Акустическое детектирование микроэмболов на ранних этапах тромбообразования IN VITRO и IN VIVO тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.02, кандидат биологических наук Узлова, Светлана Геннадьевна

• Узлова, Светлана Геннадьевна
• кандидат биологических наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Узлова, Светлана Геннадьевна

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК ОСНОВНЫХ ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

Глава I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

§ 1 Общие представления о функционировании системы свертывания крови

§1.1 Физиологическое значение системы свертывания крови

§1.2 Первичная реакция организма на кровотечение

§1.3 Биохимический механизм ССК

§1.4 Полимеризация фибрина

§1.5 Система противосвертывания

§1.6 Фибринолиз

§2 Влияние гидродинамики на процессы свертывания крови

§2.1 Влияние конвективного массопереноса на плазменную систему гемостаза

§2.2 Напряжения сдвига и гидродинамическая активация тромбоцитов

§3 Математическое моделирование процессов свертывания крови

§4 Методы диагностики нарушений ССК

§5 Акустические методы

§5.1 Ультразвуковые методы в медицине

§5.2 Использование акустических методов для изучения свертывания крови

§5.3 Регистрация микроэмболов с помощью ТСИ

§5.4 Спонтанный эхоконтраст и его возможная связь с тромбообразованием

ПОСТАНОВКА ЗАДАЧИ

Глава II МЕТОДЫ И МАТЕРИАЛЫ. СХЕМА ЭКСПЕРИМЕНТА

Глава III АКУСТИЧЕСКОЕ ДЕТЕКТИРОВАНИЕ РАННИХ СТАДИЙ

ВНУТРИСОСУДИСТОГО ТРОМБООБРАЗОВАНИЯ

§1 Стадийность процессов тромбообразования

§2 Анализ и сопоставление оптического и акустического сигналов

§3 Регистрация процессов тромбообразования в оптически непрозрачной цельной крови

§4 Влияние гемодинамический условий на процесс тромбообразования

§5 Влияние гематокрита на эффективность акустической регистрации процессов тромбообразования

Глава IV УЛЬТРАЗВУКОВОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОЦЕССОВ ФИБРИНОЛИЗА ПОД ДЕЙСТВИЕМ ПРЕПАРАТА

СТРЕПТОКИНАЗА»

§ 1 Методика эксперимента

§2 Акустическая регистрация фибринолиза

§3 Влияние концентрации стрептокиназы на протекание фибринолиза

§4 Влияние задержки введения стрептокиназы от начала процессов тромбообразования на протекание фибринолиза

Глава V ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ВЫВОДЫ

БЛАГОДАРНОСТИ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Акустическое детектирование микроэмболов на ранних этапах тромбообразования IN VITRO и IN VIVO»

Проблемы тромбообразования интенсивно изучаются в связи с важной ролью нарушений системы гемостаза при целом ряде клинически проявляющихся патологий [Баркаган 1999, Балуда 1995, Макаров 2003, Levi 1999, Colman 2006]. Оценка состояния системы гемостаза производится посредством специальных диагностических тестов, многие из которых выполняются в лабораторно-клинических условиях [Баркаган 1999, Балуда 1995, Козинец 1997, Hall 1991, Baglin 2005].

Для изучения наиболее деликатных, а в ряде случаев и наиболее сложных вопросов, касающихся механизмов регуляции системы свертывания крови, создаются специальные методики, в том числе основанные на использовании новых физико-химических или биологических принципов [Barrowcliffe 2006, Baglin 2008, Brummel-Ziedins 2008].

В силу сложности механизмов регуляции системы свертывания крови бывает далеко непросто установить истинную причину нарушения процессов тромбообразования у конкретного пациента [Балуда 1995, Баркаган 1999, Zwaal 1986].

Для описания динамики процессов тромбообразования используются математические методы, моделируются отдельные звенья системы регуляции свертывания крови, кинетика процессов контактной активации [Pokhilko 1998, Khanin 1989, Kramoroff 2001], каскадный механизм усиления сигнала по внешнему и/или внутреннему пути регуляции [Beltrami 1995, Jesty 2005, Lu 2004]. Моделируются этапы ранней пристеночной полимеризации [Guy 2007].

В последнее время интенсивно изучаются пространственные аспекты процессов тромбообразования в бесконвективных и конвективных условиях [Атауллаханов 1994, Лобанов 1997, Lobanov 1997, Lobanov 2005, Злобина 2006, Гузеватых 2000, Чуличков 2000, Panteleev 2006]. К сожалению, развитые к настоящему времени теоретические методы позволяют эффективно описывать тромбообразование в потоках слабой интенсивности (Re«l ) [Гурия 2002]. Перенос полученных результатов на интенсивные течения наталкивается на общую гидродинамическую проблему описания развития турбулентности в сосудах при высоких числах Рейнольдса [Falkovich 2006].

В связи с этим, большое значение имеют методы прямого непосредственного детектирования процессов тромбообразования в сосудах большого диаметра.

В отличие от процессов свертывания крови в бесконвективных (или слабо конвективных) условиях (когда имеет место формирование сплошных (солидных) тромбов), в интенсивных потоках крови (или плазмы) внутрисосудистое тромбообразование обычно представляет собой стадийный процесс [Злобина 2006], на ранних стадиях развития которого в кровотоке формируются множественные микротромбы (размером до 100 микрон).

Развитие такого рода микротромбов в условиях кровотока in vitro* приводит, как показали оптические методы, к появлению в кровотоке макроскопических флотирующих сгустков, или же - макроэмболов [Шевкопляс

2000, Falati 2002, Turitto 1998, Ruggeri 1993].

В микрокапилярном кровотоке нарушения гемодинамики эффективно регистрируются in vivo в реальном времени оптическим методом капилляроскопии [Gurfinkel 1998, Гурфинкель 2001].

