Адренорецепторы и норадреналин головного мозга в ходе нормального и модифицированного глюкокортикоидами развития тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.13, кандидат биологических наук Юшкова, Анна Александровна

• Юшкова, Анна Александровна
• кандидат биологических наук
• 1998

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Юшкова, Анна Александровна

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. АДРЕНЕРГИЧЕСКИЕ

РЕЦЕПТОРЫ В ОНТОГЕНЕЗЕ МЛЕКОПИТАЮЩИХ

1.1. Структура норадренергической системы головного мозга

и ее формирование в онтогенезе

1.2. Распределение подтипов адренорецепторов в отделах мозга

и их локализация в синапсе

1.3. Молекулярная структура адренорецепторов и механизм

трансдукции медиаторного сигнала

1.4. Регуляция функции и числа адренорецепторов

1.4.1 Эффекты медиатора

1.4.2 Действие стероидных гормонов

1.5. Формирование рецепторного звена норадренергической системы в онтогенезе

1.6. Эффекты норадреналина и стероидных гормонов на онтогенез рецепторного звена норадренергической

системы

1.6.1. Действие медиатора

1.6.2. Эффекты глюкокортикоидов

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Животные

2.2. Экспериментальные воздействия

2.3. Получение и приготовление образцов ткани мозга для последующих анализов

2.4. Радиолигандное определение количества и

аффинности адренергических рецепторов

2.5. Определение количества мРНК агд-адренорецепторов

2.6. Определение содержания норадреналина

2.7. Статистическая обработка результатов

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ

3.1 Изменение в онтогенезе плотности адренергических рецепторов и содержания норадреналина в головном

мозге крыс

3.1.1. Норадреналин

3.1.2. а2-адренорецепторы

3.1.3. (3-адренорецепторы

3.1.4. Содержание норадреналина и плотность адренорецепторов

в развивающемся мозге

3.2. Онтогенез плотности адренергических рецепторов и содержания норадреналина в головном мозге крыс

после пренатального воздействия глюкокортикоидами

3.2.1 Норадреналин

3.2.2. а2-адренорецепторы

3.2.3. мРНК а2А-адренорецепторов мозга

3.2.4. /3-адренорецепторы

3.2.5. ¡З-адренорецепторы коры головного мозга при изменении уровня норадреналина

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Адренорецепторы и норадреналин головного мозга в ходе нормального и модифицированного глюкокортикоидами развития»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы. Закономерности формирования нейромедиаторных систем мозга в онтогенезе являются одним из центральных объектов исследования современной нейробиологии. На ранних этапах развития закладываются основы последующей функциональной активности этих систем, определяющих физиологические и поведенческие особенности взрослого организма. Нейромедиатор норадреналин участвует в регуляции поведения и многих физиологических функций (Буданцев, 1976). Медиаторный сигнал воспринимается специфическими белками - адренорецепторами (Манухин, 1968; Сергеев, Шимановский, 1987; Шишкина, Дыгало, 1997). Формирование рецепторного звена норадренергической системы мозга у крыс начинается во второй половине эмбрионального развития и заканчивается к двухмесячному возрасту. В эти же сроки онтогенеза в головном мозге происходит быстрое становление систем синтеза, выделения и обмена норадреналина (Раевский, 1991).

У взрослого организма повышение уровня норадреналина в синаптической щели снижает по механизму с1о\уп-регуляции количество постсинаптических (3-рецепторов (Наскоск, Ма1Ьоп, 1988), а активация пресинаптических а2-рецепторов угнетает синтез и высвобождение медиатора норадренергическим нейроном (Ву1ипс1 е1.а1., 1995). Такая регуляция, вероятно, способна координировать онтогенез медиаторного и рецепторного звеньев системы. Вместе с тем, взаимоотношения этих звеньев в раннем онтогенезе до последнего времени оставались неясными. Дополнительные возможности для выявления связей между ними в формирующейся норадренергической системе может предоставить модификация ее онтогенеза пренатальным воздействием глюкокортикоидами,

которое изменяет уровень норадреналина в развивающемся мозге (Дыгало и др., 1991, 1993).

Последствия воздействия глюкокортикоидов представляют и самостоятельный интерес. Уровень этих гормонов в организме повышается при стрессе или гормонотерапии. Не исключено, что влияние пренатального стресса на количество адренорецепторов мозга потомства (Peters, 1984) обеспечено этими гормонами. Длительные эффекты стероидов на адренорецепторы могут быть обусловлены их влиянием на уровень норадреналина и, кроме того, непосредственным действием глюкокортикоидов на экспрессию генов, кодирующих эти рецепторы (Kuroda et.al., 1993). Вместе с тем, ни внутрисистемные (медиатор-рецепторные), ни внешние по отношению к данной системе (глюкокортикоидные) эффекты на развитие ее рецепторного звена до последнего времени оставались практически неисследованными.

Изучение этих эффектов будет способствовать пониманию регуляторных процессов онтогенеза рецепторного звена норадренергической системы головного мозга и выяснению механизмов длительных последствий ранних воздействий для функций взрослого организма, зависящих от этой медиаторной системы. Такие сведения могут оказаться полезными и при разработке в дальнейшем способов влияния на развитие нейрохимической системы мозга и коррекции онтогенетических дефектов её функции.

Цель и задачи исследования-. Основной целью работы было выявление и анализ онтогенетических корреляций плотности адренергических рецепторов и уровня норадреналина в головном мозге в ходе нормального и модифицированного глюкокортикоидами развития нейрохимической системы. В связи с этим ставились следующие задачи:

1. Выявить в ходе нормального онтогенеза возможные коррелятивные взаимосвязи между уровнем норадреналина и плотностью а.2- и )3-адренорецепторов в стволе головного мозга -месте расположения основного скопления тел норадренергических нейронов, и в коре, где локализованы их терминали.

2. Изучить влияние повышенного уровня глюкокортикоидов в период эмбриогенеза на последующее развитие этих адренорецепторов в онтогенезе.

3. Провести анализ онтогенетических корреляций между уровнем медиатора и плотностью адренорецепторов на фоне гормональной модификации развития нейрохимической системы.

4. Оценить возможные связи гормональных эффектов на рецепторы с влиянием глюкокортикоидов на уровень норадреналина и на экспрессию генов, кодирующих адренорецепторы.

Научная новизна, В работе впервые установлено, что количество аг- и р-адренорецепторов в стволе головного мозга крыс превышает их число в коре в пренатальный период развития, а характерное для взрослых животных обратное соотношение формируется постнатально. Впервые обнаружен пик повышения количества ал-рецепторов ствола мозга, приходящийся на перинатальный период.

Установлено, что пренатальное воздействие глюкокортикоидами понижает плотность аг-рецепторов в коре головного мозга 35-дневных и взрослых животных, не изменяя сродство рецепторов к лиганду. Это снижение происходит параллельно впервые обнаруженному уменьшению количества мРНК сс2а-рецепторов в этом отделе мозга полуторамесячных

крыс после воздействия глюкокорти коида м и в период эмбриогенеза.

Впервые выявлено, что пренатальное воздействие глюкокортикоидами индуцирует волнообразные отклонения от нормы онтогенеза количества Р-рецепторов в коре мозга с минимумом в первую неделю после рождения и максимумом после второй недели жизни. Эти изменения числа рецепторов происходят в противофазе вызванным гормоном колебаниям содержания норадреналина и затухают одновременно со стабилизацией уровня медиатора. Введение крысятам на 4 - 6 дни жизни а-метилтирозина снижает содержание норадреналина в коре головного мозга в недельном возрасте и пропорционально повышает плотность Р-адренорецепторов. Впервые установлено, что механизм с1ошп-регуляции этих рецепторов норадреналином функционирует уже на ранних этапах онтогенеза.

Обнаружены отрицательная корреляция между количеством аа-рецепторов ствола и уровнем норадреналина коры и положительная корреляция между уровнем норадреналина ствола и р-рецепторов коры головного мозга. Эти корреляции проявляются в ходе нормального онтогенеза и сохраняются при модификации развития норадренергической системы мозга воздействием глюкокортикоидами в пренатальный период.

Теоретическая и практическая значимость. Полученные в работе данные развивают теоретические представления о взаимосвязи пре- и постсинаптических звеньев норадренергической системы в ходе индивидуального развития и о характере изменений онтогенеза нейрохимической системы мозга после нарушения гормонального баланса в эмбриогенезе. Эти сведения необходимы для понимания закономерностей

формирования функции медиаторной системы мозга в онтогенезе. Кроме того, полученные данные могут быть полезны в акушерстве, педиатрии и животноводстве при оценке и коррекции нежелательных последствий нарушения баланса глюкокортикоидов в период внутриутробного развития на функционирование медиаторных систем мозга взрослого организма и регулируемые ими функции. Результаты работы используются в лекционном курсе "Гормоны в онто- и филогенезе" Новосибирского государственного университета. Апробация работы. Материалы данной работы были представлены на V Всесоюзной конференции "Физиология и биохимия медиаторных процессов" (Москва, 1990), Всесоюзном симпозиуме "Биохимия рецепторных систем" (Таллин, 1990), 9 Всеобщем совещании европейского общества нейрохимиков (Дублин, 1992), на отчетных сессиях Института цитологии и генетики СО РАН (1994, 1997), 2 и 3 съездах физиологов Сибири и Дальнего Востока (Новосибирск, 1995; 1997), Всероссийском симпозиуме "Физиология сигнальных молекул" (Москва, 1998), Международном совещании "Моноаминергические и пептидергические нейроны: дифференцировка, пластичность и регуляция экспрессии фенотипа межклеточными сигналами" (Москва, 1998).

По теме диссертации опубликовано 12 печатных работ, в том числе 5 статей в отечественной печати.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ Адрснорецепторы головного мозга в онтогенезе млекопитающих.

1.1. Структура норадренергической системы головного мозга и ее

формирование в онтогенезе

Норадренергическая медиаторная система головного мозга участвует в регуляции ряда физиологических функций и систем организма, например, сердечно-сосудистой и эндокринной систем, регуляции температуры тела, сокращения зрачка, выделения некоторых гормонов гипофиза (Jhanvar-Unial et.al., 1988; Jones, 1988; Bill et.al., 1989; Heal et.aL, 1989; Kimber et.al., 1996; Szabadi, Bradshow, 1996). Различные типы поведения, например, пищевое и питьевое, половое, агрессивное, обучение, ' сон - тоже регулируются норадренергической системой (Layder et.al., 1975; Currie et.aL, 1988; Jones, 1988).

Эту нейрохимическую систему головного мозга составляют в основном норадренергические нейроны и их отростки; клетки, содержащие адреналин, и их волокна составляют лишь 10% от норадренергических (Regen et.al, 1988). Наибольшее скопление норадренергических нейронов находится в оральном отделе дна IV желудочка в области синего пятна - locus coeruleus (рис. 1). Кроме того, норадренергические нейроны располагаются в таких ядрах ствола мозга, как reticularis lateralis nuclei, nuclei tractus solitarii, a также в некоторых других ядрах (Fuxe, 1965; Буданцев, 1976). Норадренергическая иннервация передних отделов мозга осуществляется в основном нейронами синего пятна. Наиболее значительные восходящие пути - дорзальный и

вентральный пучки. . Аксоны адренергических волокон проникают практически во все отделы мозга, но особенно много их окончаний в коре, гипоталамусе и мозжечке (Levitt, Moore, 1979; Schlumpf et.al., 1980; Elias et.al., 1982; Раевский, 1991).

Рис. 1. Схема строения норадренергической системы головного

мозга крыс.

AI - А7 - скопления тел норадреналин-синтезирующих нейронов, в том числе А6 - locus coeruleus - в стволе головного мозга; заштрихованные области - места окончания терминален норадренергических нейронов, в их числе кора.

Дифференцировка нейронов синего пятна у крыс начинается на 10 - 13 день эмбрионального развития, несколькими днями позже в этих нейронах гистохимическими методами можно обнаружить присутствие норадреналина (Lauder, Bloom, 1975). Норадренергические аксоны, развивающиеся в ростральном направлении, иннервируют передние отделы и достигают корковой пластинки на 16-17 день эмбриогенеза, в период интенсивной пролиферации и миграции клеток в неокортекс (Levitt, Moore, 1979; Раевский, 1991). За несколько дней до рождения эти волокна прорастают во фронтальные и латеральные отделы коры и образуют два основных пучка. К моменту рождения эти волокна появляются в затылочной и париетальной зонах коры и начинают ветвиться в первые дни после рождения. В конце первой недели жизни

распределение норадренергических волокон в неокортексе в целом соответствует наблюдаемому у взрослых животных (Раевский, 1991). Общая плотность синапсов в коре новорожденных крысят значительно ниже, чем у взрослых животных. В коре мозга взрослых крыс норадренергические синапсы распределяются, концентрируясь по слоям, параллельно поверхности, плотность их в различных слоях неодинакова (Krist, Molliver, 1976; Раевский, 1991).

Норадреналин в ткани головного мозга обнаруживается гистохимичекими методами на 13 день пренатального развития у мышей (Elias et.al., 1982) и на 15 - у крыс, одновременно с появлением ферментов, обеспечивающих его синтез (Coyle, Henry, 1973). В это время количество медиатора составляет лишь 2% от уровня взрослых животных в целом мозге. К рождению оно увеличивается в 15 раз (Coyle, Henry, 1973; Elias et.al., 1982), а в перинатальном периоде наблюдается непродолжительное резкое увеличение содержания норадреналина - через три-четыре дня содержание медиатора возвращается к прежнему уровню (Elias et.al., 1982).

