Анализ полиморфизма генов сердечно-сосудистой системы и системы детоксикации в различных возрастных группах Санкт-Петербурга тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.15, кандидат биологических наук Глотов, Олег Сергеевич

• Глотов, Олег Сергеевич
• кандидат биологических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Глотов, Олег Сергеевич

Оглавление

Список сокращений

Введение

Научная новизна работы

Практическая значимость

Основные положения, выносимые на защиту

Глава I 1. Обзор литературы

1.1. Определение генетического полиморфизма. 17 Значение генетического полиморфизма в современной медицинской генетике.

1.2. Мультифакториальные болезни и факторы их 18 развития

1.2.1. Генетические факторы

1.2.2. Факторы внешней среды

1.3. Генетическое тестирование мультифакториальных 24 заболеваний

1.3.1. .Основные задачи предиктивной медицины

1.3.2. Сердечно-сосудистые заболевания и гены 27 предрасположенности

1.3.3. Онкологические заболевания и гены 31 предрасположенности к онкологическим заболеваниям

1.4. Старение и долгожительство

1.4.1. История изучения старения и долгожительства

1.4.2. Проблема старения на современном этапе

1.4.3. Факторы и причины старения 38 1.4.3.1 Факторы, определяющие продолжительность 39 жизни

1.4.3,2. Основные теории старения и долгожительства

1.4.4. Гены, ассоциированные с долгожительством

1.4.4.1. Гены сердечно-сосудистой системы

1.4.4.1.1. Гены метаболизма липидов

1.4.4.1.2. Гены ренин-ангиотензиновой системы

1.4.4.1.3. Гены, контролирующие обмен оксида азота

1.4.4.1.4. Гены, регулирующие уровень гомоцистеина 59 в крови

1.4.4.1.5. Гены фибринолиза

1.4.4.2. Гены метаболизма (внешней среды)

1.4.4.2.1.1- я фаза детоксикации

1.4.4.2.2.2-я фаза детоксикации

1.4.4.3. Гены антиоксидантной защиты и ответа на 68 стресс

1.4.4.4. Гены митохондриальной ДНК

1.4.4.5. Гены воспаления и иммунного ответа

Глава II 2. Материалы и методы

2.1. Обследуемые группы

2.2. Использованные материалы, реактивы, и 75 оборудование

2.3. Выделение ДНК из лейкоцитов периферической 76 крови

2.4. Проведение полимеразной цепной реакции (ПЦР)

2.4.1. Амплификация фрагментов ДНК для анализа 77 методом ПААГ

2.4.2. Амплификация фрагментов ДНК для анализа 79 методом гибридизации на олигонуклеотидном биочипе

2.5. Электрофорез в нативном ПААГ и визуализация 80 результатов

2.7. Гибридизацию меченого продукта на микрочипе 82 Регистрация изображения и его обработка

3.1. Анализ полиморфизма генов сердечно-сосудистой 85 системы (АСЕ, AGT, AGTR1, NOS33, MTHFR, GPIIIa, РАН) и системы детоксикации (GSTM1, GSTT1, NAT2) у новорожденных, лиц среднего возраста и у лиц старше 69 лет

3.1.1. Анализ соответствия распределения генотипов 86 закону Харди-Вайнберга

3.1.2. Сравнительный анализ частот генотипов и 87 аллелей генов (АСЕ, AGT, AGTR1, NOS3, MTHFR, GPIIIa, PAI1, GSTM1, GSTT1, NAT2) у новорожденных, лиц среднего возраста и у лиц старше 69 лет

3.1.3. Сравнительный анализ частот генотипов и 102 аллелей генов (АСЕ, AGT, AGTR1, NOS3, MTHFR, GPIIIa, РАН, GSTM1, GSTT1, NAT2) в возрастных подгруппах лиц старше 69 лет.

3.2. Сравнительный анализ частот генотипов и аллелей 110 генов сердечно-сосудистой системы (АСЕ, AGT, AGTR1, NOS33, MTHFR, GPIIIa, PAI1) и генов системы детоксикации (GSTM1, GSTT1, NAT2) у лиц старше 69 лет с некоторыми мультифакторными заболеваниями

2.6. Гидролиз ПЦР-фрагментов

2.9. Статистические методы

Глава III 3. Результаты и обсуждение

3.3. Корреляционный анализ генетических и 126 возрастных показателей

3.3.1. Корреляционный анализ между генами 127 сердечно-сосудистой системы (АСЕ, AGT, AGTR1, NOS33, MTHFR, GPIIIa, РАН), генами системы детоксикации (GSTM1, GSTT1, NAT2) и возрастом (для лиц старше 69 лет)

3.3.2. Корреляционный анализ взаимодействий между 128 генами сердечно-сосудистой системы (АСЕ, AGT,

AGTR1, NOS33, MTHFR, GPIIIa, PAI1) и системы детоксикации (GSTM1, GSTT1, NAT2)

3.4. Комплексный анализ генов сердечно-сосудистой 130 системы (АСЕ, AGT, AGTR1, NOS33, MTHFR, GPIIIa, РАН) и системы детоксикации (GSTM1, GSTT1, NAT2) у новорожденных, лиц среднего возраста (популяция) и у лиц старше 69 лет

3.4.1. Анализ взаимодействия генов сердечно- 132 сосудистой системы (АСЕ, AGT, AGTR1, NOS33, MTHFR, GPIIIa, PAI1) и системы детоксикации (GSTM1, GSTT1, NAT2) у новорожденных (Н), лиц среднего возраста (П) и у лиц старше 69 лет (С)

3.4.2. Анализ взаимодействия генов сердечно- 137 сосудистой системы (АСЕ, AGT, AGTRI, NOS33, MTHFR, GPIIIa, РАН) и системы детоксикации (GSTM1, GSTT1, NAT2) у лиц старше 69 лет с хроническими заболеваниями в анамнезе

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Анализ полиморфизма генов сердечно-сосудистой системы и системы детоксикации в различных возрастных группах Санкт-Петербурга»

Итогом Международной программы «Геном человека» явилась идентификация практически всех генов, в том числе и тех, мутации которых приводят к наследственным болезням либо предрасполагают к мультифакториальным заболеваниям. Появилась реальная возможность не только проводить точную молекулярную диагностику, но и с определенной вероятностью оценить предрасположенность человека к тому или иному заболеванию (Шварц, 1997; Nebert, 1997; Баранов и др., 2000).

Хорошо известно, что ранняя диагностика и своевременная профилактика различных заболеваний является актуальной проблемой современной медицины. Как правило, пациент обращается к врачу, когда болезнь уже имеет клинические проявления и не редко серьезные осложнения. При этом основная причина патологического процесса зачастую остается невыясненной (Баранов и др., 2000). В этом случае самое интенсивное лечение требует постоянного применения лекарственных препаратов и может лишь временно улучшить состояние пациента

Поиск генетических маркеров, отвечающих за наследственную предрасположенность к мультифакториальным заболеваниям, является главной целью современной предиктивной медицины. На практике такая цель может быть достигнута путем молекулярного тестирования генов, получивших название "генов предрасположенности" «suceptibility genes» (Collins, 1999). Последние можно определить как гены, наследственные варианты (полиморфизм) которых совместимы с жизнью, но в сочетании с неблагоприятными внешними факторами могут быть причиной различных патологических состояний и заболеваний, в том числе и таких частых как атеросклероз, ишемическая болезнь сердца, остеопороз, сахарный диабет, бронхиальная астма, и прочих (Баранов и др., 2000).

Выяснение составляющих генной сети каждого мультифакториального заболевания, идентификация в ней ключевых ("центральных") генов и генов-модификаторов (Колчанов и др., 2003), анализ ассоциации их полиморфизма с конкретным заболеванием, разработка на этой основе комплекса профилактических мероприятий для каждого конкретного пациента составляют стратегическую основу нового, быстро развивающего направления - предиктивной (предсказательной) медицины. Для более точной оценки роли генетического полиморфизма в этиологии заболевания особенно перспективным представляется изучение полиморфизма генов, контролирующих наиболее важные, биохимически взаимосвязанные процессы метаболизма. Особый интерес в этой связи представляет изучение полиморфизма генов сердечно-сосудистой системы и системы детоксикации ксенобиотиков. Результаты исследований показали, что полиморфизм генов соответствующих систем существенно меняет их активность, и может быть основной причиной биохимических и функциональных нарушений, приводящих к серьезным острым и хроническим заболеваниям (Пузырев, 2003; Rupert et al, 2003; Zhu et al, 2003; Naber et al, 2004a,b). Поэтому ранняя диагностика наследственной предрасположенности к этим заболеваниям имеет решающее значение для предиктивной медицины, как один из реальных путей в борьбе за активное долголетие, против преждевременного старения (Schachter et al, 1994; Varcasia et al., 2001; Анисимов, 2003).

