Анализ иммуностимулирующего действия интерлейкина-1бета при местном применении у человека тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат биологических наук Варюшина, Елена Анатольевна

• Варюшина, Елена Анатольевна
• кандидат биологических наук
• 1998

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Варюшина, Елена Анатольевна

ПЕРЕЧЕНЬ УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Иммунологическая характеристика роли цитокинов в 11 развитии местной воспалительной реакции

1.2 Изучение продукции цитокинов и функций лейкоцитов 15 при воспалительных заболеваниях легких

1.2.1 Цитокины при воспалительных заболеваниях легких

1.2.2 Нарушения функциональной активности лейкоцитов при 18 воспалительных заболеваниях респираторного тракта

1.3 Регуляторная роль цитокинов в процессах заживления ран

1.3.1 Основные стадии в процессе заживления ран, роль 22 цитокинов на различных этапах заживления ран

1.3.2 Изучение функций клеток и продукции цитокинов при 26 осложненном течении раневого процесса

1.4. Использование иммуномодуляции доя лечения 30 хронических осложненных местных воспалительных процессов и длительно незаживающих ран

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

ГЛАВА 3 ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ ИЛ-ip НА ПОКАЗАТЕЛИ 51 МЕСТНОГО ИММУНИТЕТА У БОЛЬНЫХ С АБСЦЕССАМИ ЛЕГКИХ 3.1. Влияние местного применения ИЛ-1 Р на цитоло- 51 гический состав в полости деструкции

3.2. Исследование функциональной активности нейтрофилов 51 в очаге воспаления и в периферической крови, изучение влияния местного применения ИЛ-1 р на функции лейкоцитов

3.3. Изучение влияния местного применения ИЛ-1(3 на 59 продукцию провоспалительных цитокинов клетками в очаге деструкции и в периферической крови

3.4. Результаты изучения клинической эффективности 69 применения ИЛ-ip у больных с абсцессами легких

ГЛАВА 4. ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ ИЛ-1(5 НА ФУНКЦИИ 71 ЛЕЙКОЦИТОВ И НА ЦИТОЛОГИЧЕСКИЙ СОСТАВ В РАНЕВОМ ОЧАГЕ У БОЛЬНЫХ С ДЛИТЕЛЬНО НЕЗАЖИВАЮЩИМИ РАНАМИ И ФЛЕГМОНАМИ

4.1. Влияние местного применения мазевой формы с ИЛ-1р 72 на клеточный состав в мазках-отпечатках из ран

4.2 Влияние местного применения мази с ИЛ-lp на функции 73 нейтрофилов в раневом очаге

4.3. Динамика показателей клеточного состава в раневом 82 очаге при флегмонах на фоне местного применения ил-ip

4.4. Влияние местного применения ИЛ-ip на функции 83 нейтрофилов раневого очага у больных с флегмонами

4.5. Результаты клинического исследования эффективности 85 применения ИЛ-1р у больных с длительно незаживающими ранами и флегмонами

ГЛАВА 5 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Анализ иммуностимулирующего действия интерлейкина-1бета при местном применении у человека»

Процессы воспаления представляют собой ответ организма на повреждение тканей или внедрение инфекции, направлены на элиминацию патогена и находятся под контролем иммунной системы. Развитие и поддержание воспалительного ответа происходит, главным образом, за счет продукции цитокинов. Цитокины - это белки или гликопротеиды, обладающие низким молекулярным весом, которые связываются со специфическими рецепторами на поверхности различных типов клеток, регулируют рост, дифференцировку и функции клеток-мишеней аутокринным, паракринным и эндокринным путями. Цитокины -индуцибельные белки, то есть продукция этих медиаторов клетками начинается только в ответ на индукторы.

Основным медиатором, регулирующим иммунный и острофазовый ответ в организме, является интерлейкин-1 (ИЛ-1) (Dinarello С.А., 1984). ИЛ-1 - это общее название для двух полипептидов ИЛ-1а и ИЛ-1(3 с мол. массой около 18 кД. Эти белки являются продуктами двух различных генов, но имеют гомологичное строение и сходное биологическое действие. У человека ИЛ-1 а является преимущественно мембранной, а ИЛ-1 р -секреторной формой ИЛ-1. ИЛ-1а, ИЛ-1р объединяют в семейство ИЛ-1, куда относят еще один белок, известный под названием антагонист рецептора ИЛ-1 (АРИЛ). Практически все типы клеток в организме способны продуцировать ИЛ-1, однако основным источником ИЛ-1 являются активированные моноциты/макрофаги. Благодаря широкому спектру своих биологических активностей ИЛ-1 играет ключевую роль в процессах воспаления как на системном, так и на местном уровне. ИЛ-1 относится к так называемым «провоспалительным цитокинам» (Moldawer L.L., 1994) . Помимо ИЛ-1, провоспалительными цитокинами являются фактор некроза опухоли-альфа (ФНО-а), интерлейкин-6 (ИЛ-6), интерлейкин-8 (ИЛ-8). Продукция провоспалительных цитокинов начинается в момент повреждения тканей и совершенно необходима для нормального течения воспалительного процесса. Все этапы развития местной воспалительной реакции находятся под контролем цитокинов и, в первую очередь, ИЛ-1. Известно, что ИЛ-1 in vitro может активировать практически все типы клеток, принимающих участие в развитии местной воспалительной реакции - нейтрофилы, лимфоциты, макрофаги, эндотелиальные клетки, благодаря наличию на их поверхности специфических рецепторов для ИЛ-1. С другой стороны, остается малоизученным вопрос о роли ИЛ-1 в воспалительной реакции in vivo, и совершенно не исследовано влияние ИЛ-1 на протекание местного воспалительного процесса у человека.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность проблемы. Одним из основных медиаторов, регулирующим иммунный и острофазовый ответ в организме, является интерлейкин-1 (ИЛ-1) (Dinarello С.А., 1984). ИЛ-1р контролирует все этапы развития местного воспалительного процесса. Экспрессия мРНК и продукция ИЛ-1(3 в очаге наблюдаются на ранних стадиях воспаления (Fahey T.J.III et al., 1990; Waage A. et al., 1989). Ключевая роль ИЛ-ip в воспалительном процессе подтверждена тем, что при дефиците зрелых форм этого цитокина местная воспалительная реакция заметно снижена (Fantuzzi G. et al., 1997). ИЛ-ip усиливает экспрессию адгезионных молекул эндотелиальными клетками, активирует важнейшие функции нейтрофилов. ИЛ-lp является праймирующим фактором для нейтрофилов in vitro (Yagisawa М. et al., 1995), то есть обладает способностью усиливать ответ лейкоцитов на стимуляцию (Brandolini L. et al., 1996; Yagisava M. et al., 1995; Dularay B. et al, 1990; Smith R.J et al, 1986; Ogle J.D, et al, 1988).

