Анализ опиатов, барбитуратов и каннабиноидов методом латексной агглютинации с использованием функциональных полимерных микросфер тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.06, кандидат химических наук Солодухина, Надежда Михайловна

• Солодухина, Надежда Михайловна
• кандидат химических наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат химических наук Солодухина, Надежда Михайловна

Оглавление

Введение

Глава 1. Литературный обзор

1.1 Актуальность проблемы наркомании

1.2. Характеристики опиатов, каннабиноидов, барбитуратов

1.3 Методы диагностики наркомании

1.3.1. Иммунохимические методы анализа наркотических веществ

1.3.2. Экспресс методы диагностики наркомании: Метод РОСА и метод на основе реакции латексной агглютинации

1.4. Использование полимерных носителей для создания

биотехнологических тест-систем

Глава 2. Экспериментальная часть

2.1. Исходные вещества и материалы

2.2 Методы синтеза и исследования

2.2.1 Синтез и получение рабочих характеристик полистирольных (пСт)

и полиметилметакрилатных (пММА)суспензий с разными диаметрами,

содержащие карбоксильные группы на поверхности

2.2.2. Синтез и получение рабочих характеристик иммунологических

реагентов

Глава 3. Результаты и обсуждения

3.1 Синтез и определение свойств полимерных микрочастиц

3.1.1 Синтез полистирольных микрочастиц

3.1.2 Синтез полиметилметакрилатных микрочастиц

3.2 Синтез белковых конъюгатов морфина, барбамила, А9-ТГК

3.3 Разработка способа иммуноанализа низкомолекулярных соединений (опиатов, барбитуратов, каннабиноидов) на основе реакции латексной агглютинации

3.3.1 Оптимизация условий проведения реакции латексной агглютинации

3.3.2. Оценка аналитических параметров разработанных диагностических наборов на выявления наркотических веществ в моче методом латексной агглютинации

3.3.3. Апробация разработанных диагностических наборов реагентов

3.3.4. Определение времени хранения разработанных диагностических наборов реагентов

Выводы

Сокращения

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Анализ опиатов, барбитуратов и каннабиноидов методом латексной агглютинации с использованием функциональных полимерных микросфер»

Введение

В последние годы в нашей стране и в мире злоупотребление наркотическими веществами (НВ) приобретает все более широкие масштабы и негативно влияет на все сферы деятельности человека [1]. Начальным этапом выявления и предупреждения наркомании являются массовые обследования людей с помощью скрининговых методов анализа. К ним, в первую очередь, относятся способы, включающие различные методы иммуноанализа с инструментальной либо визуальной детекцией. Наибольшее распространение получили иммунофлуоресцентный, иммуноферментный, иммунохроматографические методы.

Большое значение имеет разработка методов экспресс диагностики для быстрого и достоверного выявления факта употребления НВ в «полевых» условиях (в отсутствие приборного оснащения).

В настоящее время для проведения экспресс анализа на выявление НВ в биологических жидкостях человека используются иммунодиагностические тест-системы, включающие применение функциональных частиц монодисперсных суспензий. Такие тест-системы позволяют получить достоверный результат, обладают высокой скоростью проведения анализа (10-15 минут), простотой интерпретации полученных результатов, низкой стоимостью исследования.

Принцип работы указанных диагностических тест-систем основан на высокоспецифичной иммунохимической реакции между антигеном и антителом, которые предварительно иммобилизовали на полимерные носители. При проведении анализа полимерные конъюгаты, содержащие антигены и антитела взаимодействуют и образуют пространственные сетки -агломераты, наличие которых в растворе может быть зарегистрировано различными методами. Например, методом спектрофотометрии, нефелометрии или простым визуальным наблюдением.

Цель работы - Разработка эффективного иммунологического метода определения наркотических веществ (опиатов, каннабиноидов, барбитуратов) в физиологической жидкости человека (моче) на основе реакции латексной агглютинации с использованием функциональных полистирольных и

полиметилметакрилатных микросфер.

Актуальность темы диссертации определяется важностью разработки высокоэффективного, недорогого, простого в исполнении, не требующего специального оборудования экспресс-метода определения наркотических веществ в физиологической жидкости человека, основанного на реакции латексной агглютинации, как части диагностического комплекса мер, направленных на предупреждение распространения и мониторинг наркомании в РФ.

Научная новизна исследования определяется тем, что впервые:

— Разработан метод получения конъюгатов низкомолекулярных гаптенов - производных опиатов, барбитуратов и каннабиноидов - с полимерными полистирольными и полиметилметакрилатными микросферами.

