Аналитические возможности лигандообменного капиллярного электрофореза при определении биологически активных веществ тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.02, кандидат химических наук Алексеева, Анна Владимировна

• Алексеева, Анна Владимировна
• кандидат химических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат химических наук Алексеева, Анна Владимировна

ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРНЫХ ДАННЫХ.

1.1. Лигандный обмен в хроматографии и капиллярном электрофорезе.

1.2. Факторы, влияющие на разделение аналитов в лигандообменном капиллярном электрофорезе.

1.3. Процессы комплексообразования при хроматографическом и электрофоретическом разделении энантиомеров.

1.3.1. Хиральный лигандообменный капиллярный электрофорез.

1.3.2. Аффинный электрофорез.

1.4. Off- и on-line концентрирование с использованием процессов комплексообразования при электрофоретическом и хроматографическом определении биологически активных соединений.

1.5. Свойства биологически активных соединений и физико-химические методы их определения.

1.5.1. Углеводы.

1.5.1.1. Общая характеристика углеводов.

1.5.1.2. Физико-химические методы определения Сахаров.

1.5.2. Аминокислоты.

1.5.2.1. Общая характеристика аминокислот.

1.5.2.2. Физико-химические методы определения аминокислот.

1.5.3. Биогенные амины.

1.5.3.1. Общая характеристика биогенных аминов.

1.5.3.2. Физико-химические методы определения биогенных аминов.

1.5.4. Полифенолы.

1.5.4.1. Общая характеристика полифенолов.

1.5.4.2. Физико-химические методы определения полифенолов.

1.5.5.Аскорбиновая кислота.

1.5.5.1. Свойства и биологические функции аскорбиновой кислоты.

1.5.5.2. Физико-химические методы определения аскорбиновой кислоты.

1.6. Пробоподготовка реальных объектов.

ГЛАВА 2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

2.1. Аппаратура.

2.2. Реагенты.

2.3. Подготовка кварцевого капилляра.

2.4. Приготовление стандартных растворов определяемых веществ.

2.5. Приготовление рабочих растворов.

2.6. Определение параметров удерживания, эффективности и факторов селективности и разрешения в капиллярном электрофорезе и хроматографии.

2.7. Подбор систем лигандного обмена при определении аминокислот, аминов и Сахаров.gl

2.8. Определение Сахаров методом лигандообменного капиллярного электрофореза.

2.8.1. Оптимизация условий разделения фруктозы и глюкозы.

2.8.2. Количественный анализ реальных объектов.

2.9. Определение катехинов методом мицеллярной электрокинетической хроматографии.

2.10. Изучение процессов комплексообразования полифенолов с катионами А1 , Fe , Си методами капиллярного электрофореза и ВЭТСХ.

2.10.1. Определение кофеина в чае методом ВЭТСХ с использованием комплексообразования полифенолов с Fe в режиме off-line.

2.11. Исследование взаимодействия аскорбиновой кислоты с катионами металлов (Сa ,Ni , Си ,Fe , А1 ) методом КЗЭ.

2.12. Изучение взаимодействия полифенолов с биополимерами (казеином и ДНК).

2.12.1. Изучение взаимодействия полифенолов с казеином методом мицеллярной электрокинетической хроматографии. Ю

2.12.2. Исследование влияния катехинов на свойства ДНК.

2.13. Хиральное разделение аминокислот методом лигандообменного капиллярного электрофреза.

2.14. Количественная оценка процессов комплексообразования в условиях лигандообменного капиллярного электрофореза. ЮЗ

ГЛАВА 3. ЛИГАНДНЫЙ ОБМЕН ПРИ ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКОМ ОПРЕДЕЛЕНИИ АМИНОКИСЛОТ, АМИНОВ И САХАРОВ.

3.1. Лигандообменный капиллярный электрофорез аминокислот

3.2. Использование метода ЛОКЭ для определения Сахаров.

3.2.1. Выбор системы лигандного обмена.

3.2.2. Установление строения комплексов «сахар — Си(П)у>.

ГЛАВА 4. ПРОЦЕССЫ КОМПЛЕКСООБРАЗОВАНИЯ ПРИ ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКОМ И ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМ ОПРЕДЕЛЕНИИ ПОЛИФЕНОЛОВ И АСКОРБИНОВОЙ КИСЛОТЫ.

ГЛАВА. 5. ДОСТОИНСТВА И ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА ЛИГАНДООБМЕННОГО КАПИЛЛЯРНОГО ЭЛЕКТРОФОРЕЗА И ЕГО

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРИМЕНЕНИЕ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Аналитические возможности лигандообменного капиллярного электрофореза при определении биологически активных веществ»

Актуальность. Основными проблемами электрофоретического определения многих биологически активных соединений являются отсутствие в их молекулах хромофорных групп (сахара, алифатические аминокислоты и амины), низкие значения констант диссоциации (сахара), недостаточная стабильность в процессе анализа (аскорбиновая кислота, полифенолы, катехоламины).

Использование процессов комплексообразования с органическими агентами (краун-эфирами, цикламами, циклодекстринами, ПАВ) и ионами переходных металлов (Си , Fe и др.), введенными в матрицу пробы, состав рабочего электролита или подвижную фазу, позволяет расширить аналитические возможности методов разделения. Перспективными в этом направлении могли бы оказаться электрофоретические методы, основанные на лигандном обмене, ближайшим аналогом которых является лигандообменная хроматография. При этом высокая эффективность метода КЭ и возможность on-line концентрирования могут обеспечить заметное снижение времени анализа и пределов обнаружения аналитов.

Данная работа посвящена выявлению возможностей лигандообменного капиллярного электрофореза (ЛОКЭ) при определении биологически активных соединений {аминокислот, биогенных аминов, Сахаров и полифенолов) в объектах растительного происхождения, фармацевтических препаратах и биологических жидкостях человека. Имеющиеся зарубежные работы в этой области ориентированы, в основном, на хиральное разделение. Однако использование принципа лигандного обмена в капиллярном электрофорезе может способствовать решению и других задач: обнаружение не поглощающих в УФ-области соединений без проведения стадии дериватизации; снижение пределов детектирования поглощающих аналитов; изменение эффективности и селективности разделения.