После рождения содержание медиатора в стволовых отделах мозга, где содержится основное скопление тел нейронов, достигает взрослого уровня быстрее, чем в корковых структурах, где находятся окончания этих нейронов. Так, на 4 день постнатального развития уровень норадреналина в стволе мозга составляет 40% от взрослого, а в коре - около 15-20%. Уровень, характерный для взрослых животных, достигается в стволе к концу первого месяца жизни, а в коре - к концу второго месяца жизни (Posher, Heller, 1972; Nomura et.al., 1976; Morris et.al., 1980). Таким образом, становление уровня норадреналина происходит в основном во время постнатального развития, причем в каудальных отделах раньше, чем в ростральных.

Действие норадреналина и адреналина на клетки-мишени опосредовано специфическими воспринимающими белками -адренорецепторами (Манухин, 1968; Сергеев, Шимановский, 1987). Адренорецепторы выделены из различных тканей, это относительно гидрофобные интегральные мембранные белки.

Адренергические рецепторы являются членами обширного семейства рецепторных белков клеточной мембраны, связанных со своей эффекторной внутриклеточной системой через белки, обладающие GTP-азной активностью (G-белки) (Dixon et.al., 1986; Lefcowitz, Carón, 1988). Через G-белок-сопряженные рецепторы действуют различные лиганды: катехоламины, субстанция Р, вазопрессин, лютеонизирующий гормон и многие другие. Рецепторы этого семейства обеспечивают сигнальную функцию примерно 80% известных нейротрансмиттеров и гормонов (Birnbaumer et.al., 1990; Шишкина, Дыгало, 1997). Адренорецепторы присутствуют в периферических органах на окончаниях нервных волокон и в сосудах, а так же в центральной нервной системе.

В 1948 г. R.Ahlquist, изучая фармакологические эффекты адреналина и норадреналина, пришел к выводу, что существуют два типа периферических адренорецепторов, отличающихся по чувствительности к лигандам, а- и (3-адренорецепторы. Первые опосредуют в основном возбуждение функции органа (сужение сосудов, например), вторые торможение (расслабление сосудов) (Ahlquist, 1948; Сергеев, Шимановский, 1987). К настоящему времени с помощью широкого набора фармакологических препаратов, взаимодействующих с адренорецепторами, и методов молекулярного клонирования проведена более детальная их классификация. Установлено, что а-адренорецепторы делятся на два подкласса: ai- и аг-рецепторы. В свою очередь, в каждом

подклассе выделяют несколько подтипов рецепторов: gua-, cxib-и а|D-aдрепорецепгоры (Perez et.al., 1991; Zilles et.al., 1991, Bylund, 1992; Clark et.al., 1995), ölia-, am- и агс-адренорецепторы (Regan et.al., 1988; Bylund et.al., 1992; Kurose et.al, 1993). Все они кодируются различными генами, лежащими в разных хромосомах. ß-Адренорецепторы также делятся на три подкласса, кодирующиеся различными генами - ßi-, ß>- и ß_v рецепторы (Emorine et.al., 1987; Frielle et.al., 1987; Bahouth et.al., 1989; Granneman et.al., 1993; Brown, Machida, 1994).

1.2. Распределение подтипов адренорецепторов в отделах мозга и

их локализация в синапсе.

Подклассы адренорецепторов имеют свои преимущественные места локализации по отделам мозга. Так, у крыс и мышей наибольшее количество ш-рецепторов находится в обонятельных луковицах, кора больших полушарий занимает среднее место по количеству этих рецепторов, в гиппокампе и синем пятне их количество невелико (Young, Kuhar, 1980; Jones et.al., 1985). аг-Адренорецепторы довольно широко распространены в головном мозге. Высокая плотность их наблюдается во многих ядрах таламуса и гипоталамуса. В то же время в гиппокампе присутствует очень малое количество этих рецепторов (Young, Kuhar, 1980; Goffmet, Caviness, 1986; Zilles et.al., 1991). Кора, обонятельные луковицы и мозжечок содержат она- и агс-подтипы, в среднем мозге и в стволе находятся в основном она-, а в базальных ганглиях и мозжечке - в основном агс-подтип; агв-подтип найден только в таламусе (Zeng et.al., 1991; MacDonald, Scheinin, 1995).

Наибольшее количество ß-адренорецепторов находится в коре полушарий, особенно в I - III слоях, причем количество ßi-

рецепторов много больше количества Рз-рецегггоров в этой структуре. Напротив, в коре мозжечка основную массу р~ рецепторов составляет Рг-подтип. Значительное количество Р~ рецепторов присутствует в ядрах гипоталамуса, однако в таламических структурах этих рецепторов практически нет (Goff]net, Caviness, 1986; Parkinson et.al, 1988; Wanaka et.al., 1989). Как правило, адренорецепторы в мозге находятся на нервных элементах, вместе с тем, показано их присутствие на клетках глии и сосудах головного мозга. Выявлено наличие Р~ рецепторов на глиальных клетках (Pittman et.al., 1980; Cash et.al., 1986; Herkenham, 1987), которые активируются не циркулирующими катех о л а мина м и, а именно медиатором нейронального происхождения (Aolci, 1992; Aoki, Pickel, 1992). На глиальных клетках, по-видимому, присутствуют и он-, и ai-адренорецепторы (Cash et.al., 1986; Stone, Ariano, 1989). Плотности распределения адренергических терминалей и их рецепторов не всегда соответствуют друг другу (Herkenham, 1987), что может быть связано с расположением адренорецепторов не только на нервных клетках.

По имеющимся данным, Pi-рецепторы могут находится на пресинаптической (Wessler, Anschuttz, 1988; Wanaka et.al., 1989) и постсинаптической (Goffmet et.al., 1986) мембранах, тогда как Pi-рецепторы найдены лишь на постсинаптической мембране (Wessler, Anschuttz, 1988). Только постсинаптически обнаружены ai-рецепторы, а аг-рецепторы найдены как пост-, так и пресинаптически (Young, Kuhar, 1980; Cash et.al., 1986; Daly, 1988; Heal et.al., 1989). Через пресинаптические рецепторы осуществляется саморегуляция высвобождения медиатора: -стимуляция в случае Pi-адренорецепторов (Wessler, Anschuttz,

1988) и угнетение в случае аг-адренорецепторов (Young, Kuhar, 1980; Harsing et.al., 1989).

1.3. Молекулярная структура адренорецепторов и механизм трансдукции медиаторного сигнала.

В настоящее время изучены нуклеотидные и аминокислотные последовательности многих адренорецепторов позвоночных: aia-, ocib-, аш-рецепторы человека, крысы, хомячка и быка (Lomasney et.al, 1991; Perez et.al., 1991; Weinberg et.al., 1994; Clarke et.al., 1995); агл-адренорецептор человека, y грызунов аналогичный рецептор классифицирован как 0C2D-адренорецептор (Kobilka et.al., 1987, (В); Bylund et.al., 1995), а?в-рецепторы человека, крысы и мыши (Harrison et.al., 1990; Lomasney et.al., 1990; Zeng et.al., 1990; Floridellis et.al., 1991), aie-рецептор человека и опоссума (Murphy, Bylund, 1988; Regan et.al., 1988); pi-, (З2- и рз-рецепторов человека (Emorine et.al., 1987; Kobilka et.al., 1987, a; Frielle et.al., 1987; Grannerman et.al., 1992, 1993; Lelias et.al., 1993), крысы (Buckland et.al., 1990; Shimomura, Terada, 1990; Machida et.al., 1990; Bensaid et.al, 1993), мыши (van Spronsen et.al., 1993; Jasper et.al., 1993), а также различные Р-рецепторы птиц и амфибий(Б1хоп et.al., 1986; Yarden et.al., 1986). Гены большинства подтипов адренорецепторов безинтронны, за исключением генов агв- и Рз-рецепторов (Bensaid et.al., 1993; Milligan et.al., 1994). Все подтипы адренорецепторов обладают высокой степенью гомологии на нуклеотидном и аминокислотном уровнях и сходством в структуре. Схематическое строение адренорецептора приведено на рис. 2. Наиболее изученным из семейства адренорецепторов является Рг-подтип, поэтому их

ЦИТОПЛАЗМА

соои

Рис. 2. Схема строения адренергического рецептора.

альфа-2А адренорецептор по СЬа1Ьег§ сЬ а1., 1997. Сопряженные с в-белком рецепторы содержат 7 трансмембранных доменов, вне- и внутриклеточные петли. Ы-конец локализован вне клетки, Оконец - внутри ее.

молекулярное строение (номера аминокислотных остатков) будет рассмотрено на его примере.

В структуре адренорецептора выделяют семь гидрофобных трансмембранных доменов (это альфа-спирали, состоящие из 2428 аминокислотных остатков каждая) и более гидрофильные связывающие их участки: три внеклеточные петли, три цитоплазматические петли (С-1 - С-Ш), внеклеточный (14-концевой) и цитоплазматический (С-концевой) концы (Уагёеп е1:.а1., 1986; КоЬШса е1.а1., 1987, (А,Б); ЬеАсошкг, Сагоп 1988).

Внеклеточные участки рецептора гликозилированы (Fraser et.al.,

1987). Трансмембранные домены с участием внеклеточных петель и N-конца формируют своеобразный карман и вовлечены во взаимодействие с лигандом (Lefkowitz, Caron, 1988; Mitchell et.al., 1989; Dohlman et.al., 1990). Агонист связывается посредством диполь-дипольного взаимодействия между лигандом и пептидом (Schmidt et.al., 1993). Во взаимодействии с аминогруппой лиганда, атакующего адренорецептор, участвует Asp-113 - аминокислота из третьего трансмембранного домена, а во взаимодействии с ароматическими гидроксильными группами - Ser-204 и Ser-207 из пятого трансмембранного домена. Кроме того, имеется взаимодействие с Phe-290 из шестого и с Asp-79 из второго трансмембранных доменов (Chung et.al., 1988; Tota et.al., 1991; Strader et.al., 1995). Наличие Asp в третьем, двух Ser в пятом и Phe в шестом трансмембранных доменах строго необходимо для связывания катехоламинов рецепторами. Лиганд-специфичность различных подтипов рецепторов определяется отличиями по другим аминокислотам в трансмембранных доменах (Suryanarayana et.al., 1991; Wang et.al., 1991; Schmidt et.al., 1993).

Трансмембранные домены и две первые цитоплазматические петли C-I и C-II являются наиболее консервативными по аминокислотным последовательностям (Yarden et.al., 1986; Kobilka et.al., 1987, а, б, в,); Lefkowitz, Caron,

1988). В силу их консервативности не они определяют специфичность взаимодействия с G-белком (O'Dowd et.al, 1988; Lefkowitz, Caron, 1988). Важными участками для связывания G-белка считаются N-концевая доля цитоплазматического хвоста, особенно находящийся там Cys-341 (O'Dowd et.al, 1988, 1989), и С-концевая доля третьей цитоплазматической петли (O'Dowd et.al, 1988; Hausdorff et.al,

] 990, 6; Cheung et.al., 1992). Установлено, что мутации по Cys-341 ведут к значительному снижению стимуляции рецептором аденилатциклазы после воздействия агонистом, причем это снижение связано с изменениями во взаимодействии с G-белком. Две первые цитоплазматические петли выступают в качестве дополнительных областей для поддержания соответствующей ориентации места связывания G-белка.

Связывание агониста с рецептором вызывает изменение конформации последнего, что активирует сопряженный с ним G-белок. Этот белок представляет собой сложную гетерогенную систему, состоящую из трех субъединиц - а, р и у - как в случае ингибирующего, так и стимулирующего механизмов (Bray et.al., 1986; Itoh et.al., 1986). Каждая из субъединиц, в свою очередь, представлена в нескольких изоформах. Они отличаются по первичной структуре и по активности (Coleman, Sprang, 1996). В исходном (неактивном) состоянии а-субъединица связана с гуаниндифосфатом (GDP). При взаимодействии лиганда с рецептором в результате конформационных изменений лиганд-рецепторного комплекса сродство а-субъединицы к GDP снижается, а к GTP возрастает, поэтому GDP заменяется на присутствующий в клетке GTP. При этом происходит диссоциация G-белка на два комплекса: a-GTP и Д-у (Conklin, Bourne, 1993; Coleman, Sprang, 1996). После диссоциации эти комплексы действуют на различные эффекторные системы, изменяя внутриклеточные процессы.

Внутриклеточные эффекты, благодаря различным системам вторичных посредников, отличаются у разных подтипов адренорецепторов. При стимуляции a i-рецепторов сопряженные с ними G-белки (через комплекс a-GTP) активируют фосфолипазу-С, в результате чего увеличивается содержание внутриклеточных ионов кальция (Lefkowitz,

Carón, 1988; Wu et.al., 1992). ai-Рецепторы активируют фосфолипазу С с помощью Gq- или Gh-белков (Cotecchia et.al., 1990; Wu et.al., 1992). Кроме того, ai-рецепторы активируют и другие сигнальные пути, например, стимулируют фосфолипазы А и D (Minneman, Esbenshade, 1994).