Число работ, посвященных изучению особенностей частот "функционально-значимого" полиморфизма в различных популяциях стремительно растет. Подробно изучается полиморфизм генов, вовлеченных в этиологию и патогенез многих тяжелых хронических заболеваний, таких как сердечно-сосудистые, нейро-дегенеративные и онкологические (Baranov et al., 1996; Шварц, 1997; Пузырев, 2003).

Важная информация о вкладе того или иного генетического полиморфизма в развитие мультифакториальных заболеваний, в процессы долголетия и старения может быть получена путем сравнения частот аллелей в разных возрастных группах, начиная от рождения и до глубокой старости. В доступной литературе такие исследования нами не обнаружены. Исключение составляют специальные исследования преимущественно последних лет, посвященные сравнению аллельных частот некоторых генов у лиц среднего возраста и у столетних стариков с целью поиска генетического полиморфизма, положительно ассоциированного с долгожительством (Анисимов, 2003).

Цель настоящей работы - анализ полиморфизма генов сердечнососудистой системы и системы детоксикации в разных возрастных группах (новорожденные, лица среднего возраста и старше 69 лет)

Достижение поставленной цели предусматривает решение следующих задач:

1. Исследовать полиморфизм генов сердечно-сосудистой системы {АСЕ, AGT, AGTR1, NOS3, MTHFR, GPIIIa, PAI1)-,

2. Исследовать полиморфизм генов системы детоксикации (GSTM1, GSTT1, NAT2)\

3. Провести сравнительный анализ полиморфизма генов сердечнососудистой системы и генов системы детоксикации в разных возрастных группах;

4. Проанализировать ассоциацию полиморфизма изученных генов с некоторыми частыми возрастными заболеваниями.

Научная новизна работы:

S Впервые изучены особенности аллельного полиморфизма семи генов сердечно-сосудистой системы {АСЕ, AGT, AGTR1, NOS3, MTHFR, GPIIIa, РАН) и трех генов системы детоксикации (GSTM1, GSTT1, NAT2) в трех возрастных группах населения Северо-Западного региона РФ.

S Проанализированы ассоциации полиморфных вариантов изученных генов с пятью различными заболеваниями у лиц старше 69 лет: ишемическая болезнь сердца (ИБС), гипертоническая болезнь (ГБ), острое нарушение мозгового кровообращения (ОНМК), инсулиннезависимый сахарный диабет (ИНСД), катаракта.

S Впервые для трех возрастных групп показаны отличия в распределении частот генотипов по отдельным генам (NAT2 и GSTM1) и их сочетаниям (GPIIIa А1/А1 + AGTR1 А/- и GPIIIa А1/А1 + GSTM1 0/0), установлены различия в распределении частот сочетанных генотипов четырех генов системы «Давление», и трех генов системы детоксикации.

S Впервые показано, что у лиц мужского пола частоты А2 аллели гена GPIIIa и сочетанного генотипа GSTM1 (+) GSTT1 (+) уменьшаются в ряду новорожденные - лица среднего возраста - лица старше 69 лет.

S Впервые выявлены возрастные «рубежи» изменения частот генотипов: 75 лет для генотипа А2/А2 (GPIIIa), 90 лет - для генотипа С/С (AGT).

S Для лиц старше 69 лет впервые установлена ассоциация сочетанных генотипов GSTM1 (0/0)+ MTHFR (С/-) + NAT2 (N/S) с ИБС, GPIIIa (А2/А2) + NOS3 (4/4 или 5/5) - с ИНСД, AGT (Т/Т) - с ОНМК, AGTR1 (А/С) + PAI1 (4G/4G или 5G/5G)+ NOS3 (4/4 или 5/5) - с катарактой. Для лиц старше 69 лет при комплексном анализе полиморфизма генов, продукты которых регулируют давление, впервые показано, что «неблагоприятные» аллели и генотипы этой системы ассоциированы с ИНСД.

Практическая значимость:

Анализ полиморфных вариантов генов сердечно-сосудистой системы (АСЕ, AGT, AGTR1, NOS3, MTHFR, GPIIIa, РАН) и генов системы детоксикации (GSTM1, GSTT1, NAT2) можно рассматривать как прогностический тест для оценки риска развития ИБС, ГБ, ОНМК, ИНСД и катаракты.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Распределение частот генотипов по отдельным генам (NAT2 и GSTM1), их сочетаниям (GPIIIa А1/А1 + AGTR1 AJ- и GPIIIa А1/А1 + GSTM1 0/0), а также частот сочетанных генотипов 4 генов регулирующих давление, и 3 генов системы детоксикации в трех возрастных группах отличается.

2. Выявлено уменьшение частоты А2 аллели GPIIIa гена и сочетанного генотипа GSTM1 (+) GSTT1 (+) у лиц мужского пола в ряду новорожденные - лица среднего возраста - лица старше 69 лет.

3. Установлены возрастные «рубежи» изменения частот генотипов: 75 лет для генотипов АСЕ (I/I) и GPIIIa (А2/А2), 90 лет - для генотипа AGT (С/С).

4. У лиц старше 69 лет выявлена ассоциация генотипов: GSTM1 (0/0)+ MTHFR (С/-) + NAT2 (N/S) с ИБС, GPIIIa (А2/А2) + NOS3 (4/4 или 5/5) -с ИНСД, AGT (Т/Т) - с ОНМК, AGTR1 (А/С) + PAI1 (4G/4G или 5G/5G)+ NOS3 (4/4 или 5/5) - с катарактой. Некоторые сочетанные генотипы по 4-м генам системы «Давление», ассоциированы с ИНСД у лиц старше 69 лет.

5. Выявленные ассоциации полиморфизма изученных генов с долгожительством и мультифакториальными заболеваниями подтверждают предположение о том, что с возрастом происходит элиминация из популяции ряда генотипов и аллелей генов «предрасположенности».

6. Наличие «функционально неблагоприятных» аллелей следует учитывать при разработке индивидуальных программ профилактики заболеваний и «антистарения».

Заключение диссертации по теме «Генетика», Глотов, Олег Сергеевич

Выводы

1. Распределение частот генотипов по единичным генам (NAT2 и GSTM1), их аллельным сочетаниям (GPIIIa А1/А1 + AGTR1 А/- и GPIIIa А1/А1 + GSTM1 0/0), а также частоты «суммы баллов» >7 для системы «Давление» и «суммы баллов» > 3 для системы «Детоксо» достоверно отличаются между новорожденными, лицами среднего и старшего (после 69 лет) возраста;

2. Частоты А2 аллели GPIIIa гена и сочетанного генотипа GSTM1 (+/-и/или +/+) GSTT1 (+/+ и/или +/-) у лиц мужского пола в ряду новорожденные - лица среднего возраста - лица старше 69 с возрастом уменьшаются;

3. Частота генотипов I/I (ген АСЕ) и А2/А2 (ген GPIIIa) у лиц 75-89 лет достоверно ниже по сравнению с лицами 69-74 лет, тогда как частота генотипа С/С (ген AGT) у лиц старше 90 лет достоверно возрастает по сравнению с таковой в группе более молодых индивидуумов;

4. В группе лиц старше 69 лет генотип GSTMI (0/0)+ MTHFR (С/-) + NAT2 (N/S) ассоциирован с ишемической болезнью сердца (ИБС); генотип GPIIIa (А2/А2) + NOS3 (4/4 или 5/5) - с инсулиннезависимым сахарным диабетом (ИНСД); генотип AGT (Т/Т) - с острой недостаточностью мозгового кровообращения (ОНМК); генотип AGTR1 (А/С) + PAI1 (4G/4G или 5G/5G) + NOS3 (4/4 или 5/5) - с катарактой; накопление «суммы баллов» >7 системы «Давление» характерно для лиц старше 69 лет с ИНСД.

