Анализ репаративных процессов в нижней челюсти при использовании модифицированных остеопластических материалов серии Гапкол с мезенхимальными стромальными клетками в эксперименте тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.21, кандидат медицинских наук Фионова, Элина Викторовна

• Фионова, Элина Викторовна
• кандидат медицинских наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Фионова, Элина Викторовна

Введение.

Глава 1. Применение клеточных технологий для повышения эффективности остеопластических материалов.

1.1 Остеопластические материалы на основе коллагена и кальций-фосфатных соединений, используемые для оптимизации репаративного остеогенеза.

1.2 Исследование свойств остеопластических материалов на модели длительных культур костного мозга.

1.3 Использование мезенхимальных стволовых клеток совместно с остеопластическими материалами для клеточной терапии.

Глава 2. Материалы и методы исследования.

2.1. Методы исследования свойств материалов на модели длительных культур костного мозга.

2.2. Методика заселения и изучения свойств мезенхимальных стромальных клеток на остеопластических материалах.

2.3. Методика изучения репаративной регенерации нижней челюсти кролика под влиянием материалов Гапкол и Индост с МСК.

Глава 3. Репаративные процессы в ветви нижней челюсти кроликов при использовании модифицированных остеопластических материалов, заселенных мезенхимальными стволовыми клетками (Собственные исследования).

3.1. Исследование свойств остеопластических материалов на модели длительных культур костного мозга.

3.2. Влияние остеопластического материала Гапкол в двух модификациях на цитотоксичность, пролиферацию и дифференцировку фибробластов и мезенхимальных стволовых клеток человека.

3.2.1. Рельеф поверхности образцов исследуемых материалов.

3.2.2. Характеристика СО-профиля выделенных МСК.

3.2.3. Оценкацитотоксичности образцов с помощью МТТ- теста.

3.2.4. Определение эффективности прикрепления клеток к поверхности образцов.

3.2.5. Оценка влияния образцов на эффективность пролиферации МСК.

3.3. Заживление костного дефекта челюсти при использовании Гапкола и Индоста с нанесенными на поверхность мезенхимальных стволовых клеток.

3.3.1. Гапкол без вакуумной обработки и без НБК (1-я контрольная группа).

3.3.2. Применение Индоста без вакуумной обработки с НБК (2-я контрольная группа).

3.3.3 Применение Индоста с вакуумной обработкой и НБК (3-я контрольная группа).

3.3.4. Применение Индоста с вакуумной обработкой, НБК и нанесенной на поверхность культурой МСК (основная группа).

Глава 4. Обсуждение результатов и заключение.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Анализ репаративных процессов в нижней челюсти при использовании модифицированных остеопластических материалов серии Гапкол с мезенхимальными стромальными клетками в эксперименте»

Актуальность

В настоящее время в практической медицине, а именно в стоматологии, челюстно-лицевой хирургии и травматологии, используются резорбируемые и биостабильные композиционные материалы для замещения костных дефектов после травмы, удаления опухолей, устранения врожденных и приобретенных дефектов (М.Ш.Мустафаев и соавт., 1998, 2000; С.Г.Курдюмов и соавт., 2000; А.М.Воложин, В.С.Агапов и соавт. 2000). Среди резорбируемых остеопластических материалов большое распространение получили композиты, образованные из коллагена и синтетического минерального компонента, гидроксиапатита и трикальцийфосфата. К ним относится серия материалов: Колапол, Гапкол, Коллапан, производимые фирмами «Полистом» и «Интермедапатит». Эти материалы обладают высокой степенью биосовместимости, технологичны при изготовлении, имеют по сравнению с импортными аналогами невысокую стоимость, но не уступают им в качестве и остеопластических свойствах. В механизме остеопластического действия этих материалов основная роль принадлежит их остеокондуктивным свойствам, что способствует хорошей интеграции с костной тканью. Недостатком материалов является низкая способность инициировать построение костной ткани из-за отсутствия специфических стимуляторов-остеоиндукторов (морфогенетических • белков и др.). В связи с этим продолжительность реабилитации пациентов после оперативного вмешательства у некоторых пациентов (особенно при наличии общесоматических заболеваний: сахарный диабет, другие эндокринопатии, гипертоническая болезнь и т.д.) отличается длительностью и, кроме того, повышается риск послеоперационных осложнений. С целью придания этим материалам свойств инициировать построение костной ткани в их состав вводят компоненты межклеточного матрикса: гиалуроновую кислоту и хондроитинсульфат (В.В.Сарычев, 2005; И.С. Мальгинова, 2005). Важная позитивная роль может принадлежать также неколлагеновым костным белкам, которые выделены в чистом виде и испытаны в. эксперименте в составе составе остеопластического материала. Этот материал под названием «Пластины коллагеновые с гидроксиапатитом остеоиндуктивные "ИНДОСТ" ВФС 01032006/4599-06 от 22.12.2006» разрешены к клиническому применению в стоматологии.

Дальнейшее совершенствование свойств остеопластических материалов может быть осуществлено при использовании новой биотехнологии, позволяющей сформировать на поверхности биосовместимых резорбирующихся композитов слой костных клеток из, клеток — предшественников костного мозга. Костные клетки- сами являются источником специфических факторов костного морфогенеза. Использование этих технологий в дальнейшем может существенно снизить, риск осложнений и сократить период реабилитации, пациентов после оперативного устранения дефектов костей лица и челюстей, а также других костей скелета, особенно в случае' нарушенного заживления костной раны при иммунодефицитных состояниях и общесоматических » заболеваниях. Исследований по применению биорезорбируемых композитных материалов заселенных остеопрогениторными клетками, полученными из мезенхимальных стромальных клеток костного мозга, проведено не было, что послужило основанием для формулирования цели , и задач-данной работы.

