Амперометрические биосенсоры для определения некоторых микотоксинов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.02, кандидат наук Май Тхи Тхань Хуен

• Май Тхи Тхань Хуен
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Май Тхи Тхань Хуен

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1 СВОЙСТВА МИКОТОКСИНОВ И МЕТОДЫ ИХ

ОПРЕДЕЛЕНИЯ

1.1 Микотоксины и их свойства

1.1.1 Афлатоксины

1.1.2 Охратоксин А

1.1.3 Зеараленон

1.1.4 Патулин

1.2 Методы определения микотоксинов

1.2.1 Хроматографические методы определения микотоксинов

1.2.2 Иммунохимические методы определения микотоксинов

1.2.3 Био сенсоры для определения микотоксинов

1.2.3.1 Ферментные сенсоры

1.2.3.2 Иммуносенсоры для определения микотоксинов

1.2.3.3 Аптасенсоры для определения микотоксинов

1.2.4. Свойства некоторых ферментов и биосенсоры на их основе

1.2.4.1. Холинэстераза и биосенсоры на ее основе

1.2.4.2 Ь-цистеиндесуфгидраза и ее использование в биосенсорах

1.2.4.3. Щелочная фосфатаза и биосенсоры на ее основе

1.2.4.4 Тирозиназа и биосенсоры на ее основе

Глава 2 НАНОТРУБКИ КАК МОДИФИЦИРУЮЩИЙ МАТЕРИАЛ

ПОВЕРХНОСТИ ЭЛЕКТРОДОВ

2.1. Свойства углеродных нанотрубок

2.2. Функционализация углеродных нанотрубок

2.3. Ферментные электроды на основе углеродных нанотрубок

Глава 3. ПОСТАНОВКА ЗАДАЧИ, АППАРАТУРА, ОБЪЕКТЫ

ИССЛЕДОВАНИЯ И УСЛОВИЯ ЭКСПЕРИМЕНТА

3.1. Постановка задачи

3.2 Аппаратура и объекты исследования

3.3. Реактивы и приготовление растворов

3.4. Получение гомогенатов из растительных материалов

3.4.1 Получение гомогената из зерновой культуры

3.4.2 Получение гомогената из грибов и бананов

3.5. Подготовка углеродных нанотрубок для модификации электродов

3.6. Изготовление амперометрических биосенсоров на

основеиммобилизованных ферментов

3.7. Обработка экспериментальных данных

3.7.1. Расчет кинетических параметров ферментативных реакций

3.7.2. Определение констант связывания иммунного комплекса

антиген-антитело

3.7.3. Определение процента перекрестного реагирования

Глава 4. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ВОЗМОЖНОСТИ АМПЕРОМЕТРИЧЕСКИХ БИОСЕНСОРОВ В ОПРЕДЕЛЕНИИ

НЕКОТОРЫХ МИКОТОКСИНОВ

4.1. Аналитические возможности холинэстеразного биосенсора в

определении микотоксинов

4.1.1. Природа формирования аналитического сигнала холинэстеразного

биосенсора

4.1.2. Изучение влияния афлатоксина В1, зеараленона и охратоксина А

на каталитическую активность иммобилизованной холинэстеразы

4.1.3. Холинэстеразные биосенсоры на основе модифицированных

углеродными нанотрубками электродов

4.2. Оценка возможности использования цистеиндесульфгидразы как ферментного препарата в биосенсорах для определении

микотоксинов

4.2.1. Природа формирования аналитического сигнала

4.2.2. Влияние афлатоксина В1, охратоксина А и зеараленона на каталитическую активность иммобилизованной

цистеиндесульфгидразы

4.2.2. Влияние микотоксинов на модифицированные МУНТ

цистеиндесульфгидразные сенсоры

4.3. Оценка аналитических возможностей биосенсоров на основе иммобилизованной щелочной фосфатазы в определении

микотоксинов

4.3.1. Природа формирования аналитического сигнала

4.3.2. Влияние патулина, афлатоксина В1, зеараленона и охратоксина А

на иммобилизованную щелочную фосфатазу

4.3.3 Влияние МУНТ на аналитические характеристики биосенсора

на основе щелочной фосфатазы

4.4. Биосенсоры на основе тирозиназы

4.4.1. Природа формирования аналитического сигнала

тирозиназного биосенсора

4.4.2. Изучение влияния зеараленона на каталитическую активность

иммобилизованной тирозиназы

4.4.2.1. Действие зеараленона на иммобилизованную тирозиназу

4.4.2.2 Модификация электродов композитом - МУНТ - хитозан:

влияние на аналитические возможности

4.4.2.3. Модификация электродов композитом - ОУНТ - хитозан: влияние

на аналитические возможности

4.5 Кинетические параметры реакций ферментативного превращения

субстратов в присутствии микотоксинов

4.6. Разработка иммуноферментного сенсора для определения

афлатоксина В1

4.6.1. Аналитические возможности иммуноферментного сенсора

4.6.2 Аналитические возможности иммуноферментного сенсора, модифицированного углеродными нанотрубками для определения

афлатоксина В1

Глава 5 ОПРЕДЕЛЕНИЕ МИКОТОКСИНОВ В ПИЩЕВЫХ

ПРОДУКТАХ

5.1. Определение АФВ1 и зеараленона в зерновых культурах

5.2. Определение патулина в яблоках

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ЛИТЕРАТУРА

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Амперометрические биосенсоры для определения некоторых микотоксинов»

ВВЕДЕНИЕ

Микотоксины (от греч. шукеБ-гриб и 1хгакоп-яд) являются продуктами жизнедеятельности микроскопических (плесневых) грибов. В настоящее время они составляют одну из наиболее опасных групп токсичных соединений, представляющих угрозу здоровью населения. Многие из них обладают мутагенными и канцерогенными свойствами. Поскольку эти соединения могут находиться во многих продуктах питания, вполне обоснован интерес исследователей к разработке различных современных способов их определения. Важность их контроля обусловлена высоким уровнем загрязнения, обнаружением все новых микотоксинов, расширением групп продуктов питания и кормов, загрязненных микотоксинами. Для основных микотоксинов в ряде стран установлены ПДК.

Наиболее часто для определения микотоксинов используют различные варианты хроматографических методов. В то же время хроматографические методы имеют определенные недостатки, поэтому методы хроматографии часто сочетают с различными вариантами экстракции. Все это указывает на актуальность и необходимость дальнейших разработок новых более простых способов, новых подходов для определения токсикантов.

В последнее время достаточно активно разрабатываются различные биохимические, в том числе, иммунохимические методы определения микотоксинов. Такие методы анализа являются удобным инструментом для первичного скрининга больших партий продукции, благодаря своей простоте, экспрессности и относительно невысокой стоимости. Среди них следует отметить работы по использованию различных биосенсоров для решения данной аналитической задачи. Однако примеры работ по применению биосенсоров и в частности, ферментных электродов для определения микотоксинов пока немногочисленны.

В настоящее время идет активный поиск путей повышения чувствительности определений микотоксинов, упрощения процедуры и

сокращения времени анализа, снижения матричного эффекта анализируемых объектов.

Разработка новых аналитических устройств на основе биосенсоров, позволяющих с высокой чувствительностью и избирательностью определять микотоксины, обладающие определенной универсальностью действия, представляет интерес для пищевой промышленности, сельскохозяйственной деятельности, охраны здоровья населения. Особенно это актуально для Республики Вьетнам, жаркий и влажный климат в которой способствует развитию плесневых грибов. В настоящее время значительное внимание уделяется разработке сенсорных устройств, которые позволяют проводить экспрессное определение загрязнителей в полевых условиях и не требуют высококвалифицированного персонала.

Современный подход к совершенствованию и разработке новых амперометрических биосенсоров связан с различными способами модификации поверхности первичных преобразователей с целью придания им заданных свойств. Наноматериалы являются наиболее перспективными для огромного множества приложений в композитных материалах [1]. В частности, углеродные нанотрубки (УНТ), благодаря своим уникальным электронным и оптоэлектронным свойствам весьма перспективны для использования в качестве основы для создания миниатюрных биосенсорных устройств. Такой подход оказался весьма перспективным для совершенствования поверхности используемых первичных преобразователей, что открывает новые возможности в плане разработки биосенсоров, предназначенных для определения различных микотоксинов [2].

Цель работы - разработка новых амперометрических биосенсоров на основе иммобилизованных ферментов, относящихся к классам гидролаз, лиаз, оксидоредуктаз и модифицированных многослойными и однослойными углеродными нанотрубками планарных электродах для определения некоторых микотоксинов, оценка их аналитических возможностей, сопоставление результатов анализа, полученных на модифицированных и

немодифицированных углеродными нанотрубками сенсорах, а также использование полученных результатов для контроля содержания микотоксинов в пищевых продуктах.

Научная новизна работы.

Предложены новые варианты амперометрических биосенсоров на основе модифицированных многослойными и однослойными углеродными нанотрубками планарных платиновых электродов и иммобилизованных ферментов (холинэстераза, щелочная фосфатаза, цистеиндесульфгидраза, тирозиназа) для определения микотоксинов. Найдены условия модификации поверхности планарных электродов УНТ, обеспечивающие получение максимального аналитического сигнала в присутствии определяемых микотоксинов. Предложены наилучшие сочетания ферментативной и электрохимической реакций для наиболее чувствительного определения отдельных микотоксинов.