Внутриклеточные эффекты ai- и ß-рецепторов осуществляются через другую систему: комплекс a-GTP взаимодействует с аденилатциклазой, в результате чего последняя либо активируется (в случае Gs), либо ингибируется (в случае G¡). Все ß-рецепторы стимулируют аденилатциклазу, в этот путь включен стимулирующий Gs-белок (Rodbell, 1980; Bouvier et.al., 1987; Fraser et.al., 1987; Lefkovvitz, Carón, 1988; Duman et.al., 1989). аг-Адренорецепторы ингибируют аденилатциклазу через ингибируюций Gi-белок (Rodbell, 1980; Lefkowitz, Carón, 1988; Thomsen et.al., 1988; Duman et.al., 1989). Аденилатциклаза в активном состоянии синтезирует циклический аденозинмонофосфат (сАМР), который, взаимодействуя с различными ферментами, обеспечивает ответ клетки на медиатор. Так как а-субъединица обладает GTP-азной активностью, то практически сразу образуются новый комплекс a-GDP и неорганический фосфат. Комплекс a-GDP взаимодействует с комплексом ß-y и система возвращается в исходное состояние (Rodbell, 1980; Coleman, Sprang, 1996).

1.4. Регуляция функции и числа адренорецепторов.

1.4.1. Эффекты медиатора.

Функция адренорецепторов в мозге взрослых животных находится под регуляторным контролем ряда факторов, среди которых немаловажную роль играет сам медиатор норадреналин - и другие агонисты этих рецепторов (Sibley, Lefkowitz, 1985; Beck, Halloran 1989; Hadcock et.al, 1989).

Наиболее быстрая регуляция функции рецепторов связана с фосфорилированием рецепторного белка, что приводит к его десенситизации - снижению эффективности включения системы вторичных посредников, несмотря на продолжающееся присутствие стимулирующего рецепторы агониста (Lai et.al.,1981; Sibley, Lefkowitz, 1985; Allen et.al., 1989; Liggen et.al., 1989; Suzuki et.al., 1992). Фосфорилирование рецепторов по специфическим аминокислотным остаткам, расположенным в цитоплазматическом хвосте или в третьей цитоплазматической петле, может осуществляться несколькими протеинкиназами, в том числе сАМР-зависимой протеинкиназой (протеинкиназой А), специализированной киназой ß-адренорецепторов (Hausdorff et.al., 1990, а) или протеинкиназой С (Sugden et.al., 1980). Фосфорилирование рецепторов киназой ß-адренорецепторов стимулируется агонистом и протекает в течение нескольких минут после связывания лиганда, причем эта или подобные киназы могут фосфорилировать не только ß-, но и другие адренорецепторы (Liggett et.al., 1992). Десенситизация такого типа - вызванная фосфорилированием рецептора после его связывания с агонистом и приводящая к нарушению этого связывания называется гомологической. Кроме того, может наблюдаться и гетерологическая десенситизация. Она происходит в результате активации других сигнальных систем в этой же клетке,, например, в результате действия адренокортикотропного гормона или инсулина (Bouvier et.al, 1987; Hadcock et.al, 1992; Moffett et.al, 1993).

Более глубокий уровень регуляции количества адренорецепторов связан с изменением их числа на клетке. Хорошо известным регулятором является сам медиатор, понижающий плотность собственных рецепторов, этот процесс носит название down-регуляции. Именно снятием down-

регуляционного влияния медиатора объясняется то, что длительное понижение уровня нора дремал ина (например, в результате разрушения норадренергических терминалей 6-гидроксидофа м и ном или при воздействии некоторых препаратов) ведет к увеличению числа ai-, а 2- и Р-рецепторов в головном и спинном мозге крыс (U'Prichard et.al., 1980; Law et.al., 1985; Cash et.al., 1986; Hosoda, Duman, 1993; Slotkin et.al., 1995). Хроническое повышение уровня медиатора вызывает противоположный эффект: снижение числа адренорецепторов в головном мозге или в периферических тканях, что имеет место как при введении экзогенного лиганда, так и при повышении естественного уровня медиатора, например, при стрессе (Lai et.al., 1981; Davies, Lefkowitz, 1984; Olgiati et.al., 1988; Stone et.al, 1989; Heal et.al., 1991; Hosoda, Duman, 1993). Известно, что длительное стрессирование вызывает увеличение скорости биосинтеза и снижение обратного захвата норадреналина головного мозга (Standford et.al., 1984). Одновременно у таких животных значительно снижается количество ос- и p-адренорецепторов в коре, гипоталамусе и стволе мозга без изменения сродства рецепторов к лигандам (Standford et.al., 1982; Stone, Piatt, 1982; Yamanaka et.al., 1987). Down-регуляция агонистом осуществляется на уровне процессов синтеза/распада рецепторного белка. Известно, что при длительном воздействии агониста на адренорецепторы (эти данные получены для Р-рецепторов на культурах клеток) происходит уменьшение числа последних на мембране клетки и внутри ее в результате секвестрации рецепторов (ухода рецепторных белков во внутриклеточные компартменты) и дальнейшего протеолиза (Sibley, Lefkowitz, 1985; Ligget et.al., 1989; Suzuki et.al., 1992). Аналогичный результат - уменьшение количества Р-рецепторов - получен и при

инкубации срезов коры мозга с их агонистом изопротеренолом. При этом, однако, наблюдалось и увеличение количества ai-рецепгоров, что может быть одним из проявлений функционирования механизма гомеостатического контроля центральной норадренергической активности (Maggi et.ah, 1980). При хронической - свыше 16 часов - инкубации культуры клеток, экспрессирующей адренорецепторы, с агонистом снижается не только число самих адренорецепторов, но также уменьшается количество и время полужизни их мРНК (Hadcock, Malbon, 1988; Hadcock et.al., 1989; Port et.al., 1992; Hosoda, Duman, 1993; Hosoda et.al., 1995). Скорость транскрипции генов при этом не изменяется. Аналогичный результат - ослабление ответа после хронической стимуляции рецепторов -наблюдается и в организме, например, при длительном лечении препаратами, являющимися лигандами адренорецепторов.

1.4.2. Действие стероидных гормонов.

Стероидные гормоны способны оказывать разнообразные эффекты на адренорецепторы. Показано, что адреналэктомия приводит к значительному снижению количества оц-адренорецепторов в клетках гладкомышечной ткани, при этом заместительная терапия дексаметазоном восстанавливает плотность рецепторов (Haigh, Jones, 1990). Так же экспрессию а ]-рецепторов стимулируют тестостерон и альдостерон (Hoffman, Hu, 1995). Андрогены влияют и на экспрессию аг-адренорецепторов, тканеспецифично изменяя количество мРНК. Эта специфичность может быть Связана с различным распределением подтипов аг-рецепторов и с неодинаковым влиянием на них гормона. Так, в почках крыс тестостерон активирует транскрипцию гена агв-рецептора (Johnson et.al., 1995), в то же время в головном мозге, где основной подтип агд,

такой зависимости нет. Более того, установлена отрицательная корреляция между уровнем тестостерона в крови и плотностью аг-рецепторов в гипоталамусе. Эта связь может быть отражением механизма отрицательной обратной связи в регуляции гипоталамо-гипофизарно-гонадной системы (Shishkina, Naumenko, 1995). Плотность аз-адренорецепторов в некоторых отделах головного мозга зависит от уровня глюкокортикоидных гормонов. Так например, установлено соответствие суточных ритмов кортикостерона и аг-адренорецепторов паравентрикулярного ядра гипоталамуса (Jhanvar-Uniyal et.al., 1986) и понижение количества этих рецепторов в паравентрикулярном и супраоптическом ядрах гипоталамуса в результате адреналэктомии, возвращающееся к норме после воздействия кортикостероном (Jhanvar-Uniyal, Leibowitz, 1986). Хроническое стрессирование приводило к увеличению числа аг-рецепторов ствола мозга (Torda et.al., 1985).

Влияние глюкокортикоидов на экспрессию адренорецепторов наиболее изучено на примере (3-рецепторов. Известно, что у взрослых крыс количество (3-рецепторов изменяется под воздействием этих гормонов, снижаясь в печени, сердце (Scarpace et.al., 1988) и коре головного мозга (Kuroda et.al., 1993) и увеличиваясь в легких и клетках крови (Davies, Lefkowitz, 1984; Мак et.al., 1995). Адреналэктомия приводит к противоположному эффекту. Дексаметазон, вводимый в течении 10 дней, понижал количество (3-рецепторов в коре головного мозга взрослых крыс, но не влиял на (3-рецепторы гиппокампа (Kuroda et.al., 1993). Стресс, сопровождающийся изменениями концентрации глюкокортикоидов в крови, вызывает изменения в количестве адренорецепторов мозга. Однако, по данным одних исследователей, хроническое стрессирование приводит к увеличению плотности (3-адренорецепторов в коре мозга крыс, а

острое - снижает их плотность (Basso et.l., 1993; Papp et.al., 1994). По данным других авторов плотность ß-рецепторов в коре мозга, стволе, гипоталамусе и гиппокампе после хронического стресса уменьшается (Standford, Nutt, 1982; Torda et.al, 1985). Эти противоречия могут быть связаны с особенностями стрессорных процедур, использованных в разных работах, и, как следствие, вероятно, с неодинаковым вкладом в стрессорные эффекты действия стероидов и нейротрансмиттера.

В соответствии с признанным в настоящее время механизмом действия стероидов внутриклеточные рецепторы этих гормонов взаимодействуют со специфичными участками ДНК. Глюкокортикоид-зависимые последовательности обнаружены в 5'-области генов ß-адренорецепторов, но в гене ßi-подтипа этот сайт опосредует угнетение транскрипции, а в гене Р2-подтипа - ее активацию (Malbon, Hadcock, 1988; Kiely et.al., 1994). Установлено, что глюкокортикоиды значительно снижают скорость транскрипции генов ßi- и ßs-рецепторов и повышают её у ßz-рецептора, не изменяя время жизни их мРНК (Guest et.al.,1990; Feve et.al., 1990; Feve et.al., 1992; Kiely et.al., 1994). В связи с неравномерностью распределения подтипов ß~ рецепторов эффект глюкокортикоидов на их плотность тканеспецифичен.

Регуляторное влияние стероидных гормонов на функциональную активность адренорецепторов может осуществляться во взаимодействии с эффектами адренергических лигандов. Так, введение глюкокортикоидов крысам предотвращает развитие вызываемой изопротеренолом (агонистом ß-рецепторов) десенситизации этих рецепторов в их головном мозге (Stone et.al., 1989). Глюкокортикоиды снимают десенситизацию, то есть восстанавливают чувствительность к

адреномиметикам, путем увеличения плотности (3-рецепторов в легких человека и животных (Davies, Lefkowitz, 1984).

Адреночувствительность клетки определяется наличием в ее цитоплазматической мембране адреиорецепторов, что зависит от экспрессии в данной клетке соответствующих генов. Путем экспрессии кДНК p-рецепторов в клетках, исходно их не имевших, были получены нормально функционирующие рецепторы, обеспечившие адреночувствительность до этого не реагировавших на адреномиметики клеток (Fraser et.al., 1987; Marullo et.al., 1988; Shaji et.al., 1989; Chappot et.al., 1990). В ходе индивидуального развития адреноренокомпетентность тканей, таких как, например, нервная, формируется лишь на определенных этапах онтогенеза, что также может быть связано с активностью экспрессии кодирующих адренорецепторы генов (Перцева, 1989; Duman et.al., 1989).

1.5. Формирование рецепторного звена адренергической системы в онтогенезе.

Первые (3-адренорецепторы появляются в коре больших полушарий у крыс на 15 день эмбрионального развития (Bruinink, Lichtensteiger, 1984), в это же время они обнаруживаются в обонятельных луковицах (Schlumpf et.al., 1985). Их концентрация в переднем мозге эмбрионов составляет около 10% от уровня данных рецепторов в мозге взрослых животных (Goffinet et.al., 1986). Константа диссоциации мест связывания обоих подтипов (З-рецепторов в течении всего онтогенеза остается постоянной (Pittman et.al., 1980; Bruinink, Lichtensteiger, 1984; Cash et.al., 1986). Кроме того, количество (3-адренорецептор-зависимой аденилатциклазы развивается параллельно количеству Р-рецепторов (Harden et.al., 1977; Duman et.al., 1989). Эти факты свидетельствуют о

функциональной зрелости образующихся рецепторов. Подтипы p-рецепторов имеют различную онтогенетическую динамику.

Количество Р i -адренорецепторов в коре больших полушарий при рождении невелико, медленно увеличивается в течении первой недели жизни и более резко во время второй-третьей недель, достигая в этом возрасте уровня, характерного для взрослых животных (Harden et.al., 1977; Pitt man et.al., 1980; Lorton et.al., 1988). Число Рг-адренорецепторов в коре плавно возрастает в эти сроки, оставаясь все время ниже, чем число pi-рецепторов (Lorton et.al., 1988). Соотношение Pi- и р2-рецепторов в коре остается примерно постоянным на протяжении всего развития, соответственно, 3:1 (Pitman et.al., 1980). Показано, что плотность обоих подтипов Р-рецепторов изменяется пропорционально их мРНК (Duman et.al., 1989).