Работа поддержана грантами РФФИ №07-03-01001-а, «Ползуновскими грантами», «У.М.Н.И.К.» (С.-Петербург, Россия).

Цель работы; выявление возможностей лигандообменного капиллярного электрофореза при определении биологически активных соединений (сахаров, аминокислот, аминов, природных антиоксидантов и т.д.) и установление критериев при выборе систем лигандного обмена.

В связи с поставленной ifenbio необходимо было решить следующие задачи:

1. Установить факторы, влияющие на образование комплекса «металл — органический лиганд» в условиях лиганднообменного капиллярного электрофореза

2. Количественно оценить обсуждаемые процессы комплексообразования для подтверждения выявленных закономерностей

3. Выявить пути снижения пределов обнаружения аналитов в условиях лигандообменного капиллярного электрофореза, включая on-line концентрирование

4. Выяснить возможность одновременного определения органических биологически активных соединений (результат лигандного обмена) и неорганических ионов (косвенное детектирование)

5. Получить сравнительные оценочные характеристики метода лигандообменного капиллярного электрофореза с лигандообменной хроматографией

Научная новизна

Предложены критерии выбора систем для реализации режима лигандного обмена в капиллярном электрофорезе (природа металла-комплексообразователя и лиганда, рН рабочего электролита) в зависимости от характеристик определяемых аналитов (констант диссоциации рКа, значений изоэлектрических точек рI, способности к хелатированию, наличия или отсутствия хромофорных фрагментов, а также функциональных групп, склонных к окислению).

Установлено влияние рН рабочего электролита на интенсивность аналитического сигнала аминокислот и показано, что максимальная интенсивность наблюдается при рН, близком к значению рI аминокислот. Полученные закономерности подтверждены рассчитанными константами связывания (Ксв): наибольшие значения Ксв комплексов «аминокислота — Си(11)» наблюдаются при рН ~ рI.

Показана перспективность использования on-line концентрирования в режиме ЛОКЭ. Наибольших факторов концентрирования удалось достичь в случае аминокислот при использовании динамического рН-скачка, основанного на различии в значениях рН зоны пробы и рабочего электролита. Пределы обнаружения аминокислот снижены в 20 - 30 раз и составили 0,5 — 1,0 мг/л.

На примере диализирующего раствора и сыворотки крови человека продемонстрирована возможность одновременного определения Сахаров (прямое УФ-детектирование в форме комплексов с Cu(II)) и неорганических катионов Na+, К+ (косвенное УФ-детектирование) в режиме лигандообменнош капиллярного электрофореза.

Установлено, что возможность обнаружения Сахаров, алифатических аминов и аминокислот в условиях лигандного обмена в существенной степени определяется хелатным эффектом, а для образования комплекса «сахар - Си(П)у> необходимым условием также является циклическая форма молекулы сахара.

На примере цистеина и глутатиона показано, что аминокислоты и пептиды, молекулы которых содержат легкоокисляющиеся SH-группы, в условиях ЛОКЭ детектируются в форме комплексов их продуктов окисления с катионами Си2+.

Электрофоретическими и спектрофотометрическими методами установлено взаимодействие катехинов с белком молока — казеином, в отличие от другого биополимера ДНК, где радиопротекторное действие катехинов не сопровождается образованием комплекса с макромолекулой.

Установлены факторы, влияющие на стабильность аскорбиновой кислоты в процессе ее электрофоретического определения (рН элюента/рабочего электролита, присутствие катионов различных металлов (Са2+, Zn2+, Al3+, Со2+, Ni2+, Cu2+, Fe3+), органического растворителя (ацетонитрила, метанола). Показано, что максимальный стабилизирующий эффект оказывает снижение рН.

Практическая значимость работы

Предложен электрофоретический способ определения Сахаров, основанный на лигандном обмене, в пищевых продуктах (соках, винах, меде и т.д.), а также одновременного определения глюкозы и неорганических катионов (Na+, К+) в фармацевтических препаратах (раствор глюкозы для инъекций, диализирующий раствор для больных с почечной недостаточностью) и биологических жидкостях человека (сыворотка крови). Пределы обнаружения глюкозы, фруктозы, сахарозы, Na и К составили 21, 8, 183, 27 и 35 мг/л, соответственно.

Предложен способ, исключающий стадию пробоподготовки, хроматографического (ВЭТСХ) определения кофеина (минорного компонента) в чае с использованием селективного взаимодействия

II катехинов с катионами Fe . Предел обнаружения кофеина составил 100 нг.

Выявлены факторы, определяющие устойчивость аскорбиновой кислоты в процессе электрофоретического анализа, и предложен вариант мицеллярной электрокинетической хроматографии с обращенной полярностью для ее определения. Предел обнаружения составил 80 мкг/л.

Положения, выносимые на защиту

1. Закономерности выбора систем для лигандообменного капиллярного электрофореза при обнаружении алифатических аминокислот, аминов и диаминов, Сахаров ионогенной (гепарин) и неионогенной (сахароза, глюкоза, фруктоза) природы.

2. Возможности снижения пределов обнаружения биологически активных соединений в условиях лигандообменного капиллярного электрофореза, включая on-line концентрирование.

3. Количественная оценка процессов комплексообраования определяемых биологически активных соединений (аминов, аминокислот и Сахаров) с катионами металлов Си2+.

4. Возможности хирального лигандообменного капиллярного электрофореза при разделения энантиомеров аминокислот в выбранных условиях.

5. Сравнительные оценочные характеристики лигандообменного капиллярного электрофореза, капиллярного зонного электрофореза с косвенным УФ-детектированием и лигандообменной хроматографии.

6. Использование полученных закономерностей при решении практических задач: определение Сахаров в напитках, фармацевтических препаратах и биологических жидкостях методом ЛОКЭ; определение кофеина в различных образцах чая методом ВЭТСХ; определение аскорбиновой кислоты в напитках методом мицеллярной электрокинетической хроматографии с обращенной полярностью.