Проблема проходимости крупных сосудов (особенно глубоко-залегающих) обычно изучается методами ангиографии [Зубарев 1991, Зубарев 1998, Correas

2001, Campani 1998]. Эти методы позволяют эффективно обнаруживать локальную блокаду сосудов фибриновыми и тромбоцитарными тромбами [Зубарев 1991, Зубарев 1998, Correas 2001, Campani 1998]. Однако на ранних

Re = VL/v - известный безразмерный параметр подобия - число Рейнольдса [Ландау 2003]. в пластиковых трубках с силиконовым внутренним покрытием, используемых в аппаратах для гемодиализа. этапах внутрисосудистого тромбообразования, когда нарушения кровотока обуславливаются свежими, т.е. структурно рыхлыми тромбами, методы ангиографии неэффективны (в силу проницаемости рыхлых тромбов для радиоконтрастных веществ) [Бузиашвили 2001].

В связи с тем, что выявление самых ранних этапов внутрисосудистого тромбообразования представляет большой клинический интерес, разработка методов эффективного раннего детектирования микротромбов в кровотоке представляет собой важную актуальную задачу.

В настоящей работе для указанных целей нами предлагается использовать ультразвуковые методы. Анализ современных работ о применении ультразвуковых методов к изучению проблем тромбообразования, проведенный в главе I настоящей диссертации, показал, что в этой области можно выделить несколько перспективных направлений.

Одно из таких направлений связано с применением транскраниального доплеровского сканирования (ультразвуковая доплерография сосудов головного' мозга) для регистрации одиночных флотирующих эмболов различного происхождения [Markus 1995, Russell 2002, Ringelstein 1998].

Другое направление исследований представлено работами по непосредственному изучению изменения параметров акустического сигнала в ходе тромбообразования в бесконвективных системах in vitro [Грибаускас 1972, Machado 1991, Huang 2005, Shung 1986].

С клинической точки зрения большой интерес представляют работы, посвященные изучению эффекта спонтанного эхоконтраста (СЭК) [Iliceto 1985, Ercan 2003, Rastegar 2003, Merino 1992, Панченко 2007]. СЭК - явление увеличения интенсивности рассеяния ультразвука от кровотока, часто наблюдаемое в крупных сосудах и полостях сердца.

В главе II описаны методы и материалы, используемые в данном исследовании. Приводится подробное описание экспериментальной установки и последовательности действий при проведении опытов, указана методика обработки данных.

В главе III изучаются процессы свертывания, регистрируемые одновременно оптическими и акустическими методами. Результаты разбиты на три основные части. В первой части показана коррелляция между оптическим и акустическим сигналами, регистрируемыми в ходе свертывания в оптически прозрачной плазме крови. Во второй части приведены результаты обработки и анализа акустических данных для плазмы крови и цельной крови. Продемонстрированна стадийность процессов тромбообразования. В третьей части приводятся данные экспериментов по влиянию гидродинамических условий на процессы свертывания крови, а также влияние гематокрита на эффективность регистрации начальных этапов тромбообразования.

В главе IV рассматривается возможность использования разработанной методики ультразвуковой регистрации процессов свертывания крови для исследования динамики лизиса, вызванного действием фибринолитического препарата стрептокиназы, в условиях интенсивного кровотока.

В проведенном исследовании показано, что акустическое детектирование фибриновых микросгустков в условиях интенсивных течений, как плазмы крови, так и цельной крови позволяет надежно выявлять самую раннюю (взрывную) фазу полимеризации фибрина при внутрисосудистом свертывании крови.

Проведенный в свете полученных результатов анализ данных детектирования методами ультразвуковой диагностики эффектов спонтанного эхоконтраста у пациентов ГНЦ РАМН позволил выдвинуть представление о стадийности тромбообразования в условиях in vivo [Узлова 2008].

Исследование показало, что СЭК может иметь различную структуру, характеристики которой такие как плотность, форма рассеивающих частиц, их подвижность, могут меняться во времени в широком диапазоне. В работе выделено несколько характерных видов СЭК: «метель», «мусс», «желе», «студень». Сопоставление клинических записей (см. Приложение) и записей, описанных в главе III, показало сходство клинически наблюдаемых типов СЭК с наблюдаемыми в эксперименте картинами изменения эхоконтраста в ходе процессов тромбообразования in vitro.

В заключительной части работы обсуждаются ограничения рассмотренных в работе акустических методов для проведения диагностики ранних этапов внутрисосудистого тромбообразования непосредственно в клинических условиях.

Заключение диссертации по теме «Биофизика», Узлова, Светлана Геннадьевна

ВЫВОДЫ

1. С помощью специально разработанной оригинальной экспериментальной установки, позволяющей производить параллельное детектирование оптического и акустического сигналов в ходе процессов тромбообразования, показано, что появление в кровотоке фибриновых микросгустков, регистрируемых оптически, одновременно проявляется в акустическом сигнале в виде эхоконтраста.

2. Показано, что на начальном этапе тромбообразования в плазме крови интенсивность доплеровского сигнала резко увеличивается в 6,4±1,3 раза; при тромбообразовании в цельной крови - в 2,2±0,4 раза.

3. Продемонстрирована принципиальная возможность использования ультразвуковых методов, основанных на доплеровском сканировании крупных сосудов, для неинвазивного детектирования ранних стадий внутрисосудистого тромбообразования в реальном времени.

4. Установлена принципиальная возможность мониторирования кинетики фибринолитических процессов (вызываемых действием стрептокиназы) акустическими методами.

БЛАГОДАРНОСТИ

Автор выражает искреннюю благодарность своему научному руководителю Георгию Теодоровичу Гурия.

Я глубоко признательна академику А.И. Воробьеву за интерес, проявленный к работе, профессору С.А. Васильеву за содержательное обсуждение клинических аспектов применения акустических методов, руководителю отделения реконструктивно-восстановительной ортопедии к.м.н. В.Е. Мамонову за ценные замечания, профессору В.А. Макарову за ценные консультации по использованию некоторых коагулологических препаратов, ст.н.с. отделения анестезиологиии и реаниматологии к.м.н. В.А. Атопкову и к.м.н. С.В. Моделу за стимулирующие дискуссии, профессору H.H. Самсоновой за внимание, проявленное к работе, и консультации по методам экспресс-диагностики.