В отличии от коры больших полушарий, отношение J3i- и Р2-рецепторов в мозжечке крыс значительно меняется во время развития: на 8 -13-й дни постнатального развития Pi-рецепторы составляют 18% от общего числа адренорецепторов, потом их количество снижается и к третьему месяцу жизни составляет только 2%, сохраняясь далее на этом уровне. Общая плотность p-адренорецепторов в мозжечке, возрастая с 5-го по 42 - 45-ый дни жизни, оставалась все время ниже, чем в коре больших полушарий (Pitman et.al., 1980; Lorton et.al., 1988). Увеличение количества рецепторов в течение первых 2 - 4-х недель постнатального развития характерно для областей, иннервируемых нейронами синего пятна. Другие отделы мозга, например, substantia nigra, на 5-10-й дни постнатального развития имеют повышенный уровень p-адренорецепторов по сравнению с областями, получающими иннервацию от синего пятна. К трехмесячному возрасту количество рецепторов в этом

отделе постепенно увеличивается до взрослого уровня (Lorton et.al., 1988).

Аналогично ß-рецепторам, подтипы а-рецепторов образуются функционально зрелыми. Об этом свидетельствуют постоянные в онтогенезе константы диссоциации лиганд-рецепторного комплекса (Nomura et.al., 1984; Battie, 1986; Nowak, Silverrin 1988; Miyasaki et.al., 1989) и параллельное развитие стимуляции включения меченого фосфора в фосфолипиды агонистами ai-рецепторов и числа мест связывания этих рецепторов (Deskin et.al, 1981).

На 14-й день эмбрионального развития в мозге плодов крыс наблюдается экспрессия мРНК am-, а с 19-го дня - aiA-рецепторов, интенсивность ее в это время невелика, но с возрастом усиливается (McCune, Hill, 1995). Специфичность распределения подтипов ai-рецепторов, характерная для взрослых животных, устанавливается к третьей неделе жизни. В этом возрасте в некоторых областях мозга начинается снижение интенсивности экспрессии их генов, продолжающееся до взрослого состояния (McCune, Hill, 1995), что согласуется с более ранними данными о количестве этих адренорецепторов, оцененным методом радиолигандного связывания. По ним ai-адренорецепторы в ядрах ствола головного мозга присутствуют уже у новорожденных крыс и либо сохраняются на постоянном уровне, как в дорзальном ядре шва (Smith, Gallager, 1989), либо их количество значительно снижается, как в синем пятне (Williams, Marshall, 1987). В коре больших полушарий максимум количества ai-

адренорецепторов достигается к 20-21-му дню постнатальной жизни (Morris et.al., 1980; Maurin et.al., 1985), после чего их уровень остается постоянным.

Количество подтипов аг-рецепторов в разных отделах головного мозга изменяется неодинаково. Так, в конце эмбрионального периода наблюдается значительное усиление процессов транскрипции и трансляции генов агл- и а?в-рецепторов с последующим снижением количества этих рецепторов в ряде структур мозга, в том числе в коре и стволе, тогда как для агс-рецепторов такой картины не наблюдается (Winzer-Serhan et.al., 1997, а, б; Winzer-Serhan, Leslie, 1997). Эти сведения согласуются с более ранними работами, сообщающими, что количество а.2-рецепторов в стволе новорожденных крысят больше, чем у взрослых крыс и постепенно снижается (Stolk et.al., 1985; Kim ига, Nakamura 1987). Измеренное в коре мозга сразу после рождения количество адренорецепторов подтипа агл было меньше, чем у взрослых животных, a постепенное увеличение их числа происходило постнатально, до 4-15-го дня жизни. Уровень рецепторов подтипа aie растет медленнее, достигая значений, характерных для взрослых животных, лишь к 70-ти дням жизни (Nomura et.al., 1984; Kitamura et.al, 1989). Такие различия в онтогенетической динамике разных подтипов аг-рецепторов могут быть связаны с их еще не ясной, но, вероятно, неодинаковой функциональной ролью в развивающемся мозге.

Рассмотренные литературные данные свидетельствуют, что формирование рецепторного звена норадренергической системы крыс начинается в последней трети внутриутробного развития и заканчивается в первые недели постнатальной жизни. Следует отметить, что этот процесс, очевидно, не является автономным. Формирование адренорецепторов может зависеть как от сигналов, генерируемых самой норадренергической системой, т.е. от её медиатора - норадреналина, так и от внешних по

отношению к этой системе стимулов, например, от стероидных гормонов.

1.6. Эффекты норадреналина и стероидных гормонов на онтогенез рецегпорного звена иорадренергической системы.

1.6.1. Действие медиатора.

Предположение о возможном влиянии норадреналина на синаптогенез высказывалось рядом исследователей, тем не менее, влияние медиатора на онтогенез адренорецепторов до сих пор не выяснено. Время появления первых адренорецепторов в коре головного мозга примерно совпадает с появлением там норадренергических терминалей (Shlumpf et.al., 1980; Goffinet et.ah, 1986), но созревание пре- и постсинаптических компонентов иорадренергической системы происходит в разные сроки. Так, взрослый уровень ß-рецепторного связывания достигается к третьей неделе жизни, а взрослый уровень содержания норадреналина - только ко второму месяцу (Harden et.ah, 1977; Morris et.al., 1980; Pittman et.al., 1980; Duman et.al., 1989). Это наводит на мысль, что развитие постсинаптических ß-рецепторов протекает в известной мере независимо от развития пресинаптических нейронов, тогда как для ос-рецепторов такая зависимость представляется возможной (Deskin et.al., 1981; Law et.ah, 1985). В то же время разрушение норадренергических терминалей в раннем онтогенезе путем инъекции новорожденным крысятам 6-гидроксидофамина приводит к резкому увеличению ß-рецепторного связывания и не затрагивает аз-рецепторное связывание (Cash et.ah, 1986; Lorton et.al., 1988). Это свидетельствует о возможной взаимосвязи уровня норадреналина и числа ß-адренорецепторов, проявляющейся при нарушениях нормального онтогенеза. Вместе с тем, полученные до последнего времени данные не дают

ясной информации о взаимодействии медиаторного и рецепторного звеньев в ходе формирования нейрохимической системы в онтогенезе.

1.6.2. Эффекты глюкокортикоидов.

Способность стероидных гормонов действовать на центральную нервную' систему обуславливается их беспрепятственным прохождением в мозг и наличием в нём специфических рецепторов к данным гормонам (McEwen et.al., 1986; Tashima et.al., 1989). Повышенное в результате стресса или гормонотерапии в период раннего онтогенеза количество глюкокортикоидных гормонов нарушает процессы глио- и нейрогенеза в мозге. Действие этих гормонов на развитие проявляется уже при их введении во время беременности, и обусловлено способностью стероидов проходить плацентарный барьер (Zarrow et.al., 1971). Пренатальное воздействие глюкокортикоидами снижает вес тела плодов и новорожденных крысят (Franks, Roberts, 1979), вес мозга и содержание в нём ДНК (Velazques, Romano, 1987).

Неонатальное введение кортикостерона приводит к сокращению количества клеток коры мозга и мозжечка в мозге крыс (Cotterel et.al., 1972), вызывает ухудшение развития дендрйтов и миелинизации волокон мозга (Velaquez, Romano, 1987). Вводимый на 2 - 6 дни жизни в дозе 6 мг / 100 г веса гидрокортизон снижал синтез ДНК, РНК и белков в мозге крыс (Szijan, Burdman, 1973). Степень выраженности супрессорного катаболического эффекта на ЦНС зависит, от дозы введенного гормона (De Kosly et.al., 1982; Brown, Fisher, 1986), а также от срока его применения: эффект от воздействия на 2 - 3-ей неделе жизни гораздо менее, выражен, чем при воздействиях на более ранних этапах развития (Vernadakis, Woodbury, 1970; Howard, 1976). Снижение числа клеток . мозга под действием

глюкокортикоидов наиболее выражено в областях, не закончивших рост и дифференцировку (гиппокамп, мозжечок) и, вероятно, является следствием торможения пролиферации (Bohn, 1984). В закончивших деление отделах мозга глюкокортикоиды нарушают миелинизацию, ветвление дендритов и образование синапсов (Meyer, 1985). Описанные эффекты глюкокортикоидов на число клеток, синаптогенез, биосинтез белков в развивающемся мозге потенциально могут привести и к изменению онтогенеза адренорецепторов.

Глюкокортикоиды способны также влиять на обмен норадреналина в развивающемся мозге. Так, активность ключевого фермента биосинтеза норадреналина тирозингидроксилазы - в стволе мозга у 21-дневных плодов крыс изменяется после пренатального повышения уровня глюкокортикоидов (Дыгало и др., 1991). У животных, перенесших гормональное воздействие в период эмбриогенеза, после рождения повышается активность тирозингидроксилазы в коре мозга в 7-, 16-дневном и в стволе в 35-дневном возрастах, а содержание норадреналина в коре мозга повышено в 7- и снижено в 16-дневном возрастах (Калинина, 1995). Согласно описанным в предыдущих разделах обзора регуляторным эффектам медиатора на число адренорецепторов у взрослых животных и его потенциальному участию в регуляции онтогенеза этих рецепторов, вызываемые глюкокортикоидами изменения синтеза и обмена норадреналина в развивающемся мозге также, вероятно, способны обеспечить влияние этих стероидов на формирование рецепторного звена норадренергической системы.

Косвенным свидетельством в пользу такого предположения являются результаты опытов, в которых беременных самок подвергали стрессирующим воздействиям. Уровень глюкокортикоидов в крови беременной самки, как

известно, повышается при стрессе и эти гормоны легко проникают в плод (Zarrow et.al., 1971). Стресс во второй половине беременности вызывает изменения в содержании катехоламинов во многих отделах мозга 21-дневных плодов и новорожденных крысят. Некоторые из этих изменений сохраняются и у взрослых потомков. В коре мозга взрослых животных после пренатального стрессирования не сохраняется повышенный на 16 день жизни уровень норадреналина, но в гипоталамусе, после понижения содержания норадреналина в первые две недели жизни, происходит значительное увеличение его уровня ко 2 - 3 месяцу (Moyer et.al., 1978; Peters, 1982). Также в результате пренатального стрессирования усиливается обмен норадреналина в мозге Зх;-месячных животных, о чем свидетельствует повышенное содержание метаболитов этого медиатора (Takahashi et.al., 1992). Пренатальный стресс вызывает длительные нарушения в развитии рецепторного аппарата потомков. У таких животных на 16 день жизни в коре головного мозга снижено количество ой- и |3-адренорецепторов5 а у половозрелых - аг-рецепторов (Peters, 1984). Вместе с тем, глюкокортикоиды являются важными, но не единственными гормонами, уровень которых повышается при стрессе. Поэтому описанные опыты оставляют неясным вопрос: действительно ли эффекты пренатального стресса на адренорецепторы обусловлены глюкокортикоидами и в какой мере в эти эффекты вовлечены изменения уровня и обмена норадреналина.

Обобщая имеющиеся литературные данные, можно заключить, что пренатальное воздействие глюкокортикоидами, оказывая длительное влияние на развитие организма, изменяет также и формирование норадренергической системы головного мозга. Отмечены эффекты гормонов на биохимические показатели этой медиаторной системы: на активность

ферментов синтеза и содержание медиатора. В генах некоторых адренорецепторов имеются глюкокортикоид-зависимые сайты. Перечисленные выше предпосылки. указывают на возможное влияние глюкокортикоидов на онтогенез адренорецепторов мозга. Вероятно, именно нарушениями рецепторного звена норадренергической системы обусловлены обнаруженные ранее эффекты пренатального воздействия глюкокортикоидами на реакции адренокортикальной (Дыгало, Науменко, 1983; Науменко и др., 1990), гипоталамо-гипофизарно-гонадной (Шишкина, Быкова, 1989) и терморегуляторной (Науменко и др., 1990) систем взрослых животных в ответ на инфузию норадреналина в мозг и на регулируемое этим медиатором поведение (Дыгало, 1993). Важность. нормального функционирования этих физиологических систем для полноценной жизни особи, а также тот факт, что нарушение баланса глюкокортикоидов в развивающемся организме является обычным последствием стресса или гормонотерапии, обусловливают необходимость выяснения эффектов этих гормонов на ранних стадиях развития организма на рецепцию норадреналина в центральной нервной системе.

Имеющиеся литературные данные, свидетельствуют об актуальности исследования закономерностей формирования норадренергической системы головного мозга в онтогенезе. Именно на ранних этапах развития закладываются основы последующей функциональной активности этой системы, определяющие физиологические и поведенческие особенности взрослого организма. Вместе с тем, ни внутрисистемные (медиатор-рецепторные), ни внешние по отношению к данной нейрохимической системе (глюкокортикоидные) эффекты на развитие ее рецепторного звена до последнего времени оставались практически неисследованными. В связи с этим, задачей работы явилось исследование уровня норадреналина и

количества адренорецепторов, действующих через одинаковую систему вторичных посредников - аг- и (3-подтипов, находящихся в местах преимущественной локализации тел и окончаний норадренергических нейронов, соответственно, в стволе и коре головного мозга - в ходе нормального и модифицированного глюкокортикоидами развития. Изучение этих вопросов необходимо для понимания регуляторных процессов онтогенеза рецепторного звена норадренергической системы головного мозга и выяснения механизмов длительных последствий ранних воздействий для функций взрослого организма, зависящих от этой медиаторной системы.