Заключение диссертации по теме «Аналитическая химия», Алексеева, Анна Владимировна

выводы

1. Выявлены критерии, обеспечивающие разделение и обнаружение аналитов в условиях лигандообменного капиллярного электрофореза природа металла-комплексообразователя и природа противоиона; характеристики аналита (значение рКа, способность к хелатированию и т.д.); присутствие конкурирующих добавок; рН рабочего электролита, значение которого влияет на электрофоретические характеристики аналитов и возможность образования комплекса с ионами Си (максимальная интенсивность аналитического сигнала и связывание аминокислот с ионами 2+

Си наблюдается при рН ~ pi).

2. Установлено, что использование метода ЛОКЭ позволяет снизить пределы обнаружения поглощающих в УФ-области соединений (триптофан, тирозин, гистамин) по сравнению с традиционным капиллярным зонным электрофорезом в 2-3 раза. При реализации on-line концентрирования {динамического рН-скачка) пределы обнаружения алифатических аминокислот были снижены в 20 — 30 раз и составили 0,5 — 1,0 мг/л.

3. Предложен способ электрофоретического определения Сахаров в форме их комплексов с катионами Си и показано, что необходимым условием является циклическая форма сахара.

4. Разработан способ одновременного определения глюкозы в форме комплексов с

Си2+ и неорганических катионов Na , К (результат косвенного УФ-детектирования) в диализирующем растворе и сыворотке крови больных почечной недостаточностью.

5. Предложен способ экспресс-определения кофеина в зеленом чае методами капиллярного электрофореза и высокоэффективной тонкослойной хроматографии, основанный на использовании селективного связывания полифенолов (мешающих компонентов) катионами Fe3+, Cu2+, без проведения стадии пробоподготовки.

6. Выявлены возможности хирального лигандообменного капиллярного электрофореза при разделении аминокислот (значения фактора разрешения

Rs) для энантиомеров D,L-Pro, AZ-Tyr, D,L -ДОФА составили 0.7, 0.9, 1.4, соответственно) в выбранных условиях.

7. Показано, что метод лигандообменного капиллярного электрофореза превосходит лигандообменную хроматографию по времени анализа и эффективности, уступая ей по селективности.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Алексеева, Анна Владимировна, 2009 год

1. В.А. Даванков, Дж. Навратил, X. Уолтон. Лигандообменная хроматография. Пер. с англ. М.: Мир. 1990. 294 С.

2. G. Giibitz, W. Jellenz, W. Santi. Separation of the optical isomers of aminoacids by ligand-exchange chromatography using chemically bonded phases // J. Chromatogr. 1981. V. 203. P. 377-384.

3. E. Gassmann, J. E. Kuo, and R. N. Zare. Electrokinetic Separation of Chiral

4. Compounds // Science. 1985. V. 230. P. 813-814.

5. P. Gozel, E. Gassman, H. Michelsen, R.N. Zare. Electrokinetic resolution ofamino acid enantiomers with copper (II) — aspartame support electrolyte // Anal. Chem. 1987. V. 59. P. 44-49.

6. M. Blanco, I. Valverde. Choice of chiral selector for enentioseparation bycapillary electrophoresis // Trends in Analytical Chemistry. 2003. V. 22. P. 428-439.

7. M.G. Schmid, N. Grobuschek, O. Lecnik, G. Giibitz. Review article: Chiralligand-exchange capillary electrophoresis // J. Biochem. Biophys. Methods. 2001. V. 48. P. 143-154.

8. N. G. Sundin, T.M. Dowling, N. Grinberg, G. Bicker. Enantiomeric separationof dansyl amino acids using MECC with a ligand exchange mechanism // J. Microcolumn Separations. 1996. V. 8.1. 5. P. 323-329.

9. A. Vergali, M.G. Schmid, F. Kilar, G. Giibitz. Chiral separation of a-aminoacids by ligand-exchange capillary electrophoresis using N-(2-hydroxy-octyl)-L-hydroxyproline as a selector // Electrophoresis. 1998. V. 19. P. 2109-2112.

10. M.G. Schmid, R. Rinaldi, D. Drenevy, G. Giibitz. Enantioseparation of a-aminoacids and dipeptides by ligand exchange capillary electrophoresis of various L-4-hydroxyproline derivatives //J. Chromatogr. A. 1999. V. 846. P. 157-163.

11. M.G. Schmid, G. Giibitz. Direct enantiomer separation of underivatized aminoacids by capillary zone electrophoresis based on ligand exchange // Enantiomer. 1996. V. 1. P. 23- 27.

12. M.G. Schmid, О. Lecnik, U. Sitte, G. Giibitz. Application of ligand-exchangecapillary electrophoresis to the chiral separation of a-hydroxy acids and p-blockers // J. Chromatogr. A. 2000. V. 875. P. 307-314.

13. Z. Chen, J.-M. Lin, K. Uchiyama, T. Hobo. Separation behaviour of amino acid enantiomers in ligand-exchange micellar electrokinetic chromatography // J. Microcolumn Separations. 1999. V. 11. P. 534-540.

14. V. Cucinotta, A. Guffrida, D. La Mendola, G. Maccarone, A. Puglisi, E.L

15. N. Grobuschek, M.G. Schmid, C. Tuscher, M. Ivanova, G. Giibitz. Chiral separation of P-methyl-amino acids by ligand-exchange using capillary elecrophoresis and HPLC // J. Pharmaceuticals and Biomedical Analysis. 2002. V. 27. P. 599-605.

16. S. Zhao, Y.-M. Liu. Enantioseparation of underivatized amino acids by capillary electrophoresis using copper(II) (S)-3-aminopirrolidine - L-histidine ternary complex as the chiral selector // Analytica Chimica Acta. 2001. V. 426. P. 65-70.

17. X. Lu, Y. Chen, L. Guo, Y. Yang. Chiral separation of underivatized amino acids by ligand-exchange capillary electrophoresis using a copper(II) — L-lysine complex as selector // J. Chromatogr. A. 2002. V. 945. P. 249-255.

