mechanisms to disease / B. Amulic [et al.] // Annu Rev Immunol. - 2012. - Vol. 30. - P. 459-89.

175. Neutrophil kinetics in health and disease / C. Summer [et al.] // Trends Immunol. 2010. - Vol. 31, No 8. - P. 318-324.

176. Oral lactoferrin treatment resolves amoebic intracecal infection in C3H/HeJ mice. / Leön-Sicairos N. [et al] // Biochem Cell Biol. - 2012 - Vol. 90, No. 3 -P. 435-441.

177. Padgett, D.A. How stress influences the immune response / D.A. Padgett, R. Glaser // Trends Immunol. - 2003. - Vol. 24. - P. 444-448.

178. Panyim, S. High resolution acrylamide gel electrophoresis of histone / S. Panyim, R. Chalkley // Archives of Biochemistry and Biophysics. - 1969. - Vol. 130.-P. 337-346.

179. Parks, K.R. Epinephrine, Cortisol, endotoxin, nutrition, and the neutrophil / K.R. Parks, J.M. Davis // Surg Infect (Larchmt). - 2012. - Vol. 13. - P. 300-306.].

180. Perron, G.G. Experimental evolution of resistance to an antimicrobial peptide / G.G. Perron, M. Zasloff, G. Bell // Proc. Biol. Sei. - 2006. - Vol. 273. - P. 251256.

181. Piccinini, A.M. DAMPening Inflammation byModulating TLR Signalling / A.M. Piccinini, K.S. Midwood // Mediators of Inflammation. - 2010. -Vol.2010.-P. 1-22.

182. Plasma defensin concentrations are elevated in patients with septicemia or bacterial meningitis / A.V. Panyutich [et al.] // J Lab Clin Med. - 1993. - Vol. 122(2).-P. 202-207.

183. Plasma elastase, al-antitripsin and lactoferrin in sepsis: evidence for neutrophils as mediators in fatal sepsis / J.H. Nuijens [et al.] // J. Lab. Clin. Med. - 1992. -Vol.119.-P.159-168.

184. Plasma lactoferrin as a marker of infection in elderly individuals / E.O. Adeyemi [et al.] // Aging (Milano). - 1992. - Vol. 4, №2. - P. 135-137.

185. Pro- and anti-inflammatory cytokines expression in rat's brain and spleen exposed to chronic mild stress: Involvement in depression / Z. You [et al.] // Behavioural Brain Research. - 2011. - Vol. 225. - P. 135-141.

186. Protegrins: leukocyte antimicrobial peptides combine features of corticostatic defensins and fachyplesins / V.N. Kokryakov [et al.] // FEBS Lett. -1993. -Vol.327, No 2. - P. 231-236.

187. P-selectin-dependent leukocyte recruitment and intestinal mucosal injury induced by lactoferrin /1. Kurose [et al.] // J Leukoc Biol. - 1994. - Vol. 55. -P. 771-777.

188. Psychological stress and susceptibility to the common cold / Sheldon Cohen [et al.] // J. Med. - 1991. - Vol. 325 - P. 606-612.

189. Purification and antimicrobial properties of three defensins from rat neutrophils / P.B. Eisenhauer [et al.] // Infect. Immun. - 1989. - Vol. 57. - P. 2021-2027.

190. Rabin, B. S. Stress, Immune Function, and Health: The Connection / B.S. Rabin. - Wiley-Liss, 1999. - 341 p.

191. Radulovic, M. The effect of acute immobilization stress on the abundance of corticotropin-releasing factor receptor in lymphoid organs / M. Radulovic., C. Weber, J. Spiess // J Neuroimmunol. - 2000. - Vol. 103(2). - P. 153-164.

< \

i

i

192. Rat Corticostatin R4: synthesis, disulfide bridge assignment, and in vivo activity / L.A. Cervini [et al.] // Peptides. - 1995. - Vol. 16, No. 5. - P. 837-842.

193. Rat neutrophil defensins. Precursor structures and expression during neutrophilic myelopoiesis / N.Y. Yount [et al.] // J. Immunol. - 1995. - Vol. 155.-P. 4476-4484.