Поскольку ИЛ-1(3 не обладает прямым действием на функциональную активность нейтрофильных гранулоцитов в экспериментах in vitro (Figari I.S. et al., 1987; Kharazmi A. et al., 1988), влияние ИЛ-lp на функции нейтрофилов, по-видимому, является опосредованным через индукцию других цитокинов. Однако, несмотря на большое количество данных, полученных in vitro, проведены лишь единичные исследования роли ИЛ-ip в местной воспалительной реакции in vivo на животных и отсутствуют данные об изучении механизмов действия ИЛ-ip в воспалительном очаге у человека.

Кроме иммуностимулирующего действия, ИЛ-ip может обладать также ранозаживляющим действием, поскольку ИЛ-1р оказывает стимулирующее влияние на рост и метаболизм соединительной ткани (Goldring МБ. et al., 1987).

Важные биологические функции ИЛ-1 явились предпосылкой для использования данного цитокина в качестве иммуностимулирующего препарата, которое стало возможным благодаря тому, что в настоящее время в России создан медицинский препарат на основе рекомбинантного ИЛ-lp человека. Клинические испытания ИЛ-ip продемонстрировали его высокую эффективность при лечении больных с посттравматическими иммунодефицитами и сепсисом (Симбирцев А.С., Попович A.M., 1996). В последние годы получило развитие местное применение ИЛ-ip, которое позволяет достичь значительных клинических эффектов при отсутствии системной токсичности. Однако до сих пор не был исследован механизм иммуностимулирующего действия ИЛ-ip при местном использовании.

Цель работы: Изучить механизм иммуностимулирующего действия интерлейкина-ip (ИЛ-ip) при местном применении у человека.

Задачи исследования:

1. Провести комплексное исследование функциональной активности лейкоцитов воспалительного очага и периферической крови при гнойно-деструктивных процессах в легких, флегмонах и длительно незаживающих ранах у человека.

2. Исследовать влияние местного применения препарата ИЛ-lp на изменения клеточного состава и на функции лейкоцитов в очаге у больных с абсцессами легких в динамике.

3. Изучить продукцию провоспалительных цитокинов клетками воспалительного очага у больных с абсцессами легких в динамике на фоне применения препарата ИЛ-1(3.

4. Изучить изменения цитологического состава и функциональной активности нейтрофилов в раневом очаге у больных с флегмонами и длительно незаживающими ранами на фоне применения ИЛ-ip.

5. Провести сравнительную оценку влияния местного применения ИЛ-1(3 на показатели функциональной активности клеток очага воспаления и периферической крови у больных с асбцессами легких.

Научная новизна работы: Впервые изучено иммуностимулирующее действие рекомбинантного ИЛ-ip при местном использовании для лечения осложненных воспалительных процессов и незаживающих ран у человека. Показано, что применение ИЛ-1 р усиливает защитные реакции в очаге воспаления за счет активации функций нейтрофильных гранулоцитов и индуцирует синтез провоспалительных цитокинов клетками воспалительного очага. Продемонстрировано, что использование ИЛ-1р вызывает позитивные изменения цитологических показателей в осложненных ранах, которые выражаются в увеличении количества макрофагов, лимфоцитов и фибробластов в раневом очаге.

Научно-практическая значимость работы: Полученные данные являются основой для новых подходов к использованию рекомбинантного ИЛ-lp в качестве местного иммуностимулирующего средства при вялотекущих и осложненных воспалительных процессах у человека с учетом механизмов действия препарата, а также дая выбора оптимальных доз, схем и длительности лечения.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту;

1. У больных с абсцессами легких показатели фунциональной активности нейтрофилов в очаге деструкции снижены по сравнению с соответствующими значениями для нейтрофилов периферической крови.

2. Местное применение ИЛ-ip усиливает основные функции нейтрофилов, полученных из очага воспаления у больных с абсцессами легких, флегмонами и длительно незаживающими ранами.

3. Введение ИЛ-1 р в полость абсцесса усиливает синтез провоспалительных цитокинов клетками в очаге деструкции.

4. Местное использование ИЛ-lp не оказывает существенного влияния на показатели функциональной активности лейкоцитов периферической крови и содержание провоспалительных цитокинов в сыворотке крови.