Настоящая работа была выполнена благодаря тесному сотрудничеству с К.Г. Гурия, внесшему значительный вклад в разработку методики двухканальной регистрации процессов тромбообразования и принимавшему непосредственное участие в проведении ряда опытов и в обработке результатов, а также благодаря сотрудничеству с заведующим отделением ультразвуковой диагностики A.A. Шевелевым.

Автор благодарит также сотрудников и аспирантов лаборатории криобиофизики клеток крови ГНЦ РАМН: Е.А. Катруху, К.Е. Злобину, O.A. Дудченко, И.А. Романца, A.C. Рухленко и З.В. Ковальчук за помощь и поддержку.

Хочу поблагодарить профессора датского технологического университета Эрика Мосекилде за ценные советы и замечания.

Отдельная благодарность преподавателям кафедры физики живых систем МФТИ A.M. Мелькумянцу, Ю.А. Чизмаджеву, А.И. Дьяченко и Г.Т. Гурия за содержательные курсы лекций и советы. А также особая благодарность моим учителям из школы 1030 г. Зеленограда И.Б. Кожухову, И.Н. Горбатому, A.A. Прокофьеву, Н.М. Гафинович и Д.Ю. Виноградову за то, что привили любовь к учебе, и желание разбираться в сложном.

Благодарю своих родителей за их любовь, понимание и под держку во всех моих начинаниях и непростых поисках самореализации.

Работа выполнена при поддержке гранта РФФИ № 07-04-01523-а "Исследование спонтанного тромбообразования в интенсивных потоках" (рук. Г.Т. Гурия).

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Узлова, Светлана Геннадьевна, 2008 год

1. Alves С.Н., Machado J.C. Measurement of plasma clotting time using ultrasonicshear waves. // Physiol. Meas. 1994 Aug, 15(3), p. 309-16.

2. Ataullakhanov F.I., Guria G.T., Sarbash V.I., Volkova R.T. Spatiotemporaldynamics of clotting and pattern formation in human blood. // Biochim. et Biophys. Acta, 1998, v. 1425, p.453-468.

3. Baglin T. The measurement and application of thrombin generation. Review. //

4. British Journal of Haematology, 2005, 130(5), p.653-661.

5. Baglin T., Palmer C.R., Luddington R., Baglin C. Unprovoked recurrent venousthrombosis: prediction by D-dimer and clinical risk factors. // J Thromb Haemost. 2008 Jan 8, p.577-582.

6. Barrowcliffe T.W., Cattaneo M., Podda G.M., Bucciarelli P., Lussana F., Lecchi,

7. A., Toh C.H., Hemker H.C., Béguin S., Ingerslev J., Sorensen B. New approaches for measuring coagulation. // Haemophilia 2006, 12, p.76-81.

8. Beltrami E., Jesty J. Mathematical analysis of activation thresholds in enzymecatalyzed positive feedbacks: application to the feedbacks of blood coagulation. // PNAS, 1995, v. 92(19), p.8744-8748.

9. Black I.W. Spontaneous Echo Contrast: Where There's Smoke There's Fire. //

10. Echocardiography 2000, 17(4), p.373-382.

11. Born G.V.R. Aggregation of blood platelets by adenosine diphosphate and itsreversal. // Nature, June 9, 1962, pp.927.

12. Boynard M., Lelievre J.C., Guillet R. Aggregation of red blood cells studied byultrasound backscattering. // Biorheology 1987; 24, p.451-461.

13. Brummel-Ziedins K., Undas A., Orfeo T., Gissel M., Butenas S., Zmudka K.,

14. Mann K.G. Thrombin generation in acute coronary syndrome and stable coronary artery disease: dependence on plasma factor composition. // J Thromb Haemost. 2008 Jan; 6(1), p. 104-110.

15. Butenas S., Mann K.G. Caution in the interpretation of continuous thrombingeneration assays. // J Thromb Haemost. 2007 May; 5(5), p. 1084-5; author reply 1085-7.

16. Campani R., Calliada F., Bottinelli O., Bozzini A., Sommaruga M.G., Draghi F.,

17. Anguissola R. Contrast enhancing agents in ultrasonography: clinical applications. // Eur J Radiol. 1998 May; 27 Suppl 2, p. 161-170.

18. Carlo-Filho M.M., Machado J.C. Measuement of ultrasonic attenuationcoefficient of human blood plasma during clotting in the frequency rangt of 8 to 22 MHz. // Ultrasound Med. Biol., 2006 Jul, 32(7), p.1055-1064.

19. Chen R., Doolittle R.F. Isolation, characterization and location of a donoracceptor unit from cross-linked fibrin. // Proc. Natl. Acad.Sci. USA 66, 1970, p.472-479.

20. Chow T.W, Heliums J.D, Moake J.L, Kroll M.H. Shear stress-induced von

21. Willebrand factor binding to platelet glycoprotein lb initiates calcium influx associated with aggregation. // Blood 1992, v. 80, p. 113-120.

22. Collins P.W., Hirsch S., Baglin T.P., Dolan G., Hanley J., Makris M., Keeling

23. D.M., Liesner R., Brown S.A., Hay C.R. Acquired hemophilia A in the United Kingdom: a 2-year national surveillance study by the United Kingdom Haemophilia Centre Doctors' Organisation. // Blood 2007;109(5), p.1870-1877.

24. Colman R.W., Marder V.J., Clowes A.W., George J.N., Goldhaber, S.Z.

25. Hemostasis and Thrombosis. Basic Principles and Clinical Practice, 5th edn. -Philadelphia, PA: Lippincott Williams & Wilkins. 2006, pp 1578.

26. Correas J.M., Bridal L., Lesavre A., Méjean A., Claudon M., Hélénon О.

27. Ultrasound contrast agents: properties, principles of action, tolerance, and artifacts. //Eur Radiol. 2001; 11(8), p.1316-1328.