194. Recruitment of CD1 lb/CD 18 to the neutrophil surface and adherence dependent cell locomotion / B.J. Hughes [et al.] // J. Clin. Invest. - 1992. - Vol. 90.-P. 1687-1698.

195. Rich, I.N. Extrarenal erythropoietin production by macrophages / I.N. Rich, W. Heit, B. Kubanek // Blood. - 1982. - Vol. 60, N4. - P. 1007-1018.

196. RNA expression patterns change dramatically in human neutrophils exposed to bacteria / Y.V. Subrahmanyam [et al.] // Blood. - 2001. - Vol. 97(8). - P. 24572468.

197. Robineaux, J. Contribution a letude des granulation neutrophiles des polynucleares par la microcinematographie en contraste de phase / J. Robineaux, J. Frederic // Comptes Rendus des Seances de la Société de Biologie (Paris). -1955. - Vol. 149. - P.486-489.

198. Rodriguez, D.A. Antimicrobial mechanisms and potential clinical application of lactoferrin / D.A. Rodriguez, L. Vazquez , G. Ramos // Rev Latinoam Microbiol. - 2005. - Vol. 47. - P. 102-111.

199. Roles of antimicrobial peptides such as defensins in innate and adaptive immunity / J. Oppenheim [et al.] // Ann. Rheum. Dis. - 2003. - Vol. 62. Suppl 2.-P. 17-21.

200. Salzet, M. Antimicrobial peptides are signaling molecules / M. Salzet // Trends Immunol. - 2002. - Vol. 23. - P. 283-284.

201. Sapolsky, R.M. How do glucocorticoids influence stress responses? Integrating permissive, suppressive, stimulatory, and preparative actions / R.M. Sapolsky , L.M. Romero, A.U. Munck // Endocrine Reviews. - 2000. - Vol. 21. - P. 55-89.

202. Scott, M.G. Cationic antimicrobial peptides and their multifunctional role in the immune system / M.G. Scott, R.E.W. Hancock // Crit Rev Immunol - 2000. -Vol. 20.-P. 407-431

203. Scott, P.H. Plasma lactoferrin levels in newborn preterm infants: effect of infection / P.H. Scott // Ann. Clin. Biochem. - 1989. - Vol.26. - P.412-415.

204. Selsted, M.E. Mammalian defensins in the antimicrobial immune response / M.E. Selsted, A.J. Ouellette // Nat Immunol. - 2005. - Vol. 6. - P. 551-557.

205. Selye, H. Syndrome-produced by diverse nocuous agents / H. Selye // Nature. -1936. - Vol. 138, No 3479. - P. 32.

206. Sengelov, H. Control of exocytosis in early neutrophil activation / H. Sengelov, L. Kjeldsen, N. Borregaard//J. Immunol. - 1993. - Vol. 150. - P. 1535-1541.

207. Sengelov, H. Separation of human neutrophil plasma membrane from intracellular vesicles containing alkaline phosphatase and NADPH oxidase activity by free flow electrophoresis / H. Sengelov, M.H. Nielsen, N. Borregaard // J. Biol. Chem. - 1992. - Vol. 267. - P. 14912-14926.

208. Smith, S.M. The role of the hypothalamic-pituitary-adrenal axis in neuroendocrine responses to stress / S.M. Smith // Dialogues Clin Neurosci. -2006. - Vol.8, N 4. - P. 383-395.

209. Solomon, S. Corticostatins / S. Solomon // Trends Endocrinol Metab. - 1993. -

«

Vol.4.-P.260-264.

210. Steiner, H. Binding and action of cecropin and cecropin analogues: antibacterial peptides from insects / H. Steiner, D. Andreu, R.B. Merrifield // Biochim. Biophys. Acta. - 1988. - Vol. 939. - P. 260-266.

211. Stimulatory and inhibitory effects of interleukin (IL)-4 and IL-13 on the production of cytokines by human peripheral blood mononuclear cells: priming for IL-12 and tumor necrosis factor alpha production / A. D'Andrea [et al.] // J. Immunol. - 1995.-Vol. 181.-P. 537-546.