Апробация работы: Материалы диссертации представлены и обсуждены на: 4-й международной конференции "СПИД, рак и родственные проблемы", Санкт-Петербург, 21-25 мая 1996 г.; научной конференции, посвященной 150-летию клинического отдела Военно-Медицинской Академии «Актуальные вопросы клиники, диагностики и лечения», 7-8 апреля 1997 г.; 1-й медико-биологической конференции молодых ученых Санкт-Петербурга 17-19 ноября 1997 г.; на 2127 заседании Хирургического общества Пирогова, 1998; 6-й международной конференции "СПИД, рак и родственные проблемы", Санкт-Петербург, 21-25 мая 1998 г.; 2-й международной научной конференции «Дни иммунологии в Санкт

Петербурге'98», 26-29 мая 1998 г., Санкт-Петербург; 2-м съезде Общества «Интерфероны и цитокины» и Международного общества исследований интерферонов и цитокинов, 25-30 октября, 1998 г., Иерусалим, Израиль.

Публикации: по материалам диссертации опубликовано 13 научных работ.

Объем и структура диссертации: диссертация изложена на 123 страницах текста и состоит из обзора литературы, главы материалов и методов, двух глав результатов собственных исследований, обсуждения, списка литературы, включающего 15 отечественных и 136 зарубежных источников. Работа иллюстрирована 25 таблицами и 12 рисунками.

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Варюшина, Елена Анатольевна

выводы

1. У больных с гнойно-деструктивными заболеваниями легких показатели функциональной активности нейтрофилов в очаге воспаления значительно снижены по сравнению с соответствующими показателями нейтрофилов периферической крови.

2. Местное применение ИЛ-lp у больных с абсцессами легких усиливает хемотаксис лейкоцитов, повышает адгезию, стимулирует продукцию супероксидных радикалов и увеличивает показатели фагоцитоза нейтрофильных гранулоцитов, полученных из очага деструкции.

3. Введение ИЛ-lp в полость абсцесса приводит к изменениям в продукции провоспалительных цитокинов. Под действием ИЛ-lp увеличивается доля и частота выявления клеток, в цитоплазме которых с помощью моноклональных антител определяются ИЛ-а и ИЛ-8, и возрастают уровни ИЛ-8 в полости абсцесса.

4. Применение ИЛ-1 р усиливает индуцированную продукцию супероксидных радикалов и фагоцитоз лейкоцитов раневого очага у больных с флегмонами и длительно незаживающими ранами.

5. На фоне местного применения ИЛ-1 р происходит постепенное увеличение доли лимфоцитов и макрофагов в раневом отделяемом у больных с абсцессами легких, флегмонами и длительно незаживающими ранами.

6. На основании проведенных исследований можно заключить, что механизм иммуностимулирующего действия ИЛ-1 р при местном применении у человека связан с повышением функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов и усилением синтеза провоспалительных цитокинов.

7. Введение физиологических доз ИЛ-ip непосредственно в очаг воспаления вызывает местное иммуностимулирующее действие и не оказывает существенного влияния на содержание провоспалительных цитокинов - ИЛ-lp, ИЛ-8, ФНО-а - в сыворотке крови и на показатели функциональной активности лейкоцитов периферической крови.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Варюшина, Елена Анатольевна, 1998 год

1. Абдрашитова Н.Ф., Фархутдинов P.P., Загиддулин М.З., Хамилов Ф.Х. Сравнительный анализ влияния антибиотиков на свободнорадикальное окисление in vitro и in vivo // Бюлл. Эксп. Биол. Мед. 1997. - Т. 125. -№ 3. - С. 297-299.

2. Абишева А.Б., Козаченко Н.В. Иммунологические нарушения в патогенезе острых абсцессов легких // Клиническая медицина. 1991. Т. 69.-№5.-С. 58-60.

3. Абишева А.Б., Цаплина И.Е., Баширова Е.С., Ламм Я.Э. Сравнительный анализ фунциональной активности клеток бронхоальвеолярных смывов и периферической крови у больных острыми абсцессами легких // Клиническая хирургия . 1991. Т. 69 - № 1. - С. 74 - 76.

4. Ермаков Е.В., Кириллов В.А., Преображенский В.Н., Ермакова Т.И. Эффективность эндобронхиального введения концентрата гранулоцитов у больных с различными формами хронического бронхита. -Клиническая медицина. 1990. - Т. 68. - №6. - С. 93 - 96.

5. Костюченок Б.М., Карлов В.А. Клиника раневого процесса. В: Раны и раневая инфекция. Руководство для врачей. Под ред. Кудрина М.И., Косиоченка Б.М. М.: "Медицина", 1990. - С. 186 - 221.

6. Котов А.Ю., Трофимов А.Н., Перумов Н.Д., Симбирцев А.С. и др. Получение, характеристика и использование моноклональных антител к интерлейкину-lp человека // Иммунология. 1993. - № 4. - Стр. 41-43.

7. Кубанова А.А., Маркушева Л.И., Фомина Е.Е. Уровень сывороточного фактора некроза опухоли при различных дерматозах // Иммунология. -1998.-№2.-С. 47-49.

8. Методические рекомендации по экспериментальном (доклиническому) изучению лекарственных препаратов для местного лечения гнойных ран. М., 1989, с. 26-30.

9. Методические рекомендации по экспериментальном (доклиническому) изучению лекарственных препаратов для местного лечения гнойных ран. М., 1989, с. 38.

10. Покровская М.П., Макаров М.С. Цитология раневого экссудата как показатель заживления ран. М.: "Медгиз", 1942.

11. Полосухин В.В., Егунова С.М., Чувакин С.Г., Бессонов А.П. Ультраструктура альвеолярных макрофагов при эндобронхиальной лазерной терапии хронических воспалительных заболеваний легких // Иммунология. 1994. - № . - С. 51 - 56.

12. Сергель О.С., Гончарова З.Н. Цитологическое исследование. В; Раны и раневая инфекция. Руководство для врачей. Под ред. Кудрина М.И., Костюченка Б.М. М.: "Медицина", 1990. - С. 192 - 196.