28. Cullinane M., Markus H.S. Evaluation of a 1 MHz transducer for transcranial

29. Doppler ultrasound including embolic signal detection. // Ultrasound Med Biol. 2001 Jun; 27(6), p.795-800.

30. Chung E., Fan L., Degg C., Evans D. Detection of Doppler embolic signals:

31. Psychoacoustic considerations. // Ultrasound Med.Biol. 2005;31(9), p. 11771184.

32. Dahlback B. Blood coagulation. Review. // Lancet.; 355(9215), p.1627-1632.

33. Davie E.W. Biochemical and Molecular Aspects of the Coagulation Cascade. // J

34. Thromb Haemost 1995, 74(1), p.1-6.

35. Davie E.W. A brief historical review of the waterfall/cascade of bloodcoagulation. // J Biol Chem. 2003; 278(51), p.50819-50832.25. de Genne, P.-G. Scaling Consepts in Polymer Physics. Ithaca and London:

36. Cornell Universoty Press. 1979, pp.324.

37. Droste D.W., Hagedorn G., Notzold A., Siemens H.-J., Sievers H. H., Kaps M.

38. Bigated Transcranial Doppler for the Detection of Clinically Silent Circulating Emboli in Normal Persons and Patients With Prosthetic Cardiac Valves. // Stroke 1997; 28(3), p.588-592.

39. Ercan E., Baris N., Tengiz I., Ercan H.E., Onbasili O.A., Duman C., Cinar C.S.

40. Femoral signal intensity. A new method for prediction of embolic risk. // Jpn Heart J 2003, 44, p.705-712.

41. Erbel R., Stern H., Ehrenthal W., Schreiner G., Treese N., Kramer G., Thelen M.,

42. Schweizer P., Meyer J. Detection of spontaneous echocardiographic contrast within the left atrium by transesophageal echocardiography: spontaneous echocardiographic contrast. // Clin Cardiol 1986; 9, p.245-252.

43. Esmon C.T. Regulation of blood coagulation. // Biochim Biophys Acta 2000;1477, p.349-360.

44. Esmon C.T. The protein C anticoagulant pathway. // Arterioscler Thromb 1992;12(2), p.135-145.

45. Falati S., Gross P., Merrill-Skoloff G., Furie B.C., Furie B. Real-time in vivo imaging of platelets, tissue factor and fibrin during arterial thrombus formation in the mouse. // Nat Med 2002; 8, p. 1175-1181.

46. Falkovich G., Sreenivasan K.R. Lessons from hydrodynamic turbulence. //

47. Physics Today 2006; 59, p.43-49.

48. Fatkin D., Loupas T., Low J., Feneley M. Inhibition of red cell aggregationprevents spontaneous echocardiographic contrast formation in human blood. // Circulation 1997; 96, p.889-896.

49. Feigenbaum H. Echocardiography. 2nd ed. Philadelphia. Lea and Febiger, 1976,pp.350.

50. Furie B., Furie B.C. In vivo thrombus formation. Review. // J Thromb Haemost2007;5 Suppl 1, p. 12-17.

51. Gao S., Wong K.S., Hansberg T., Lam W.W.M., Droste D.W., Ringelstein E.B.

52. Microembolic Signal Predicts Recurrent Cerebral Ischemic Events in Acute

53. Stroke Patients With Middle Cerebral Artery Stenosis. // Stroke 2004;35(12), p.2832-2836.

54. Gennisson J.L., Lerouge S., Cloutier G. Assessment by transient elastography ofthe viscoelastic properties of blood during clotting. // Ultrasound Med Biol 2006;32, p.1529-1537.

55. Ghalichi F., Deng X., Champain A., Douville Y., King M., Guidoin R. Low

56. Reynolds number turbulence modeling of blood flow in arterial stenosis. // Biorheol 1998;35, p.281-294.

57. Gladner J.A.The action of thrombin on fibrinogen. // In: Fibrinoben. K. Laki, Ed.,

58. Marcel Dekker, New York 1968, p.87-115.

59. Gotto S., Ikeda Y., Saldivar E., Ruggeri Z.M. Distinct mechanisms of plateletaggregation as a consequence of different shearing flow conditions. // J Clin Invest 1998; 101(2), p.479-486.

60. Gurflnkel Y.I., Korol O.A., Kufal G.E. Computer capillaroscopy as a newcardiological diagnostics method. // In Optical Investigations of Cells In Vitro and In Vivo (ed. D.L. Farkas, R.C. Leif, B.J. Tromberg) Proc.SPIE 1998;3260, p.232235.

61. Guria G.Th., Herrero M.A., Zlobina, K.E. A mathematical model of bloodcoagulation induced by activation sources. // Discrete and continuous dynamical systems. Series A. 2008 (in press).

62. Guy R.D., Fogelson A.L., Keener J.P. Fibrin gel formation in a shear flow. //

63. Math Med Biol 2007;24(1), p.l 11-130.

64. Hall R., Malia R.G. Medical laboratory haematology. Oxford, UK: Butterworth

65. Heinemann Boston; 1984, pp.162.

66. Hemker H.C., Béguin S. Phenotyping the clotting system. // J Thromb Haemost2000;84, p.747-751.

67. Kitamura H., Sigel B., Machi J., Feleppa E.J., Sokil-Melgar J., Kalisz A., Justin J.

68. Roles of Hematocrit and Fibrinogen in Red Cell Aggregation Determined by Ultrasonic Scattering Properties. // Ultrasound Med Biol 1995;21(6), p.827-832.

69. Home M.K., McCloskey D.J. Factor V Leiden as a common genetic risk factor forvenous thromboembolism. // J Nurs Scholarsh 2006;38, p. 19-25.

70. Huang C.-C., Wang S.-H., Tsui P.-A. Detection of blood coagulation and clotformation using quantitative ultrasonic parameters. // Ultrasound Med Biol 2005;31(11), p.1567-1573.

71. Huang C.-C., Wang S.-H., Tsui P.-A. In Vitro Study on Assessment of Blood

72. Coagulation and Clot Formation Using Doppler Ultrasound. // Jpn J Appl Phys 2005;44(12), p.8727-8732.

73. Huang C.-C., Wang S.-H. Caracterization of Blood Properties from Coagulating

74. Blood of Different Hematocrits Using Ultrasonic Backscatter and Attenuation. // Jpn J Appl Phys2006;45(9A), p.7191-7196.

75. Huang C.-C., Wang S.-H. Assessment of blood coagulation under various flowconditions with ultrasound backscattering. // IEEE Trans Biomed Eng 2007;54, p.2223-2230.