Впервые установлено, что афлатоксин В1, охратоксин А, зеараленон и патулин проявляют свойства ингибиторов щелочной фосфатазы, цистеиндесульфгидразы и тирозиназы, а охратоксин А, зеараленон и патулин являются ингибиторами холинэстераз. Выявлено активирующее действие охратоксина А на цистеиндесульфгидразу в определенном интервале концентраций. В каждом конкретном случае на основании кинетических параметров (кажущейся константы Михаэлиса, максимальной скорости реакции) установлен тип ингибирования. Разработан иммуноферментный сенсор для определения афлатоксина В1, основанный на совместной иммобилизации антител против афлатоксина В1 и гомогената из грибов, как источника тирозиназы и использовании иммобилизованной тирозиназы в качестве метки. Тирозиназа использовалась в таком качестве впервые. Оценены значения констант связывания образующихся иммунных комплексов антиген (АФВ1) - антитело.

Показано, что использование гомогенатов растительных тканей, как источника ферментных препаратов в моделях биосенсоров, позволяет создавать

биосенсоры для определения микотоксинов.

Практическая значимость.

Предложены простые и удобные способы модификации поверхности электродов УНТ в сочетании с иммобилизацией ферментных препаратов, позволяющие получить модели биосенсоров с улучшенными аналитическими характеристиками. Модификация поверхности электродов обеспечила практически во всех случаях более высокую чувствительность определений микотоксинов.

Разработаны способы определения микотоксинов с помощью предложенных биосенсоров на основе иммобилизованных холинэстераза, щелочная фосфатаза, цистеиндесульфгидраза, тирозиназы. Предложены методики определения микотоксинов в пищевых продуктах (соках, орехах), крупах, зерновых культурах и фуражном зерне, кормах для животных с погрешностью определения 8г не больше 0.076 на уровне и ниже ПДК. Разработанный иммуноферментный сенсор позволяет селективно определять АФВ1 в присутствии других микотоксинов. Методики определения микотоксинов характеризуются высокой точностью, чувствительностью, экспрессностю, воспроизводимостью и доступностью, позволяют работать с малыми объемами иследуемых растворов и реагентов и могут быть использованы для скрининга микотоксинов в пищевых продуктах.

Использование в качестве ферментных препаратов гомогенатов из растительных тканей делает процесс получения биосенсоров недорогим и доступным широкому кругу потребителей.

Практические рекомендации по использованию разработанных биосенсоров для контроля качества пищевых продуктов.

Методология и методы исследования.

Для выполнения поставленных в диссертационной работе задач были использованы различные варианты вольтамперометрии: постояннотоковая с линейной и треугольной формой наложения потенциала, вольтамперометрия с быстрым изменением потенциала, амперометрия. С их помощью выявлены

особенности протекания электрохимических реакций на разработанных биосенсорах. Для проведения проверочных опытов и получения дополнительной информации использовали данные спектрофотометрических измерений, жидкостной и твердофазной экстракции.

Для изучения морфологии поверхности модифицированных электродов, использованы методы электронной сканирующей микроскопии (ЭСМ), что позволило получить представления о формировании поверхности сенсоров на основе иммобилизованных УНТ и ферментных препаратов.

Использованы биокомпозитные материалы, на основе иммобилизованных ферментных препаратов, УНТ и антител в разных комбинациях, которые ранее для разработки биосенсоров для определения микотоксинов не применялись. Использованы разработанные нами оригинальные приемы и подходы для разработки иммуноферментных сенсоров, основанные на совместной иммобилизации компонентов биоспецифических взаимодействий.

В качестве основы биосенсоров использовали не только одноэлектродные печатные платиновые электроды, но и мультиэлектродные (многоэлектродные) системы (4 электрода), соединенные на единой подложке. Это позволило сделать определение более экспрессным, перейти к изучению микрообъемов анализируемых растворов (не более 200 мкл). На защиту выносятся:

• Лабораторные модели разработанных амперометрических биосенсоров на основе модифицированных УНТ электродов и иммобилизованных ферментов холинэстераза, щелочная фосфатаза, цистеиндесульфгидраза и тирозиназы и способы получения модифицированных УНТ электродов как основы соответствующих биосенсоров.

• Результаты изучения действия микотоксинов (АФВ1, OTA, ЗЕА и патулина) на каталитическую активность холинэстеразы, щелочной фосфатазы, L-цистеиндесульфгидразы и тирозиназы в составе биосенсоров

© Результаты изучения кинетики ферментативных реакций в присутствии микотоксинов.

• Аналитические возможности разработанных биосенсоров для определения микотоксинов: совокупность факторов влияющих на величину аналитического сигнала, аналитические и метрологические характеристики.

• Новые способы (методики) определения микотоксинов с помощью разработанных биосенсоров, включая иммуноферментный сенсор с тирозиназой в качестве метки на фоне сложных органических матриц.

Степень достоверности и апробация работы:

Представленные в работе выводы и заключения получены в результате анализа большого объема экспериментального материала с применением современных физико-химических методов исследования и определения на сертифицированном оборудовании. Регистрируемые параметры являются воспроизводимыми, а результаты определения, полученные с применением разных биосенсоров согласуются между собой и с литературными сведениями. Наличие модифицирующих покрытий и морфология рабочей поверхности биосенсоров подтверждены данными ЭСМ.

Результаты исследований были доложены и обсуждены на международных и российских конференциях и изложены в соответствующих материалах: III Всероссийского симпозиума «Разделение и концентрирование в аналитической химии и радиохимии» с международным участием (Краснодар, 2011), XIX Менделеевском съезде по общей и прикладной химии (Волгоград, 2011), II Международной научно-практической конференции "Современные проблемы безопасности жизнедеятеьности: теория и практика" (Казань, 2012), XI Научной конференции молодых ученых, аспирантов и студентов научно-образовательного центра Казанского (Приволжского) федерального университета "Материалы и технологии XXI века" (Казань, 2012), VIII Всероссийской конференции по электрохимическим методам анализа "ЭМА -2012" (Уфа-Абзаково, 2012), 11 Международной конференции по холинэстеразам (Казань, Россия, 2012), Всероссийской молодежной конференции «Химия под знаком Сигма: исследования, инновации, технологии» (Казань, 2012), Всероссийской конференции молодых ученых,

аспирантов и студентов с международным участием по химии и наноматериалам «Менделеев - 2013» (Санкт-Петербург, 2013), 2 Съезд аналитиков России (Москва, 2013).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 4 статьи (в том числе 3 статьи в журналах, входящих в перечень ВАК) и 8 тезисов докладов.

Личный вклад автора. Все экспериментальные результаты, представленные в диссертации получены лично автором. Автор также принимал участие в обработке и обсуждении полученых результатов, оценке кинетических параметров, интерпретации и систематизации результатов эксперимента.

Работа выполнялась в соответствии с планами научно-исследовательских работ Казанского (Приволжского) федерального университета по теме «Развитие теоретических и прикладных основ методов определения малых количеств биологически активных веществ» (№ 0120107141), при частичной финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (грант 13-03-01101-а) и регионального гранта № 12-03-97031-р-Поволжье_ а).

Структура и объем работы: Диссертация изложена на 148 стр. машинописного текста, содержит 29 таблиц и 15 рисунков. Работа состоит из введения, 5 глав, заключения, выводов и списка литературы, включающего 166 ссылок.

Во введении отмечены актуальность и необходимость проводимых исследований, задачи и цель работы, сформулированы научная новизна, практическая значимость и положения, выносимые на защиту.

В первых двух главах представлен обзор литературы, посвященный, свойствам микотоксинов и методам их определения (глава 1), а также свойствам и применению углеродных нанотрубок для модификации электродов (глава 2).

В третьей главе обоснована поставка задачи, описаны используемые приборы и реактивы, основные условия проведения эксперимента, приготовление растворов, способы расчетов кинетических и иммунологических характеристик.

Четвертая глава посвящена вопросам разработки новых амперометрических биосенсоров, включая биосенсоры на основе модифицированных УНТ электродов. Уделено внимание сопоставлению аналитических характеристик разработанных биосенсоров. Представлены результаты разработки иммуноферментного сенсора для определения АФВ1 с использованием тирозиназы в качестве метки.

В пятой главе представлены результаты практической реализации полученных результатов: предложены методики определения микотоксинов в пищевых продуктах, кормах для животных. Апробация предложенных методик проведена на конкретных объектах разного происхождения (Россия, Вьетнам).

В заключении обобщены полученные результаты и сделаны рекомендации по их практическому использованию. Обсуждаются некоторые проблемные вопросы разработки и применения амперометрических биосенсоров при определении токсикантов в пищевых продуктах.

Автор выражает глубокую благодарность научному руководителю доктору химических наук, профессору Медянцевой Э.П., научному консультанту академику РАЕН и МАНВШ, доктору химических наук, профессору Будникову Г.К.

ГЛАВА 1. СВОЙСТВА МИКОТОКСИНОВ И МЕТОДЫ ИХ ОПРЕДЕЛЕНИЯ

1.1. Микотоксины и их свойства

Термин микотоксины охватывает широкую группу соединений весьма отличающихся по своему химическому строению и, следовательно, по оказываемому токсическому действию. К числу наиболее распространенных микроорганизмов относятся плесневые грибы, объединяющие несколько тысяч видов. Известно более 250 видов микроскопических грибов способных продуцировать несколько сотен микотоксинов. Микотоксины (от греческого mykes - гриб и toxikon - яд) — это вторичные метаболиты микроскопических грибов, обладающие выраженными токсическими свойствами. Микотоксины продуцируются в основном грибами родов Aspergillus, Fusarium, Pénicillium. Однако при определенных условиях роста могут выделяться другими видами грибов [3]. Среди микотоксинов, представляющих опасность для здоровья человека, наиболее распространены зеараленон и зеараленол, афлатоксины, трихотеценовые микотоксины (трихотецены), патулин, охратоксины [4].

Микотоксины являются природными загрязнителями различных продуктов питания: зерна, злаковых, бобовых, семян подсолнечника, плодов, мясных изделий, молока, овощей, фруктов, кормов для животных и другой сельскохозяйственной продукции. Например, продуценты афлатоксинов поражают, главным образом, зерновые, масличные и бобовые культуры; зеараленона, охратоксинов, трихотеценов типов А и В - зерновые культуры; трихотеценов типа С - грубые корма, богатые клетчаткой; патулина - фрукты, овощи и продукты их переработки[5].