— Для создания иммунохимических реагентов использованы полимерные микросферы со средним диаметром 0,5 мкм, стабилизированные карбоксилсодержащим кремнийорганическим ПАВ, устойчивые в буферных растворах.

— установлены оптимальные параметры проведения РЛА при анализе опиатов, барбитуратов и каннабиноидов в моче человека.

Практическая значимость.

Разработан новый экспресс-метод анализа на основе метода ЛА для определения опиатов, каннабиноидов и барбитуратов в физиологической жидкости человека (моче) с чувствительностью, удовлетворяющей требованиям иммунохимических методов анализа. Разработанные

диагностические наборы реагкнтов обладают следующими параметрами: предел обнаружения (ПО) каннабиноидов составляет 50 нг/мл, ПО барбитуратов и опиатов составляет 300 нг/мл.

Разработанные диагностические наборы являются готовым продуктом и могут внедряться на рынке изделий медицинского назначения.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Использование полистирольных и полиметилметакрилатных частиц со средним размером 0,5 мкм в качестве носителей биолигандов при создании диагностических наборов реагентов для определения опиатов, каннабиноидов и барбитуратов в моче человека.

2. Способы определения низкомолекулярных гаптенов (опиатов, барбитуратов, каннабиноидов) методом латексной агглютинации на основе полимерных монодисперсных микросфер.

3. Определение диагностической значимости разработанных наборов реагентов для определения опиатов, барбитуратов, каннабиноидов методом ЛА и возможность их использования в медицинской практике для проведения экспресс-анализа указанных НВ.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология (в том числе бионанотехнологии)», Солодухина, Надежда Михайловна

Выводы.

1. Определены оптимальные размеры функциональных частиц.

Выбраны полистирольные частицы с диаметром 0,55 мкм и полиметилметакрилатных частицы с диаметром 0,475 мкм для их использования в качестве носителя биолигандов.

2. Выбраны иммунохимических реагенты: синтетические конъюгированные антигены, содержащие в своем составе производные опиатов, каннабиноидов, барбитуратов.

3. Разработаны методы получения новых белково-полимерных комплексов исследуемых наркотических веществ (опиатов, барбитуратов, каннабиноидов) с использованием различных полимерных суспензий.

4. Разработаны новые методы иммуноанализа опиатов, барбитуратов и каннабиноидов на основе реакции латексной агглютинации. Предел обнаружения разработанных диагностических наборов, полученных на основе полистирольных полимерных микросфер, составил 300 нг/мл для определения опиатов и барбитуратов, 50 нг/мл для определения каннабиноидов.

5. Проведено сравнение результатов одновременного анализа образцов мочи методами ЛА и ВЭЖХ. Показана возможность использования указанных методов в диагностической практике.

Сокращения

РЛА - реакция латексной агглютинации пСт - полистирол пММА - полиметилметакрилат

ПАВ - поверхностно-активное вещество

НВ - наркотические вещества

А9-ТГК - Д9-тетрагидроканнабинол

М-БСА - конъюгат морфин-бычий сывороточный альбумин Б-БСА - конъюгат барбамил - бычий сывороточный альбумин А9-ТГК-БСА - конъюгат А9-тетрагидроканнабинол - бычий сывороточный альбумин

М-ова - конъюгат морфин-овальбумин Б-ова - конъюгат барбамил-овальбумин

А-ТГК-ова - конъюгат А9-тетрагидроканнабинол -овальбумин ИФА - иммунноферментный анализ

ПФИА - поляризационный флуоресцентный иммуноанализ ИХА - иммунохроматографический анализ ПСК - персульфат калия,

КС - поверхностно-активное вещество - полидиметилсилоксан Ат - антитело Аг - антиген

ПО - предел обнаружения

ХТЛ - химико-токсикологические лаборатории

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Солодухина, Надежда Михайловна, 2012 год

Список Литературы

1. Annual report on the state of the drugs problem in Europe EMCDDA, Lisbon, November 2010.

2. Великанова Л.П. О. В. Каверина, Р. В. Бисалиев. Наркология, Феникс. 2006, - 383 с.

3. Вайсов С.Б. Наркотическая и алкогольная зависимость, 2008, - 272 с.

4. Указ Президента РФ № 690 от 9 июня 2010 г. «Об утверждении стратегии государственной антинаркотической политики Российской федерации до 2020 г.».

5. Пятницкая И. Н. Общая и частная наркология: Руководство для врачей. // М.: Издательство «Медицина», 2008. 640 с.