Заключение

В последние годы возрастает число работ, посвященных изучению особенностей частот функционально-значимого полиморфизма разных генов. Как показывает анализ мировой литературы, уже доступны для клинического применения более 300 генетических тестов, в том числе и для многих, наиболее частых мультифакториальных болезней. Идентификация всех генов человека, открытие новых генных сетей существенно увеличивают возможности генетического тестирования наследственной предрасположенности, что позволяет говорить о начале «эры персонифицированной (индивидуальной) медицины», основанной на понимании генетической уникальности каждого человека (Баранов и др., 2000, 2005; Черч, 2006). В недалеком будущем исследование генетических маркеров (наличие ассоциированных аллелей) позволит по-новому взглянуть и на процесс старения.

Тестирование аллельных вариантов генов Фазы 1 и 2 детоксикации позволяет идентифицировать индивидуумов с предрасположенностью к заболеваниям, провоцируемых неблагоприятными экзогенными факторами. Естественно, что выявление лиц группы высокого риска до появления признаков заболевания имеет принципиальное значение для правильного медико-генетического консультирования и своевременной и адекватной упреждающей терапии (Баранов и др., 2000; Сиделева, 2002). Комплексное тестирование генов "внешней среды" позволяет не только идентифицировать индивидуумов с "быстрым" и "медленным" типами метаболизма ксенобиотиков, но и определять индивидуальную чувствительность к различным фармакологическим препаратам (Motulsky, 1999). Более того, именно таким образом можно подобрать индивидуальную дозировку различных лекарств (Кукес, 2004). Тестирование генов, продукты которых играют ключевую роль в метаболических процессах, также имеет большое значение для оценки индивидуальной предрасположенности к различным мультифакториальным болезням. Анализ полиморфизма таких генов (р53, L-MYC, VDR3, CollAl, ER1 и др.) оправдан для оценки индивидуальной чувствительности к остеопорозу, эндометриозу, ВИЧ инфекции, к онкологическим заболеваниям. Аллельный полиморфизм многих других генных локусов обнаруживает ассоциацию с диабетом, атеросклерозом, гипертонией, ишемической болезнью сердца, некоторыми психическими болезнями (DQA1, DQB1, TNFA, АСЕ, AGT, AGTR1, NOS3, АРОЕ, APOCIII, GPIIIa, DRD и др.) (Баранов и др., 2000, Баранов и Хавинсон, 2002).

Таким образом, в настоящее время уже на основе имеющихся данных вполне оправдано тестирование генетических маркеров, отвечающих за наследственную предрасположенность к некоторым мультифакториальным заболеваниям - ведущим причинам сокращения периода активного долголетия. Важно, однако, отметить, что современный уровень наших знаний в области предиктивной медицины делает оправданным применение генетического тестирования только в семьях высокого риска, то есть там, где уже имеется больной с четко установленным мультифакториальным заболеванием, у которого известны особенности полиморфизма генов соответствующей генной сети. Рандоминезированное генетическое тестирование - задача будущей предиктивной медицины. Она может быть решена только при наличии масштабных проспективных исследований, доказывающих полезность соответствующего генетического тестирования для выявления лиц высокого риска и наличия эффективных путей профилактики конкретного мультифакториального заболевания.

Как известно, основными причинами смертности на сегодняшний день являются сердечно-сосудистая патология и онкологические заболевания. Несмотря на большой прогресс в лечении этих заболеваний, разработки ученых, направленные на их профилактику представляются наиболее актуальным и востребованным направлением современной медицины. Концептуальную основу этих разработок составляют исследования генетической предрасположенности.

Оценка вклада наследственного компонента в долгожительство основана на изучении разных метаболических систем и, соответственно, разных групп генов. Существуют различные варианты классификации генов «старения-долгожительства» (Butler et al., 2003).

Как упоминалось ранее (см. 1.4.) представляется целесообразным выделить две основные группы таких генов (Баранов и Баранова, 2007):

1. собственно гены долгожительства и старения ("age regulated genes" (Graham et al, 2004)).

2. гены «предрасположенности», аллельные варианты которых ответственны за возникновение хронических мультифакториальных болезней (Баранов и др., 2000)

Настоящее исследование было посвящено изучение возрастных особенностей аллельных частот генов второй группы - генов сердечнососудистой системы и системы детоксикации.

Стандартные исследования полиморфизма генов в разных возрастных группах обычно включали две группы сравнения: первая -либо группа лиц старше 60 лет (Brattstrom et al, 1999; Anisimov et al, 2001; Хавинсон и др., 2002;; Stessman et al, 2005) либо группа столетних (Bladbjerg et al, 1999; Blanche et al, 2001; Choi et al, 2003; Varcasia et al,

2001) и вторая - контрольная группа (популяция). Контрольная группа обычно включала школьников (6-17 лет) соответствующего региона (Anisimov et al., 2001) или лиц от 8 до 60 (Хавинсон и др., 2002).

Между тем, хорошо известно, что вследствие достаточно высокой перинатальной смертности и смерти детей в возрасте до 2-х лет значительная часть полиморфных аллелей, влияющих на выживаемость, должны подвергаться элиминации именно в раннем постнатальном периоде. Поэтому без анализа «особенностей» генетического полиморфизма у новорожденных спектр распределения функционально-значимых аллелей генов «предрасположенностей» остается явно неполной.

Попытки проанализировать взаимодействие между различными полиморфными вариантами генов «предрасположенностей» и долгожительством пока сравнительно немногочисленны (Хавинсон и др.,

2002). Анализ уже имеющихся литературных данных возрастных особенностей аллельных частот разных генов позволяет отметить следующие основные факты:

S частоты редких аллелей генов APOCIII и LP А достоверно снижаются после 60 лет (Хавинсон и др., 2002).

S снижение частоты генотипа I/I гена АСЕ, достигает достоверных значений после 70 лет (Хавинсон и др., 2002).

S установлена ассоциация с долгожительством определенных аллелей генов ренин-ангиотензиновой системы (REN) и генов Н гаплотипа митохондрий (Tan et al., 2002).

Несмотря на то, что, молекулярно-генетические основы старения и долгожительства активно изучаются, существует мало работ, посвященных комплексному анализу возрастных особенностей полиморфизма генов разных метаболических систем. Остаются открытыми вопросы взаимодействия продуктов генов между собой и с внешней средой. Не до конца понятны этнические и географические особенности ассоциации тех или иных полиморфных аллелей с долгожительством и старением.

Поэтому к вопросу о клинической интерпретации результатов генетического тестирования риска мультифакториальных заболеваний в настоящее время необходимо подходить с большой осторожностью. При этом следует использовать комплексный подход, включающий, наряду с анализом частот соответствующих полиморфных аллелей в популяции -изучение динамики возрастных изменений этих аллелей и анализ их межгенных взаимодействий (Хавинсон и др., 2002).

Для выяснения роли генетических факторов предрасположенности к долгожительству и к ряду частых мультифакториальных заболеваний в данной работе была предпринята попытка сравнительного анализа частот полиморфных вариантов генов сердечно-сосудистой системы (АСЕ, AGT, AGTR1, NOS3, MTHFR, GPIIIa, РАН) и генов системы детоксикации (GSTMI, GSTTI, NAT2). Исследования проводили на образцах ДНК пациентов трех возрастных групп, не являющихся родственниками и проживающих в Северо-западном регионе России (популяционный контроль). У части лиц старшей возрастной группы (> 69) лет на момент обследования или в анамнезе отмечались такие заболевания как ИБС, ГБ, ОНМК, ИНСД, катаракта.

Для оценки комплексного влияния полиморфизма изученных генов нами предложен подход на основе анализа «суммы баллов».