76. Hurwitz A, Yesner R., Cooke RW. Ultrasonic measurement of the effects ofheparin on blood viscosity. // Lab Invest 1952; 1(4), p.463-468.

77. Ikeda Y., Handa M., Kamata T., Kawano K., Y. Kawai, Watanabe K., Sakai K.,

78. Mayumi F., Itagaki I., Yoshioka A., Ruggeri Z.M. Transmembrane calcium influx associated with vWf binding to GPIb in the initiation of shear-induced platelet aggregation. // J Thromb Haemost 1993;69(5), p.496-502.

79. Iliceto S., Antonelli G., Sorino M., Biasco G., Rizzon P. Dynamic intracavitaryleft atrial echoes in mitral stenosis. // Am J Cardiol 1985;55, p.603-606.

80. Jacobs J.E., Malinka A.V., Haque P., Jhabvala M.D. Ultrasound spectroscopyapplied to blood coagulation studies. // Ultrasonics 1976; 14(2), p.84-90.

81. Jesty J., Beltrami E. Positive feedbacks of coagulation: their role in thresholdregulation. Review. // Arterioscler Thromb Vase Biol 2005;25(12), p.2463-2469.

82. Jesty J., Rodriguez J., Beltrami E. Demonstration of a Threshold Response in a

83. Proteolytic Feedback System: Control of the Autoactivation of Factor XII. // Pathophysiol Haemost Thromb 2005;34, p.71-79.

84. KaibaraM. Rheology of blood coagulation. //Biorheology 1996;33(2), p.101-117.

85. Kaposzta Z., Young E., Bath P.M.W., Markus H.S. Clinical Application of

86. Asymptomatic Embolic Signal Detection in Acute Stroke: A Prospective Study. //Stroke 1999;30(9), p.1814-1818.

87. Kartamyshev S.P., Balashov S.A., Melkumyants A.M. Role of Endothelium

88. Sensitivity to Shear Stress in Noradrenaline-Induced Constriction of Feline Femoral Arterial Bed under Constant Flow and Constant Pressure Perfusions // J Vase Res 2007;44(1), p.1-10.

89. Kessels H., Willems G.M., Hemker H.C. Analysis of thrombin generation inplasma. // Comput Biol Med 1994;24, p.277-288.

90. Khanin M.A., Semenov V.V. A mathematical model of the kinetics of bloodcoagulation. // J Theor Biol 1989;136, p.127-134.

91. Kogan A.E., Kardakov D.V., Khanin M.A. Analysis of the activated partialthromboplastin time test using mathematical modeling. // Thromb Res 2001;101, p.299-310.

92. Kramoroff A., Nigretto J.M. In vitro factor XI activation mechanism according toan optimized model of activated partial thromboplastin time test. // Blood Coagul Fibrinolysis 2001; 12, p.289-299.

93. Kulkarni S., Dopheide S.M., Yap C.L., Ravanat C., Freund M., Mangin P., Heel

94. K.A., Street A., Harper I.S., Lanza F., Jackson S.P. A revised model of platelet aggregation. // J Clin Invest 2000;105(6), p.783-791.

95. Levi M. Hemostasis in the 21st century. Review.// Neth J Med 1999;55(6), p. 280286.

96. Levi M. Disseminated intravascular coagulation. // Critical Care Medicine 2007;35, p. 21-91.

97. Lobanov A.I., Starozhilova T.K. The Effect of Convective Flows on Blood

98. Coagulation Processes. // Pathophysiol Haemos Thromb 2005;34, p.121-134

99. Lobanov A.I., Starozhilova, T.K. Effect of Convective Flows on Formation of

100. Two Dimensional Structures in the Model Blood Coagulation. // Phystech J 1997;3 (2), p. 96-104.

101. Lu G., Broze G.J., Krishnaswamy S. Formation of factors IXa and Xa by theextrinsic pathway: differential regulation by tissue factor pathway inhibitor and antithrombin III. // J Biol Chem 2004;279, p.17241-17249.

102. Machado J.C., Lenzi A., Silva W.G. An ultrasnic method to measure humanplasma coagulation time. // J Acoust Soc Am 1991;90(4 Pt 1), p. 1749-1753.

103. Machado J.C., Kruger M.A., Fontes E.M.A., Almedia M.M.G. Evaluation of anultrasonic method applied to the measurement of blood coagulation time. // Pysiol Meas 1997;18, p.129-143.

104. Mackinnon A.D., Aaslid R., Markus H.S. Long-Term Ambulatory Monitoring for

105. Cerebral Emboli Using Transcranial Doppler Ultrasound. // Stroke 2004;35(1), p.73-78.

106. MannK.G., Van't VeerC., CawthernK., Butenas S. The role of the tissue factorpathway in initiation of coagulation. //Blood Coagul. Fibrinolysis 1998;9, p.3-7.

107. Markus H. Importance of Time-Window Overlap in the Detection and Analysis of

108. Embolic Signals. // Stroke 1995;26(11), p.2044-2047.

109. Markus H.S., Punter M. Can Transcranial Doppler Discriminate Between Solidand Gaseous Microemboli? Assessment of a Dual-Frequency Transducer System. // Stroke 2005 ;36(8), p. 1731-1734.

110. Merino A., Hauptman P., Badimon L., Badimon J.J., Cohen M., Fuster V.,

111. Goldman M. Echocardiographic "Smoke" Is Produced by an Interaction of Erytrocytes and Plasma Proteins Modulated by Shear Forces. // JACC 1992;20(7), p.1661-1668.

112. Mikell F.L., Asinger R.W., Elsperger K.J., Anderson W.R., Hodges M. Regionalstasis of blood in the dysfunctional left ventricle: echocardiographic detection and differentiation from early thrombosis. // Circulation 1982;66, p.755-763.

113. Mittal R., Simmons S.P., Udaykumar H.S. Application of large-eddy simulationto the study of pulsatile flow in a modeled arterial stenosis. // J Biomech Engineer 2001;123, p.325-332.