Цель работы: в лабораторных условиях и экспериментально обосновать эффективность применения» неколлагеновых белков кости в составе остеопластического материала Гапкол, модифицированного вакуумной обработкой и с культурой мезенхимальных стволовых клеток для оптимизации репаративной регенерации челюстной кости. 6

Задачи

1. Оценить в длительных культурах костного мозга декстеровского типа динамику кроветворения на поверхности образцов остеопластических материалов: Гапкол, Коллаген и Пародонкол.

2. Определить возможность применения образцов Гапкол а, модифицированного вакуумной обработкой и содержащего неколлагеновые белки кости, для длительного культивирования в среде, содержащей мезенхимальные стволовые клетки.

3. Изучить влияние материала Гапкол на цитотоксичность, пролиферацию и дифференцировку фибробластов и мезенхимальных стволовых клеток человека.

4. Определить влияние Гапкола без вакуумной обработки и не содержащего неколлагеновые белки кости, внесенного в костную рану ветви нижней челюсти кролика, на репаративную регенерацию. *

5. Оценить, как влияет Гапкол с вакуумной обработкой и содержащий неколлагеновые белки кости на построение костной ткани, ветви нижней челюсти кролика.

6. Определить особенности репаративного остеогенеза в ветви нижней челюсти кролика при внесении в костную рану Гапкола, содержащего неколлагеновые белки кости с мезенхимальными стволовыми клетками на поверхности.

Положения, выносимые на защиту

1. Формирование на образцах Гапкола преимущественно стромальных, чем кроветворных клеток при культивировании в длительной культуре костного мозга декстеровского типа. Образцы Гапкола и Индоста подвергнутые вакуумной обработке и содержащие НБК не могут быть культивированы более 3-х дней вследствие перехода клеток в суспензию, содержащую мезенхимальные стволовые клетки. Малое количество клеток на поверхности Гапкола и Индоста дает ложное представление о токсичности материала, так как МСК быстро переходят в культуральную среду с разрушающегося материала. Быстрая деструкция материала в условиях культивирования не позволяет клеткам пролиферировать и подвергаться остеогенной дифференцировке. 3'. Внесение в костную рану ветви нижней челюсти кролика Гапкола без вакуумной обработки, не содержащего НБК, вызывает умеренные воспалительные и воспалительно-деструктивные процессы.Внесение в костную рану ветви нижней челюсти кролика Индоста с вакуумной обработкой и содержащего НБК вызывает усиление построения костной ткани. Нанесение МСК на поверхность Гапкола, содержащего неколлагеновые белки кости, вызывает более высокую активность остеогенетических процессов в челюсти и интенсификацию процессов созревания новообразованной костной ткани.

Научная новизна

Впервые установлено, что-в декстеровской культуре костного мозга на образцах остеопластического материала Гапкол формируется значительно больше стромальных, чем кроветворных клеток. Научной новизной отличаются данные о том, что Индост, подвергнутый вакуумной обработке и содержащий неколлагеновые белки кости, не может быть длительно культивирован вследствие нестойкости материала и быстрого разрушения в жидкой среде. Деструкция образцов Гапкола и Индоста в условиях культивирования- не позволяет мезенхимальным стволовым клеткам пролиферировать. на материале и подвергаться остеогенной дифференциации. Введение в состав Индоста неколлагеновых белков кости повышает его остеогенетический потенциал при репаративной регенерации нижней челюсти только после удаления летучих соединений с помощью вакуумной обработки материала. Заселение МСК Индоста, содержащего НБК, вызывает слабые проявления воспалительно-деструктивных реакций, повышает активность остеогенетических процессов и способствует созреванию новообразованной костной ткани.

Практическое значение

Оценка динамики кроветворения в длительных культурах костного мозга на поверхности Гапкола является важным этапом для оценки их биосовместимости. Преобладание на материалах Гапкол формирования стромальных клеток над кроветворными клетками характеризует его остеопластический потенциал. Вакуумная обработка материала Гапкол с целью удаления остатков уксусной кислоты и формальдегида является необходимым условием для проявления активности, введенного в состав материала неколлагеновых белков кости. Культивирование мезенхимальных стволовых клеток на Индосте, модифицированном вакуумной обработкой и содержащим неколлагеновые белки кости, может продолжаться не более 3-х дней из-за нестойкости материала в жидкой среде и не позволяет проведение'остеогенной дифференциации. Заселение поверхности Гапкола, содержащего НБК, мезенхимальными стволовыми клетками уменьшает проявления воспалительно-деструктивных реакций, повышает активность остеогенетических процессов и усиливает процессы созревания новообразованной костной ткани.

Предложения по использованию результатов исследования

Полученные данные используются в учебном процессе и в дальнейшей научной работе на кафедре патофизиологии стоматологического факультета МГМСУ и на кафедре госпитальной терапевтической стоматологии.

Объем и структура диссертации

Диссертация написана на 124 страницах машинописного текста, состоит из введения, 4 глав, выводов, практических рекомендаций, списка использованной литературы, в том числе 74 российских автора и 102 иностранных. В диссертации представлено 7 таблиц и 30 рисунков.