В результате проведенного исследования установлены следующие основные факты возрастных «особенностей» полиморфизма изученных генов:

1. достоверное уменьшение частоты I/I генотипа и I аллели гена ангиотензинпревращающего фермента (АСЕ) у лиц 75-89 лет по сравнению с таковой у лиц 69-74 лет; предполагается, что наличие I аллели является фактором риска диабета 2 типа и ожирения, у индивидуумов старше 75 лет. Неблагоприятный эффект данного полиморфизма нивелируется после 90 лет;

2. достоверное отличие частот генотипов и аллелей гена рецептора ангиотензиногена (.AGTR1) в группе лиц среднего возраста; достоверное отличие частот С и А аллелей между мужчинами и женщинами в группе новорожденных и лиц среднего возраста, достоверное отличие распределения С/- генотипа между мужчинами и женщинами среднего возраста;

3. уменьшение частоты А2 аллели гена активации агрегации тромбоцитов (GPIIIa) у лиц мужского пола в ряду новорожденные - лица среднего возраста - лица старше 69 лет, что позволяет предположить некоторое значение данного полиморфизма в детерминации продолжительности жизни у человека. Складывается впечатление, что этот полиморфизм является фактором риска сердечно-сосудистой патологии только до 90 лет;

4. статистически значимое различие между частотами генотипов глютатион-Б-трансферазы GSTMI в группах новорожденных и лиц среднего возраста; достоверные различия между новорожденными мужского пола и мужчинами среднего и старшего возраста; возможно, лица с генотипом GSTM1 (0/0) мужского пола имеют определенные адаптивные преимущества и как следствие большую продолжительность жизни;

5. возрастание частоты «двойных нулевых» генотипов GSTT1 (0/0) и GSTM1 (0/0) у индивидуумов мужского пола в ряду новорожденные - лица среднего возраста - лица старше 69 лет при одновременном уменьшение частоты GSTT1 (+/+ или +/-) и GSTM1 (+/+ или +/-) генотипов;

6. статистически значимое различие в распределении частот генотипов N-ацетилтрансферазы (NAT2) между новорожденными и лицами среднего возраста, а также между новорожденными и долгожителями, что позволяет предполагать меньшую продолжительность жизни независимо от пола у «медленных» ацетиляторов по сравнению с носителями N аллели;

7. выявленное отличие частоты генотипа А1/А1 (GPIIIa) и А/- (.AGTR1) у новорожденных и лиц среднего возраста, по-видимому, указывают на то, что сочетание этих генотипов благоприятно для детей и может способствовать «повышению выживаемости» в детском возрасте, но не оказывает заметного влияния на продолжительность жизни лиц среднего и пожилого возраста;

8. достоверное отличие частоты генотипа Al/Al (GPIIIa) 0/0 (GSTMI) в группе новорожденных по сравнению с таковой у лиц среднего и пожилого (>69 лет) возраста, по-видимому, определяется действием отбора;

9. достоверное отличие частоты сочетанного генотипа, ассоциированного со сниженным давлением («сумма баллов» 7 и более) у лиц старше 69 лет по сравнению с лицами среднего возраста свидетельствующее о том, что генотипы, определяющие «суммарно» повышенное давление и ассоциированые с сердечно-сосудистыми заболеваниями и, по-видимому, неблагоприятны для увеличения продолжительности жизни, так как с возрастом они элиминируются из популяции, особенно у лиц мужского пола;

10. достоверное возрастание частоты сочетанного генотипа системы «Детоксо» («сумма баллов» 3 и более) в ряду новорожденные - лица среднего возраста - лица старше 69 лет; такое сочетание ассоциировано с долгожительством;

11. полиморфизм генов системы фибринолиза и обмена гомоцистеина не являются ключевыми в определении продолжительности жизни;

Естественно, что все приведенные факты и, конечно, высказанные на их основе предположения и гипотезы требуют дальнейшего тщательного изучения.

В результате сравнительного анализа частот аллелей и генотипов изученных генов у лиц старше 69 лет с заболеваниями и без таковых установлено:

1. увеличение частоты гетерозиготного (I/D) генотипа по гену АСЕ в группах лиц старше 69 лет с различными заболеваниями по сравнению с таковыми без соответствующих нозологий, возможно, объясняется тем, что, несмотря на наличие заболевания, носители данного генотипа живут дольше, чем лица с таковым заболеванием и другим генотипом;

2. достоверное увеличение частот N/S генотипа NAT2 и сочетанных генотипов: GSTM1 (0/0) + NAT2 (N/S), MTHFR(С/-) + NAT2 (N/S), GSTM1 (0/0) + MTHFR (C/-) + NAT2 (N/S) у лиц старше 69 лет с ишемической болезнью сердца (ИБС), чем без ИБС; достоверное увеличение частот А2/А2 генотипа GPIIIa и сочетанного генотипа GPIIIa (А2/А2) + NOS3 (4/4 или 5/5) у лиц старше 69 лет с инсулиннезависимым сахарным диабетом (ИНСД) и таковыми без ИНСД; частота носителей «суммы баллов» 6 и 7 баллов системы «Давление» (аллели и генотипы риска) в группе лиц старше 69 лет с ИНСД оказалась достоверно выше таковой у лиц старше 69 лет без ИНСД;

4. статистически значимое различие в распределении частот генотипов по AGT гену между лицами старше 69 лет с острым нарушением мозгового кровообращения (ОНМК) и без ОНМК;

5. достоверное понижение частоты 4G/5G генотипа гена PAI1 у лиц старше 69 лет с катарактой (К), позволяющее высказать предположение, что в возрасте старше 69 лет, генотип 4G/5G определяет «устойчивость» к катаракте и является маркером для тестирования возрастного риска этого заболевания; достоверное повышение сочетанных генотипов AGTR1 (А/С) + NOS3 (4/4 или 5/5) и AGTR1 (А/С) + РАН (4G/4G или 5G/5G) + NOS3 (4/4 или 5/5) у лиц старше 69 лет с К по сравнению с таковыми без К, что позволяет предполагать аддитивный эффект полиморфизма генов AGTR1,

PAI1 и N0S3 в развитии К и рекомендовать тестирование этих генов для выявления лиц высокого риска К.

Использованный в работе статистический метод подсчета, основанный на "анализе суммы баллов" позволяет проводить оценку суммарного вклада нескольких генов одной системы в развитие мультифакториального заболевания, что способствует большей объективизации результатов генетического тестирования и их адекватной интерпретации.

Необходимы дальнейшие углубленные исследования не только ретоспективного, но и проспективного плана для проверки данного подхода на других генных системах и других мультифакториальных заболеваниях. Однако, уже на основании полученных данных можно судить о том, что гены систем «Давление» и «Детоксо» принимают непосредственное участие в определении продолжительности жизни на разных возрастных рубежах.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Глотов, Олег Сергеевич, 2007 год

1. Александров А.А. Повышенное артериальное давление в детском и подростковом возрасте (ювенильная артериальная гипертония) // РМЖ. -1997.-Т. 9.-С. 559-565.

2. Анисимов В.Н. Молекулярные и физиологические механизмы старения. СПб: Наука, 2003.- 468 с.

3. Баранов B.C. Баранова Е.В. Иващенко Т.Э. Асеев М.В. Геном человека и гены «предрасположенности» (Введение в предиктивную медицину) // СПб. Издательство "Интермедика". 2000. - 272с.

4. Баранов B.C., Хавинсон В.Х. Определение генетической предрасположенности к наследственным и мультифакториальным заболеваниям. Генетический паспорт // Методические рекомендации. -СПб.: ИКФ "Фолиант".- 2001. -48с.

5. Баранов B.C., Баранова Е.В., Иващенко Т.Э. Геном человека как научная основа предиктивной медицины. Геномика медицине // ред. Иванов В.И. и Киселев JI.JL, Москва, Академкнига. - 2005. - С. 361-380.

6. Баранов B.C., Баранова Е.В. Генетические аспекты старения // Успехи геронтол. 2007. - в печати.

7. Баранова Е. Код ДНК, или Как продлить молодость. М.: ACT; СПб.: Астрель-СПб. 2007. - 222с.

8. Беспалова О. Н., Аржанова О. Н., Иващенко Т. Э. и др. Генетические факторы предрасположенности к привычному невынашиванию беременности// Ж. акуш. и женских болезней. 2001. - T.XLX. - С. 8-13.

9. Бондаренко О.Н., Галстян Г.Р., Анцифиров М.Б., Кузнецова Т.В., Кобылянский А.Г. Биологическая роль оксида азота при сахарном диабете // Сахарный диабет.2002. В 2(15). - С. 56-63.

10. Вторая конференция "Biologie Prospective", Санторини, Греция, 2004.

11. Гаврилов Л.А., Гаврилова Н.С. Биология продолжительности жизни. -М.: Наука. 1991.-280 с.

12. Гинтер Е.К. Популяционная генетика и медицина // Вестник РАМН.-2001.-№ 10.-С. 25-31.

13. Гладышев Г.П., Курнакова Н.В. Движущая сила эволюций живой материи и термодинамическая теория старения // Успехи геронтол. 1998. -Т. 2.-С. 49-58.