Микотоксины обладают канцерогенными, тератогенными, нефротоксическими, гепатотоксическими, мутагенными свойствами, оказывают иммунодепрессивный эффект, поражают почки, печень, нервную и кровеносную системы, желудочно-кишечный тракт, вызывают заболевания крови, септическую ангину, дерматиты, судороги, острые боли, состояние аналогичное тяжелому опьянению, нарушают гормональное равновесие и

функции воспроизводства. Они обладают токсическим эффектом даже в чрезвычайно малых дозах [6].

Термин микотоксины охватывает широкую группу соединений весьма отличающихся по своему химическому строению и, следовательно, по оказываемому токсическому действию. Рассмотрим наиболее распространенные микотоксины, которые выделяются своими токсическими и канцерогенными свойствами, а также наиболее широко распространены.

1.1.1. Афлатоксины

Афлатоксины - это вторичные метоболиты плесневых грибов Aspergillus (A.) flavus, A. parasiticus, A. nomius, A. tamari и ряда других видов Aspergillus, обладающие высокой токсичностью, канцерогенным, мутагенным, тератогенным и гепатотоксическим действием. Они нарушают синтез белка, ингибируя транскрипцию. Увеличение их концентрации, например, приводит к разрушению печени и подавлению роста птицы. Люди могут подвергаться воздействию афлатоксинов при периодическом потреблении загрязненных продуктов питания. Афлатоксины широко распространены в матрицах таких продуктов как специи, крупы, масло, фрукты, овощи, молоко, мясо и т.д. Природными субстратами грибов Aspergillus являются арахис, кукуруза, другие зерновые и бобовые, семена хлопчатника, различные орехи, некоторые фрукты, овощи [7].

Самым опасным и распространенным в этой группе микотоксинов является афлатоксин В1 (АФВ1), который опасен своими канцерогенными свойствами. Он может накапливаться в печени и способствовать возникновению опухолей, провоцировать мутации в клетках. Отмечено иммунно-депрессивное действие АФВ1, т.е. снижение общих защитных сил организма. Обширные исследования свидетельствуют о том, что АФВ1 способен стимулировать развитие рака печени. Большинство эпидемиологических данных выявляет корреляцию между подверженностью действиям АФВ1 и увеличением сферы действия рака печени [8].

Афлатоксины Ml и М2 являются гидролизированными метаболитами афлатоксинов В1 и В2 и могут обнаруживаться в молоке и молочных продуктах, полученных от домашнего скота, в рацион которого попала пища, загрязненная афлатоксинами В1 и В2. Афлатоксины очень быстро проникают вглубь продукта. Они не имеют ни вкуса, ни запаха, но обладают сильной токсичностью. Доза всего в 2 мкг на килограмм массы тела может вызвать системное заболевание - афлатоксикоз [9].

1.1.2. Охратоксин А

Охратоксин А (ОТА) относится к числу наиболее опасных и распространенных токсикантов. Жизнедеятельность плесневых грибов рода Aspergillus и Pénicillium, чаще всего приводит к загрязнению ОТА зерна и продуктов на его основе, а также кофейных зерен и какао, сушеных фруктов, вина и виноградного сока, пива, специй [10]. При этом ОТА с продуктами растительного и животного происхождения может попадать в организм человека. Поскольку ОТА вызывает целый ряд негативных последствий для здоровья человека [11], необходим контроль за его содержанием в продуктах питания и кормах для сельскохозяйственных животных.

ОТА является микотоксином продуцируемым конкретно Aspergillus ochraceus и Pénicillium verrucosum [12]. Он содержит остаток изокумарина, соединенный пептидной связью с L-аланином. Обладает выраженным нефротоксическим и тератогенным действием. Из-за своей токсичности, европейское сообщество издало директивы и в некоторых странах есть собственные нормы в отношении содержания ОТА в продуктах питания, кормах и напитках.

1.1.3. Зеараленон

Среди микотоксинов своими канцерогенными, эстрогенными и тератогенными свойствами, а также широкой распространенностью выделяется зеараленон. Зеараленон синтезируется грибами из рода Fusarium (F. graminearum, F. tricinctum); относится к лактонам резорциловой кислоты,

характеризуется анаболическим и эстрогенным действием.

К группе зеараленона и его производных относятся 15 микотоксинов. Для зеараленона ЛД50 = 10000 мг/кг (крысы, перорально). В качестве естественных загрязнителей встречаются только зеараленон и зеараленол [5]. Зеараленон является микотоксином, который в основном заражает зерновые культуры, он может накапливается в зерновых до сбора урожая [13]. Этот микотоксин обнаруживают в продуктах питания и кормах для животных в широком диапазоне концентраций, в зависимости от состояния окружающей среды и условий хранения. С потреблением продуктов питания и кормов загрязненных зеараленоном были связаны острые и хронические отравления и раковые заболевания [14].

1.1.4. Патулин

Патулин - микотоксин, вырабатываемый плесневыми грибками из родов Pénicillium и Aspergillus обладающий выраженными мутагенными свойствами. В высоких концентрациях патулин обнаруживается в продуктах переработки фруктов и овощей.

Обнаружение у патулина высокой токсичности, мутагенных и канцерогенных свойств, а также выявление его в качестве загрязнителя пищевых продуктов заставляет отнести патулин к особо опасным микотоксинам. По химической структуре патулин представляет собой 4-гидроксифуропиран [15].

Установлено, что патулин обладает свойствами антибиотика широкого спектра действия и его действие проверено на эффективность при простудных заболеваниях. Однако патулин никогда в этом плане не использовался на практике в медицинских целях по причине его раздражающего действия на желудок и способности вызывать тошноту и рвоту [15].

Некоторые представители микотоксинов отмечены в таблице 1.

Таблица 1.

Основные представители микотоксинов и их краткая характеристика [16]

Химическое название микотоксина Грибы, продуцирующие микотоксины Оказываемое действие, заболевание Продукты, зараженные микотоксином

1 2 3 4

Афлатоксины В1 и Ml (6aR-cis) (2,3,6а, 9а) тетрагидро-4-митоксициклопента [с] фуро[2,3-11][1],бензопиран -1,11-диона Aspergillus flavus, Aspergillus parasiticus, Aspergillus nomius Канцерогенный, нефротоксический гепатотоксический эффект, тератогенное и мутагенное действие Зерновые культуры, орехи, продукты на их основе, мука, хлопок (АФВ1); молоко и молочные продукты (АФМ1)

Охратоксин А 7-карбокси-5- хлоро-8 гидрокси- 3,4-дигидро-311- метилизокумарин- 7-L-ß- фенилаланина Aspergillus ochraceus, Pénicillium viridicatum Острый гепатит, нефротоксичное, тератогенное и иммунодепреесивное действие Зерновые культуры и продукты на их основе, специи кофейные зерна и какао, вино, пиво, сушеные фрукты, виноградный сок,

Зеараленон 6-10-гидрокси-6-оксо-1 -ундецил-Ь-лактон резорци-ловой кислоты Fusarium (F.) graminearum, F. culmorum Эстрогенные и тератогенные свойства Зерновые культуры, корма для животных

Патулин 4-гидрокси-4Н-фуро[3,2-с]пиран-2(6Н)-один Pénicillium expansum, Aspergillus byssochlamys Нейротоксин, вызывает нарушения генетического аппарата,вероятный канцероген, мутаген Яблоки и другие фрукты продукты их переработки, фасоль, пшеница

Трихотецены Т2 (3-гидрокси-4,15- диацетокси-8- изобутирилокси- 12,13-эпокси- трихтец-9-ен) F. tricinctum, F. sporotrichiella, F. solani Нейротоксин, тератогенные, цитотоксические, иммунодепрессивны дерматотоксические свойства Кукуруза, арахис, рис

1 2 3 4

Фумонизины диэфир пропан-1,2,3-рикарбоновой кислоты и 2-амино-12, 16-диметил-З, 5, 10, 14, 15-пентагид-роксиэйкозана F. moniliforme, F. anthophilum, F. diamini, F. globosum, F. napiforme, F. nygamai, F.subglutinans Нефротоксин, респираторные расстройства, нейротоксичность, вероятный канцероген Зерновые, ячмень, арахис, сорго, рис, овес, кукуруза, продукты и корма на ее основе

1.2. Методы определения микотоксинов 1.2.1. Хроматографические методы определения микотоксинов

В настоящее время для определения микотоксинов наиболее часто применяют различные хроматографические методы. Наиболее распространенными из них являются методы и методики, разработанные на основе этих методов, с использованием таких вариантов хроматографии как тонкослойная (ТСХ), высокоэффективная жидкостная (ВЭЖХ), газовая (ГХ), жидкостная (ЖХ), и их сочетания с масс-спектрометрической (MC) и флуоресцентной детекцией [17-20].