Заключение диссертации по теме «Физиология», Юшкова, Анна Александровна

ВЫВОДЫ

1. У 21-дневных плодов крыс количество аг- и р-адренорецепторов в стволе головного мозга больше, чем в коре. Характерное для взрослых животных превышение количества рецепторов обоих типов коры над стволом формируется в постнатальном онтогенезе. Обнаружено резкое повышение количества аг-адренорецепторов в стволе мозга в перинатальный период.

2. Введение кортикостерона самкам крыс на 16 и 18 дни беременности вызывает в коре головного мозга их потомков волнообразные колебания содержания норадреналина с превышением контрольного уровня в первую неделю, снижением - во вторую и затухающие к концу третьей недели жизни.

3. Воздействие кортикостероном в период внутриутробного развития снижает в коре головного мозга месячных и взрослых крыс количество аз-рецепторов без изменения их сродства к лиганду.

4. Повышение уровня глюкокортикоидов в последней трети пренатального развития, не изменяя уровня мРНК агл-рецепторов в стволе головного мозга, снижает содержание этого транскрипта в коре полуторамесячных крыс, что свидетельствует о длительном угнетении глюкокортикоидами экспрессии постсинаптичесих агд-рецепторов нейронами этого отдела мозга.

5. Введение кортикостерона на 16 и 18 дни эмбриогенеза, не изменяя сродство Р-адренорецепторов к лиганду, приводит к волнообразным колебаниям их количества в коре больших полушарий с минимумом в первую и максимумом после второй недели жизни крыс. Эти изменения числа рецепторов происходят в противбфазе вызванным гормоном отклонениям от нормы уровня норадреналина и затухают одновременно со стабилизацией содержания медиатора.

6. Введение крысятам на 4 - 6 дни жизни а-метилтирозина снижает содержание норадреналина в коре головного мозга в недельном возрасте и пропорционально повышает плотность р-адренорецепторов.

7. Механизм понижающей регуляции Р-адренорецепторов норадреналином функционирует уже на начальных этапах онтогенеза и опосредует влияние глюкокортикоидов на количество этих рецепторов в коре головного мозга развивающихся животных.

8. Между количеством аг-адренорецепторов в стволе и уровнем норадреналина в коре головного мозга в ходе нормального онтогенеза наблюдаются отрицательная, а между уровнем норадреналина в стволе и Р-адренорецепторов в коре головного мозга положительная корреляции. Эти взаимосвязи сохраняются при гормональной модификаций развития. Медиаторное и рецепторные звенья нейрохимической системы формируются в тесной взаимосвязи начиная с ранних этапов индивидуального развития.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Юшкова, Анна Александровна, 1998 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Буданцев А.Ю. Моноаминергические системы мозга // М.- Наука.-1976.- 193 с.

Будко К.П., Гладкович Н.Г., Максимова Е.В. Нейроонтогенез // М.-

Наука.- 1985.- 270 с. Дыгало H.H. Приобретение стероидами гормональных функций в эволюции и их эффекты в раннем онтогенезе // Успехи современной биологии.- 1993.- т. 113.- вып. 2.- с. 162-175 Дыгало H.H., Калинина Т.С., Науменко Е.В. Катехоламиновая система мозга плодов крыс при нарушении баланса кортикостероидов // Бюллютень экспериментальной биологии и медицины.-1991.- N 10.- т. CXII.- с. 353 - 355 Дыгало H.H., Науменко Е.В. Роль глюкокортикоидов матери во время беременности в определении реакции гипоталамо-гипофизарной-адренокортикоидальной системы взрослого потомства при эмоциональном стрессе // Доклады АН СССР.-1983.-т. 271.-N4.- с. 1003-1006 Дыгало H.H., Калинина Т.С., Милова A.A. Модификация онтогенеза катехоламиновой системы коры головного мозга гормональными индукторами // Материалы Всесоюзного симпозиума "Физиология и биохимия медиаторных процессов".-1990.- с. 102 Дыгало H.H., Шишкина Г.Т., Милова A.A. Бета-адренорецепторы коры головного мозга крысят после воздействий, изменяющих уровень норадреналина // Онтогенез.- 1993.- т. 24.- N 3.- с. 93-97 Калинина Т.С. Эффекты глюкокортикоидов в раннем онтогенеза на активность тирозингидроксилазы головного мозга крыс // Автореферат на соискание ученой степени кандидата биологических наук.-Новосибирск.-1995 Калинина Т.С., »ДыгалоН.Н. Онтогенез мозга и пресинаптических маркеров катехоламиновой системы крыс // Сибирский биологичесикй журнал.-1991.- вып. 2.- с. 61-65

Калинина Т.С., Сурнина Н.Ю., Шишкина Г.Т., Дыгало H.H. Применение метода ОТ-ПЦР для анализа экспрессии а2А-адренергических рецепторов в головном мозге крыс // Мол. биол.-1998.-т. 32.- N2.- с. 367

Лакин Г.Ф. Биометрия // М.- Наука.- 1980.- 293 с.

Манухин Б.Н. Физиология адренорецепторов // М.- Наука.- 1968.234 с.

Науменко Е.В., Дыгало H.H., Маслова JI.H. Длительная модификация стрессорной реактивности воздействиями в пренатальном онтогенезе // в кн. Онтогенетические и генетико-эволюционные аспекты стресса.- Новосибирск.- 1990.- с. 40-54

Раевский В.В. Онтогенез медиаторных систем мозга // М.: Наука.-1991.- 144 с.

Перцева М.Н. Молекулярные основы развития гормонокомпетентности// Л.- Наука.- 1989.-251 с.

Сергеев В.П., Шимановский Н.Л. Рецепторы физиологически активных веществ // М.- Медицина.- 1987.- 273 с.

Сурнина Н.Ю., Шишкина Г.Т., Дыгало H.H. Влияние тестостерона на альфа2- и бета-адренорецепторы головного мозга крыс. // Нейрохимия.- 1997.- т. 14, N 3, с. 279-284.

Шишкина Г.Т., Быкова Т.С. Постнатальное развитие половой системы самцов крыс после пренатального введения кортикостерона // Онтогенез.- 1989.- т. 20.- N 4.- с. 431-434

Шишкина Г.Т., Дыгало H.H. Молекулярная физиология адренергических рецепторов // Успехи физиол. наук.- 1997.- т. 28.-N1.- с 61-74

Шишкина Г.Т., Сурнина Н.Ю., Дыгало H.H. Половое поведение и альфа-адренорецепторы в неокортексе самцов крыс после кастрации и введения тестостерона. // Журн. Высш. Нервн. деятельности им. И.П.Павлова.- 1997.- т. 47, N 3, с. 592-596.

Ahlquist R.P. A study of the adrenotropic receptors // Am. J. Physiol.-

1948.-v. 153.-p. 586-600 Allen J.M., Abrass I.S., Palmitter R.D. beta 2-adrenergic receptor regulation after transfecnion into a cell line deficien in the cAMP-dependent protein kinase // Mol. Pharmacol.- 1989.- v. 36.- p. 248255

Aoki C. Beta-adrenergic receptors: astrocytic localisation in the adult visual cortex and their relation to catecolamine axon terminals as reveled by electron microscopic immunocitochemestry // J Neurosci.-1992.-v. 12.- p. 781-792 Aoki C., Pickel V.M. C-terminal tail of beta-adrenergic receptors: immunocitochemical lokalisation within astrocytes and their relation to catecolaminergic neurons in N. tractus solitarii and area postrema // Brain Res.- 1992.-v. 571.-p. 35-49 Bahouth S.W., Hadcock J.R., Malbon C.C. Expression of mRNA of beta-1 and beta-2 adrenergic receptors in Xenopus oocytes results from structurally distinct receptjr mRNAs // J Biol Chem.- 1989.-v. 263.-N18.-p. 8822-8826 Basso A.M., Depiante-Depaoli M., Cancela L., Molina V. Seven-day variable-stress regime alters cortical beta-adrenoreceptor binding and immunologic responses: reversal by imipramine // Pharm. Biochem. Behav.- 1993.- v. 45.- N 3.- p. 665-672 Battie C.N. Postnatal development of the (H3]-yohimbine binding in the olfactory bulb of male and female rats // Dev. Brain Rec.- 1986.- v. 30.-N1.-p. 129-132 Beck S.G., Halloran P.M. Impramine alters beta-adrenergic, but not serotoninergic mediated responses in rat hippocampal pyramidal cells // Brain Res.- 1989,- v. 504.- p. 72-81 Bennet; J.P., Yamamura H.I. Neurotransmitter, hormone or drug receptor binding methods // in: Neurotransmitter Receptor Binding, ed. by H.I. Ymamura.-1985

Bensaid M., Kaghad M., Rodriges M., LeFur G., Caput D. The rat beta 3-adrenergic receptor gene contains an intron // FEBS Lett.- 1993.- v. 318.-p. 223-226

Bill D.J., Hughes I.E., Slephens R.J. The thermogenic action of alpha 2-adrenoceptor agonist in reserpnised mice are via a central postsynaptic alpha 2-adrenoeeptor mechanism // British J. Pharmacol.- 1989.- v. 96.-N1.-p. 133-143

Birnbaumer L., Abramowitz J., Brown A.M. Receptor-effector coupling by

G-proteins//Biochem Biophys Acta.- 1990.-v. 1031.-p. 163-264 Bohn M.C. Glucocorticoid induced teratologies of the nervous system //

Neurobehavioral teratology.- ed. by Yonai J.- 1984.- p. 365-387 Bouvier M., Colins S., O'Dowd B.F. Two distinct pathways of cyclic AMP mediated down-regulation of the beta-2 adrenergic receptor: phosphorilation of the receptor and regulation of its RNA // J. Biol. Chem.- 1989.- v 264.- p. 16786- 16792 Bouvier M., Hnatowich M., Collins S., Kobilka B.K., Deblasi A., Lefkowitz R.J., Caron M.G. Expression of a human cDNA encoding the beta 2-adrenergic receptor in Chines Hamster Fibroblasts (CHF): functionality and regulation of the expressed receptors // Mol. Pharmacol.-1987.- v. 33.-p. 133-139 Bray P., Carter A., Simons C., Guo V., Puckett C., Kamholz J., Spiegel A., Nirenberg M. Human cDNA clones four species of Gs-alpha signal transduction protein // Proc Natl Acad Sci USA.- 1986.- v. 83.- p 88938897

Brown J.A., Machida C.A. The 5' flanking region of the rat beta 3-adrenergic receptor gene: divergence with the human gene and implication for species-specific gene expression // DNA Seq.- 1994.- v. 234.-p. 319-324

Brown M.R., Fisher L.A. Glucocorticoid supressijn of the symphathetic nervous system and adrenal medula // Life Sci.- 1986.- v. 39.- N 11.- p. 1003-1012

Bruininc A., Lichtensteiger M. beta-adrenoreceptor binding sites in fetal rat brain // J. Neurochem.- 1984.- v. 43.- N 2.- p. 578-581

Buckland P.R., Hill R.M., Tidmarsh S.F., McGuffin P. Primary structure of the rat beta-2-adrenergic receptor gene // Nucleic Acids Res.- 1990.-v. 18.-p. 682

Bylund D.B., Shnyder S.H. beta-adrenergic binding in membrane preparation from mammalian brain // Mol. Farmacol.- 1976.- v. 12.- p. 568-580

Bylund D.B. Subtypes of alpha 1- and alpha 2-adrenergic receptors. // FASEB J.- 1992.- v. 6.- p. 832-839

Bylund D.B., Blaxall H.S., Iversen L.J., Caron M.G., Lefkowitz R.J., Lomasney J.W. Pharmacological characteristics of alpha 2-adrenergic receptors: comparison of pharmacologically defined subtypes with subtypes identified by molecular cloning. // Mol. Pharmacol.- 1992.-v.-42 p.-1-5.