6. Шабанов П.Д Наркология. Практическое руководство для врачей..//М.: ГЭОТАР-МЕД, 2003. 560 с.

7. Веселовская Н. В., Коваленко А. Е. Наркотики. Свойства, Действие, Фармакокинетика, Метаболизм. Пособие для работников наркологических больниц, наркодиспансеров, химико-токсикологических и судебно-химических лабораторий // Москва: Триада-Х, 2000. 196 с.

8. Devane W.A., Dysarz F.A., Johnson M.R., Melvin L.S., Howlett A.C. Determination and characterization of a cannabinoid receptor in rat brain. //Mol Pharmacol. 1988. 34(5).p.605-13.

9. Иванец H.H., Анохина И.П., Винникова M.A.. Наркология // ГЭОТАР МЕДИЦИНА, 2008, 720 с.

10. Симонов Е.А., Найденова Л.Ф., Ворнаков С.А Наркотические средства и психотропные вещества, контролируемые на территории Российской Федерации // InterLab, 2003, 412 с.

11. Приказ Министерства здравоохранения РФ № 289 от 5 октября 1998 г. «Об аналитической диагностике наркотических средств, психотропных и других токсических веществ в организме человека».

12. Приказ Минздравсоцразвития России №40 от 27.01.2006 г. «Об организации проведения химико-токсикологических исследований при аналитической диагностике наличия в организме человека алкоголя, наркотических средств, психотропных и других токсических веществ».

13. Трубачева Ж.Н., Мягкова М.А., Абраменко Т.В., Еремин С.А., Смирнов A.B., БуркинА.А. Твердофазный иммуноферментный метод количественного определения гидазепама в моче человека // Хим.-Фарм. Журн. 2000. №10. С.49-51.

14. Мягкова М.А., Копоров Д.С., Морозова В.И., Паршин А.Н., Абраменко Т.В., Панченко О.Н. // Новый подход к диагностике наркомании и тест-системы для определения наркотиков, психотропных веществ и антител к ним. // Современные наукоемкие технологии. 2004. № 3. С. 95-96.

15. Демерчян Ш.А., Петроченко С.Н., Смирнов A.B., Абраменко Т.В., Мягкова М.А. // Твердофазный иммуноферментный метод определения амфетаминов в моче // Клиническая лабораторная диагностика. 2007. № 12. С. 20-33.

16. Eremin S.A., Zaitchev S.V., Egorov A.M., Ermakov A.N., Smirnov A.V., Izotov B.N. // Anal. Chim. Acta. 1989. V. 227. P. 287-290.

17. Смирнов A.B., Еремин С.А., Егоров A.M., Изотов Б.Н. // Хим.-фарм. журнал. 1994. № 1. С. 54-60.

18. Еремин С.А., Уфимцева Е.В., Изотов Б.Н. // Вопросы наркологии. 1995. № 3. С. 31-36.

19. «Метод раннего выявления потребления наркотических веществ «Дианарк» для предупреждения наркомании»: Медицинская технология АА № 0000179.-М.: Росздравнадзор. 2010. - 30 с.

20. Демерчян Ш.А., Петроченко С.Н., Копоров Д.С ., Мягкова М.А., Абраменко Т.В., Фурсова А.Д., Смирнов A.B., Воложин A.B. // Разработка иммуноферментного анализа иммуноглобулинов класса А, связывающих производные опиатов, каннабиноидов, амфетаминов в слюне и сыворотке крови у больных наркоманией // Биотехнология. 2007. № 2. С. 91-96.

21. Федеральные авиационные правила "Медицинское освидетельствование летного, диспетчерского состава, бортпроводников, курсантов и кандидатов, поступающих в учебные заведения гражданской авиации" (ФАП МО ГА 2009).

22. Изотов Б.Н., Козлов A.A., Диденко Е.С., Доровских И.В., Калягин Ю.С. // Методы химико-токсикологической диагностики в мониторинге наркологической ситуации в России // Наркология. 2007. № 8. С. 33-37.

23. Савчук С.А., Симонов Е.А., Сорокин В.И., Дорогокупец О.Б., Веденин А.Н. // Применение метода фиксации времен удерживания при хромато-масс-спектрометрическом и хроматографическом определении наркотических средств // Журнал аналитической химии. 2004. Т. 59. № 10, С. 1059-1069.

24. Симонов Е.А., Изотов Б.Н., Фесенко A.B. Наркотики: методы анализа на

коже, в её придатках и выделениях. - М.: «Анахарсис». 2000. - 130 с.