Авторы [21] описывают способ, который был разработан для одновременного определения содержания ЗЕА, АФ (Bl, В2, Gl и G2) и OTA в зерновых культурах методом ВЭЖХ с флуоресцентным детектированием (ФД) после предварительного отделения виммуноаффинной колонке и фотохимической дериватизации. Экстрагирование образца зерна проводилось смесью метанола с водой (80:20 по объему). Микотоксины разделены обращенно-фазовой ВЭЖХ на колонке Nova-Pak с линейным градиентом смеси метанол-ацетонитрил-1%-ный раствор фосфорной кислоты. Использовали градуировочные зависимости в диапазоне концентраций 4.0 - 100.0 мкг/л для ЗЕА, 0.24 - 6.0 мкг/л для все изученных афлатоксинов (Bl, В2, Gl и G2) и 0.5 -40.0 мкг/л для OTA. Содержание микотоксинов, извлеченных из различных зерновых культур (пшеница, рис, рожь), в соответствии с полученными ВЭЖХ данными, находилось в диапазоне от 4.0 -16.0 мкг/кг для ЗЕА, 0.24 - 1.0 мкг/кг для афлатоксинов (Bl, В2, Gl и G2) и 0.5 - 3.0 мкг/кг для OTA. Относительное

стандартное отклонение было на уровне от 2.79% до 9.38%. Пределы обнаружения (ПрО) составили 4.0 мкг/кг для ЗЕА, 0.24 мкг/кг для афлатоксинов (В 1, В2, Gl и G2) и 0.5 мкг/кг для OTA.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Май Тхи Тхань Хуен, 2013 год

ЛИТЕРАТУРА

1. Хабриева, Р.У. Токсикологическая химия. Аналитическая токсикология: Учебник / Под ред. Р.У. Хабриева, Н.И. Калетиной. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010.-С. 706-717.

2. Евтюгин, Г.А. Биосенсоры в России: 20 лет исследований // ЖАХ. — 2011.— Т.66, №11. -С. 1144-1149.

3. Feng, W. Enzymes immobilized on carbon nanotubes / W. Feng, P. Ji // Biotechnology Advances. - 2011. -Vol.29. - P. 889-895.

4. Тутельян, В.А. Микотоксины / В.А. Тутельян, Jl. В. Кравченко. - М.: Медицина. - 1985. - 321 С.

5. Betina, V. Mycotoxins. Production, isolation, separation and purification / V. Betina // Elsevier Scientific publishers - Amsterdam: - 1984. - P.525.

6. Сайт «Натуральная медицина» http://www.svetlanas.info/view post.php?id=7

7. Alberts, J.F. Biological degradation of aflatoxin B1 by Rhodococcus erythropolis cultures / J.F. Alberts, Y. Engelbrecht, P.S. Steyn, W.H. Holzapfel, W.H. Van Zyl // International J. of Food Microbiology. - 2006. -Vol.109,1.: 12. - P.121-126.

8. Kamika, I. Natural occurrence of Aflatoxin B1 in peanut collected from Kinshasa, Democratic Republic of Congo /1. Kamika, Losona L. Takoya // Food Control. - 2011. - Vol. 22,1.11. - P. 1760-1764.

9. Scald.http://www.scald.sp.ru/Scald/p books_9.html

10. Amezqueta, S. Ochratoxin A decontamination: A review / S. Amezqueta, E. Gonzalez-Penas, M. Murillo-Arbizu, A. Lopez de Cerain // Food Control. -2009.-Vol.20.-P. 326-333.

11. Vargaa, J. Ochratoxin A in grapes and grape - derived products / J. Vargaa, Z. Kozakiewicz // Trends in Food Science & Technology. - 2006. - Vol.17. -P.72-81.

12. Reinsch, M. Determination of ochratoxin A in beer by LC-MS/MS ion trap detection / M. Reinsch, A. Topfer, A. Lehmann, I. Nehls, U. Panne // Food Chemistry. - 2007. - Vol.100. - P.312-317.

13. Panini, N. V. Immunosensor in a continuous-flow/stopped-flow systems / N. V. Panini, F. A. Bertolino, E. Salinas, G. A. Messina, J. Raba // Biochemical Engineering J. - 2010. - Vol.51. - P.7-13.

14. Klaric, M.S. Co-occurrence of aflatoxins, ochratoxin A, fumonisins, and zearalenone in cereals and feed, determined by competitive direct enzyme-linked immunosorbent assay and thin-layer chromatography / M.S. Klaric, Z.Cvetnic, S. Pepeljnjak, I. Kosalec // Hig Rada Toksikol. - 2009. - Vol.60, №

4. - P.427-434.

15. http://www.knowmycotoxins.com/ru/ndairyl2.htm

16. 3HUHKji0nejH5i.MHK0T0KCHHbihttp://dic.academic.ru/dic.nsf/ruwiki/121772.

17. Shephard, G.S. Developments in mycotoxin analysis: an update for 2007-2008 / G.S. Shephard, F. Berthiller, J. Dorner, R. Krska, G.A. Lombaert, B. Malone, C. Maragos, M. Sabino, M. Solfrizzo, M.W. Trucksess, H.P. Van Egmond, T.B. Whitaker // World Mycotoxin J. - 2009. - Vol.2, № 1. - P. 3-21.

18. Shephard, G.S. Developments in mycotoxin analysis: an update for 2008-2009 / G.S. Shephard, F. Berthiller, J. Dorner, R. Krska, G.A. Lombaert, B. Malone, C. Maragos, M. Sabino, M. Solfrizzo, M.W. Trucksess, H.P. van Egmond, T.B. Whitaker // World Mycotoxin J. - 2010. - Vol.3, № 1. - P. 3-23.

19. Shephard, G.S. Developments in mycotoxin analysis: an update for 2010 - 2011 / G.S. Shephard, F. Berthiller, P.A. Burdaspal, C. Crews, M.A. Jonker, R. Krska,

5. MacDonald, R.J. Malone, C. Maragos, M. Sabino, M. Solfrizzo, H.P. Van Egmond, T.B. Whitaker // World Mycotoxin J. - 2012. - Vol.5, № 1. - P. 3-30.

20. Turner, N.W. Analytical methods for determination of mycotoxins: A review / N.W. Turner, S. Subrahmanyam, S.A. Piletsky // Analytica Chimica Acta. -2009. -Vol. 632, № 2.- P. 168-180.

21. Li, J. Simultaneous determination of aflatoxins, zearalenone and ochratoxin A in cereal grains by immunoaffmity column and high performance liquid chromatography coupled with post-column photochemical derivatization / J. Li, Y. Yu, M. Tian, H. Wang, F. Wei, L. Li, X. Wang// Se Pu. - 2006. - Vol.24, №

6. - P.581-584.

22.Beltran, E. UHPLC-MS/MS highly sensitive determination of aflatoxins, the aflatoxin metabolite Ml and ochratoxin A in baby food and milk / E. Beltran, M. Ibanez, J.V. Sancho, M.A. Cortes, V. Yusa, F. Hernandez // Food Chemistry. -2011.-№ 126.-P. 737-744.

23. Wang, H. Determination of aflatoxin Ml in milk by triple quadrupole liquid chromatography-tandem mass spectrometry / H. Wang, X.J. Zhou, Y.Q. Liu, H.M. Yang, Q.L. Guo // Food Additives and Contaminants Part A. - 2010. -Vol. 27, № 9.-P.1261-1265.

24. Wang, H. Simultaneous determination of chloramphenicol and aflatoxin Ml residues in milk by triple quadrupole liquid chromatography-tandem mass spectrometry / H. Wang, X.J. Zhou, Y.Q. Liu, H.M. Yang, Q.L. Guo // J. of Agricultural and Food Chemistry. - 2011.- Vol. 59, № 8 - P. 3532-3538.

25. Muscarella, M. Validation according to European Commission Decision 2002/657/EC of a confirmatory method for aflatoxin Ml in milk based on immunoaffinity columns and high performance liquid chromatography with fluorescence detection / M. Muscarella, S. Lo Magro, C. Palermo, D. Centonz // Analytica Chimica Acta. - 2007. -№ 594.- P. 257-264.

26. Rahmani, A. Validation of the procedure for the simultaneous determination of aflatoxinsochratoxin A and zearalenone in cereals using HPLC-FLD / A. Rahmani, S. Jinap, F. Soleimany // Food Additives and Contaminants. - 2010. -Vol. 27, №12. - P. 1683-1693.

27. Tanaka, H. Development of a liquid chromatography/time-of-flight mass spectrometric method for the simultaneous determination of trichothecenes, zearalenone and aflatoxins in foodstuffs / H. Tanaka, M. Takino, Y. Sugita-Konishi, T. Tanaka // Rapid Commun Mass Spectrom. - 2006. - Vol. 20, № 9. -P. 1422-1428.

28. De Andrés, F. Determination of zearalenone and its metabolites in urine samples by liquid chromatography with electrochemical detection using a carbon nanotube-modified electrode / F. de Andrés, M. Zougagh, G. Castañeda, A. Ríos // J. of Chromatography A. - 2008. - Vol.1212. -P.54-60.

29. Wang, Y. Simultaneous detection of airborne Aflatoxin, Ochratoxin and Zearalenone in apoultry house by immunoaffinity clean-up and highperformance liquid chromatography / Y. Wang, T. Chai, G. Lu, C. Quan, H. Duan, M. Yao, B. Zucker, G. Schlenker // Environmental Research. - 2008. -Vol. 107.-P. 139-144.

30. Alcaide-Molina, M. High through-put aflatoxin determination in plant material by automated solid-phase extraction on-line coupled to laser-induced fluorescence screening and determination by liquid chromatography-triple quadrupole mass spectrometry / M. Alcaide-Molina, J. Ruiz-Jimnez, J.M. Mata-Granados, M.D. Luque de Castro // J. ChromatographyA. - 2009. - Vol. 1216— P. 1115-1125.

31. Tanaka, H. Development of a liquid chromatography/time-of-flight mass spectrometric method for the simultaneous determination of trichothecenes, zearalenone and aflatoxins in foodstuffs / H. Tanaka, M. Takino, Y. Sugita-Konishi, T. Tanaka // Rapid Commun Mass Spectrom. - 2006. -Vol. 20, № 9. -P. 1422-1428.

32. Bascarán,V. Analysis of ochratoxinA in milk after direct immuneaffmity column clean-up by high-performance liquid chromatography with fluorescence detection / V. Bascarán, A. Hernándezde Rojas, P. Chouclno, T. Delgado // J. of ChromatographyA. - 2007. -Vol. 1167. -P. 95-101.