Bylund D.B., Hass N.A., Cerutis D.R., Blaxall H.R. Characterisation of alpha-2-adrenergicreceptor subtypes // Pharmacol Comm.- 1995.- v. 6.-p. 87-90

Cash R., Rainsman R., Lanfumey L., Ploska A., Agid Y. Cellular localization of adrenergic receptores in rat and human brain // Brain Res.- 1986.-v. 370.-p. 127-135

Chalberg S.C., Duda T., Rhine J.A., Sharma R.K. Molecular cloning, sequencing and expression of an a2-adrenergic receptor complementary DNA from rat brain // Mol Cell Biochemictry.- 1990.-v. 97.-p. 161-172

Chapot M.P., Eshdat Y., Marullo S., Guillet J-G., Charbit A., Strosberg A.D., Devalier-Klutchko C. Localisation and characterisation of the different beta-adrenergic receptors expressed in Escherichia coli // Eur J Biochem.- 1990.- v. 187.- p. 137-144 \

Cheung A.H., Huang R.R., Strader C.D. Involment of the specific hydrophobic, but not hydrophilic, amino acids in the third intracellular

loop of the beta-adrenergic receptor in the activation of Gs // Mol Pharmacol.- 1992.-v. 41 .-p. 1061-1065 Chomczynski P., Sacchi N. Single step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction // Analytical Biochem.- 1987.-v. 162.-p. 156 - 159. Chung F-Z., Wang C-D., Potter P.C., Venter J.C., Fraser C.M. Site-detected mutagenesis and constinuosis expression of human beta-adrenergic receptor // J Biol Chem.- 1988.- v. 263.- p. 4052-4055 Clark D.E., Fors A.P.D.W., Williams D.R. Pharmacolological evidence for the equivalence of the alpha-lA-adrenoceptor of rat and the cloned bovine alpha-1 C-adrenoceptor: a reviced alpha-1-adrenoceptor classification scheme // Pharmacol Comm.- 1995.- v. 6.- p. 9-14 Coleman D.E., Sprang S.R. How G-proteins work: a continuning story //

Trends in Biol. Sci.- 1996,- v. 21N 2.- p. 41-80 Conklin B.R., Bourne H.R. Strustural elements of G alpha subunit that interact with G beta gamma, receptors and effectors // Cell.- 1993.-v.73.-p. 631-641

Cotecchia S., Exum S., Caron M.G., Lefcowitz R.G. Regions of the alpha-1 adrenoreceptor involved in coupling to phosphatidylinositol hydrolisis and enchanced sensitivity of biological function // Proc. Nath. Acad. Sci. USA.-1990.- v. 87.- p. 2896-2900 Cotterel M., Balazs R., Jonson A.U. Effect of corticosteroid on. biochemical maturation of rat brain: postnatal cell formation // J. Neurochem.- 1972.- v. 19,- N 9.- p. 2151-2167 Coyle J.T., Henry D. Catecolamines in fetal and newborn rat brain // J

Neurochem.- 1973.-v. 21.-p. 61-67 Currie D., Lewis R.V., McDevitt D.G. Central effects of beta-adrenoceptor antagonists. 1. Performance and sybjective assessments of mood // British J. Clin. Pharmacol.- 1988.- v. 26.- N 2.- p. 121-128 Daly R.N., Sulpizio A.C., Levitt B., DeMarinis R.M., Regan J.N., Ruffolo J.W., Hieble Jr. and J.P. Evidence for heterogeniti between prejunctional and postjanctional alha 2-adrenoceptors using 9-

substituée 3-benzazepines // J. Pharmacol. Exp. Ther.- 1988.- v. 247.- N l.-p. 122-128

Davies O.A., Lefkowitz R.J. Regulation of beta-adrenergic receptors by

steroid hormones //Annu. Rev. Phisiol.- 1984.- v. 46.- p. 119-130 Deslcin R., Seidler F.J., Whitmore W.L., Slotkin T.A. Development of alpha-adrenergig and dopaminergic receptor sistems depends on maturation of their presynaptic nerve terminals in the rat brain // J. Neurochem.- 1981.-v. 36.-p. 1683-1690 Dixon R.A.F., Kobilka B.K., Strader D.J., Benovier J.L., Dohlman H.G., Frielle T., Bolanovski M.A., Bennett C.D., Rands E., Diehl R.E., Mumford R.A., Slater E.E., Sigal I.S., Caron M.G., Lefkowitz R.J, Strader C.D. Cloning of the gene and cDNA for mammalian beta-adrenergic receptor and gomology with rodopsin // Nature.- 1986.- v. 264.» p. 75-79

Dohlman H.G., Caron M.G., DeBlasi A., Frielle T., Lefkowitz R.G. Role of extracellular disulfide-bonded cysteines in the ligand binding function of the beta 2-adrenergic receptor // Biochemestry.- 1990.- v. 29.-p. 2335-2342

Duman R.S.,Saito N.,Tallman J.F. Development of the beta-adrenergic receptor and G-protein messenger RNA in rat brain // Molecular Brain Res.- 1989.- v. 5.- N.4.- p. 289-296 Elias M., Deacon T., Caviness V.S. The development of neurocortical noradrenergic innervation in the mouse: a quantitalive radioenzymatic analisis // Dev. Brain. Res.- 1982.- v. 3.- p. 652-656 Emorine L.J., Marullo S., Delavier-Klutchko C., Kaveri S.V., Dureiu-Trautmann O., Stroberg A.D. Structure of the gene for human beta 2-adrenergic receptor: expression and promotor characterisation II. Feretti C., Blengio M., Gamaiero S.R., Chi P. Biochemical and behavior changes indused by accute stress in a chronic variate stress model of depression: the effect of amitriptiline // Eur. J. Pharmacol.-1987.-v. 280.-p. 19-26

Feve B., Emorine L.J., Briend-Sutren M.M., Lansier F., Strosberg A.D., Paipault J. Differential regulation of beta-1- and beta-2-adrenergic receptor protein and mRNA levels by glucocorticoids during 3T3-F442A adipose differentiation // J Biol Chem.- 1990.- v. 265.- p. 1634316349

Feve B., Baude B., Krief S., Strosberg A.D., Pairault J., Emorine LJ. Ingibition by dexametasone of beta-3-adrenergic receptor responsiveness in 3T3-F442A adipocytes. Evidence for a transcriptional mechanism//J Biol Chem.- 1992.-v. 267.-p. 15905-15915

Floridellis C.S., Handy D.E., Bresnanan M.R., Zannis V.I., Gavras H. Cloning and expression of a rat brain alpha-2B-adrenergic receptor // Proc. Nath. Acad. Sci. UCA.-1991.-v. 88.-p. 1019-1023

Franks L.M., Roberts R.V. Effects of low-doses prenatal corticosterooid administration on the premature rat// Biol. Neonate.- 1979.- v. 36.- N l.-p. 1-9.

Fraser C.M., Chung F-Z., Venter J.C. Continuous hight density expression of human beta 2-adrenergic receptor in a mouse cell line previosly lacking beta-receptors // J. Biol. Chem.- 1987.- v. 262.- N 31.-p. 14843-14846

Frielle T., Collins S., Daniel K.W., Caron M.J., Lefkowitz R.J., Kobilka B.K. Cloning of the cDNA for the human beta 1-adrenergic receptor // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1987.- v. 84.- N 22.- p. 79217924

Fuxe K., Dahlstrom A., Hiller N-A. Central noradremergic neurons and monoamine neuro-transmission // Excepta Med. Internat. Congress Series N87.- Proc XXIII Inter. Congr. Physiol. Sci.- Tokyo- 1965.- p. 419-434

Goffinet A.M., Cavines V.C. Autoradiographic localisation of the beta-land alpha-1-adrenoreceptors in the midbrain and forebrain of normal and reeler mutant mice // Brain Res.- 1986.- v. 366.- p. 193-202

Goffinet A.M., Hemmendinger L.M., Cavines V.C. Autoradiographic study of the beta-1-adrenergic receptor development in the mouse forebraine // Dev. Brain Res.- 1986.- v. 24.- N 1/2,- p. 187-191 Granneman J.G., Lahners K.N., Rao D.D. Rodent and human beta-3-adrenergic receptor genes contain an intron within the protein-coding block // Mol Pharmacol.- 1992.- v. 42,- p. 964-970 Granneman J.S., Lahner K.N., Chaudhry A. Characterisation of a human beta 3-adrenergic receptor gene // Mol Pharmacol.- 1993.- v. 44.- p. 264-270

Grota L.J., Ader R. Adrenocortical function in pregnant rats: handing and

the 24-hour rhythm // Phisiol. Behav.- 1970.- v. 5.- N 4.- p. 289-296 Guest S.J., Hadcock J.R., Watkins D.C., Malbon C.C. Beta-1- and beta-adrenergic receptor expression in differentiatig 3T3-L1 cell. Independent regulation at the level of mRNA // J. Biol. Chem.- 1990.-v. 265.- p. 5370-5375 Hadcock J.R., Malbon C.C. Down-regulation beta-adrenergic receptors: agonist-indused redaction in receptor mRNA levels // Proc. Nath. Acad. Sci. USA.- 1988.- v. 85,- p. 5021-5025 Hadcock J.R., Wang H., Malbon C.C. Agonist-induced déstabilisation of beta-adrenergic receptor mRNA // J. Biol. Chem.- 1989.- v. 264.- N 33.-p. 19928-19933

Hadcock J.R., Port J.D., Gelman M.S., Malbon C.C. Cross-talk between tyrosine-kinase and G-protein-linked receptor: phosphorilation of beta-2-adrenergic receptor is responce to insuline // J. Biol. Chem.- 1992.- v. 267.-p. 26017-26022 Haigh R.G., Jones C.T. Effect of glucocorticoids on alpha-1-adrenergic receptor binding in rat vascular smooth musclé // J. Mol. Endicrinol.-1990,- v. 5,- p. 41-48 Harden T.K.,Wolfe B.B.,Sporn J.R.,Percins J.P.,Mokinoff P. Ontogeny of beta-adrenergic receptor in rat cerebral cortex // Brain Res.- 1977.-v. 125.-p. 99-108

Harrison J.K., D'Angelo D.D., Zeng D., Lynch K.R. Pharmacological characterisation of rat alpha-2-adrenergic receptors // Mol. Pharmacol.- 1990.- v. 40.- p. 407-412 Harsing L.G., Kaposci J., Visi E.S. Possible role of alpha-2 and alpha-1 adrenoreceptors in the experimentally induse depression of the central nervous system // Pharmacol. Biochem. Behav.- 1989.- v. 32.-p. 927-932

Hausdorff W.P., Caron M.C., Lefcowitz R.J. (a) Turning of the signal: desensitisation of the beta-adrenergic receptor function // FASEB J.-1990,-v. 4,-p. 2881-2889 Hausdorff W.P., Hnatowich M., O'Dowd B.F., Caron M.G., Lefcowitz R.J. (6) A mutation of the beta 2-receptor impairs agonist activation of adenylate cyclase without higt affinity agonist binding // J. Biol. Chem.-1990,-v. 265,-N 3,-p. 1388-1393 Heal D.J., Prow M.R., Bukett W.R. Clonidine induced hypoaktivity and midriasis in mice are respectevely mediated via pre- and postsynaptic alpha-2-adrenoreceptors in the brain // Eur. J. Pharmacol. 1989.-v 170.-p. 19-28 Heal D.J., Prow M.R., Buckett W.R. Effects of antidepressant drugs and electroconvulsive shock on pre- and postsynaptic alpha 2-adrenoceptor function in the brain: rapid down-regulation by sibutramine hydrocloride // Psychopharmacology (Berl).-1991.- v. 103.- p. 251-257 Hercenhem M. Mismatches between neurotransmitter and receptor localisation in brain: observation and implication // Neurosci.- 1987.- v. 23.-Nl.-p. 1-39

HoffmanB.B., Hu Z.W. Regulation of responses mediated by alpha-1 -adrenergic receptors in smooth muscle cells // Pharmrcol. Comm.-1995.-v. 6,-p. 47-52 Hosoda K., Duman R.S. Regulation of beta 1-adrenergic receptor mRNA and ligand binding by antidepressant treatments and norepinephrine depletion in rat frontal cortex // J. Neurochem.- 1993.- v. 60.- p. 13351343

Hosoda K., Fitzgerald L.R.,Vaidya V.A., Feussner G.K., Fishman P.H., Duman R.S. Regulation of beta 2-adrenergic receptor mRNA and gene transcription in rat C6 glioma cells: effect of agonists, forskolin, and protein synthesis ingibition // Mol. Pharmacol.- 1995.-v. 48.- p. 206-211 Howard E. Absesns of effects f corticosterone given at 22 days // Dev.