212. Stimulus-dependent secretion of plasma proteins from human neutrophils / N. Borregaard [et al.] // J. Clin. Invest. - 1992. - Vol. 90. - P. 86-102.

213. Stress, the immune system and vulnerability to degenerative disorders of the central nervous system in transgenic mice expressing glucocorticoid receptor antisense RNA / B. Marchetti [et al.] // Brain Res. Brain Res. - 2001. - Vol. 37. - P. 259-272.

214. Stress-induced changes in blood leukocyte distribution. Role of adrenal steroid hormones / F.S. Dhabhar [et. al.] // Jr. of immun. - 1996. - Vol 157. - P. 16381644.

215. Stress-induced increases in hypothalamic IL-1: a systematic analysis of multiple stressor paradigms / T. Deak [et al.] // Brain Res Bull. - 2005. - Vol. 64. - P. 541-556.

216. Stress-induced redistribution of immune cells - from barracks to boulevards to battlefields: a tale of three hormones / F.S. Dhabhar [et al.] // Psychoneuroendocrinology. - 2012. - Vol. 37. - P. 1345-1368.

217. Structure of human apolactoferrin at 2.0 A resolution. Refinement and analysis of ligand-induced conformational change / G.B. Jameson [et al.] // Acta Crystallogr D Biol Crystallogr. - 1998. - Vol. 54. - P. 1319-1335.

218. Suppressive effects of milk-derived lactoferrin on psychological stress in adult rats / N. Kamemori [et al.] // Brain Res. - 2004. - Vol. 1029. - P. 34-40.

219. Surface nucleolin participates in both the binding and endocytosis of lactoferrin in target cells / D. Legrand [et al.] // Eur J Biochem. - 2004. - Vol. 271. - P. 303-317.

220. Szuter, C.A. Phagocytosis-enhancing effect of lactoferrin on bovine peripheral blood monocytes in vitro and in vivo/ C.A. Szuter, T. Kaminska, S.M. Kandefer // Arch Vet Pol. - 1995. - Vol. 35. - P. 63-71.

221. The cationic antimicrobial peptide LL-37 modulates dendritic cell differentiation and dendritic cell-induced T cell polarization / D.J. Davidson [et al.] // J. Immunol. - 2004. - Vol. 172. - P. 1146-1156.

222. The concentration-dependent membrane activity of cecropin / L. Silvestro [et al.] // Biochemistry. - 1997. - Vol. 36. - P. 11452-11460.

' i \ i

223. The effects of two nights of sleep deprivation with or without energy restriction on immune indices at rest and in response to cold exposure / R.J. Costa [et al.] // Eur J Appl Physiol. - 2010. - Vol. 109. - P. 417-428.

224. The endothelium and cytokine secretion: the role of peroxidases as immunoregulators / D. L. Lefkowitz [et al.] // Cell Immunol. - 2000. - Vol. 202(1)-P. 23-30.

225. The interleukin-1 type 2 receptor gene displays immediate early gene responsiveness in glucocorticoid-stimulated human epidermal keratinocytes / W.J. Lukiw [et al.] // J Biol Chem. - 1999. - Vol. 274(13). - P. 8630-8638.

226. The structure of neutrophil defensin genes / R. Linzmeier [et al] // FEBS Lett. -1993. - Vol. 321. - P. 267-277.

227. Tissue fractionation studies. Intracellular distribution patterns of enzymes in liver tissue / C. De Duve [et al.] // Biochem. J. - 1955. - Vol.60. - P.604-617.

228. Toxoplasma gondii: inhibition of the intracellular growth by human lactoferrin / K. Dzitko [et al.] // Pol J Microbiol. - 2007. - Vol. 56. - P. 25-32.

229. Transcriptional profile of the Escherichia coli response to the antimicrobial insect peptide cecropin A / R.W. Hong [et al.] // Antimicrob Agents Chemother. -2003.-Vol. 47.-P. 1-6.