Заключение диссертации по теме «Стоматология», Фионова, Элина Викторовна

ВЫВОДЫ

1. Результаты сравнительного изучения свойств остеопластических материалов при оценке костномозгового кроветворения в длительных культурах костного мозга показали, что на образцах Гапкола формировалось значительно больше стромальных клеток, чем кроветворных в период с 7 по 28 сутки культивирования. Интенсивное- развитие кроветворного микро окружения на остеопластических материалах тесно связано с остеогенной способностью клеток-предшественников.

2. Образцы Индоста подвергнутые вакуумной обработке и содержащие неколлагеновые белки кости не могут быть длительно культивированы с мезенхимальными стволовыми клетками вследствие их перехода в суспензию и на пластик. Эти клетки сохраняются на поверхности Гапкола в течение 3-х дней после начала культивирования.

3. Малое количество клеток на поверхности Гапкола и Индоста дает ложное представление о токсичности материала, так как размножающиеся клетки быстро переходят в культуральную среду. Быстрая деструкция образцов материалов в условиях культивирования не позволяет проведение остеогенной дифференцировки.

4. Внесение в*костную рану ветви нижней челюсти кролика Гапкола без вакуумной обработки и не содержащего неколлагеновые белки кости вызывает умеренные воспалительные и воспалительно-деструктивные процессы через 1 месяц после начала опыта. Новообразование костной субстанции происходит к концу 2-го месяца после нанесения травмы.

5. Внесение в костную рану ветви нижней челюсти кролика материала «Индост» с вакуумной обработкой и содержащего неколлагеновые белки кости вызывает усиление построения костной ткани на фоне снижения воспалительно-дистрофических реакций. 6. Нанесение мезенхимальных стволовых клеток на поверхность Индоста вызывает более умеренные, чем в других группах, проявления воспалительно-деструктивных реакций. Отмечена более высокая активность остеогенетических процессов и значительная интенсификация процессов созревания новообразованной костной ткани.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Рекомендуется использование длительной культуры костного мозга декстеровского типа для предварительной оценки биосовместимости и остеогенного потенциала материалов Гапкол и Индост (пластины).

2. Культивирование мезенхимальных стволовых клеток на Индосте, содержащем неколлагеновые белки кости, может продолжаться не более 3-х дней из-за нестойкости материала в культуральной среде и не позволяет проведение остеогенной дифференциации.

3. Заселение мезенхимальными стволовыми клетками поверхности Индоста, может быть рекомендовано для уменьшения проявления воспалительно-деструктивных реакций, повышения активности остеогенетических процессов и усиления процессов созревания новообразованной костной ткани.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Фионова, Элина Викторовна, 2008 год

1. Бажанов H.H. Коллагенопластика при хирургическом лечении пародонтоза: Методические рекомендации.- М., 1984.- 13 с.

2. Безрукова А.П. Хирургическое лечение заболеваний пародонта.- М.: Медицина, 1987.- 160 с.

3. Бойматов М.Б., Григорьян A.C., Рудько В.Ф. и др. Применение биогенного композиционного материала на основе гидроксилапатита, для устранения внутрикостных полостей // Стоматология.- 1993.- N 3-6.- С.51-53.

4. Бондаренко М.О. Оптимизация репаративного остеогенеза в челюстной кости при иммунодефицитном состоянии путем применения Полиоксидония совместно с неколлагеновыми белками кости (экспериментальное исследование). Автореф. дисс. канд. мед. наук. 2007.

5. Воложин А.И., Дьякова C.B., Топольницкий О.З. и др. Клиническая апробация препарата на основе гидроксиапатита в стоматологии // Новое в стоматологии. Специальный выпуск.- 1993.- N 3.- С.29-31.

6. Воложин А.И., Арион В.Я., Зырянов Г.В. Экспериментальное обоснование применения тактивина у больных иммунодефицитным состоянием при лечении периапикального воспаления // Патол.физиол.-1994.-№6.-С.31 -32.

7. Воложин А.И., Агапов B.C. и др. Остеопластическая эффективность различных форм гидроксиапатита по данным экспериментальноморфологического исследования // Стоматология. 2000. Т.19, №3. С.4.

8. Воложин А.И., Барер Г.М., Григорьян A.C., Воложина С.А. Корневая паста на основе гидроксиапола фирмы "Полистом" // Вестник стоматологии.- 1996.- N 5(41).- С.З.

9. Воложин А.И., Денисов А.Б., Дружинина P.A. и др. Заживление кожной раны, осложненной воспалением под влиянием гидроксиапатит-содержащей коллагеновой губки с хиноксидином // Тезисы докладов научной сессии, посвященной 50-летию РАМН., ММСИ, 1994.- С.83.

10. Воложин А.И., Денисов-Никольский Ю.И., Лосев Ф.Ф.,Докторов

11. Воложин А.И., Докторов A.A., Татаренко-Козмина Т.Ю., Матвеева

12. B.Н. Технология формирования стволовых мезенхимальных клеток-источника костных клеток на синтетических остеопластических композитных материалах. Журнал "Cathedra" № 3 (15), 2005.С.70-71.

13. Воложин А.И., Дьякова1 C.B., Топольницкий О.З. и др. Клиническая апробация препарата на основе гидроксиапатита в стоматологии // Новое в стоматологии. Специальный выпуск,- 1993.- N 3.- С.29-31.