Phisiol.- 1976.- v. 9.- p. 25-29 Itoh H., Kozasa T., Nagata S., Nacamura S., Katada T., Ui M., wai S., Ohtsuka E., Kawasaki H., Suzuki K., Kaziro Y. Molecular cloning and sequence determination of cDNAs for alpha-subunits of the guanine nucleotide-binding proteins Gs , Gi and G0 from rat brain // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1986,- v. 83.- N 11.- p. 3776-3780 Jacobowitz D.M., Rihardson J.S. Method for the rapid determination of norepinephrine, dopamine and serotonin in the same braine region // Pharmacol. Biochem. Behav.- 1978,- v. 8.- N 5.- p. 515-519 Jasper J.R., Link R.E., Chruscinski A.J., Kobilka B.K., Bernstain D. Primary structure of the mouse beta-1-adrenergic receptor gene // Biochim. Biophys. Acta.- 1993.- v. 1178,- p. 307-309 Jhanwar-Uniyal M., Leibowirz S.F. Impact of circulating corticosterone on alpha 1 - and alpha 2-noradrenergic receptors in oliscrete brain areas // Brain. Res.- 1986.- v. 368,- N 2.- p. 404-408 Jhanwar-Uniyal M., Papamichael M.J., Leibowirz S.F. Glucose-dependent changes in alpha 2-noradrenergic receptors in hipotalamic nuclei // Physiol, and Behav.- 1988.- v. 44.- N 4/5.- p. 611-617 Jhanwar-Uniyal M., Roland C.R., Leibowirz S.F. Diurnal rhytm of alpha 2-noradrenergic receptors in the paraventricular nucleus and other brain areas> Relation to circulation corticosterone and fedeeng behavior // Life Sci.- 1986.- v. 38.- N 5.- p. 473-482 Johnson M.L., Gong G., Pettinger W.A. Expression and regulation of renal alpha-2-adrenoceptor // Pharmacol. Comm.- 1995.- v. 6.- p. 169173

Jones D.L. Hypotalamic alpha-adrenergic blocage modifiers drinking and blood pressure responses to central angiotensine II in conscious rats // Can. J. Physiol. Pharmacol.- 1988 .- v. 66.-N 10.- p. 1270-1277 Jones L.S., Gauger L.L., Davis N.A. Anatomy of brain alpha-1 adrenergic receptors: in vitro autoradiography with [I]-heat // J. Comp. Neurol.-1985,-v. 231.- p. 190-208 Kahan T., Pernow J., Schwieler J., Wallin B.G., Lundberg J.M., Hjemdahl P. Noradrenaline release evoked by physiological pattern is modulated by prejunctional alpha- and beta-adrenoreceptors // Br. J. Pharmacol.- 1988.-v. 95.-N4,-p. 1101-1108 Kiely J., Hadcock J.R., Bahouth S.W., Malbon C.C. Glucocorticoids down-regulate beta-l-adrenergic-receptor expression by supressing transcription of the receptor gene // Biochem. J.- 1994.- v. 302.- p. 397403

Kimber J., Watson L., Mathias C.J. Neuropharmacological evaluation of hypotalamic alpha-adrenoceptor deficit in human central cympathetic degeneration//J. Pharmacol.- 1996.-v. 494P.-p. 138-139 Kimura F., Nakamura S. Postnatal development of a -adrenorecep- tormediated autoingibition in the locus coeruleus // Dev. Brain Res.-1987.-v. 35.-p. 21-26 Kitamura Y., Mochii M., Kodama R., Agata K., Watanabe K., Eguchi G., Nomura Y. Ontogenesis of alpha 2-adrenoreceptor coupling with GTP-binding proteins in rat telencephalon // J. Neurochem.- 1989.- v. 53,- p. 249-257

Kobilka B.K., Dixon R.A.F., Frielle T., Dohlman H.G., Bolanowski M.A., Sigal I.S., Yang-Feng T.L., Francke U., Caron M.A., Lefkowitz R.J (a) cDNA for human beta 2-adrenergic receptor: a protein with multiple membrane-spaning domains are encoded by a gene whose chromosomal location is shared with that of the receptor for platelet-derived growth factor // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1987.- v. 84.- N l.-p. 46-50

Kobilka B.D., Frielle T., Dohlman H.C., Bolanowski M.A., Dixon R. A.F., Keller P., Caron M.G., Lefkowitz R.J. (6) Delineation of the intronless nature of the genes for the human and humster beta 2-adrenergic receptor and their putative promoters regions // J. Biol. Chem.- 1987.- v. 262.- p. 7321-7327 Kobilka D.K., Matsui H„ Kobilka T.S., Yang-Feng T.L., Franke U., Caron M.C., Lefcovitz R.J., Regan J.W. (b) Cloning, sequencing and expressing of the gene coding for the human platelet alpha 2-adrenergic receptor // Science!- 1987.- v. 238.- p. 650-656 De Kosly S.T., Nonneman A.J., Schieff A.J. Morphological and behavioral effects of perinatal glucocorticoid administration // Phisiol. and Behavior.- 1982.- v. 29,- p. 895-900 Kuroda Y., Mikuni M., Nomura N., Takahashi K. Differential effect of subcronic dexamethasone treatment on serotonin-2 and beta-adrenergic receptors in the rat cerebral cortex and hippocampus // Neurosci. Lett.- 1993.- v. 155,- p. 195-198 Kurose H., Arriza J.L., Lefkowitz R.J. Characterization of alpha 2-adrenergic receptor subtype-specific antibodies. // Mol. Pharmacol 1993.-v. 43.-p. 444-50 Kristt D.A.,Moliver M.E. Sinapses in newborn rat cerebral cortex: a quantative ultrastractural study // Brain Res.- 1976.- v. 108.- p. 180-186 Lai E., Rosen O.M., Ruben C.S. Differentation-depended expression of catecolamine-stimulated adenylate cyclase // J.Biol.Chem.1981.- v. 256.-N24.-p. 12866-12874 Lauder J.M., Bloom F.E. Ontogeny of monoaminergic neuron in the locus coeruleus, raphe nuclei and substantia nigra of the rat. II // J. Comp. Neurol- 1975.-v. 163.-p. 251-264 Law C., Pylypin A., Rose L.L. Development of serotoninergic and adrenergic receptors in the rat spinal cord: effects of neonatal chemical lession and hyperthyroidism // Dev.Brain Res.- 1985.- v. 19.- N 1.- p. 57-66

Lefcowitz R.J., Caron M.G. Adrenergic receptors - models for the study of receptors coupled to the guanine nucleotide regulatory proteins // J. Biol. Chem.- 1988.-v. 263.-N 11.-p. 4993-4996 Lelias J.M., Kaghad M., Rodrigues M., Chalon P., Bonnin J., Dupre I., Deplech B., Bensaid M., LeFur C., Ferrara P. Molecular cloning of a human beta-3-adrenergic receptor cDNA // FEBS Lett.- 1993.- v. 324.-p. 127-130

Levitt P., Moore P.Y. Development of the noradrenergic innervation

of neocortex // Brain Res.- 1979.- v. 162.- p. 243-259 Liggett S.B., Bouvier M., Hausdorff W.P., O'Dowd B., Caron M.G., Lefcowitz R.J. Altered patterns of agonist-stimulated cAMP accumulation in cells expressing mutant beta 2-adrenergic receptors laking phosphorilation sites // Mol. Pharmacol.- 1989.- v. 36.- p. 641-646 Liggett S.B., Ostrowski J., Chesnut L.C. Sites in the third intracellular loop of the alpha-2A-adrenergic receptor conferm short term agonist-promoted desensitisation//J. Biol. Chem.- 1992.- v. 267.- p. 4740-4746 Lomasney J.M., Cottechia S., Lorenz W., Allen L.F. Expansion of the alpha-2-adrenergic receptor family: cloning and characterisation of a human alpha-2-adrenergic receptor subtype, the gene for which is located on chromosome 2 // Proc. Nath. Acad. Sci. USA.- 1990.- v. 87.-p. 5094-5098

Lomasney J.M., Lorenz W., Allen L.F. Molecular cloning and exprwssion of the cDNA for the alpha-1A adrenergic receptor // J. Biol. Chem.-1991.-v. 266.-p. 6365-6369 Lorton D., Bartolome J., Slotcin T.A., Davies J.N. Development of brain bete-adrenergic receptors after neonatal 6-hydroxidopamine treatment // Brain Res. Bull.- 1988.- v. 21.- p. 521-600 Lowry O.H.,Rosenbrough N.J.,Farr A.L. et.al. Protein measure- ment with the Folin phenol reagent // J.Biol.Chem.- 1951.- v. 193.- p. 265275

MacDonald E., Scheinin M. Distribution and pharmacology of alpha2-adrenoceptors in central nervous system // J.Physiol. Phafmacol.-1995.-v. 46.- N3.- p. 241-258 Machida C.A., Bunzow J.R., Searles R.P., Van Tol H.5 Tester B., Neve K.A., Teal P., Nipper V., Civelli O. Molecular cloning and expression of the rat beta-1-adrenergic receptor gene // J. Biol. Chem.- 1990.- v. 265.-p. 12960-12960 Maggi A., U'Prichard D.C., Enna S.J. beta-adrenergic regulation of alpha 2-adrenergic receptors in the central nervous system // Science.- 1980.-v. 207.-N4431,-p. 645-647 Mak J.C., Nishikawa M., Barnes P.J. Glucocorticoid increase beta-adrenergic receptor transcription in human lung // Am. J. Physiol.-1995,-v. 268.-p. L41-L46 Malbon C.C., Hadcock J.R. Evidence that glucocorticoid responce elements in the 5'-noncoding region of the humster beta 2-adrenergic receptor gene are obligate for glecocoticoid regulation of receptor mRNA levels // Biochem. Biophys. Res. Comm.- 1988.- v. 154.- N 2.-p. 676-681

Marullo S., Delavier-Klutchko C., Eshdat Y,Strosberg A.D., Emorine L. Human beta 2-adrenergic receptors expressed in Eserichia coli membrans retain their pharmacological properties // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1988.- v. 85.- N 20.- p. 7851-7857 Maurine Y., Le Saux F., Graillot C., Baumann N. Altered postnatal ontogeny of alpha 1- and alpha 2-adrenooreceptor binding sites in the brain of convulsive mutant mouse (quaking) // Dev Brain Res.- 1985.-v. 22,-N 2.-p. 229-235 McCune S.K., Hill J.M. Ontogenetic expression of two alpha-1 adrenergic receptor subtypes in the rat brain // J. Mol. Neurosci.- 1995.- v. 6.- N 1.-p. 51-62

McEwen B.C., De Cloet E.R., Rotene W. Adrenal steroids and actions in the nervous sistem // Physiol. Rev.- 1986.- v. 66.- p. 1121-1128

Meyer J.C. Biochemical effects of corticosteroids on neuronal tiessue //

Physiol. Rev.- 1985,- v. 65.- N 4,- p. 946-1020 Milligan G., Svoboda P., Brown C.N. Why are there so many adrenoceptors sybtypes ? // Biochem. Pharmacol.- 1994.- v. 48.- p. 1059-1071

Minneman K.P., Esbenshade T.A. Alpha-1-adrenergic subtypes // Ann Rev

Pharmacol Toxicol.- 1994.-v. 34.-p. 117-133 Mitchell T.J., Tute M.S., Webb G.A. A molecular modelling study of the interaction of noradrenaline with the beta 2-adrenergic receptor // J. Comput. Aided. Mol. Des.- 1989.- v. 3.- p. 211 -223 Miyazaki H., Tanike T., Ohga A. Developmental disappearance of excitatory alpha 1 -adrenergic function in oesophagus of chic embryo // Br. J. Pharmacol.- 1989.- v. 97.- N 3.- p. 723-730 Moffett S., Mouillas B., Bonin H., Bouvier M. Altered phosphorylation and desentisation patterns of a human beta-2 adrenergic receptor lacing the palmitolated Cys341 // EMBO J.- 1993.- v. 12,- p. 349-356 Morris M.J., Dausse J-P., Devynck M.A., Meyer P. Ontogeny of alpha 1- and alpha 2-adrenoceptors in rat brain // Brain Res.-1980.- v. 190.-p. 268-271

Moyer J.A., Herrenkohl L.R., Jacobowitz D.M. Stress durin pregnancy: effect of catecolamines in discret brain region of offspring as adult // Brain Res.- 1978,- v. 144.- Nl.-p. 172-178 Murphy T.J., Bylund D.B. Characterisation of alpha-2-adrenergic receptor in the OK cell, an opossum kidney cell line // J. Pharmacol. Exp. Ther.-1988.-v. 244.-p. 571-578 Naymenko E.V., Dygalo N.N. Role of maternal corticosteroids and epinephrine changes during pregnancy in alteration of pituitary-adrenal reactivity of adult offspring // Sterss: The Role of Catecolamines and Other Neurotransmitters.-N.Y.: Science Publishers, Inc.- 1984.- p. 839847

Nomura Y., Naiton F., Segava T. Regional changes in monoamine content and uptake of the rat brain during postnatal development // Brain Res.-1976,-v. 101.-p. 305-315 Nomura Y., Kawai M., Mita K., Segava T. Developmental changer of cerebral cortical [H3]-clonidine binding in rats. Influence of guanine nucleotide and cations //J. Neurochem.- 1984,- v. 42,- p. 1240- 1245 Nowak G., Silverrin J. Kineitics of [H3]-prazosine binding to the rat cerebral cortex during agin // Pharmacol. Biochem. Behav.- 1988.- v. 31.-N2.-p. 505-507 Nudel U., Zakut R., Shani M., Neuman S., Levy Z., Yaffe D. The nucleotide sequence of the rat cytoplasmic (3-actin gene // Nucleic Acids Research.- 1983.-v. ll.-N6.-p. 1759-1771 O'Dowd B.F., Hnatowich M., Caron M.C., Lefkowitz R.J., Bouwier M. Palmitolation of the human beta 2-adrenergic receptor // J. Biol. Chem.-1989.-v. 264.-N 13,-p. 7564-7569 O'Dowd B.F., Hnatowich M., Regan J.W., Leader W.M., Caron M.G., Lefkowitz R.J. Site-detected mutagenesis of the cytoplasmic domains of the human beta 2-adrenergic receptor // J. Biol. Chem.-1988.- v. 263.- N 31.- p. 15985-15992 Olgiati V.R., Cohen B.M., Stramentionli G. Time-dependent changes of cortical alpha 1- and beta-adrenoceptors induced by S-adenosyl-L-methionine // Pharmacol. Res. Comm.- 1988.- v. 20.- suppl N 2.- p. 273 Papp M., Nalepa I., Vetulani J. Reversal by imipramine of beta-adrenoreceptor up-regulation indused in a chronic mild stress model of depression//Eur. J. Pharmacol.- 1994,-v. 261.-N 1-2.-p. 141-147 Parkinson D., Coscia E., Daw N.M. Identification and localisation of adrenergic receptors in cat visual cortex // Brain Res.- 1988.- v. 457.- p. 70-78

Perez DM., Piasick M.T., Graham R.M. Solution-phase library screening for the indefication of rare clones: isolation of an alpha-ID adrenergic receptor cDNA // Mol Pharmacol.-1991.- v. 40.- p. 876-883