102

25. Брюн. Е.А., Мягкова М.А., Морозова B.C., Морозов С.В. Сравнительный опыт определения наркотических веществ в России и за рубежом. - М.: «Вопросы наркологии». 2011, №1, стр. 9-16.

26. Попечителев Е.П., Старцева О.Н., Аналитические исследования в медицине, биологии и экологии. 2003, Москва: Высшая Школа, 280 с.

27. Ricci F., Volpe G., Micheli L., Palleschi G., A review on novel developments and applications of immunosensors in food analysis. Anal Chim. Acta. 2007, v. 605(2), p. 111-129.

28. Yang M., Li H., Javadi A., Gong S. Multifunctional mesoporous silica nanoparticles as labels for the preparation of ultrasensitive electrochemical immunosensors. Biomater. 2010, v. 31(12), p. 3281-3286.

29. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: Учебник, под ред. Воробьева А.А. 2004, Москва: Мед. информац. Агентство, 704 с.

30. Williams A.T.R., Smith D.S. Fluorescence polarization immunoassay. Methods of immunological analysis. Albert W.H.W., Staines N.A. (Editors) 1991, VCH: Wolnheim.

31. Любавина И.А., Зинченко A.A., Лапенков М.И., Николаева Т.Л. // Экспресс-метод выявления морфина в водных образцах с помощью иммунохроматографии с использованием моноклональных антител, меченных коллоидным золотом // Биоорганическая химия. 2005. Т. 31. № 1. С. 108-112.

32. Вызова Н.А., Свиридов В.В., Гаврилова Н.Ф., Распопова Е.Н., Яковлева И.В., Генералова А.Н., Лукин Ю.В., Черкасова В.В., Жердев А.В., Дзантиев Б.Б. Иммунохроматографическая и латекс-агглютинационная

системы детекции дифтерийного токсина. // Биоорганическая химия. 2009. Т. 35. №4. С. 533-541.

33. Feldkamp С.S. Immunological reactions // Clinical Chemistry: Theory, Analysis, Correlation / L. Kaplan, A. Pesce, S. Kazmierzak. 2003. P. 216-245.

34. Энциклопедия клинических лабораторных тестов (под ред. Н.У.Тица). «Лабинформ», Москва, 1997, 960 с.

35. Кузьмина Н.С., Кириллова. Г.А., Гаврилова Н.Ф., Свиридов В.В., Кузнецова. Г.И., Яковлева И.В., Буркин М.А., Лукин Ю.В., Генералова А.Н., Станишевский Я.М., Грицкова И.А., Прокопов Н.И., Определение антител к тиреоглобулину и пероксидазе щитовидной железы в сыворотке крови человека в реакции латекс-агглютинации. Аллергия, астма и клиническая иммунология, 2005, № 8, стр. 19-24.

36. Nolan J. P. and Mandy F. Multiplexed and Microparticle-based Analyses: Quantitative Tools for the Large-Scale Analysis of Biological Systems.// Cytometry Part A, 69A, 2006, p.318-325.

37. Басырева Л.Ю. Создание диагностических тест-систем на основе полимерных суспензий и факторы, определяющие их чувствительность и специфичность.// Канд. диссертация 1994

38. Грицкова И.А., ЛобановА.Н., Станишевский Я.М., Прокопов Н.А., Кравцов Э.Г. Получение антительных диагностических тест-систем заданной специфичности. //Биотехнология.-М.-2003.-Вып.2-С.81-85.

39. Wilkins Т.А., Brouwers G., Mareschal J.-С., High sensitivity homogeneous partickle-based immunoassay for thyrotropin//Clin. Chem.-1988.-v.34.-N9.-p.1749-1752.

40. Particle aggregation method and apparatus: US Pat WO 93/19367 МКИ С G 08 F 34/244/ Coacley W.T. - published. 30.09.1993.

41. Direct agglutination test for pregnancy United States Patent 4003988. Inventors: Hoff, Gail (Millington, NJ) Prevorsek, Metka (Morristown, NJ). Application Number: 05/691915. Assignee: Warner-Lambert Company (Morris Plains, NJ). 436/534, 422/429, 436/818. G01N33/53; G01N33/543; G01N33/76; G01N33/53; G01N33/543; G01N33/74; (IPC 1-7): G01N31/02; G01N33/16. Filing Date: 06/01/1976. Publication Date: 01/18/1977.