18. Z. Chen, K. Uchiyama, T. Hobo. Chiral resolution of dansyl amino acids byligand exchange-capillary electrophoresis using Cu(II)-L-prolinamides as chiral selector // Analytica Chimica Acta. 2004. V. 523. P. 1-7.

19. V.A. Davankov. Enantioselective ligand exchange in modern separation techniques //J. Chromatogr. A. 2000. V. 1000. P. 891-915.

20. A. Bazanella, К. Bachmann. Separation and direct UV detection of sugars bycapillary electrophoresis using chelation of copper (II) // J. Chromatogr. A. 1998. V. 799. P. 283-288.

21. J. Snopek, I. Jelinek, E. Smolkova-Keulemansova. Review: Chiral separationby analytical electromigration methods // J. Chromatogr. 1992. V. 609. P. 117.

22. S.A.C. Wren. Theory of chiral separation in capillary electrophoresis // J. Chromatogr. 1993. V. 636. P. 57-62.

23. Е.П. Соколова, H.A. Смирнова. Межмолекулярные взаимодействия. Основные понятия: Учебное пособие для университетов. СПб.: Санкт-Петербургский университет, ВВМ, 2008. — 225 е.: илл.

24. Панкратов А.Н. Кислоты и основания в химии: Учеб. пособие. — Саратов: Изд-во Сарат. ун-та, 2006. — 196 е.: ил.

25. Основы аналитической химии. В 2 кн. Кн. 1. Общие вопросы. Методы разделения: Учеб. Для вузов/Ю.А. Золотов, Е.Н.Дорохова, В.И. Фадеева и др. Под ред. Ю.А. Золотова. — 2-е изд., перераб. и доп. — М.: Высш. шк., 2002. — 351 е.: ил.

26. JI.A. Карцова, А.А. Сидорова, А.С. Иванова. Электрофоретическое определение биогенных аминов в биологических жидкостях // Журнал Аналитической Химии. 2007. Т. 62. № 10. С. 1066-1071.

27. W.J. Shieh, A.R. Hedges. Properties and applications of cyclodextrines // J.M.S. Pure Appl. Chem. A. 1996. V. 33 (5). P. 673-683.

28. A. M. Rizzi. Efficiency in chiral high-performance liquid-exchange chromatography. Influence of the complexation process, flow-rate and capacity factor// J. Chromatogr. 1991. V. 542. P. 221-237.

29. V.A. Davankov. Chiral selectors with chelating properties in liquid chromatography: fundamental reflections and selective review of recent developments // J. Chromatogr. A. 1994. V. 666. P. 55-76.

30. S. Fanali. Enantioselective determination by capillary electriphoresis with cyclodextrines as chiral selectors // J. Chromatogr. A. 2000. V. 875. P. 89122.

31. L. Guo, S. J. Lin, Y.F. Yang, L. Qi, M.X. Wang, Y. Chen. Fast enentioseparation of arylglycine amides by capillary electrophoresis with highly sulfated-(3-cyclodextrin as a chiral selector // J. Chromatogr. A. 2003. V. 998. P. 221-228.

32. Z. Chen, J.-M. Lin, K. Uchiyama, T. Hobo. Simultaneous separation of sixteenpositional and optical isomers of the tryptophan family by ligand-exchange micellar electrokinetic chromatography // Chromatographia. 1999. V. 49. P. 436-443.

33. V. Cucinotta, A. Giuffrida, G. Maccarrone, M. Messina, A. Puglisi, A. Torrisi,

34. G. Vecchio. The 6-derivative of (3-cyclodextrin with succinic acid: a new chiral selector for CD-EKC // J. Pharmaceuticals and Biomedical Analysis. 2005. V. 37.1. 5. P. 1009-1014.

35. K. Takeo. Review: Advances in affinity electrophoresis // J. Chrom. A. 19951. V. 698. P. 89-105

36. K.L. Larsen, W. Zimmermann. Analysis and characterization of cyclodextrinsand their inclusion complexes by affinity capillary electrophoresis // J. Chromatogr. A. 1999. V. 836. P. 3-14.

37. S. Bose, J. Yang, D.S. Hage. Guidelines in selecting ligand concentrations forthe determination of binding constants by affinity capillary electrophoresis // J. Chromatogr. B. 1997. V. 697. P. 77-88.

38. JI.А. Карцова, Е.А. Бессонова. Методы on-line концентрирования в капиллярном электрофорезе // Журнал аналитической химии. 2009. Т.64. №4. С. 340-351. ^

39. Н. Tsuchiya, М. Sato, Н. Kato, Т. Okubo, L.R. Juneja, М. Kim. Simultaneousdetermination of catechins in human saliva by high performance liquid chromatography // J. Chromatogr. B. 1997. V. 703. P. 253-258.

40. H. Tsuchiya, M. Sato, H. Kato, H. Kureshiro, N. Takagi. Nanoscale analysis ofpharmacologically active catechins in body fluids by HPLC using borate complex extraction pretreatment // Talanta. 1998. V. 46. P. 717-726

41. M. Vaher, M. Koel. Separation of polyphenolic compounds extracted from plant matrices using capillary electrophoresis // J. Chromatogr .A. 2003. V. 990. P. 225-230.

42. D.J. Weiss, C.R. Anderton. Determination of catechins in matcha green tea bymicellar electrokinetic chromatography // J. Chromatogr. A. 2003. V. 1011. P. 173-180.

43. Л.А. Карцова, A.B. Алексеева. Обзор: Свойства и физико-химические методы определения полифенольных соединений // ЖАХ. 2008. В. 63. № 11. С. 1126-1136.

44. К. Vuorensola, Н. Siren. Determination of urinary catecholamines with capillary electrophoresis after solid-phase extraction // J. Chromatogr. A. 2000. V. 895. P. 317-327.

45. T.T. Березов, Б.Ф. Коровкин. Биологическая химия: Учебник — 3-е изд., перераб. и доп.- М.: Медицина, 1998- 704 е.: ил- (Учеб. лит. для студентов мед. вузов). ISBN 5-225-02709-1.