Peters D.A.V. Prenatal stress: effects on brain catecolamines levels //

Parmacol. Biochem. Behav.- 1982.- v. 17.- N4,- p. 721-725 Peters D.A.V. Prenatal stress: effects on development of brain adrenergic

receptors // Parmacol. Biochem. Behav.- 1984.- v. 21.- N 3.- p. 417-422 Pittman R.N.,Minneman C.P.,Molinoff P.V. Ontogeny of beta 1- and beta 2-adrenergic receptors in rat cerebellum and cerebral cortex // Brain Res.- 1980,- v. 188,-p. 357-368 Posher W., Heller A. Regional development of catecolamine biusynthesis in

rat brain // J Neurochem.- 1972,- v. 19.- p. 1917-1930 Port J.D., Huang L.Y., Malbon C.C. Beta-adrenercic agonists that down-regulate receptor mRNA up-regulate a M(r) 35.000 protein(s) that selectively binds to beta-adrenergic receptor mRNAs // J. Biol. Chem.-1992.-v. 267.-p. 24103-24108 Rodbell M. The role of hormone receptors and GTP-regulatory proteins in

membrane transduction // Nature.- 1980.- v. 284.- p. 17-22 Regan J.N., Kobilka T.S., Yang-Feng T.L., Caron M.G., Lefkowitz R.J., Kobilka B.K. Cloning and expression of human kidney cDNA for an alpha-2-adrenergic receptor subtype // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1988,- v. 85.- N 17.- p. 6301-6305 Scarpace P.J., Bares L.A., Morley J.E. Glucocorticoids modulate beta-adrenoceptor subtypes and adenylate cyclase in brown fat // Am. J. Physiol.- 1988.-v. 255.-N2.-p. 153 Schlump M., Shoemaker W.J., Bloom F.E. Innervation of embrionic rat cerebral cortex by catecolamine containing fibers // J. Comp. Neurol.-1980,-v. 192.- p. 361-376 Schlumpf M., Palacios J.M., Cortes R., Pazos A., Lichtensteiger W. Ontogenetic patterns of drug and neurotransmitter binding sites in fetal rat brain: qualitative and quantitative autoradiography // J. Neurochem.- 1985.- v. 44 suppl.- p. 127 ;

Schmidt W.F., Waters R.M., Mitchell A.D., Warthen J.D., Honigberg I.L., Van Halbeek H. Association of beta-agonists with corresponding beta-

2- and beta-1-adrenergic pentapeptide sequences // Int. J. Pept. Protein. Res.- 1993.- v. 41.- p. 467-475 Scott J.P., Steword J.M., Chelt V.J. Critial period in the organisation of

system // Developmental Psychobiol.- 1974.- v. 7.- p. 489-513 Shaji T.G., Arbabian M.A., Ruoho A.E. High-efficiency expression of mammalian beta-adrenergic receptors in baculovirus-infevted insect cells // Biocem. Biophys. Res. Comm.- 1989.- v. 163.- N 3.- p. 12651269

Shimomura H., Terada A.. Primary structure of the rat beta-1 adrenergic

receptor gene // Nucleid Acids Res.- 1990.- v. 18.- p. 4591 Shishkina G.T., Dygalo N.N. Effect of glucocorticoid injected into pregnant female mice and rats on wheit of male sexual glands in adult offspring and testosterone level in fetus is genotype-depended // Experientia.- 1994,-v. 50.-N8.-p. 721-724 Shishkina G.T, Naumenko E.V. Correlation between the hypotalamic density of H3-clonidine-binding sites and plasma testosterone levels in mice//Neuroendocrinology.- 1995,- v. 207.-p. 275-276 Sibley D.R., Lefkowitz R.J. Molecular mechanisms of receptor desensitization usin the beta-adrenergic receptor-coupled adenylate cyclase sistem as a model //Nature.- 1985.- v. 317.- p. 124-129 Slotkin T.A., Lorbell B.A., McCook E.C., Barnes G.A., Seidler F.J. Neural input and the development of adrenergic intracellular signaling: neonatal denervation evokes neither receptor upregulation nor persistent supersensetivity of adenilate cyclase // Brain Res. Dev. Brain. Res.- 1995.-v. 88,-p. 17-29 Smith D.A., Gallager D.W. Electrophysiological and biochemical characterisation of the development of alpha 1-adrenergic and 5HTi-re-ceptors associated with dorsal raphe neurons // Dev. Brain Res.- 1989.-v.46.-p. 173-186

Spronsen A., Nahimias C., Krief S., Briend-Sutren MM., Strosberg A.D., Emorine L.J. The promotor and intron/exon structure of the human

and mouse beta-3-adrenergic-receptore genes // Eur. J. Biochem.-1993,-v. 213,-p. 1117-1124 Standford S.C., Fillens M., Ryan E. The effects of reapeted mild stress on cerebral cortical adrenoceptors and noradrenaline sinthesis in the rat // Neurosci. Lett.- 1984.- v. 45.- p. 163-167 Standford S.C., Nutt D.J. Comparison of the effect of repeated electroconvulsive shok on alpha-2- and beta-adrenoceptors in different regions of rat brain // Neurosci.- 1982.- v. 7.- N 7.- p. 1753-1757 Stolk J.M., Loftus D.J., Guchhait R.B., U'Pritchard D.C. Anhereted differences in rat brain adrenaline formation: ontogeny of PNMT and alpha 2-adrenoceptors in two inbrad rat strain // J.Neurochem-1985,-v. 44 suppl.- p. 116 Stone E.A., Ariano M.A. Are glial cells targets of the central noradrenergic system? A review of the evidence // Brain Res. Rev.- 1989.- v. 14.- N 4.-p. 297-309

Stone E.A., Egawa M., Colbjornsen C.N. Catecolamine-induced de-sensitization of brain beta adrenoceptors in vivo and reversal by corticosterone//Life Sci.- 1989.- v. 44.- N 3.-p. 209-213 Stone E.A., Piatt J.E. Brain adrenergic receptors and resistence to stress //

Brain Res.- 1982,- v. 237.- p. 405-414 Strader T.D., Fong T.M., Candelore M.R. Adrenergic receptor as a model for the family of G protein coupled receptors // Pfarmacol. Comra.-1995.-v. 6.-p. 101-132 Sugden D., Ho A.K., Sugden A.L., Klein D.C. Negative Feedbec mecanisms: evidence that desensitisation of pineal alpha-1-adrenergic responses involved protein kinase-C // Endocrinology.- 1980.- v. 123.-N 3.- p. 1425-1432

Suryanarayana S., Daunt D.A., Von Zasstrow M., Kobilka B.K. A point mutation in the sevents hydrophobic domain of the alpha-2-adrenergic receptor increases its affinity for a family of beta receptors antogonists //J. Biol. Chem.-1991.-v. 266.-p. 15488-15492

Suzuki T., Nguyen C.T., Nantel F., Bonin H., Valiquette M., Frielle T., Bouver M. Distinct regulation of beta 1- and beta 2-adrenergic receptors in Chinese hamster fibroblasts // Mol. Pharmacol.- 1992.- v. 41 .-p. 542-548

Szabadi E., Bradshow C.M. Autonomic pharmacology of alpha 2-

adrenoceptors//J. Psychopharmacol.- 1996.- N 10.- suppl 3.-p. 6-18 Szijan I., Burdman J.A. The relationship between DNA synthesis and the synthesys of nuclear proteins in rat brain. Effect of hydrocortisone acetate // Biochem. Biophis. Acta.- 1973.- v. 299.- p. 344-353 Takahashi L.K., Turner J.G., Kalin N.H. Prenatal stress alters brain catecolaminergic activity and potentiates stress-indused behavior in adult rats //Br.Res.- 1992.- v. 574.- N 1-2.- p. 131-137 Tashima Y., Terui M., Itoch H., Mizunuma H., Kobayashi R., Marymo F. Identical properties of aldosterone and corticosterone binders and their presence in rat brain and kidney // J. Biochem.- 1989,- v. 106.- p. 446454

Thomsen W.J., Jacques J.A., Neubing R.R. Ingibition of adenylate cyclase is mediated by high affinity conformation of the alpha 2-adrenergic receptor // Mol Pharmacol.- 1988.- v. 34.- N 6.- p. 814-822 . Torda T., Kwetnasky R., Petrikova M. Effect of repeated immobilisation stress on central and peripheral adrenoceptors in rats // Endocrinol. Exp.- 1985.-v. 19.-N3.-p. 157-163 Tota M.R., Candelore M.R., Dixon R.A.F., Strader C.D. Biophysical and genetic analiysis of the ligand-binding site of the beta-adrenoceptor // Trends. Pharmacol. Sci.-1991,- v. 12.- p. 4-6 U'Pritchard D.C., Reisine T.D., Mason S.T., Fibiger H.C.S Yamamura H.I. Modulation of rat brain alpha- and beta-adrenergic receptor populations by lessoin of dorsal noradrenergic bundle // Brain Res.-1980.-v. 187,-p. 143-154 *

Velazques P.N., Romano M.C. Corticosterone. therapy during gestation: effects on the development of rat cerebellum // Int. J. Dev. Neurosci.-1987.- v. 5.-N3.-p. 189-194

Vernadakis A., Woodbury D.M. Effect of Cortisol on maturation of the central nervous system // Influence of homones on the nervous system.-Proct. Int. Soc. Psyhoneuroendocrinol.- Brooklin.- 1970.-p. 85-97 Wanaka A., Malbon C.C., Matsumoto M., Kamada T., Yohyama M. Presence of catecholaminergic axon-terminals containing beta-adrenergic receptor in the preventricular zone of the rat hypothalamus // Brain Res.- 1989.- v. 479,- p. 190-193 Wang C.D., Buck M.A., Frase C.M. Site-directed mutagenesis of alpha-2A-adrenergic receptors: identification of amino asids involved in ligand binding and receptor activation by agonists // Mol. Pharmacol.-1991.-v. 40,- p. 168-179 Weinberg D.H., Trivedi P., Tan C.P. Cloning, expression and characterisation of human alpha-adrenergic receptors alpha-1 A, -IB and -1C // Biochem. Biophys. Res. Comm.- 1994.-v. 201.-p. 1296-1304 Wessler I., Anschuttz S. Beta-adrenergic stimulation enchances transmitter output from the rat phenic nerve // Br. J. Pharmacol.-1988.- v. 95.-N3,-p. 669-674 Williams J.T., Marshall K.C. Membrane properties and adrenergic responses in locus coeruleus neurons of young rats // J. Neurosci.-1987.- v. 7.- N 11.- p. 3687-3694 Winser-Serhan U.H., Leslie F.M. Alpha-2B adrenoceptor mRNA expression during rat brain development // Brain Res Dev Brain Res.-1997.-v. 100.-p. 90-100 Winser-Serhan U.H., Raymon H.K., Broide R.S., Chen Y., Leslie F.M. (a) Expression of alpha 2 adrenoceptors during rat brain development~l. Alpha 2A messenger RNA expression. // Neuroscience.- 1997.- v. 76.-N l.-p. 241-260

Winser-Serhan U.H., Raymon H.K., Broide R.S., Chen Y., Leslie F.M. (6) Expression of alpha 2 adrenoceptors during rat brain development~2. Alpha 2C messenger RNA expression and [H3}rauwolscine binding. // Neuroscience.- 1997.- v. 76.- N 1.- p. 261-272

Wu D., Katz A., Lee C.H., Simon M.I. Activation of phospholipase C by alpha-1-adrenergic receptors is mediated by the alpha sub units of Gq family // J. Biol. Chem.- 1992.- v. 267.- p. 25798-25802 Yamanaka K., Murumatsu I., Kigishi S. Effect of chronic nicotine treatment against repeated immobilisation stress // Pharmacol. Biochem. Behav.-1987.- v. 26.-p. 259-263 Yarden Y., Rodrigues H.5 Wong S.K-F., Brandt D.R., May D.C., Burnier J., Harkins R.N., Chen E.Y., Ramachandran J., Ulrich A., Ross E.M. The avian béta-adrenergic receptor: primari structure and membrane topology // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1986,- v. 83.- N 18,-p. 6795-6799

Yong W.C., Kuhar M.J. Noradrenergic alpha 1- and alpha 2-receptors: light microscopic autoradiographic localisation // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1980,- v. 77.- N 3,- p. 1696-1700 Zarrow M.H., Philpot J.E., Denerberg V.H. Passage of C14-corticosterone from the rat mother to the foetus and neonate // Nature.- 1971.- v. 266,-p. 1058.-1059 Zeng D., Harrison J.K., D'Angelo D.D. Molecular characterisation of a rat alpha-2B adrenergic receptor // Proc.Nath. Acad. Sci. USA.- 1990.-v. 87.-p. 3102-3106 Zeng D.V., Lynch K.R. Distribution of alpha 2-adrenergic receptor mRNA in the rat CNS // Brain Res. Mol. Brain Res.- 1991.- v. 10.- p. 219-225

Zilles K., Gross G.3 Scheincher A., Schudgen S., Bauer A., Bahro M.? Shwendemann G., Zech K., Kolassa N. Regional and laminar distribution of alpha-1-adrenoreceptors and their subtypes in human and rat hippocampus // Neurosci.-1991v. 40.- N 2.- p. 307-320