114. Moehring M.A., Klepper J.R.Pulse Doppler ultrasound detection, characterizationand size estimation of emboli in flowing blood. Biomedical Engineering. // IEEE Transactions on 1994;41(1), p.35-44.

115. Monsuez J.J., Miclea J.M., Brice P., Chauveinc L., Boiron M. Platelet infusionrelated echocardiographic contrast. // Am J Cardiol 1990;66, p.244-244.

116. Mosesson M.W. Fibrinogen and fibrin structure and functions. Review. // J

117. Thromb Haemost 2005;3(8), p.1894-1904.

118. Muga K.M., Melton L.G., Gabriel D.A. A flow dynamic technique used to assessglobal homeostasis. // Blood Coag Fibrin 1995;6, p.73-78.

119. Nakajima H., Kaibara M., Suzuki Y. Influence of blood flow the intravascularthrombus formation In vivo study using hybrid vascular model. // J Jpn Soc Thromb. Hemost 1995;6, p.86-94.

120. Niemiarowski S., Regoeczi E., Stewart G.J. Platelet interaction with polymerizingfibrin. // J Clin Invest 1972;51, p.685-700.

121. Olson S.T., Shore J.D. Kinetic characterization of heparin-catalyzed anduncatalyzed inhibition of blood coagulation proteinases by antithrombin. // Methods Enzymol 1993;222, p.525-559.

122. Ossant F., Libgot R., Coupe P., Lermusiaux P., Patat F. High frequencyultrasound characterization of the coagulation process of whole blood. // Ultrasonics Symposium, 2004 IEEE 2, p.846-849.

123. O'Brein J.R. Shear-induced platelet aggregation. // Lancet 1990; 335, p.711-713.

124. Pakhilko A.V., Ataullakhanov F.I. Contact Activation of Blood Coagulation:

125. Trigger Properties and Hysteresis. // J Theor Biol 1998; 191, p.213-219.

126. Panteleev M.A., Ovanesov M.V., Kireev D.A., Shibeko A.M., Sinauridze E.I.,

127. Ananyeva N.M., Butylin A.A., Saenko E.L., Ataullakhanov F.I. Spatial propagation and localization of blood coagulation are regulated by intrinsic and protein С pathways, respectively. // Biophys J 2006;90(5), p. 1489-1500.

128. Peeters H., Stenhoudt G., Decroix G. Ultrasonic measurments of coagulation andfibrinolisis. // J Clin Path 1964;17, p.320-323.

129. Prisco D., Paniccia R. Point-of-Care Testing of Hemostasis in Cardiac Surgery. //1. Thromb J 2003; 1, pp.l.

130. Rastegar R., Harnick D.J., Weidemann P., Fuster V., Coller В., Badimon J.J.,

131. Chesebro J., Goldman M.E. Spontaneous echo contrast videodensity isflow-related and is dependent on the relative concentrations of fibrinogen and red blood cells. // J Am Coll Cardiol 2003;41(4), p.603-610.

132. Reininger A.J., Heijnen H.F.G., Schumann H., Specht H.M., Schramm W.,

133. Ruggeri Z.M. Mechanism of platelet adhesion to von Willebrand factor and microparticle formation under high shear stress // Blood 2006; 107(9), p.3537-3545.

134. Reynolds O. On the Dynamical Theory of Incompressible Viscous Fluids and the

135. Determination of the Criterion. // Phil Trans Roy Soc 1895; 186, p. 123-161.

136. Ringelstein E.B., Droste D.W., Babikian V.L., Evans D.H., Grosset D.G., Kaps

137. M., Markus H.S., Russell D., Siebler M. Consensus on microembolus detection by TCD. // Stroke 1998;29, p.725-729.

138. Ruggeri Z.M. Mechanisms of shear-induced platelet adhesion and aggregation. //

139. TrombHaemost 1993;70(1), p. 119-123.

140. Russell D., Brucher R. Embolus Detection and differentiation using multifrequency transcranial doppler. // Stroke 2005;36(4), p.706-706.

141. Russell D., Brucher R. Online automatic discrimination between solid and gaseous cerebral microemboli with the first multifrequency transcranial doppler. // Stroke 2002;33(8), p.1975-1980.

142. Sakariassen K.S. Shear-induced platelet activation and platelet microparticle formation in native human blood. // Thromb Res 1998;92, p.33-41.

143. Schaberle W., Herwig B. Ultrasonography in vascular diagnosis: a therapy-oriented textbook and atlas. Springer-Verlag 2005, pp.356.

144. Schenone M., Furie B.C., Furie B. The blood coagulation cascade. // Curr Opin Hemetol 2004; 11, p.272-277.

145. Shung K.K., Thieme G.A. Ultrasonic Scattering in Biological Tissues. Boca Raton, FL: CRC, 1993, pp.499.

146. Shung K.K., Fei D.Y., Ballard J.O. Future studies on ultrasonic properties of blood clots. // J Clin Ultrasound 1986;14(4), p.269-275.

147. Shung K.K., Fei D.Y., Yuan Y.W., Reeves W.C. Ultrasonic characterization of blood during coagulation. // J Clin Ultrasound 1984;12(3), p.147-153.

148. Shung K.K. Diagnostic Ultrasound: Imaging and Blood Flow Measurements. -CRC-Press, 2005, pp.232.

149. Sigel B., Machi J., Beitler J.C., Justin J.R. Red cell aggregation as a cause of blood-flow echogenicity. // Radiology 1983;148(3), p.799-802.

150. Sigel B., Coelho J.C., Schade S.G., Justin J., Spigos D.G. Effect of plasma proteins and temperature on echogenicity of blood. // Invest Radiol 1982;17(1), p.29-33.

151. Sigel B., Machi J., Beitler J.C., Ramos J.R., Justin J.R., Feinberg H. Ultrasonic detection of red cell aggregation immediately preceding blood clotting. // Invest Radiol 1984;19(5), p.458-461.

152. Slofstra S.H., Spek C.A., ten Cate H. Disseminated intravascular coagulation. Review.// Hematol J 2003;4(5), p.295-302.

153. Spronk H.M.H., van der Voort, D., ten Cate H. Blood coagulation and the risk of atherothrombosis: a complex relationship. // Thromb J 2004, p.2-12.