33. Chiraz, Z. Occurrence of patulin in apple-based-foods largely consumed in Tunisia / Z. Chiraz, A. Salwa, H. Wafa, B. Hassan // Food Control. - 2013. -Vol. 31.-P. 263-267.

34. Kataoka , H. Determination of patulin in fruit juice and dried fruit samples by in-tube solid-phase microextraction coupled with liquid chromatography-mass spectrometry / H. Kataoka, M. Itano, A. Ishizaki, K. Saito // J. of Chromatography A. -2009. -Vol. 1216. -P. 3746-3750.

35. Moukas, A. Determination of patulin in fruit juices using HPLC-D AD and GC-MSD techniques / A. Moukas, V. Panagiotopoulou, P. Markaki // Food Chemistry. - 2008. -Vol.109. - P. 860-867.

36. Li, J. Solid- phase extraction and HPLC determination of patulin in apple juice concentrate / J. Li, R. Wu, Q. Hu, J. Wang // Food. Control. -2007. -Vol.18. - P. 530-534.

37. Barreira, M. J. Occurrence of patulin in apple-based-foods in Portugal / M. J. Barreira, P.C. Alvito, C.M. Almeida // Food Chemistry. - 2010. -Vol.121. -P. 653-658.

38. http://www.moloko.cc/view_news.php?id=06-07-2006

39. Гогин, А. Микотоксины: Эффективный контроль эффективное производство / А. Гогин // Журнал «Комбикорма». -2005. - №. 2. -Р. 68-70.

40. Smith, D;S. Immunochemical methods for mycotoxin detection / D.S. Smith, S.A. Eremin // Anal. Bioanal. Chem. (in press, DOI 10.1007/s00)2I6-00)8-1897-z).

41. Bondarenko, A.P. Determination of Zearalenone and Ochratoxin A Mycotoxins in Grain by Fluorescence Polarization Immunoassay / A.P. Bondarenko, S.A. Eremin // Analytical Chemistry. - 2012. -Vol. 67, № 9. - P. 790-794.

42. Бондаренко, А.П. Определение афлатоксина B1 и микофенольной кислоты в сыре методом поляризационного флуоресцентного иммуноанализа / А.П. Бондаренко, С.А. Еремин // Аналитическая химия - новые методы и возможности. Съезд аналитиков России и Школа молодых ученых, - 26-30 апреля 2010 г. Москва (пансионат «Клязьма»). - 2010. -С. 47.

43. Урусов, А.Е. Иммунохимичекие методы анализа микотоксинов / А.Е. Урусов, А.В. Жердев, Б.Б. Дзантиев. // Ж. прикладной биохимии и микробиологии. -2010. - Т.46, №3. - С.276-290.

44. Li, S. Amperometric biosensor for a flatoxin B1 based on aflatoxin-oxidase immobilized on multiwalled carbon nanotubes / S. Li, J. Chen, H. Cao, D. Yao, D. Liu // Food Control. - 2011. -Vol. 22. - P. 43-49.

45. Larou, E. High throughput cellular biosensor for the ultra-sensitive, ultra-rapid detection of aflatoxin Ml / E. Larou, I. Yiakoumettis, G. Kaltsas, A. Petropoulos, P. Skandamis, S. Kintzios // Food Control. - 2013. - Vol. 29. - P. 208-212.

46. Hansmann, T. Kinetic insight into the mechanism of cholinesterasterase inhibition by aflatoxin B1 to develop biosensors / T. Hansmann, B. Sanson, J. Stojan, M. Weik, J. Marty //Biosensors and Bioelectronics. - 2009. - Vol. 24, №. 7.-P. 2119-2124.

47. Puiu, M. Kinetic approach of aflatoxin B1-acetylcholinesterase interaction: A tool for eveloping surface plasmon resonance biosensors / M. Puiu, O. Istrate, L. Rotariu, C. Bala // Analytical Biochemistry. - 2012. - Vol. 421.- P. 587-594.

48. Alonso-Lomillo, M.A. Horseradish peroxidase-screen printed biosensors for determination of Ochratoxin A / M.A. Alonso-Lomillo, O. Donmnguez-Renedo, L. Torno-de Romon, M.J. Arcos-MartHnez // Analytica Chimica Acta. -2011. -Vol. 688.-P. 49-53.

49. Válimaa, A.L. A novel biosensor for the detection of zearalenone family mycotoxins in milk / A.L. Válimaa, T. Kivistó, I. Piia, T. Matti // J. Microbiolog. Methods. - 2010 - Vol. 80. - P. 44-48.

50. Micheli, L. An electrochemical immunosensor for aflatoxin Ml determination in milk using screen-printed electrodes / L. Micheli, R. Grecco, M. Badea, D. Moscone, G. Palleschi // Biosensors and Bioelectronics. - 2005. -Vol.21, № 4. -P. 588-596.

51. Piermarini, S. Electrochemical immunosensor array using a 96-well screen-printed microplate for aflatoxin B1 detection / S. Piermarini, L. Micheli, N.H.S. Ammida, G. Palleschi, D. Moscone // Biosensors and Bioelectronics. -2007. -Vol. 22.-P. 1434-1440.

52. Kaushik, A. Chitosan-iron oxide nanobiocomposite based immunosensor for ochratoxin A / A. Kaushik, P.R. Solanki, A.A. Ansari, S. Ahmad, B.D. Malhotra // Electrochemistry Communications. -2008. -Vol. 10. -P.1364-1368.

53. Xue-Ping, Liu. Ultrasensitive electrochemical immunosensor for ochratoxin A using gold colloid-mediated hapten immobilization / Xue-Ping Liu, Y.Deng, X. Jin, L. Chen, J. Jiang, G. Shen, Ru-Qin Yu // Analytical Biochemistry. -2009. -Vol. 389. -P. 63-68.

54. Radi, А.Е. Anelectrochemical immunosensor for ochratoxin A based on immobilization of antibodies on diazonium-functionalized gold electrode / A.E. Radi, X. Munoz-Berbel, M. Cortina-PuigandJ.L. Marty// Electrochimica Acta. -2009. -Vol. 54. -P. 2180-2184.

55. Heurich, M. An electrochemical sensor based on carboxymethylated dextran modified gold surface for ochratoxin A analysis / M. Heurich, M. Kadir, I.E. Tothill // Sensors and Actuators B. -2011. -Vol. 156. -P. 162-168.

56. Hervas, M. Simplified calibration and analysis on screen-printed disposable platforms for electrochemical magnetic bead-based inmunosensing of zearalenone in baby food samples / M. Hervas, A.M. Lypez, A. Escarpa // Biosensors and Bioelectronics. -2010. - Vol. 25. - P. 1755-1760.

57. Bonel, L. An electrochemical competitive biosensor for ochratoxin A based on a DNA biotinylatedaptamer / L. Bonel, J.C. Vidal, P. Duato, J.R. Castillo // Biosensors and Bioelectronics. - 2011. -Vol. 26. -P. 3254-3259.

58. Prabhakar, N. Poly aniline Langmuir-Blodgett film based aptasensor for ochratoxin A detection / N. Prabhakar, Z. Matharu, B.D. Malhotra // Biosensors and Bioelectronics. -2011. -Vol. 26. -P. 4006-4011.

59. Barthelmebs, L. Electrochemical DNA aptamer-based biosensor for OTA detection, using superparamagnetic nanoparticles / L. Barthelmebs, A. Hayat, A. Limiadi, J. Marty, T. Noguer // Sensors and Actuators B. - 2011. - Vol. 54. - P. 2180-2184.

60. Старостина, В.К. Холинэстераза: методы анализа и диагностическое значение: информационно-методическое пособие / В.К. Старостина, С.А. Дегтева. - Новосибирск: ЗАО «Вектор-Бест». -2008. -35 с.

61. Гайнуллина, Э.Т. Механизм взаимодействия холинэстераз с фосфорорганическими лигандами и модификация биохимического метода определения соединений антихолинэстеразного действия / Э. Т. Гайнуллина, А. М.Антохин, С. Б.Рыжиков, К. В.Кондратьев, В.Ф. Таранченко // Российский химический журнал. - 2007. - Т.1, №2. -С. 131133.

62. Антохин, A.M. Холинэстеразы: структура активного центра и механизм влияния блокаторов холинорецепторов на скорость взаимодействия с лигандами / A.M. Антохин, Э.Т. Гайнуллина, В.Ф. таранченко. С.Б. Рыжиков, Д.К. Яваева // Успехи химии. - 2010. - Т.7, № 8. - С.780-795.

63. Евтюгин, Г.А. Основы биосенсорики: Учебное пособие / Г.А Евтюгин, Г.К Будников, Е.Е. Стойкова // Казань. - 2007. -82 с.

64. Щербакова, Л.Ф. Сенсорные системы для экспресс-определения токсичных химикатов / Л.Ф. Щербакова, A.B. Шантроха, И.В. Егоров, A.A. Щербаков// Российский химический журнал. -2007.-Т.1, №2 - С.127-130.

65. Медянцева, Э.П. Ферментный электрод на основе иммобилизованной холинэстеразы для определения потенциальных загрязнителей окружающей среды / Э.П. Медянцева, Г.К. Будников, С.С. Бабкина // Журн.аналит.химии. - 1990. - Т. 45, № 7. - С. 1386-1389.

66. Никольская, Е.Б. Применение холинэстераз в аналитической химии /Е.Б.Никольская, Г.А.Евтюгин // Журн.аналит.химии. - 1992. -Т.47,№2. -С.1358-1377.

67. Skladal, P. Biosensors based on Cholinesterase for detection of pesticides / P. Skladal // Food technol.biotechnol. -1996. - V.4, № 1. - P. 43-49.