14. Воложин А.И., Лиханов В.Б., Гаража С.Н. и др. Новые подходы к применению синтетического гидроксиапатита в стоматологии, травматологии и хирургии. Труды научно-практическогообъединения «Биомедицинские технологии», Вып.5, Москва, 1996.. '. С.27-32. . \

15. Воложин А.И., Немерюк Д.А., Докторов A.A., Матвейчук И.В., Попов В.К., Рогинский В®., Краснов А.П: //В1кн;: Биомедицинские технологии / Груды НИЦ БМ'Г ВИЛАР.-1999. -Вып. 12. -MI С-.22

16. Воложин А.И:, Попов ВЖ., Краснов А.П. и др. Физико-механические иморфологические характеристики- новых композитов на основе сверхвысокомолекулярного полиэтилена и гидроксиапатита. — «Новое в стоматологии», 1999, 8.- С.З5-43:

17. Воложин А.И., Татаренко-Козмина Т.Ю, Матвеева В.Н. Стволовые клетки: перспективы применения в стоматологии и челюстно-лицевой хирургии. Журнал "Cathedra" № 2 (14), 2005.С.54-58.

18. Григорьян A.C., Воложина G.A., Антипова З.П. и др. Экспериментальная апробация корневой пасты на основе гидроксиапатита//Стоматология.- 1996.-N 1.- С.7-11.

19. Григорьян A.C., Грудянов А.И., Воложин-А.И., Лосев Ф.Ф., Чупахин П.В., Войнов A.B. // Труды VI съезда.Стоматологической ассоциации России, М., 2000. С.185-187.

20. ЗГ. Григорьян A.C., Паникаровский В.В., Хамраев Т.К. и др. Сравнительное изучение 2-х способов введения гранул гидроксилапатита // Сб. Новое в техническом обеспечении стоматологии: Материалы конференции стоматологов.-Екатеринбург, 1992.- С.118-121.

21. Гуревич O.A., Дризе Н.И., Удалов Г.А., Чертков И. Л. Влияние кроветворения на клетки-предшественники стромы костного мозга. — Бюлл. экспер. биол., 1982. №10, с. 115—117.

22. Гуревич O.A., Дризе Н.И., Удалов Г.А., Чертков И.Л. Длительные культуры костного мозга как модель изучения клеток-предшественников кроветворной стромы. — Пробл. гематол., 1982, № 7, с. 7—13.

23. Десятниченко К.С. Неколлагеновые белки костной ткани в регуляции скелетного гомеостаза, минерализации и репаративного остеогенеза/ Автореф. . докт. дисс. // Челябинск. 1997. - 34 с.

24. Десятниченко К.С., Балдин Ю.П. Экспериментально-теоретические исследования, подтверждающие концепцию Г.А.Илизарова о единстве генеза костной и кроветворной тканей // Гений ортопедии. 1995. -№1.-С.29-32.

25. Десятниченко К.С., Балдин Ю.П., Шрейнер A.A. и др. Стимуляция остеогенеза высокомолекулярной фракцией неколлагенового белка костной ткани // Вопр.мед.химии. 1987. - №1. - С.79-84.

26. Иванов-Смоленский А.Г., Гуревич O.A., Самойлова P.C., Чертков И.Л. Происхождение прилипающих клеток в длительных культурах костного мозга. Пробл. гематол., 1982, № 7, с. 25—27.

27. Каширина O.A. Применение биогенного композиционного материала на хирургическом этапе дентальной имплантации: Дисс. .канд. мед. наук.- М., 1994.- 127 с.

28. Кондратенко Н.Ф., Чертков И.JI. Стволовые кроветворныее клетки периферической крови мышей. Бюлл. экспер. биол., 1972, № 9, с. 100—103.

29. Курдюмов С.Г., Истранов Л.П., Орловский В.П., Воложин А.И. Материалы для репаратовного остеогенеза в имплантологии /Современные проблемы имплантологии. Труды 5 Межд. конф. Саратов. 2000. С. 119.

30. Леонтьев В.К., Воложин А.И., Андреев Ю.Н. и др. Применение новых препаратов гидроксиапола и колапола в клинике (первые итоги) // Стоматология.- 1995.- N 5.- С.69-71.

31. Луцевич Э.В., Андреев Ю>Н., Агапов B.C., Воложин А.И. Обеспечение быстрого и надежного гемостаза новым препаратом ко л ano л в хирургии // III Российский национальный конгресс

32. Человек и лекарство", 16-20 апреля 1996 года: Тезисы докладов.-М., С.ЗЗ.

33. Максимовский Ю.М., Чиркова Т.Д., Воложин А.И. Новый отечественный препарат гидроксиапол при хирургическом лечении пародонтита// Зубоврачебный вестник.- 1993.- N3.- С. 19-22.

34. Мустафаев Магомет Ш. Экспериментальная апробация и клиническое применение биорезорбируемых мембран в комплексном лечении переломов костей лицевого скелета и при реконструктивных операциях. Автореф. дисс. док. мед. наук. Москва, 1998. 37 с.

35. Ожелевская С.А. Применение неколлагеновых белков кости в составе материала Гапкол, модифицированного вакуумной обработкой, для оптимизации регенерации кости в эксперименте. Автореф. дисс. канд. мед. наук. 2007.

36. Подрушняк Е. П., Лизун О. Н.// Вестн. АМН СССР. 1990. № 1. С. 37.