42. Composition and method for performing pregnancy tests: United States Patent 3234 096, МКИ G 08 N 32/00/ Pollak W. заявл. 15.11.1965, опубл. 12.04. 1966.

43. Способ иммунологической экспресс-диагностики токсических форм дифтерийной инфекции Пат. 2113172 Рф, МПК6 А 61В 10/00 / Меньшикова А.Ю., Шабсельс Б.М., Власов Г.П., Кветная А.С.; заявитель и патентообладатель НИИ инфекций, г. Санкт-Петербург - № 9400395/14; Заявл. 05.01.94; Опубл. 20.06.98. Бюл. № 17.

44. Способ экспресс-диагностики туберкулеза на основе реакции латекс-агглютинации: Пат. 2130615. РФ, G01N33/569 / Гизатулина Н.М.; Головлев И.Р.; Хлебников B.C.; Зимин А.Е.; Прокопов Н.И.; заявитель и патентообладатель Гизатулина Надия Мансуровна. - № 98109392/14; заявл. 18.05.1998 ; опубл.20.05.1999. Бюл. № 23 (II ч.) .

45. Способ получения латексного антигенного микобактериального диагностикума: Пат. 2117294 РФ, G01N33/569, G01N33/545. / Лазовская А.Л.; Воробьева З.Г.; Слинина К.Н. ; заявитель и патентообладатель Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечерноземной зоны РФ, МКИ6

в 01 N 33/569, 33/545. - № 97101164/13 ; заявл. 17.01.1997; опубл. 10.08.1998. Бюл. № 3.

46. Бургасова О. А., Кулешова Л.Б., Ценева Г.Я. и др. Сравнительная оценка различных иммунологических реакций в диагностике псевдотуберкулеза //Журн. микробиологии, эпидемиологии, иммунобиологии.-1996. -N2.-C.48-51.

47. Sanders R.C., Campbell A.D., Jenkins M.F. Routine detection of human rotavirus by latex agglutination: comparison with enzyme-linked immunosorbent assay, electron microscopy and polyacrylamide gel electrophoresis.//J Virol Methods. 1986, 13(4), p. 285

48. Васильев Б.Я., Васильева Р.И., Лобзин Ю.В. Острые кишечные заболевания. Ротавирусы и ротавирусная инфекция. // Лань,- 2000 г., - с.272.

49. Gonzalez V.D.G., Gugliotta L.M., Meira G.R., Giacomelli C.E. Latex of immunodiagnosis for detecting the chagas disease: II. Chemial coupling of antigen AG36 onto carboxylated latexes // Journal of Materials Science: Materials in Medicine. 2008. T. 19. № 2. P. 789-795.

50. Gonzalez V.D.G., Garcia V.S., Vega J.R., Meira G.R., Gugliotta L.M., Marcipar I.S. Immunodiagnosis of chagas disease: synthesis of three latex-protein complex containing different antigens of trypanosome cruzi // Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. 2010. T. 77. № 1. P. 12-17.

51. Папаян Л.П., Князева E.C. Д-Димер в клинической практике: Пособие для врачей // Под редакцией Н.Н. Петрищева. - М.: 000 «Инсайт полиграфик», 2002. - 20 с.

52. Иммунология. Практикум. - К.: Высшая школа. - 1989. - 302 с.

53. Хаитов P.M., Ярилин А.А., ПинегинБ.В. - Иммунология. Атлас. //ГЭОТАР-Медиа, 2011 г. С. 624.

54. Ройт А. Под ред. Василова Р.Г., Киркина А.Ф. Основы иммунологии. //Издательство Мир. 1991. С.328.

55. Грицкова И. А., Прокопов Н.И., Лобанов А.Н., Станишевский Я.М. Синтез полимерных суспезий для иммунохимических исследований //Тезисы научно-технической конференции. - Мурманск.-2001-е. 323-324.

56. Wang D., Q. Luo, X. Li, X. Wang, H. Yong, Z. Zhen, X. Liu, D. Jia One-step method to prepare monodisperse polymer particles in the micron size range // Colloid Polym Sci., 2003, № 282, p. 48-55.

57. Marks V. False-Positive Immunoassay Results: A Multicenter Survey of Erroneous Immunoassay Results from Assays of 74 Analytes in 10 Donors from 66 Laboratories in Seven Countries // Clin. Chem. 2002. Vol. 48. P. 2008-2016.