68. Евтюгин, Г.А. Биосенсоры для определения ингибиторов ферментов в окружающей среде / Г.А. Евтюгин, Г.К. Будников, Е.Б. Никольская // Успехи химии. -1999. -Т.68, №12. - С. 1142-1167.

69. Arduini, F. Biosensors based on Cholinesterase inhibition for insecticides, nerve agents and aflatoxin B1 detection (review)/ F. Arduini, A. Amine, D. Moscone, G. Palleschi // Microchim. Acta. - 2010. -V. 170. -P. 193-214.

70. Arduini, F. Sviluppo di un biosensore per la determinazione dell'AFBl In: XXII National Congress of the Italian Chemical Society / F. Arduini, L. Micheli, A. Amine, JL. Marty, D. Moscone, G. Palleschi // Firenze, - 2006. - P.l 1.

71. Pohanka, M. Evaluation of aflatoxin В1 -acetylcholinesterase dissociation kinetic

using the amperometric biosensor technology: prospect for toxicity mechanism / M. Pohanka, K. Musilek, K. Kuca // Protein Pept Lett.- 2010. - Vol.17, № 3. -P. 340-342.

72. Chauhan, N. An amperometric acetylcholinesterase sensor based on Fe304 nanoparticle/multi-walled carbon nanotube-modified ITO-coated glass plate for the detection of pesticides / N. Chauhan, Ch.Sh. Pundir. // Electrochim. Acta. -2012. -Vol. 67. -P.79-86.

73. Du, D. Electrochemical thiocholine inhibition sensor based on biocatalytic growth of Au nanoparticles using chitosan as template / D. Du, J. Ding, J. Cai, A. Zhang // Sensors and Actuators B: Chemical. - 2007. -Vol. 127, №2. -P.317-322.

74. Ivanov, A.N. Acetylcholinesterase biosensor based on single-walled carbon nanotubes - Co phtalocyanine for organophosphorous pesticides detection / A.N. Ivanov, R.R. Younusov, G.A. Evtugyn, F. Arduini, D. Moscone, G. Palleschi // Talanta. -2011. -Vol.85.-P. 216-221.

75. Hassan, S. Acetylcholinesterase Based Detection of Residual Pesticides on Cotton / S. Hassan, J. Militky // American J. of Anal. Chem. - 2012. -Vol.3, №. 2. -P.93-98.

76. Тернера, Э. Биосенсоры: основы и приложения / Под ред. Э.Тернера и др. -М.: Мир. - 1992. - С. 35,52-53.

77. Либберт, Э. Физиология растений / Э. Либберт. -М.: Мир, 1981 -215с.

78. Медянцева, Э.П. Применение тканей растений для оценки загрязненности почвы некоторыми тяжелыми металлами / Э.П. Медянцева, Н.В. Кремлева, Т.К. Будников, Е.В.Асафова // Вест. Российск. Акад. сельскохозяйствен, наук. - 1997.-№6. - С.52-54.

79. Медянцева, Э.П. Амперометрический биосенсор для определения свинца и кадмия / Э.П. Медянцева, Н.В. Кремлева. Т.К. Будников, Ю.И. Бормотова // Журн.аналит.химии. - 1999. - Т.54, №2. - С. 166-170.

80. Alacam, S. A novel biosensor based on 1-homocysteine desulfhydrase enzyme immobilized in eggshell membrane / S. Alacam // J. of Molecular Catalysis B:

Enzymatic.- 2007-Vol. 49.-P. 55-60.

81. Hassan, S.S.M. A novel potentiometric biosensor for selective L-cysteine determination using L-cysteine-desulfhydrase producing Trichosporon jirovecii yeast cells coupled with sulfide electrode / S.S.M. Hassan, A.F. El-Baz, H.S.M. Abd-Rabboh // Analytica chim. acta. - 2007,- Vol. 602.-P. 108 -113.

82. Ефременко, E. H. Ферменты деструкции фосфорорганических нейротоксинов / Е.Н. Ефременко, С.Д. Варфоломеев // Успехи биологической химии - 2004 - Т. 44 - С. 307-347.

83. Мугинова, С.В. Возможности и перспективы использования щелочных фосфатаз для определения ионов металлов / С.В. Мугинова, A.M. Жаворонкова, Т.Н. Шеховцова // Журн. аналит. химии - 2005 - Т.60, №3.-С.247-263.

84. Sánchez, F.G. Free and sol-gel immobilized alkaline phosphatase-basedbiosensor for the determination of pesticides and inorganic compounds / F. G. Sánchez, A. NavasDíaz, M.C. Ramos Peinado, С. Belledone// Analytica Chim. Acta.- 2003,- Vol.484.-P. 45-51.

85. Wang, J.H. The Detection of Alkaline Phosphatase Using an Electrochemical Biosensor in a Single-Step Approach / J.H. Wang, K. Wang, B. Bartling, Ch.Ch. Liu // Sensors. - 2009,- Vol.9.- P. 8709-8721.

86. Akyilmaz, E. An inhibition type alkaline phosphatase biosensor for amperometric determination of caffeine/ E. Akyilmaz, M. Turemis // ElectrochimicaActa.- 2010.- V.55. - P. 5195-5199.

87. Jaenicke, E. Tyrosinasesfrom crustaceans form hexamers / E. Jaenicke, H. Decker // Biochem. J. - 2003. - V.371. - P.515- 523.

88. Ramsden, C.A Mechanistic studies of tyrosinase suicide inactivation / C.A. Ramsden, P.A. Riley // Arkivoc. -2010 (i). - P. 260-274.

89. Chang, Te-S. An Updated Review of Tyrosinase Inhibitors / Te-S . Chang // Inter. J. Mol. Sci. -2009,-Vol. 10,№ 6. - P. 2440 - 2475.

90. Дубачева, Г.В. Электрохимические биосенсоры для анализа эстерза в

смеси: дис.хим.наук: 03.00.23/Дубачева Галина Витальевна.- М. - 2008 -173 с.

91. Prieto-Simon, В. Emerging biotools for assessment of mycotoxins in the past decade/ B. Prieto-Simon, T. Noguer, M. Campas//Trends in Analyt. Chem. -2007. - Vol. 26, №.7. - P. 689-702.

92. Yang, L. A novel tyrosinase biosensor based on chitosan-carbon-coated nickel nanocomposite film / L.Yang, H. Xiong, X.Zhang, S.Wang// Bioelectrochem. -2012,-Vol.84.-P. 44^48.

93. Limin, L. A novel tyrosinase biosensor based on hydroxyapatite-chitosan nanocomposite for the detection of phenolic compounds / L.Limin, Z. Li, Z. Xiaobing, H. Shuangyan, S. Guoli, Y. Ruqin // Analyt. Chim.Acta.-2010, -Vol. 665.-P.146- 151.

94. Yu-Chen, T. Amperometric biosensors based on multiwalled carbonnanotube-Nafion-tyrosinase nanobiocomposites forthe determination of phenolic compounds / T. Yu-Chen, C. Chian-Cheng // Sensors and Actuators. -2007. -Vol.125.-P. 10-16.

95. Cheng, Y. Amperometric tyrosinase biosensor based on Fe304 nanoparticles-coated carbon nanotubes nanocomposite for rapid detection of coliforms / Y. Cheng, Y. Liu, J. Huang, K. Li., X. Yuezhong, Z. Wen, J. Litong // Electrochimica Acta. -2009. -Vol.54. -P.2588-2594.

96. Раков, Э.Г. Нанотрубки и фуллерены / Э.Г. Раков // М.: «Университетская книга». - 2006. - 235 с.

97. Yuna,Y.H. Fabrication and characterization of carbon nanotube array electrodes with gold nanoparticle tips / Y.H. Yuna, Zh. Dongb, V.N. Shanovc, A. Doepked, W.R. Heinemand, H.B. Halsall, A. Bhattacharyab, D.K.Y. Wonge, M.J. Schulza // Sensors and Actuators. - 2008. - Vol. 133. - P. 208-212.

98. Punbusayakul, N. Carbon nanotubes architectures in electroanalysis / N. Punbusayakul // Procedia Engineering. - 2012. - Vol. 32. - P. 683-689.

99. Кривенко, А.Г. Электрохимия наноструктурированного углерода / А.Г. Кривенко, Н.С. Комарова// Успехи химии. - 2008. - Т. 77, №11. -С.995-1012.

100. Zhang, Y. Functionalized carbon nanotubes for potential medicinal applications / Y. Zhang, Y. Bai, B. Yan // DrugDiscoveryToday. - 2010. -Vol. 15, №. 11/12. -P. 428-435.

101. Jayachandran, V. Chitosan Composites for Bone Tissue Engineering—An Overview / V. Jayachandran, Se-KwonKim // MarDrugs. - 2010. - Vol. 8, № 8. -P. 2252-2266.

102. Yuyang, L. Decoration of carbon nanotubes with chitosan / L. Yuyang, T. Jing, X. Chen, J.H. Xin // Carbon. - 2007. -Vol. 45, №. 6. -P.1212-1218.

103. Zigang, W. Preparation and characterization of chitosan-grafted multiwalled carbon nanotubes and their electrochemical properties / W. Zigang, W. Feng, Y. Feng, Q. Liu, X. Xu, T. Sekino, A. Fujii, M. Ozaki // Carbon. - 2007. - Vol. 45,1. 6.-P.1212-1218.

104. Wang, J. Carbon-nanotube based electrochemical biosensors: a review / J. Wang // Electroanal. - 2004. -Vol. 17, №. 1. -P. 7-14.

105. Gomathi, P. Multiwalled carbon nanotubes grafted chitosan nanobiocomposite: A prosperous functional nanomaterials for glucose biosensor application / P. Gomathi, M.K. Kim, J.J. Park, D. Ragupathy, A. Rajendran, S.C. Lee, J.C. Kim, S.H. Lee, H.D. Ghim // Sens. ActuatorsB - 2011. -Vol. 155, №. 2. -P. 897-902.