37. Пономарев В.Д. Аналитическая химия, 2 часть.- М.: Высшая школа, 1982.- 126 с.

38. Сабанцева Е.Г. Лечение пародонтита с применением биогенных материалов (эксперим. и клин, исследование): Автореф. дисс. .канд. мед. наук.- М., 1993.- 21 с.

39. Сарычев В.В. Экспериментальное изучение остеопластических свойств новых гелевых композиций на основе гиалуроновой кислоты для замещения дефектов челюстной кости. Автореф. дисс. канд. мед. наук. Стоматология, Патологическая физиология. 2005.

40. Татаренко-Козмина Т.Ю., Де Хи Чер, Воложин А.И. Характеристика CD-профиля мезенхимальных стромальных клеток из челюсти человека. Международная конференция. Греция октябрь 2005 Журнал " Фундаментальные исследования", № 3, 2006. С.115.

41. Топольницкий О.З. Обоснование выбора вида и размера аллотрансплантантов при костной пластике нижней челюсти у детей: Автореф. дисс. .канд. мед. наук.- М., 1994. 16 с.

42. Тулеулов К.Т. Пластика послеоперационных полостных дефектов челюстной помощи населению Каз. ССР.- Целиноград, 1989.- С.89-91.

43. Фриденштейн А.Я., Лалыкина К.С. Индукция костной ткани и остеогенные клетки-предшественники. — М.: Медицина, 1973. — 220с.

44. Фриденштейн А.Я., Лурия Е.А. Клеточные основы кроветворного микроокружения. М.: Медицина, -1980. 210 с.

45. Хамраев Т.К. Применение гранулята керамики гидроксилапатита для замещения дефектов костной ткани челюсти: Автореф. дисс. .канд. мед. наук.-М., 1994.- 23с.

46. Чертков И.Л., Гуревич O.A., Удалов Г.А. Изучение клеток, переносящих кроветворное микроокружение, с помощью гетеротопной трансплантации костного мозга. — В кн.: Роль стволовых клеток в лейкозо- и канцерогенезе. Киев, 1977, с. 16—18.

47. Чертков И.Л., Фриденштейн А .Я. Клеточные основы кроветворения. — М.: Медицина, 1977. 270 с.

48. Чиркова Т.Д. Применение трикальцийфосфата в комплексном лечении пародонтита: Автограф, дисс. .канд. мед. наук.- М., 1990.20 с.

49. Шевцов В.И., Десятниченко К.С. Биохимические аспекты регуляции дистракционного остеогенеза // Вестн.РАМН. 2000. - №1. - С.30-34.

50. Щепёткин И. А. // Успехи соврем, биологии. -1994. -Т. 114. -№ 4. -С. 454-465.

51. Allen T.D., Dexter Т.М. Surface morphology and ultrastructure of murine granulocytes and monocytes in long-term liquid culture. — Blood Cells, 1976, vol. 2, p. 591—606.

52. Al-Saffar N., Revell P.A.//Proc. 10th europ. conf. on biomaterials. Davos, 1993. P.l.

53. Alwan W.H//ANN. Rheum. Dis. 1989. V. 48. P. 476.

54. Anderson R.W., Sharp J.G. Evaluation of monolayer, liquid, gelfoam sponge and artficially capillary culture systems for the study of hematopoiesis. —Exp. Hematol., 1981, vol. 9, p. 187—196.

55. Athanasou N.A., Quinn J., Bulstrode C.J.K.// J. Bone Joint Surg. B. 1992. V. 74. P.57.

56. Bagambisa F.B., Joos U .// Biomaterials, 1990. V. 11. P. 50.

57. Beirne O.R., Greengpan J.S. Histologic evalution of tissue response to hydroxyapatite implanted on human mandibules // J. denf. Res.- 1985.-V.6.- N 64.-P.l 152-1154.

58. Bentoey S.A., Knutsen. T., Whang-Peng J. The origin of the hematopoietic microenvironment in continous bone marrow culture. — Exp.Hematol., 1982, vol. 10, p. 367—372.

59. Bizios R. // Biotechnol. and Bioengng. 1994. V. 43. P. 582.

60. Brinks J., Brinks G. et al. Two year evaluation of a Kneadable hydroxylapatite preparation for the preservation of human maxillo-mandibular bone // J. Oral. Implantol.- 1987.- V.13.- N 2.- P. 186-195.

61. Brook I.M., Craig G.T., Lamb DJ. // Biomaterials. 1991 . V. 12. P. 179.

62. Brook I.M., Lamb D.S. Two-stage combined vestibuloplasty and partical mandibular ridge augmentation with hydroxyapatite // J. Oral. Maxillofac. Surg.- 1988.-V.47.-N 4.-P.331-335.

63. Buns C.E. Periodontology 13 years of GTR: A report on the 70th annual meeting of the German Society for Periodontology // Schweiz.Monatschr.Zahnmed. - 1995. -Vol.105, № 11.-P.1469-1472.

64. Cancedda R, Bianchi G, Derubeis A, Quarto R. Cell therapy for bone disease: a review of current status. Stem Cells. 2003;21(5):610-619.

65. Chen C.C. et al. Evaluation of a collagen membrane with and winthout bone grafts in treating periodontal intrabony defects // J.Periodontol. -1995. Vol.66,№ 6. - P.522-530.

66. Chertkov J.L., Gurevitch O.A, Udalov G.A. Role of bone marrow stroma in hemopoietic stem cell regulation. — Exp. Hematol., 1980, vol. 8, p. 770—778.