14. Гладышев Г.П. Термодинамика старения // Изв. РАН. Сер. Биол. -1998.-№5. -С. 533-543.

15. Гладышев Г.П. Термодинамическая теория старения выявляет причины старения и смерти с позиций общих законов природы // Успехи геронтол. 2001. - Т. 7. - С. 42-45.

16. Глотов О.С., Глотов А.С., Тарасенко О.А., Иващенко Т.Э., Баранов B.C. Исследование функционально значимого полиморфизма АСЕ, AGTR1, ENOS, MTHFR, MTRR и АРОЕ генов в популяции Северо

17. Западного региона России // Экологическая генетика. 2004. - Т. 2. № 3. -С. 32-35.

18. Горбунова В.Н., Баранов B.C. Введение в молекулярную диагностику и генотерапию наследственных заболеваний // СПб., специальная литература. 1997. - 287с.

19. Грмек М.Д. Геронтология учение о старости и долголетии // М.: Наука. - 1964.- 132 с.

20. Дильман В.М. Черыре модели медицины // М.: Медицина. 1987. - 288 с.

21. Животовский J1.A. Популяционная биометрия // Наука. Москва. В-1991.-С. 70, 78-81.

22. Иващенко Т.Э., Сиделева О.Г, Петрова М.А., Гембицкая Т.Е., Орлов А.В., Баранов B.C. Генетические факторы предрасположенности к бронхиальной астме // Генетика. 2001. - Т. 37, №1. - С. 107-111.

23. Колчанов Н.А., Ананько Е.А., Колпаков Ф.А., Подколодная О.А. и др. Генные сети // Молекулярная биология. 2000.

24. Кольман Я., Рем К.-Г. Наглядная биохимия: Пер. с нем. // М.: Мир,-2000. 469 с.

25. Крутько В.Н., Подколзин А.А., Донцов В.И. Общие причины, механизмы и типы старения // Успехи геронтол. 1997. - Т. 1. - С. 34-40.

26. Кукес В.Г. Метаболизм лекарственных средств: клинико-фармакологические аспекты // М: Издательство «Реафарм». 2004. - 144с.

27. Кулинский В.И. Обезвреживание ксенобиотиков // Соросовский Образовательный журнал. - 1999. - В.1. - С. 8-12.

28. Леонтьева И.В. Атеросклероз, ишемическая болезнь сердца, инфаркт миокарда как педитрические проблемы: Лекция №29 // Москва. 1997.

29. Мечников И.И. Этюды оптимизма // М.: 1988. 328 с.

30. Пальцев М.А. Современные подходы к изучению патогенеза болезней // Вест. РАМН. 1999. В.9. - С. 22-25.

31. Пузырев В.П. Генетика артериальной гипертензии (современные исследовательские парадигмы) // Клиническая медицина. 2003. - Н. 1. - С. 12-18.

32. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTIC А // М. МедиаСфера. 2003. - 312 с.

33. Розельфельд С.В. Спонтанный мутагенез у мышей разных линий при старении // Успехи геронтол. 2001. - Т. 8. - С. 44-49.

34. Саприн А.Н. Ферменты метаболизма и детоксикации ксенобиотиков // Успехи биологической химии М."Наука". 1991. Т. 32. - С. 146-172.

35. Саприн А.Н., Калинина Е.В. Окислительный стресс и его роль в механизмах апоптоза и развития патологических процессов // Успехи биол. и химии.- 1999.- Т. 39.- С. 289-326.

36. Середенин С.Б. Лекции по фармакогенетике // М., Медицинское информационное агентство.- 2004.-303 е.: ил.

37. XVII (80) сессия Общего собрание Российской академии медицинских наук. Москва. 4 октября 2006г.

38. Сиделева О.Г. Полиморфные аллели генов, ассоциированные с патогенезом атопической формы бронхиальной астмы у жителей Северо-запада России: Автореф. дис. канд. биол. наук. // СПб.- 2002. 19 с.

39. Синклер Д.Г., Гайренте Л. Секрет генов долголетия // В мире науки. -2006. №6. - С. 23-29.

40. Степанов В.А. Этногеномика неселения Северной Евразии // Томск: Изд-во " Печатная мануфактура". 2002. - 244 с.

41. Степанов В.А., Пузырев В.П. Анализ аллельных частот семи микросателлитных локусов Y-хромосомы в трех популяциях тувинцев // Генетика. 2000. - Т.36. - С. 241-248.

42. Торчинов Е.А. Даосизм: опыт историко-религиозного описания // СПб.: Лань.- 1998.-448 с.

43. Худолей В.В. Канцерогены: характеристики, закономерности, механизмы действия // СПб.: НИИ Химии СПбГУ.- 1999. 419с.

44. Хуснутдинова Э.К., Фатхлисламова Р.И., Хидиятова И.М. и др. Рестрикционно-делеционный полиморфизм V-области митохондриальной ДНК в популяциях народов Волго-Уральского региона // Генетика. 1997. -Т. 33.-С. 996-1000.

45. Шварц Е.И. Современные возможности молекулярной генетики в клинической практике // Матер, симп. "Вопросы фармакотерапии в клинической практике: прошлое, настоящее, будущее". СПб. - 1997. - С. 3-6.

46. Шляхто Е.В., Конради А.О. Роль генетических факторов в ремоделировании сердечно-сосудистой системы при гипертонической болезни // Артериальная гипертензия. 2002. - Т. 4. - Н. 3.

47. Щербакова М.Ю. Группы риска детей по атеросклерозу (выявление, профилактика, лечение): Автореф. дис. д-ра мед. наук. Москва.-1999.

48. Чазов Е.И. Ишемическая болезнь сердца, инфаркт миокарда, атеросклероз // Москва. 1992. - 178 с.

49. Черных С.И. Новые аспекты в изучении роли гормона роста человека в регуляции процессов роста и развития// Научно-практический журнал "Медичний Всесвгг". 2003. - III. №2.

50. Черч Дж. Проект «Персональный геном» // В мире науки. 2006. -№4.-С. 30-39.

51. Эммануэль Н.М. Некоторые молекулярные механизмы и перспективы профилактики старения // Изв. АН СССР. Сер. Биол. 1975. - №4. - С. 785794.

52. Agerholm-Larsen В., Nordestgaard B.G., Steffensen R., Sorensen T.I., Jensen G., Tybjaerg-Hansen A. ACE Gene Polymorphism: Ischemic Heart Disease and Longevity in 10 150 Individuals // Circulation. 1997. - V 20;95(10).- P. 2358-67.

53. Arbustini E, Dal Bello B, Morbini P, Burke AP, Bocciarelli M, Specchia G, Virmani R. Plaque erosion is a major substrate for coronary thrombosis in acute myocardial infarction//Heart. 1999 Sep;82(3):269-72.

54. Assmann G., Schulte H., Funke H., von Eckardstein A. The emergence of triglycerides as a significant independent risk factor in coronary artery disease // Eur Heart J. 1998. - V. 19 Suppl M. - P. M8-14.

55. Autrup H. Genetic polymorphisms in human xenobiotica metabolizing enzymes as susceptibility factors in toxic response // Mutat Res. 2000 - V.3.-№464(1)-P.65-76.

56. Balistreri C.R., Candore G., Colonna-Romano G., Lio D., Caruso M., Hoffmann E., Franceschi C., Caruso C. Role of Toll-like receptor 4 in acute myocardial infarction and longevity // JAMA. 2004. - V. 17;292(19). - P. 2339-40.

57. Barzilai N., Atzmon G., Schechter C., Schaefer E.J., Cupples A.L., Lipton R., Cheng S., Shuldiner A.R. Unique lipoprotein phenotype and genotypeassociated with exceptional longevity // JAMA. 2003. - V. 15;290(15). - P. 2030-40.

58. Bathum L., Christiansen L., Jeune В., Vaupel J., McGue M., Christensen K. Apolipoprotein e genotypes: relationship to cognitive functioning, cognitive decline, and survival in nonagenarians // J Am Geriatr Soc. 2006. - V. 54(4). -P. 654-8.

59. Becker D.M., Kwiterovich P.O. Coronary prone families: the clinical meaning of importance " family history" // Cardiovasc. Rev. 1988. - V. 9. -P.63-71.

60. Beisiegel U., Weber W., Ihrke G., Herz J., Stanley K.K. The LDL-receptor-related protein, LRP, is an apolipoprotein E-binding protein // Nature. 1989. -V. 14;341(6238). - P. 162-4.