13. Симбирцев А.С., Попович A.M. Сфера применения рекомбинантного интерлейкина-1 р при лечении больных с иммуно дефицитными состояниями при травме и сепсисе // Анестезиология и реаниматология. 1996. -№4.-С. 76-78.

14. Чучалин А.Г., Овчинников А.А., Белевский А.С., Филлипов Н.В. Применение суспензии аутологичных макрофагов для лечения абсцессов легких // Клиническая медицина. 1985. - Т. 63. - № 2. - С. 85 -88.

15. Шойхет Я.Н., Заремба С.В., Дуков Л.Г. и др. Прокоагулянтная и протеолитическая активность лейкоцитов в очаге поражения у больных острыми абсцессами и гангреной легких // Клиническая медицина. -1991.-Т. 69. № 1. - С. 88-91.

16. АН Н., Haribabu В., Richardson R.M. et al. Mechanisms of inflammation and leukocyte activation (Review) //Med. Clin. North. Am. 1997. - V. 81. - P. 1-28.

17. Antony V.B., Godley S.W., Kunkel S.L. et al. Recruitment of inflammatorycells to the pleural space. Chemotactic cytokines, interleukin-8 and monocyte chemotactic peptide-1 in human pleural fluids // J. Immunol. 1993. - V. 151.-P. 7216-7223.

18. Bagdade J.D., Root R.K., Bulger R.J. Impaired leukocyte function in patients with poorly controlled diabetes // Diabetes. 1974. - V. 23. - P. 9 -15.

19. Baggiolini M., Clark-Lews I. Interleukin-8, a chemotactic and inflammatory cytokine (Review)// FEBS Letters. 1992. - V. 307. - P. 97 -101.

20. Bajaj M.S., Kew R.R., Webster R.O. et al. Priming of human neutrophil function by TNF: enhancement of superoxide anion generation, degranulation and chemotaxis to chemoattractant C5a and f-met-leu-phe // Inflammation. 1992. - V. 16. - P. 241 - 250.

21. Bayne E.K., Rupp E.A. et al. Immunocytochemical detection of interleukin-1 within stimulated human monocytes // J. Exp. Med. 1986. - V. 163. - P. 1267.

22. Bazzoni F., Cassatella M.A., Rossi F. et al. Phagocytosing neutrophils produce and release high amounts of the neutophil-activating peptide-1 /interleukin-8 // J. Exp. Med. -1991. V. 173. - P. 771 - 774.

23. Becker S., Delvin R.B., Haskill J.S. Differential production of tumor necrosis factor, macrophage colony stimulating factor and interleukin-1 by human alveolar macrophages // J. Leuk. Biol. 1989. - V. 45. - P. 353 - 361.

24. Becker S., Quau J., Koren H.S., Haskill J.S. Constitutive and stimulated MCP-1, GRO alpha, beta, and gamma expression in human epithelium and bronchoalveolar macrophages // Am. J. Phys. 1994. - V. 266 (3 Pt 1). - P. L278 - 286.

25. Bellavite P., Carletto A., Biasi D. et al. Studies of skin-window exudate human neutrophils: complex pattern of adherance to serum-coated surfaces in dependent on FMLP doses // Inflammation. 1994. - V. 18. - P. 575 -587.

26. Ben-Ezra J., Sheibani K., Hwang D.L., Lev-Ran A. Megakariocyte synthesis is the source of epidermal growth factor in human platelets // Am. J. Pathol. -1990.-V. 137.-P. 755 -759.

27. Braaddus V., Hebert C.A., Vitangeol R.V. et al. Interleukin-8 is a major neutrophilic chemotactic factor in pleural liquid of patients with empiema // Am. Rev. Respir. Dis. 1992. - V. 148. - P. 825 - 830.

28. Brandolini L., Bertini R., Bizzari C. et al. Il-lp primes IL-8-activated human neutrophils for elastase release, phospholipase D activity, and calcium flux // J. Leuk. Biol. 1996. - V. 59. - P. 427.

29. Brandolini L., Sergi R., Caselli G. et al. Interleukin-lp primes interleukin-8-stimulated chemotaxis and elastase release in human neutrophils via its type I receptor // Eur. Cytokine Netw. 1997. - V. 8. - P. 173 - 178.

30. Buckley A., Davidson J.M., Kamerath C.D. et al. Sustained release of epidermal growth factor accelerated wound repair //Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1985. - V. 82. - P. 7340 - 7344.

31. Carrel A. Growth promoting function of leukocytes // J. Exp. Med. 1992. -V. 36.-P. 385-397.

32. Carveth H.J., Bohnsack J.F., Mclntyre T.M. et al. Neutrophil activating factor (NAF) induces polymorphonuclear leukocyte adhrence to endothelial cells and to subendothelial matrix proteins // Bioshem.Biophys. Res. Commun. 1989. - V. 162. -P. 387 - 393.

33. Cassatella M.A. The production of cytokines by polymorphonuclear neutrophils // Immunol. Today. -1992. V. 16. - P. 21 - 26.

34. Castella X., Artigos A. Cytology of BAL fluid in bacterial pneumonia //

35. Chest. 1990. - V. 97.-P. 1500- 1501.

36. Chen J.D., Lapier J.C., Sauder D.N. et al. Interleukin-1-alpha stimulates keratinocyte migration through an epidermal growth factor/transforming growth factor-alpha-independent pathway// J. Invest. Dermatol. 1995. - V. 104.-P. 729-733.

37. Clark R.A. The commonality of cutaneous wound repair and lung injury // Chest. 1991. - V. 99. - P. 57S - 60S.

38. Colotto F., Re F., Polentarutti N. et al. Modulation of granulocyte survival and programmed cell death by cytokines and bacterial products // Blood. -1992,-V. 80,-P. 2012-2020.