106. Yuna,Y. Nanotube electrodes and biosensors / Y. Yuna, Z. Dong, V. Vesselin, R. William, H. Brian, A. Bhattacharyae, L. Confortif, R. Narayang, S. William, M. Schulza // J. Nanotoday. - 2007. - P. 30-37.

107. Federica,V. Carbon nanotubes as electrode materials for the assembling of new electrochemical biosensors / V. Federica, S. Orlanducci, M.L. Terranova, A. Amine, G. Palleschi // Sensors and Actuators B. - 2004. -Vol. 100. -P. 117-125.

108. Subbiah, A. Simultaneous detection of dopamine, ascorbic acid, and uric acid at electrochemically pretreated carbon nanotube biosensors / A. Subbiah, L. Guodong, L. Chen-Zhong // Nanotechnology, BiologyandMedicine. - 2010. -Vol. 6.-P. 52-57.

109. Chen, J. Development of an amperometric enzyme electrode biosensor for sterigmatocystin detection / J. Chen, D. Liu, S. Li, D. Yao // Enzyme and

Microbial Technology. - 2010.- Vol. 47. - P. 119-126.

110. Amjad, A. Simultaneous purification and immobilization of mushroom tyrosinase on an immunoaffinity support / A. Amjad, A. Suhail, H. Qayyum // Process Biochemistry. - 2005. - Vol.40, -P. 2379-2386.

111. Duckworth, H.W. Physi о chemical and kinetic properties of mushroom tyrosinase / H. W. Duckworth, J.E. Coleman // Journal of Biological Chemistry. -I970.-Vol. 245.-P. 1613-1625.

112. Yakup Arica, M. Characterisation of tyrosinase immobilised onto spacer-arm attached glycidyl methacrylate-based reactive microbeads / M. Yakup Arica , B. Gulay, B. Niyazi // Process Biochemistry. -2004.-Vol. 39.-P. 2007-2017.

113. Basu,T. Recent Advances in Carbon Nanotubes Based Biosensors (Review)/ T. Basu, R. Pratima Solanki, B. D. Malhotra // Sensors- 2008, -Vol.8, -P.l-xmanuscripts.

114. Ajeet, K. Carbon nanotubes — chitosan nanobiocomposite for immunosensor / K. Ajeet, P.R. Solanki, M.K. Pandey , K. Kaneto, S. Ahmad, D. Bansi Malhotra // Thin Solid Films. -2010, -Vol. 519. -P. 1160-1166.

115. Березин, И.В. Иммобилизованные ферменты / И.В. Березин, H.JI. Клячко, А.В. Левашов, К. Мартинек, В.В. Можаев, Ю.Л. Хмельницкий. -М. : Высшая школа, 1987. -108 с.

116. Березин, И.В. Иммобилизованные ферменты. Современное состояние и перспективы. Т.1. / Под ред. И.В. Березина, В.К. Антонова, К. Мартинека. -М.: Изд-во МГУ. -1976.-450 с.

117. Березин, И.В. Практический курс химической и ферментативной кинетики / И.В. Березин, А.А. Клёсов. -М.:Наука. - 1976. -320 с.

118. Крупянко, В.И. Векторный метод представления ферментативных реакций / В.И Крупянко. - М.:Наука, -1990.-144с.

119. Егорова A.M. Теория и практика иммуноферментного анализа / Подред. A.M. Егорова. - М.: Высшая школа. -1991 - 288 с.

120. Setford, S.J. Immunosensing inorganic and mixed aqueous-organic phase

environments / S.J. Setford // Trendsin Anal.Chem - 2000.-V.19, №5. -P.330-339.

121. Medyantseva, E.P. Cholinesterase biosensors in determination of some mycotoxins / E. P. Medyantseva, H. Mai Thi Thanh, R.M. Varlamova, E.Yu. Tarasova, G. R. Sakhapova, S.S. Babkina, H.C. Budnikov // Book of Abstr.l 1th International Meeting on Cholinesterases (June 4-9) Kazan, Russia. - 2012. -P.178.

122. Медянцева, Э.П. Определение некоторых микотоксинов амперометрическими холинэстеразными биосенсорами / Э.П. Медянцева, X. Май Тхи Тхань, P.M. Варламова, Г.Р. Сахапова, Е.Ю. Тарасова, Г.К. Будников // Учен. Зап. Казан. Ун-та. Сер. Естеств. Науки. -2012.-Т.154, кн.1.-С. 101-111.

123. Ильичева, Н.Ю. Холинэстеразные биосенсоры для определения гербицида пропанила/ Н.Ю. Ильичева, Э.П. Медянцева, P.M. Бейлинсон, Г.К. Будников, О.Н. Ванягина // Вестник МГУ. - 2003. -Т.43, № 6. -С.408-411.

124. Медянцева, Э.П. Иммунохимический анализ гербицидов группы сим-1,3,5-триазинов с помощью амперометрического холинэстеразного биосенсора / Э.П. Медянцева, М.П. Кутырева, Э.Р. Фахреева, Н.Ю. Ильичева, С.А. Еремин, Г.К. Будников // Агрохимия. - 2000. - №3. - С. 72-80.

125. Li, S. Amperometric biosensor for aflatoxin B1 based on aflatoxin-oxidase immobilized on multiwalled carbon nanotubes / S. Li, J. Chen, H. Cao, D. Yao, D. Liu // Food Control. - 2011. - Vol. 22. - P. 43-49.

126. Wu, Z. Preparation and characterization of chitosan-grafted multiwalled carbon nanotubes and their electrochemical properties / Z. Wu, W. Feng, Y. Feng, Q. Liu, X. Xu, T. Sekino, A. Fujii, M. Ozaki // Carbon. - 2007. - V.45.- P. 12121218.

127. Olivas-Armendáriz, I. Chitosan/MWCNT composites prepared by thermal induced phase separation / I. Olivas-Armendáriz, P. García-Casillas, R. Martínez-Sánchez, A. Martínez-Villafane, C.A. Martínez-Pérez // J. Alloys and Compounds - 2010. - Vol.495. - P. 592-595

128.Xiao-bo, L. Electrostatic layer-by-layer assembled multilayer films of chitosan and carbon nanotubes / L. Xiao-bo, J. Xiao-ying // New Carbon Materials -2010.- Vol.25, №3.-P. 237-240.

129. Li, C. Highly biocompatible multi-walled carbon nanotube-chitosan nanoparticle hybrids as protein carriers / C. Li, K. Yang, Y. Zhang, H. Tang, F. Yan, L. Tan, Q. Xie, S. Yao // Acta Biomaterialia. - 2011. - Vol.7.- P. 30703077.

130. Peng, F. Novel nanocomposite pervaporation membranes composed of

poly (vinyl alcohol) and chitosan - wrapped carbon nanotube / F. Peng, F. Pan,

i

H. Sun, L. Lu, Z. Jiang // J. Membr. Sci. - 2007. - Vol.300.- P. 13-19.

131.Сухно, И.В. Углеродные нанотрубки. Часть1. Высокотехнологичные приложения / И.В. Сухно, В.Ю. Бузько. - Краснодар, 2008. - 55 с.

132. Медянцева, Э.П. Определение некоторых микотоксинов амперометрическими холинэстеразными биосенсорами / Э.П. Медянцева, X. Май Тхи Тхань, P.M. Варламова, Г.Р. Сахапова, Е.Ю. Тарасова, Т.К. Будников // Учен. Зап. Казан. Ун-та. Сер. Естеств. Науки. - 2012. - Т. 154. -Кн.1. - С. 101-111.

133. Cometa, M.F. In vitro inhibitory effect of aflatoxin B1 on acetylcholinesterase activity in mouse brain / M.F. Cometa, P. Lorenzini, S. Fortuna, M.T. Volpe, A. Meneguz, M. Palmer // Toxicology. - 2005. - Vol. 206. - P. 125-135.

134. Май Тхи Тхань, X. Определение зеараленона амперометрическими биосенсорами на основе модифицированных углеродными нанотрубками электродов / X. Май Тхи Тхань, Э.П. Медянцева, P.M. Варламова, Г.Р. Сахапова, О.В. Николаева //Вестник Казанск. технологич. ун-та.- 2012.-№15,- С.149-153.

135. Эггинс, Б. Химические и биологические сенсоры / Б. Эггинс // М.Техносфера, - 2005,- С. 116-118.

136. Мусил, Я. Современная биохимия в схемах / Я. Мусил, О. Новакова, К. Кунц. - М.: Мир, 1994. - с.44.

137. Золотов, Ю.А. Основы аналитической химии. Кн.1. Общие вопросы. Методы разделения / Под ред. Ю.А.Золотова.- М.: Высшая шк., 2000 -383с.

138. Медянцева, Э.П. Определение некоторых микотоксинов амперометрическими биосенсорами / Э.П. Медянцева, P.M. Варламова, Е.Ю. Тарасова, Май Тхи Тхань X., Г.Р.Сахапова, Г.К.Будников // III Всерос. симпозиум «Разделение и концентрирование в аналитической химии и радиохимии» с международным участием (2-8 октября 2011 г.). Краснодар, 2011.- Тез.докл.- С.256.

139. Медянцева, Э.П. Амперометрические биосенсоры для контроля качества пищевых продуктов: определение некоторых микотоксинов/ Э.П. Медянцева, X. Май Тхи Тхань, P.M. Варламова, Г.Р. Сахапова, Е.Ю. Тарасова, Т.К. Будников // VIII Всерос. Конф. по электрохимическим методам анализа "ЭМА - 2012" (3-9 июня), Уфа-Абзаково, 2012 - С.72.