46. Б.И. Збарский, И.И. Иванов, С.Р. Мардашев. Биологическая химия: Учебник.- 5-е изд., испр. и доп.- Ленинград.: Медицина, 191972 582 е.: ил — (Учеб. лит. для студентов мед. вузов).

47. C. W. Wilson, P. E, Shaw, C. W. Campbell. Determination of organic acidsand sugars in Guava (Psidium guajava L.) cultivars by high-performance liquid chromatography // J. Sci. Food Agric. 1982. V. 33. P. 777-780.

48. K. Tang, L. Liang, Y. Cai, S. Мои. Determination of sugars and alditols in tobacco with high-performance anion-exchange chromatography // J. Sep. Sci. 2007. V. 30. P. 2160-2166.

49. J J. Conboy, J. Henion. High-performance anion-exchange chromatography coupled with mass spectrometry for the determination of carbohydrates // Biological Mass Spectrometry. 1992. V.21. P. 397-407.

50. R.M. Saunders. Separation of sugars on an ion-exchange resin // Carbohydr. Res. 1968. V. 7. P. 76 79.

51. H. F. Walton. Ligand-exchange chromatography: A brief review // Ind. Eng.

52. Chem. Res. 1995. V. 34. P. 2553-2554.

53. M. Stefansson, D. Westerlund. Ligand-exchange chromatography of carbohydrates and glycoconjugates // J. Chromatogr. A. 1996. V. 720. P. 127136.

54. S. M. Santos, A. C. Duarte, V. I. Esteves. Development and application of capillary electrophoresis based method for the assessment of monosaccharide in soil using acid hydrolysis // Talanta. 2007. V. 72. P. 165-171.

55. E. Maeda, M. Kataoka, M. Hino, K. Kajimoto, N. Kaji, M. Tokeshi, J. Kido, Y.

56. Shinohara, Y. Baba. Determination of human blood glucose levels using microchip electrophoresis //Electrophoresis. 2007. V. 28. P. 2927-2933.

57. C. Chiesa, P. Oefner, L. R. Zieske, R. A. O'Neill. Micellar electrokinetic chromatography of monosaccharides derivatized with l-phenyl-3-methyl-2-pyrazolin-5-one // J. CAP. ELEC. 1995. V. 2 (4). P. 175-183.

58. H. Schwaiger, P. J. Oefner, C. Huber, E. Grill, G. K. Bonn. Capillary zone electrophoresis and micellar electrokinetic chromatography of 4aminobenzonitrile carbohydrate derivatives // Electrophoresis. 1994. V. 15. P. 941-952.

59. M. Ristolainen. Characterization of totally chlorine-free effluents from Kraftpulp bleaching. II. Analysis of carbohydrate-derived constituents after acid hydrolysis by capillary zone electrophoresis // J. Chromatogr. A. 1999. V. 832. P. 203-209.

60. Z. L. Rassi, Y. Mechref. Recent advances in capillary electrophoresis of carbohydrates: Review//Electrophoresis. 1996. V. 17. P. 275-301.

61. X. Y. Wang, Y. Chen, Z. Li, Z. Wang. Analysis of carbohydrates by capillaryzone electrophoresis with on-capillary derivatization // J. of Liquid Chromatography & Related Technology. 2002. V. 25.1. 4. P. 589-600.

62. A.V. Jager, F.G. Tonin, M.F.M. Tavares. Comparative evaluation of extractionprocedures and method validation for determination of carbohydrates in cereals and dairy products by capillary electrophoresis // J. Sep. Sci. 2007. V. 30. P. 586-594.

63. Y.-H. Lee, T.-I. Lin. Determination of carbohydrates by high-performance capillary electrophoresis with indirect absorbance detection // J. Chromatogr. B. 1996. V. 681. P. 87-97.

64. Y. Ciringh, J. S. Lendsey. Analysis of sugar phosphates and related compoundsusing capillary zone electrophoresis with indirect UV detection // J. Chromatogr. A. 1998. V. 816. P. 251-259.

65. B. Lu, D. Westerlund. Indirect UV detection of carbohydrates in capillary zoneelectrophoresis by using tryptophan as a marker // Electrophoresis. 1996. V. 17. P. 325-332.

66. S. Hoffstetter-Kuhn, A. Puulus, E. Gassmann, H. M. Widmer. Influence of borate complexation on the electrophoretic behavior of carbohydrates in capillary electrophoresis //Anal. Chem. 1991. V.63. P. 1541-1547.

67. G. Morales-Cid, В. M. Simonet, S. Cardenas, M. Valcarcel. On-capillary sample clean up method for the electrophoretic determination of carbohydrates in juice samples // Electrophoresis. 2007. V. 28. P. 1557-1563.

68. A. Pervin, A. Al-Hakim, R.J. Linhardt. Separation of glycosaminoglycan-derived oligosaccharides by capillary electrophoresis using reversed polarity // Anal. Biochem. 1994. V. 221. P. 182-188.

69. T. Toida, R. J. Linhardt. Detection of glucosaminoglycans as a copper (II) complex in capillary electrophoresis // Electrophoresis. 1996. V. 17. P. 341346.

70. S. Rovio, J. Yli-Kauhaluoma, H. Siren. Determination of neutral carbohydratesby CZE with direct UV detection // Electrophoresis. 2007. V. 28. P. 31293135.

71. A.M. Tolbert, R. Baldwin. Liquid chromatography and electrochemical detection of alditols and acidic sugars at a cobalt phthalocyanine-containing chemically modified electrode // Electroanalysis. 1989. V. 1. P. 389-395.

72. L.A. Kartsova, Y.V. Cherkas, I.N. Krasnova. Analysis of aminoacids in humanserum by isocratic reversed-phase liquid high-performance chromatography with various types of phtalaldehyde derivatization // J. Chromatogr. A. 2001. V. 913. P. 303-308.