67. Cho M.I. et al. Platelet-derived growth factor-modulated guided tissue regenerative therapy // J.Periodontol. 1995. - Vol.66, №6. - P.522-530.

68. Cohen E.F. Guided bone regeneration in combination with demineralized freeze-dried bone: allograft using a nonresorbable membrane // Compend.Contin.Educat.Den. 1995. - Vol.16,№ 9. - P.851-864.

69. Conner H.D. Bone grafting with a calcium suifate barrier after root ampation // Compend.Contin.Educat.Den. 1996. - Vol.l7,№ 1. - p.42, 44, 46; quiz 48.

70. Cowan CM, Shi YY, Aalami OO, Chou YF, Mari C, Thomas R, Quarto N, Contag CH, Wu B, Longaker MT. Adipose-derived adult stromal cells heal critical-size mouse calvarial defects. Nat Biotechnol,. 2004. 22(5):560-567.

71. Daculsi G., LeGeros R.Z., Heughebaert M., Barbieux J. // Calcif. Tissue Internat. 1990. V. 46. P. 20.

72. Dahlin et al. Bone augmentation at fenestrated implants by an osteopromotive membrane technique: A controlled clinical study // Clin.Oral.Implants Res. 1991. - Vol.2,№4. - P.159-165.

73. Deb A, Wang S, Skelding KA, Miller D, Simper D, Caplice NM. Bone marrow-derived cardiomyocytes are present in adult human heart: A study of gender-mismatched bone marrow transplantation patients. Circulation, 2003. 107(9): 1247-1249.

74. Deeb E.M., Roszhoulski M. Hydroxylapatite granules and bloks as an extracraniol augmenting material in rhesus monkeys // J. Oral. Maxillofac. Surg.- 1988.- V.46.- N1.- P.33-40.

75. Dexter T.M. Haemopoiesis in long-term bone marrow cultures. — Acta haemat. (Basel), 1979, vol. 62, p. 299—305.

76. Dexter T.M., Spooncer E., Toksoz D., Lajtha L.G. The role of cells and their products in the regulation of in vitro stem cell proliferation and granulocyte development. — J. Supramol. Struct., 1980, vol. 13, p. 513— 524.

77. Drummond et al. Guided tissue regeneration in managing an incisor with a labially fused supernumerrary: case report // Pediatr.Dent. 1995. — Vol. 17,№ 4. -P.379-385.

78. Ducheyne P., Beight J., Cuckler J., Evans B., Rodin S. // Biomaterials. 1990. V. 11.P.531.

79. De Bruijn J.D., Klein C.P., de Groot K., van Blitterswijk C.A. // J. Biomed. Materials Res. -1992. -V. 26. P. 1365-1371.

80. Eggli P.S., Muller W., Schenk R.K. .// Clin. Orthop. 1988. № 232. P. 127.

81. Eliason J.F., Testa N.G., Dexter T.M. Erythropoietin— stimulated erythropoiesis in long-term bone marrow culture. — Nature, 1979, vol. 281, p. 382—384.

82. Falasca G. F., Ramachandrula A., Kelley K. A., O'Connor C. R., Reginato AJ. // Arthritis and Rheumatism. 1993. V. 36. P. 105.

83. Fincelman R.D. Growth factors in bones and teeth // CDA J. 1992 -Vol. 20. — No 12. -P.23-29.

84. Frame J.W., Rout P.G., Browne R.M. Rigde augmentation using solid and porous hydroxylapatite particles with and without autogenous bone or plaster // J. Oral. Maxillofac. Surg.- 1987.- V.45.- N 9.- P.771-777.

85. Fredenstein A., Latzinik N., Grosheva A., Gorskaya U. // Exper. Hematol. 1982. V. 10. P. 217.

86. Fugazzotto P. A. Success and failure rates of osseointegrated implants in function in regenerated bone for 6 to 51 months: a preliminary report // Int. J. Oral.Maxillofac.Implant. 1997. - Vol.12, N21. - P. 17-24.

87. Ganeles J., Listgarten M. A., Evian C. I. // J. Periodontal. 1986. V. 57. P. 133.

88. Greenberg H.M., Newburger P.E., Parker L.M. et al. Human granulocytes generated in continuous bone marrow culture are physiologically normal. — Blood, 1981, vol. 58. p. 724—732.

89. Greenberg B. R., Wilson F. D., Woo L. Granulopoietic effects of human bone marrow fibroblastic cells and abnormalities in the «granulopoietic microenvironment». — Blood. 1981, vol. 58, p. 557—564.

90. Holmes R.E., Hegitr H. Porous Hydroxylapatite as a bone graft substitite in Mandibular controur augmentation: A histometric Study // J. Oral. Maxillofac. Surg.- 1987.- V. 45.- N 5.- P.421-429.

91. Hutmacher D., Hurzeler M.B., Schliephake H. A review of material properties of biodegradable and bioresorbable polymers anddevices for GTR and GBR applications // Int.J.Oral.Maxillofac.Implant. 1996. Vol. 11 ,№5. - P.667-678.

92. Hyvonen P.M., Kowolik M. J. // J. Clin, and Lab. Immunol. 1991. V. 35. P. 47.

93. Ishikawa K., Eanes E.D.// J. Dental Res. 1993. V. 72. P. 474.

94. Jarcko M. // Clin. Orthop. 1981. № 157. P. 259.

95. Kasemo B. Biocompatibilidy of titanium implants: Surface science aspects // J. Prosth. Dent., 1983.June.- V.3.- P.310-320.