154. Strutt J.W. (Baron Rayleigh) The theory of sound, vol. 2, 2nd edn. London: Macmillan. 1896

155. Tanaka A., Saijo Y. Blood Flow Visualization of Left Atrial Spontaneous Echo Contrast (SEC) Using gradient based optical flow estimation. // Conf. Proc. IEEE Eng Med Biol Soc 2007; 1, p.4500-4503.

156. Turitto V.T, Connie L.H. Mechanical factors affecting homeostasis and thrombosis. // Thromb Res 1998;92, p.25-31.

157. Turitto V.T., Weiss H.J., Baumgartner H.R. Platelet interaction with subendothelium in von Willebrand's disease: Altered thrombus formation distinct from defective platelet adhesion. // J Clin Invest 1984;74, p. 173 0-1741.

158. Uzlova S.G., Guria K.G., Guria G.Th. Acoustic determination of early stages of intravascular blood coagulation. // Phil Trans Roy Soc 2008;366(1880), p.3649-3661.

159. Virchow R. Phlebose und Tronbose im Gefasssystem. Gesammelte Abhadlungen zur wissenschaftlichen Medizin. -Frankfurt, 1856.

160. Vogler E.A., GraperJ.C., Harper G.R., Lander L.M., Brittain W.J. Contact activation of the plasma coagulation cascade. I. Procoagulant surface energy and chemistry. // J Biomed Mater Res 1995;29, p. 1005-1016.

161. Voleisis A., Kazys R., Mazeika L., Sliteris R., Voleisiene B., Grybauskas P. Ultrasonic method for the whole blood coagulation analysis. // Ultrasonics 2002;40, p. 101-107.

162. Wagenvoord R., Hemker P.W., Hemker H.C. The limits of simulation of the clotting system. // J Thromb Haemost 2006;4, p.1331-1338.

163. Wang X.F., Liu L., Cheng Т.О., Deng Y.B., Wang J.E. The relationship between intracardiovascular smoke-like echo and erythrocyte rouleaux formation. // Am Heart J 1992; 124, p.961-965.

164. Weisel J.W. Fibrin assembly. Lateral aggregation and the role of the two pairs of fibrinopeptides. // Biophys J 1986;50, p. 1079-1093.

165. Willems G.M., LindhoutT., Hermens W.Th., HemkerH.C. Simulation model for thrombin generation in plasma. // Haemost 1991;21, p. 197-207.

166. Wiman В., Collen D., Molecular mechanism of physiological fibrinolysis. // Nature 1978;272, p.549-550.

167. World Health Organization 2004 The world health report 2004 changing history, p.l22-123.

168. Yang Y., Grosset D.G., Li Q., Shuaib A., Lees K.R. Turbulence and Circulating Cerebral Emboli Detectable at Doppler Ultrasonography: A Differentiation Study in a Stenotic Middle Cerebral Artery Model AJNR // Am J Neuroradiol 2002; 23(7), p.1229-1236.

169. Yang Yi., Grosset D.G., Li Q., Lees K.R. Identification of echocardiographic "smoke" in a bench model with transcranial doppler ultrasound. // Stroke 2000;31, p.907-914.

170. Yongchareon W., Yong D.F. Initiation of turbulence in models of arterial stenosis. //JBiomech 1979; 12, p. 185-196.

171. Yuan Y.W., Shung K.K. Ultrasonic backscatter from flowing whole blood. II: Dependence on frequency and fibrinogen concentration. // J Acoust Soc Am 1988;84(4), p.l 195-1200.

172. Zarnitsina V.I., Pokhilko A.V., Ataullakhanov F.I. A mathematical model for the spatio-temporal dynamics of intrinsic pathway of blood coagulation. II. Results. // Thromb Res 1996;84(5), p.333-344.

173. Zotz R.J., Miiller M., Genth-Zotz S., Darius H. Spontaneous Echo Contrast Caused by Platelet and Leukocyte Aggregates? II Stroke 2001;32, p.l 127-1133.

174. Zwaal R.F.A., Hemker H.C. Blood coagulation. Amsterdam 1986: Elsevier.

175. Баркаган 3.C., Момот А.П. Основы диагностики нарушений гемостаза. -М.: «Ньюдиамеед-АО», 1999, 244 с.

176. Бузиашвили Ю.И., Шумилина М.В., Патогенез ишемических нарушений головного мозга. // Эндоваскулярная хирургия при патологиибрахиоцефальых артерий. Издательство НЦССХ им. А.Н. Бакулева РАМН 2001, с.25-28.

177. Бутенас С., Манн К.Г. Свертывание крови. // Биохимия 2002, 67(1), с.5-15.

178. Воробьев А.И., Городецкий В.М., Шулудко Е.М., Васильев С.А. Острая массивная кровопотеря. -М.: ГЭОТАР-МЕД 2001, 175с.

179. Грибаускас П.С. и др. Ультраакустические параметры свертывания крови. // Ультразвук в физиологии и медицине 1972;1, с.73-74.

180. Гузеватых А.П. Пороговая гидродинамическая активация внутрисосудистого тромбообразования вследствие развития стеноза. // Диссертация на соискание ученой степени кандидата физико-математических наук, МГУ, 2000, 105с.

181. Гузеватых А.П., Лобанов А.И., Гурия Г.Т. Математическое моделирование активации внутрисосудистого тромбообразования вследствие развития стеноза. // Математическое моделирование 2000; 12(4), с.39-60.

182. Гурия Г.Т. Макроскопическое структурообразование в динамике крови в свете теории неравновесных структур. // Диссертация на соискание ученой степени доктора физико-математических наук, ГНЦ РАМН, 2003, 349с.

183. Гурия Г.Т., Узлова С.Г., Шевелев A.A., Васильев С.А., Гурия К.Г. Акустически детектируемые микросгустки как предвестники внутрисосудистых тромботических постоперационных осложнений. // Бюллетень НЦССХ им. А.Н. Бакулева РАМН 2007;8(3), с.154-154.