39. Davidson J.M. Wound repair. In: Inflammation. Basic principles and clinical correlates. Second Edition. Ed. by Gallin J.I., Goldstein I.M., Shyderman R., Raven Press, Ltd, NY. 1992. - P. 809 - 819.

40. Dinarello C.A. Interleukin-1 // Rev. Inf. Dis. 1984. - V. 6. - P. 51 - 95.

41. Driscoll K.E., Maurer J.K. Cytokine and growth factor release by alveolar macrophages: potential biomarkers of pulmonary toxicity // Toxicologic Pathology. 1991. - V. 19 (4Ptl). - P. 398 - 405.

42. Dularay В., Elson C.J., Clements-Jewery S. et al. Recombinant human interleukin-1 beta primes human polymorphonuclear leukocytes for stimulus-induced myeloperoxidase release // J. Leuk. Biol. 1990. - V. 47. - P. 158 -163.

43. Dvonch V.M., Murphy R.J., Matsuoka J., Grotendorst G.R. Changes in growth factor level in human wound fluid // Surgery. 1992. - V. 112. - P. 18 -23.

44. Elias J.A., Freundlich В., Kern J.A. et al. Cytokine networks in the regulation of inflammation and fibrosis in the lung // Chest. 1990. - V. 97. - P. 1439 -1446.

45. Fahey T.J. -3rd, Turbeville Т., Mclntyre K. Differential TNF secretion bywound fibroblasts compaired to normal fibroblasts in response to LPS // J. Surg. Res. 1995. - V. 58. - P. 759 - 764.

46. Fahey III T.J., Sherry В., Tracey K.J. et al. Cytokine production in a model of wound healing: the appearance of MIP-1, MTP-2, cachetin/TNF and IL-1 // Cytokine. 1990. - V. 2. - P. 92 - 99.

47. Fantuzzi G., Ku G., Harding M.W. et al. Response to local inflammation of IL-1 beta-converting enzime-deficient mice // J. Immunol. 1997. - V. 158. -P. 1818- 1824.

48. Fantuzzi G., Sacco S., Ghezzi P. Physiological and cytokine responses in IL-1 beta-deficient mice after zymozan-induced inflammation // Am. J. Physiol 1997. - V. 273 (1 Pt 2). - P. R400 - 406.

49. Feiken E., Romer J., Eriksen J., Lurd L.R. Neutrophils express tumor necrosis factor-a during mouse skin wound healing // J. Invest. Dermatol. -1995.-V. 105.-P. 120- 123.

50. Figari I.S., Mori N.A., Palladino M.A.Jr. Regulation of neutrophil migration and superoxide production by recombinant tumor necrosis factor-a and p: comparison to recombinant interferon-y and interleukin-1 p // Blood. 1987. -V. 70/-P. 979-984.

51. Finch P.W., Rubin J.S., Miki T. et al. Human KGF is FGF-related with properties of a paracrine effector of epithelial cell growth // Sience. 1989. -V. 345.-P. 752 - 755.

52. Ford H.R., Hoffman R.A., Wing E.J. et al. Characterization of wound cytokines in the sponge matrix model // Arch. Surg. 1989. - V. 124. - P. 1422 - 1428.

53. Frank S., Hubner G., Breir G. et al. Regulation of vascular endothelial growth factor expression in cultured keratinocytes. Implication for normal and impaired wound healing // J. Biol. Chem. 1995. - V. 26. - P. 12607 -12613.

54. Goldring M B., Krane S .M. Modulation by recombinant interleukin-1 synthesis of types I and III collagens and associated procollagen mRNA levels in cultured human cells // J. Biol. Chem. 1987. - V. 262. - P. 16724 - 16729.

55. Greaves M. W. Lack of effect of topically applied epidermal growth in man in vivo // Clin. Exp. Dermatol. 1980. - V. 5. - P. 101-103.

56. Grob P.M., David E., Warren T.C. et al. Characteristic of a receptor for human monocyte-derived neutrophil chemotactic factor/interleukin-8 // J. Biol. Chem 1990. - V. 265. - P. 8311 - 8316.

57. Hakkert B.C., Kuijpers T.W., Leeuwenberg J.F. et al. Neutrophil and monocyte adherence to and migration across monolayers of cytokine-activated endothelial cell: The contribution of CD18, ELAM-1, and VLA-4 // Blood. 1991. - V. 78. - V. 2721 - 2726.

58. Harada A., Sekido N., Akhoshi T. et al. Essential involvment of interleukin-8 (IL-8) in acute inflammation Review. // J. Leuk. Biol. 1994. - V. 56. - P. 559 - 564.

59. Herrick S.E., Sloan P., McGurk M. Et al. Sequential changes in the histological pattern and extracellular matrix deposition during the healing of chronic venous ulcer // Am. J. Path. 1992. - V. 141. - P. 1085 - 1092.

60. Katz M., Alvares A., Kirsner R., Eaglstein W. Human wound fluid from active wound stimulated fibroblast and endothelial cell growth // J. Am. Acad. Dermatol. 1991. - V. 25. - P. 1054 - 1058.

61. Kelly J. Cytokines in the lung // Am. Rev. Respir. Dis. 1990. - V. 141. - P. 765-788.

62. Kern J.A., Lamb R.J., Reed J.C. et al. Interleukin-l-beta gene expression in human monocytes and alveolar macrophages from normal subjects and patients with sarcoidosis // Am. Rev. Respir. Dis. 1988. - V. 137. - P. 1180 -1184.