96. Kramer G.M., Mattout P. et al. Ractiones und histologische Knochen Hydroxylapatit-Transplantat: Fellbeschcibung // Int. J. Paradont. Restous. Zahnleik.- 1989.- Bd. 9.-N 1.- S.9-12.

97. Leanderson P., Tagesson C. // Brin. J. Industr. Med. 1992. V. 49. P. 745.

98. LeGeros R,Z., Daculsi G., Orly I., Gregoire M., Heughebaert M., Gineste M., Kijkowska R. // Bone bonding biomaterials. Reed heasthcare communins / Eds Ducheyne P. et al. Hague: Leiderdorp, 1992. P.201.

99. LeGeros R.Z., Zheng R., Kijkowska R., Fan D., LeGeros J.P. // Characterization and performance of calcium phosphate coatings for implants / Eds Horowitz E., Parr J. E. Philadelphia: American Soc. test. And materials. 1993. -P. 28-34.

100. Lemons J.E. // Characterization and performance of calcium phosphate coatings for implants / Eds Horowitz E., Parr J. E. Philadelphia: Amer. Soc. test, and materials, 1993. P.18.

101. Lemons J.E. // Clin. Orthop. 1990. № 261. P. 153.

102. Lord B. I., Wright E. G. Sources of haemopoietic stem cell proliferation: stimulators and inhibitors. -Blood Cells. 1980. -V. 6. - P. 581-593.

103. Lorenz H.P., Adzick N.S. "Scarless skin wound repair in the fetus". West J Med, 1993; 159 (3): 350-355.

104. Manuskiatti W., Maibach H.I. "Hyaluronic acid and skin: wound healing and aging", hit J Dermatol, 1996; 35(8): 539-544.

105. Mattson J.S. et al. Treatment of intrabony defects with collagen membrane barriers: Case reports // J.Periodontol. 1995. - Vol.66,№ 7. -P.635-645.

106. Mc Carthny T.L., Centrella M. Links among growth factors, hormones, and nuclear factors with essential roles in bone formation // Crit. Rev. Oral Med. 2000. - V. 11. - No 4. - P.409-422.

107. Mehlisch D.R., Taylor T.D. et al. Collagen-hydroxylapatite implant for augmenting deficient alveolar ridges: Twellvee-month clinical data // J.Oral.Maxillofac. Surg.- 1988.- V. 46.- N 10.- P.839-849.

108. Mellonig J.T. et al. Demineralised freeze-dried and autologous bone as aids to healing// J.Periodontol.- 1995.-Vol.66, № 11.-P.1013-1016.

109. Mercier P. Ridge reconstruction with hydroxylapartite. Part 1. Anatomy of the residual ridge 11 J. Oral. Surg.- 1988.- V. 65.- N 5.- P.505-510.

110. Mezey E, Key S, Vogelsang G, Szalayova I, Lange GD, Crain B. Transplanted bone marrow generates new neurons in human brains. Proc Natl Acad Sci U S A 2003;100:1364-1369.

111. Nagase M., Ruly-Bin Chen.et al. Radiographic and microscopic evaluation of subperiosiosteally implanted blokes of hydroxilapatite-gelatin nuxture in rabbits//J. Oral.Maxillofac. Surg.- 1989.- V.47.-N1.-P.40-45.

112. Nyman S., Lindhe J., Karring T., Rylander H. New attachment formation by guided tissue regeneration // J.Clin.Periodontol. 1982. .- Vol.9. -P.290-296.

113. Ohgushi H., Okumura M., Tamai S. // J. Biomed. Materials Res. -1990.-V. 24. -P. 1563-1569

114. Ohgushi H., Okumura M., Yoshikawa T., Inoue K., Senpuku K., Tamai S. //J. Biomed. Materials Res. 1992. V. 26. P. 885.

115. Ohgushi H., Okumura M., Yoshikawa T., Senpuku T., Inoue K., Tamai S., Shors E.C.//Proc. 4th internal sympos. on ceramics in medicine. V. 4: Bioceramics / Eds Bondield W. et al. L., 1991. P. 213.

116. Ono I., Ohura T., Murata M., Yamaguchi H., Ohnuma Y., Kuboki Y. // Plastic and Reconstruct. Surg. 1992. V. 90. P. 870.

117. Orlic D, Kajstura J, Chimenti S, et al. Bone marrow cells regenerate infarcted myocardium. Nature 2001. 410:701-705.

118. Parabita G.F., Troletti G.D., Zanneti U.L. Linpi ego della idrossiapatite di calcio in chirurgia oro maxillofacciale Nota III. Trattamento divoluminose della casistica // Minerva Stomatol.- 1985.- V.34.- N6.-P.913-922.

119. Patt H.M., Malonev M.A., Flannery M.L. Hematopoietic microenvironment transfer by stromal fibroblasts derived from bone marrow varying in cellularity. — Exp. Hematol., 1982, vol. 10, p. 738— 742.

120. Pecora G., Baek S.H., Rethnam S., Kim S. Barrier membrane techniques in endodontic microsurgery // Dent.Clin.North. Amer. 1997. -Vol.41,№3. - P.585-602.

121. Puleo D.A., Bizios R. // J. Biomed. Materials Res. 1992. V. 26. P. 291.

122. Sanchez-Ramos JR. Neural cells derived from adult bone marrow and umbilical cord blood. J Neurosci Res, 2002. 69(6):880-893.