140. Медянцева, Э.П. Новые амперометрические биосенсоры для определения микотоксинов и антидепрессантов / Э.П. Медянцева, P.M. Варламова, Д.А, Волоцкая, Г.Р. Сахапова, Е.Ю. Тарасова, Л.И. Садриева, Д.И. Брусницын, X. Май Тхи Тхань, Г.К. Будников // Тезисы докладов "XIX Менделеевский съезд по общей и прикладной химии" (25-30 сентября). - Т.4. -Волгоград, 2011.-С.370.

141. Медянцева, Э.П. Амперометрические биосенсоры для определения охратоксина А / Э.П. Медянцева, X. Май Тхи Тхань, P.M. Варламова, Е.Ю. Тарасова, Г.Р. Сахапова, Г.К. Будников // Учен. Зап. Казан. Ун-та. Сер. Естеств. Науки.-2012.-Т. 154, кн.4.-С. 92-104.

142. Май Тхи Тхань, X. Амперометрические биосенсоры на основе модифицированных углеродными нанотрубками электродов для определения некоторых микотоксинов / X. Май Тхи Тхань, Э.П. Медянцева, Г.Р. Сахапова, P.M. Варламова, Николаева О.В.// XI Научная конференция молодых ученых, аспирантов и студентов научно-образовательного центра Казанского (Приволжкого) федерального

университета " Материалы и технологии XXI века" - Казань, (17 мая) 2012 - Тез.докл.-С.69.

143. Шайдарова, Л.Г. Каталитическое электроокисление щавелевой кислоты на электроде. Модифицированном углеродными нанотрубками с электроосажденными частицами палладия / Л.Г. Шайдарова, И.А. Челнокова, Е.И. Романова. Г.Ф. Махмутова, A.B. Гедмина, Г.К. Будников // Учен.зап.КазГУ. Сер. Естеств. Науки. - 2011. - Т.153, №1. -С.29-38.

144. Май Тхи Тхань, X. Определение зеараленона амперометрическими биосенсорами на основе модифицированных углеродными нанотрубками электродов / X. Май Тхи Тхань, Э.П. Медянцева, P.M. Варламова, Г.Р. Сахапова, О.В. Николаева // Всеросс. молодежи, конф. «Химия под знаком Сигма: исследования, инновации, технологии» (2-4 июля 2012 г.). Казань: Изд-во КНИТУ, 2012. - Тез.докл. -С.100-101.

145. Медянцева, Э.П. Био- и иммуносенсоры для определения патогенных микроорганизмов в биомедицинских объектах / Э.П. Медянцева, Г.К. Будников // Биохимические методы анализа: проблемы аналитической химии. Т.12. Под ред. Б.Б. Дзантиева. М.: Наука, - 2010. - С.243-276.

146. Коллинз, У.П. Новые методы иммуноанализа / У.П. Коллинз. -М.: Мир. -1991.-С. 280.

147. Ёсида, К. Электроокисление в органической химии. Роль катион радикалов как интермедиатов в синтезе / К. Ёсида. Пер. с англ. - М.: Мир. - 1987. -336 с.

148. http://blackmould.me.uk/patulin.html

149. Haghbeen, К. Purification of tyrosinase from edible mushroom / K. Haghbeen, F. Rastgar Jazii, A.A. Karkhane, S. Shareefi Borojerdi // Iran. J. of Biotechnol. -2004. - Vol. 2, №3. - P. 189-94.

150. Rocha, A.M.C.N. Characterization of polyphenoloxidase (PPO) extracted from 'Jonagored' apple / A.M.C.N. Rocha, A.M.M.B. Moráis // Food Control. -2001.-Vol. 12.-P. 85-90.

151. Nematpour, F.S. The Banana Pulp Polyphenol Oxidase is a Tyrosinase // F.S. Nematpour, K. Haghbeen, M.K. Babaei, F. Rastgar Jazii, O. Nouraeen, M.B. Yancheshmeh // J.of Biological Sciences, -2008. -Vol.8, № 3. _p. 526-533.

152. Chuang, M.-C. Ал electrochemical tyrosinase-immobilized biosensor for albumin—toward a potential total protein measurement / M.-C. Chuang, C.-C. Liu, M.-C. Yang // Sensors and Actuators B. - 2006. - Vol.114. -P. 357-363.

153. Hervas Parez, J.P. Amperometric tyrosinase biosensor based on polyacrylamide microgels / J.P. Hervas Parez, M. Sanchez-Paniagua Lopez, E. Lopez-Cabarcos, B. Lopez-Ruiz // Biosensors and Bioelectronics. -2006. -Vol.22. -P. 429-439.

154. Sapelnikova, S. Amperometric sensors based on tyrosinase-modified screenprinted arrays / S. Sapelnikova, E. Dock, T. Ruzgas, J. Emneus // Talanta. - 2003.-Vol.61.-P. 473-483.

155.Korkut Ozoner, S. Enzyme Based Phenol Biosensors. Biosensors for Health, Environment and Biosecurity / S. Korkut Ozoner, E. Erhan, F. Yilmaz // Book 3, Intech Open Access Publisher, ISBN 978-953-307-486-3, Edited by Vernon Somerset, Temmuz-2011. -P. 319-340,.

156. Chen, J. Sensitive phenol determination based on co-modifying tyrosinase and palygorskite on glassy carbon electrode / J. Chen, Y. Jin // Microchim Acta. -2010. - Vol. 169. -P.249-254.

157. Кулис, Ю.Ю. Аналитические системы на основе иммобилизованных ферментов / Ю.Ю. Кулис. - Вильнюс: Мокслас. - 1981. - 200 с.

158. Zhao, Q. Determination of Phenolic Compounds Based on the Tyrosinase-Single Walled Carbon Nanotubes Sensor/ Q. Zhao, Q.K. Zhuang//. Electroanalysis- 2005. - Vol.17, №1. -P. 85-88.

159. Медянцева, Э.П. Амперометрические иммуноферментные сенсоры для биомедицинских исследований и определений / Э.П. Медянцева. Г.К.Будников // Бутлеровские сообщения. -2011. -Т.25, №8. - С.9-19.

160. Nguyen, Т. С. Nghien cuu muc do о nhiem nam moc va doc to cua chung tren ngo gaoViet Nam va bien phap phong trir / Т. C. Nguyen - Luan an tien si, -DH T6ng hop HaNoi. -1998. -131 trang.

161. Старо дуб, Н.Ф. Микотоксин патулин: продуценты, биологическое действие, индикация в пищевых продуктах. / Н.Ф.Стародуб, J1.H. Пилипенко, A.B. Егорова, И. В. Пилипенко // Современные проблемы токсикологии. - 2008. - №3. - С. 50-57.

162. СанПиН 2.3.2.1078-01. Гигиенические требования безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов. -2001.

163. Медянцева Э.П. Контроль содержание некоторых микротоксинов в пищевых продуктах / Э.П. Медянцева, X. Май Тхи Тхань, Р.М.Варламова, Г.Р.Сахапова, Е.Ю.Тарасова, Г.К.Будников, Т.Н. Зимина // Материалы II Международной научно-практической конференции "Современные проблемы безопасности жизнедеятеьности: теория и практика" - Казань: «Научный центр безопасности жизнедеятельности детей ». -2012. -С. 264271.

164. Май, Т.Т.Х. Амперометрические биосенсоры для определения микотоксинов в пишевых продуктах / Т.Т.Х Май, Е.Ю. Тарасова, О.В. Николаева, P.M. Варламова// Менделеев - 2013. Аналитическая химия. Седьмая всероссийская конференция молодых ученых, аспирантов и студентов с международным участием по химии и наноматериалам. Тезис докладов. Аналитическая химия. -СПб: Издательство Соло, 2013. - С.58-59.

165. Май Тхи Тхань, X. Аналитические возможности амперометрических биосенсоров на основе модифицированных электродов для контроля качества пищевых продуктов России и Вьетнама на примере определения микотоксинов / Х.Май Тхи Тхань, Э.П.Медянцева, P.M. Варламова, О.В. Николаева, Г.К. Будников / Второй съезд аналитиков России (сентября 2013). - Тез.докл. Москва. - С.380.

166. Стародуб, Н.Ф. Анализ микотоксинов: подготовка проб. / Н.Ф.Стародуб, JI.H. Пилипенко, A.B. Егорова, И.В. Пилипенко, О.С. Гойстер, Г.А. Хмельницкий // Биотехнология. -2008. - Т.1, №1. - С.106 -115.

147

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

Аг - антиген

Ат - антитело

АФВ1 - афлатоксин В1

АХЭ- ацетилхолинэстераза

БСА - бычий сывороточный альбумин,

БТХХ - битирилтиохолин хлорид

БС - биосенсор

ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография

ГХ - газовая хроматография

ГА - глутаровый альдегид

ЖХ - жидкостная хроматография

ЗЕА - зеараленон

ИФА - иммуноферментный анализ

ИФС - иммуноферментный сенсор

МС - масс-спектрометрия

МУНТ - многостенные углеродные нанотрубки

OTA - охратоксин А

ОУНТ - одностенные углеродные нанотрубки ХЭ - холинэстераза ХЗ - хитозан

ПДК - предельно допустимая концентрация ПрО - предел обнаружения ПХ - пероксидаза хрена

сн - нижняя граница определяемых содержаний

ТСХ - тонкослойная хроматография

УНТ - углеродные нанотрубки

ФД - флуоресцентное детектирование

ФПИА - Флуоресцентный поляризационный иммуноанализ

ФБ - фосфатный буфер

ЩФ - щелочная фосфатаза ЦДГ - цистеиндесульфгидраза ДМД - диодно-матричный детектор ДМФА - диметилформамид УФ - ультрафиолетовый ЛД50 - полулетальная доза

ПФИА - поляризационный флуоресцентный иммуноанализ ЭСМ - электронная сканирующая микроскопия