184. Гурия К.Г., Узлова С.Г., Шевелев A.A., Васильев С.А. Акустическое детектирование ранних этапов тромбообразования. // Сб. тезисов 11-ой международной Пущинской школы-конференции «Биология наука XXI века» 2007, с.241-241.

185. Давыдовский И.В. Общая патология человека. (2-е издание) -М.: Изд. «Медицина», 1969, 611с.

186. Дебейки М. Новая жизнь сердца, М.: Гэотар Медицина, 1998, 500с.

187. Добровольский А.Б., Титаева E.B. Система фибринолиза: регуляция активности и физиологические функции ее основных компонентов. // Биохимия 2002;67(1), с.116-126.

188. Дранник Г.Н., Ена Я.М., Варецкая Т.В. Продукты расщепления фибрина/фибриногена при патологических процессах (биохимические и клинические аспекты). Киев, "Здоров'я" 1987, 184с.

189. Злобина К.Е. Гурия Г.Т. Акустически детектиуемая внутрисосудистая микро-агрегация, вызванная патологическими процессами в тканях. Математическая модель. Соотношение подобия. // Тромбоз, Гемостаз и Реология 2006;2, с.3-14.

190. Зубарев А.Р., Григорян P.A. Ультразвуковое ангиосканирование. М.: Медицина, 1991, 173с.

191. Зубарев A.B. Неинвазивная (или малоинвазивная) ультразвуковая ангиография. Кремлевская медицина. // Клинический вестник 1998;4, с.68-71.

192. Инструкция по фракционированию консервированной крови на клеточные компоненты и плазму. // -М.: Министерство здравоохранения, 1987, №0614/24.

193. Козинец Г.И., Макаров В.А. Исследование системы крови в клинической практике. //-М.: 1997, 216с.

194. Кудряшов Б.А. Биологические проблемы регуляции жидкого состояния крови и ее свертывания. Мое. Медицина 1975, 488с.

195. Ландау Л.Д., Лифшиц Е.М. Теоретическая физика. Том VI. Гидродинамика. Изд.: ФИЗМАТЛИТ®, 2003, 736 с.

196. Ландсберг Г.С. Оптика. М.: Физматлит, 2003, 6-е издание, 848с.

197. Лобанов А.И., Старожилова Т.К., Гурия Г.Т. Качественное исследование начального этапа формирования неравновесных структур в модели типа «реакция-диффузия». // Математическое моделирование 1997;9(12), с.З-15.

198. Макаров В.А., Горбунова H.A. Гемостаз и реология крови. -М.: "Триада-фарм", 2003, 104с.

199. Мелькумянц A.M., Балашов Т.А., Смишко В., Хаютин В.М. Избирательное включение чувствительности артерии к скоростикровотока глутаровым альдегидом. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины 1998; 101(5), с.524-526.

200. Панченко Е.П., Добровольский А.Б. Тромбозы в кардиологии. -М:: Спорт и культура, 1999. 464с.

201. Панченко Е.П., Кропачева Е.С. Профилактика тромбоэмболий у больных мерцательной аритмией. -М.: ООО "Медицинское информационное агенство", 2007, 144 с.

202. Практическое руководство по ультразвуковой диагностике. Под ред. В.В. Митькова. М.: Видар-М, 2005, 720с.

203. Профилактика тромбоэмболических осложнений у хирургических больных в многопрофильном стационаре: методические рекомендации. Под ред. Шевченко Ю.Л., Савельева B.C. М.: Медицина, 2003, 29с.

204. Руксин В.В. Тромбозы в кардиологической практике. М.: Biniom Publishers. СПб. Невский Диалект, 1998, 125с.

205. Савельев B.C., Кошкин В.М. Критическая ишемия нижних конечностей. -М.: Медицина, 1997, 160с.

206. Струкова С.М., ТкачукВ.А. Протеиназы системы свертывания крови и фибринолиза как клеточные регуляторы (гл. ред. Скулачев В.П.). // Биохимия, -М.: Наука, 2002, 67(1), с.3-5.

207. Стуров В.Г., Чупрова A.B., Антонов А.Р., Анмут С.Я. Конечный этап свертывания крови в норме и патологии. // Тромбз, гемостаз и реология 2006, 3(27), с.26-29.

208. Узлова С.Г. Гидродинамическая активация системы свертывания крови в потоках со сложной геометрией. // Бакалаврская работа, 2001, 36с.

209. Узлова С.Г. Гидродинамические механизмы активации свертывания крови в потоках со сложной геометрией. // Магистрская работа, 2003, 43с.

210. Узлова С.Г., Гурия Г.Т., Шевелев A.A. Допплерография свертывания крови в интенсивных потоках. // Сб. тезисов 10 Пущинской школы-конференции «Биология наука XXI века» 2006, с.168-168.

211. Узлова С.Г., Гурия Г.Т., Шевелев A.A., Васильев С.А., Гурия К.Г. Акустическое детектирование ранних этапов тромбообразования. // Сб. тезисов, материалы 13 Всероссийской научной конференции студентов-физиков и молодых ученых 2007, с.482-482.

212. Узлова С.Г., Гурия К.Г., Шевелев A.A., Васильев С.А., Гурия Г.Т. Неинвазивная регистрация нарушений гемостаза акустическими методами. // Бюллетень НЦССХ им. А.Н. Бакулева РАМН, Сердечнососудистые заболевания. Приложение. 2007;8(6), с.245-245.

213. Хилл К. Применение ультразвука в медицине. Физические основы. М. Мир, 1989, 560с.

214. Чуличков A.JL, A.B. Николаев, А.И. Лобанов, Г.Т. Гурия Моделирование динамики тромбообразования в кровотоке. // Математическое моделирование, 2000, т. 12, № 3, с.76-95.

215. Шевкопляс С.С. Экспериментальное изучение пространственного тромбообразования в интенсивных потоках in vitro. // Дипломная работа на соискание учёной степени магистра наук, 2000, 65с.

216. Шмидт Р., Тевс Г. Физиология человека, т. 2. -М.: Мир, 1996, 313с.

217. Шумилина М.В. Комплексная ультразвуковая диагностика патологии периферических сосудов. Учебно-методическое руководство. М.: НЦССХ им. Бакулева РАМН 2007, 310 с.