61. Benetos A., Safar M.E. Aortic collagen, aortic stiffness, and ATI receptors in experimental and human hypertension // Can. J. Physiol. Pharmacol. 1996. -V. 74(7). - P. 862-866.

62. Bernstein C., Bernstein H. Aging, Sex, and DNA Repair // San Diego: Acad. Press, Inc., 1991.

63. Bladbjerg E.M, Andersen-Ranberg K., de Maat M.P., Kristensen S.R., Jeune В., Gram J., Jespersen J. Longevity is independent of common variationsin genes associated with cardiovascular risk // Thromb Haemost. 1999. -V. 82(3).-P. 1100-5.

64. Blanche H., Cabanne L., Sahbatou M., Thomas G. A study of French centenarians: are ACE and APOE associated with longevity? // С R Acad Sci III. 2001. - V. 324(2). - P. 129-35.

65. Brattstrom L., Zhang Y., Hurtig M., Refsum H., Ostensson S., Fransson L., Jones K., Landgren F., Brudin L., Ueland P.M. A common methylenetetrahydrofolate reductase gene mutation and longevity // Atherosclerosis. 1998. -V. 141(2). - P. 315-9.

66. Brown-Borg H.M., Borg K.E., Meliska C.J., Bartke A. Dwarf mice and the ageing process // Nature. 1996. - V.7;384(6604). - P. 33.

67. Brown-Borg H.M., Rakoczy S.G. Catalase expression in delayed and premature aging mouse models // Exp Gerontol. 2000. - V. 35(2). - P. 199212.

68. Cappola A.R., Xue Q.L., Ferrucci L., Guralnik J.M., Volpato S., Fried L.P. Insulin-like growth factor I and interleukin-6 contribute synergistically to disability and mortality in older women // J Clin Endocrinol Metab. 2003. - V. 88(5).-P. 2019-25.

69. Capri M., Salvioli S., Sevini F., Valensin S., Celani L., Monti D., Pawelec G., De Benedictis G., Gonos E. S., and Franceschi C. The Genetics of Human Longevity // Ann. N.Y. Acad. Sci. 2006. - V. 1067. - P. 252-263.

70. Cascorbi I., Brockmoller J., Mrozikiewicz P.M., Muller A., Roots I. Arylamine N-acetyltransferase activity in man // Drug Metab Rev.- 1999.- V. 31(2). P.489-502.

71. Choi Y.H., Kim J.H., Kim D.K., Kim J.W., Kim D.K., Lee M.S., Kim C.H., Park S.C. Distributions of ACE and APOE polymorphisms and their relations with dementia status in Korean centenarians // J Gerontol A Biol Sci Med Sci. -2003.-V. 58(3).-P. 225-6.

72. Christiansen L., Bathum L., Frederiksen H., Christensen K., 2004. Paraoxonase 1 polymorphisms and survival. Eur. J. Hum. Genet. 12, 843-7.

73. Christiansen L., Brasch-Andersen C., Bathum L., Kruse T.A., K. Christensen. A longitudinal study of the effect of GSTT1 and GSTMI gene copy number on survival // Mechanisms of Ageing and Development. 2006. -V. 127.-P. 597-9.

74. Collins F.S. Shattuck Lecture Medical and Societal Consequences of the Human Genome Project//New Engl. J. Med. - 1999. - V.341, N.l. - P. 28-37.

75. Cotton R.G., Scriver C.R. Proof of "disease causing" mutation // Hum Mutat.- 1998.-V. 12(1).-P. 1-3.

76. Cutler R.G. Human longevity and aging: possible role of reactive oxygen species // Ann N Y Acad Sci. 1991. - V. 621. - P. 1-28.

77. Daly AK. Molecular basis of polymorphic drug metabolism // J Mol Med.-1995.-V.73(1 l)-P.539-53.

78. Dato S., Passarino G., Rose G., Altomare K., Bellizzi D., Mari V., Feraco E., Franceschi C., De Benedictis G. Association of the mitochondrial DNAhaplogroup J with longevity is population specific // Eur J Hum Genet. 2004. -V. 12(12).-P. 1080-2.

79. De Benedictis G., Carotenuto L., Carrieri G., De Luca M., Falcone E., Rose G., Yashin A.I., Bonafe M., Franceschi C. Age-related changes of the 3'APOB-VNTR genotype pool in ageing cohorts // Ann Hum Genet. 1998. - V. 62(Pt 2).-P. 115-22.

80. Dilman V.M., Anisimov V.N. Hypothalmic mechanisms of ageing and of specific age pathology~I. Sensitivity threshold of hypothalamo-pituitary complex to homeostatic stimuli in the reproductive system // Exp Gerontol. -1979.-V. 14(4).-P. 161-74.

81. Dix D., Cohen P. On the role of aging in carcinogenesis // Anticancer Res. 1999. -V. 19(1B). - P. 723-6.

82. Ershler W.B., Keller E.T. Age-associated increased interleukin-6 gene expression, late-life diseases, and frailty // Annu Rev Med. 2000. - V. 51. - P. 245-70.

83. Farmer J.A., Gotto A.M. Dyslipidemia and other risk factor for coronary artery disease // In: Braunwald E., ed. Heart Disease: A Text-book of Cardiovascular Medicine. Philadelphia: Saunders. 1997. - P. 1126-1160.

84. Ferns G.A., Stocks J., Ritchie C., Galton D.J. Genetic polymorphisms of apolipoprotein C-III and insulin in survivors of myocardial infarction // Lancet. -1985. V. 10;2(8450). - P. 300-3.

85. Finch C.E., Ruvkun G. The genetics of aging //Annu Rev Genomics Hum Genet. 2001. - V. 2. - P. 435-62.

86. Finch C.E. The biology of aging in model organisms // Alzheimer Dis Assoc Disord. 2003. - V. 17, Suppl 2. - P. 39-41.

87. Fox C.S., Heard-Costa N.L., Vasan R.S., Murabito J.M., D'Agostino R.B. Sr., Atwood L.D. Genomewide Linkage Analysis of Weight Change in the Framingham Heart Study // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2005. - V. 15. - P. 3197-3201.

88. Franceschi С., Monti D., Sansoni P., Cossarizza A. The immunology of exceptional individuals: the lesson of centenarians // Immunol Today. 1995. -V. 16(1).-P. 12-6.

89. Frossard P.M., Kane J.P., Malloy M.J., Bener A. Renin gene Mbol dimorphism is a discriminator for hypertension in hyperlipidaemic subjects // Hypertens Res. 1999. - V. 22(4). - P. 285-9.

90. Fryer A.A., Bianco A., Hepple M., Jones P.W., Strange R.C., Spiteri M.A. Polymorphism at the glutathione S-transferase. A new marker for bronchial hyperresponsiveness and asthma // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2000. -V.161.- P. 1437-1442.

91. D., Strange R.C., Stucker I., Sugimura H., To-Figueras J., Vineis P., Yu M.C., Taioli E. // Metabolic Gene Polymorphism Frequencies in Control Populations // Cancer Epidemiology, Biomarkers & Prevention. 2001. - V 10. - P. 1239— 1248.

92. Gaspari L., Pedotti P., Bonafe M., Franceschi C., Marinelli D., Mari D., Garte S., Taioli E. Metabolic gene polymorphisms and p53 muta-tions in healthy centenarians and younger controls // Biomarkers. 2003. - V. 8. - P. 522-528.

93. Gems D., McElwee J.J. Broad spectrum detoxification: the major longevity assurance process regulated by insulin/IGF-1 signaling? // Mech Ageing Dev.2005.-V. 126(3).-P. 381-7.

94. Gershon D. The mitochondrial theory of aging: is the culprit a faulty disposal system rather than indigenous mitochondrial alterations? // Exp Gerontol. 1999. - V. 34. - P. 613-9.

95. Ginaldi L., De Martinis M., D'Ostilio A., Marini L., Loreto M.F., Martorelli V., Quaglino D. The immune system in the elderly: II. Specific cellular immunity // Immunol Res. 1999. - V. 20(2). - P. 109-15.

96. Giner V., Poch E., Bragulat E., Oriola J., Gonzalez D., Coca A., De La Sierra A. Renin-angiotensin system genetic polymorphisms and salt sensitivity in essential hypertension // Hypertension. 2000. - V. 35(1 Pt 2). - P. 512-517.