230. Transcriptome analysis of neutrophils after endurance exercise reveals novel signaling mechanisms in the immune response to physiological stress / Oliver Neubauer [et al.] // J Appl Physiol. - 2013. - Vol. 114. - P. 1677-1688.

231. Turnbull, A.V. Regulation of the hypothalamic-pituitary-adrenal axis by cytokines: actions and mechanisms of action / A.V. Turnbull, C.L. Rivier // Physiol Rev. - 1999. - Vol.79( 1). - P. 1 -71.

232. Two types of murine helper T cell clone. I. Definition according to profiles of lymphokine activities and secreted proteins / T.R. Mosmann [et al.] // J Immunol. - 1986. - Vol.136. - P. 2348-57.

233. Ultrastructural localization of cytochrome b in the membranes of resting and phagocytosing human granulocytes / A.J. Jesaitis [et al.] // J Clin Invest. - 1990. -Vol. 85(3).-P. 821-835.

234. Ward, P.P. Multifunctional roles of lactoferrin: a critical overview / P.P. Ward, E. Paz, O.M. Conneely // Cellular and Molecular Life Sciences. - 2005. - Vol. 62. - P. 2540-2548.

235. Webster, J. I. Neuroendocrine regulation of immunity / J.I.Webster, L. Tonelli, E.M. Sternberg // Annu. Rev. Immunol. - 2002. - Vol. 20. - P. 125-163.

236. Weigent, D.A. Production of peptide hormones and neurotransmitters by the immune system / D.A. Weigent, J.E. Blalock // Chem. Immunol. - 1997. - Vol. 69.-P. 1-30.

237. Wiesner, J.A. Antimicrobial peptides: the ancient arm of the human immune system / J. Wiesner, A. Vilcinskas // Virulence. - 2010. - Vol.1 - P. 440-464.

238. Wright, C.D. Candidacidal activity of myeloperoxidase: Characterization of myeloperoxidase-yeast complex formation / C.D.Wright, R.D. Nelson // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 1988. - Vol.154. - P.809-817.

239. Wright, D.G. Secretory responses of human neutrophils: Exocytosis of specific (secondary) granules by human neutrophils during adherence in vitro and during exudation in vivo / D.G. Wright, J.I. Gallin // J. Immunol. - 1979. - Vol. 123. -P. 285-292.

240. Wright, D.G. The differential mobilization of human neutrophil granules/ D.G. Wright, D.A. Bralove , J.I. Gallin // Am. J. Pathol. - 1977. - Vol. 87. - P. 273278.

241. Yang, D. Antimicrobial proteins act as "alarmins" in joint immune defense / D. Yang , J.J. Oppenheim // Arthritis & Rheumatism. - 2004. - Vol. 50, No. 11.-P. 3401-3403.

242. Yeaman, M. R. Mechanisms of antimicrobial peptide action and resistance / M.R. Yeaman, N.Y. Yount // Pharm. Rev. - 2003. - Vol. 55, No. 1. - P. 27-55.

243. Yuping, L. AMPed Up immunity: how antimicrobial peptides have multiple roles in immune defense / Yuping Lai, Richard L. Gallo // Trends Immunol. -2009.-Vol. 30-P. 131-141.

244. Zanetti, M. Cathelicidins: a novel protein family with a common proregion and a variable C-terminal antimicrobial domain /M. Zanetti, R. Gennaro , D. Romeo // FEBS Lett. - 1995. - Vol. 374. - P. 1-5.

245. Zasloff, M. Antimicrobial peptides of multicellular organisms / M. Zasloff // Nature. - 2002. - Vol. 415. - P. 389-395.

246. Zeya, H.I. Antibacterial and enzymic basic proteins from leukocyte lysosomes: separation and identification / H.I. Zeya, J.K. Spitznagel // Science. - 1963. -Vol. 142.-P. 1085-1087.

247. Zeya, H.I. Cationic proteins of polymorphonuclear leukocyte lysosomes. I. Resolution of antibacterial and enzymatic activities / H.I. Zeya, J.K. Spitznagel //J Bacteriol. - 1966. - Vol. 91. - P. 750-754.