73. Encyclopedia of Separation Science. C. F. Poole, M. Cooke, I.D. Wilson (Eds).

74. Publisher: Academic Press; 2000. 4500 p.

75. JI.A. Карпова, И.Н. Краснова, И.В. Колмакова. Анализ нейромедиаторныхаминокислот и биогенных аминов в синномозговой жидкости методом обращенно-фазовой высокоэффективной хроматографии // Журнал аналитической химии. 1997. Т. 52. № 7. С. 767-772.

76. М. Krizek, Т. Pelikanova. Determination of seven biogenic amines in foods bymicellar electrokinetic capillary chromatography // J. Chromatogr. A. 1998. V. 815. P. 243-250.

77. E.K. Paleologos, S.D. Chytiri, I.N. Savvaidis, M.G. Kontominas. Determination of biogenic amines as their benzoyl derivatives after cloud point extraction with micellar liquid chromatographic separation // J. Chromatogr. A. 2003. V. 1010. P. 217-224.

78. B. Kagedal. Catecholamines and their methabolites // J. Chromatogr. B. 1988.1. V. 429. P. 177-233.

79. A. Kovacs, L. Simon-Sarkadi, K. Ganzler. Determination of biogenic aminesby capillary electrphoresis // J. Chromatogr. A. 1999. V. 836. P. 305-313.

80. S.C. Su, S.S. Chou, P.C. Chang, D.F. Hwang. Determination of biogenic amines in fish implicated in food poisoning by micellar electrokinetic capillary chromatography // J. Chromatogr. B. 2000. V. 749. P. 163-169.

81. K.B. Male, J.H.T. Luong. Derivatisation, stabilization and detection of biogenic amines by cyclodextrin-modified capillary electrophoresis laser-induced fluorescence detection // J. Chromatogr. A. 2001. V. 926. P. 309-317.

82. X. Sun, X. Yang, E. Wang. Determination of biogenic amines by capillary electrophoresis with pulsed amperometric detection // J. Chromatogr. A. 2003. V. 1005. P. 189-195.

83. X. Liu, L.-X. Yang, Y.-T. Lu. Determination of biogenic amines by 3-(2-furoyl)quinoline-2-carboxaldehyde and capillary electrophoresis with laser-induced fluorescence detection // J. Chromatogr. A. 2003. V. 998. P. 231-219.

84. T. A. Smith. Polyamines // Annu. Rev. Plant Physiol. 1985. V. 36. P. 117-143.

85. C. W. Tabor, H. Tabor. Polyamines // Annu. Rev. Biochem. 1984. V. 53. P.749.790.

86. V. Quemener, Y. Blanchard, L. Chamaillard, R. Havouis, B. Cipolla, J-Ph. Moulinoux. Polyamine deprivation: A new tool in cancer treatment // Anticancer Res. 1994. V. 14. P. 443-448.

87. D.H. Russell, C.C. Levy, S.C. Schimpff, I.A. Hawk. Urinary polyamines in cancer patients //Cancer Res. 1971. V. 31(11). P. 1555-1558.

88. B. ten Brink, C. Damink, H.M.L J. Joosten, J.H.J. Huis in't Veld. Occurrenceand formation of biologically active amines in foods // Int. J. Food Microbiol. 1990. V. 11. P. 73-84.

89. P. Volin. Determination of free urinary catecholamines by high-performance liquid chromatography with electrochemical detection // J. Chromatogr. B. 1994. V. 655. P. 121-126.

90. R.P.H. Nikolajsen, A.M. Hansen. Analtical methods for determining urinary catecholamines in healthy subjects // Analytica Chimica Acta. 2001. V. 449. P. 1-15.

91. M.A. Raggi, C. Sabbioni, G. Casamenti, G. Gerra, M. Calonghi, L. Masotti. Determination of catecholamines in human plasma by high-performance liqiud chromatography with electrochemical detection // J. Chromatogr. B. 1999. V. 730. P. 201-211.

92. R.M. Riggin, P.T. Kissinger. Determination of catecholamines in urine by reverse-phase liquid chromatography with electrochemical detection // Anal.Chem. 1977. V. 49(13). P. 2109-2111.

93. S. Honda, M. Takahashi, Y. Araki, K. Kakehi. Post-column derivatization of catecholamines with 2-cyanoacetamide for fluorometric monitoring in high-performance liquid chromatography // J. Chromatogr. B. 1983. V. 274. P. 4552.

94. Y. Ohkura, M. Kai, H. Nohta. Fluorigenic reactions for biomedical chromatography // J. Chromatogr. B. 1994. V. 659. P. 85-107.

95. T. Okumura, Y. Nakajima, M. Matsuoka, T. Takamatsu. Study of salivary catecholamines using fully automated column-switching high-performance liquid chromatography // J. Chromatogr. B. 1997. V. 694. P. 305-316.

96. M.E. Bovingdon, R.A. Webster. Derivatization reactions foe neurotransmittersand their automation // J. Chromatogr. B. 1994. V. 659. P. 157-183.

97. J. Lange, K. Thomas, C. Wittmann. Comparison of a capillary electrophoresis method with high-performance liquid chromatography for the determination of biogenic amines in various food samples // J. Chromatogr. B. 2002. V. 779. P. 229-239.

98. H. Siren, M. Mielonen, M. Herlevi. Capillary electrophoresis in the determination of anionic catecholamine methabolites from patients' urine // J. Chromatogr. A. 2004. V. 1032. P. 289-297.

99. K. Vuoresola, H. Siren. Determination of urinary catecholamines with capillary electrophoresis after solid-phase extraction // J. Chromatogr. A. 2000. V. 896. P. 317-327.

100. E.C.Y. Chan, P.Y. Wee, O.Y. Ho. HPLC assay for catecholamines and metanephrines using fluorimetric detection with pre-column 9-fluorenylmethyloxycarbonyl chloride derivatization// J. Chromatogr. B. 2000. V. 749. P. 179-189.

101. A. Mitsui, H. Mohta, Y. Ohkura. High-performance liquid chromatography of plasma catecholamines using 1,2-diphenylethylenediamine as precolumn fluorescence derivatization reagent // J. Chromatogr. B. 1985. V. 344. P. 6170.