97. Glotov O.S., Baranov V.S. Genetic polymorphisms of detoxyfication genes as basic predictive markers of aging // Anti-Aging Medicine World Congress.2006. Paris, March 23 -25. - P. 116.

98. Greider C.W, Blackburn E.H. Identification of a specific telomere terminal transferase activity in Tetrahymena extracts // Cell. 1985. - V. 51. - P. 405413.

99. Harman D. Free-radical theory of aging. Increasing the functional life span // Ann N Y Acad Sci. 1994. - V.30;717. - P. 1-15.

100. Hayes J.D., Pulford D.J. The glutathione S-transferase supergene family: regulation of GST and the contribution of the isoenzymes to cancer chemoprotection and drug resistance // Crit. Rev. Biochem. Mol. Biol. 1995. -V. 30.-P. 445-600.

101. Haywood G.A., Gullestad L., Katsuya Т., Hutchinson H.G., Pratt R.E., Horiuchi M., Fowler M.B. ATI and AT2 angiotensin receptor gene expression in human heart failure // Circulation. 1997. - V. 4;95(5). - P. 1201-1206.

102. Hilgers K.F., Langenfeld M.R., Schlaich M., Veelken R., Schmieder R.E. 1166 A/C polymorphism of the angiotensin II type 1 receptor gene and the response to short-term infusion of angiotensin II // Circulation. 1999. - V. 28;100(13). - P. 1394-1399.

103. Hubert C., Houot A.M., Corvol P., Soubrier F. Structure of the angiotensin I-converting enzyme gene. Two alternate promoters correspond to evolutionary steps of a duplicated gene // J. Biol. Chem. 1991. - V. 15;266(23). - P. 1537715383.

104. Hughes P.E., Pfaff M. Integrin affinity modulation // Trends Cell Biol. -1998.-V. 8(9).-P.359-64.

105. Humphries S.E., Talmud P.J., Hawe E., Bolla M., Day I.N., Miller G.J. Apolipoprotein E4 and coronary heart disease in middle-aged men who smoke: a prospective study // Lancet. 2001. - V. 14;3 58(9276). - P. 115-9.

106. Hurme M., Lehtimaki Т., Jylha M., Karhunen P.J., Hervonen A. Interleukin-6 -174G/C polymorphism and longevity: a follow-up study // Mech Ageing Dev. 2005. - V. 126(3). - P. 417-8.

107. Inoue I., Nakajima Т., Williams C.S. et al. A nucleotide substitution in the promoter of human angiotensinogen is assotiated with essential hypertensionand affect basal transport in vitro// J. Clin. Invest. 1997. - V. 99. - P. 17861797.

108. Ivaschenko Т. E., Sideleva O. G., Baranov V. S. Glutathione-S-transferase mu and theta genes polymorphysm as neew risk factors of atopic bronchial asthma // J. Mol. Med. 2002. - V. 80. - P. 39-43.

109. Jeunemaitre X., Inoue I., Williams C.S. et al. Haplotypes of angiotensinogen in essential hypertension//Am. J. Hum. Genet. 1997. - V. 60. -P. 1448-1460.

110. Joos L., Pare P., Sanford A. Genetic risk factors for chronic obstructive pulmonary disease // Swiss med. Wkly. -2002.- V. 132. P. 27-37.

111. Juronen E., Tasa G., Uuskula M., Pooga M., Mikelsaar A.V. Purification, characterization and tissue distribution of human class theta glutathione S-transferase Tl-1 // Biochem. Mol. Biol. Int. 1996. - V. 39. - P. 21-29.

112. Jouanny P., Guillemin F., Kuntz C., Jeandel C., Pourel J. Environmental and genetic factors affecting bone mass // Similarity of bone density among members of healthy families. Arthritis Rheum. 1995. - V. 38(1). - P. 61-7.

113. Kervinen K., Savolainen M.J., Salokannel J. Hynninen A., Heikkinen J., Ehnholm C., Koistinen M.J., Kesaniemi Y.A. Apolipoprotein E and В polymorphisms longevity factors assessed in nonagenarians // Atherosclerosis. -1994.-V. 105.-P. 89-95.

114. Kinirons M. T. & O'Mahony M. S. Drug metabolism and ageing // Br J Clin Pharmacol. 2004. - V. 57(5). - P. 540-4.

115. Knecht T.P., Glass C.K. The influence of molecular biology on our understanding of lipoprotein metabolism and the pathobiology of atherosclerosis // Adv Genet. 1995. - V. 32. - P. 141-98.

116. Kyvik K.O., Green A., Beck-Nielsen H. Concordance rates of insulin dependent diabetes mellitus: a population based study of young Danish twins // BMJ. 1995. - V. 311 (7010). - P. 913-917.

117. Lagaay A.M., D'Amaro J., Ligthart G.J., Schreuder G.M., van Rood J.J., Hijmans W. Longevity and heredity in humans. Association with the human leucocyte antigen phenotype // Ann N Y Acad Sci. 1991. - V. 621. - P. 78-89.

118. Laisney V., Gross M.S., Frezal J. Human genes for glutation-S-transferases // Hum. Genet. 1984. - V. 68. - P.221-227.

119. Lee J., Lauer R.M., Clarke W.R. Lipoprotein in the progeny of young men with coronary artery disease: children with increased risk // Pediatrics.- 1986. -V.78. P.330-337.

120. Lewis DF. Homology modelling of human cytochromes P450 involved in xenobiotic metabolism and rationalization of substrate selectivity // Exp Toxicol Pathol. 1999. - V.51(4-5). - P. 369-74.

121. Lifton R.P., Gharavi A.G., Geller D.S. Molecular mechanisms of human hypertension // Cell. 2001. - V. 23; 104(4). - P. 545-556.

122. Lio D., Scola L., Crivello A., Colonna-Romano G., Candore G., Bonafe M., Cavallone L., Francesch C. and Caruso C. Gender-specific association between 1082 IL-lOpromoter polymorphism and longevity // Genes and Immunity. -2002. -V. 3. P. 30-33.

123. Lottermoser K., Dusing R., Ervens P., Koch В., Burning Т., Sachinidis A., Vetter H., Ко Y. The plasminogen activator inhibitor 1 4G/5G polymorphism isnot associated with longevity: a study in octogenarians // J Mol Med. 2001. -V. 79(5-6).-P. 289-93.

124. Meyer U.A., Zanger U.M. Molecular mechanisms of genetic polymorphisms of drug metabolism //Annu Rev Pharmacol Toxicol.- 1997. V. 37.-P. 269-96.

125. Miller R.A. The aging immune system: primer and prospectus // Science. -1996. V. 5;273(5271). - P. 70-4.

126. Miller R.A. The aging immune system: subsets, signals, and survival // Aging (Milano). 1997.- V. 9(4 Suppl). - P. 23-4.

127. Moniek P., Bladbjerg E., Hjelmborg J., Bathum L., Jespersen J., Christensen K. Genetic Influence on Inflammation Variables in the Elderly //Arterioscler Thromb Vase Biol. 2004. - V. 24. - P. 2168-2173.

128. Morley A.A. The somatic mutation theory of ageing // Mutat Res. 1995. -V. 338(1-6).-P. 19-23.

129. Motulsky A.G. If I had a gene test, what would I have and who would I tell? // Lancet. 1999. - V. 354 Suppl 1. - P. SI35-7.

130. Muiras M.L., Verasdonck P., Cottet F., Schachter F. Lack of association between human longevity and genetic polymorphisms in drug-meta-bolizing enzymes at the NAT2, GSTM1 and CYP2D6 loci // Hum. Genet. 1998. -V 102.-P. 526-532.

131. Naber C.K., Siffert W. Genetics of human arterial hypertension // Minerva Med. 2004.- V. 95(5). - P. 347-56.

132. Naber C.K., Siffert W., Erbel R., Heusch G. Genetics of human coronary vasomotion // Arch Mai Coeur Vaiss. 2004. - V. 97(3). - P. 255-60.

133. Nebert D.W., Carvan M.J. Ecogenetics: from Biology to Health // Toxicol.Industr.Health. 1997. - V. 13.-P. 163-192.

134. Parkin D.M., Bray F.I., Devesa S.S. Cancer burden in the year 2000. The global picture // Eur J Cancer. 2001. - V. 37 Suppl 8. - P. S4-66.