63. Khallil N., Bereznay O., Sporn M., Greenberg A.H. Macrophage production of transforming growth factor and collagen synthesis in chronic pulmonary inflammation // J. Exp. Med. 1989. - V. 170. - P. 727 - 737.

64. Klebanoff S.J., Clark R.A. The neutrophil: Function and clinical disorders. -1978.

65. Knighton D.R., Ciresi K., Friegel V.D. et al. Stimulation of repair in chronic, nonhealing cutaneous ulcers using platelet-derived wound healing formula // Surg. Gynecol. Obstet. 1990. - V. 170. - P. 56 - 60.

66. Koch A.E., Kunkel S.L., Burrows J.S. et al. Synovial tissue macrophages as a source of the chemotactic cytokine interleukin-8 // J. Immunol. 1991. - V. 147.-P. 2187-2195.

67. Koch A.E., Polverini P.J., Kunkel S.L. et al. Interleukin-8 as a macrophage-derived mediator of angiogenesis // Science. 1992. - V. 258. - P. 1798 -1801.

68. Ко vacs E.J. Fibrogenic cytokines: the role of immune mediators in the development of fibrosis // Immunol. Today. -1991. V. 12. - P. 17 -23.

69. Kovacs E.J., DiPietro L.A. Fibrogenic cytokines and connective tissue production (Review) // FASEB. J. 1994. - V. 8. - P. 854 - 861.

70. Kuhn C. Pattern of lung repair. A morphologist s view // Chest. 1991. - V. 99. - P. 80S.

71. Kunkel S.L., Standiford Т., Kasahara K., Strieter R.M. Interleukin-8 (IL-8): the major neutrophil chemotactic factor in the lung // Exp. Lung Res. 1991. -V. 17.-P. 17-23.

72. Kupper T.S. The activated keratinocyte: a model for inducible cytokine production by non-bone marrow-derived cells in cutaneous inflammatory and immune responses // J. Invest. Dermatol. 1990. - V. 94. - P. 146S -150S.

73. Larsen C.G., Anderson A.O., Oppenheim J.J. et al. Production of interleukin-8 by human dermal fibroblast and keratinocytes in response to interleukin-1 or tumor necrosis factor // Immunology. 1989. - V. 68. - P. 31 - 36.

74. Lee A., Whyte M.K., Haslett Ch. Inhibition of apoptosis and prolongation of neutrophil functional longevity by inflammatory mediators // J. Leuk. Biol. -1993. V. 54.-P. 283-288.

75. Leibovich S.J., Ross R. The role of macrophage in wound repair: a study with hydrocortisone and antimacrophage serum // Am. J. Pathol. 1975. - V. 78.-P. 71-91.

76. Leme J.G., Hamamura L., Migliorini R.H., Leite M.P. Influence of diabetes upon the inflammatory response of the rat. A pharmacological analisis // Eur. J.Pharm.-V. 23.-P. 74-81.

77. Leukocyte function. Methods in hematology, V. 3. Ed. by Cline M.J. NY -1981.

78. Lord P.C.W., Wilmoth L.M.G., Mizel S.B., McCall C.E. Expression of interleukin-1 a and p genes by human blood polymorphonuclear leukocytes // J. Clin. Invest. 1991. - V. 87. - P. 1312 - 1321.

79. Lynch S.E., Colvin R.B., Antoniades H.N. Growth factors in wound healing // J. Clin. Invest. 1989. - V. 84. - P. 640 - 646.

80. Maas-Szabowski, Fusenig N.E. Interleukin-1-induced growth factor expression in postmitotic and resting fibroblasts // J. Invest. Dermatol. -1996.-V. 107.-P. 849-855.

81. Manna Sunil K., Bhattacharaya Chitralekha, Gupta Sajib K., Samanta Ajoy K. Regulation of interleukin-8 receptor expression in human polymorphonuclear neutrophils // Mol. Immunol. 1995. - V.32. - P. 883 -893.

82. Marucha P.T., Zeff R.A., Kreutser D.L. Cytokine-induced IL-ip gene expression in the human polymorphonuclear leukocytes // J. Immunol. -1991.-V. 147.-P. 2603 -2608.

83. McKay I.A., Leigh I.M. Epidermal cytokines and their roles in cutaneous wound healing // British J. Dermatol. -1991. V. 124. - P. - 513 - 518.

84. Millar A.B., Foley N.M., Singer M. et al. Tumor necrosis factor in bronchopulmonary secretion of patients with adult respiratory distress syndrome // Lancet. 1989. - V. 2. - P. 712 - 714.

85. Mizutani H., Black R.? Kupper T. Different strategies of interleukin-1 production and processing in keratinocytes and monocytes // Cytokine. -1989.-V. l.-P. 78-82.

86. Molenaar D.M., Palumbo P.J., Willson W.R. and Ritts R.E. Leukocytechemotaxis in diabetic patients and their non diabetic first-degree relatives // Diabetes (Suppl. 2). V. 25. - P. 880 - 883.

87. Mooney D.P., Gamelli R.L., O Reilly M. Improved wound healing through the local delivery of tumor necrosis factor // Surg. Forum. 1988. - V. 38. -P. 77 - 79.

88. Mueller R.V., Hunt Т.К., Tokunada A., Spenser E.M. The effect of insulin like factor on wound healing variables and macrophage in rats // Arch. Surg. 1994. - V. 129.-P. 262-265.

89. Munc G., Rubinstein I., Singer P. Phagocytosis and oxidative burst of granulocytes in the respiratory tract in chronic and acute inflammation // J. Otolaringol. 1995. - V. 24. - P. 105 -110.

90. Mustoe T.A., Pierce G.F., Gramates P. et al. Accelerated healing of incisional wound in rats induced by transforming growth factor-p // Science. 1987. -V. 237.-P. 1333 - 1336.