102. J. A. M. McKenzie, C. J. Watson, R.D. Rostand, I. German, S.R. Witowski, R.T. Kennedy. Automated capillary liquid chromatography for simultaneuos determination of neuroactive amines and amino acids // J. Chromatogr. A. 2002. V. 962. P. 105-115.

103. V. Stangl, H. Dreger, K. Stangl, M. Lorenz. Molecular targets of tea polyphenols in the cardiovascular system // Cardiovascular Research. 2007. V. 73. P. 348-358.

104. H. Yu, J. Yin, S. Shen. Effects of epi-gallocatechin gallate on PC-3 cell cytoplasmic membrane in presence of Cu2+ // Food Chemistry. 2006. V. 95. P. 108-115.

105. G. Lill, S. Voit, K. Schror, A.-A. Weber. Complex effects of different green tea catechins on human platelets // FEBS Letters. 2003. V. 546. P. 265-270.

106. H. Horie, K. Kohata. Application of capillary electrophoresis to tea quality estimation // J. Chromatogr .A. 1998. V. 802. P. 219-223.

107. H. Horie, T. Mukai, K. Kohata. Simultaneuos determination of qualitatively important components in green tea infusions using capillary electrophoresis // J. Chromatogr.A. 1997. V. 758. P. 332-335.

108. E. Blahova, J. Lehotay. Sample preparation and HPLC determination of catechins in green tea // Chem. Anal. 2006. V. 51. P. 795-807.

109. M. C. Pascual-Marti, A. Salvador, A. Chafer, A. Berna. Supercritical fluid extraction of resveratrol from grape skin of Vitis vinifera and detremination by HPLC // Talanta. 2001. V. 54. P. 735-740.

110. В.И. Слесарев. Основы химии живого. СПб: Химиздат, 2001. 784 С.

111. V. Nwuha, М. Nakajima, J. Tong, S. Ichikawa. Solubility study of green tea extracts in pure solvents and edible oils // J. Food Engineering. 1999. V. 40. P.161-165.

112. Биохимия фенольных соединений. Под ред. Дж. Харборна. М.: Мир, 1968.451 С.

113. S. Khokhar, R. К. Owusu Apenten. Iron binding characteristics of phenolic compounds: some tentative structure-activity relations // Food Chemistry. 2003. V. 81. P. 133-140.

114. S.B. Erdemoglu, S. Guser. Selective determination of aluminium bound with tannin in tea infusion // Analytical Science. 2005. V. 21. P. 1005-1008.

115. L.M. Costa, S.T. Gouveia, J.A. Nobrega. Comparison of heating extraction procedures for Al, Ca, Mg and Mn in tea samples // Analytical Science. 2002. V. 18. P. 313-318.

116. Chia-Chann Shiue, Shu-Yu Lin, Chuen-Ying Liu. Chemically bonded fullerene C60 capillary column for the electrophoretic separation of plant polyphenols //J. Chinese chemical society. 2001. V. 48. P. 1029-1034.

117. M. Lopez-Serrano, A. R. Barselo. Reversed-phase and size-exclusion chromatography as useful tools in the resolution of peroxidase-mediated (+)-catechin oxidation product // J. of Chromatogr. A. 2001. V. 919. P. 267-273.

118. A.M. van Nederkassel, M. Daszykowski, D.L. Massart, Y. Vander Heyden. Prediction of total green tea antioxidant capacity from chromatograms by multivariate modeling // J. Chromatogr.A. 2005. V. 1096. P. 177-186.

119. M.Sano, M.Tabata, M. Suzuki, M. Degawa, T. Miyase, M. Maeda-Yamamoto. Simultaneous determination of twelve tea catechins by high-perfomance liquid chromatography with electrochemical detection // The Analyst. 2001. V. 126. P. 816-820.

120. M. Kumamoto, T. Sonda, K. Takedomi, M. Tabata. Enhanced separation and elution of catechins in HPLC using mixed-solvents of water, acetonitrile and ethyl acetate as mobile phase // Analytical sciences. 2000. V. 16. P. 139-144.

121. A. Kotani, Y. Hayashi, R. Matsuda, F. Kusu. Optimization of HPLC-ECD of catechins with precision and efficiency based on FUMI theory // Analytical Science. 2003. V. 19. P. 865-869.

122. B. Suarez, A. Picinelli, J.J. Mangas. Solid-phase extraction and high-performance liquid chromatographic determination of polyphenols in apple musts and ciders // J. Chromatogr.A. 1996. V.727. P. 203-209.

123. G. Maiani, M. Serafini, M. Salucci, E. Azzini, A. Ferro-Luzzi. Application of a new high-perfoemance liquid chromatigraphic method for measuring selected polyphenols in human plasma // J. Chromatogr.A. 1998. V. 692. P. 311-317.

124. H. Tsuchiya. High performance liquid chromatographic analysis of polyhydroxyflavones using solid-phase borate complex extraction // J. Chromatogr.В. 1998. V. 720. P. 225-230.

125. H. Tsuchiya, M. Sato, H. Kato, T. Okubo, L.R. Juneja, M. Kim. Simultaneous determination of catechins in human saliva by high performance liquid chromatography // J. Chromatogr. B. 1997. V. 703. P. 253-258.

126. P. L. Fernandez, M. J. Martin, A. G. Gonzalez, F. Pablos. HPLC determination of catechins and caffeine in tea. Differentation of green, black and instant teas // Analyst. 2000. V. 125. P. 421-425.

127. Y. Zuo, H. Chen, Y. Deng. Simultaneous determination of catechins, caffeine and gallic acid in green, Oolong, black and pu-erh teas using HPLC with photodiode array detector // Talanta. 2002. V. 54. P. 307-316.

128. X. Gu, Q. Chu, M. O'Dwyer, M. Zeece. Analysis of resveratrol in wine by capillary electrophoresis // J. Chromatogr.A. 2000. V.881. P.471-481.