123. Sautier J.M., Nefusi J.R., Forest N. // Biomaterials. 1992. V. 13. P. 400.

124. Serre C.M., Palillard M., Chavassieux P., Boivin G. // Biomaterials. 1992. V. 14. P. 97.

125. Shevcov V.I., Desiatnichenko K.S. Developoment and exerimental evalutuon of preparations from mature bone tissue // Sceletal Reconstruction and Bioimplantation (Ed. T.S.Lindholm). 1997. -Austin, Texas, USA. - P.81-95.

126. Simion M., Scarano A., Gionso L., Piattelli A. Guided bome regeneration using resorbable and nonresorbable membranes: a comparative histologic study in humans // Int.J.Oral.Maxillofac.Implant. 1996. - Vol. 11,№6. -P.735-742.

127. Soballe K., Hansen E.S., Brockstedt-Rasmussen H., Hjortdal V.E., Juhl G. I., Pedersen C.M., Hvid I., Bunger C. // J. Arthroplasty. 1991. V. 6. P. 307.

128. Spector M., Cease C., Tong-Li X. // Crit. Revs in Biocompatibility. 1989. V. 5. P. 269.

129. Stamm C, WestphaL B, Kleine HD, Petzsch M, Kittner C, Klinge H, Schumichen C, Nienaber CA, Freund M, Steinhoff G. Autologous bone-marrow stem-cell transplantation for myocardial regeneration. Lancet, 2003.361: 11-12.

130. Stern R, Frost GI, Shuster S, Shuster V, Hall J, Wong T, Gacunda P. "Hyaluronic acid ami skin". Cosm &Toil, 1998; 113: 43-48.

131. Tatsuo S., Kohsuke O., Kanako S., Ken-Ichi M. // J. Oral Maxillofacial Surg. 1993.

132. Tavussoli M., Khademi R. The origin of hemopoietic cells in ectopic implants of spleen and marrow.—Experientia, 1980, vol. 36, p. 1126— 1127.

133. Taylor T.D., Helfrick J.F. Technical Considerations in mandibular ridge reconstruction with collagen/HA IMP-LANTS//J. Oral. Maxillogfac.' Surg.- 1988.- V. 47.- N4.- P.422-425.

134. Testa N. G., Dexter T. M. Long-term production of erythroid precursor cells (BFU) in bone marrow cultures.—Differentiation, 1977, vol. 9, p. 193—195.

135. Tio F.O., Nishioka G. et al. Osteogenesis in replamineform hydroxylapatite porous (RHAP) Ceramic implants usede for human mandibular ridge augmentation. Report of two cases // J. Oral.

136. Maxillofac. Surg.- 1987.- V.45.- P. 188-194.

137. Tofe A.J., Watson B.A., Cheung H.S. // Characterization and performance of calcium phosphate coatings for implants / Eds Horowitz E., Parr J.E. Philadelphia: Amer. Soc. test, and materials, 1993. P. 10.

138. Towfighi P. et al. Use of a titanium-reinforced membrane in periodontal regeneration: a case report // Compend.Contin.Educat.Den. 1995. -Vol. 16,№ 9. - P.922-924.

139. Volozhin A.I., Ioulova N.A., Ageeva L.V., Mamedov A.A. Elaboration and Application of Bioregenerating Membranes for Maxillary Bone Defect Withdraw. The Asian journal of oral and maxillofacial surgery, Supplement №1. V.12, 2000. - P. 176.

140. Weaver C.M. et al. Quntibication of biochemical markers of bone turnover by kinetic measure of bone formation and resorption in young females//J.Bone Miner.Res. 1997. - Vol.l2,№ 10.-P.714-720.

141. Weinlander M., Grundschober F., Plenk H. Tierexperimentelle Undersuchungen zur Auffulling von Knochendefekten mit Hydroxyapatitkeramic//Z. Stomatol.- 1987.- Bd.84.- N 4.- S.195-205.

142. Williams N; Jackson H., Rabellino E.M. Proliferation and differentiation of normal granulopoietic cells in continuous bone marrow cultures.—J. Cell. Physiol. 1980, vol. 102, p.287-295.

143. Wilson F. D., Tavassoli M., Greenberg B. R. et al. Morphological studies on "adherent cells" in bone marrow cultures from humans, dogs, and mice.—Stem. Cells, 1981, vol. l,p. 15—29.

144. Wlodarski K.H., Kobus M. // Arch, immunol. et therap. exptl. 1992. V. 40. P. 83.

145. Wozney J.M. Biology and clinical applications of rhBMP-2 // Tissue engineerig: application in maxillofacial surgery and periodontics (edd. S.E.Lynch, R.G.Genco, R.E.Marx). Quintessence Publishing Co, Inc. -1999. - P.103-124.

146. Zitzmann N.U. Naef R., Scharer P. Resorbable versus nonresorbable membranes in combination with Bio-Oss For guided bone regeneration // Int.J.Oral.Maxillofac.Implant. 1997. - Vol.12,№6. -P.593-598.

147. Zuk P.A., Zhu M., Ashjian P., De Ugarte D.A., Huang J.I., Mizuno H., Alfonso Z.C., Fraser J.K., Benhaim P., Hedrick M.H. Human adipose tissue is a source of multipotent stem cells. MBC Online 2004; 12: 4279.