58. Latex particle agglutination test in the diagnosis of Haemophilus influenzae type b, Streptococcus pneumoniae and Neisseria meningitidis A and С meningitis in infants and children. Paulo A. M. Camargos, Marcelo S. Almeida, Isabel Cardoso, Geraldo L. Filho, Deodoro M. Filho, Josel. Martins, Klever W. B. Batista, Roberto С. O. Silva, Carlos M. F. Antunes. // Journal of Clinical Epidemiology, Volume 48, Issue 10, October 1995, P. 1245-1250.

59. Получение окрашенных полимерных суспензий: Пат. Японии 0 86/19651, МКИ С 08 F 2 /44/ О. Suniti., О. Yasuhiro, A. Koci. - опубл. 12.03.1986.

60. Generalova A. N., Sizova S. V., Oleinikov V. A., Zubov V. P., Artemyev M. V., Liat Spernath, Kamyshny Alexander and Magdassi Shlomo, Highly fluorescent ethyl cellulose nanoparticles containing embedded semiconductor nanocrystals,

Colloids and Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspects, 2009, V. 342, N 1-3, pp. 59-64.

61. Medcalf E.A., D.J. Newman, A. Gilboa, E.G. Gorman, C.P. Price. A rapid and robust particle-enhanced turbidimetric immunoassay for Serum ^-microglobulin. // J. Immunol. Methods.-1990. - v. 129. - p. 447-449.

62. Bangs L.B. Immunological application of microspheres // The Latex Course. -1996.-N4/-p. 1-29.

63. Thompson J.C., Graig A.R., Davey C.L., Newman D.J., Londsdale M.L., Busher W.J., Nagle P., Price C.P. Kinetics and proposed mechanism of the reaction of an immunoinhibition, particle-enhanced immunoassay // Clin. Chem. - 1997. -v. 43.-p. 2384-2389.

64. Wilkins T.A., Brouwers G., Mareschal J.C., Cambiaso C.L. High sensitivity, homogeneous particle-based immunoassay for thyrotropin. Clin. Chem. - 1988. - v. 34(9). - p. 1749-1752.

65. Particle aggregation method and apparatus. Eur. Pat. N 5912182. Inventors: William Terence Coakley, Martin Alan Grundy, Werner Bolex. Original Assignee: University College Cardiff Consultants Limited. Current U.S. Classification:

436/174; 422/73; 435/287.2; 435/288.1; 436/514; 436/517; 436/536; 436/539. International Classification: GO IN 33557; G01N 118. Filing date: Sep 8, 1997. Issue date: Jun 15, 1999.

66. Singer J. M., Plotz C. M. The latex fixation test. I. Application to the serologic diagnosis of rheumatoid arthritis. // American Journal of Medicine №21:888-893 1956.

67. Bang L.B. Uniform latex particles. // Indianapolis: Seradin Inc. - 1984. - p. 68.

68. Способ имммунологической экспресс-диагностики токсических форм дифтерийной инфекции. Патент РФ 2113172. Per. номер заявки: 94000385. Основные коды МГЖ: А61В010/00 А61К039/05 G01N033/536. Изобретатели: Меньшикова А.Ю., Шабсельс Б.М., Власов Г.П., Кветная А.С. Патентообладатели: Научно-иследовательский нститут детских инфекций, г.Санкт-Петербург.

69. Molday R. Dreyer W.J. New immunolatex spheres visual markers of antigen on lymphocytes for scanning electron microscopy // J.Cell Biol., 1975, V.64, p.75-88.

70. Yen S.P., Rembaum A., Molday R.W. Dreyer W. Polymer particles for immunological assay // Emulsion polymerization: ACS series. Washington. 1976, p. 236-257.

71. Akihiko Kondo, Takeharu Kawano, Fumio Itoh, Ко Higashitani Immunological agglutination kinetics of latex particles with physically adsorbed antigens. // Journal of Immunological Methods, Volume 135, Issues 1-2, 31 December 1990, Pages 111-119.

72. Process for polymerization of unsaturated monomeric organic compounds in aqueous emulsion. US Pat. 3 206 422 VRB С 08 A 8.28 // Kern W., Schultz R., Cheldron H., заявл. 11.01.1960, опубл. 14. 09. 1965.

73. Tuncel A., Kahraman R., Piskin E. Monosize Polystyrene Latices Carrying Functional Groups On Their Surfaces //J.Appl.Polym.Sci.-1994.-Vol.51.-Iss.8.-pp. 1485-149.

74. Thurman E.M. Immunochemical technology for Environmental applications // Washington: Am. Chem. Soc., ACS Symposium series 657, 1997, 397 p.

75. Критчфилд Ф. Анализ основных функциональных групп в органических соединениях. Москва: Мир, 1965, С. 206.