91. Mustoe T.A., Pierce G.F., Morishima C., Deuel T.F. Growth factor-induced acceleration of tissue repair through direct and inductive activites in a rabbit dermal ulcer model // J. Clin. Invest. 1991. - V. 87. - P. 694 - 703.

92. Nelson K.D. Chemotaxis under agarose // J.Immunol. 1975. - V. 115. - P. 1650- 1656.

93. Niethammer D., Dieterle V., Kleihauer E. et al. An inharited defect in granulocyte function: Impaired chemotaxis, phagocytosis and intracellular killing of microorganisms // Helv. Paediatr. Acta. 1975. - V. 30. - P. 537 -541.

94. Och H.D., Igo R.P. The NBT slide test: A simple screening method for detecting chronic granulomatous disease and female carriers // J. Pediatr. -1973,-V. 83.-P. 77-82.

95. Ogle J.D., Noel J.G., Sramkoski R.M. et al. Effect of combination of tumor necrosis factor alpha and chemotactic peptide, f-met-leu-phe on phagocytosis of opsonized microspheres by human neutrophils //Inflammation. 1992. -V. 16.-P. 57-68.

96. Paccaud J.P., Schifferli J.A., Baggiolini M. NAP/IL-8 induces up-regulation of CR-1 receptors of human neutrophil leukocytes // Biochem. Biophys. Res. Commun.- 1990.-V. 166.-P. 187- 192.

97. Pejnovic N., Lilic D., Zunic G. et al. Abberant levels of cytokines within the healing wound after born injury // Arch. Surg. 1995. - V. 130. - P. 999 -1006.

98. Peterson J.M., Barbul A., Breslin R.J. et al. Significance of T-lymphocytes in wound healing // Surgery. 1987. - V. 102. - P. 300 - 305.

99. Peveri P., Walz A., Dewald В., Baggiolini M. A novel neutrophil-activating factor produced by human mononuclear phagocytes // J. Exp. Med. 1988. -V. 167. - P. 1547 - 1259.

100. Piquet P.F., Collart M.A., Grau G.E. et al. Requirement of tumor necrosis factor on development of silica induced pulmonary fibrosis // Nature (London). V. 344. - P. 245 - 247.

101. Ponder B.A., Wilkinson M.M. Inhibition of endogenous tissue alkaline phosphatase with the use of alkaline phosphatase conjugates in immunohistochemistery // J. Histochem. Cytochem. 1981. - V.29. - P. 981 -989.

102. Proost P., Wuyts A., van Damme J. The role of chemokine in inflammation (Review) // Int. J. Clin. Lab. Res. 1996. - V. 26. - P. 211 - 223.

103. Raghow R. The role of extracellular matrix in postinflammatory wound healing and fibrosis (Review) // FASEB J. 1994. - V. 8. - P. 823 - 831.

104. Raines E.W., Dower S.K., Ross R. Interleukin-1 mitogenic activity for fibroblasts and smooth muskle cells is due to PDGF-AA / Science. 1989. -V. 243.-P. 393 -394.

105. Riches D.W.F. The multiple role of macrophages in wound healing. In: Clark R.A.F., Henson P.M. eds. The molecular and cell biology of wound repair. N.Y. Premium Press. 1998. - P. 213 - 242.

106. Rodrigues J.L., Miller C.G., De Forge L.E. Local production of interleukin-8 is associated with nososomal pneumonia // J. Trauma. 1992. - V. 33. - P. 74-81.

107. Rolf M.W., Kunkel S.L., Standiford T.J. et al. Expression and regulation of human pulmonary fibroblast-derived monocyte chemotactic peptide-1 // Am. J. Phys. 1992. - V. 263 (5 Pt 1). - P. L536 - 545.

108. Rolf M.W., Kunkel S.L., Standiford T.J. et al. Pulmonary fibroblast expression of interleukin-8: a model for alveolar macrophage-derived cytokine networking // Am. J. Respir. Cell. Mol. Biol. 1991. - V. 5. - P. 493-501.

109. Rook J.A.W., Stule J., Umar S., Dockrell H.M. A simple method for the solubilisation of reduced NBT and its use as a colorimetric assay for activation of human macrophages by interferon // J. Immunol. Meth. 1985. -V. 82.-P. 161-167.

110. Rot A. Endothelial cell binding of NAP/IL-8: role in neutrophil emigration // Immunology Today. 1990. - V. 13. - P. 291 - 294.

111. Schroder J.-M., Sticherling M., Henneicke at al. IL-lp or tumor necrosis factor-a stimulate release of three NAP/IL-8-releated neutrophil chemotactic proteins in human dermal fibroblasts // J.Immunol. 1990. - V. 144. - P. 2223- 2232.

112. Silva-Mejias C., Gamboa-Antinolo F., Lopes-Cortes L.F. et al. Interleukin-1 p in pleural fluids of different etiologies // Chest. 1995. - V. 108. - P. 942 -945.

113. Silver T.M., Sweirkosz J.E., Hyers T.M. et al. Immunoreactive interleukin-1 in bronchoalveolar lavage fluid of high risk patients and patients with adult respiratory distress syndrome // Exp. Lung Res. 1989. - V. 15. - P. 881 -894.

114. Smart S.J., Casale T.B. Interleukin-8-induced transcellular neutrophil migration is facilitated by endothelial and pulmonary epithelial cells // Am. J. Resp. Cell. Mol. Biol. 1993. - V. 9. - P. 489 - 495.

115. Smart S.J., Casale T.B. Pulmonary epithelial cells facilitate TNF-alpha-induced neutrophil chemotaxis. A role of cytokine networking // J. Immunol.- 1994. V. 152. - P. 4087 - 4094.