129. D J. Weiss, C.R. Anderton. Determination of catechins in matcha green tea by micellar electrokinetic chromatography // J. Chromatogr. A. 2003. V. 1011. P. 173-180.

130. J. Pazourek, G. Gonzalez, A.L. Revilla, J. Havel. Separation of polyphenols in Canary Islands wine by capillary zone electrophoresis without preconcentration // J. Chromatogr. A. 2000. V. 874. P. 111-119.

131. M. Vaher, М. Koel. Separation of polyphenolic compounds extracted from plant matrices using capillary electrophoresis // J. Chromatogr.A. 2003. V. 990. P. 225-230.

132. J.J. Dalluge, B.C. Nelson. Determination of tea catechins // J. Chromatogr. A.2000.V. 881. P. 411-424.

133. B.-L. Lee, C.-N. Ong. Comparative analysis of tea catechins and theaflavins by high-performance liquid chromatography and capillary electrophoresis // J. Chromatogr.A. 2000. V. 881. P. 439-447.

134. H. Tsuchiya, M. Sato, H. Kato, H. Kureshiro, N. Takagi. Nanoscale analysis of pharmacologically active catechins in body fluids by HPLC using borate complex extraction pretreatment // Talanta. 1998. V. 46. P. 717-726.

135. E. G. Yanes, S. R. Gratz, A. M. Stalcup. Tetraethylammonium tetrafluoroborate : a novel electrolyte with a unique role in the capillary electrophoretic separation of polyphenols found in grape seed extracts // Analyst. 2000. V. 125. P. 1919-1923.

136. J. P. Aucamp, Y .Hara, Z. Apostolides. Simultaneous analysis of tea catechins, caffeine, gallic acid, theanine and ascorbic acid by micellar electrokinetic capillary chromatography // J. Chromatogr. A. 2000. V. 876. P. 235-242.

137. B. Z'umreoglu-Karan. The coordination chemistry of Vitamin C: An overview // Coordination Chemistry Reviews. 2006 V. 250. P. 2295-2307.

138. A. Versari, A. Mattioli, G. P. Parpinello, S. Galassi. Rapid analysis of ascorbic and isoascorbic acids in fruit juice by capillary electrophoresis // Food Control. 2004. V. 15. P. 355-358.

139. J. Oszmianski, A. Wojdylo, J. Kolniak. Effect of Z-ascorbic acid, sugar, pectin and freeze-traw treatment on polyphenol content of frozen strawberries // LWT-Food Science and Technology. 2009. V. 42. P.581-586.

140. A.E. Martell, in: P.A. Seib, B.M. Tolbert (Eds). Ascorbic acid: Chemistry, Metabolism and Uses. Publisher: Advances in Chemistry Series 200, American Chemical Society. 1989. P. 152-156.

141. J. C. Deutsch. Review: Dehydroascorbic acid // J. Chromatogr. A. 2000. V. 881. P. 299-307.

142. H. Iwase, I. Ono. Determination of ascorbic acid in food by column liquid chromatography with electrochemical detection using eluent for pre-run sample stabilization //J. Chromatogr. A. 1998. V. 806. P. 361-364.

143. M. J. Esteve, R. Farre, A. Frigola, J. M. Garcia-Cantabella. Determination of ascorbic and dehydroascorbic acids in blood plasma and serum by liquid chromatography // J. Chromatogr. B: Biomedical Sciences and Applications. 1997.V. 688. P. 345-349.

144. C. W. Klamplf, W. Buchberger, P. R. Haddad. Review: Determination of organic acids in food samples by capillary zone electrophoresis // J. Chromatogr. A. 2000. V. 881. P. 357-364.

145. Г.Б. Голубицкий, E.B. Будко, E.M. Басова, A.B. Костарной, B.M. Иванов. Устойчивость аскорбиновой кислоты в водных и водно-органических растворах для количественного определения // ЖАХ. 2007. Т. 62. № 8. С. 823-828.

146. F. Sahbaz, G. Somer. Determination of ascorbic acid in fruit and vegetables using normal polarography // Food Chemistry. 1992. V. 44. P. 141-146.

147. Л.Г. Шайдарова, И.А. Челнокова, A.B. Гедмина, Г.К. Будняков. Совместное вольтамперометрическое определение дофамина и аскорбиновой кислоты на электроде, модифицированном бинарной системой золото палладий // ЖАХ. 2009. Т. 64. № 1. С. 43-51.

148. E.M. Strochkova, Y.I. Kuselman, A. Shenhar. Simultaneous voltammetric determination of uric and ascorbic acids in urine // Talanta. 1997. V. 44. P. 1923-1928.

149. S. Wang, D. Du. Differential pulse voltammetry determination of ascorbic acid with ferrocene-X-cysteine self-assembled supramolecular film modified electrode // Sensors and Actuators B. 2004. V. 97. P. 373-378.

150. H. Horie, A. Nesumi, Т. Ujihara, К. Kohata. Rapid determination of caffeine in tea leaves // J. Chromatogr. A. 2001. V. 942. P. 271-273.

151. K.L. Rundlett, D.W. Armstrong. Examination of the origin, variation, andproper use of expressions for the estimation of association constants by capillary electrophoresis // J. Chromatogr. A. 1996. V. 721. P. 173-186.

152. Пронин А.Я. Хроматографическое разделение глюкозы и фруктозы. Хроматография на благо России. М.: Издательская группа «Граница». 2007. 688 с.

153. Kim J.I., Hong S.B., Row К.Н. Effect of particle size in preparative reversed-phase high-performance liquid chromatography on the isolation of epigallocatechin gallate from Korean green tea // J. Chromatogr. A. 2002. V. 949. P. 275.

154. Л.А. Карцова, A.B. Алексеева. Влияние казеинов молока на содержание полифенолов в составе чая // ЖАХ. 2008. В. 63. № 11. С. 1107-1111.

155. Л.А. Карцова, А.В. Алексеева. Использование селективного комплексообразования катехинов с ионами Fe3+ при определении кофеина в чае методом ВЭТСХ // ЖАХ. 2009. Т.64. № 9. С. 954-958.