76. Ugelstad J. Mfutakamba H.R., Mork P.C., Ellingsen Т., Berge R., Holm. L., Schinid R., Jorgedal A., Hansen F. K., Nustad K., Preparation and characterization of monodisperse polymer particles // J. polym. Sci., Polym. Symp, 1985, v.72, p. 225-240.

77. Noh H., Vogler E.A. Volumetric interpretation of protein adsorption: partition coefficients, interphase volumes, and free energies of adsorption to hydrophobic surfaces // Biomaterials. 2006. T. 27. № 34. C. 5780-5793.

78. Camarero J.A. Recent developments in the site-specific immobilization of proteins onto solid supports // Biopolymers - Nucleic Acid Sciences Section. 2008. T. 90. № 3. C. 450-458.

79. Ivanova E.P., Wright J.P., Pham D.K., Alekseeva Y.V., Demyashev G.M., Nicolau D.V., Brack N., Pigram P. A comparative study between the adsorption and covalent binding of humain immunoglobulin and lysozyme on surface-modified poly(tret-butyl methacrylate) / Biomedical Materials. 2006. Т. 1. № 1. C. 24-32.

80. Pierce Chemical Technical Library, 2002, Protein immobilization series.

81. John P. Nolan and Francis Mandy. Multiplexed and Microparticle-based Analyses: Quantitative Tools for the Large-Scale Analysis of Biological Systems. Cytometry 2006, 69A, p.318-325.

82. Sivakumar M., Panduranga K. Rao. Synthesis and characterization of poly(methyl methacrylate) functional microspheres. Reactive and Functional Analysis, 2000, №46, p. 29-37.

83. Greg Т. Hermanson Bioconjugate Techniques // Academic Press 2nd edition. 2008, p.1323.

84. Okubo M., Kanaida K.and Matsumoto T. Preparation of Carboxylated Polymer Emulsion Particles in Which carboxyl Groups are Predominantly Localized at Surface Layer by Using the Seeded Emulsion Polymerization Technique J. Appl.Polym. Sci., 1987, v. 33, p.1511-1516.

85. Прокопов H. И., Грицкова И. А., Черкасов В. P., Чалых Ф. Е. Синтез монодисперсных функциональных полимерных микросфер для иммуно-диагностических исследований // Успехи химии. - 1996. - Т. 65, № 2. - С. 178-192.

86. Крашенинникова И.Г. Полимерные суспензии медико-биологического назначения с узким распределением частиц по размерам. Автореф. дис док.хим.наук., М., 2007.

87. Gritskova I.A., Gusev S.A., Grzywa E.G. Синтез полистирольных суспензий с узким распределение частиц по размерам // Polymery, 1991, vol.36 N11-12, p. 418-422.

88. Грицкова И.А., Копылов В.М., Симакова Г.А., Гусев С.А., Маркудзе И.Ю., Левшенко Е.Н. // Высокомолек. соединения. Серия Б. 2010 г. Т.52. №9. С. 1689-1695

89. Грицкова И.А., Крашенинникова И.Г., Нусс П.В., Дорохова Е.В., Гусев С.А., Аль-Хаварин Адсорбция белков на полистирольных микросферах и постановка реакции латекс - аглютинации // Коллоидный журнал - 1994 -Т56,№4-С 491-496.

90. Kjellqvist К. Acid curing waterborne microparticles // Prog. In org. coatings. 1994. Vol.24, iss. 1-4, pp. 209-223.

91. United States Patent Application Publication. US 2008/0108147. Reduction of Non-Specific binding in immunoassays. Inventors: Banumathi Sankaran (Pittsford, NY, US) Sheryl S. Sullivan (Hilton, NY, US) Darrell C. Haynes (Rochester, NY, US) Philip C. Hosimer (Rochester, NY, US) Graham Yearwood (Bethlehem, PA, US), IPC8 Class: AG01N3353FI, USPC Class: 435 71, Publication date: 03/05/2009, Patent application number: 20090061455.

92. Schuaar R.L. Immobilized glycoconjugate for cell recognition studies. Review //Anal. Biochem., 1984, v.143,p.1-13.

93. Woodward R. "Tetrahedron", 1966, suppl. № 8, pt 1, p. 321-46. Перевод В. В. Баев.

94. Овчинников Ю.А. Биоорганическая химия. М.: Просвещение, 1987. 815 с.

95. Чирикова О.В. Синтез функциональных полимерных суспензий в присутствии кремнийорганических ПАВ. Дис. Канд. хим. наук, М., 1994.