116. Smith W.B., Gamble J.R., Clare-Lewis I., Vadas M.A. Interleukin-8 induces neutrophil transendothelial migration // Immunology. 1991. - V. 72. - P. 65 -72

117. Southey A.K., O'Connor C.M., Fitzerald M.X. The effect of fibroblast conditioned medium on neutrophil survival and activation // Biochemical

118. Society Transactions. 1994. - V. 22. - P. 528.

119. Standiford T.J., Kunkel S.L., Phan S.H. et al. Alveolar macrophage-derived cytokines induce monocyte chemoattractant protein-1 expression from human pulmonary type II-like epithelial cells // J. Biol. Chem. 1991. - Y. 266.-P. 9912-9918.

120. Sticherling M., Bornscheur E., Schroder M., Cristopher E. Immunihistochemical study of NAP/ interleukin-8 in contact ezema and atopic dermatitis // Arch. Dermatol. Res. 1992. - V. 284. - P. 82 - 85.

121. Sticherling M., Schroder J., Christopher E. Production and characterization of monoclonal antibodies against the novel neutrophil activating peptide NAP 1/ interleukin-8 // J. Immunol. 1989. - V. 143. - P. 1628 - 1634.

122. Strieter R.M., Kasahara K., Allen R.M. et al. Cytokine-induced neutrophil-derived interleukin-8 // Am. J. Pathol. 1992. - V. 141. - P. 397 - 407.

123. Strieter R.M., Kunkel S.L. Acut lung injury: The role of cytokines in the elicidation of neutrophils // J. Invest. Med. 1994. - V. 42. - P. 640 - 651.

124. Sunderkotter C., Steinbrink K., Goebeler M. et al. Macrophages and angiogenesis // J. Leuk. Biol. 1994. - V. 55. - P. 410 - 422.

125. Takeichi O., Saito I., Tsurumachi T. et al. Human polymorphonuclear leukocytes derived from chronically inflammed tissue express inflammatory cytokines in vivo // Cell. Immunol. 1994. - V. 156. - P. 296 -309.

126. Thornton S.C., Pot S.V., Walsh B.J. et al. Interaction of immune an connective tissue cells: the effects of lymphokines and monokines on fibroblast growth // J. Leuk. Biol. 1990. - V. 47. - P. 312 - 320.

127. Thracey K.J., Lowry S.F., Cerami A. Cahectin/TNFa in septic shock and septic adult respiratory distress syndrome // Am. Rev. Respir. Dis. 1988. -V. 138.-P. 1377- 1379.

128. Waage A., Halstensen A., Shalaby R. et al. Local production of tumor necrosis factor-a, interleukin-1 and interleukin-6 in meningococcal meningitis. Relation on the inflammatory response // J. Exp. Med. 1989. -V. 170. - P. 1859- 1867.

129. Werner S., Breden M., Hubner G. et al. Induction of keratinocyte growth factor expression is reduced and delayed during wound healing in the genetically diabetic mouse // J. Invest. Dermatol. 1994. - V. 103. - P. 469 -473.

130. Werner S., Peters K.G., Longaker M.T. et al. Large induction of keratinocyte growth factor in the dermis during wound healing // Proc. Nath. Acad. Sci. USA. 1992. - V. 89. - P. 6896 - 6900.

131. Werner S., Smala H., Liao X. et al. The function of KGF in morphogenesis of epithelization and reeepithelization of wounds // Science. 1994. - V. 266. -P. 819-822.

132. Wewers M.D., Herszyk D.J. Alveolar macrophages differ from blood monocytes in human interleukin-1 beta release. Quantitation by enzime-linked immunoassay // J. Immunol. 1989. - V. 143. - P. 1635.

133. Wewers M.D., Rennard S.I., Hance A.J. et al. Normal human alveolar macrophages obtained by bronchoalveolar lavage have a limited capacity to release interleukin-1 // J. Clin. Invest. 1984. - V. 74. - P. 2208.

134. Witschi H. Role of epithelium in lung repair // Chest. 1991. - V. 99, 3S. -P. 22S-25S.

135. Wu L., Pierce G.F., Galiano R.D., Mustoe T.A. Keratinocyte growth factor induces granulation tissue in ischemic dermal wounds. Importance of epithelial-mezenchimal cell interactions // Arch. Surg. 1996. - V. 131. - P. 660 - 666.

136. Yamada Y., Hofler K.? Burke J.F., Gelfand J.A. An in vivo model of the wound microenvironment. Local phagocytic cell abnormalities associated with in sity complement activation // J. Infect. Dis. 1987. - V. 155. - P. 998 -1004.

137. Yee J.? Christou N.V. The local role of tumor necrosis factor alpha in the modulation of neutrophil function at sites of inflammation // Arch. Surg. -1994.-V. 129.-P. 1249- 1255.

138. Yee J., Ciannias B. Kapadia B. et al. Exudative neutrophils modulation of microbicidal function in the inflammatory microenvironment // Arch. Surg. -1994.-V. 129.-P. 99-104.

139. Yuo A., Kitagawa S., Kasahara T.? Matsushima K. et al. Stimulation and priming of human neutrophils by interleukin-8: cooperation with tumor necrosis factor and colony-stimulating factors // Blood. 1991. - V. 78. - P. 2708-2714.

140. Zavadil D., Floreani A.A., Daughton D. et al. Nososomal pneumonia is associated with decreased neutrophils in alveolar spaces // Chest. 1995. -V. 108.-P. 93S.

141. Zhao L.L., Davidson J.D., Wee S.C. et al. Effects of hyperbaric oxigen and growth factors in rabbit ear ischemic ulcers // Arch. Surg. 1994. - V. 129. -P. 1043- 1049.