135. Pastrakuljic A., Tang B.K., Roberts E.A., Kalow W. Distinction of CYP1A1 and CYP1A2 activity by selective inhibition using fluvoxamine and isosafrole // Biochem Pharmacol. 1997. - V. 21; 53(4). - P. 531-8.

136. Perls Т., Levenson R., Regan M., Puca A. What does it take to live to 100? // Mech Ageing Dev. 2002. - V. 123(2-3). - P. 231-42.

137. Pesch В., Dusing R., Rabstein S., Harth V., Grentrup D., Bruning Т., Landt O., Vetter H., Ко Y.D. Polymorphic metabolic susceptibility genes and longevity: a study in octogonarians // Toxicol. Lett. 2004. - V. 151. - P. 283290.

138. Peto R., Parish S.E., Gray R.G. There is no such thing as ageing, and cancer is not related to it // IARC Sci Publ. 1985. - V. 58. - P. 43-53.

139. Procopciuc L., Popescu Т., Jebeleanu G., Pop D., Zdrenghea D. Essential arterial hypertension and polymorphism of angiotensinogen M235T gene // J. Cell. Mol. Med. 2002. - V. 6(2). - P. 245-250.

140. Rahman I., MacNee W. Lung glutation and oxidative stress: implications in cigarette smoke-induced airway disease // Am. J. Physiol. 1999. - V. 277. - P. 1067-1088.

141. Ralston S.H. The genetics of osteoporosis // Bone. 1999. - V. 25(1). - P. 85-6.

142. Roberts-Thomson I.C., Ryan P., Khoo K.K., Hart W.J., McMichael A.J., Butler R.N. Diet, acetylator phenotype, and risk of colorectal neoplasia // Lancet.-1996. V. 18; 347(9012). - P. 13 72-4.

143. Ross R. Cellular and molecular studies of atherogenesis // Atherosclerosis. 1997. -V. 131 Suppl:S3-4.

144. Ross I.K. Mitochondria, sex, and mortality //Ann N Y Acad Sci. 2004. -V. 1019.-P. 581-4

145. Ross O.A., McCormack R., Curran M.D,. Duguid R.A., Barnett Y.A., Rea I.M., Middleton D. Mitochondrial DNA polymorphism: its role in longevity of the Irish population // Exp Gerontol. 2001. - V. 36(7). - P. 1161-78.

146. Ross O.A., Curran M.D., Meenagh A., Williams F., Barnett Y.A., Middleton D., Rea I.M. Study of age-association with cytokine gene polymorphisms in an aged Irish population // Mech Ageing Dev. 2003. - V. 124(2).-P. 199-206.

147. Rupert J.L., Kidd K.K., Norman L.E., Monsalve M.V., Hochachka P.W., Devine D.V. Genetic polymorphisms in the Renin-Angiotensin system in high-altitude and low-altitude Native American populations // Ann. Hum. Genet. -2003.-V. 67(Pt 1).-P. 17-25.

148. Salvioli S., Bonafe M., Capri M., Monti D., Franceschi C. Mitochondria, aging and longevity~a new perspective // FEBS Lett. 2001. - V. 492(1-2). - P. 9-13.

149. Sambrook J., Fritsch EP., Maniatis. Molecular cloning: a Laboratory Coldspring Harbour Lab // Coldspring Harbour, NY, 1989.

150. Saretzki G., Von Zglinicki T. Replicative aging, telomeres, and oxidative stress // Ann N Y Acad Sci. 2002. - V. 959. - P. 24-9.

151. Schachter F., Faure-Delanef L., Guenot F., Rouger H., Froguel P., Lesueur-Ginot L., Cohen D. Genetic associations with human longevity at the APOE and ACE loci // Nat Genet. 1994. - V. 6(1). - P. 29-32.

152. Schindowski K., Frohlich L., Maurer K., Muller W.E., Eckert A. Age-related impairment of human T lymphocytes' activation: specific differences between CD4 (+) and CD8 (+) subsets // Mech Ageing Dev. 2002. - V. 123(4).-P. 375-90.

153. Shigenaga M.K., Hagen T.M., Ames B.N. Oxidative damage and mitochondrial decay in aging // Proc Natl Acad Sci USA.- 1994. V. 8;91(23). - P. 10771-8.

154. Sing C.F., Davignon J. Role of the apolipoprotein E polymorphism in determining normal plasma lipid and lipoprotein variation // Am J Hum Genet.-1985.-V. 37(2).-P. 268-85.

155. Singh R., Kolvraa S., Bross P., Christensen K., Gregersen N., Tan Q., Jensen U.B., Eiberg H., Rattan S.I. Heat-shock protein 70 genes and human longevity: a view from Denmark // Ann N Y Acad Sci. 2006. - V. 1067. - P. 301-8.

156. Skulachev V.P. The programmed death phenomena, aging, and the Samurai law of biology // Exp Gerontol. 2001. - V. 36(7). - P. 995-1024.

157. Sorensen A.B., Weinert F.E., Sherrod L.R. Human Development and the Life Course: Multidisciplinary Perspectives. Hillsdale: Lawrence Erlbaum Assoc., 1986. 245.

158. Talmud P.J., Humphries S.E. Apolipoprotein C-III gene variation and dyslipidaemia // Curr Opin Lipidol. 1997. - V. 8(3). - P. 154-8.

159. Tan Q., De Benedictis G., Ukraintseva S.V., Franceschi C., Vaupel J.W., Yashin A.I. A centenarian-only approach for assessing gene-gene interaction in human longevity // Eur J Hum Genet. 2002. - V. 10(2). - P. 119-24.

160. Tanaka C., Kamide K., Takiuchi S., Miwa Y., Yoshii M., Kawano Y., Miyata T. An alternative fast and convenient genotyping method for the screening of angiotensin converting enzyme gene polymorphisms // Hypertens. Res. 2003. - V. 26(4). - P. 301-306.

161. Tiret L., Bonnardeaux A., Poirier O. et al. Synergistic effect of the angiotensin-converting enzyme and angiotensin II type receptor gene polymorphism on risk of myocardial infarction // Lancet. 1994. - V. 344. - P. 910-913.

162. Todd J.A. Genetics of type 1 diabetes // Pathol Biol. 1997. - V. 45. - P. 219-227.

163. Todesco L., Angst C., Litynski P., Loehrer F., Fowler В., Haefeli W.E. Methylenetetrahydrofolate reductase polymorphism, plasma homocysteine and age // Eur J Clin Invest. 1999. - V. 29(12). - P. 1003-9.

164. Turyn D., Dominici F.P., Sotelo A.I., Bartke A. Specific interactions of growth hormone (GH) with GH-receptors and GH-binding proteins in vivo ingenetically GH-deficient Ames dwarf mice I I Growth Horm IGF Res. 1998. -V. 8(5).-P. 389-96.

165. Utermann G., Steinmetz A., Weber W. Genetic control of human apolipoprotein E polymorphism: comparison of one- and two-dimensional techniques of isoprotein analysis // Hum Genet. 1982. - V. 60(4). - P. 344-51.

166. Van Zandycke S.M., Sohier P.J., Smart K.A. The impact of catalase expression on the replicative lifespan of Saccharomyces cerevisiae // Mechanicms of Ageing and Development. 2002. - V.l 23 (4). - P. 365-373.

167. Verbeke P., B.F.C. CLARK & S.I.S. RATTAN. Reduced levels of oxidized and glycoxidized proteins in human fibroblasts exposed to repeated mild heat shock during serial passaging in vitro // Free Radic. Biol. Med. 2001. -V.31.-P. 1593-1602.

168. Vijg J. Somatic mutations and aging: a re-evaluation // Mutat Res. 2000. -V. 17; 447(1).-P. 117-35.

169. Von Zglinicki T. Oxidative stress shortens telomeres // Trends Biochem Sci. 2002. - V. 27(7). - P. 339-44.

170. Yamamura K., Hirose N., Arai Y. Contribution of glutathione S-transferase Ml to longevity // J. Am. Geriatr. Soc. 2001. - V. 49. - P. 338-339.

171. Zaman A.G., Helft G., Worthley S.G., Badimon J.J. The role of plaque rupture and thrombosis in coronary artery disease // Atherosclerosis. 2000. -V. 149(2).-P. 251-66.

172. Zhang Y., Herman B. Ageing and apoptosis // Mechanicms of Ageing and Development. 2002. - V. 123 (4). - P. 245-260.