96. Poltavchenko A.G., Yakovchenko A.M., Krivenchuk N.A.Immobilization of antigens on a protein microarray substrate // Biotechnology in Russia. 2007. № 1. C. 118-130.

97. Волкова E.B., Грицкова И.А., Злыднева JI.A., Левшенко Е.Н., Рассоха Н.В., Чадаев П.Н., Шрагин Д.И. Полимеризация метилметакрилата в присутствии кремнийорганических ПАВ // Химия и химическая технология, 2011, Т. 54, №.9 Стр. 70-73

98. Грицкова И.А., Прокопов Н.И., Марков А.Г., Чалых А. Е., Аль-Хаварин Д.Полистирольные суспензии, полученные в присутствии

\

карбоксилсодержащего кремнийорганического поверхностно-активного вещества//Высокомолекулярные соединения, 2005, т.47, №4, с.710-715.

99. Быков В.А., Грицкова,И.А., Прокопов Н.И., Станишевский Я.М. Полимерные микросферы в диагностике Учебное пособие (лабораторный практикум) // изд. ММА им .ИМ. Сеченова, 2004, 41с.

100. Кирилин А. Д., Белова Л.О., Максимов A.C. Использование кремнийорганических соединений в основном органическом синтезе/ Под ред. чл-корр. РАН, проф. Чернышева Е.А Учебное пособие. // М., МИТХТ им. М.В. Ломоносова, 2005 - 25 е.: ил.

101. Алексеев П.Г., Скороходов И.И., Поварнин П.И. Свойства кремнийорганических жидкостей: Справочник - М: Энергосамиздат. 1997. 328 с.

102. Коллоидные поверхностно-активные вещества / Пер с англ./ Под ред. А.Е.Таубмана, З.Н.Маркиной. // М., 1966, - 199 с.

103. Андрианов К.А. Полимеры с неорганическими главными цепями молекул. // М.,изд. АН СССР, 1962, 287 с.

104. Соболевский М.В., Музовская O.A., Попелева Г.С. «Свойства и области применения кремнийорганических продуктов под общей ред. проф. М. В. Соболевского». М., «Химия», 1975 г.

105. Шебырев В.В., ГутковичА.Л., Рыбкин Э.П., Груздев Б.Н. Влияние гидродинамики и поверхностно-активных веществ на размер капель эмульсии // Всесоюзная конференция по агрогидродинамике химических аппаратов АЭРОХИМ, - Северодонецк, 1981, с. 146-151.

106. Прокопопов Н.И., Грицкова И.А., Черкасов В.Р. Синтез монодисперсных функциональных полимерных микросфер для иммунодиагностических

исследований. Учебно-методическое пособие.-М: Издательство ИПЦ МИТХТ им. М.В. Ломоносова, 2000, с.51.

107. Прокопов Н.И. Эмульсионная полимеризация диеновых и виниловых мономеров при образовании ионогенных поверхностно-активных веществ на границе раздела фаз. Автореф. дис. ... канд. хим. наук. - M.: МИТХТ. -1986. -24 с.

108. Rawle A. PCS in 30 Minutes. // Malvern Instrument Ltd. - 1994. - P.l-8.

109. Determination of Particle Size. Photon Correlation Spectroscopy. ISO TS 24/SC4/WG7 Fourth Draft. - 1993.

110. Liners R. V. Measurement of Particle Size Distribution by Autocorrelation Spectroscopy // Int. Conference Polymer Latex II. -London, 1985. P. 13/1-13/10.

111. Ленинджер А. Основы биохимии //т. 1-3, M., 1985, 368 с.

112. Waterboer T., Sehr P., Pawlita M. Suppression of non-specific binding in serological Luminex assays. // J of Immunological Methods 309, 2006,

p.200-204.

113. И.А. Грицкова, E.H. Левшенко, E.P. Мансурова, И.В. Хачатурян, Н.И. Прокопов, Г.А.Симакова, В.М.Копылов // Полимеризация стирола в присутствии кремнийорганических ПАВ различной природы. Вестник МИТХТ им. М.В.Ломоносова №5. 2008.

114. Станишевский Я.М., Грицкова И.А., Прокопов Н.А., ЛобановА.Н., Измайлова В.Н., Быков В.А., Кравцов Э.Е. Влияние способа присоединения биолиганда на устойчивость иммунохимических тест-систем, основу которых составляют полимерные микросферы // Биомедицинские технологии.-М.-2001.- Вып. 16-С. 107-113.